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Supervivencia de la cepa F2 en el alimento Las barras de error indican la desviación estándar de los resultados con

2 MATERIALES Y MÉTODOS 2.1 Preparación del suplemento probiótico

Foto 3.1 Cepa F2 liofilizada

3.2 Supervivencia de la cepa F2 en el alimento Las barras de error indican la desviación estándar de los resultados con

respecto a la media.

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RESULTADOS

3.1 Preparación del suplemento probiótico

: El número de células viables en el liofilizado fue semanalmente con un recuento en placa en agar MRS; el recuento

durante un año en aproximadamente 1012 UFC/mL

muestras liofilizadas con 10 % de leche descremada como para aquellas en las que se utilizó 20 % de la misma. Al no observarse cambios en los recuentos, se

la concentración de 10 % de leche como crioprotector ión de la cepa F2.

aración del suplemento probiótico en el alimento

muestra la viabilidad de la cepa F2 en el alimento en el tiempo disminución observada en el recuento, se decide preparar diari

para los ensayos de engorde de los animales.

3.2 Supervivencia de la cepa F2 en el alimento Las barras de error indican la desviación estándar de los resultados con respecto a la media.

en el liofilizado fue semanalmente con un recuento en placa en agar MRS; el recuento tanto para las muestras liofilizadas con 10 % de leche descremada como para aquellas en las que se utilizó 20 % de la misma. Al no observarse cambios en los recuentos, se como crioprotector para la

robiótico en el alimento: La Figura 3.2 muestra la viabilidad de la cepa F2 en el alimento en el tiempo. Debido a la disminución observada en el recuento, se decide preparar diariamente el

para los ensayos de engorde de los animales.

Supervivencia de la cepa F2 en el alimento. Las barras de error indican la desviación estándar de los resultados con

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3.2 Ensayo de seguridad de la cepa F2 sobre trucha arcoíris

En esta experiencia, un vial de liofilizado se mezcló directamente con la ración diaria de alimento. Es importante señalarque luego de 48 o 72 h de alimentar los peces con el alimento mezclado con el liofilizado, se observaron cambios en el comportamiento, movimientos infrecuentes y rechazo al alimento. Sin embargo, no hubo mortalidad de los animales por este motivo, y pocos días después de suspendido el alimento, los animales recuperaron su comportamiento normal. Debido a esto se sacrificó un animal de cada tanque de la UT y personal de la cátedra de Patología de Animales Acuáticos de la UNS, realizó disecciones de estos animales, no observando daños en los órganos estudiados. Estos efectos fueron adjudicados a la presencia de la leche utilizada como crioprotector de la cepa. Una consulta con el Dr. José Luis Balcázar (Universidad de Girona, España) confirmó que la leche podría provocar trastornos gastrointestinales, y por lo tanto, se decide eliminarla por lavados sucesivos con PBS para continuar los ensayos de inocuidad durante 10 días más, con la adición del probiótico directamente al agua de cultivo, siguiendo la metodología explicada en el punto 2.1.4. En esta nueva etapa no se observaron cambios en el comportamiento de los peces, la alimentación fue normal y la supervivencia general del ensayo fue del 100 % por lo que la cepa F2 fue considerada inocua para la realización de los ensayos de engorde.

3.3 Experiencia de engorde con la administración del probiótico en el agua de cultivo

Luego de la administración del probiótico, directamente al agua de cultivo durante 77 días, no se observaron patologías ni cambios en el comportamiento de los peces, confirmando los resultados observados en la

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experiencia anterior. No se detectaron diferencias significativas en la supervivencia en ambas unidades: 94.67 % ± 2.31 y 93.33 % ± 2.31 para UC y UT, respectivamente (p > 0.05). La Tabla 3.1 muestra los resultados obtenidos en este ensayo. La Figuras 3.3 y 3.4 muestran los resultados obtenidos de la TEC e ICA en cada período de muestreo.

Tabla 3.1 Parámetros de crecimiento de trucha arcoíris durante el engorde con

la administración del probiótico en el agua

Valores medios obtenidos de 3 tanques para la unidad control (UC) y la unidad tratamiento (UT)

TEC: tasa específica de crecimiento; ICA: índice de conversión del alimento; GPP: ganancia promedio de peso

*Probabilidad asociada con la prueba t de Student a dos colas. DS: desvío estándar. TE: tamaño del efecto

UC UT p* TE

Peso medio inicial (g ± DS) 108,52 (± 3,88) 97,57 (± 4,83) 0,037 - Peso medio final (g ± DS) 199,25 (± 3,89) 195,84 (± 8,64) 0,57 - GPP (% ± DS) ) 83,7 (± 3,0) 100,8 (± 6,1) 0,012 3,5 TEC (%/día ± DS) 0,78 (± 0,02) 0,87 (± 0,01) 0,0021 5,6 ICA (g alim/g pez ± DS) 1,47 (± 0,07) 1,48 (± 0,05) 0,94 -

Figura 3.3 Tasa específica de crecimiento

durante el ensayo de engorde con la administración del probiótico en el agua

Las barras de error indican la desviación estándar de los resultados con respecto a la media.

diferencias significativas (

Figura 3.4 Índice de conversión alimentaria de trucha arcoíris durante el ensayo de engorde con la administración del probiótico en el agua en los muestreos quincenales.

Las barras de error indican la desviación estándar de los resultados con respecto a la media. Le diferencias significativas ( a a 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 1 T E C ( % / d ía ) 0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 2,50 3,00 1 IC A ( g a li m e n to /g p e z ) a 146

Tasa específica de crecimiento de trucha arcoíris durante el ensayo de engorde con la administración del probiótico en el agua en los muestreos quincenales.

barras de error indican la desviación estándar de los resultados con respecto a la media. Letras diferentes en el mismo período indican diferencias significativas (p < 0,05).

Índice de conversión alimentaria de trucha arcoíris durante el ensayo de engorde con la administración del probiótico en el agua en los muestreos quincenales.

Las barras de error indican la desviación estándar de los resultados con respecto a la media. Letras diferentes en el mismo período indican diferencias significativas (p < 0,05). a a a a a a b 2 3 4 5 Muestreos Control Tratamiento 2 3 4 Muestreos Control Tratamiento a a a a a a a de trucha arcoíris durante el ensayo de engorde con la administración del barras de error indican la desviación estándar de los resultados con Letras diferentes en el mismo período indican

Índice de conversión alimentaria de trucha arcoíris durante el ensayo de engorde con la administración del probiótico Las barras de error indican la desviación estándar de los resultados con tras diferentes en el mismo período indican

b 5 Muestreos 5 Muestreos b a

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3.4 Experiencia de engorde con la administración del probiótico en el alimento

Luego de la administración del probiótico como suplemento de la dieta base, no se observaron patologías ni cambios en el comportamiento de los peces. Tampoco se observaron diferencias en la supervivencia en ambos sistemas (p > 0.05): 100 % ± 0,00, para la UC y 98,81 % ± 2,06, para la UT.

La Tabla 3.2 muestra los valores de los parámetros de crecimiento.

Tabla 3.2 Parámetros de crecimiento de trucha arcoíris durante el engorde con

la administración del probiótico en el alimento

Valores medios obtenidos de 3 tanques para la unidad control (UC) y la unidad tratamiento (UT)

TEC: tasa específica de crecimiento; ICA: índice de conversión del alimento; GPP: ganancia promedio de peso

*Probabilidad asociada con la prueba t de Student a dos colas. DS: desvío estándar. TE: tamaño del efecto