UNIVERSIDAD AUTONOMA METROPOLITANA
UNIDAD IZTAPALAPA
y
/
.i.
J'
DIVISION DE CIENCIAS BIOLOGICAS
Y
DE LA SALUD
LICENCIATURA EN BIOLOGIA EXPERIMENTAL
KEPOK'I'E FINAL DE SERVICIO SOCIAL
"Período de reestablecimiento
o
estabilización del
estado metabólico en indivudos que han sufrido
alcoholismo crónico"
..
7O R J 1.. I 1VOS ... 8
h l l 3 ' l * O l ~ O I ~ O ~ ;IA
...
9 . 13l<ISSIII. '1'AI)OS Y I>IS( .:I JSION
...
14 . 20 (KlNCI .I!SIONES ... 21 K~(:O~llSNI)A(:IONI'S...
22IZI13L~IOGKAFIA
...
23 . 261
El alcoholismo es un problema de Salud Pública que aqueja
a hombres y mujeres por igual, sin importar su educación,
raza, nivel socioeconómico o creencias religiosas. Es una
enfermedad que consiste de lesiones patológicas que se
producen en el organismo a consecuencia del consumo del
alcohol durante largos períodos de tiempo (Alcoholic Anonymous
World Service, 1989).
Tales lesiones se desarrollan normalmente en forma lenta
y, en las fases tempranas puede desaparecer después de un
período de abstenencia total. El síntoma común del comienzo
del alcoholismo es el aumento en la dependencia al alcohol
tanto física como mentalmente.
El etanol puede ser tolerado de manera aguda a niveles
relativamente elevados. Se ha propuesto, que la exposición
crónica al etanol durante varios años causa cierto grado de
adaptación en la que el individuo puede mantenerse en
condiciones relativamente funcionales. Aunque- la tolerancia
t
tiene un alto precio, ya que se pueden desarrollar daños
serios en diferentes tejidos (Derr et al, 1990).
Estadísticas del año de 1980, han revelado que el 4 % de
alcoholismo. Siguiendo el curso de la observación estadística,
se sabe que de cien bebedores, cinco se convertirán
alcohólicos crónicos (Hall, 1 9 9 0 ) .
Aunque, algunas veces el etanol ingerido puede ser
eliminado a través del aliento, orina, sudor y leche materna,
pero más del 90% es metabolizado. El papel predominante del
hígado en este proceso fué demostrado primeramente, por
Lundsgaar hace más de 50 años, quién demostró que animales
desviscerados no metabolizan etanol (von Wartburg y Buhler,
1984).
Se puede presentar metabolismo extrahepático del alcohol
etílico, pero tiene pequeña contribución en el catabolismo
total. La ruta principal del metabolismo del etanol es a
través de la Alcohol Deshidrogenasa (ADH) que lo convierte en
acetaldehído, el cual puede entonces ser más metabolizado en
el hígado mismo o en otro tejido (Kennedy y Tipton, 1990).
La oxidación del etanol resulta en la transferencia de
hidrógeno a la nicotinamida adenina dinucleótido (NAD). El
resultado entre la relación NADH/NAD, en turno, produce un
cambio en la tasa de los metabolitos que son dependientes para
la reducción en el acoplamiento de NADH-NAD. Además, ha sido
propuesto, que la alteración de la relación NADH/NAD es
responsable de un número alto de anormalidades metabólicas
3
asociadas con el abuso del alcohol. Por ejemplo, aumento en la
relación lactato/piruvato produciendo hiperlacticidemia. Estos
cambios del estado óxido-reductor (redox) celular resultan en
una inhibición de la degradación de ácido grasos, causando su
acumulación. También, hay aumento en la síntesis de ácidos
grasos y triglicéridos, los lípidos periféricos almacenados
pueden ser movilizados. Estos cambios redox pueden inhibir la
síntesis de glucosa en el hígado, contribuyendo a los efectos
hipoglucémicos, particularmente en el estado avanzado de
alcoholismo (Brindley, 1987) . J
El consumo crónico del etanol tiene poco efecto en la
actividad de la ADH, donde se ha reportado que, sólo aumenta
10%. En constraste, la actividad del Sistema Oxidativo
Microsomal (MEOS) (dependiente del citocromo p-4501, puede
aumentar significativamente como resultado de la inducción de
retículo endoplásmico. Además, la activiad de la Aldehído
Deshidrogenasa (AldDH) microsomal, aumenta por el consumo de
etanol (Kennedy y Tipton, 1990).
*
La acumulación de grasa en el hígado es la alteración del
metabolismo de l o s 1ípid.os producidos por la ingesta crónica
del alcohol etílico. Así la esteatosis constituye la
característica histológica más relevante de esta fase inicial
que es generalmente definida como hígado graso alcohólico.
las alteraciones que afectan el metabolismo de proteínas y
organelos subcelulares ocurren paulatinamente. Estos cambios
asociados juegan un papel importante en la perpetuación de la
alteración en el metabolismo de lípidos hepáticos, además de
los efectos inmediatos de la oxidación del etanol en el
metabolismo intermediario (Baraona y Lieber, 1979).
El hígado graso alcohólico está asociado con
hiperlipemia, por la acumulación de lípidos en el hígado y en
la sangre, ambos son considerados fenómenos multifactoriales.
La acumulación de grasa en el hígado, es también
prominente en hepatitis alcohólica (definida por necrosis e
inflamación) y en cirrosis alcohólica (caracterizado por
fibrosis y distorción de la arquitectura del hígado)
(Savolainen et al, 1986).
Los datos sobre los efectos del etanol en la síntesis de
proteínas en el hígado, son inconsistentes, además de pocos y
algunas veces contraversiales. Estudios, llevados a cabo en
hígado de rata, han mostrado que el alcohol etílico influye en
la incorporación de aminoácidos marcados isotópicamente en las
proteínas hepáticas, mientras que la síntesis de albúmina
disminuye y altera la liberación de lipoproteinas (Crouse
y
5
Un incremento en la producción de lipoproteinas por el
hígado, ha sido observado en ratas tratadas crónicamente con
etanol
.
Sin embargo, no hay modificaciones o aumento en lasíntesis de proteínas hepáticas y plasmáticas en ratas
intoxicadas con alcohol.
El etanol produce efectos sobre material genético,
componentes citopl.ásmicos y membrana plasmática en células
hepáticas. Los mecanismos involucrados en la alteración del
metabolismo de proteínas o sobre la actividad de varias
enzimas, se ha discutido ampliamente. Algunos autores, han
propuesto que el alcohol actúa modificando del ambiente
lipídico de la membrana celular. Este mecanismo ha sido,
sugerido particularmente, para explicar la modulación de la
actividad de enzimas unidas a la membrana, y el ensamblaje de
glicoproteínas membranales (Achord, 1995).
La inhibición en la secreci6n de proteínas y secreción de
glicopr~teínas, se ha atribuido al metabolito primario del
etanol (acetaldehído), el cual se une a grupos sulfidrilo de
aminoácidos que constituyen los microtúbulos.
*
En algunos sistemas in vitro, la exposición al etanol
altera la síntesis de proteínas, principalmente cuando están
al, 1990) e inhibiendo la incorporación de aminoácidos en las
proteínas de células de hígado de rata (Perin et al, 1 9 8 8 ) .
~1 efecto agudo del alcohol en la capacidad del hígado
para sintetizar albúmina, no ha sido determinada. Aunque, se
ha observado, que la alteración de los mecanismos subcelulares
responsables para la sintesis de albúmina ocurren rápidamente.
Los cambios inducidos por etanol pueden ser solamente
transitorios, ya que la síntesis de albúmina, frecuentemente
se encuentra normal una vez que se deja de ingiere este
hepatotóxico o en sistemas de perfusión de hígado aislado
cuando hay administración de triptófano (Rothschild et al,
1 9 7 1 ) .
EI etano1 y su metabolito primario (acetaldehído) , pueden
alterar directamente la membrana celular, actividad de enzimas
intracelulares, respuesta inmune, fibrogenésis hepática y
oxigenación de tejidos (Perin et al, 1 9 8 8 ) .
A nivel mundial, existen cinco asociaciones, en las que
se ayuda a personas que sufren alcoholismo, para poder dejar
de beber. Estas asociasiones son; 1) Alcohólicos Anónimos
(AA), 2 ) Orgamizaciones para l a Sobriedad Prolongada (SOS), 3)
Recuperación Racional (RR) , 4) Modelo Social y 5 ) Sobriedad
7
En nuestro país, el grupo importante, es Alcohólicos
Anónimos, el cual, es una comunidad de hombres y mujeres que
comparten su mutua experiencia, fortaleza y esperanza para
poder resolver el problema común y ayudar a otros a
rehabilitarse del alcoholismo.
El Único requisito para ser miembro de A A , es el deseo
dejar de ingerir bebidas alcohólicas, está institución se
sostiene económicamente, a trav6s de las contribuciones
voluntarias de sus miembros, no está afiliada a ninguna secta,
religión, partido político, organización o institución alguna;
no interviene en controversias, no respalda ni se opone a
ninguna causa. Su objetivo primordial es mantener sobrios y
ayudar a otros alcohólicos a lograr la sobriedad (Alcoholics
Anonymous World Services, 1989).
En los grupos de alcohólicos anónimos terapia intensiva,
los individuos están recluidos durante noventa días, para su
recuperación. La aplicación de esta medida, sólo está basada
en la experencia, por tanto, es importante establecer con
bases científicas, el tienpo que debe transcurrir para el
reestablecimiento o estabilización metabólica, después de un
Determinar el período de tiempo necesario para el
reestablecimiento o estabilización metabólica en individuos
que han sufrido alcoholismo crónico.
1) Conocer el tiempo de reestablecimiento del estado
nutricional en individuos con alcoholismo crónico después de
un período de abstinencia, a través de la determinación de
proteínas totales y albúmina plasmáticas.
2) Determinar el reestablecimiento o estabilización a
nivel metabólico de lípidos totales y colesterol en individuos
con alcoholismo crónico después de un período de abstinencia. *
3 ) Establecer el tiempo de reestablecimiento o
estabilización del daño hepático en individuos con alcoholismo
crónico después de un período de abstinencia mediante la
determinación en plasma de enzimas marcadoras citosólicas (GPT
9
a ) OBTENCION DE MUESTRA.
Los donadores fueron 160 personas, cuya edad osciló entre
los 18 y 35 años, el tiempo que han dejado de ingerir bebidas
alcohólicas varió desde 1 hasta 120 días.
De cada uno de ellos, se obtuvieron 20 militros de sangre
por punción venosa empleando tubos Vacutainer al vacío
conteniendo heparina sódica. El tubo conteniendo la sangre, se
centrifugó a 2 5 0 0 rpm durante 15 minutos, se colectó el plasma
y se guardo a - 7 0 ° C hasta su análisis.
b ) C U A N T I F I C A C I O N DE PROTEINAS TOTALES.
La determinación del contenido de proteínas totales en
plasma, se realizó mediante el método de Rojkín et al,
(1974a). Para esto, en tubos de ensayo se colocaron 50 U1 de
plasma ó estándar 6 aguar y se adicionaron 3.5 m1 de solución
conteniendo EDTA/Cu (13 mM/L) en NaOH (875 mM/L) y O. 5 % de
Lauryl sulfato de sodio. Esta disolución, se incubó a 37°C
durante 10 minutos. Luego, se leyó la absorbancia a 540 nm de
Para el cálculo del contenido en el plasma, se realizó el
cociente de la concentración del estándar entre la absorbancia
correspondiente y luego el valor resultante se multiplicó por
la lectura de absorbancia registrada en l o s tubos conteniendo
el plasma problema.
c ) CUANTIFICACION DE ALBUMINA.
La estimación del contenido de la albúmina, se llevó a
cabo por el método propuesto por Rojkin et al (1974b). Se
colocaron 10 u1 de plasma 6 estandar en tubos de ensayo y se
afiadieron 3.5 m1 del reactivo de bromo-cresolsulfon-ftaleína
(en polioxietilen lauril eter), que se mantuvieron entre 15 y
2BC'C durante 10 minutos. Después, la absorbancia fue leída a
625 nm.
El contenido de albúmina en el plasma de cada donador, se
obtuvó a partir del factor resultante del cociente del
contenido en g/dL del estándar sobre la absorbancia del mismo.
El valor resultante, se multiplicó por la absorbancia de cada
plasma problema.
t
d) C U A N T I F I C A C I O N DE L I P I D O S T O T A L E S .
Para la determinación del contenido de lípidos totales,
I 1 ácido sulfúrico (97%). Esta disolución, se puso en baño de
agua hirviente durante 10 minutos, transcurrido este tiempo,
los tubos se dejaron enfriar. Luego, se tomaron 0.1 m1 de la
mezcla reactiva y se colocaron en tubos limpios, a l final se
adicionaron 2.5 m1 de mezcla reveladora conteniendo ácido
fosfórico (11.9 mM/L), vainillina (8 mM/L) y se leyó la
absorbancia 530 nm de longitud de onda (Folch et a l , 1957).
e ) C U A N T I F I C A C I O N DEL COLESTEROL.
Al volumen de 20 u1 de plasma ó estandar, se adicionó 1 m1
de solución de anhídrido acético (6.33 M/L) en ácido acético
(99%) , esta mezcla, se incubó durante 10 minutos a 25°C.
Después, se añadieron 0.2 m1 de ácido sulfúrico ( 9 7 % ) , la
disolución resultante, se colocó en baño de agua a 15-25°C y
se leyó la absorbancia a 610 nm (Dittmer y Wells, 1969).
El contenido colesterol de cada muestra problema, fué
obtenido del valor calculado del cociente de la absorbancia
del problema entre la absorbancia del estándar, luego, el
resultado se multiplicó por 300, refiriéndose el contenido en
f) A C T I V I D A D E N Z I M A T l C A .
Todas las estimaciones de actividades enzimáticas se
llevaron a cabo a la temperatura de 25°C.
ASPARTATO AMINOTRANSFERASA O GLUTAMIC0 OXALACETICO TRANSAMINASA.
En la determinación de la actividad de la ASAT ó GOT, se
realizó mediante el procedimiento sugerido por Reitman y
Frankel (1957). Para esto, se emplearon los sustratos; L-
Aspartato (240 mM/L), NADH (0.18 mM/L), Malato deshidrogenasa
(240 U/L), Lactato deshidrogenasa (600 U / L ) , 2-alfa
cetoglutarato (12 rnM/L) que estuvieron disueltos en
amortiguador de Tris-HC1 (80 mM/L, pH 7.8). De esta mezcla, se
emplearon 3 m1 y se le adicionaron 300 u1 de plasma, se agitó
y se registró l a absorbancia a 340 nm, a l o s 3 0 segundos, 1,
2 y 3 minutos.
Se .obtuvó la diferencia promedio de absorbancia/minuto,
restando cada lectura de la anterior y promediando l o s
valores. Este promedio se multiplicó por el coeficiente de
extinción molar del NADH (1111) , dando la actividad en
Unidades/Litro de plasma.
13
ALANINA AMINOTRANSFERASA O GLUTAMIC0 PIRUVICO TRANSAMINASA.
La actividad de la ALAT ó GPT, se llevó a cabo mediante
el metodo propuesto por Reitman y Frankel (1957). Las
concentraciones de los sustratos fueron; L-alanina (500 mM/L),
NADH (0.18 mM/L), Lactato deshidrogenasa (1,200 U/L), 2-alfa
cetoglutarato (15 mM/L) disueltos en amortiguador Tris-HC1
(100 mM/I,, pH 7.5). De esta disolución, se tomaron 3.0 m1 y se
adicionaron 300 ul, se mezclaron por inversión, se leyó la
absorbancia a 340 nm, a los 30 segundos, 1, 2 y 3 minutos.
Se obtuvo la actividad de la enzima, primero realizando
la diferencia promedio de absorbancia/minuto, esto se logró,
restando cada lectura de la anterior y promediando los
valores. Este promedio, se multiplicó por el coeficiente de
extinción molar del NADH es 1111, dando la actividad en
Unidades/Litro de plasma.
A N A L I S I S E S T A D I S T I C O .
*
Se emplearon métodos descriptivos como promedio,
desviación estándar y gráficas en barra, para definir el
comportamiento de las variables analizadas y para plantear
lasposibles causas-efecto observadas, se utilizó la prueba
En la Figura 1, se muestra el comportamiento en el
contenido de proteínas totales plasmáticas en individuos
después de la abstinencia. Se puede observar que hay aumento
en el contenido después de la segunda quincena del período de
abstinencia, ya qu.e al inicio del período, se encontraron
valores promedio de 5 . 4 4 5 0 . 5 5 8 g/dl, y a partir de dicha
quincena los valores fueron significativamente mayores, siendo
el valor promedio de 6 . 2 4 ~ 0 . 5 3 1 g/dl, llegando a estar dentro
de l o s rangos de referencia para individuos sanos.
Indicando así que el consumo crónico de alcohol
influye en los individuos a que no se realice una síntesis
normal de proteínas existentes en plasma y por lo tanto tener
estado nutricional bajo. Sin embargo, al someterse a la
abstinencia alcohólica hay recuperación importante en los
niveles de proteínas y por tanto, en su estado nutricional.
Se ha propuesto, ,qu.e el etanol modifica la síntesis de
proteínas de manera cuantitativa
y
cualitativa, después de uncorto período de exposici6n. Recientemente, se ha descrito, en
células hepáticas de rata expuestas a este agente químico,
disminución en la incorporación de metionina marcada
isotópicamente, alteración en la velocidad de proliferación,
15
contenido de ácido ribonucléico mensajero (Chobert et al,
1988).
En lo que se refiere al contenido de albúmina en
plasma, al principio de la rehabilitación, los valores
promedio fueron de 3 . 2 3 k 0 . 2 9 g/dl y la estabilización, se
lleva a cabo entre la segunda y tercera quincena del período
de abstinencia, llegando a valores de 3.78k0.46 g/dl (ver
Figura 2)
.
Con respecto a este comportamiento; se ha observado
que durante la exposición aguda al etanol, la síntesis de
albúmina disminuye notablemente pero que en determinado tiempo
esta proteína aumenta considerablemente teniendose así valores
significativos, que están dentro de los valores normales.
Además, muchos efectos del etanol pueden ser
provocados por sus metabolitos o su acción sobre las membranas
celulares, algunos de estas alteraciones podrían ser debidos
a la modificación específica de la expresión génica, aunque
los mecanismos de esta modificación, no es conocido (Porter et
al, 1987).
b
Con el abuso en la ingesta del etanol, el cambio
histológico más obvio que se observa, es la acumulación de
la hiperlipemia sérica, considerando lo anterior, se llevó a
cabo la estimación del contenido de lípidos totales en plasma
de individuos alcohólicos crónicos (Achord, 1995).
En la Figura 3 , se observa que en las primeras dos
quincenas del período de abstinencia, el contenido fué de
8 3 5 ~ 4 0 1 . 2 5 mg/dl. Sin embargo, a partir de la tercera
qui.ncena, los valores obtenidos disminuyen de manera
considerable (120.18k378.20 g/dl), probablemente asociado a un
período de estabilización del metabolismo, durante el cual
empieza la utilización de los lípidos acumulados.
El aumento excesivo en el contenido de lípidos en
muchos de los pacientes, en las primeras quincenas tienen su
probable explicación en que cuando el etanol esta presente,
este llega a ser la fuente de energía preferente y desplaza el
90% de otros sustratos en el hígado.
Posteriormente, a partir de la quinta quincena, se
observó nuevamente aumento en l o s valores de lípidos totales,
esto podría ser consecuencia del tipo de dieta a la que están ?
sometidos los individuos durante su rehabilitación.
En cuanto al contenido plasmático de colesterol, se
observó que, en l o s primeras dos quincenas del período de
17
mg/dl), pero a partir de la tercera quincena disminuyó la
cantidad de colesterol haciéndose más significativa con un
valor promedio de 235.07+86.07 mg/dl y disminuyendo aún más en
las últimas quincenas, al parecer debido a que el catabolismo
del colesterol, comienza a estabilizarse y/o aumento en la
conversión de este a ácidos biliares.
Se ha obervado, que la administración crónica de
alcohol etílico produce reemplazamiento de carbohidratos como
fuente de energía y acumulación de colesterol esterificado en
el hígado y que está asociado con aumuento de etanol en la
sangre (Lefevre et al, 1972).
Por otro lado, la adición de colesterol en la dieta
produce la acumulación de diez veces más colesterol
esterificado. A s í , la alimentación simultánea de colesterol y
alcohol etílico resulta en aumento de 2 0 veces en colesterol
esterificado y plasmático (Crouse y Grundy, 1984).
El hombre está expuesto a diversos xenobióticos como,
fármacos, pesticidas, aditivos alimenticios y solventes
orgánicos entre otros. Estos difieren en su estructura química
Por sus características fisicoquímicas el etanol,
puede penetrar rápidamente la bicapa lipídica afectando las
propiedades fisicoquímicas de la membrana. Sin embargo, se
conoce poco, sobre la interacción de este con componentes
membranales. Se ha propuesto, que puede estar interaccionando
con la cabeza polar de los fosfolípidos, anclándose por medio
de su grupo funcional hidroxilo (Wood y Schroeder, 1988).
Al analizar, el comportamiento en la actividad
enzimática de Alanina aminotransferasa ( G P T ) , en individuos
alcoholicos esta elevada. Se puede considerar, que la
liberación de estas enzimas puede estar relacionado, con el
efecto fluidizante del etanol y por el ataque de radicales
libres productos de su metabolismo sobre los enlaces dobles de
l o s ácidos grasos en los fosfolípidos que integran la membrana
plasmática (lipoperoxidación), viéndose modificada la
permeabilidad selectiva y la estructura de la membrana,
permitiendo la salida de enzimas y solutos diversos del
citoplasma hacia el plasma.
La Figura 5 muestra que la estabilización en la
actividad enzimática en enzimas marcadoras de daño hepático,
se lleva a cabo a partir de la tercera quincena del período de
abstinencia, en donde baja de manera significativa,
encontrándose la actividad promedio de 30.6k151.94 U/L,
19
valores de referencia (18 U / L ) , lo cual indica que el daño en
la membrana plasmática no progresa indefinidamente.
Este mismo efecto, se observó en la actividad de la
Aspartato Aminotransferasa, que se localiza generalmente
difundida en hígado y corazón, debido a la alteración de
dichos organos, el nivel de AST circulante aumenta de forma
proporcional al daño del órgano. En la Figura 6 , se observa
que la actividad en plasma en las primeras quincenas tuvo
promedio de 8 0 . 4 5 k 6 4 . 3 0 , disminuyendo a partir de la tercer
quincena mostrándose la actividad promedio 5 1 . 8 1 ~ 4 0 . 2 2 ,
haciéndose los valores más significativos, hasta llegar a
semejantes a los valores de referencia (19 U / L )
.
L o s niveles elevados de AST y ALT en individuos con
alcoholismo crónico, indican daño producido por el etanol en
el tejido hepático principalmente.
E 1 análisis de la actividad de enzimas séricas de
pacientes juega papel importante en la práctica clínica, una
determinación de una sola enzima marcadora, no es suficiente
*
para la diagnosis exacta entre el daño producido por la
ingesta de etanol y por la no ingesta, por tanto, es necesario
usar la combinación de pruebas proporcionando información más
Los reportes sobre las alteraciones producidas en l a s
membranas plasmáticas por la exposición al etanol, se han
encaminado a entender el proceso de adicción, que se presenta
en organismos expuestos cronicamente a este compuesto, para
esto, se han aislado principalmente las membranas de células
cerebrales (Chin y Golstein, 1977; Harris y Schroeder, 1981).
Hill y Bangham (1975) , sugirieron que la composición
lipídica de las membranas celulares puede cambiar de acuerdo
a las condiciones fisiológicas, a las que un organismo está
expuesto. Este efecto, es semejante a la capacidad de las
bacterias y los organismos poiquilotermos para cambiar la
composición de los ácidos grasos de los fosfolípidos de
21
IJa ingesta del etanol provoca disminución en los
contenidos de proteínas totales y albúmina en plasma de
humanos. Efecto que tiende a desaparecer después de la segunda
quincena de la abstinencia total y conforme avanza la no
ingesta alcohólica, los contenidos llegan a valores de
referencia para individuos sanos.
En cuanto al. contenido de lípidos totales y
colesterol, el primero, mostró dos fases durante la primera
hubo disminución hasta la tercera quincena y a partir de l a
cuarta quincena el contenido aumento. En el caso, del
colesterol este no mostró cambios durante la abstinencia.
La actividad de enzi-mas citosólicas ( A S T y ALT)
marcadoras de daño .hepático, mostró que a partir de la tercera
quincena hay una estabilización del daño producido por el
etanol.
*
Los resultados en conjunto mostraron que a parir de la
tercera quincena, ti.ende haber estabilización de las
Una vez realizado este trabajo, podemos señalar que
ayudaría en la interpretación de los resultados, la
homogenización del número de muestras por período de
abstinencia. Además, ya que hay diferencia en proteínas
totales, se podría pensar en efecto diferencial, como fué
observado en el contenido de albúmina, considerando esto,
podría analizar el patrón proteico de plasma de alcohólicos y
no alcohólicos mediante electroforesis.
Como l o s resultados mostraron, el contenido de
colesterol, no se altera durante la abstinencia, podría ser
que el contenido var.iará entre el libre y esterificado, así
como, el incorporad'o en lipoproteínas, por tanto, sería
recomendable, llevar a cabo la determinación de los patrones
de lipoproteinas séricas.
En este trabajo, sólo fué analizada la actividad
plasmática de enzimas que rlqrmalmente se encuentran dentro de
la célula hepática, ayudaría como prueba diagnóstica el uso de
pruebas para enzimas membranales indicadoras de alcoholismo
crónico, como es la Gamma Glutamil Transpeptidasa y Fosfatasa
Alcalina. Por último, se podrían analizar, otras funciones que
pueden ser alteradas p o r la exposición al etanol, por e'jemplo,
23
Achord, J.L. (1995). Alcohol and the liver. Sci. & Med., 2:
16-25
Alcoholics Anonymous World Service, Inc.(1989). Alcoholics
Anonymous. NY. pp 181.
Baraona, E. and Lieber, C.S. (1979). Effects of ethanol on
lipid metabolism. J. Lipid Research. 20:289-315.
Brindley, D.N. (198'7). What factors control hepatics
triacilglycerol accumulation in alcohol abuse. Biochim. Soc.
Trans. , 16 : 251-253.
Crouse J , J. and Grundy, S (1984). Effects of alcohol on
plasma lipoproteins and cholesterol and triglyceride
metabolism in man. J. Lipid Res. 25:486-496.
Chin, J.H. and Goldstein@, J1.B. (1977). Drug tolerance in
biomembranes: A spin label study of the effects of ethanol.
Science., 196:684-685.
Chobert M.N, Vincens P., Guellaen, Laperche Y. and Hanoune J.
pattern in the C rat hepatoma cell line. J. Hepatology, 6:85-
92.
Derr R. F , Porta E.A, Larkin E.C and Rao G . A (1990)
.
I sethanol per se hetotox:ic?. J. Hepatology, 10:381-385.
Dittmer, J.C. and W'ells, M.A. (1969). Quantitative and
qualitative analysis 'of lipids and lipid components. Meth.
Enzymol., 14: 486-487.
Reitman, S. and Frankell, S . (1957). A colorimetric method for
the determination of serum glumatic oxaloacetic and glutamic
pyruvic transaminases. Amer. J . Clin. Pathol., 28:56-59.
Folch, J., Lees, M. and Stanley, J.S. (1957). An simple method
for the isolation and purification of total lipids from animal
tissues. J . Biol. Chem., 226:497-509.
Hall, T. (1990)
.
New way to treat alcoholism shuns spiritualism. New York: Time..;. Dec, 24.*
Harris, R.A. and Schroeder, F . (1981). Ethanol and the
physical properties of brain membranes. Mol. Pharmacol.,
25
Hill, M.W y Bagham, A.D. (1975). General depressant drug
dependency: A biophysical hipothesis. adv. exp. med. biol.,
59: 1 - 9 .
Kennedy, N.P. and Tipton, K.F. (1990). Ethanol metabolism and
alcoholic liver disease. Essays Biochem., 25:138-191.
Perin, A., Scalabrino, G. Sessa, A and Arnabadi (1988). In
vitro inhibition of protein synthesis in rat liver as a
consecuence of ethanol metabolism. Biochim. Biophys. Acta.
366 : 101.
Peterson, K.S. (1992). "AA by day with the-help pf a higher
power. USA today., April 21.
Porta, E.A., Bergman B . J . y Stein,A.A. (1965). Acute
alcoholic hepatitis. Am. J. Phathol., 46:657-689.
Porter, T.D., Fujita, V.S. and Coon, M.J. (1987). Quantitation
Of cytochrome p-450 f o r 3A rnl<NA in tissues from untreated and
*
ethanol-,acetona, and imidazole-treated rabbits. Fed. proc.,
46:2140a.
la reacción del Biuret. Nuevo reactivo cupro alcalino estable.
Bioq. Atl. , 6 : 1931-1934.
Rojkín, M.L. , Olguin, M.C. , Drappo, J.A. y Sosa, C.F. (1974b)
.
Fraccionamiento protéico con determinación directa de
albúmina. Bioq. C l i n . , 8: 241-245.
Rothschild, M.A, Oratz, M . , Mongelli, J. and Schreiber S .
(1971). Alcohol induced depression of albumina. Synthesis:
Reversal by tryotophan. J . Clin. Invest., 50:1812-1817.
Savolainen, M . J , Baraona, E., Leo, and Lieber C . S . (1986).
Pathogenesis of the hipertriglyceridemia at early stages of
alcoholic liver injury in the baboon. J. Lipid Res. 27:1073-
1 0 8 3 .
Stammati, A.P., Silano, V.X. and ZUCCO, F. (1981). Toxicology
invetigation with cell culture system. Toxicology, 20:91-153.
von Wartburg, J.P. and Buhler, R. (1984). Biology of disease.
Alcoholism and aldehydism: new biomedical concepts. Lab.
Invest., 50:5-15.
2 7
'T
0.000
Figuro
1 .
Contenido
de proteinas totales plasmatico
en individuos alcoholicos
despues
de
la
abstinencia.
n=80
-
1
.o00*
n=29 T
2 . 0 0 0
*
n=20
T
3.000
*
n=19
T
4.000
*
n=12
T
5.000
Abstine'ncia
( I
5
dius)
0.000
Figura
2 .
Contenido
plasmutico
de
albumina e n
individuos
alcoholicos
despues
de
la
abstinencia,
n-80 n =:
29
p(0.05
n=19
T
~ ( 0 . 0 5
n=12'1
.o002
.o00 3.000 4.000 5.0002 9
Figura
3.
Contenido
total
de
lipidos
e n
p l a s m a
de
individuos alcoholicos
despues
de la abstinencia.
o.
O00-
1 .o00 2.000 3.000 4.0005.000
Fiyur-a
-4. C o l e s t e r o l
p l u s m a t i c o en
individuos
alcoholicos
d e s p u e s
de
la abstinencia,
0.000 + 1 .o00 2.000 3.000
4.000
5.0003 1
Figura
5.
Actividad
plasmatica
de
la
ALT
en
ulcoholicos
despues
de
la abstinencia.
0.000
'1
.o002.000
p(0.05
p ( 0 . 0 5
n - 2 0 n = l 9
T
T
s.
O00
4.000
5.000
T
Fiyur-a
6.
Actividad plusmatica
de
la
AST
e n
alcoholicos
d e s p u e s
de
la
abstinencia.
n=80
1
n=29
0.000
-
1
.o002.000
3.000
4.000
5
.O00AbstinGncia
( I
5
dias)
~ ( 0 . 0 5
n=20
p(0.05T
n=19
