Efecto de la combinación de las concentraciones del 6 Bencilaminopurina y del medio Murashige y Skoog, 1962 en el establecimiento in vitro de Prosopis pallida, Trujillo, 2018

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. IC AS. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. EN CI. AS. BI O. LO. G. ESCUELA PROFESIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Efecto de la combinación de las concentraciones del 6-. CI. Bencilaminopurina y del medio Murashige y Skoog, 1962 en el establecimiento in vitro de. BI. BL. IO. TE. CA. DE. Prosopis pallida, Trujillo, 2018.. TESIS PARA OBTENER. EL TÍTULO PROFESIONAL DE BIÓLOGO. AUTORES: Br. CAMPOS LEÓN, Diego José Br. CHÁVEZ ALCÁNTARA, Claudia Cristina. ASESOR: Dr. LÓPEZ MEDINA, Segundo Eloy. Trujillo - Perú 2019. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Dr. Orlando Moisés Gonzales Nieves RECTOR. IC AS. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. BI O. LO. G. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. Dr. Rubén César Vera Veliz. AS. VICE-RECTOR ACADÉMICO DE LA. CI. EN CI. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. DE. Dr. Weyder Portocarrero Cárdenas. CA. VICE-RECTOR DE INVESTIGACIÓN DE LA. BI. BL. IO. TE. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. Dr. Steban Alejandro Ilich Zerpa SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. IC AS. Dr. Freddy Rogger Mejía Coico DECANO DE LA. BI O. LO. G. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. AS. Dr. William Elmer Zelada Estraver SECRETARIO DE LA. CI. EN CI. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. DE. Freddy Peláez Peláez. DIRECTOR DE LA. CIENCIAS BIOLÓGICAS. BI. BL. IO. TE. CA. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE. Dra. Angelita Teresa Cabrera de Cipriano DIRECTOR DE DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. PRESENTACIÓN. LO. G. Señores miembros del Jurado Dictaminador.. BI O. Dando cumplimiento a lo dispuesto en el Reglamento de Grados y Títulos de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, nos honramos en. AS. presentarles y someter a vuestra consideración y elevado criterio el presente informe de. EN CI. tesis intitulado: Efecto de la combinación de las concentraciones del 6Bencilaminopurina y del medio Murashige y Skoog, 1962 en el establecimiento in. Trujillo, junio del 2019.. IO. TE. CA. DE. Profesional de Biólogo.. CI. vitro de Prosopis pallida, Trujillo, 2018 con el que pretendemos obtener el Título de. Br. Claudia Cristina Chávez Alcántara.. BI. BL. Br. Diego José Campos León.. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR El que suscribe Dr. Segundo Eloy López Medina, asesor de la tesis titulada: Efecto de la combinación de las concentraciones del 6-Bencilaminopurina y del medio. IC AS. Murashige y Skoog, 1962 en el establecimiento in vitro de Prosopis pallida, Trujillo,. G. 2018.. LO. CERTIFICA. BI O. Que la investigación ha sido desarrollada de conformidad con su correspondiente proyecto y las orientaciones pertinentes.. AS. En cuanto al informe ha sido redactado bajo mi asesoramiento, acogiendo las. EN CI. observaciones y sugerencias alcanzadas, por lo que autorizo a los bachilleres: Campos León Diego José y Chávez Alcántara Claudia Cristina continuar con los procedimientos. Dr. López Medina Segundo Eloy.. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. según los fines.. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. LO. EN CI. AS. BI O. Presidente del jurado. G. Dra. Rodríguez Espejo Marlene Rene.. IC AS. JURADO DICTAMINADOR. Dr. Veneros Terrones Roger.. CA. DE. CI. Secretario. Vocal. BI. BL. IO. TE. Dr. López Medina Segundo Eloy.. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que la presente tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo aprobado por. G. IC AS. UNANIMIDAD.. CI. EN CI. AS. BI O. Presidente del jurado. LO. Dra. Rodríguez Espejo Marlene Rene.. Secretario. BI. BL. IO. TE. CA. DE. Dr. Veneros Terrones Roger.. Dr. López Medina Segundo Eloy. Vocal. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. IC AS. A Dios, le doy gracias por amarme a pesar de las debilidades, por ser mi luz y guía de mi camino, por darme. G. la fortaleza y perseverancia para. LO. seguir adelante en el camino de la. BI O. vida.. AS. A mi Familia, por su apoyo y porque. EN CI. creyeron en mí dándome ejemplos dignos de superación y entrega, por todas sus enseñanzas, su dedicación, su sacrificio y. demuestran, son los que me impulsan a seguir adelante.. IO. TE. CA. DE. CI. su confianza, por el amor que siempre me. mi. BL. A. padre. Segundo. Campos. Linares, que está presente en mí. BI. memoria, su disciplina y consejos para poder conseguir la ansiada meta de ser profesional.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A Dios por haberme brindado una. IC AS. hermosa familia y por guiar mis pasos y decisiones que he tomado en la vida dándome coraje y valentía para lograr. BI O. LO. G. mis metas, sin Él nada sería posible.. AS. A mis queridos padres Lorenzo Chávez. EN CI. jara y Juana Alcántara Díaz, quienes cuidaron de mi bienestar y educación brindarme su apoyo incondicional para. mucho.. IO. TE. CA. DE. CI. seguir adelante con mis sueños. Los amo. A mis hermanas Leyly Nataly Chávez. BL. Alcántara y Vanessa Soledad Chávez. BI. Alcántara, porque siempre confiaron en mí y me dieron fuerza para luchar y seguir adelante.. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RECONOCIMIENTO. IC AS. Un reconocimiento muy especial a nuestro asesor de tesis: Dr. López Medina, Segundo Eloy por su orientación, apoyo, confianza, lo cual permitió. G. el desarrollo y culminación satisfactoria del presente trabajo de. LO. investigación. Además, por brindarnos su amistad y conocimientos. BI O. académicos durante nuestra formación profesional.. Un reconocimiento a los profesores de la Escuela Académico Profesional de. EN CI. formación académica.. AS. Ciencias Biológicas por su dedicación y por brindarnos una buena. Un reconocimiento a los profesores miembros del jurado por sus observaciones y sugerencias en la mejora de la investigación.. CI. Finalmente, un reconocimiento a la Facultad de Ciencias Biológicas y por. DE. ende a nuestra reconocida y licenciada Universidad Nacional de Trujillo, lo. Los autores. BI. BL. IO. TE. CA. cual nos sentimos orgullosos de ser parte de esta gran familia universitaria.. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONTENIDO AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ............ii AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS ............. iii. IC AS. PRESENTACIÓN ..................................................................................................iv. DEL ASESOR ......................................................................................................... v. LO. G. JURADO DICTAMINADOR ................................................................................vi. BI O. APROBACIÓN .....................................................................................................vii DEDICATORIA .................................................................................................. viii. AS. RECONOCIMIENTO ............................................................................................. x. EN CI. CONTENIDO .........................................................................................................xi LISTA DE TABLAS ........................................................................................... xiii. CI. LISTA DE FIGURAS ............................................................................................ xv. DE. RESUMEN ..........................................................................................................xvii. CA. ABSTRACT....................................................................................................... xviii INTRODUCCIÓN ............................................................................................. 1. II.. MATERIAL Y MÉTODOS ............................................................................ 6. IO. TE. I.. BL. A. Identificación y registro de la especie. ..................................................................... 6. BI. B. Clasificación taxonómica (Trópicos.org, 2019). ...................................................... 7 C. Preparación de la semilla.......................................................................................... 7 Colecta y selección de frutos del algarrobo. ............................................................. 7 Obtención de la semilla............................................................................................. 7. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Prueba del agua en las semillas................................................................................. 8 Proceso pre-germinativo (escarificación). ................................................................ 8 D. Preparación del sustrato y sembrado de las semillas (Anexo 5). ............................. 8. IC AS. E. Emergencia y riego de las plántulas de Prosopis pallida ......................................... 8 F. Preparación de los tratamientos (Anexo 6). .............................................................. 9. LO. G. G. Diseño experimental. ............................................................................................. 11. BI O. H. Esterilización.......................................................................................................... 12 I. Sembrado del explante. ........................................................................................... 12. AS. J. Área de incubación. ................................................................................................. 14. EN CI. Seguimiento de los explantes de cada tratamiento. ................................................ 14 Toma de datos de los tratamientos de acuerdo a las variables de estudio. ............. 14. CI. K. Análisis estadístico................................................................................................. 15. DE. III. RESULTADOS ............................................................................................... 16. CA. IV. DISCUSIÓN .................................................................................................... 25. TE. V. CONCLUSIONES ............................................................................................ 34. IO. VI. RECOMENDACIONES ................................................................................. 35. BL. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ........................................................... 36. BI. ANEXOS…………………………………………………………………………39. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. LISTA DE TABLAS Pág. Tabla1. Tratamientos resultantes de la combinación de las concentraciones del 6-. IC AS. Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de biotecnología del. LO. G. Instituto de la papa y cultivos andinos-UNT, 2019.. 6. BI O. Tabla 2. Análisis de varianza para longitud de las plántulas provenientes de la yema apical de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de. AS. 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y. CI. cultivos andinos – UNT, 2019.. …9. EN CI. al 1/3, realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y. DE. Tabla 3. Test de Tukey de la longitud de las plántulas provenientes de la yema apical de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la. CA. combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, …18. TE. realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos. BI. BL. IO. andinos – UNT, 2019.. Tabla 4. Análisis de varianza del número de raíces de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el. …19. laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019. xiii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 5. Test de Tukey del número de raíces de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio. …19. G. IC AS. de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019.. LO. Tabla 6. Análisis de varianza de la longitud de la raíz mayor de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la. BI O. combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos. EN CI. AS. andinos – UNT, 2019.. …20. CI. Tabla 7. Test de Tukey de la longitud de la raíz mayor de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la. DE. combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3,. …21. CA. realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos. BI. BL. IO. TE. andinos – UNT, 2019.. xiv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. LISTA DE FIGURAS Pág. Figura 1. Vista satelital del jardín botánico de la Universidad Nacional de Trujillo. Georreferenciado a 8º 6´42.08” S 79°2´16.94” O. Tomado de Google. …6. IC AS. Earth Pro versión 7.0 beta (Fuente; Elaboración Propia).. G. F Figura 2. Diseño de bloque completo al azar, tres repeticiones con nueve. LO. tratamientos cada uno, con la combinación de las concentraciones del 6Bencilaminopurina y del medio Murashige y Skoog, 1962 y ocho unidades …10. AS. Prosopis pallida (Fuente; Elaboración Propia).. BI O. muéstrales en cada tratamiento con un total de 216 plántulas in vitro de. EN CI. Figura 3. Grafica de barras para el test de Tukey de la variable longitud de la plántula proveniente de la yema apical de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6-. CI. Bencilaminopurina de 0,00; 0.25 y 0.50 ppm del y del medio basal de Murashige y Skoog, 1962 al 1, al ½ y al 1/3 realizado en el laboratorio de. CA. Elaboración Propia).. DE. Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019 (Fuente; …18. TE. Figura 4. Grafica de barras para el test de Tukey de la variable número de. IO. raíces de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K. “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones, del 6-. BL. Bencialaminopurina Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y medio. BI. Basal de Murashige y Skoog, 1962 al 1, ½ t al 1/3 realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019. …20. (Fuente; Elaboración Propia).. xv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Figura 5. Grafica de barras para el test de Tukey de la variable longitud de raíces de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K. “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de Biotecnología. …21. IC AS. del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019 (Fuente; Elaboración. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. Propia).. xvi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. En el Perú, Prosopis pallida, es el principal símbolo de los bosques secos del norte con. IC AS. gran importancia económica para la región, por sus múltiples usos como materia prima. Los métodos de propagación sexual por semillas y de propagación asexual por esquejes. G. son ineficientes. Por lo tanto, nos propusimos a investigar el efecto de la combinación de. LO. las concentraciones de 6- Bencilaminopurina y el medio basal de Murashige y Skoog,. BI O. 1962 sobre el establecimiento in vitro de semillas. El equipo de ensayo fue la semilla escarificada por el método mecánico, los tratamientos fueron t1 (1 MS y 0,00 ppm de. AS. BAP), t2 (1 MS y 0,25 ppm de BAP), t3 (1 MS y 0,50 ppm de BAP), t4 (1/2 MS y 0,00. EN CI. ppm de BAP), t5 (1/2 MS y 0,25 ppm de BAP), t6 (1/2 MS y 0,0 MS).50 ppm de BAP), t7 (1/3 MS y 0.00 ppm de BAP), t8 (1/3 MS y 0.25 ppm de BAP), t9 (1/3 MS y 0.50 ppm de BAP), el trabajo de investigación se realizó en el laboratorio del instituto de papa y. CI. cultivos andinos -UNT, durante cinco meses. Se aplicó un diseño de bloques completos al. DE. azar, con tres repeticiones, nueve tratamientos y ocho unidades de muestra. Los datos fueron analizados por las pruebas ANOVA y Tukey. Se concluye que el medio de 1/2. CA. Murashige y Skoog con 0.00 ppm BAP es el mejor para la longitud de las plántulas (T4) y. TE. el medio de 1/3 Murashige y Skoog con 0.00 ppm BAP es el mejor para el número de. BL. IO. raíces de plántulas de Prosopis pallida H.B.K (T7).. BI. Palabras clave: Establecimiento; Prosopis pallida; Murashige y Skoog al medio; 6Bencilaminopurina.. xvii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT. In Peru, Prosopis pallida, is the main symbol of the dry forests of the north with great. IC AS. economic importance for the region, for the multiple uses as raw material. The methods of sexual propagation by seeds and asexual propagation by cuttings are inefficient. Therefore,. G. we set out to investigate the effect of the combination of the concentrations of 6-. LO. Bencilaminopurine and the basal medium of Murashige and Skoog, 1962 on in vitro seed. BI O. establishment. The experimental unit was the scarified seed by the mechanical method, the treatments were t1 (1 MS and 0.00 ppm of BAP), t2 (1 MS and 0.25 ppm of BAP), t3 (1. AS. MS and 0.50 ppm of BAP), t4 (1/2 MS and 0.00 ppm of BAP), t5 (1/2 MS and 0.25 ppm. EN CI. of BAP), t6 (1/2 MS and 0.50 ppm of BAP), t7 (1/3 MS and 0.00 ppm of BAP), t8 (1/3 MS and 0.25 ppm of BAP), t9 (1/3 MS and 0.50 ppm of BAP), the research work was carried out in the laboratory of the institute of potato and Andean crops -UNT, during five. CI. months. A design of complete blocks was applied at random, with three repetitions, nine. DE. treatments and eight sample units. The data were analyzed by ANOVA and Tukey tests. It is concluded that the 1/2 Murashige and Skoog medium with 0.00 ppm BAP is best for. CA. seedling length (T4) and the 1/3 Murashige and Skoog medium with 0.00 ppm BAP is best. BL. IO. TE. for the number of roots of Prosopis pallida H.B.K (T7) seedlings.. BI. Keywords: Establishment; Prosopis pallida; Murashige and Skoog in the middle; 6-. Bencilaminopurine.. xviii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. I.. INTRODUCCIÓN. I. INTRODUCCIÓN. Prosopis pallida (Humb. & Bonpl. Ex Willd.) Kunth. “algarrobo” pertenece a la familia. IC AS. Fabaceae (Tropicos.org, 2019), es un árbol perennifolio de hasta 20 metros de altura y es el símbolo principal de los bosques secos del norte del Perú. Representa una gran. G. importancia económica para la región puesto que su madera es empleada para la. LO. construcción y combustible, sus frutos comestibles son utilizados para la elaboración de. AS. Weigend, 2012; MINAM, 2011; Rivera, 2018).. BI O. algarrobina, harina de algarrobo, entre otros productos (Dostert, Roque, Cano, La Torre y. EN CI. Desempeña un rol importante para el ecosistema de los bosques secos ya que por ser una leguminosa es una especie con potencial para recuperar la fertilidad y productividad de. DE. CI. los suelos sódicos (Aguilera, 2014; Rivera, 2018).. CA. Los métodos de propagación de Prosopis pallida H.B.K son sexual por semillas y. TE. asexual por esquejes; las semillas, poseen una consistencia dura y necesitan un. IO. tratamiento pre-germinativo, en condiciones naturales se da por animales que comen los. BL. frutos o vainas, luego pasado por el tracto digestivo del animal, son escarificados y. BI. expulsados al exterior, estas al encontrar un medio adecuado, germinan y se establecen (Galera, 2000); la propagación vegetativa es muy ineficiente e igualmente la propagación asexual a partir de esquejes de árboles adultos, por las dificultades de establecimiento con respecto a un sistema radicular adecuado en los suelos predominantes de la zonas de origen. Una técnica de micropropagación in vitro con una alta respuesta de multiplicación. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. constituye una interesante alternativa para la propagación asexual de la especie (Flor. IC AS. Caravia, 2013).. Recientemente, se ha conferido mayor atención a las técnicas de cultivo in vitro para la. G. preservación de especies leñosas de difícil propagación, especies amenazadas o especies. LO. que no producen semillas. La propagación de semillas de Prosopis pallida es muy. BI O. limitada; además la germinación es baja, lo que denota las limitaciones de este proceso. AS. para mantener esta especie (Zárate, Cantos y Troncoso de Arce, 1997).. EN CI. La Micropropagación in vitro es un método empleado para la obtención de plantas de manera rápida, libre de patógenos y en numerosas cantidades, esto contribuye a mantener. CI. el equilibrio del ecosistema forestal y del ambiente como herramienta de rescate ya que. DE. permite la producción de plantas, conservación de la biodiversidad genética y la. TE. CA. innovación de procedimientos tecnológicos (Farjon, 2013).. IO. En cuanto a la propagación in vitro de especies forestales es importante el empleo de. BL. planta madre en buen estado debido a que a partir de ella se realizará su micropropagación. BI. esto permitirá reducir la incidencia de microorganismos patógenos y saprofíticos y así obtener una respuesta inmediata del explante. Los tejidos vegetales a cultivar deben proceder de plantas tiernas. Las características del explantes y su procedencia son importantes para lograr la homogeneidad necesarias en las plantas propagadas in vitro. (Cantillo, Igarza y Ochoa, 2011; De Feria y cols., 2009).. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El medio de cultivo es la combinación sólido o líquido de nutrientes y agua, incluyendo sales inorgánicas, carbohidratos, vitaminas y aminoácidos. También se le llama medio basal y puede ser suplementado con algún regulador de crecimiento y ocasionalmente con. IC AS. otras sustancias. Se debe añadir azúcares al medio de cultivo, ya que las plantas u órganos no son completamente autotróficos cuando se desarrollan en condiciones in vitro. BI O. LO. G. (Nacimiento Ponce, 2014).. Los requerimientos nutritivos para un crecimiento in vitro varían con la especie, e. AS. incluso son específicos de acuerdo a la parte de la planta que se esté cultivando y a la respuesta que se desea obtener. Debido a estas necesidades específicas se han desarrollado. EN CI. formulaciones para los medios de cultivos (Martínez, Rodríguez, Colinas, Villegas,. DE. CI. Castillo y Alia, 2015; Rivera, 2018).. El medio MS es comúnmente empleado en los cultivos de tejidos vegetales. Este medio. CA. fue elaborado por Murashige y Skoog, 1962 donde modificaron las composiciones de las. TE. sales minerales hasta obtener un balance óptimo para la propagación in vitro de muchas. BI. BL. IO. especies vegetales (Jaramillo, 2008).. El medio MS es considerado rico en sales (Cassells & Curry, 2001) pues contiene altas. concentraciones de iones amonio NH4 + (20.6 mM), iones nitrato NO3 - (39.4 mM), iones cloro Cl- (6.0 mM) y MoO4 - (1.0 mM). Sin embargo, contiene concentraciones de Ca (3.0 mM), PO4 - (1.3 mM), Mg+ (1.5 mM) y Cu++ (0.1 mM) relativamente bajas en. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. comparación con otros medios de cultivo como el DKW (Driver-Kuniyuki Walnut) (Martínez-Villegas,. Andrade-Rodríguez,. Colinas-León,. Villegas-Torres,. Castillo-. Gutiérrez, y Alia-Tejacal, 2015). Generalmente, el cultivo in vitro de plantas leñosas,. IC AS. requiere medios con menor cantidad de sales minerales tales como el WPM, que es un medio considerado como de baja concentración en sales NH4 + (5Mm), no3 – (9.7 Mm) Y. G. CL- (1.3 Mm) (Lloyd & McCown, 1981). Sin embargo, el medio MS, 1962 podría ser. LO. efectivo si bajamos su concentración en sales de tal manera que ensayos relacionados a. BI O. estas concentraciones serían interesantes para determinar protocolos de micropropagación. AS. de esta importante especie.. EN CI. Estos medios de cultivo son suplementados con reguladores de crecimiento, como las auxinas, giberelinas, pero mayormente son usadas las citoquininas para inducir el. DE. CI. crecimiento de brotes en muchas especies de plantas (Zárate y cols., 1997).. CA. Las citoquininas son hormonas que en el interior de las plantas se encargan de. TE. promover la división celular, retrasar el envejecimiento de las hojas y promoviendo la. IO. expansión celular. Promueve la proliferación de tallos e induce la formación de brotes. BL. adventicios las más empleadas y de mayor empleo para la multiplicación de plantas in. BI. vitro son cinetina (KIN), bencilaminopurina (BAP) y zeatina (ZEA) (Ascón & Talón, 2013; Boeri, 2015; Roca & Mroginski 1991).. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El BAP, se caracteriza por promover el crecimiento, división y elongación de las células, promueve la germinación, regula el crecimiento de las raíces e inhibe el proceso de envejecimiento de las hojas. Sus propiedades físico químicas son, forma cristalina y. IC AS. blanca sin olor, estable en soluciones ácidas y alcalinas, así como bajo la luz y el calor, su punto de fusión es de 235 ºC (Basail y cols., 2015). Su composición química es derivada. G. de la adenina, pertenece al grupo de isoprenoides aromáticos. Los niveles del BAP, en la. LO. planta dependen básicamente del balance entre los siguientes procesos: transporte,. AS. BI O. conjugación, síntesis y degradación (Cotelo, 2016).. A nivel molecular el BAP se une a CRE1 (receptor de citoquininas), que se localiza en. EN CI. el retículo endoplasmático del receptor, denominado CHASE. Se activa así la actividad histidin quinasa, fosforilando un aspartato del dominio receptor de CRE1. El fosfato se. CI. transfiere a una proteína citosólico llamada AHP (es una proteína histidina fosfotransferasa. DE. de Arabidopsis). Esta migra hacia el núcleo donde les cederá el fosfato a los residuos de aspartato de los dominios receptores de las ARR de tipo A y tipo B. La fosforilación de las. CA. ARR tipo B, activan el dominio de salida que induce la transcripción de genes ARR tipo. TE. A; la fosforilación de las ARR de tipo A hace que se produzcan efectores que van a llevar. IO. a cabo la respuesta adecuada en la planta (Taiz & Ziegler, 2015). Con estos aspectos. BI. BL. permiten el uso en medios de cultivo in vitro.. Por lo tanto, la presente investigación estudiará el efecto de la combinación de las concentraciones de 6-Bencilaminopurina y del medio Murashige y Skoog en el establecimiento in vitro de Prosopis pallida, Trujillo, 2018.. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II.. MATERIAL Y MÉTODOS. Identificación y registro de la especie.. IC AS. La planta Prosopis pallida (Humb. & Bonpl. Ex Willd.) Kunth. “algarrobo” (Tropicos.org, 2019) proviene del jardín botánico (Anexo 1) de la Universidad Nacional de Trujillo. G. (UNT), georreferenciado a 8º 6´42.08” S 79°2´16.94” O (Fig.1) en el distrito de Trujillo,. LO. provincia de Trujillo, departamento de la Libertad, un ejemplar de la especie se encuentra. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. depositado en el Herbario Truxillense (HUT) con el número de registro 59728 (Anexo 2).. BI. BL. Figura 1. Vista satelital del jardín botánico de la Universidad Nacional de Trujillo. Georreferenciado a 8º 6´42.08” S 79°2´16.94” O. Tomado de Google Earth Pro versión 7.0 beta (Fuente; Elaboración Propia).. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DIVISIÓN. ………. Plantae. CLASE. ……..... Equisetopsida C. Agardh.. SUBCLASE. ……… Magnoliidae Novák ex Takht.. G. SUPERORDEN .……... Rosanae Takht.. IC AS. Clasificación taxonómica (Trópicos.org, 2019).. ............. Fabales Bromhead. FAMILIA. ............. Fabaceae Lindl.. GÉNERO. ............ Prosopis L.. ESPECIE. ............. Prosopis pallida (Humb. & Bonpl. Ex Willd.) Kunth.. AS. BI O. LO. ORDEN. EN CI. Preparación de la semilla.. CI. Colecta y selección de frutos del algarrobo.. Se seleccionaron los frutos (vainas) del algarrobo (Anexo 3, Fig. A) del jardín botánico de. DE. la Universidad Nacional de Trujillo las cuales fueron colocadas en bolsas previamente. CA. etiquetadas y trasportadas a laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos. IO. TE. andinos – UNT.. BL. Obtención de la semilla.. BI. De los frutos (vainas) seleccionados, de color mostaza, se desenvainó retiró todo el mesocarpio o pulpa hasta llegar al endocarpio o corozo; con la ayuda de un cortaúñas se obtuvieron las semillas (Anexo 3, Fig. B).. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Prueba del agua en las semillas. Se seleccionó 500 semillas de Prosopis pallida H.B.K, y se sumergió en 200 ml en agua de caño a un vaso acrílico de 250 ml (Anexo 3, Fig. C), dejándolas a temperatura ambiente. IC AS. por 24h hasta que se descartó las semillas hinchadas, quedándonos con las semillas con el. G. epicarpio intacto.. LO. Proceso pre-germinativo (escarificación).. BI O. Se escarificó por el método mecánico, empleando una lija número 250, produciendo una ligera abrasión a nivel del epicarpio de la semilla (Anexo 3, Fig. D). A las semillas. AS. escarificadas, se les colocó en agua por 72 h (Anexo 3, Fig. E), hasta observar la. EN CI. emergencia de la radícula, para acelerar el proceso germinativo.. Preparación del sustrato y sembrado de las semillas (Anexo 5).. CI. En un balde de 1 L se preparó el sustrato que consistió en una mezcla de arena fina. DE. proveniente de duna y humus de lombriz, en proporción 1:1, agregándose agua suficiente para mantener la humedad en él humus, posteriormente en cada celda se colocó el sustrato,. CA. dejando un espacio de 1cm para colocar la semilla. En los germinadores, se sembraron las. TE. 500 semillas y suavemente se colocó una capa del sustrato para cubrirlo, finalmente se. BI. BL. IO. regó con agua de caño (Anexo 4).. Emergencia y riego de las plántulas de Prosopis pallida A partir del tercer día, se registró la emergencia de las plántulas de Prosopis pallida (Humb. & Bonpl. Ex Willd.) Kunth (Anexo 5).. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El seguimiento del crecimiento de las plántulas duro cinco días después de la siembra. El. IC AS. riego de las plántulas era cada dos días.. Preparación de los tratamientos (Anexo 6).. G. Se calculó las concentraciones del medio Murashige y Skoog ,1962 junto con las. LO. concentraciones del 6-Bencilaminopurina con la fórmula de concentraciones C1.V1 =. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. C2.V2, quedando establecido el diseño, de la siguiente manera (Tabla 1):. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla1. Tratamientos resultantes de la combinación de las concentraciones del 6Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos-UNT, 2019. Leyenda. BAP. (10X. (50 ppm. ml). ml). 1 MS; 0. AGAR. SACAROSA. (g). 5. 0. 0.4. 5. 0.25. 0.4. 5. 0.5. 2.5. 0. (g). 1.5. 1 MS; 0.5. BAP T5. ½ MS; 0.25 BAP ½ MS;. 0.4. 1.5. 24. 2.5. 0.25. 0.4. 1.5. 24. 2.5. 0.5. 0.4. 1.5. 24. 1.7. 0. 0.4. 1.5. 24. 1.7. 0.25. 0.4. 1.5. 24. 1.7. 0.5. 0.4. 1.5. 24. DE. T6. 24. EN CI. ½ MS; 0. 1.5. 0.4. CI. BAP T4. 24. 24. AS. 0.25 BAP T3. Muestral. 1.5. BI O. 1 MS;. LO. BAP T2. Unidad. G. T1. MS. IC AS. Tratamientos. 0.5 BAP. 1/3 MS; 0. CA. T7. BAP. 1/3 MS;. TE. T8. IO. 0.25 BAP 1/3 MS; 0.5 BAP. BI. BL. T9. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Diseño experimental. Se aplicó un diseño de bloque completo al azar con tres repeticiones, nueve tratamientos y. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. IC AS. ocho unidades muéstrales por tratamiento (Fig. 2).. IO. Figura 2. Diseño de bloque completo al azar, tres repeticiones con nueve. BI. BL. tratamientos cada uno, con la combinación de las concentraciones del 6-. Bencilaminopurina y del medio Murashige y Skoog, 1962 y ocho unidades muéstrales en cada tratamiento con un total de 216 plántulas in vitro de Prosopis pallida (Fuente; Elaboración Propia).. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Esterilización. Se colocó en una autoclave modelo 25X-2 a una presión de 15 psi a 121 °C por 15 minutos y se dejó enfriar, los 216 frascos agrupados en paquetes de 12 frascos con los respectivos. G. IC AS. tratamientos, tres botellas de agua destilada de 500 ml. (Anexo 7).. LO. En una estufa universal UN110 marca memmert experts in thermostatics a 110°C por dos. AS. BI O. horas, se colocó dos frascos de 100 ml, pinzas y papel aluminio.. Sembrado del explante.. EN CI. Se obtuvieron los explantes a los cinco días a partir de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K, germinadas en el invernadero (Anexo 8, Fig. A), teniendo cuidado que la longitud. CI. del hipocótilo sea de 2 cm presentando cotiledones y yema apical (Anexo 8, Fig. B). Los. DE. explantes fueron colocados en un vaso de precipitación de 250 ml que contenía agua de. TE. CA. caño para retirar el residuo de arena, luego se llenó 20 ml para su conservación.. IO. Se preparó hipoclorito de sodio a una concentración de 2%, con alcohol de 70° y se. BI. BL. almaceno en una botella de vidrio de 250 ml.. Seguidamente, se desinfesto la cámara de flujo laminar con legía marca Clorox al 4 %. Y se colocó tres mecheros de 90 ml con ron de quemar, en un frasco lleno de alcohol de 70°. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. con algodón conteniendo la pinza. Posteriormente los paquetes de frascos de medio de. IC AS. cultivo previamente esterilizados en autoclave.. Los explantes fueron lavados con alcohol al 70° por 30 segundos y cinco veces enjuagados. G. con agua destilada estéril, y lavados con hipoclorito de sodio al 2% por dos minutos y. BI O. LO. cinco veces enjuagado con agua esterilizada.. AS. Luego los frascos fueron sacados de cada paquete inmediatamente se retiró la tapa de papel aluminio (Anexo 9, Fig. A), con una la pinza se cogió la tapa de papel aluminio que. EN CI. fue flameado junto con la boca del frasco (Anexo 9, Fig. B), la tapa del papel aluminio se puso en un lado del mechero y luego se agarró con la pinza el explante y se introdujo en el. CI. frasco (Anexo 9, Fig. C), este procedimiento se repitió con cada uno de los frascos según. DE. como se seguía el orden de siembra se selló con el papel aluminio y se colocaba a un. TE. CA. costado (Anexo 9, Fig. D).. IO. Luego del sembrado, se le agrego cinta polystrech para protegerlo la tapa de papel. BI. BL. aluminio, luego se rotulo según él diseño (Anexo 9, Fig. E).. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Área de incubación. Posteriormente se pasó al área de incubación, presentando una humedad de 77% (Anexo 10, Fig. A) y 18°C de aire acondicionado, con un fotoperiodo de 16/8 y fue ordenado. IC AS. según el diseño experimental (Anexo 10, Fig. B).. G. Seguimiento de los explantes de cada tratamiento.. LO. Mediante observación, se monitoreó la evolución de los explantes hasta la evaluación final. BI O. (Anexo 11), la cual se realizó a los 15 días, después del establecimiento in vitro, para su. AS. posterior análisis estadístico.. Toma de datos de los tratamientos de acuerdo a las variables de estudio.. EN CI. Primero se desenvolvió la cinta polystrech y se retiró la tapa de papel aluminio, con una pinza curva punta fina se extrajo la plántula del frasco (Anexo 12, Fig. A) y se cortó con. CI. navaja los cotiledones que facilitó la toma de datos (Anexo 12, Fig. B), posteriormente se. DE. colocó sobre una hoja milimetrada para medir la longitud de la plántula proveniente de la yema apical (Anexo 12, Fig. C), y longitud de la raíz mayor en cada plántula y número de. CA. raíces (Anexo 12, Fig. C), realizándose de la misma manera todas las medidas de las. BI. BL. IO. TE. variables de acuerdo a los tratamientos según el diseño.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Análisis estadístico. Para determinar la significancia estadística de los tratamientos, para obtener el mejor medio que establezca el crecimiento de la yema apical, número de raíces y longitud de. IC AS. raíces de plántulas de Prosopis pallida H.B.K, se usaron la prueba de análisis de varianza (ANAVA) (α = 0.05), y la prueba de Tukey con (α = 0.05) con el error estándar y el. G. coeficiente de correlación para cada variable, con el uso del programa InfoStat (Di Rienzo. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. y cols., 2018).. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. III. RESULTADOS. En el análisis de varianza de la longitud de las plántulas provenientes de la yema apical de. IC AS. Prosopis pallida H.B.K “algarrobo”, presenta diferencias estadísticamente significativas para el establecimiento de las concentraciones del 6-bencialminopurina y del medio. BI O. LO. G. Murashige y Skoog, 1962. Uno o varios tratamientos establecen significancia (Tabla 2).. En la tabla 3 está la prueba de Tukey (α= 0.05) en la variable longitud de la plántula. AS. proveniente de la yema apical con un error de 0.0603, indica dos grupos homogéneos. El. EN CI. primer grupo está conformado por los tratamientos t8, t3, t9, t6, t7, t2 y t5, el segundo grupo lo conforma los tratamientos t7, t2, t5, t1, y t4. Se interpreta que no existe diferencias significativas entre los tratamientos del grupo uno y dos, porque. CI. estadísticamente son iguales. Los intervalos de las medias del grupo uno es de 0.26 a 0.47. DE. y del grupo dos es de 0.36 a 0.55. Tenemos un rango mayor en el primer grupo y un menor rango en el grupo dos. Hay una intercepción entre los grupos con los tratamientos t7, t2, t5,. CA. estos tratamientos vienen a ser los mayores valores del primer grupo y diferentes de los. BL. IO. TE. tratamientos t1 y t4.. BI. En la figura 3 se observa un gráfico de barras de la prueba de Tukey (α= 0.05) en la variable longitud de la plántula proveniente de la yema apical, indica dos grupos homogéneos con la letra a y b. El primer grupo está conformado por los tratamientos t8, t3, t9, t6, t7, t2 y t5, el segundo grupo lo conforma los tratamientos t7, t2, t5, t1, y t4. Se interpreta que no existe diferencias significativas individualmente entre los tratamientos 16. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. del grupo uno y dos, porque estadísticamente son iguales. Tenemos un mayor número de tratamientos en el primer grupo y un menor número en el grupo dos. Hay una intercepción entre los dos grupos con los tratamientos t7, t2 y t5, estos tratamientos vienen a ser los. IC AS. mayores valores del primer grupo y diferentes de los tratamientos t1 y t4. El grupo homogéneo con mayor media para la longitud de las plántulas provenientes de la yema. G. apical estuvo conformado por lo tratamientos t7, t2, t5, t1 y t4, si bien es cierto que el. AS. BI O. significativa que los demás tratamientos del segundo grupo.. LO. tratamiento cuatro es el que mayor media presenta que el resto, no presenta diferencia. En el análisis de varianza para el número de raíces de las plántulas de Prosopis pallida. EN CI. H.B.K “algarrobo”, presenta diferencias estadísticamente significativas para el establecimiento de las concentraciones del 6-bencialminopurina y del medio Murashige y. DE. CI. Skoog. Uno o varios tratamientos establecen significancia (Tabla 4).. CA. En la tabla 5 está la prueba de Tukey ( α = 0.05) en la variable número de raíces con un. TE. error de 1.0799, indicando tres grupos homogéneos. El primer grupo está conformado por. IO. los tratamientos t3, t2, t9, t6, t5 y t8, el segundo grupo lo conforma el tratamiento uno y el. BL. tercer grupo está formado por los tratamientos t4 y t7. Se interpreta que no existe. BI. diferencia significativa entre los tratamientos del grupo uno por tener medios iguales a cero; el segundo grupo posee diferencias significativas y el tercero grupo no tiene diferencias significativas por ser estadísticamente son iguales. Las medias del grupo uno es de cero y del grupo dos es de 1.13 mientras que el grupo tres presenta un intervalo de 2.29 a 2.46. Tenemos un mayor número de tratamientos dentro del grupo uno con respecto al 17. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. grupo dos y tres. Los grupos no poseen una intercepción. El grupo tres posee el tratamiento. IC AS. siete como el tratamiento estadísticamente con mayor media.. En la figura 4 se observa un gráfico de barras de la prueba de Tukey (α= 0.05) en la. G. variable número de raíces, indica tres grupos homogéneos con la letra a, b y c. El primer. LO. grupo está conformado por los tratamientos t3, t2, t9, t6, t5 y t8, el segundo grupo lo. BI O. conforma el tratamiento uno y el tercer grupo está formado por los tratamientos t4 y t7. Se interpreta que no existe diferencia significativa entre los tratamientos del grupo uno por. AS. tener medios iguales a cero; el segundo grupo posee diferencias significativas y el tercero grupo no tiene diferencias significativas por ser estadísticamente iguales. Tenemos un. EN CI. mayor número de tratamientos dentro del grupo uno con respecto al grupo dos y tres. El grupo homogéneo con mayor media para el numero de raíces estuvo conformado por los. CI. tratamientos t4 y t7, si bien es cierto que el tratamiento siete no es estadísticamente. TE. CA. grupo uno y dos.. DE. diferentes dentro del grupo tres, pero si representa diferencia significativa con respecto al. IO. En el análisis de varianza en la longitud de las raíces de las plántulas de Prosopis pallida. BL. H.B.K. “algarrobo”, presenta diferencias estadísticamente significativas para el. BI. establecimiento de las concentraciones del 6-bencialminopurina y del medio Murashige y Skoog. Un tratamiento establece significancia (Tabla 6).. En la tabla 7 está la prueba de Tukey (α = 0.05) en la variable longitud de la raíz mayor de las plántulas con erro de 0.0041. Indica dos grupos homogéneos. El primer grupo está. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. conformado por los tratamientos t5, t6, t8, t2, t3, y t9 y el segundo grupo lo conforma los tratamientos t1, t7 y t4. Se interpreta que no existe diferencias significativas entre los tratamientos del grupo uno y del dos porque son estadísticamente iguales. Los intervalos. IC AS. de las medias del grupo uno es igual a cero y del grupo dos es de 0.07 a 0.12. Tenemos un mayor número de tratamientos en el grupo uno a diferencia del segundo grupo. No hay. G. intercepción entre las medias. Los tratamientos t1, t7 y t5 vienen a ser los mayores valores. BI O. LO. del segundo grupo a diferencia del primer grupo.. AS. En la figura 5 se observa un gráfico de barras de la prueba de Tukey (α= 0.05) en la variable longitud de raíces de las plántulas, indica tres grupos homogéneos con la letra a,. EN CI. b. Indica dos grupos homogéneos. El primer grupo está conformado por los tratamientos t5, t6, t8, t2, t3, y t9 y el segundo grupo lo conforma los tratamientos t1, t7 y t4. Se. CI. interpreta que no existe diferencias significativas entre los tratamientos del grupo uno y del. DE. dos porque son estadísticamente iguales. Tenemos un mayor número de tratamientos en el grupo uno a diferencia del segundo grupo. No hay intercepción entre las medias. Los. CA. tratamientos t1, t7 y t5 vienen a ser los mayores valores del segundo grupo a diferencia del. TE. primer grupo. El grupo homogéneo con mayor media para la longitud de raíz de las. IO. plántulas estuvo conformado por los tratamientos t1, t7 y t5, si bien es cierto que el. BL. tratamiento siete no es estadísticamente diferentes entre el grupo dos, pero si presenta. BI. diferencia significativa con respecto a los tratamientos del grupo uno.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. gl. CM. F. Modelo. 2.55. 8. 0.32. 5.29. Tratamientos. 2.55. 8. 0.32. 5.29. Error. 12.48. 207. 0.06. Total. 15.04. 215. P-valor. <0.0001 <0.0001. BI O. LO. G. SC. EN CI. AS. F. V. IC AS. Tabla 2 Análisis de varianza para longitud de las plántulas provenientes de la yema apical de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019.. Tratamientos. DE. CI. Tabla 3 Test de Tukey de la longitud de las plántulas provenientes de la yema apical de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019. Medias. n. E. E. Grupo 1. 0.26. 24. 0.05. A. 0.26. 24. 0.05. A. 0.27. 24. 0.05. A. 0.30. 24. 0.05. A. 0.36. 24. 0.05. A. B. T2. 0.41. 24. 0.05. A. B. T5. 0.47. 24. 0.05. A. B. T1. 0.53. 24. 0.05. B. T4. 0.55. 24. 0.05. B. CA. T8. T9. IO. T6. TE. T3. BI. BL. T7. Grupo 2. Error: 0.0603 gl: 207. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. b. b. a,b. 0.5 a,b 0.4. a, b. 0.3. a. a. a. T8. T3. T9. a. IC AS. Medias de la longitud de las plantulas proveniente de la yema apical. 0.6. 0.2 0.1. T7. T2. Tratamientos. T5. T1. T4. LO. T6. G. 0. BI O. Figura 3. Grafica de barras para el test de Tukey de la variable longitud de la plántula proveniente de la yema apical de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la. AS. combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0,00; 0.25 y 0.50 ppm del y del. EN CI. medio basal de Murashige y Skoog, 1962 al 1, al ½ y al 1/3 realizado en el laboratorio de. CI. Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019. (Fuente; Elaboración Propia).. SC. gl. CM. F. P-valor. Modelo. 209.42. 8. 26.18. 24.24. <0.0001. Tratamientos. 209.42. 8. 26.18. 24.24. <0.0001. Error. 223.54. 207. 1.08. 432.96. 215. BI. BL. IO. TE. F. V. CA. DE. Tabla 4 Análisis de varianza del número de raíces de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019.. Total. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 5 Test de Tukey del número de raíces de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019. n. E. E. Grupo 1. 2. 0.00. 24. 0.21. A. T2. 0.00. 24. 0.21. A. T9. 0.00. 24. 0.21. A. T6. 0.00. 24. 0.21. T5. 0.00. 24. 0.21. T8. 0.00. 24. T1. 1.13. T4. 2.29. T7. 2.46. Grupo 3. AS. BI O. LO. T3. EN CI. 0.21. A A A. 0.21. 24. 0.21. C. 24. 0.21. C. B. DE. CI. 24. BI. BL. IO. TE. CA. Error: 1.0799 gl: 207. Grupo. IC AS. Medias. G. Tratamientos. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 3 c c. 2. IC AS. 1.5 b 1. G. Media del número de raíces. 2.5. a. a. a. a. a. a. T3. T2. T9. T6. T5. T8. T1. BI O. 0. LO. 0.5. T4. T7. AS. Tratamientos. Figura 4. Grafica de barras para el test de Tukey de la variable número de raíces de las plántulas de. EN CI. Prosopis pallida H.B.K. “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones, del 6-Bencialaminopurina Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y medio Basal de Murashige y Skoog, 1962 al 1, ½ t al 1/3 realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de. DE. CI. la papa y cultivos andinos – UNT, 2019. (Fuente; Elaboración Propia).. F. V. gl. CM. F. P-valor. 0.47. 8. 0.06. 14.33. <0.0001. Tratamientos. 0.47. 8. 0.06. 14.33. <0.0001. Error. 0.84. 207. 0.00041. Total. 1.31. 215. BL. SC. BI. IO. TE. CA. Tabla 6 Análisis de varianza de la longitud de la raíz mayor de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019.. Modelo. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 7 Test de Tukey de la longitud de la raíz mayor de las plántulas de Prosopis pallida H.B.K “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019. n. E. E. Grupo 1. T5. 0.00. 24. 0.01. A. T6. 0.00. 24. 0.01. A. T8. 0.00. 24. 0.01. A. T2. 0.00. 24. 0.01. T3. 0.00. 24. 0.01. T9. 0.00. 24. 0.01. T1. 0.07. 24. 0.01. B. T7. 0.10. 24. 0.01. B. T4. 0.12. G. LO. BI O. A. AS. A. 24. 0.01. B. CI. 0.14. b. DE. 0.12 0.1. b b. CA. 0.08 0.06. TE. 0.04 0.02. A. a. a. a. a. a. a. IO. Media de la longitud de la raíces. Error: 0.0041 gl: 207. T6. T8. T2. T3. T9. 0. Grupo 2. IC AS. Medias. EN CI. Tratamientos. BL. T5. T1. T7. T4. Tratamientos. BI. Figura 5. Grafica de barras para el test de Tukey de la variable longitud de raíces de las plántulas de. Prosopis pallida H.B.K. “algarrobo” en el establecimiento in vitro de la combinación de las concentraciones del 6- Bencilaminopurina de 0.00; 0.25 y 0.50 ppm y del medio basal Murashige y Skoog, 1962 al 1, al 1/2 y al 1/3, realizado en el laboratorio de Biotecnología del Instituto de la papa y cultivos andinos – UNT, 2019 (Fuente; Elaboración Propia).. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IV. DISCUSIÓN. Se obtuvieron las plántulas de Prosopis pallida H.B.K, a partir de semillas escarificadas. IC AS. por el método mecánico como proceso pre-germinativo, el resultado fue 100 % de semillas germinadas (Anexo 4), este método mencionado no es considerado en los ensayos pre-. G. germinativos en las publicaciones científicas consultadas. Los métodos pre-germinativos. LO. usados para obtener el mayor porcentaje de germinación son dos: método químico y. BI O. método físico. El método químico con ácido sulfúrico al 72 % por diez minutos de exposición obtuvo 33.33 % de germinación en Prosopis pallida (Rivera, 2018), el ácido. AS. sulfúrico al 100 % por dos minutos de exposición dio un 52.5 % de germinación en. EN CI. Prosopis alba (Prokopiuk & chifa, 2000) y el ácido sulfúrico al 98 % por tres minutos fue de 95 % de germinación en Prosopis chilensis (Tapia y cols., 2012), (Arévalo y cols., 1998) citado por (Rivera, 2018) dijo “ mientras más aumentó el tiempo de inmersión para. CI. el ácido sulfúrico concentrado, menor era el porcentaje de germinación que obtenida,. DE. presentado los mejores resultados con un tiempo de 5 minutos” (p. 46); otro insumo usado en este método es la acetona al 100 %, con una exposición de diez minutos genero buenos. CA. resultados (70.25%) en Prosopis pallida ((Rivera, 2018) con un similar resultado con 12. TE. horas de exposición en Prosopis alba (Prokopiuk & chifa, 2000). El método físico con. IO. agua caliente a 80 º C, es recomendado por los autores (Prokopiuk & chifa, 2000) en. BL. Prosopis alba (100 º C por 24 h con 61 % germinación; 20 º C por 24 h con 28 %. BI. germinación) otros autores como (Sobrevilla, López-Herrera, López-Escamilla, y RomeroBautista, 2013) en Prosopis laevigata (20%, a 65°C por 8 minutos) y (Juárez, Rodríguez, y. Cepeda, 2001) con Prosopis laevigata (60 % a 80°C por 8 min). Con los métodos e insumos mencionados anteriormente, el método mecánico presenta una mayor ventaja costo/beneficio y ofrece mayor porcentaje de germinación con respecto a los insumos 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. utilizados en el método químico, como el ácido sulfúrico, este no es sugerido por muchos investigadores por cuestión de seguridad y principalmente por la dificultad de conseguirlo, con respecto al uso de la acetona ofreció resultados positivos pero el tiempo de exposición. IC AS. es demasiado alto y es un contaminante al aire y al agua después de su uso; el método mecánico es más practico que el método físico con agua caliente, mientras el tiempo que se emplea para calentar al agua y el transcurso de la aplicación de esta supera la labor de. LO. G. lijar las semillas, además (Prokopiuk & chifa, 2000) dijo “El proceso de germinación se. BI O. produce rápidamente una vez que el agua penetra en la semilla” (p. 2), y es justamente lo. AS. que se logra al producir abrasión en las semillas y sumergirlos al agua.. EN CI. El tipo de explantes utilizado en este trabajo estuvo basado en la experiencia del trabajo de (Rivera, 2018) para garantizar el mayor tiempo de las plántulas en el establecimiento in. CI. vitro con los tratamientos citados en material y métodos. En principio se diseñó emplear. DE. los explantes provenientes de plántulas germinadas in vitro. Sin embargo, al realizarlo, no se obtuvo el resultado adecuado para que sea usado como explante, por el rápido y gran. CA. alargamiento y un ligero curvamiento del hipocótilo y radícula durante la germinación. TE. epigea, es por ello que se optó por usar plántulas germinadas ex vitro. En el ensayo para. IO. obtener el explante en el trabajo de Rivera (2018), mostró que el explante no debería ser. BL. solo la yema apical, porque se necrosa rápidamente, seguido probó con la yema apical y. BI. sus cotiledones para que la yema pueda usar los cotiledones como reserva, pero aun así no mostro buenos resultados a corto plazo por presentar necrosis apical, no obstante siguió experimentando y con yema apical, los cotiledones y parte del hipocótilo (Anexo 8), pudo obtener resultados positivos; es por ello que integramos la experiencia a este trabajo. Sin embargo con el explante ya establecido Rivera (2018) no pudo mantenerlo demasiado. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..