Efecto de la concentración del aceite esencial de Cymbopogon citratus sobre el crecimiento de Microsporum canis y Trichophyton rubrum in vitro

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ESCUELA PROFESIONAL DE. BI O. LO. G. MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. IC AS. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. AS. Efecto de la concentración del aceite esencial de Cymbopogon. citratus sobre el crecimiento de Microsporum canis y Trichophyton. EN CI. rubrum in vitro.. CI. TESIS. DE. PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL. CA. DE BIÓLOGO - MICROBIÓLOGO. ASESORA: Dra. ICELA MARISSA RODRÍGUEZ HARO. TRUJILLO – PERU. BI. BL. IO. TE. AUTOR: Br. MARIA DE JESUS SALINAS ARANDA. 2019. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. Dr. ORLANDO MOISÉS GONZALES NIEVES. BI O. LO. G. Rector de la Universidad Nacional de Trujillo.. Dr. RUBÉN CÉSAR VERA VELIZ. EN CI. AS. Vice – rector Académico de la Universidad Nacional de Trujillo.. CI. Dr. WEYDER PORTOCARRERO CÁRDENAS. DE. Vice – rector de Investigación de la Universidad Nacional de. TE. CA. Trujillo.. Dr. STEBAN ILICH ZERPA. BI. BL. IO. Secretario General de la Universidad Nacional de Trujillo.. I Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. IC AS. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR: En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados y Títulos de la Universidad Nacional de Trujillo, presento a vuestra. G. consideración y claro discernimiento la tesis titulada: “Efecto de la. LO. concentración del aceite esencial de Cymbopogon citratus sobre el. BI O. crecimiento de Microsporum canis y Trichophyton rubrum in vitro”.. Esperando que vuestro criterio sea de comprensión por errores u omisiones. AS. cometidos en la elaboración del informe de tesis, nos sometemos a vuestro. Trujillo, mayo del 2019.. Br. MARÍA DE JESÚS SALINAS ARANDA. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. dictamen.. II Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CERTIFICACIÓN DEL ASESOR La que suscribe Dra. Icela Marissa Rodríguez Haro, asesora de la tesis. IC AS. titulada:. “Efecto del crecimiento del aceite esencial de Cymbopogon citratus sobre el. G. crecimiento de Microsporum canis y Trichophyton rubrum in vitro”. LO. CERTIFICA. BI O. Que la investigación ha sido desarrollada de conformidad con su correspondiente proyecto y las orientaciones pertinentes.. AS. En cuanto al informe ha sido redactado bajo mi asesoramiento, acogiendo las observaciones y sugerencias alcanzadas, por lo que autorizo al bachiller:. EN CI. María de Jesús Salinas Aranda continúe con los procedimientos según los. Dra. Icela Marissa Rodríguez Haro ASESORA. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. fines.. III Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. MIEMBROS DEL JURADO. G. Dra: Icela Marissa Rodríguez Haro. EN CI. AS. BI O. LO. PRESIDENTE. Dra: Manuela Natividad Luján Velásquez. Ms.C. Eduardo José Muñoz Ganoza VOCAL. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. SECRETARIA. IV Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que. IC AS. la presente tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales,. BI O. LO. G. siendo aprobada por UNANIMIDAD.. Dra: Icela Marissa Rodríguez Haro. DE. CI. EN CI. AS. PRESIDENTE. SECRETARIA. BI. BL. IO. TE. CA. Dra: Manuela Natividad Luján Velásquez. Ms.C. Eduardo José Muñoz Ganoza VOCAL. V Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. AGRADECIMIENTOS. A la Dra: Icela Marissa Rodríguez Haro por su dedicada labor en la. G. motivación, y guía en la investigación, sobre todo por la confianza brindada,. BI O. LO. apoyo y asesoramiento en el desarrollo del presente trabajo de tesis.. Al Dr. Marco Leoncio Salazar Castillo por su apoyo moral, enseñanza y por. EN CI. AS. los consejos brindados durante el proceso de investigación.. A Dios por permitirme culminar el presente trabajo de tesis al mantenerme. CI. con bienestar, salud, así como también por colocarme en el lugar adecuado y. BI. BL. IO. TE. CA. DE. con las personas correctas que me permitieron culminar esta investigación.. VI Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. DEDICATORIA. A mis abuelos Claudina Reyes Rodríguez y Agustín Conversión Salinas Reyes por su tiempo dedicado, amor incondicional y por ser mi fuerza y razón para lograr. LO. G. mis objetivos.. BI O. A mi madre Agustina Aranda García por ser quien me enseñó a nunca rendirme, por siempre confiar en mí, por toda la motivación brindada, y a mi padre Nolberto. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. Salinas Reyes por su ayuda para seguir avanzando en mis metas trazadas.. VII Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN Se evaluó el efecto de la concentración del aceite esencial de Cymbopogon citratus. IC AS. sobre el crecimiento de Microsporum canis y Trichophyton rubrum in vitro. Para lo cual, se preparó Agar Sabouraud conteniendo concentraciones de dicho aceite. G. esencial de 0.1, 0.5, 1, 1.5 y 2 µL/mL, respectivamente y además del control (0. LO. µL/mL). Sobre dicho medio se sembró por puntura central un fragmento de micelio. BI O. de dichos hongos en estudio, provenientes de un cultivo monospórico, se incubó a 25 °C hasta 14 días. Se realizó tres repeticiones por triplicado por cada. AS. concentración incluyendo el control. La lectura del crecimiento micelial se realizó. EN CI. midiendo el diámetro de la colonia en milímetros a partir del séptimo día de siembra hasta el décimo cuarto día, se encontró que el aceite esencial de hierbaluisa a las concentraciones de 0.1, 0.5, 1, 1.5 y 2 µL/mL inhiben completamente el crecimiento. CI. de los hongos en estudio. Concluyéndose que el aceite esencial es un fuerte. CA. DE. inhibidor del crecimiento de M. canis y T. rubrum.. BI. BL. IO. rubrum.. TE. Palabras clave: Aceite esencial, hierbaluisa, Microsporum canis, Trichophyton. VIII Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT This thesis work had as purpose to evaluate the effect of essential oil of. IC AS. Cymbopogon citratus. “lemongrass” on the growth of Microsporum canis and Trichophyton rubrum in vitro. For which, I prepared Sabouraud Agar containing. G. concentrations of the said essential oil, 0.1, 0.5, 1, 1.5, and 2 µL/mL, respectively,. LO. and in addition to the control (0 µL/mL). On this medium was inoculated by puncture. BI O. central a fragment of mycelium of these fungi in the study, coming from a culture monosporic, was incubated at 25 °C up to 14 days. We performed three replicates. AS. in triplicate for each concentration including the control. The reading of mycelial. EN CI. growth was performed in millimeters the diameter from the seventh day of sowing until the fourteenth day, it was found that the essential oil of lemongrass from the concentration including the control.. CI. The mycelial growth was measured by measuring the diameter of the colony in. DE. millimeters from the seventh day of sowing until the fourteenth day, it was found that. CA. the essential oil of lemon grass at the concentrations of 0.1, 0.5, 1, 1.5 and 2 μL / mL completely inhibit the growth of the fungi under study. Concluding that the. BL. IO. TE. essential oil is a strong growth inhibitor of M. canis and T. rubrum.. BI. Keywords: Essential Oil, lemongrass, Microsporum canis, Trichophyton rubrum.. IX Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO……………………………………………………….. I. IC AS. PRESENTACIÓN……………………………………………………………………………………………………………………..…….. II CERTIFICACIÓN DEL ASESOR………………………………………………………………………………………………..………. III. MIEMBROS DEL JURADO…………………………………………………………………………………………………..…………. IV. G. APROBACIÓN…………………………………………………………………………………………………………………..………….. V. LO. AGRADECIMIENTOS………………………………………………………………………………………………………………..….. VI. BI O. DEDICATORIA………………………………………………………………………………………………………………..……………. VII RESUMEN………………………………………………………………………………………………………………………………….. VIII ABSTRACT …………………………………………………………………………………………………………………………….…... IX. AS. INTRODUCCIÓN……………………………………………………………………………………………………………………...…....1. EN CI. MATERIAL Y MÉTODOS………………………………………………………………………………………………..…………..... 10. TE. CA. DE. CI. 1. Material de estudio………………………………………………………………………………………..…………..…. 10 1.1. Ubicación del área de estudio……………………………………………………………………………....... 10 1.2. Ubicación del sitio de muestreo……………………………………………………………………….…..…. 10 1.3. Muestreo…………………………………………………………………………………………………………..….…. 10 1.4. Obtención de plantas de Cymbopogon citratus………………………………………………….....… 11 1.5. Identificación de plantas de Cymbopogon citratus……………………………………………..….… 11 2. Procedimiento……………………………………………………………………………………………………………......12 2.1. Obtención del aceite esencial de Cymbopogon citratus………………………………………....…12 2.2. Obtención de cultivos monospóricos de Microsporum canis y Trichophyton rubrum...13 2.3. Evaluación del efecto del aceite esencial de Cymbopogon citratus sobre el crecimiento de Microsporum canis y Trichophyton rubrum…………………………………………………………..13 2.4. Análisis de datos………………………………………………………………………………………………………..16. IO. RESULTADOS………………………………………………………………………………………………………………………………..17. BL. DISCUSIÓN……………………………………………………………………………………………………………………………………22 CONCLUSIONES…………………………………………………………………………………………………………………………….28. BI. RECOMENDACIONES…………………………………………………………………………………………………………………….29 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS……………………………………………………………………………………………………..30 ANEXOS………………………………………………………………………………………………………………………………………..38. X Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN En el Perú existen abundantes recursos naturales, el estudio de la flora. IC AS. y la comprobación de sus propiedades terapéuticas resulta importante desde el punto de vista científico y cultural. La utilización de plantas. G. medicinales tradicionalmente se ha ido perfeccionando a lo largo de. LO. tiempo, tamizando hoy por el rigor científico de ensayos químicos,. BI O. farmacológicos, toxicológicos y clínicos.(Nazzaro, Fratianni, Coppola, y De Feo, 2017).. AS. Cymbopogon citratus, es reconocida como una de las plantas. EN CI. medicinales más usadas en América Latina, por sus múltiples usos terapéuticos y su agradable aroma a limón (Carbajal, 1991; Miranda,. CI. 1995; Cápiro et al., 2001). DE. Cymbopogon citratus, “hierbaluisa”, es una planta que pertenece a la familia de las gramíneas y se cultiva en casi todos los países tropicales. CA. y subtropicales. Sus hojas miden de 20 a 100 cm de largo y uno a 1.5. TE. cm de ancho, tiene los bordes duros y el nervio central fuerte en la. IO. sección basal. Las inflorescencias son largas, hasta de 60 cm, están. BL. reunidas en panículas de espiguillas. Crece desde los 1400 msnm, se adapta a una variedad de suelos con abundante lluvia y luz solar. Su. BI. mejor desarrollo se da en suelos franco arenosos y bien drenados (Fonnegra y Jiménez, 2007). Se utiliza para la elaboración de bebida. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. aromática y se emplea en la medicina tradicional en diversas partes del mundo (Vázquez-briones y Guerrero-beltrán, 2017).. IC AS. Los aceites esenciales son productos oleosos y volátiles de los. metabolitos secundarios producido por varias plantas medicinales, son. G. líquidos aceitosos aromáticos obtenidos a partir de material vegetal. LO. (flores, brotes, semillas, hojas, ramas, cortezas, hierbas, madera, frutos. BI O. y raíces). Se pueden obtener por fermentación o extracción, pero el método de destilación con vapor es el más comúnmente utilizado para. AS. su producción comercial (Kayode y Afolayan, 2015). A pesar de haber sido reconocido desde hace tiempo por su actividad antibacteriana,. EN CI. antifúngica, antiviral, insecticida y propiedades antioxidantes, es reciente el interés en las sustancias naturales que se obtiene ha dado lugar a una. CI. nueva conciencia científica de estas sustancias. (Vázquez-briones y. DE. Guerrero-beltrán, 2017).. CA. La composición cualitativa y cuantitativa de los aceites esenciales varía significativamente entre las distintas especies de plantas incluso dentro. TE. de la misma especie, debido a diferentes razones tales como: clima, la. IO. estación, la ubicación geográfica, la geología, la parte de la planta, ciclo. BL. vegetativo y el método utilizado para obtener el aceite esencial (Basholli,. BI. et al., 2017) Los compuestos activos de los aceites esenciales han sido divididos en cuatro grupos de acuerdo a su estructura química; el primer grupo son. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. los terpenos (los principales son los monoterpenos y sesquiterpenos); el segundo grupo son los terpenoides ( son terpenos oxigenados y se. IC AS. subdividen en alcoholes, aldehídos, cetonas, éteres, ésteres, epóxidos y fenoles) ; el tercer grupo es fenilpropenos y en el cuarto grupo están los. G. componentes en cantidades traza (Kayode y Afolayan, 2015).. LO. Los dermatofitos son hongos queratinolíticos y se puede presentar tanto. BI O. en hombres como en animales, según el grado de profundidad anatómica que afecte el hongo, se les clasifica en superficiales y. AS. cutáneas. Las micosis superficiales son aquellas en las que hay afección de la capa córnea de la piel y la porción suprafolicular del pelo. Las. EN CI. micosis cutáneas afectan capas más profundas de la piel y sus anexos como pelos y uñas; se dividen en dermatofitosis (dermatofitos de los. CI. géneros Microsporum, Epidermophyton y Trichophyton) y candidiasis. DE. cutánea (levaduras del género Cándida). Ocasionalmente se puede encontrar hongos ambientales en estas lesiones. La aparición de estas. CA. micosis y la frecuencia de sus agentes etiológicos depende de factores. TE. tales como áreas geográficas, sexo, edad, clima, localización de la lesión. IO. y otros (Bejar, Villanueva, Guevara y González., 2014).. BL. Las dermatofitosis se encuentran entre las infecciones de mayor. BI. prevalencia en todo el mundo con predominio en las zonas tropicales de climas cálidos y húmedos (Gräser, Scott, y Summerbell, 2008). La OMS ha calculado una frecuencia global de micosis superficial de 20 a 25% de la población y 5 a 10% causados por dermatofitos. El hombre puede. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. afectarse de los animales infectados resaltando entre ellos los domésticos como perros y gatos (Sánchez., Matos y Kumakawa,. antropofílicos,. rubrum. cosmopolitas,. y. Microsporum que. poseen. canis ciertos. son. hongos. IC AS. 2009).Trichophyton. factores. de. patogenicidad como las proteasas que podrían encontrarse tanto in vitro. 1995). LO. G. como durante el proceso de infección (Weitzman, Corporis, y Favosa, y tiene la propiedad de desarrollar resistencia a antifúngicos. BI O. (Mukherjee et al., 2003).. AS. El diagnóstico de una dermatofitosis por Microsporum canis se realiza por cultivo, que permite observar las características culturales. EN CI. macroscópicas tales como la forma y color del micelio y microscópicas como la presencia de macroconidos de 6 a 15 células, pared gruesa,. CI. rugosa, ornamentada, con extremos más delgados, además se pueden. DE. observar microconidas. Colonia de reverso amarillo o naranja, algodonosa, abundante crecimiento en medio de arroz. Trichophyton. CA. rubrum presenta macroconidios que no son frecuentes y si están. TE. presentes, son de pared delgada con 3 a 8 células. Presenta escasos. IO. microconidios ovoides, piriformes a lado y lado de la hifa. Son ureasa. BL. negativa hasta 7 días después de sembrada. Por otro lado, existen pruebas rápidas, basadas en la observación directa de pelos, escamas. BI. o raspado de uñas donde se puede observar las artrosporas o hifas sobre el material infectado. Asimismo, la biopsia de piel es un método no necesario, aunque es. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. efectivo (Sandoval et al., 2012;Jul et al., 2012). Por otro lado, el tratamiento para la dermatofitosis depende de la. IC AS. extensión de las lesiones; siendo tópico y se utilizan productos. antimicóticos en presentaciones de pomadas, soluciones o cremas. G. conteniendo ketoconazol, miconazol, clotrimazol o terbinafina y para las. LO. lesiones generalizadas se usan champús antimicóticos y tratamiento. BI O. sistémico (Sandoval et al., 2012). La elección de la droga en particular a usar para las infecciones sistémicas es la griseofulvina, sin embargo. AS. también se utiliza el ketoconazol e itraconazol, aunque estos suelen generar ciertos efectos adversos como vómitos, diarrea, y anorexia, y. EN CI. son hepatotóxicos (Plumb, 2009). Un inconveniente importante de los tratamientos con estas drogas es que suelen ser efectivos después de. CI. varios meses. Por ello, la presente investigación evaluará la posibilidad. DE. de usar el aceite esencial de hierbaluisa como una alternativa natural,. Aunque. CA. para el control de este tipo de infecciones. los dermatofitos tienen. generalmente. una. localización. TE. superficial, la relación entre el hongo y su hospedero continúa siendo. IO. poco entendida. A pesar de los múltiples estudios para tratar de dilucidar. BL. la función específica de las proteasas dermatofíticas, solo se han logrado. BI. avances muy puntuales en cuanto al mecanismo patogénico de dichos microrganismos. Dentro de los principales hallazgos se encuentran aquellos relacionados con la adhesión e invasión de los dermatofitos a la epidermis (Mendez-Tovar, 2010).. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. La adherencia de los microorganismos al tejido hospedero es un paso importante en el establecimiento de la mayoría de las infecciones y en. IC AS. las dermatofitosis es un prerrequisito. Se han desarrollado múltiples modelos experimentales para el estudio de la cinética de adherencia de los dermatofitos, estos experimentos se han llevado a cabo tanto in vitro. LO. G. como ex vivo (Zurita y Hay, 1987). Estos estudios han demostrado que. la adherencia de las esporas a los tejidos del hospedero es tiempo –. BI O. dependiente, lo que es seguido por la germinación y posterior invasión del estrato córneo en hifas en crecimiento y en múltiples direcciones. AS. (Baldo et al., 2012). Zurita y Hay, 1987 observaron: que la adherencia. EN CI. máxima de las artroconidias de Trichophyton sp a los queratinocitos humanos en suspensión ocurría entre las tres y cuatro horas.. CI. Baldo et al., 2008 realizaron un modelo de adherencia altamente. DE. eficiente de Microsporum canis, para ello utilizaron una reconstrucción de epidermis inter folicular felina. La adherencia bajo estas condiciones. CA. también fue tiempo – dependiente iniciando a las dos horas y con un. TE. incremento a las seis horas post inoculación.. IO. La adherencia del hongo a la célula hospedera es mediada a través de. BL. adhesinas fúngicas y su interacción con los receptores de las células. BI. hospederas. Es muy poco lo que se conoce aún sobre los factores que median la adherencia de los dermatofitos (Baldo et al., 2012). Trichophyton rubrum y T. mentagrophytes expresan en la superficie de. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. sus microconididas adhesinas específicas de carbohidratos que reconocen la manosa y la galactosa. (Esquenazi, Alviano, De Souza, &. IC AS. Rozental, 2004). Se cree que éstas pueden jugar un papel importante en el proceso de adhesión (Esquenazi, De Souza, Alviano, & Rozental,. G. 2003).. LO. En M. canis se ha demostrado también el papel de las proteasas, y las. BI O. principales implicadas son de la familia de las subtilisinas (Monod et al., 2002; Vermout et al., 2007). Aparte de las subtilisinas en M. canis se han. AS. estudiado otras proteasas, algunas de ellas son metaloproteasas (Meps) de la familia de las fungilisinas; sin embargo, al parecer estas. EN CI. endoproteasas parecen tener un papel más tardío en el proceso de infección, y no como parte esencial en el proceso de adhesión (Monod. CI. et al., 2002; Vermout, Baldo, Tabart, Losson, y Mignon, 2008).. DE. Una vez el dermatofito se encuentra adherido a las células hospederas,. CA. las hifas comienzan su crecimiento y se van anclando al hospedero al proyectarse de manera longitudinal y transversal por toda la superficie.. TE. Sin embargo, todo el proceso de invasión no se puede iniciar sin antes. IO. reducir los puentes de disulfuro que se encuentran en la red compacta. BL. de proteínas que componen los tejidos queratinizados.. BI. La degradación de proteínas por los dermatofitos a un pH neutral ocurre de manera similar en Aspergillus sp. Las subtilisinas y las fungalisinas digieren las proteínas en péptidos de cadena larga, los cuales. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. posteriormente son convertidos a aminoácidos y péptidos de cadena corta por la acción sinérgica de las leucina aminopeptidasas (Lap 2), y. IC AS. las dipeptidil peptidasas (DppIV) (Monod et al., 2002). Una vez degradadas las proteínas de la queratina, quedan como resultado. aminoácidos, dipéptidos y tripéptidos, los cuales son fuente nutricional. LO. G. para la supervivencia de los dermatofitos.. BI O. Para que se lleve a cabo todo el proceso patogénico se debe desencadenar un proceso de respuesta inmune cuando se ha. AS. establecido el proceso de adherencia e invasión del dermatofito en la piel (Uribe y Cardona, 2013). La cantidad de inóculo requerida para. EN CI. desencadenar una infección espontánea no ha sido establecida. Algunos estudios in vivo del siglo pasado, demostraron que la dosis infectante en. CI. piel glabra es de seis conidias. En personas afectadas con una. DE. inmunidad normal, una respuesta de hipersensibilidad se desarrolla en 30 días con recuperación espontánea aproximadamente a los 50 días. CA. (Blanco y Garcia, 2008).. TE. Algunos dermatofitos, como Trichophyton rubrum y Trichophyton. IO. tonsurans, son altamente adaptables a los humanos y pueden evadir o. BL. silenciar la respuesta inmune. T. rubrum contiene manan en su pared. BI. celular, el cual está implicado en un fenómeno inmunosupresor. El manan en una forma dosis dependiente es capaz de inhibir in vitro la respuesta linfoproliferativa de los monocitos, también inhibe el recambio del estrato córneo, bien sea directamente o a través de la alteración de. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. la función linfocitaria (Blake, Dahl, Herron, y Nelson, 1991) Las inmunoglobulinas también participan en la respuesta inmune. En las. IC AS. infecciones agudas se produce una respuesta inmune de tipo celular,. mientras que en las infecciones crónicas se detectan altos niveles de Ig. G. E e Ig G4; estas subclases de inmunoglobulina se aumentan en. LO. infecciones crónicas con pobre respuesta inmune (Giddey, Favre,. BI O. Quadroni, y Monod, 2007; Woodfolk, Sung, Benjamin, Lee, y Platts-Mills, 2000).. AS. Es necesario investigar sobre las concentraciones mínimas que inhiban. EN CI. el crecimiento de microorganismos, usando métodos sensibles y robustos que nos permitan reportar estos datos y valorar la capacidad. CI. antimicrobiana de los aceites esenciales. Estos aceites esenciales, son muy buenas alternativas como antimicrobianos ya que en la actualidad. DE. alrededor del mundo estamos buscando formas de cuidar y controlar. CA. nuestros cultivos de plagas y enfermedades, sin destruir más el medio ambiente, tratando de obtener tendencia hacia los productos naturales y. BI. BL. IO. TE. dejar a un lado los productos químicos que tanto daño causan.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.. IC AS. MATERIAL Y MÉTODO. Material de estudio Ubicación del área de estudio. G. 1.1. LO. La presente investigación se realizó en el Laboratorio de Tecnología. BI O. Enzimática y Productos Naturales, Departamento de Química Biológica y Fisiología Animal de la Universidad Nacional de Trujillo, Trujillo – Perú. Ubicación del sitio de muestreo. AS. 1.2. EN CI. El material biológico para este proyecto fueron las hojas de Cymbopogon citratus “hierbaluisa”, fueron recolectadas en el Centro poblado de Oscol. CI. que se localiza a 7°54’10” latitud Sur y a latitud Oeste 78°34’20” Oeste,. DE. Distrito de Sinsicap, Provincia de Otuzco, Departamento de La Libertad. CA. a 2 200 m.s.n.m. 1.3. Muestreo. TE. La recolección de las muestras de las hojas de Cymbopogon citratus.. IO. “hierbaluisa” fueron procedentes de cultivos agrícolas de Oscol en. BI. BL. octubre de 2018 y se tomaron las muestras al azar.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.4. Obtención de las plantas de Cymbopogon citratus. Las plantas de Cymbopogon citratus fueron recolectadas en el mes de. IC AS. octubre del 2018 del cultivo agrícola de Oscol, Distrito de Sinsicap, Provincia de Otuzco, Departamento de La Libertad-Perú.. en. mayor. proporción. y. calidad. el. principio. LO. acumula. G. Se seleccionó la parte aérea (hojas) de C. citratus que es donde se activo.. BI O. Posteriormente, se empaqueto en bolsas de papel y se transportó a temperatura de 25 °C al Laboratorio de Tecnología Enzimática y. AS. Productos Naturales, Departamento de Química Biológica y Fisiología. EN CI. Animal de la Universidad Nacional de Trujillo.. Identificación de las plantas de Cymbopogon citratus.. CI. 1.5. DE. Una muestra de la planta de Cymbopogon citratus “hierbaluisa”, se llevó. CA. al Herbarium Truxillense (HUT) de la Universidad Nacional de Trujillo para su identificación y posterior clasificación taxonómica según el. TE. sistema filogenético de la especie. Constancia N°012-2019-HUT. BI. BL. IO. (ANEXO1).. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2. Procedimiento. IC AS. 2.1 Obtención del aceite esencial de Cymbopogon citratus. La obtención del aceite esencial de Cymbopogon citratus se realizó en el laboratorio. de. Farmacognosia,. Departamento. Académico. de. LO. G. Farmacotécnia – Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, mediante el Método por Destilación por arrastre con. BI O. vapor de agua. Se seleccionaron las hojas de hierbaluisa, descartando las deterioradas sin presencia de magulladuras, cortes o demás lesiones. EN CI. AS. y eliminando las materias extrañas orgánicas e inorgánicas.. Se trabajó con 20 kg de hojas frescas de C. citratus, se colocó en la. CI. cámara del equipo de extracción de aceites esenciales, en el generador. DE. de vapores se colocó el agua y se conectó a la energía eléctrica que calentó hasta ebullición por 15 - 20 min, de ésta manera el vapor de agua. CA. generado atravesó por la cámara extractora arrastrando el aceite. TE. esencial. Al pasar por el refrigerante condensó los vapores obteniéndose el hidrolato. (Rodriguez, 2015).. IO. Este hidrolato obtenido se vierte a un embudo de separación donde el. BI. BL. aceite se posicionó en la fase superior, se le agregó cristales de cloruro de sodio y se procedió a separar. Finalmente, la cantidad obtenida del aceite esencial de hierbaluisa se colocó en un frasco de color ámbar con previa rotulación y se conservó en refrigeración a 4°C hasta el momento de su uso. (Rodriguez, 2015).. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.2 Obtención de cultivos monospóricos de Microsporum canis y. IC AS. Trichophyton rubrum.. Los cultivos de Microsporum canis y Trichophyton rubrum fueron. G. proporcionados por el Laboratorio del Instituto de Medicina Tropical de la. LO. Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo. Estos fueron. BI O. sembrados en tubos de ensayo de 16 x 180 mm conteniendo Agar Sabouraud (Das et al., 2011) y fueron incubados a temperatura de 25 °C. AS. ± 2, durante 7 a 14 días; posteriormente, en una solución estéril de Tween. EN CI. 80 al 0.1 % se preparó una suspensión de esporas, a partir de los tubos con el hongo en desarrollo, luego se agitó suavemente para separar las esporas (Cañedo y Ames, 2004).. CI. A continuación, se sembró por estría 200 µL de dicha suspensión de. DE. esporas en Agar Sabouraud y se incubó a 25 °C ± 2 hasta 14 días. Se. CA. tomó un fragmento de dicha colonia en crecimiento y se transfirió a un medio de Agar Sabouraud y se incubó en las mismas condiciones. TE. anteriormente mencionadas.. IO. 2.3 Evaluación del efecto del aceite esencial de Cymbopogon citratus. BI. BL. sobre el crecimiento de Microsporum canis y Trichophyton rubrum. 2.3.1.. Evaluación del efecto del aceite esencial de Cymbopogon. citratus sobre el crecimiento de Microsporum canis.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.3.1.1.. Preparación del medio de cultivo con diferentes concentraciones del aceite esencial. IC AS. Se preparó matraces de aceite esencial de hierbaluisa en Tween 80 al 0,1% , luego se preparó Agar Sabouraud y el medio de cultivo se esterilizó a 121°C y en caliente aproximadamente 50. LO. G. °C, se incorporó el aceite esencial para obtener concentraciones 0.1, 0.5, 1, 1.5 y 2µL de AE/mL de medio, respectivamente.. BI O. Se utilizó un testigo, por ello no se le adicionó el aceite esencial de hierbaluisa. Luego, el medio de cultivo se sirvió en placa de. Siembra e incubación de cultivos monospóricos.. CI. 2.3.1.2.. EN CI. placa control).. AS. Petri estériles (tres placas por cada concentración, incluyendo la. DE. A partir del cultivo puro de Microsporum canis se sembró por puntura en la parte central de las placas de Petri conteniendo. CA. Agar Sabouraud con las diferentes concentraciones del aceite. TE. esencial de hierbaluisa previamente preparadas en el paso. 7 días.. BI. BL. IO. anterior, las cuales fueron incubadas a temperatura de 25 °C por. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.3.1.3.. Lectura. A partir del séptimo día posterior a la siembra, hasta el décimo. IC AS. cuarto día de la siembra, cada 24 horas, se midió el diámetro de crecimiento radial (mm) del dermatofito en diferentes direcciones para obtener un diámetro promedio final de crecimiento por día. LO. G. por cada concentración del aceite esencial y del grupo control. Los resultados de crecimiento de Microsporum canis se. BI O. expresaron en milímetros y en porcentaje de crecimiento (%C), teniendo en cuenta el crecimiento alcanzado por el grupo control. 𝐷𝑖á𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑝𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎 𝑝𝑟𝑜𝑏𝑙𝑒𝑚𝑎 𝑥100 𝐷𝑖á𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑝𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎 𝑡𝑒𝑠𝑡𝑖𝑔𝑜. CA. DE. CI. 𝐶=. EN CI. AS. (100%), de la siguiente manera:. 2.3.2.. Evaluación del efecto del aceite esencial de Cymbopogon. TE. citratus sobre el crecimiento de Trichophyton rubrum.. aceite esencial sobre. el crecimiento de. Microsporum canis. mencionadas en el punto 2.3.1. incluyendo el control.. BI. BL. IO. Se procedió de la misma manera que en la evaluación del efecto del. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.4 Análisis de datos. La determinación de las concentraciones del efecto del aceite esencial. IC AS. de Cymbopogon citratus sobre el crecimiento de Microsporum canis y Trichophyton rubrum in vitro, se realizó analizando el porcentaje de. G. crecimiento de Microsporum canis y Trichophyton rubrum, en las. LO. diferentes concentraciones del aceite esencial, y no se procesó los datos. BI O. en base a la prueba de Análisis de Varianza Unidireccional (ANOVA) ya que hubo una inhibición completa en todas las concentraciones. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. evaluadas(Morales, 2011).. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS Se evaluó el efecto de la concentración del aceite esencial de Cymbopogon. IC AS. citratus sobre el crecimiento de Microsporum canis y Trichophyton rubrum in. G. vitro después de 14 días de incubación.. LO. En la figura 1: Se presenta el porcentaje de crecimiento radial de Microsporum. AS. de evaluación, en condiciones de laboratorio.. BI O. canis en las concentraciones de 0, 0.1, 0.5, 1.0, 1.5 y 2.0 µL/mL a los 14 días. EN CI. En la figura 2 Se presenta el crecimiento radial de Microsporum canis en la concentración de 0 µL/mL y en las concentraciones 0.1, 0.5, 1.0, 1.5 y 2.0 µL/mL. CI. no se observa crecimiento a los 14 días de evaluación.. DE. En la figura 3 Se presenta el porcentaje de crecimiento radial de Trichophyton rubrum en las concentraciones de 0, 0.1, 0.5, 1.0, 1.5 y 2.0 µL/mL a los 14 días. TE. CA. de evaluación.. IO. En la figura 4 Se presenta el crecimiento radial de Trichophyton rubrum en la. BL. concentración de 0 µL/mL y en las concentraciones 0.1, 0.5, 1.0, 1.5 y 2.0 µL/mL. BI. no se observa crecimiento a los 14 días de evaluación.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) IC AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G LO. 100. BI O. 80. AS. 60. EN CI. 40. 20. CI. Porcentaje de crecimiento radial de M.canis. 120. 0 0. 0.1. 0.5. 1. 1.5. 2. TE. CA. DE. Concentraciones del aceite esencial de C. citratus (DC) Stapf.. En la figura 1 Porcentaje de crecimiento radial de Microsporum canis en las. BI. BL. IO. concentraciones de 0, 0.1, 0.5, 1.0, 1.5 y 2.0 µL/mL a los 14 días de evaluación.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 0.1 µL/ mL. 0 µL/mL – envés. IC AS. 0 µL/mL - haz. BI O. 1.0 µL/ mL. 1.5 µL/ mL. CA. DE. CI. EN CI. AS. 0.5 µL/ mL. LO. G. control. IO. TE. 2 µL/ mL. BL. En la figura 2 Crecimiento radial de Microsporum canis en concentraciones de 0, 0.1,. BI. 0.5, 1.0, 1.5 y 2.0 µL/mL a los 14 días de evaluación.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) IC AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G BI O. LO. 100. AS. 80. EN CI. 60. 40. CI. 20. 0 0. DE. Porcentaje de Crecimiento radial de M.canis. 120. 0.1. 0.5. 1. 1.5. 2. TE. CA. Concentraciones del aceite esencial de C. citratus (DC) Stapf.. IO. En la figura 3 Porcentaje de crecimiento radial de Trichophyton rubrum en las. BI. BL. concentraciones de 0, 0.1, 0.5, 1.0, 1.5 y 2.0 µL/mL a los 14 días de evaluación.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 0 µL/mL – envés. 0.1 µL/ mL. LO. G. IC AS. 0 µL/mL - haz. 1.0 µL/ mL. 1.5 µL/ mL. CA. DE. CI. EN CI. AS. 0.5 µL/ mL. BI O. control. BL. IO. TE. 2.0 µL/ mL. 0,. BI. En la figura 4 Crecimiento radial de Trichophyton rubrum en concentraciones de 0.1, 0.5, 1.0, 1.5 y 2.0 µL/mL a los 14 días de evaluación.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN En relación a los datos obtenidos en el crecimiento de Microsporum canis y. IC AS. Trichophyton rubrum en la tabla 1, respectivamente. Se observa que, hasta los 14 días de evaluación, el crecimiento de estos dermatofitos fue inhibido en las. G. concentraciones trabajadas de 0.1, 0.5, 1.0, 1.5 y 2.0 µL/mL del aceite esencial lo cual se puede deber a sus propiedades. LO. de Cymbopogon citratus. BI O. antifúngicas y al componente mayoritario, el citral , alcanzando valores entre 65 y el 85%.(Wilson et.al, 2002) y sus isómeros, geranial (trans-citral, llamado. AS. citral A) y neral (cis-citral, llamado citral B)(García et al.,2008), componentes. EN CI. mencionados anteriormente son derivados primarios de monoterpenos. (Ralambindrainy et al., 2018).. CI. 7Restrepo et al., 2009 hacen mención que la hierbaluisa es una planta antimicrobianas (Kieling y. DE. aromática con propiedades antioxidantes,. Prudencio, 2018) y antifúngicas (García et al,2008). utilizada para la. CA. preparación de té medicinal, en la industria cosmética, farmacéutica y. TE. para la producción de aceites esenciales siendo ésta una mezclas de compuestos orgánicos volátiles los cuales producen el aroma de muchas. IO. de las sustancias vegetales y contiene los siguientes compuestos: citral. BL. (65-70%), acetato de geranilo (3.0%), geraniol (1.8%), metil heptanona (2.6%). BI. y mirceno (12.7%) así como también citronelal, neral y algunas trazas de livalol y dipenteno. Estudios han demostrado que los extractos de hojas de hierbaluisa contienen compuestos fenólicos asociados con beneficios para la salud.. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Según otros estudios realizados estos componentes de este aceite esencial varía ampliamente por sus efectos medioambientales, entre estos se. IC AS. encuentran a los factores genéticos, el origen geográfico, el estado nutricional, los materiales vegetales extraídos (tallo, hoja y flor), los métodos de. G. extracción, entre otros (Bejar, Villanueva, Guevara y González., 2014).. LO. La mayor parte de la actividad antimicrobiana se encuentra en los terpenoides. BI O. como en los aceites esenciales que tienen aldehídos o fenoles como componentes principales a cinalamdehído, carvacrol, eugenol, timol y citral. AS. (según diversos estudios se encontró que es éste el principal componente activo de C.citratus,) son los más eficaces, seguido de los aceites esenciales. EN CI. que contienen alcoholes de terpenoides. Los aceites esenciales con cetonas o ésteres (B-mirceno, α-tuyona, o acetato de geranilo) poseen una actividad. CI. inferior. Aunque los componentes esenciales son muy importantes por su. DE. actividad biológica, los componentes en cantidades trazas desempeñan un papel importante, ya que pueden potenciar los efectos de los componentes. CA. principales (Perricone, Arace, Corbo, Sinigaglia, y Bevilacqua, 2015). TE. Teniendo en cuenta la gran cantidad de componentes presentes en el aceite. IO. esencial de hierbaluisa, es probable que su actividad antifúngica no tenga un. BL. mecanismo específico. Por ello, el efecto inhibidor de este aceite esencial. BI. generalmente es atribuido al componente o mezcla de componentes que lo conforman (Burt, 2004). Además, estos componentes presentan carácter lipofílico e hidrofóbico que son importantes debido a la polaridad que estos poseen. (Goodman, Gilman, 1985). 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Otros estudios realizados nos muestran que fueron evaluados dieciséis aceites. IC AS. dentro de los cuales estaba el aceite esencial de Cymbopogon citratus , para evaluar el efecto fungitoxico de Trichophyton rubrum y Trichophyton gypseum,. G. los cuales dieron como resultado una fuerte actividad. Los mecanismos. LO. probables de actividad antifúngica tenemos a la inhibición de la formación de. interrumpirá la integridad de la pared celular.. BI O. la pared celular fúngica, el cuál al inhibirse la síntesis de los β-glucanos, se. AS. También está la disfunción de las mitocondrias fúngicas que al inhibirse el. EN CI. transporte de electrones mitocondriales se reducirá el potencial de la membrana mitocondrial, lo cual lleva a una reducción en la producción de ATP. CI. y posteriormente a la muerte celular (Miele et al, 2001). Otro posible mecanismo esta la inhibición de la división celular que puede ocurrir a través. DE. de la inhibición de la polimerización de los microtúbulos, y por consecuencia,. CA. inhibe la formación del huso mitótico. Finalmente, tenemos a la inhibición de la síntesis de ARN /ADN o síntesis de proteínas, que al ingresar los. TE. componentes a la célula, a través de un transporte activo en ATPasas e. IO. interfiere con el ARN, esto puede provocar una síntesis defectuosa en el ARN. BL. e inhibir la transcripción del ADN (Freisesleben, Jager, 2014).. BI. También realizaron estudios donde evaluaron la actividad antifúngica de la hierbaluisa contra diez aislamientos clínicos de dermatofitos aislados en caso de tiña pedís, dando como resultado la inhibición de la germinación conidial;. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. también reportaron que el aceite esencial de hierbaluisa se caracteriza por presentar una alta cantidad de monoterpenos oxigenados en su composición.. IC AS. (Dias, et al; 2017).. G. Investigadores realizaron estudios del potencial antifúngico del citral y su. LO. mecanismo de acción del aceite esencial de C. citratus. en Magnaporthe. BI O. grisea, el cual se encontró que el citral no sólo inhibía el crecimiento hifal sino que también causaba una serie de alteraciones morfológicas y estructurales. AS. marcadas. Además el citral redujo la germinación de las esporas y la longitud. Yin, Liang, & Li, 2014). EN CI. del tubo germinal de una manera dependiente de la concentración. (Li, Wu,. CI. La actividad inhibitoria descrita de citral contra hongos es más probable debido a que citral es un miembro de la clase de aldehído α, β-insaturado en la que el. DE. grupo carbonilo es adyacente a los carbonos α y β. Debido a su ubicación en. CA. la molécula, los carbonos α y β están conjugados con el grupo carbonilo, lo que hace que el carbono α polarice positivamente y sea capaz de reaccionar con. TE. fácilmente. los. nucleófilos. y. sufrir. un. ataque. nucleófilo. IO. (Roger, Thomas, David, Charles, Randall, Pierce., 1994).. BL. Según Witz, la naturaleza química de los aldehídos α, β-insaturados, así como. BI. algunos de sus efectos toxicológicos, se basan en su capacidad para funcionar como agentes alquilantes directos. Estos agentes alquilantes son capaces de unirse covalentemente a grupos nucleófilos celulares, lo que significa que son. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. capaces de modificar procesos celulares y tienen toxicidad potencial, las células tratadas se volvieron anormales y mostraron desorganización celular. IC AS. tras la exposición a citral, lo que sugiere que citral rompe la pared celular, penetra en la membrana celular e interactúa con orgánulos celulares. Estos fenómenos. concuerdan. con. (Arlorio, Ludwig,. G. Bonfante,1994), quienes observaron la ruptura de las paredes. LO. Boller,. observados. celulares de los hongos al exponerse a citral. Es probable que estos. BI O. fenómenos se deban a la estructura de citral, ya que los efectos de los solutos en las paredes celulares podrían verse influenciados por compuestos que. AS. poseen un grupo hidrofílico y un grupo aceptor de electrones, como un grupo. EN CI. aldehído (Maoz, Neeman , 2000).. Otros estudios demostraron el efecto del citral en la actividad de la quitinasa. CI. de M.grise, por lo tanto el citral puede aumentar significativamente la actividad. DE. de la quitinasa y, por lo tanto, causar la degradación de las paredes celulares. Las quitinasas son enzimas digestivas que descomponen los enlaces. CA. glicosídicos en la quitina. En hongos, se ha demostrado que la quitinasa. TE. participa en la regulación de la degradación de las paredes celulares, la. IO. germinación de las esporas, el crecimiento de la punta, la ramificación de las. BL. hifas, el desprendimiento de las esporas y la autolisis de las hifas (Adams,. BI. 2004).. Estudios realizados en Minthostachy mollis “ muña”, que pertenecen a la. familia de las Lamineaceas, evaluaron la actividad antimicótica del aceite esencial de las hojas, para demostrar la actividad de los componentes. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. monoterpenicos de diversas estructuras químicas y una compleja composición química. Estas mezclas de componentes mostraron un amplio espectro. IC AS. fungicida y fungistático para dermatofitos como T. mentagrophytes, T. tonsurans y M. canis (Fuertes y Munguía, 2001).. G. Estudios realizados determinaron la inhibición del crecimiento micelial de. LO. dermatofitos y C.albicans gracias al citral, componente que se encuentra en. BI O. mayor cantidad en el aceite esencial de Cymbopogon citratus (Silva, Guterres,. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. Weisheimer, & Schapoval, 2008).. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIONES El aceite esencial de Cymbopogon citratus en concentraciones de 0.1, 0.5, 1.0,. IC AS. 1.5 y 2.0 µL/mL, respectivamente; inhibe completamente el crecimiento de. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. Microsporum canis y Trichophyton rubrum in vitro.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RECOMENDACIONES Se sugiere realizar investigaciones de este aceite esencial con la finalidad de. IC AS. encontrar la concentración adecuada para trabajar con Microsporum canis y. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. Trichophyton rubrum en pacientes que padecen enfermedades de la piel.. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS DJ. Quitinasas. y. glucanasas. de. pared. fúngica. Microbiology 2004 , 150 , 2029-2035.. celular. IC AS. Adams,. Arlorio, M .; Ludwig, A .; Boller, T .; Bonfante, P. Inhibición del crecimiento de las. quitinasas. de. y. β-1,3-. BI O. glucanasas. Protoplasma 1992 , 171 , 34–43.. plantas. G. por. LO. hongos. Baldo, A., Monod, M., Mathy, A., Cambier, L., Bagut, E. T., Defaweux,. AS. V.,Mignon, B. (2012). Mechanisms of skin adherence and invasion by. EN CI. dermatophytes. Mycoses, 55(3), 218–223.. Baldo, A., Tabart, J., Vermout, S., Mathy, A., Collard, A., Losson, B., &. CI. Mignon, B. (2008). Secreted subtilisins of Microsporum canis are involved in adherence of arthroconidia to feline corneocytes. Journal of Medical. DE. Microbiology, 57(9), 1152–1156.. CA. Basholli-Salihu, M., Schuster, R., Hajdari, A., Mulla, D., Viernstein, H.,. TE. Mustafa, B., & Mueller, M. (2017). Phytochemical composition, antiinflammatory activity and cytotoxic effects of essential oils from three. BL. IO. Pinus spp. Pharmaceutical Biology, 55(1), 1553–1560.. BI. Bejar, V., Villanueva, F., Guevara, J. M., González, S. (2014). artículos originales Epidemiología de las dermatomicosis en 30 años de estudio en el Instituto de Medicina Tropical Daniel A Carrión , Universidad Nacional Mayor de San Marcos , Lima , Perú, 75(2).. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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