Efecto de Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea, y Lecanicillium lecanii sobre Oiketicus kirbyi “bicho del canasto” en condiciones de laboratorio

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Ó. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. N. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. AC I. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. PARASITOLOGÍA. EM AS. DE. IN. FO. Efecto de Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea, y Lecanicillium lecanii sobre Oiketicus kirbyi “bicho del canasto” en condiciones de laboratorio. DE. SI. ST. TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO DE PROFESIONAL DE:. AUTOR: Br. AVILA YBAÑEZ ROXANA NOHELY. DI. RE. CC. IO. N. BIÓLOGO – MICROBIÓLOGO. TRUJILLO-PERÚ 2013 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Dr. Orlando Velásquez Benites. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. RECTOR. M UN. IC. AC I. Ó. N. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO QUE OTORGAN EL TÍTULO PROFESIONAL DE BIÓLOGO-MICROBIOLOGO. FO. Dra. Vilma Julia Méndez Gil. ST. EM AS. DE. IN. VICERRECTOR ACADÉMICO. SI. Dra. Flor Marlene Luna Victoria Mori. DI. RE. CC. IO. N. DE. VICERRECTOR ADMINISTRATIVO. Dr. Santiago Uceda Duclos SECRETARIO GENERAL. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS. M UN. IC. AC I. Ó. N. BIOLOGICAS. Dr. Hermes Mario Escalante Añorga. IC. A. Y. CO. DECANO. ÁT. Dr. César Augusto Jara Campos. DE. IN. FO. RM. SECRETARIO. EM AS. MsC. Pedro Arnaldo Alvarado Salinas. PARASITOLOGÍA. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. DIRECTOR DE LA ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Y. Dr. Juan Guevara Gonzales. JEFE DEL DEPARTAMENTO DE LA ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M UN. IC. AC I. Ó. N. ASESOR. CO. El que suscribe, profesor asesor de la presente tesis, declara que. Y. esta ha sido ejecutada de conformidad con su correspondiente proyecto y. ha. sido. revisado. y. acoge. las. y. sugerencias. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. correspondientes.. observaci ones. IC. este. A. con las debidas orientaciones brindadas al tesista. En cuanto al informe,. ST. ----------------------------------------------------. Asesor. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. MsC. Juan Héctor Wilson Krugg. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. con. las. disposiciones. establecidas. por. AC I. Cumpliendo. Ó. N. PRESENTACIÓN. el. IC. Reglamento de Grados y Títulos de la Universidad Nacional de. titulada:. anisopliae, Oiketicus. “Efecto. Isaria kirbyi. de. Beauveria. fumosorosea, “bicho. del. y. bassiana,. Lecanicillium. CO. Tesis. M UN. Trujillo, presento a su consideración y elevado criterio la presente. canasto”. en. Metarhizium. lecanii. sobre. condiciones. de. A. Y. laboratorio” , con el objetivo de obtener el título profesional de. RM. ÁT. IC. Biólogo-Microbiólogo.. Trujillo, Mayo del 2013. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. Espero que este trabajo sea de su aprobación. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CO. Ms. C. Gerardo Alayo Espinoza. M UN. --------------------------------------------------------. IC. AC I. Ó. N. MIEMBROS DEL JURADO. RM. ÁT. IC. A. Y. PRESIDENTE. FO. ------------------------------------------------------. IN. Ms. C. Juan Wilson Krugg. SI. ST. EM AS. DE. SECRETARIO. Ms. C. Eduardo Muñoz Ganoza VOCAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. ----------------------------------------------------. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN profesores. que. suscriben,. miembros. del. Jurado. N. Los. de. Beauveria. bassiana,. Metarhizium. anisopliae,. Isaria. AC I. Efecto. Ó. Examinador, declaran que el presente Informe de Tesis titulado:. IC. fumosorosea, y Lecanicilliu m lecanii sobre Oiketicus kirbyi “bicho. requisitos. formales. y. fundamentales,. siendo. APROBADO. por. ÁT. IC. A. Y. CO. UNANIMIDAD.. M UN. del canasto” en condiciones de laboratorio , ha cumplido con los. RM. --------------------------------------------------------. FO. Ms. C. Gerardo Alayo Espinoza. EM AS. DE. IN. PRESIDENTE. Ms. C. Juan Wilson Krugg SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. ------------------------------------------------------. ----------------------------------------------------. Ms. C. Eduardo Muñoz Ganoza VOCAL. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. DEDICATORIA. IC. AC I. Ó. A Dios por darme la vida, salud, fortaleza, ser mi guía y por estar presente siempre en cada momento de mi vida. RM FO IN. A mis abuelos, Aquiles Ibañez y Bertha Zapata, que dieron todo de sí para darle alas a ese sueño mío de conseguir ser alguien en la vida.. ST. EM AS. DE. A mi Madre Teresa Ibañez quien siempre me ha brindado su amor, fortaleza, apoyo incondicional y su ejemplo de trabajo y sacrificio.. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. A mi Padre Segundo Avila, que ahora desde el cielo me guía y me acompañó como amigo, compañero y el gran padre que fue, por ser un hombre de lucha quien se ha esforzado al darme el estudio, su amor, comprensión, ejemplo, confianza y apoyo constante… por ti soy lo que soy. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. A mi tío José, quien me brindó comprensión en los momentos más difíciles de mi vida y por apoyarme a seguir adelante en mi formación profesional.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. AGRADECIMIENTO. Ó. Expreso mi más sincero agradecimiento al Mblgo. Juan Héctor Wilson Krugg;. AC I. profesor de la Cátedra de Micología y Fitopatología, por brindarme su confianza,. CO. M UN. realización y culminación del presente trabajo.. IC. conocimientos, apoyo desinteresado, asesoramiento y sobre todo su amistad para la. Y. Me resulta muy complicado e injusto agradecer a una sola persona, cuando. IC. A. han sido varias las que participaron directamente en momentos importantes. ÁT. de mi vida, pero me gustaría hacer un reconocimiento a mis abuelos y tíos. RM. Pedro y Norma por su apoyo incondicional y sus consejos; por tal razón mi más. DE. IN. FO. sincero agradecimiento.. A mis amigos, Olinda Del Castillo, Carlos Collantes y Guillermo Cox que a través. EM AS. de experiencias buenas y no tan gratas, constituyen en algo mi formación personal, aprendizaje en la “escuela de la vida”, y han contribuido con la realización y creyeron en. ST. este trabajo; pero muy especial a esa persona que en los momentos más difíciles estuvo a. SI. mi lado, apoyándome incondicionalmente, con su amor, cariño y comprensión, Gracias “Fernando”.. DI. RE. CC. IO. N. DE. inspirándome y alentándome a no detenerme y a seguir siempre adelante… por todo esto:. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. Isaria. fumosorosea. y. Lecanicillium. lecanii. N. anisopliae,. Beauveria bassiana, Metarhizium sobre. Ó. Se determinó el efecto de. AC I. Oiketicus kirbyi “bicho del canasto” en condiciones de laboratorio.. IC. Para cada tratamiento, se recolectó 48 ejemplares de larvas II de O.. M UN. kirbyi, y se agruparon en cuatro sistemas: tres repeticiones del problema (12:12.12) y un testigo . Se colocaron las larvas en frascos y 3x10 6. conidias /ml de B. bassiana, M.. Y. suspensiones de 8 x10 5. y se les inóculo por aspersión con. CO. de vidrio de boca ancha. IC. A. anisopliae, I. fumosorosea y L. lecanii respectivamente; en el testigo. ÁT. se inoculo una solución acuosa al 0.1% de Tween 80, evaluándose. desinfectados. e. incubad as. cámara. húmeda. por. 10. días. a. IN. FO. temperatura ambiente.. en. RM. diariamente la aparición de cambios . Las larvas muertas fueron. DE. Se observó solo en los insectos inoculados con B. bassiana la. EM AS. aparición de síntomas y signos correspondiente a una infección fúngica, presentándose una. mortalidad del 100 % ; mientras que los. hongos restantes no presentaron actividad entomopatógena sobre las. ST. larvas del bicho del canasto. Se concluye que B. bassiana tiene efecto. SI. entomopatógeno sobre larvas II de O. kirbyi “bicho del cesto” en. DE. condiciones de laboratorio, ocasionando los síntomas de pérdida de. N. apetito, parálisis, melanización y muerte ; asimismo M. anisopliae, I.. CC. IO. fumosorosea y L. lecanii no presentan efecto entomopatogeno sobre. DI. RE. las larvas II de O. kirbyi en condiciones de laboratorio .. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INDICE. Ó. N. Autoridades de la Universidad Nacional de Trujillo…………………………. ii. AC I. Autoridades de la Facultad de Ciencias Biologicas …………………………. iii. M UN. IC. Asesor………………………………………………………………………… iv Presentación………………………………………………………………….. v. CO. Miembros del Jurado ………………………………………………………… vi. IC. A. Y. Aprobación ………………………………………………………………….. vii. ÁT. Dedicatoria …………………………………………………………………. viii. RM. Agradecimiento ……………………………………………………………… ix. IN. FO. Resumen ……………………………………………………………………... x. DE. Indice ………………………………………………………………………… xi. EM AS. INTRODUCCION …………………………………………………………… 1 MATERIAL Y METODO…………………………………………….. 7. SI. ST. RESULTADOS……………………………………………………………... 11. DE. DISCUSION ………………………………………………………………... 15. IO. N. CONCLUSIONES………………………………………………………….. 20. CC. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ………………………………………21. DI. RE. ANEXOS …………………………………………………………………… 26. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCION bicho. del. canasto ,. Oiketicus. kirbyi. (. Lepidoptera:. N. El. Ó. Psychidae) es un insecto polífago que se alimenta de varios cultivos. AC I. y plantas silvestres: como el plátano ( Musa spp.), cacao (. IC. Theobroma cacao L.), palma aceitera ( Elaeis guineensisJacquin),. M UN. pejibaye ( Bactris gasipaesKunth), cocotero ( Cocos nuciferaL .), almendro ( Terminalia catappa L), cítricos ( Citrus spp.), teca (. CO. Tectona grandis L.), eucalipto ( Eucalyptus spp.), palto (Persea. IC. A. Y. americana) y el níspero ( Eryobothria japonica ) 1 .. ÁT. O. kirbyi presenta larvas que recién salidas de los huevos. RM. constituyen rápidamente un estuche portátil que utilizan como refugio. La “casa” llamada también canasta o cesta, es de un color. FO. gris oscuro, de forma que asemeja a un cono truncado, la base del. IN. estuche está hecha de seda y sobre est a son colocadas fragmentos de. DE. hojas y tallos de plantas. El estuche está abierto de ambos extremos,. EM AS. en los cuales hay cierta flexibilidad, lo que facilita su apertura o cierre 2 , 3 .. ST. Cuando el insecto se establece como plaga en una plantación,. SI. los ciclos de defoliación pueden repetirse cada 4 -5 meses, que es el. DE. período de desarrollo larval. En general estos insectos se alimentan. N. inicialmente del parénquima de las hojas, para atacar finalmente los. CC. IO. frutos, que al ser roídos se deforman y pierden su valor, ya s ea como. DI. RE. alimento humano o como elemento de continuidad del árboles (semillas). Además, de consumir hojas pueden cortar tallos tiernos de su hospedero, cuando existe carencia de follaje, alimentación en base a corteza y frutos 4 .. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Cuando los ataques son muy frecuentes sobre un mismo hospedero, o el nivel poblacional es muy alto, ocasionan una total defoliación en los árboles, los que en oportunidades no son capaces. Ó. N. de resistir y mueren. A esto debe adicionarse la disminución del. AC I. vigor del individuo, lo que aumenta su susceptibilidad ante agentes. M UN. IC. de daño secundarios, principalmente barrenadores del fuste 4.. CO. El control de este insecto puede volverse muy complicado. Y. debido a sus hábitos polífagos, lo prolongado del ciclo de vida, la. A. habilidad de la larva para soportar ayunos prolongados, la protección. IC. brindada por la canasta de residuos vegetales, y la gran fecundidad de. FO. RM. ÁT. las hembras, las cuales pueden dar origen a varios miles de huevos 5.. IN. En general el control químico no se consider a eficiente, dada la. DE. protección que le brinda el capullo a los insectos, recomendándose su aplicación en etapas tempranas del ataque y cuando las larvas están. EM AS. recién eclosionadas. Los. insecticidas de más amplio espectro. (monocrotofos), tienen el potencial de ser usados en focos localizados. ST. de ataque, si se aplican utilizando las ventajas de la absorción. N. DE. SI. radical, o bien, se aplican directamente al tronco 4.5.. IO. Existen algunos informes que indican que medidas culturales. CC. como la poda, o la eliminación manual de los capullos puede ayudar. DI. RE. a disminuir el daño, dada la baja poblacional que se produce con estas actividades 5 . Por otra parte se pretende el uso de controladores. biológicos y enemigos naturales para el control de este insecto, los que en su mayoría no h an sido estudiados en profundidad en cuanto a su capacidad de establecimiento y nivel de parasitismo se refiere, 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. siendo fundamental general lineamientos de investigación en este sentido 5 .. Ó. N. Se ha utilizado como control biológico a formulaciones de B.. AC I. thuringiensis que son efectivas, aunque las dosis que se deben. IC. utilizar son considerablemente muy altas, y muy comúnmente se. M UN. alcanza a afectar solo unas dos terceras partes de la población de larvas, lo cual obliga a realizar dos o más aplicaciones del producto. Y. CO. durante un ciclo del insecto 5.. A. En relación a los hongos entomopatógenos, estos son un grupo. IC. de microorganismos ampliam ente conocidos en todo el mundo ,. ÁT. existiendo más de 700 especies reunidas en 100 géneros , aun. RM. solamente unos pocos pertenecientes a las clases Ascomycetes,. FO. Zygom ycetes, Chytridiom yctes y Deuterom ycetes , aunque muy. Estos. hongos. tienen. la. particularidad. de. parasitar. DE. plagas.. IN. pocos estudiados y promocionados en programas para el control de. virtualmente a todos los órdenes de insectos en sus diferentes. EM AS. estadíos de desarrollo, y de encontrarse en los habitats más variados, ya sea acuático, o terrestre . Asimismo, pueden jugar un. ST. papel muy impo rtante en la salud humana ya que algunas especies. SI. son virulentas. para moscas, mosquitos. triatominos y cucarachas.. DE. Además, su característica de penetrar al hospedante vía tegumento. N. no es muy común con el resto de organismos entomopatógenos,. IO. factor que los hace factibles para ser utilizados contra insectos. DI. RE. CC. plagas que no son susceptibles al ataque de bacterias y virus 6,7.. Uno de estos hongos entomopatógenos es Beauveria bassiana (Deuterom ycetes: Moniliales) que comúnmente parasita insectos de los órdenes Lepidoptera, Coleoptera y Hemiptera. Inclusive, a nivel 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. de campo este hongo se ha desarrollado exitosamente como agente de control biológico de diversos insectos plaga como el picudo negro (Cosmopolites sordidus), la broca del café (Hypothenemus insularis). y. la. langosta. (Schistocerca. N. guerin(Atta. Ó. hampei),. AC I. piceifrons ), B. bassiana también se ha evaluado contra huevos y. IC. ninfas de B. tabaci, donde ha mostrado diferentes grados de. M UN. patogenicidad 8,9.. CO. Otro hongo entomopatógeno es Metarhizium anisopliae,. Y. este hongo se encuentra en la naturaleza, en rastrojos de cultivos,. A. estiércol, en el suelo, las plantas, etc., logra buen desarrollo en. IC. lugares frescos, húm edos y con poco sol. M. anisopliae ataca. ÁT. naturalmente más de 300 especies de insectos de diversos órdenes .. RM. Entre las plagas afectadas por este hongo se encuentra el salivazo. cultivos ,. Schistocerca. IN. diversos. FO. de la caña de azúcar ( Aeneolamia varia), chinches plagas de. signaticollis,. Cleonua. punctiventus. peruviana, y. Plutella. DE. Cyclocephala. picceifrons. EM AS. xylostela , entre otros. Los insectos muertos por este hongo son cubiertos completamente por micelio, el cual inicialmente es de color blanco pero se torna verde cuando el hongo esporula de. ST. 1 0, 11, 12, 13. DE. SI. hongos. N. Isaria fumosorosea , (Thom) Samson es un hongo que pertenece. IO. a la clase forma Hyphom ycetes, de amplio intervalo de hospederos y. DI. RE. CC. gran distribución geográfica, que ha sido aislado del suelo y de insectos de diversos órdenes como homópte ros, coleópteros y colémbolos; por ello es utilizado para el control de plagas que afectan a cultivos de gran importancia económica. Entre ellas se encuentran Bemisia tabaci (mosca blanca), Burgues,. pulgones. Macrosiphoniella. Lyriomisa trifolli. sanborni ,. Brachycaudus. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. helichrysi, Myzus persicae y Aphis gossypi. Además de. Thrips. palmi, larvas de Spodoptera littoralis, Spodoptera frugiperda y coleópteros. se. informa. su. efecto. ovicida. contra. Diabrotica. AC I. Ó. N. speciosa 14, 15, 16.. IC. Lecanicillium lecanii es un hongo entomopatógeno de amplio. M UN. espectro. Este hongo es un importante biorregulador de insectos, principalmente áfidos, coccidos y aleyrodidos, por lo que es uno de. CO. los hongos entomopatógenos con mayor potencial en el manejo de. Y. plagas agrícolas 16. Se han desarrollado cepas de L. lecanii altamente. A. virulentas y epizoóticas como agentes biocontroladores de ciertos. IC. insectos. Por el momento, Mycotal y Vertalec son productos. ÁT. comerciales de este hongo entomopatógeno usado contra mosquitas. RM. blancas y áfidos, respectivamente. Comercialmente este hongo se ha. FO. utilizado desde 1990. L. lecanii también es un micoparásito de. IN. royas. L. lecanii puede infectar a los insectos directamente a través. DE. de la penetración de la cutícula y tiene múltiples mecanismos de acción que le confieren una alta capacidad pa ra evitar que el. EM AS. hospedero desarrolle resistencia 1 7 ,. 18. .. ST. Dada la importancia de Oiketicus kirbyi, una plaga que afecta. de. DE. además. SI. el follaje de la planta, perjudica el rendimiento y calidad del fruto , no. encontrarse. un. control. efectivo. con. bacterias. N. entomopatógenas y, debido a que actualmente para su control se. IO. usan productos químicos que dejan residuos tóxicos y contaminan al. DI. RE. CC. ambiente, perjudicando la salud humana y la flora benéfica, además de disminuir la calidad del producto ; se busca encontrar un control efectivo y no contaminante de este insecto mediante el uso de nuevos y potenciales agentes microbianos como los hongos, que son herramientas naturales benéficas porque mant ienen la armonía del ecosistema; por tal razón el presente trabajo tuvo co mo objetivo 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. conocer el efecto de. Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae,. Isaria fumosorosea y Lecanicillium lecanii sobre Oiketicus kirbyi. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. “bicho del cesto” en condiciones de laboratorio.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y METODO 2.1. Material Biológico. N.  Cultivo puro de Beauveria bassiana,. Ó. Metarhizium anisopliae,. AC I. Isaria fumosorosea y Lecanicillium lecanii proporcionado por la. M UN. Parasitología de la Universidad Nacional de Trujillo. IC. cátedra de Fitopatología del departamento de Microbiología y. CO.  Larvas en estadio II de Oiketicus kirbyi “bicho del cesto”. Y. 2.2. Procedimiento:. A. 2.2.1. Evaluación B. bassiana, M. anisopliae, I. fumosorosea y. L.. ÁT. IC. lecanii sobre O. kirbyi “Bicho del cesto” en condiciones de. RM. laboratorio :. FO. 2.2.1.1. Recolección e identificación de O. kirbyi:. IN. Se realizó la recolección de larvas de O. kirbyi en. DE. las plantas de palto de los fundos Mar Verde y Frusol. EM AS. I que pertenecen a la empresa CampoSol S.A., luego se trasladaron al laboratorio de Fitopatología de la UNT donde fueron clasificadas por estadios, para ello se usó. ST. la tabla de clasificación según la medi da del largo del. en estadio II (Anexo 2), recolectando 48 larvas para cada tratamiento.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. cuerpo (Campos ) 1 9 (Anexo 1). Se utilizaron las larvas. 2.2.1.2. Propagación y Estandarización del. inóculo de B.. bassiana, M. anisopliae, I . fumosorosea y L. lecanii: A partir de los cultivos puros de B. bassiana, M. anisopliae, I. fumosorosea y L. lecanii se resembró en frascos de planos conteniendo Agar Sabouraud, luego se incubó a temperatura ambiente durante 7 días 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. (Anexo 3), posteriormente se agregó solución de Tween 80 al 0,1% y se obtuvo suspensiones de conidias que fueron recibidas en matraces estériles. A. Ó. N. partir de estas suspensiones se realizó el recuento de la. de. acuerdo. esto. estandarizar. y. según. la. los. cálculos. suspensión. a. M UN. respectivos,. a. IC. para. AC I. cantidad de conidias / mL en una cámara de Neubauer. concentraciones de 8x10 5 y 3 x10 6 conidias / mL, como. CO. testigo se empleó agua destilada estéril (ADE) con un. de. conidios. de. B.. bassiana,. M.. ÁT. 2.2.1.3. Inoculación. IC. A. Y. pH de 6.8.. RM. anisopliae, I. fumosorosea y L. lecanii sobre larvas de. FO. II de O. kirbyi :. La muestra estuvo constituida por larvas de. IN. estadio II, se emplearon 48 ejemplares; de estos a 36. DE. se les considero como problema y fueron separados en. EM AS. 3 grupos de 12 ejemplares cada uno; los 12 restantes se consideraron como testigo , haciendo de este ens ayo. ST. una suma de cuatro sistemas: tres repeticiones del y un testigo. La muestra fue. SI. problema (12:12.12). DI. RE. CC. IO. N. DE. colocada en recipientes de v idrio de boca ancha con hojas de palto, que sirvieron de alimentos (Anexo 4).. A los ejemplares problema se les inoculó por aspersión una solución acuosa al 0.1% de Tween 80 conteniendo la concentración de esporas del hongo a utilizar 8x10 5 y 3 x10 6 conidias / mL, mientras que a los ejemplares testigo se les inoculó por aspersión una solución acuosa al 0.1% de Tween 80, tratando en lo posible, en ambos casos, de suministrar la misma cantidad de inóculo correspondiente a cada testigo y problema de 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. cada grupo. La aspersión de esporas se realiz ó 3 veces cada 3 días y se incubaron 25° C +/ - 0.5 y 69% de HR . Este procedimiento fue el mismo para cada uno de los. IC. 2.2.1.4. Observación de síntomas y/o signos:. AC I. Ó. N. hongos que se evaluó.. con. la. suspensión. de. esporas. de. B.. CO. inoculados. M UN. La observación de cada uno de los insectos. bassiana, M. anisopliae, I . fumosorosea y L. lecanii. Y. respectivamente, se realizó diariamente hasta el día. IC. A. 10, con la finalidad de observar el posible pr ogreso de micótica para. lo. cual. se. anotó. la. ÁT. la infección. RM. aparición de cambios en el comportamiento como. FO. pigmentación, pérdida de apetito, parálisis, muerte y aparición de micelio sobre los insectos muertos en el. DE. IN. grupo problema en comparación con el grupo control.. EM AS. 2.2.1.5. Aislamiento de los hongos inoculados a partir de los insectos con síntomas de infección micótica:. ST. A los insectos muertos durante el bioensayo se. SI. les realizó los postulados de Koch. Para esto en una. DI. RE. CC. IO. N. DE. placa de Petri se les. desinfectó con hipoclor ito de. sodio al 2% durante 3 minutos, y posteriormente se los. lavó. 3. veces. con. agua. destilada. estéril.. Seguidamente los insectos fueron secados en papel de filtro estéril y luego incubados en cámara húmeda estéril por espacio de 7 a 10 días. a temperatura. ambiente (Anexo 5) con la finalidad de que si el hongo estuviera colonizando el interior del insecto, se desarrolle y cubra con micelio la superficie cuticular. Cuando esto ocurrió se tomó un poco de este micelio 9. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. para. realizar. el. microcultivo ,. incubándose. a. temperatura ambiente durante 5 a 7 días; finalmente procedió. a. observación. según. las. microscópica. claves. e. taxonómicas. Ó. identificación. la. N. se. IC. AC I. respectivas.. M UN. 2.2.2. Análisis de datos:. CO. Los resultados obtenidos se expresaron en porcentaje de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. mortalidad.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS. concentraciones. de. esporas/mL.. de. Beauveria. Ó. diferentes. inoculadas con bassiana,. AC I. observaron en las larvas de estadio II de O. kirbyi. N. En la Tabla 1 se presentan los síntomas y/o signos que se. IC. Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea y Lecanicillium lecanii tales. M UN. como pérdida de apetito, parálisis, melanización, muerte y aparición de. larva. II de O. kirbyi, con el. A. se observa una. IC. En la Fig. 1A,. Y. CO. micelio sobre los insectos muertos.. ÁT. síntoma de momificación, luego de ser inoculada con B bassiana,. RM. mientras que en la Fig. 1B, se aprecia la presencia de micelio de B. bassiana sobre la superficie de la larva II de O. kiryi, después de 5 días. IN. FO. en condiciones de cámara húmeda.. DE. En la Fig. 2, se muestra que las larvas II de O. kirbyi presentan un B. bassiana, mientras que. EM AS. porcentaje de mortalidad del 100% frente a. para M. anisopliae, I. fumosorosea y L. lecanii se obtuvo un porcentaje. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. del 0%.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Ó. Tabla 1. Síntomas y/o signo observados en larvas II de Oiketicus kirbyi inoculados con diferentes concentraciones. UN IC AC I. de conidias/mL de Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea y Lecanicillium lecanii respectivamente, en condiciones de laboratorioa.. Metarhizium anisopliae. Isariaf umosorosea. Lecanicillium lecanii. Y. Beauveria bassiana. C1. C2. Controlb. C1. Pérdida de apetito. -. +. +. -. -. Parálisis. -. +. +. -. Melanización. -. +. +. -. Muerte. -. +. +. Aparición de micelio. -. +. +. C1. C2. Controlb. C1. C2. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. -. FO IN DE. AS EM. DE. SI ST. sobre los insectos. Controlb. C2. RM. Controlb. ÁT IC A. Síntomas y signos. CO. M. Hongo entomopatógeno. C1: 0,8 x 106 con/mL. N. a : Humedad 69 %, Temperatura 27 º C.. C2: 3,2 x 106 con/mL. CC I. O. b :Tween 80 al 0,1% + Agua Destilada estéril.. - : Ausencia de síntoma o signo.. DI RE. + : Presencia de síntoma o signo.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. EM AS. B. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. A. ST. Fig. 1. Larvas II de O. kirbyi: A. Presentando momificación y oscurecimiento después de. SI. 4 días de inoculación con B. bassiana vista al estereoscopio; B. Micelio de B.. DE. bassiana creciendo sobre la superficie de la larva II de O. kirbyi, después de 5 días. DI. RE. CC. IO. N. en condiciones de cámara húmeda.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Ó UN IC AC I. 100 90. CO. M. 80. Y. 70. ÁT IC A. 60. 50. RM. 40. M. anisopliae I. fumosorosea. DE. IN. 20. B. bassiana. L. lecanii. FO. 30. AS. 10 0. M. anisopliae I. fumosorosea Hongo entomopatógeno. L. lecanii. O. N. DE. SI ST. B. bassiana. EM. Porcentaje (%) de mortalidad de O. kirbyi. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CC I. Fig. 2. Porcentaje de mortalidad de larva II de O. kirbyi inoculadas con Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Isaria. DI RE. fumosorosea y Lecanicillium lecanii respectivamente, en condiciones de laboratorio a 25° C +/- 0.5 y 69% de HR durante 10 días.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. DISCUSION. Ó. Los síntomas y signos que presentaron los especímenes de O.. AC I. kirbyi luego de ser inoculados con dos concentraciones diferentes de. IC. conidias/m L. de B. bassiana, M. anisopliae, I. fumosorosea y L. lecanii, en la. presentan síntomas. y signos de origen. M UN. tabla 1 se observa que solo las larvas inoculadas con B. bassiana fúngico.. Los síntomas. CO. observados fueron: pérdida de apetito, parálisis, melanización y. Y. muerte, y el signo fue la aparición de micelio sobre los insectos. IC. A. muertos, además de no presentarse diferencias de los síntomas y. RM. presentaron en los mismos tiempos.. ÁT. signos entre las concentraciones de conidias utilizadas pues estos se. FO. Para que un hongo como B. bassiana produzca en un insecto los. IN. síntomas observados en la Tabla 1, debe pasar por varias etapas.. conidias. multiplicación. sobre. su. huésped,. EM AS. las. DE. Lecuona 2 0 menciona que estas etapas. son la adhesión o fijación de germinación,. penetración,. del hongo en el hemocele, producción de toxinas,. colonización y muerte del insecto; finalmente. el hongo emerge del. ST. cuerpo del insecto hacia el exterior, d onde va a esporular y. DE. SI. diseminarse (Anexo 6) 7 , 2 1 .. N. El proceso de infección se inicia con un. compatibilidad de las conidias con las células. CC. IO. reconocimiento y de. mecanismo de. del tegumento del insecto.. Con respecto al mecanismo de adhesión. DI. RE. Lecuona 2 0 , menciona que pueden diferenciarse tres fases: adsorción o inmovilización,. contacto. y. adhesión. propiamente. dicha.. En. la. adhesión pueden intervenir sustancias simples o complejas, que participan en la fijación del propágulo. Algunos de estas moléculas son conocidas como lectinas, que son proteínas o glucoproteínas de 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. origen no inmunológico pero que pueden provocar in vitro fenómenos semejantes a reacciones inmunológicas .. 22, 23. .. N. Lecuona 2 0 , atribuye además a la influencia de otros factores en. AC I. Ó. la patogenicidad del hongo, así tenemos su habilidad para penetrar la cutícula y la fortaleza del sistema inmunológico del insecto para. IC. prevenir el desarrollo del hongo (esto puede ser influenciado por la. M UN. eficacia de los hemocitos en encapsular y mecanizar al patógeno impidiendo su germinación y los factores ambientales que contribuyen 23. .. IC. A. Y. CO. al control y ocurrencia de enfermedades y epizootias 2 2 ,. cual se caracteriza por la. ÁT. Luego ocurre la diferenciación la. RM. formación de un apresorio o estructuras terminales que van a servir de punto de. agarre y remoción de la cutícula para favorecer la. FO. penetración, la cual se realiza por. una combinación de presión. IN. mecánica y enzimática tales como las lipasas, proteasas, y quitinasas. DE. que actúan degradando la cutícula del hospedante de las cuales la más. EM AS. importante en la penetración son las proteasas. Se ha observado que la acción enzimática puede ser coadyuvada por la secreción de ácidos. de. secretar. toxinas. no. enzimáticas. como. beauvericina,. SI. además. ST. orgánicos, como el ácido oxálico que es producido por B. bassiana,. bassianolides, e isarolides , que actúan y aceleran el proceso de. DE. infección , lo que explicaría la infección el posterior desarrollo del. IO. N. hongo en el insecto de O. kirbyi por B. bassiana . De la misma forma. CC. la sobreexpresión del gen que codifica para la quitinasa de B. bassiana 23, 24, 25. .. DI. RE. acelera el proceso de muerte en los insectos en un 23% 7 ,. Carballo 2 6. dice. que. ya. dentro. del. hemocel e,. ocurre. un. crecimiento prolífico del hongo. Esta multiplicación del hongo ocurre por gemación produciendo formas micelianas libres y unicelulares 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. llamadas blastosporas y también la producción de hifas. Finalmente, el hongo invade los tejidos y como consec uencia ocurre la muerte del hospedante, quedando duro, momificado y deshidratado, tal como se. IC. AC I. Ó. N. muestra en la Fig. 1(A).. M UN. Después de la muerte ocurre una fase de crecimiento miceliar hacia el exterior que concluye con la producción de nuevas unidades. CO. reproductivas sobre la superficie y rodeando el cadáver del insecto,. Y. tal como se observa en la Fig. 1(B) donde el micelio apareció luego. A. de 5 días en cámara húmeda. Estos síntomas y/o signos no se. de. los. insectos. en. el. laboratorio. ÁT. crianza. IC. observaron en el grupo control, la cual indica que las condiciones de fueron. adecuados, 23,24, 27. .. FO. RM. respaldando los resultados obtenidos en los grupo problema 2 1 ,. IN. Al observar los porcentajes de mortalidad de las larvas de. Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea y Lecanicillium lecanii. EM AS. bassiana,. DE. Oiketicus kirbyi en el laboratorio después de inocularse a Beauveria. (Figura 2), se observó que B. bassiana fue el único hongo que sobre este insecto plaga, a. de M. anisopliae, I. fumosorosea. y L. lecanii, que. SI. diferencia. ST. presento actividad entomopatógena. presentan un porcentaje de mortalidad de 0%, lo cual se debió. DE. probablemente a que B. bassiana pudo tener contacto con la larva de. IO. N. O. kirbyi, a pesar que esta presenta una cesta compuesta de seda,. CC. restos de hojas y ramas (Anexo 7), lo que no impidió que el hongo tenga contacto con el hospedero, siendo este una acción determinante. DI. RE. para que ocurra la infección . Además B. bassiana pudo haberse favorecido por algunos factores como las enzimas que produce, para producir un mayor porcentaje de mortalidad en Oiketicus kirbyi en comparación a los tres hongos restantes .. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Es importante mencionar que hay pocas investigaciones de control biológico contra el bicho del cesto, sin embargo Coto y Saunders 2 8 , propone que B. bassiana puede ser utilizado como un para. este. insecto. plaga.. También. Bustillo. y. N. efectivo. Ó. control. AC I. Vanegas 2 9 , al inocular a Opsiphanes cassina “el Gusano Cabrito de. horas. 10 5 y 10 6 esporas/mL a las 72. M UN. 0% al aplicar una concentración de. IC. La Palma Africana” con B. bassiana encontró una supervivencia de Posada y Vega 3 0 al inocular adultos de. de evaluación.. CO. Hypothenemus hampei “la broca del café” con B. bassiana encontró. Y. una supervivencia de 0% al aplicar una concentración de 10 6. A. conid/m L a los 9 días de evaluación , coincidiendo con los resultados. IC. de este trabajo; mientras que Elizondo, Murguido y Matamoros 3 1. ÁT. demostraron que M. anisopliae a la dosis de 1,7 x 10 1 3 causo. RM. patogenidad superior a 70%, L. lecanii a 1,5 x 10 1 3 entre 60 y 66% y. FO. B. bassiana a 1,5 x 10 1 3 presentó una patogenicidad del 53 %. Herrera. IN. y col. 3 2 , demostraron una supervivencia de 64% en ninfas del cuarto. DE. estadío de Bemisia tabaci “mosca blanca” inoculados con B. bassiana a una concentración de inóculo de 10 7 esporas/mL. y a los 14 días de. EM AS. aplicado el tratamiento.. y. 100%. de. SI. 50. ST. Cabrera y Pinedo 3 3 , mencionan que B. bassiana tiene entre el efectividad. contra. Eutinobotrhus. gossypii. DE. Aleurodicus dispersus, sin embargo, no es buen controlador. y de. N. Spodoptera frugiperda, Helluta phidilealis y Plutella xylostella,. IO. también Torres y col.. 34. aplicaron B. bassiana sobre el gusano blanco. CC. de la papa (Premnotrypes vorax) obteniendo un porcentaje de. RE. supervivencia del 0%, lo que se obtuvo con concentraciones de 10 7 y. DI. 10 9 esporas/mL y a los 10 días de exposición . También Lucero y col.. 35. obtuvieron porcentajes de. scarabaeiodes. frente. a. B.. mortalidad de 100% de Ancognatha bassiana. y. M.. anisopliae. a. la. concentración de 1 x 10 1 0 esporas/ml y porcentajes de 80% y 70% 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. para a la. concentración de 1 x 10 9. esporas/ml a los 18 días de. aplicados los tratamientos.. los obtenidos en este. Ó. N. Estos resultados no concuerdan con. unas de las explicaciones que se pueden dar es. IC. hongos utilizados,. AC I. trabajo, en cuanto a una mayor supervivencia y el efecto de los cuatro. M UN. que los géneros de los hongos utilizados que no ocasionan mortalidad en las larvas II de O. kirbyi no son muy comunes o específ icos y , no para O. kirbyi a diferencia de B. bassiana que. CO. son virulentos. por. Y. excelencia es un entomopatógeno en controlar diferentes órdenes de. ÁT. IC. A. insectos.. RM. Cabe resaltar que los resultados obtenidos en este trabajo son en condiciones de laboratorio por lo que es recomendable realizar posteriores. en. campo. para. FO. estudios. la. verificación. de. dichos. IN. resultados, los que pueden verse influenciada por muchos factores la. temperatura. (que. DE. como. puede. afectar. la. estabilidad. del. EM AS. entomopatógeno y perder la patogenicidad), la humedad relativa (puede intervenir en las diferentes fases del ciclo de infección del. ST. hongo sobre el huésped), l a concentración y tiempo de vida media del. SI. hongo, tipo de flora microbiana saprófita sobre el capullo del insecto ,. DE. agroquímicos residuales presentes (algunos tienen acción fungicida o fungistático), así como la radiación solar, los vegetales y las. DI. RE. CC. IO. N. precipitaciones .. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIONES Beauveria bassiana tiene efecto entomopatógeno sobre larvas I I de. N. . ocasionando. los. síntomas. de. pérdida. de. apetito,. M UN. Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea y Lecanicillium lecanii. CO. . parálisis,. IC. melanización y muerte.. AC I. Ó. Oiketicus kirbyi “bicho del cesto” en condiciones de laboratorio,. no presentan efecto entomopatogeno sobre larvas II de O. kirbyi en. B. bassiana. ocasiona una alta mortalidad de las larvas II. de O.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. kirbyi en condiciones de laboratorio.. ÁT. . IC. A. Y. condiciones de laboratorio.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. Ó. N. 1. Mexzón R, Chinchilla C, Rodríguez R. El gusano canasta, Oiketicus. AC I. kirbyi LandsGuilding (Lepidoptera: Psychidae), plaga de la palma. IC. aceitera. ASD Oil Palm Papers 2003; 25:17 -28.. M UN. 2. Nuñez R. El gusano de cartucho mayor. Carta Cuba 2005; 1(2):1 -11.. CO. 3. Carrasco F. Observaciones de Algunas Plagas de Interés para la Zona. Y. del Cuzco. Rev. Peruana de entomología agrícola 1962; 5(1): 97 -100.. IC. A. 4. Chinchilla C. Manejo integrado de problemas fitosanitarios en palma. ÁT. aceitera Elaeis guineensis en América Central. Manejo Integrado d e. RM. Plagas y Agroecología (Costa Rica) 2003; 67: 6 9 - 8 2.. en. Chile.. IN. Nativo. FO. 5. Insectos defoliadores. Manual de Plagas y Enfermedades del Bosque Disponible. en. web:. DE. ftp://ftp.fao.org/docrep/fao/011/i0217s/i0217s01.pdf. Instituto. de. EM AS. 6. Alatorre, R. 1999. Hongos Entomopatógenos. Colegio de Post Grado, Fitosanidad.. México.. Disponible. en. web:. ST. www.colpos.mx/ifit/alatorr e.html. web:. DE. SI. 7. Bolaños, J. 1999. Hongos Entomopatógenos. Ecuador. Disponible en. CC. IO. ml.. N. www.iicasaninet.net/pub/sanveg/html/biocontrol/patógenos/hongos.ht. 8. Ruiz E, Rosado A, Chan W, Alejo J, Munguia R. Patogenicidad de. DI. RE. Beauveria bassiana (Bals.) Vullemin sobre estados inmaduros de mosquita blanca (Bemisia tabacoGenn.). Fitosanidad 2009; 13 (2). 89-93.. 9. Trujillo Z, Pérez R, López M, Zamora C, Ocano C. Evaluacion de cepas. de. hongo. entomopatógeno. Beauveria. bassiana. (Bals.). 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 18. Castillo S. Uso de Metarhizium anisopliae para el control biológico. Brachiaria. (Aeneolamia spp . y Prosapia spp.) en pastizales de decumbens. en. El. Petén,. Guatemala.. Programa. AC I. Ó. educación para el desarrollo y la conservación . Guatemala 2006. de. N. del salivazo. 19.Campos J, Peres O, Berti E. BIOLOGIA DO BICHO DO CESTO. IC. Oiketicus kirbyi Lands.-Guilding, 1827) (Lepidoptera, Psychidae)EM. M UN. FOLHAS DE Eucalyptus spp. Universidad federal de Matto Grosso. CO. 1827;54: 341-358.. microbiano de Insectos Plaga. Edit. Roberto E. Lecuona.. A. Control. Y. 20.Lecuona, R. 1996. Microorganismos patógenos empleados en el. ÁT. IC. Editor. Buenos Aires Argentina.. RM. 21.Carrillo M, Blanco A. Potencial y algunos mecanismos de acción de. FO. los hongos entomopatógenos para e l control de insectos plaga. Acta. Arredondo H. 2007 Teoría y Aplicación del Control. DE. 22.Rodríguez L,. IN. universitaria 2009; 19(2):40 -49. EM AS. Biológico. Sociedad Mexicana de Control Biológico, México. 303 p. 23.Pucheta M, Flores A, Navarro S, De la Torre M. Mecanismos de. SI. ST. hongos Entomopatógenos. Interciencia 2006; 31(12): 856 -860.. DE. 24.Arias E. Aislamiento y patogénicidad del hongo nativo Beauveria bassiana (Bals) Vuill. Controlador biológico de la broca del cafeto. IO. N. Hypothenemus hampei (Ferrari). Tesis para obtener el título de. CC. ingeniero agrónomo. Universidad de San Salvador. 2007.. RE. 25.Rodríguez, M;. M. Gerding y. A. France. 2006. Selección de. DI. aislamientos de hongos entomopatógenos para el control de huevos de polilla del tomate, Tuta absoluta Meyrick (Lepidoptera: Gelechiidae). Rev. Agric. Téc. 66(2):p.151 -158. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 26.Carballo M. 2004. Control biológico de plagas agrícolas. 1 era. Edic. Manague. 323p.. N. 27.González M, Aguilar C y Rodríguez R. Control de insectos -plaga en agricultura utilizando hongos entomopatogenos: RETOS Y. AC I. Ó. la. PERSPECTIVAS. R evista Científica de la Universidad Autónoma de. M UN. IC. Coahuila 2012; 4(8): 42 -55.. 28.Coto D, Saunders J. 2004. Insectos plagas de cultivos perennes con. CO. énfais en frutales en América Central. 1era. Edic. Catie. 400p.. A. Y. 29.Bustillo D, Vanegas L, Tofiño A, Reyes C. Verificación Del Efecto. IC. De Beauveria Bassiana Sobre El Gusano Cabrito De La Palma. F, Vega.2005. Un nuevo método para evaluar el. FO. 30.Posada, J. y. RM. ÁT. Africana (Opsiphanes cassina). Rev. Corpoica 2000.. IN. potencial del biocontrol de los aislantes de esporas entomopatógenos. DE. fungicidas. Artículo: Diario de la ciencia del insecto. 5 (1):p.1 -10. Torres,. EM AS. 31.Elizondo Silva, Ana Ibis; Murguido Morales, Carlos A.; Matamoros Michel.. Patogenicidad. De. Los. Hongos. Metarhizium. ST. anisopliae (METSCHN.), Lecanicillium lecanii (ZIMM.) ZARE &. SI. GAMS Y Beauveria bassiana (BALS.- CRIV.) VUILL. sobre Thrips. DE. palmi karny en el cultivo de la papa ( Solanum tuberosum L.).. IO. N. Fitosanidad 2011; 15(3):147 -151.. CC. 32.Herrera, F; M. Carballo y P. Shannon.1999. Eficac ia de cepas nativas. RE. de hongos entomopatógenos sobre Bemisia tabaci en el laboratorio.. DI. Rev. Manejo integ. plag. 54(1).. 33.Cabrera J. y Pinedo E. El hongo Beauveria bassiana en el control de algunas plagas agrícola. Rev. Per. Ent. 1995; 37: 107 -110. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 34.Torres, R. y A, López.1997. Estudios básicos del gusano blanco de la. N. papa (Premnotry pesvorax) con Beauveria bassiana y Metarhizium. Peña. L. y. Bacca. T.. Evaluación. de. la. AC I. A,. actividad. IC. 35.Lucero. Ó. anisoplae. Rev. Colomb. Entomolog.2 (1).. de Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae. sobre. de. Ancognatha. scarabaeiodes. (Coleoptera:. CO. larvas. M UN. biocontroladora. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. Scarabaeidae). Revista Corpoica 2004;5(1): 43 - 48.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. ANEXOS. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 1: Duración media, ancho medio de cápsula cefálica y tamaño medio del cuerpo en cada estadio larval de Oiketicus. N. kirbyi (Temperatura: 25,0 ±3 °C; UR%: 70±10; Fotofase: 13. Duración. Ancho de. Largo del. (día). cápsula. cuerpo. CO. Estadio. M UN. IC. AC I. Ó. horas):. (mm). Y. (mm) 12. 0.43. II. 10. 0.48. 2.74. III. 10. IV. 15. V. 12. VI VII. 7.50. 1.57. 9.53. 13. 2.25. 13.79. DE. IC. ÁT 1.05. 3.08. 22.18. 4.07. 37.0 (♂). RM FO. IN. 21. 47 (♂). ST. 45 (♀). 39.2 (♀). 13 (♀). 5.21 (♀). 56.5 (♀). DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. IX. 1.85. 4.25. 0.69. EM AS. VIII. A. I. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. Anexo 2. Larvas en estadio II de Oiketicus kirbyi. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) L. lecanii. I. fumosorosea. M. anisopliae. 3.. Cultivos de Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea, y Lecanicilliun lecanii en agar sabouraud. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. Anexo. EM AS. DE. IN. B. bassiana. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. Anexo 4. Sistema de incubación de larvas II de O. kirbyi inoculadas con Bauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea, y Lecanicilliu nlecanii a 25°C , HR%: 69±10.. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) R2 (C1). UN IC AC I. R1 (C1). R3 (C1). FO. R1 (C2). R1 (C2). R1 (C2). N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN. Control (C2). RM. ÁT IC A. Y. CO. M. Control (C1). Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CC I. O. Anexo 5. Larvas II de O. kirbyi en cámara húmeda, luego se ser inoculadas con B. bassiana.. DI RE. C1: 8x105 con/mL C2:3x106 con/mL. R: repetición. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. Anexo 6: Ciclo de infección de un hongo entomopatógeno. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. Anexo 7. Larvas de O. kirbyi, observándose su cesto formado de restos de sedas, hojas y ramas.. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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