Crecimiento de Trichoderma harzianum utilizando como sustrato a la alfacipermetrina en condiciones de laboratorio
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(2) AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. VICERRECTOR ACADÉMICO. M UN. IC. Dr. Rubén Vera Véliz. IN. Dr. Esteban Ilich Zerpa. DE. SECRETARIO GENERAL. EM AS. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS QUE OTORGAN EL TÍTULO PROFESIONAL DE. Dr. José Mostacero León DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. BIÓLOGO – MICROBIÓLOGO. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. N. Dr. William Zelada Estraver. ÁT. Dra. Bertha Soriano Bernilla. IN. FO. RM. DIRECTORA DE LA E.A.P. DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. EM AS. DE. DEL ASESOR. El que suscribe, profesor asesor de la tesis titulada: Crecimiento de Trichoderma. ST. harzianum utilizando como sustrato a la alfacipermetrina en condiciones de. SI. laboratorio, certifica que ésta ha sido desarrollada de conformidad con los objetivos. DE. propuestos en el proyecto, y que ha recibido las recomendaciones y sugerencias. IO. N. necesarias, las cuales han sido consideradas en el informe.. DI. RE. CC. Trujillo, diciembre de 2015.. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg ASESOR. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AC I. Ó. N. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO. IC. Con el fin de cumplir con las disposiciones vigentes contenidas en el Reglamento de. M UN. Tesis Universitaria de la Facultad de Ciencias Biológicas, someto a vuestro elevado criterio la tesis titulada “Crecimiento de Trichoderma harzianum utilizando como. IC. A. Y. obtener el Título Profesional de Biólogo – Microbiólogo.. CO. sustrato a la alfacipermetrina en condiciones de laboratorio” con el propósito de. IN. FO. RM. ÁT. Trujillo, diciembre de 2015.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. Br. Mayra Karina Gutierrez Araujo. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CO. Dra. Manuela Luján Velásquez. M UN. IC. AC I. Ó. N. MIEMBROS DEL JURADO. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. PRESIDENTE. SECRETARIO. Ms. C. Eduardo Muñoz Ganoza VOCAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. APROBACIÓN. Ó. Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que el. AC I. presente informe de tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales,. Y. CO. M UN. IC. siendo aprobado por unanimidad.. IC. A. Dra. Manuela Luján Velásquez. DE. IN. FO. RM. ÁT. PRESIDENTE. SECRETARIO. Ms. C. Eduardo Muñoz Ganoza VOCAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. DEDICATORIA. Ó. A Dios por haberme dado la vida, por brindarme su infinita bondad, amor y por la. IC. AC I. salud que día a día me brinda para lograr mis objetivos y alcanzar mis metas.. M UN. A mis cuatro grandes tesoros que me vieron crecer y que siempre están presentes en. CO. cada logro en mi vida.. Y. A mis padres Willian y Geovani, por su apoyo incondicional, por su esfuerzo. IC. A. constante y espíritu de lucha por ver a sus hijas realizadas y por haber sido mi gran. ÁT. soporte en este camino de formación académico profesional.. RM. A mis hermanas Vianca y Luz con los cuales comparto muchas experiencias en el. IN. FO. transcurso de mi vida y siempre están ahí para brindarme su apoyo y fortaleza.. DE. A mis grandes amigos Pao, Lili, Bea, Vania, Angie y Alice, con los cuales compartí grandes momentos en el transcurso de los 5 años de formación académico. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. profesional en la Universidad.. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. AGRADECIMIENTOS. Ó. Agradecer mi asesor Ms. C. Juan Hector Wilson krugg por haberme brindado su. AC I. apoyo y amistad, por haber compartido sus conocimientos y experiencias, los cuales. M UN. IC. me sirvieron de mucho en el desarrollo de mi tesis. A la empresa Inversiones y Servicios Fabric. SAC. CO. A todos los profesores y compañeros que me brindaron su amistad y confianza en el. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. transcurso de los 5 años de formación académico profesional.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. RESUMEN. Ó. El presente trabajo se plantea como objetivo determinar si Trichoderma harzianum. AC I. es capaz de crecer utilizando como sustrato la alfacipermetrina a diferentes. IC. concentraciones en condiciones de laboratorio. Para lo cual se realizó la resiembra y. M UN. propagación del cultivo de T. harzianum reactivado; luego se realizaron evaluaciones del efecto del insecticida alfacipermetrina a diferentes concentraciones sobre el crecimiento de T.. CO. crecimiento de T. harzianum en placa y evaluaciones del. Y. harzianum a diferentes concentraciones de alfacipermetrina en un sistema aireado;. IC. A. por último se realizó una prueba analítica de Cromatografía en Capa Fina, para. ÁT. confirmar la degradación de la alfacipermetrina. En los resultados se observó que el. RM. crecimiento lineal de T. harzianum en la concentración de 75 ppm se presentó en un 30.54% respecto al control, mientras que en la concentración 100 ppm y 150 ppm. FO. presentaron un crecimiento de 41.62% y 52.40% respectivamente; esto nos muestra. IN. que el crecimiento de T. harzianum fue directamente proporcional a la concentración. DE. presente del plaguicida. Con respecto a los resultados del peso seco evaluado en las. EM AS. tres concentraciones se observa que en las concentraciones de 75 y 100 ppm se observó un crecimiento en porcentaje de 37.26% y 44.34% respectivamente; y el peso obtenido en la concentración de 150 ppm logró alcanzar un 52% de crecimiento. ST. respecto al control; y en la prueba analítica no se observó presencia de la. SI. alfacipermetrina en ninguna de las concentraciones evaluadas. Se concluyó que T.. DE. harzianum es capaz de degradar la alfacipermetrina a concentraciones 75, 100, 150. DI. RE. CC. IO. N. ppm en condiciones de laboratorio.. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. ABSTRACT. Ó. This paper therefore seeks to determine whether Trichoderma harzianum is able to. AC I. grow using as substrate alphacypermethrin at different concentrations in laboratory. IC. conditions. For which reseeding and culture propagation reactivated T. harzianum. M UN. was performed; then evaluation of the effect of the insecticide alpha-cypermethrin were conducted at different concentrations on the growth of T. harzianum on the. CO. growth plate and evaluations of T. harzianum at different concentrations of alpha-. Y. cypermethrin in an aerated system; Finally an analytical test Chromatography Thin. IC. A. Layer was performed, to confirm degradation alphacypermethrin. In the results it was. ÁT. observed that the linear growth of T. harzianum in the concentration of 75 ppm. RM. showed a 30.54% compared to control, while in the concentration 100 ppm and 150 ppm showed an increase of 41.62% and 52.40% respectively; this shows that the. FO. growth of T. harzianum was directly proportional to the concentration of the pesticide. IN. present. Regarding the results of the dry weight in the three concentrations tested it is. DE. observed that at concentrations of 75 and 100 ppm in growth rate 37.26% and 44.34%. EM AS. respectively was observed; and the weight obtained in the concentration of 150 ppm was able to achieve a 52% growth compared to the control; and analytical test no presence of alphacypermethrin was observed in any of the concentrations tested.. ST. Therefore it was concluded that T. harzianum is capable of degrading. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. alphacypermethrin at concentrations 75, 100, 150 ppm in laboratory conditions.. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC I. Ó. N. TABLA DE CONTENIDOS. IC. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONALA DE TRUJILLO………..ii. M UN. DEL ASESOR………………………………………………………………………………i PRESENTACIÓN…………………………........................................................................iv. CO. MIEMBROS DEL JURADO……………………………………………………………..vi. A. Y. APROBACIÓN……………………………………………………………………………vii. IC. DEDICATORIA………………………………………………………………………….viii. RM. ÁT. AGRADECIMIENTO………………………………………………………………..…...ix. FO. RESUMEN……………………………………………………………………………….…x. IN. ABSTRACT………………………………………………………………………….........xi. DE. INTRODUCCIÓN……………………………………………………………………….…1. EM AS. MATERIALE Y PROCEDIMIENTO……………………………………………………...5 2.1.MATERIAL………………………………………………………………………....5. Evaluación del efecto del insecticida alfacipermetrina a diferentes. DE. 2.2.2.. Resiembra y porpagación de cultivo de T. harzianum reactivado….5. SI. 2.2.1.. ST. 2.2.PROCEDIMIENTO………………………..………………………………………..5. N. concentraciones sobre el crecimiento de T. harzianum en placa…...………...5. DI. RE. CC. IO. 2.2.3. Evaluación del efecto del insecticida alfacipermetrina a diferentes concentraciones sobre el crecimiento de T. harzianum en un sistema aireado………………………………………………………………..……….7. 2.2.4. Evaluación de la degradación de alfacipermetrina por Cromatografía en Capa Fina……………………………………………………………………..8 2.2.5. Análisis de Datos………………………………………………………9. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS……………………………………………………………………..10. N. DISCUSIÓN……………………………………………………………………………… 15. AC I. Ó. CONCLUSIÓN…………………………………………………………………… 18. IC. RECOMENDACIONES……………………………………………….................. 19. M UN. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS……………………………………………. 20. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. ANEXOS…………………………………………………………………………. .27. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN. Ó. N. Las plantas sufren enfermedades cuando son atacadas por algún patógeno o son. AC I. afectadas por un agente abiótico; sin embargo en la mayoría de casos son producidas. IC. por plagas en su mayoría de insectos como Heliothis zea, Spodoptera exigua, Trips. M UN. palmi, etc; pero además microorganismos fitopatógenos, tales como bacterias,. CO. nematodos u hongos1.. Estas enfermedades son importantes para el hombre ya que perjudican su producción. Y. o la producción de sus derivados2,3,4. Frente a estas enfermedades se hace necesario. IC. A. establecer un control con un manejo integrado de plagas de los cultivos con el fin de. ÁT. mantener la densidad de la población del cultivo por debajo del nivel en el que. RM. comienza a causar perjuicio económico, empleando métodos de control que consisten. FO. en sistemas naturales o artificiales que dan como resultado la prevención, represión o la exclusión de una plaga,es por eso que los plaguicidas sintéticos son el método más. DE. IN. utilizado para el control de fitopatógenos5,6,7,8.. EM AS. Dentro de los productos químicos que se utilizan están los insecticidas, los cuales varian de acuerdo a su formulación. Uno de los insecticidas muy utilizado en el sector agrícola es la alfacipermetrina o cipermetrina refinada, pertenece al grupo de los. ST. piretroides de tercera generación. Está compuesta por la mezcla racémica de los dos. SI. enantiómeros más activos de cuatro isómeros CIS de la alfacipermetrina. Sus. DE. principales propiedades fisicoquímicas son tres: Es fácilmente soluble en cetona,. N. alcohol e hidrocarburos aromáticos, moderadamente soluble en solvente parafínico y. CC. IO. de baja solubilidad en agua, tiene estabilidad termal y baja volatilidad9.. RE. Es útil tanto en el control de plagas agrícolas de un amplio rango de insectos como. DI. Lepidopteros, Coleopteros, Dipteros, Hemipteros y otros en diferentes cultivos; como en el control de ectoparásitos del ganado y moscas de los establos por lo que es considerado de amplio espectro.. Sin embargo su toxicidad está considerada de. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. moderada y muy tóxica para mamíferos, y de tres a cuatro veces más tóxica que la. N. cipermetrina10.. Ó. Es por eso que el uso de estos plaguicidas se recomienda solo en casos donde la. AC I. plaga o enfermedad a alcanzado niveles de gravedad, debido a que provocan el. IC. desarrollo de mecanismos de desarrollo de resistencia a la vez que generan residuos. M UN. tóxicos en alimentos y al ambiente poniendo en riesgo la salud del hombre11,12 .Es por ello que en la actualidad se recomienda que se utilice racionalmente a los plaguicidas. CO. y se busque su interacción armoniosa con otros métodos de control como el físico y el. Y. biológico13,14.. IC. A. El control biológico constituye una alternativa de gran importancia en los programas. ÁT. de manejo integrado de plagas (MIP). Los hongos entomopatógenos pueden estar en. RM. armonía con las diferentes técnicas usadas en esquemas de manejo integrado15,16. Es. FO. por eso que una alternativa económica y eficiente para el control de enfermedades de. IN. las plantas es el uso de biofungicidas17,18; como es el caso del género Trichoderma el cual representan un grupo de hongos filamentosos, estos se caracterizan por. EM AS. DE. predominar en los ecosistemas terrestres y acuáticos 19. Algunas especies son de vida libre en el suelo, oportunistas, simbiontes de plantas, y otras son micoparásitas. Además, pueden colonizar distintos ambientes, debido a su. ST. alta capacidad reproductiva20. Los requerimientos nutrimentales de estos hongos. SI. filamentosos son pocos, y su humedad y temperatura óptimas de crecimiento se. DE. encuentran en un rango de 25 a 30 °C. Sin embargo, se pueden adaptar y sobrevivir. IO. N. en condiciones extremas de temperatura, pH y salinidad21,22,23.. CC. De manera particular, los hongos de este grupo fúngico son importantes para las. RE. plantas, al contribuir en el control de hongos fitopatógenos ya que poseen. DI. propiedades micoparasíticas y antibióticas, por lo que algunas especies han sido catalogadas como excelentes agentes de control biológico de hongos causantes de enfermedades para diferentes plantas hortícolas16,17,18. Las cepas de Trichoderma más. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. comercializadas para el control biológico son Trichoderma viride, T. polysporum y T.. N. harzianum, la cual es la más utilizada y reportada en la literatura24,25.. Ó. Las especies del género Trichoderma pueden producir diversos metabolitos. AC I. secundarios dentro de los que se encuentran algunas toxinas como la gliotoxina y. IC. hormonas de crecimiento como auxinas y giberelinas21,22,26.Así, T. harzianum y otras. M UN. especies del género son capaces de incrementar el crecimiento de plantas27. También pueden degradar diferentes fuentes de residuos celulósicos y lignocelulósicos. CO. procedentes de la industria papelera28,29,30 .. Y. Varias especies de Trichoderma son capaces de degradar plaguicidas, debido a su. IC. A. actividad enzimática. Esta capacidad bioquímica permite vislumbrar el potencial de. ÁT. aplicación de Trichoderma en la biorremediación de sitios contaminados teniendo. RM. con ello una relevancia ecológica31. No obstante, la respuesta de Trichoderma ante. FO. plaguicidas debe ser evaluada para conocer sus potencialidades y limitaciones en la. IN. degradación de este tipo de compuestos orgánicos. Como ejemplo, insecticidas como forato o carbofurano pueden estimular o inhibir el crecimiento de especies de 31,32. . Más aún, T. viride contribuye en la degradación del herbicida. DE. Trichoderma. EM AS. triflurina en más del 90 % en aproximadamente 10 días33,34. La mayoría de los plaguicidas organoclorados como el DDT, el dieldrin y el. ST. endosulfán, son persistentes en la naturaleza y presentan alta toxicidad. No obstante,. SI. se ha documentado que Trichoderma es capaz de degradar estos tres. DE. plaguicidas35,36,37. Algunas especies del género Trichoderma pueden degradar y. pentaclorofenol,. pero. no. degradan. al. N. pentacloronitrobenceno. capacidad. CC. la. IO. hexaclorociclohexano38,39. En este sentido, se ha demostrado que T. harzianum tiene de. degradar. 2,4,6-. triclorofenol,. 4,5-dicloroguaiacol,. 3,4,5-. 40,41,42. .Asi T.. DI. RE. tricloroguaiacol, tetracloroguaiacol y otros compuestos halogenados. harzianum es capaz de utilizar el insecticida organofosforado clorpirifos como fuente de asufre y de fosforo y también es capaz de degradar glifosato y ácido aminometil fosfórico43,44.. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Es por ello que estos hongos resultan benéficos ya que además de contrarrestar fitopatógenos también se ha demostrado que posee capacidades para degradar. N. residuos tóxicos, como es el caso de las especies de Trichoderma pueden. AC I. Ó. potencialmente contribuir en la degradación de compuestos orgánicos contaminantes depositados en el suelo. De manera específica, la forma en que un microorganismo. M UN. IC. interactúa con un contaminante de naturaleza orgánica, es diferente a la de un contaminante de origen inorgánico, Sin embargo algunos microorganismos pueden. CO. degradar completamente los contaminantes orgánicos, lo que implica su completa. Y. mineralización hasta compuestos inocuos como agua y dióxido de carbono29.. A. Conociendo que Trichoderma se aplica como controlador bilógico en cultivos en. ÁT. IC. donde también hay aplicación de alfacipermetrina, el que al igual que otros plaguicidas presenta efecto residual tóxico ; y sabiendo de. la capacidad de T.. RM. harzianum de interaccionar con otros compuestos orgánicos; es que el presente. FO. trabajo se plantea como objetivo determinar si Trichoderma harzianum es capaz de. IN. crecer utilizando como sustrato la alfacipermetrina a las concentraciones 75, 100, 150. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. ppm en condiciones de laboratorio.. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y PROCEDIMIENTO. Ó. Cultivo puro de Trichoderma harzianum proporcionado por el Laboratorio. AC I. . N. 2.1 Material de estudio:. IC. de Fitopatología del Departamento Académico de Microbiología y. M UN. Parasitología de la Facultad de Ciencias Biológicas Universidad Nacional de Trujillo (anexo 01).. Insecticida DOMINEX® 100EC, cuyo principio activo es la. CO. . Y. alfacipermetrina (anexo 02).. IC. Resiembra y propagación del cultivo de T. harzianum reactivado:. ÁT. 2.2.1. A. 2.2 Procedimiento:. RM. A partir del cultivo puro de T. harzianum se sembró por puntura en tres tubos con Agar Papa Dextrosa (APD), el cual se incubó a 25ºC durante. FO. 7 a 10 días, y se obtuvo un cultivo joven (anexo 03); luego a partir de. IN. este cultivo joven obtenido, se sembró en frascos planos con APD y se. Evaluación del efecto del insecticida alfacipermetrina a diferentes. EM AS. 2.2.2. DE. incubó a 25°C durante 7 a 10 días (anexo 03).. concentraciones sobre el crecimiento de T. harzianum en placa: 2.2.2.1. Preparación del medio control Agar Papa Dextrosa:. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. Para la evaluación del control se preparó 50 ml de Agar Papa Dextrosa en 1 matraz. El medio de cultivo fue esterilizado en autoclave y se dejó enfriar (anexo 04), no se le agregó el insecticida, a fin de utilizarlo como control. Luego, el medio se sirvió en 3 placas de Petri estériles (anexo 06).. 2.2.2.2.Preparación. del. Agar. mínimo. de. sales. con. alfacipermetrina: Se preparó 50 ml de Agar mínimo de sales en tres matraces. Estos fueron esterilizados en autoclave y se los dejó enfriar hasta una temperatura aproximada de 50°C (anexo 04). Se calculó el volumen que se tuvo que agregar para. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. llegar a las concentraciones 75, 100, 150 ppm (anexo 05), y con la ayuda de una micropipeta se agregó a cada matraz la. N. alfacipermetrina en cantidad suficiente para obtener las tres. AC I. Ó. concentraciones (una concentración por matraz) (anexo 06).. Luego, el medio de cultivo de cada uno de los tres matraces se. M UN. IC. sirvió en placas de Petri estériles (3 placas por cada concentración) (anexo 06).. CO. 2.2.2.3.Siembra e incubación:. A partir del cultivo puro de T. harzianum, se realizó la siembra. Y. por puntura en la parte central de las placas Petri previamente. IC. A. preparadas con Agar Papa Dextrosa (control) y Agar Mínimo. ÁT. de Sales (tres placas por concentración incluidas las placas del. RM. control) (anexo 07); las cuales se incubaron a temperatura. FO. ambiente hasta que el hongo cubra toda la superficie de la placa. IN. control.. DE. 2.2.2.4.Lectura:. A partir del primer día, y hasta el tercer día, se midió el radio. EM AS. de crecimiento micelial en centímetros (cm) del hongo en diferentes direcciones (anexo 08, 09, 10), obteniendo un radio. ST. promedio de crecimiento por día de cada concentración del. de crecimiento de T. harzianum se expresaron en centímetros y en porcentaje de crecimiento (%C), teniendo en cuenta el crecimiento alcanzado por el grupo control (100%) (anexo 12), de la siguiente manera:. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. plaguicida evaluado y del control (anexo 11). Los resultados. %𝐶 =. 𝑅𝑎𝑑𝑖𝑜 𝑝𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎 𝑝𝑟𝑜𝑏𝑙𝑒𝑚𝑎 𝑥100 𝑅𝑎𝑑𝑖𝑜 𝑝𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎 𝑡𝑒𝑠𝑡𝑖𝑔𝑜. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.2.3. Evaluación del efecto del insecticida alfacipermetrina a diferentes concentraciones sobre el crecimiento de T. harzianum. N. en un sistema aireado.. AC I. Ó. 2.2.3.1. Preparación del medio control:. Para la evaluación del control se preparó Caldo Papa Dextrosa. M UN. IC. en 1 frasco de vidrio transparente conteniendo 350 mL del medio; este fue esterilizado en autoclave y se dejó enfriar, a fin. 2.2.3.2.Preparación. del. CO. de utilizarlo como control. Caldo. mínimo. sales. con. Y. alfacipermetrina:. de. IC. A. Se preparó el medio mínimo de sales en tres frascos de vidrio. ÁT. transparentes conteniendo 350 mL del medio cada uno; estos. RM. fueron esterilizados en autoclave y se los dejó enfriar. Se. FO. agregó a cada frasco la alfacipermetrina en cantidad suficiente concentraciones 75, 100, 150 ppm. IN. para obtener las. DE. respectivamente (una concentración por frasco) (anexo 13). 2.2.3.3.Estandarización de la concentración de cultivo de T.. EM AS. harzianum:. Se utilizó twen 80 al 0.01% para desprender las esporas de T.. ST. harzianum contenidas en los frascos planos, la suspensión de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. esporas fueron recepcionadas en un matraz y aforado a 200ml con agua destilada estéril; se realizaron diluciones, y utilizando la cámara de Neubauer se determinó. la concentración de. conidias (anexo 14), para así estandarizar a la concentración de 106esporas/mL de T. harzianum (anexo 15). 2.2.3.4.Construcción del sistema aireado de agitación: Se utilizó una bureta de equipo de venoclisis, graduado de 100 ml, este fue perforado por los dos laterales en una línea recta, se unió las mangueras de 5 cm de largo aprox. en las perforaciones anteriormente realizadas a la bureta del equipo de. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. venoclisis, se colocó graduadores a cada una de las mangueras; se procedió a sellar para evitar las fugas de aire; por otro lado. N. se conectó los frascos con sulfato de cobre y cloruro de sodio al. AC I. Ó. inicio de la aireación, para evitar la contaminación; y por último se conectó las bombas de aireación (anexo 16).. M UN. IC. 2.2.3.5.Inoculación de T. harzianum e instalación del sistema aireado de agitación:. ml de la suspensión estandarizada de T.. CO. Se inoculó 7.9. harzianum (anexo 17). Luego se conectó cada frasco al sistema. Y. aireado de agitación, incubándose a temperatura ambiente. IC ÁT. 2.2.3.6.Filtración y Secado:. A. durante 10 días (anexo 17).. RM. Culminado el tiempo de incubación se procedió a la filtración. FO. del contenido de cada uno de los frascos para lo cual se utilizó. IN. papel filtro previamente pesado y un equipo de filtración al. DE. vacío (anexo 18), luego cada papel filtro con el micelio suspendido fue colocado en una placa de Petri previamente. EM AS. pesada y fue llevado a la estufa, en donde se dejó secar a 80°C durante 14 horas (anexo 19).. ST. 2.2.3.7.Obtención de resultados:. analítica cada placa de Petri con su respectivo contenido (anexo 19), y descontando el peso de la placa y el papel filtro; obteniéndose el peso seco del micelio en el control y en cada concentración. evaluada. (anexo. 20),. expresándose. los. resultados en gramos y porcentaje, teniendo en cuenta el peso seco del control (100 %) (anexo 21).. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. Después de las 14 horas en la estufa, se pesó en una balanza. 2.2.4. Evaluación. de. la. degradación. de. alfacipermetrina. por. Cromatografía en Capa Fina:. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.2.4.1.Preparación de la muestra: Consistió en una dilución de las muestras en acetona, seguida se colocó una gota de la. N. de una homogenización;. AC I. Ó. alfacipermetrina (control) y una gota de cada una de las. evaluaciones de 75, 100, 150 ppm, en línea recta distantes entre. M UN. IC. sí, sobre una misma placa de alúmina a una distancia de 1cm de la base de la placa; posteriormente se colocó en un frasco con. CO. una solución eluyente y se deja que este ascienda por capilaridad (anexo 22).. Y. 2.2.4.2.Lectura:. IC. A. Transcurrido el tiempo dentro del frasco la placa fue colocada. ÁT. dentro de otro frasco con revelador (anexo 22), y se procedió a. RM. realizar la lectura de la placa de alúmina en base al cálculo de. FO. la relación entre las distancias recorridas por el soluto y por el. IN. eluyente desde el origen de la placa (Rf) (anexo 23).. DE. 2.2.5. Análisis de Datos:. Los datos fueron procesados en base a la prueba de Análisis de. EM AS. Varianza Unidireccional (ANAVA), y Post ANAVA según el. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. paquete estadístico SPSS v. 22(anexo 24 y 25).. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC I. Ó. N. RESULTADOS. CO. M UN. crecimiento a la concentración de 150 ppm de alfacipermetrina.. IC. En la Fig 1. se observa que hay crecimiento T.harzianum presentó su mayor. Y. En la Fig 2. el crecimiento lineal en porcentaje más elevado de T.harzianum fue. ÁT. IC. A. a 150 ppm, con un 52.40% respecto al control.. RM. En la Fig 3. se observa el porcentaje de peso seco más alto de T.harzianum se. FO. obtuvo en la concentración de 150 ppm, con un 52% de crecimiento respecto al. En la. DE. IN. control.. Fig 3. se presentan dos resultados de porcentaje de peso seco. EM AS. estadísticamente iguales, en las concentraciones de 100 ppm y 75 ppm con un. ST. porcentaje de 44.34% y 37.26% respectivamente.. SI. En la figura 4. se visualiza en la placa de lúmina solo la presencia de la banda. DI. RE. CC. IO. N. DE. de la muestra del control.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(23) DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Fig 1. Crecimiento lineal de T.harzianum en diferentes concentraciones de. IO. N. alfacipermetrina; a. 0 ppm de alfacipermetrina; b. 75 ppm de alfacipermetrina;. DI. RE. CC. c. 100 ppm de alfacipermetrina; d. 150 ppm de alfacipermetrina.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(24) M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. a a. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. a. IC. A. Y. CO. a. ST. Fig 2. Crecimiento lineal en porcentaje de T.harzianum frente a tres. DE. SI. concentraciones de alfacipermetrina.. DI. RE. CC. IO. N. (a): p<0.05. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(25) M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. a b. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. b. IC. A. Y. CO. a. Fig 3. Porcentaje de Peso seco de T.harzianum frente a tres concentraciones de. N. DE. SI. alfacipermetrina.. (b): p>0.05. DI. RE. CC. IO. (a): p<0.05. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(26) DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. Fig 4. Corrido en placa de lúmina de las muestras evaluadas.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN. Ó. N. Como se conoce Trichoderma al igual que otros hongos encuentran diferentes fuentes. AC I. de nutrientes, para obtener su energía y llevar acabo sus diferentes funciones. A. IC. pesar de ello los azúcares son la fuente de carbono preferida; y obtienen el nitrógeno. M UN. de proteínas o de los productos de degradación de estas. En el caso del género Trichoderma sp. este es capaz de degradar sustratos muy complejos y emplearlos para. CO. su crecimiento gracias al gran complejo enzimático que posee,31,45,46; es por eso que el. Y. crecimiento del género Thichoderma se ve favorecido por la presencia de materia. A. orgánica u otros elementos que le proporcionen una fuente de carbono y. ÁT. IC. nitrógeno45,47, como es el caso del insecticida alfacipermetrina.. RM. En evaluar el crecimiento de T. harzianum; en un medio donde la única fuente de. FO. carbono y nitrógeno es la alfacipermetrina, se observó que en todas la. IN. concentraciones evaluadas el hongo presentó crecimiento, aunque este crecimiento varió , según la concentración del insecticida (figura 1); comparando los resultados. DE. obtenidos en porcentajes (figura 2),se observó que el crecimiento en la concentración. EM AS. de 75 ppm se presentó en un 30.54% respecto al control ,mientras que en la concentración 100 ppm y 150 ppm presentaron un crecimiento de 41.62% y 52.40%. ST. respectivamente; esto nos muestra que el crecimiento de T. harzianum fue. SI. directamente proporcional a la concentración presente del plaguicida, llegando a. DE. superar el 50% del crecimiento total en la placa control , como se observó en la concentración de 150ppm; al realizar el análisis estadístico se encontró que todos los. IO. N. crecimientos obtenidos a las diferentes concentraciones del insecticida, incluida la del. CC. control, presentan diferencia significativa con un p<0.05; lo que significa que la. RE. diferencia en crecimiento en relación a la concentración de la alfacipermetrina es real;. DI. estos resultados coinciden con los resultados obtenidos por Omar, 1998 en donde se demostró que T. harzianum es capaz de utilizar el insecticida organofosforado clorpirifos 48,49,50. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Con respecto a los resultados del peso seco evaluado en las tres concentraciones se. respectivamente; y en la. Ó. en porcentaje de 37.26% y 44.34%. AC I. un crecimiento. N. observa que el peso seco obtenido en las concentraciones de 75 y 100 ppm presentó. concentración de 150 ppm, logró alcanzar un 52% de crecimiento respecto al control. M UN. IC. (figura 3); mientras que en el análisis estadístico los resultados de las concentraciones de 75 y 100 ppm, fueron iguales, con una diferencia significativa con p>0.05. En esta. CO. evaluación se observa que hay bajo aumento de T. harzianum y esto se pudo deber a. Y. que esta especie actúa de manera lenta en medios líquidos51,52,53.. IC. A. Evaluando los resultados del crecimiento de T. harzianum en medio sólido como en. ÁT. medio líquido, se evidencia que si hubo degradación del producto alfacipermetrina,. RM. el cual se utilizó como fuente de carbono para liberar energía y llevar a cabo su. FO. crecimiento, en donde el desarrollo se debió a un metabolismo oxidativo ya que poseen una gama extraordinaria de enzimas líticas que excretan al exterior por el. DE. IN. ápice de las hifas y que les permite hidrolizar y asimilar diversos sustratos 54,55; además puesto que es un compuesto. con estructura compleja halogenada9,. la. EM AS. degradación pudo realizarse a nivel de los grupo halógenos presentes en su cadena ya que según Van Leeuwen et al. 1997, T. harzianum es una especie que posee enzimas. SI. ST. con la capacidad de reaccionar con grupos halógenos 42,56.. DE. Por otro lado según Ezzi y Lynch 200251, Trichoderma posee enzimas como la rodanasa y cianuro hidratasa, por lo que se sugiere que en esta degradación pudo darse. IO. N. lugar otra reacción a nivel del grupo ciano presente en la molécula compleja de. CC. alfacipermetrina; coincidiendo así con otras investigaciones en donde se demostró. RE. que para el caso específico de muchas cepas de T. harzianum, la gran capacidad que. DI. tiene para degradar diferentes compuestos52,57,58.. Sin embargo, puesto que T. harzianum creció en un medio mínimo de sales donde la única fuente de carbono y nitrógeno fue la alfacipermetrina (Fig. 1, 2, 3); se buscó. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. confirmar la ausencia de este químico en el medio, para lo cual se realizó la prueba analítica de Cromatografía en capa fina59,60, en donde se observó la presencia de una. N. banda para la muestra del control, mientras que en las evaluaciones de las. AC I. Ó. concentraciones de 75, 100, 150 ppm no presentaron bandas (Fig. 4) ; y por lo tanto no se registró presencia del producto, lo que nos confirmó que el insecticida fue. M UN. IC. empleado como sustrato por T. harzianum.. Si bien es cierto estas pruebas se realizaron en condiciones controladas, es necesario. CO. evaluar la respuesta de T. harzianum en campo, debido a que los resultados obtenidos. Y. constituyen un aporte para el posible empleo de T. harzianum en campos donde se. IC. A. aplica el insecticida alfacipermetrina, agregándose así otra característica más a este. ÁT. hongo además de su actividad antagónica sobre hongos y nematodos fitopatógenos, y. RM. su capacidad de estimular el crecimiento radicular del vegetal, lo cual potencia este microorganismo al ojo de los productores agrícolas ; ya que no solo permitiría la. FO. obtención de productos vegetales de alta calidad si no también ayudaría a disminuir. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. los residuos tóxicos presentes en el ambiente.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIÓN. N. . AC I IC. ppm, se incrementa el crecimiento de Trichoderma harzianum. Ó. Al incrementar la concentración de alfacipermetrina, en el rango de 75 a 150. . M UN. Trichoderma harzianum es capaz de degradar la alfacipermetrina, a las. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. concentraciones 75, 100, 150 ppm, en condiciones de laboratorio.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RECOMENDACIONES . N. Debido a que la prueba analítica de Cromatografía en capa fina no permitió. AC I. Ó. determinar con exactitud la cantidad, los compuestos en los que se degrado la. alfacipermetrina; se recomienda realizar una prueba de Cromatografía líquida. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. de alta eficiencia (HPLC).. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. Ó. N. 1. Sáenz Díaz M. Principales Insectos y Hongos Fitopatógenos. AC I. económicamente importantes desde 1970 hasta 1999 en Cuba.. IC. Fitosanidad 2003; 7(1): 55-59.. M UN. 2. Rey M, Delgado J, Rincón A, Limón C, Benítez T. Mejora de cepas de Trichoderma para su empleo como biofungicidas. Rev Iberoam. CO. Micol [revista en Internet] 2000 [acceso 15 de abril de 2015]; 17: [S31-S36]. Disponible en: http://www.reviberoammicol.com/2000-. A. Y. 17/S31S36.pdf. IC. 3. Centro de Educación y Tecnología Fundación para la Innovación. ÁT. Agraria. Manual de Producción y utilización de Trichoderma spp.;. RM. Santiago de Chile septiembre; 2004.. FO. 4. Molina G, Zaldúa S, González G, Sanfuentes E. Selección de. IN. hongos antagonistas para el control biológico de Botrytis cinerea en. DE. viveros forestales en Chile. Bosque [revista en Internet] 2006. [acceso 13 de abril de 2015]; 27(2): [126-134]. Disponible en:. EM AS. http://www.scielo.cl/pdf/bosque/v27n2/art07.pdf. 5. Pino N, Hamleth V. Ethnobotany of Four Black Communities of the. ST. Municipality of Quibdo, Choco – Colombia [revista en Internet]. SI. 2004 [acceso 13 de abril de 2015]; 17(2): [S61-S69]. Disponible en:. DE. http://www.lyonia.org/wview- Article.php?articleID=312.. DI. RE. CC. IO. N. 6. Zavaleta-Mejía, E. 1994. Control biológico de fitopatógenos. Pag. 115-125. In: R. Alatorre R. y A.W. Guzmán F. (eds.). Memorias V Curso de Control Biológico. Sociedad Mexicana de Control Biológico, México.. 7. Kopplin M. Evaluación de riesgos y restauración ambiental. The University of Arizona. EE.UU, 2004. 8. Angulo, E.M. (2009). Armenta, R.E., García, E.R., Carrillo, F.J., Salazar, V.E., Valdez, T.J. (2009). “Extractos de semilla Swietenia 20. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. humilis zucc. Con actividad antifúngica en Rhizopus stolonifer Vuill”, Revista Mexicana de Fitopalogía, 27(2), 84-92.. N. 9. Ficha técnica de Dominex 100 EC. Insecticida concentrado. Farmagro. S.A.. Disponible. AC I. Ó. emulsionante Marca Registrada por Grupo FMC. Distribuido por. en:. M UN. IC. http://sinat.semarnat.gob.mx/dgiraDocs/legamb/Dominex%20100% 20CE_MSDS.pdf. CO. 10. Devine GJ, Eza D, Ogusuku E, Furlong MJ. Uso de insecticidas: contexto y consecuencias ecológicas. Rev Peru Med Exp Salud por. plaguicidas. Anales. A. A. Intoxicación. Sis. San. IC. 11. FERRER,. Y. Pública. 2008; 25(1): 74-100.. ÁT. Navarra [online]. 2003, vol.26, suppl.1, pp. 155-171. ISSN. 12. Dirección. General. RM. 1137-6627.. de. Epidemiología,. Red. Nacional. de. FO. Epidemiología (RENACE). Reporte de vigilancia epidemiológica de. IN. riesgos ambientales Perú 2008. Lima: Ministerio de Salud; 2008.. DE. 13. Nicholls Estrada CI. Control biológico de insectos: un enfoque. EM AS. agroecológico. Medellín: Editorial Universidad de Antioquia; 2008. 14. Tahía B., Ana M., Rincón M., Carmen L., Antonio C. Codón. Biocontrol mechanisms of Trichoderma strains. Rev International. ST. Microbiology (2004) 7:249-260.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. 15. Andrews KL. Latin American research on Spodopterafrugiperda (Lepidoptera: Noctuidae). Fla. Entomol. 1988; 71(4): 630-653.. 16. Andrews KL. The whorlworm, Spodopterafrugiperda, in Central America and neighboring areas. Fla.Entomol. 1980; 63(4): 456-467. 17. Butt, T. M.; C. Jackson; N. Magan: «Introduction-Fungal Biocontrol Agents: Progress, Problems and Potential»,Fungi as Biocontrol Agents, Chapter 1, CAB International, Inglaterra, 2001, pp.1-8. 18. Izzeddin A N,Medina T L. Efecto del control biológico por antagonistas sobre fitopatógenos en vegetales de consumo humano.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Revista de la Facultad de Ciencias de la Salud 2011; 15(3):8-12. 19. Zhang C, Druzhinina I, Kubick CP, Xu T. Trichoderma biodiversity. N. in China: evidence for a north to southern distribution of species in. AC I. Ó. East Asia. FEMS Microbiol Lett. 2005; 251: 251-257.. 20. Martínez B, Infante D, Reyes Y. Trichoderma spp. y su función en. M UN. IC. el control de plagas en los cultivos. Rev Protección Veg 2013; 28(1): 1.. CO. 21. Stefanova M, Leiva A, Larrinaga L, Coronado MF. Actividad metabólica de cepas de Trichoderma spp para el control de hongos. Y. fitopatógenos del suelo. Rev Fac Agron 1999; 16: 509-516.. IC. A. 22. Franco Ortellado BM, Orrego Fuente AL. Compatibilidad in vitro de. ÁT. aislados nativos de Trichoderma spp. con fungicidas para el. RM. tratamiento de semillas. Investig Agrar 2013; 15(1):15-22.. FO. 23. Harman GE, Howell CR, Viterbo A, Chet I, Lorito M. Trichoderma. DE. 2004; 2: 43-56.. IN. species-opportunistic, avirulent plant symbionts. Nat Rev Microbiol. 24. Druzhinina I, Kubicek CP. Species concepts and biodiversity in. EM AS. Trichoderma and Hypocrea: from aggregate species to species clusters. J Zhejiang. 2005; 6B: 100-112. ME,. Herrera-Estrella. A,. Peña-Cabriales. JJ.. ST. 25. Ávila-Miranda. SI. Colonization of the rhizosphere, rhizoplane and endorhiza of garlic. DI. RE. CC. IO. N. DE. (Allium sativum L.) by strains of Trichoderma harzianum and their capacity to control allium white-rot under field conditions. Soil Biol Biochem 2006; 38: 1823-1830.. 26. Brian PW. Production of gliotoxin by Trichoderma viride. Nature 1944; 154: 667-668. 27. Di Pietro A, Lorito M, Hayes CK, Broadway RM, Harman GE. Endochitinase from Gliocladium virens: Isolation, characterization and synergistic antifungal activity in combination with gliotoxin. Phytopathology 1993; 83: 308-313.. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 28. Weil J, Westgate P, Kohlmann K, Ladisch MR. Cellulose pretreaments of lignocellulosic substrates. Enzyme Microbiol. N. Technol 1994; 16: 1002-1004.. AC I. Ó. 29. Ousley MA, Lynch JM, Whipps JM. Potential of Trichoderma spp.. as consistent plant growth stimulators. Biol Fertil Soils 1994; 17: 85-. IC. 90.. M UN. 30. Pečiulytė D. Isolation of cellulolytic fungi from waste paper gradual. CO. recycling materials. Ekologija 2007; 53: 11-18.. 31. Kleifeld O, Chet I. Trichoderma harzianum-interaction with plants. Y. and effect on growth response. Plant Soil 1992; 144: 267-272. Unterman. K.. Evaluating. A. MJR,. bioremediation:. IC. 32. Shannon. ÁT. Distinguishing fact from fiction. Annu Rev Microbiol 1993; 47:. RM. 715-738.. FO. 33. Alexander M. Biodegradation of chemical of environmental. IN. concern. Science 1981; 211: 132-138.. persistence. DE. 34. Das AC, Chakravarty A, Sukul P, Mukherjee D. Influence and of. phorate. and. carbofuran. insecticides. on. EM AS. microorganisms in rice field. Chemosphere 2003; 53: 1033-1037. 35. Bixby MW, Bousch GM, Matsumura F. Degradation of dieldrin to. ST. carbon dioxide by soil fungus Trichoderma koningii. Bull Environ. SI. Contam Toxicol 1971; 64: 491-494.. DI. RE. CC. IO. N. DE. 36. Snedeker SM. Pesticides and breast cancer risk: a review of DDT, DDE, and dieldrin. Environ Health Perspect 2001; 109: 35-47.. 37. Matsumura F, Bousch GM. Degradation of insecticides by a soil fungus Trichoderma viride. J Econ Entomol 1968; 61: 610-612. 38. Kredics L, Antal Z, Manczinger L, Szekeres A, Kevei F, Nagy E. Influence of Environmental Parameters on Trichoderma Strains with Biocontrol Potential. Food Technol Biotechnol 2000; 41(1):37–42. 39. Zayed SM, Mostafa IY, Farghaly MM, Attaby HS, Adam YM, Mahdy FM. Microbial degradation of trifluralin by Aspergillus. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. carneus, Fusarium oxysporum and Trichoderma viride. J Environ Sci Health B 1983; 18: 253-67.. N. 40. Kutz FW, Wood PH, Bottimore DP. Organochlorine pesticides and. AC I. Ó. polychlorinated biphenyls in human adipose tissue. Rev Environ Contam Toxicol 1991; 120: 1-82.. M UN. IC. 41. Cserjesi AJ, Jhonson EL. Methylation of pentachlorophenol by Trichoderma virgatum. Can J Microbiol 1972; 18: 45-49.. CO. 42. Coque JJR, Alvarez-Rodriguez ML, Larriba G. Characterization of an inducible chlorophenol O-methyltransferase from Trichoderma. Y. longibrachiatum involved in the formation of chloroanisoles and. ÁT. Microbiol 2003; 9: 5089-5095.. IC. A. determination of its role in cork taint of wines. Appl Environ. RM. 43. Montiel AM, Fernández FJ, Marcial J, Soriano J, Barrios-González. FO. J, Tomasini A. A fungal phenoloxidase (tyrosinase) involved in. IN. pentachlorophenol degradation. Biotechnol Lett 2004; 26: 1353-. DE. 1357.. 44. Omar SA. Availability of phosphorus and sulfur of insecticide origin. EM AS. by fungi. Biodegradation 1998; 9: 327-336. 45. Bulluck III, L. R.; Brosius, M.; Evanylo, G. K.; Ristaino, J. B. 2002.. ST. Organic and synthetic fertility amendments influenc soil microbial,. SI. physical and chemical properties on organic and conventional farms.. DE. Applied Soil Ecology 19: 147-160.. DI. RE. CC. IO. N. 46. Alejandro Colina, Alexis Ferrer y Lauris Urribarrí. Cellulase production by Trichoderma reesei Rut C-30 from different cellulosic substrates. Rev. Téc. Ing. Univ. Zulia 2009; 32(2): 152-159.. 47. Avila, De M. C.; Gutiérrez, A. 2000. Biocontrol de Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary en lechuga (Lactuca sativa L.). Fitopatología Colombiana 16(1-2): 172-179. 48. Alexander, M. 1971. Microbial Ecology. John Wiley & Sons, Inc. New York, USA. 511 p.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 49. Howell, C. R. (2003). Mechanism employed by Trichoderma species in the biological control of plant diseases: The history and. N. evolution of current concepts. Plant Dis. 87: 4-10.. AC I. Ó. 50. Rosalba A.D., Alejandro A., Ronald F.C., Juan José P.C., El género fúngico Trichoderma y su relación con contaminantes orgánicos e. M UN. IC. inorgánicos. Rev. Int. Contam. Ambient. 2009; 25 (4): 257-269.. 51. Lynch J.M. y Moffat A.J. (2005). Bioremediation-prospects for the. CO. future application of innovative applied biological research. Ann. Appl. Biol. 146, 217-221.. Y. 52. Harman, G., Howell, C.R., Viterbo, A., Chet, I. y Lorito,M.. ÁT. Rev. Microbiol. 2: 43-56 (2004).. IC. A. Trichoderma species-opportunistic, avirulent plant symbionts. Nat.. RM. 53. Gomes I., Gomes J., Steiner W., Esterbauer H. “Production of. FO. cellulase and xylanase by a wild strain of Trichoderma viride”.. C.P.. y. Harman,. G.E.. (Eds.).. Trichoderma. and. DE. 54. Kubicek,. IN. Appl. Microbiol. Biotechnol. Vol. 36 (1992) 701- 707.. Gliocladium, vols. 1 y 2. Taylor and Francis (1998).. EM AS. 55. Kaya F., Heitmann J., Joyce T. “Cellulose binding to cellulose fibers in high shear fields”. J. Biotechnol. Vol. 36 (1994) 1-10.. ST. 56. María S.V. y María N.Z., Producción de Conidios de Trichoderma. SI. Harzianum Rifai en dos Medios de Multiplicación Fitosanidad. DE. 15(4); (2011):215-221.. DI. RE. CC. IO. N. 57. Ministerio de Salud de la Nación. Plan Nacional de Gestión de Plaguicidas de uso sanitario. Argentina. 2005 Especificaciones para pesticidas utilizados en Salud Publica Organización Mundial de la Salud,. División. de. Enfermedades. Evaluación. de. Tropicales. Esquema. de. Pesticidas1. www.who.int/ctd/whopes/specifications_and_methods.htm CIPEIN, Centro Colaborador de OMS para Control de Calidad de plaguicidas.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 58. Ezzi M. y Lynch J.M. (2002). Cyanide catabolizing enzyme in Trichoderma spp. Enzyme Microbiol. Technol. 31, 1042-1047.. N. 59. Perez C. Ruth. Estudio de validación de la Metodología para la. AC I. Ó. determinación de Vitamina A en Alimentos infantiles instantáneos por Cromatografía Líquida de alto rendimiento (HPLC). Rev. perú.. M UN. IC. med. exp. salud pública, 2000, vol.17, no.1-4, p.26-29. ISSN 17264634.. CO. 60. Bu-cuy, C. & C. FRAr-rINí 1980. Quantitative determination of components in essential oils: delermination of pulegone in. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. peppermint oils. 1 Clzromatogr 190: 471-474.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(39) ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ANEXOS. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(40) DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. EM AS. Anexo 01: Cultivo puro de T. harzianum proporcionado por el laboratorio de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. Fitopatología. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(41) SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE. Anexo 02: a. Insecticida DOMINEX® 100EC, cuyo principio activo es la. DI. RE. CC. IO. N. alfacipermetrina.. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(42) CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Y. a. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. O R G A NI ZA CI Ó N D E LA S b N O A R CI G O Anexo 03: Resiembra y Apropagación del cultivo de T. harzianum reactivado: a. N NI Cultivo joven en frascos EScon 5 ml Agar Papa Dextrosa (APD); b. Cultivo de T. ZA U harzianum propagado en frascos planos con APD. CI NI Ó D N O D S E PA LA R S A N LA A A CI 30 G O RI Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia N 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite C http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. ES UL.
(43) FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. de sales, para las evaluaciones.. IN. Anexo 04. : Matraces con medios Agar Papa Dextrosa para el control y Agar mínimo. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 05. Cálculos realizados para la determinación de las concentraciones utilizadas para DOMINEX® 100EC (Alfacipermetrina), en los medios sólidos. AC I. Ó. N. (AMS).. M UN. IC. Ejemplo: DOMINEX® 100EC – Alfacipermetrina (75ppm). Principio Activo: Alfacipermetrina----------100 g/L. CO. Dosis de campo de DOMINEX® 100EC: a) 150 mL. de producto----------200 L. de Agua.. A. ÁT. IC. c) 300 mL. de producto----------200 L. de Agua.. Y. b) 200 mL. de producto----------200 L. de Agua.. RM. Trabajando con la primera dosis de campo, hacemos los cálculos de la cantidad del. EM AS. DE. IN. FO. principio activo (Alfacipermetrina) presente.. N. DE. SI. ST. Conversión a partes por millón (ppm):. CC. IO. Entonces, si se quiere preparar 50 mL. de medio de cultivo sólido(AMS), a la. DI. RE. concentración de 75 ppm, se debe añadir esta cantidad de producto:. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(45) CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 06. a. Adición de la alfacipermetrina a diferentes concentraciones al medio. DI. RE. mínimo de sales; b. Preparación de los medios en placas de Petri.. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(46) ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. SI. Anexo 07. a. Siembra por puntura a partir de una cultivo joven de T. harzianum; b.. DI. RE. CC. IO. N. DE. Placas de Petri sembradas con T. harzianum.. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(47) N. IO. DE. 3. 2. 1. DÍAS. CONTROL APD Diámetro (cm) Prom. REPETICIÓN Diámetr R1 R2 R3 o(cm) 4.4 4.3 4.4 4.5 4.2 4.3 4.35 4.5 4.3 4.4 4.4 4.2 4.3 6.8 6.6 6.6 6.7 6.7 6.6 6.70 6.7 6.7 6.7 6.9 6.6 6.8 8.6 8.8 8.5 8.5 8.7 8.6 8.62 8.5 8.6 8.5 8.7 8.6 8.8 4.31. 3.35. 2.18. Prom. Radio (cm). ENSAYO 1. SALFACIPERMETRINA (75 ppm) DOSIS (100 ppm) DOSIS (150 ppm) T EM(cm) Prom. Prom. Diámetro Diámetro (cm) Prom. Prom. Diámetro (cm) Prom. Prom. DÍAS REPETICIÓN Diámetro Radio DÍAS REPETICIÓN Diámetr Radio DÍAS REPETICIÓN Diámetr Radio A R1 R2 R3S (cm) (cm) R1 R2 R3 o(cm) (cm) R1 R2 R3 o(cm) (cm) 1.1 1.1 0.9 D 1.3 1.3 1.1 1.9 1.8 1.6 E 1.1 1 1.1 1.4 1.2 1.2 1.9 1.9 1.7 1 1.03 I0.52 1 1.24 0.62 1 1.83 0.91 N 1.1 1 1 1.3 1.2 1.2 2 2 1.6 F O 1.3 1.2 1.2 1.1 0.9 1 2 1.8 1.7 R 2 2.5 2 3 4 3 M33 2.83 2.82.7 2.2 2.5 2 2.8 4 3.2 Á 2 2.20 1.10 2 2.91 1.45 2 3.38 1.69 2 2.5 2 3.1 T 3 I 2.8 3 4 3.3 C 2.1 2.6 2 3 2.8 2.9A 3 3.9 3.3 3.5 3.8 3.1 4.5 4.1 4 Y 4.6 6 5.2 3.5 3.8 3.5 4.5 4 4 C 2.10 3 4.8 5.9 5.3 5.30 2.65 3 3.61 1.80 3 4.19 O 3.6 3.8 3.6 4.5 3.9 4 M 4.84.7 5.86 5.35.2 3.6 4 3.5 4.5 4.2 4.1 UN IC AC IÓ N. SI. Anexo 08. Resultados del primer ensayo realizado para la evaluación del crecimiento de T. harzianum a concentraciones de 75, 100, 150 ppm de alfacipermetrina.. CC. RE. DI. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 35. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(48) N. IO. CC. 3. 2. 1. DÍAS. CONTROL APD Diámetro (cm) Prom. REPETICIÓN Diámetr R1 R2 R3 o(cm) 4.9 4.5 4.9 4.6 4.6 4.6 4.68 4.8 4.6 4.7 4.6 4.7 4.7 7.5 7.4 7.4 7.5 7.4 7.3 7.40 7.4 7.3 7.4 7.4 7.5 7.3 8.8 8.8 8.8 8.8 8.8 8.8 8.83 8.9 8.9 8.7 8.9 8.9 8.9 4.42. 3.70. 2.34. Prom. Radio (cm). DE. ST DOSIS (75 ppm) ENSAYO 2 DOSIS (100 ppm) DOSIS (150 ppm) EM(cm) Prom. Prom. Diámetro Diámetro (cm) Prom. Prom. Diámetro (cm) Prom. Prom. DÍAS REPETICIÓNA Diámetro Radio DÍAS REPETICIÓN Diámetr Radio DÍAS REPETICIÓN Diámetr Radio S R1 R2 R3 (cm) (cm) R1 R2 R3 o(cm) (cm) R1 R2 R3 o(cm) (cm) DE 0.9 0.9 1 1.5 1.5 1.6 2.6 2.6 2.2 0.9 0.9 1 1.6 1.5 1.7 2.5 2.6 2.2 1 0.92 I0.46 1 1.60 0.80 1 2.43 1.22 N 0.8 0.9 0.9 1.5 1.6 1.7 2.6 2.4 2.3 F O 1.6 1.6 1.8 0.9 0.9 1 2.5 2.4 2.3 RM 1.1 1.3 1.3 2.6 2.9 3.1 4.1 4.1 3.9 1.1 1.2 1.3 2.7 Á2.8 3.2 4.1 4.1 3.9 2 1.25 0.63 2 2.85 1.43 2 3.98 1.99 T 1.2 1.2 1.4 2.6 2.7 3.1 4 4 3.8 I 1.2 1.3 1.4 2.8 2.7 C3 4 4 3.8 A 1.9 2.1 1.9 4.2 4.1 4.7 Y 5.4 5.4 5.5 1.9 2 1.9 4.2 4 4.6 5.4 5.3 5.5 3 2.00 1.00 3 4.33C 2.17 3 5.42 2.71 O 2 2.2 1.9 4.2 4.2 4.7 5.3 5.3 5.6 M 5.3 5.4 5.6 2 2.2 2 4.3 4.2 4.6 UN IC AC IÓ N. SI. Anexo 09. Resultados del segundo ensayo realizado para la evaluación del crecimiento de T. harzianum a concentraciones de 75, 100, 150 ppm de alfacipermetrina.. RE. DI. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 36. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
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