Antagonismo de Trichoderma virens en el control de Rhizoctonia solani en Phaseolus vulgaris var Caupì

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(1)AR IA S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. PE. UNT. CU. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. RO. FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS ESCUELA PROFESIONAL DE AGRONOMIA. AG. Antagonismo de Trichoderma virens en el control de. TESIS. TE CA. DE. Rhizoctonia solani en Phaseolus vulgaris var. Caupì.. PARA OPTAR EL TITULO DE INGENIERO AGRONOMO. O. AUTOR :. BI B. LI. ASESOR:. Alfaro Gil, Leyddy Belu MSc. Cedano Saavedra, Carolina Esther. TRUJILLO – PERU 2019. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. DEDICATORIA. AR IA S. A Dios por brindarme su protección y guiarme en el camino, gracias Señor por permitirme culminar esta etapa.. A mis padres por su comprensión, esfuerzos, sacrificios y apoyo incondicional siempre me brindan, los amo papitos.. que. PE. CU. A mis hermanos Margarita y Percy que siempre estuvieron apoyándome en todo momento, los quiero mucho hermanitos.. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. A mis tres amores Sofía, Rafaela y Micaela que son mi motivo para seguir adelante, las amo hijitas. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(3) BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. PE. CU. AR IA S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. AGRADECIMINTOS. AR IA S. A mi asesora de tesis MSc. Cedano Saavedra Carolina, por la orientación, el apoyo en el desarrollo de esta investigación y por brindarme las facilidades para el uso de las instalaciones y el manejo de los equipos de laboratorio.. A mis cuñados Ulises Samaniego y Emilene Haro, por su apoyo y consejos.. PE. CU. A mis amigos de promoción quienes formaron parte importante en mi formación académica.. RO. A Luis Rodríguez, por facilitarme sus equipos y toda su ayuda brindada.. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. A la secretaria la Sra. Marleny Cecilla Chàvez Cruzalegui por todo su apoyo brindado.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. INDICE. DEDICATORIA .................................................................................................................... ii AGRADECIMINTOS .......................................................................................................... iv. AR IA S. INDICE .................................................................................................................................. v. PRESENTACION .............................................................................................................. viii RESUMEN ........................................................................................................................... ix. CU. ABSTRACT .......................................................................................................................... x. PE. CAPITULO I ......................................................................................................................... 1 1. INTRODUCCION .................................................................................................... 1. RO. CAPITULO II ........................................................................................................................ 7. AG. 2. MATERIALES Y MÈTODOS ................................................................................. 7 2.1 Lugar de ejecución ............................................................................................... 7. DE. 2.2 Materiales ............................................................................................................. 7 2.2.1 Material biológico................................................................................................ 7. TE CA. 2.2.2 Material de laboratorio ........................................................................................ 7 2.2.3 Equipos ................................................................................................................ 8. O. 2.2.4 Material de escritorio ........................................................................................... 8. LI. 2.2.5 Software ............................................................................................................... 8. BI B. 2.3 Métodos ................................................................................................................ 9. 2.3.1 Tipo de diseño ..................................................................................................... 9 2.3.2 Tratamientos ........................................................................................................ 9. 2.3.4 Técnicas ...................................................................................................................... 10 2.3.3. Procedimiento de la investigación ............................................................................. 11 CAPITULO III .................................................................................................................... 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................................ 13 3.1 Micoparasitismo ................................................................................................. 13 3.2 Germinación ....................................................................................................... 14. AR IA S. 3.3 Incidencia de chupadera fungosa ....................................................................... 15 CAPITULO IV .................................................................................................................... 19 4.. CONCLUSIONES ............................................................................................ 19. CAPITULO V ..................................................................................................................... 20 RECOMENDACIONES ................................................................................... 20. CU. 5.. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS .............................................................. 21. RO. 6.. PE. CAPITULO VI .................................................................................................................... 21. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. ANEXOS ............................................................................................................................. 24. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. LISTA DE TABLAS. Tabla 2. 1.Descripción de los tratamientos ........................................................................................ 9 Tabla 2. 2. Distribución de los tratamientos ....................................................................................... 9 Tabla 2. 3. Escala de evaluación de “chupadera fungosa”, según Delgado, .................................... 11. AR IA S. Tabla 3. 1. ANVA del porcentaje de germinacion de frejol Caupi ................................................. 15. Tabla 3. 2. Prueba de Tukey del porcentaje de germinación de frejol Caupì ................................... 15 Tabla 3. 3. ANVA del porcentaje de incidencia de chupadera fungosa en frijol caupì .................... 17. CU. Tabla 3. 4.Prueba de Tukey (0.05%) del porcentaje de incidencia de frijol caupi .......................... 17. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. PE. Tabla 3. 5. Determinación del porcentaje de severidad de chupadera fungosa ................................ 18. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. PRESENTACION. AR IA S. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO:. En cumplimiento a las disposiciones vigentes en el Reglamento de Tesis Universitaria de la Escuela Profesional de Agronomía, someto a su elevado criterio para su. evaluación la tesis titulada “Antagonismo de Trichoderma virens en el control de Rhizoctonia solani en Phaseolus vulgaris var. caupì” con el propósito de obtener el título. Alfaro Gil, Leyddy Belu. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. PE. CU. profesional de Ingeniero Agrónomo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. “Antagonismo de Trichoderma virens en el control de Rhizoctonia solani en Phaseolus vulgaris var. caupì”. E-mail: leyddyalfaro@hotmail.com. Asesor: MSc. Cedano Saavedra carolina. E-mail: carolina_cedano@hotmail.com. AR IA S. Autor: Alfaro Gil Leyddy Belu. CU. RESUMEN. Este estudio tuvo como objetivo determinar el antagonismo de Trichoderma virens en el. PE. control de Rhizoctoni solani en Phaseolus vulgaris var.Comùn. Se utilizó dos cepas de T. virens y una cepa de R. solani las que fueron evaluadas en forma individual y luego. RO. confrontadas, más un testigo absoluto. Los tratamientos fueron distribuidos empleando un diseño completamente al azar, con 6 tratamientos y diez repeticiones. Se utilizó para los. AG. enfrentamientos el método de siembra dual en placas con medio de cultivo papa, dextrosa y agar. A la colonización total de las placas se prepararon montajes para observar al microscopio óptico si había o no micoparasitismo. Posteriormente, las placas se cubrieron. DE. con arena estéril y por placa se sembró 8 semillas de frejol var. caupì, se rego constantemente con agua estéril y se evaluó a los 25 días el porcentaje de germinación , la incidencia y. TE CA. severidad de chupadera fungosa. Los datos fueron transfomados en valores angulares y a un análisis de varianza y la prueba de Tukey. Las cepas de Trichoderma virens ejercieron un efecto antagónico sobre Rhizoctonia solani, produciendo fragmentación del micelio y micoparasitismo. El tratamiento solo con R. solani obtuvo el 5 % de germinación, y el 100%. O. de incidencia y severidad de chupadera fungosa; en los demás tratamientos la germinación. LI. fue del 100%, la incidencia fluctuó entre 1.25 y 8.75. BI B. %. y la severidad entre 0.31 a 2.8%. Estos resultados indican que T. virens puede constituirse en una alternativa sostenible para el control de R. solani.. Palabras claves: Incidencia, severidad, germinación, micoparasitismo, frijol caupi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. ABSTRACT. AR IA S. Antagonism of Trichoderma virens in the control of Rhizoctonia solani in Phaseolus vulgaris var. cowpea. AUTHOR: Alfaro Gil Leyddy Belu. E-mail: leyddyalfaro@hotmail.com. ADVISOR: MSc. Cedano Saavedra carolina. E-mail: carolina_cedano@hotmail.com. CU. The objective of this study was to determine the antagonism of Trichoderma virens in the control of Rhizoctoni solani in Phaseolus vulgaris var.cowpea. Two strains of T. virens and. PE. one strain of R. solani were used, which were evaluated individually and then compared, plus an absolute control. The treatments were distributed using a completely randomized. RO. design, with 6 treatments and 10 repetitions. The method of dual sowing in plates with potato culture medium, dextrose and agar was used for the confrontations. To the total colonization. AG. of the plates, assemblies were prepared to observe under an optical microscope whether mycoparasitism was present or not. Subsequently, the plates were covered with sterile sand. DE. and 8 seeds of var. cowpea, it was constantly irrigated with sterile water and the percentage of germination, the incidence and severity of fungal chupadera was evaluated after 25 days. The data were transformed into angular values and an analysis of variance and the Tukey. TE CA. test. Strains of Trichoderma virens exerted an antagonistic effect on Rhizoctonia solani, producing mycelial fragmentation and mycoparasitism. The treatment only with R. solani obtained 5% of germination, and 100% of incidence and severity of fungal chupadera; in the other treatments the germination was 100%, the incidence fluctuated between 1.25 and. O. 8.75%. and the severity between 0.31 to 2.8%. These results indicate that T. virens can be a. BI B. LI. sustainable alternative for the control of R. solani. Keywords: Incidence, severity, germination, mycoparasitism, cowpea beans. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. CAPITULO I 1. INTRODUCCION. AR IA S. Dentro del grupo de las fabáceas, el frejol común (Phaseolus vulgaris L.) es una de las especies cultivadas más importantes del genero Phaseolus, se conocen 55 especies, cinco de las cuales han sido domesticadas. En el frejol, existen dos grandes grupos de germoplasmas. derivados de los acervos genéticos Mesoamericano y Andino. Cada uno de estos acervos ha sido clasificado en tres razas. El acervo andino se constituyó por las razas Nueva Granada,. CU. Chile y Perú, mientras que Mesoamericano quedo integrado por las razas Jalisco, Durango. y Mesoamericana. El frejol caup’i, es uno de los cultivos más antiguos (Hernandez, 2009,. RO. PE. p.11).. Espinoza (2009, p.14) sostuvo que “el frejol común (Phaseolus vulgaris L) es una. AG. leguminosa de grano, que se siembra en todo el mundo, en América Latina se tiene la más alta producción y consumo. Además, esta leguminosa representa una fuente barata de. DE. proteínas (20 – 23%) y carbohidratos (59 – 60%), para la población de escasos recursos económicos que consume menos proteínas de otras fuentes; también, tiene importancia. TE CA. agronómica debido a que este cultivo es un excelente mejorador del suelo”.. De la gran diversidad de variedades de frejoles con que cuenta el Perú adaptados a diferentes ambientes y épocas del año; son el “caupi”, “castilla” o “chileno” y el “frejol de palo” los. O. que se han constituido en los dos tipos más demandados por los consumidores. LI. internacionales y en los principales productos agrícolas de la exportación peruana. BI B. (Valladolid et al. 1999).. Espinoza (2009, p.19) cita a Chiape (1992), quien indica que el cultivo de frejol en el Perú es considerado como uno de los cultivos de mayor importancia en la producción de alimentos básicos. Aproximadamente, el 60% de la producción es consumida en la Costa Central, teniendo mayor preferencia por el de grano amarillo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. Frecuentemente, en La Libertad, este cultivo se siembra en diferentes sectores de los distritos de Simbal, Poroto, Laredo, Huanchaco, Moche y en algunas ocasiones en los distritos de Trujillo, y Víctor Larco (Agencia Agraria Trujillo, 2013).. AR IA S. De los países que exportan este producto destacan Estados Unidos, Canadá y Myanmar, sin embargo, el Perú cuenta con ciertas ventajas comparativas que le ayudan a tener una. producción durante todo el año, por el contrario, los otros países solo producen por. temporadas; esto sin lugar a dudas abre una oportunidad de negocio para el Perú de exportar. CU. frejol castilla a países cuyo clima no le permite producir en dicha temporada (Calderón,. PE. 2016, p. 11).. La producción de frejol grano seco (incluye principalmente a las variedades canario,. RO. panamito y castilla) creció a una tasa promedio anual de 2.4% desde el 2001 al 2015, así la. AG. Producción se elevó de 86,600 toneladas (t) a 107,100 toneladas (t). Esto como resultado del incremento de las áreas cosechadas (92,900 ha al 2015) y rendimientos (1,200 t/ha), cuyas tasas de crecimiento promedio anual fueron de 1.3% y 1.1%, respectivamente. Las regiones. DE. que registraron un mayor ritmo de crecimiento de la producción fueron Huancavelica (15.2%), Huánuco (6.7%), Junín (5.4%) y Piura (4.9%), debido principalmente al incremento. TE CA. de áreas cosechadas. (Gestion, 2016).. Las enfermedades no siempre tienen una sola causa. Los síntomas que se observan en el. O. campo son producidos por la interacción de condiciones climáticas, el sistema de. LI. producción, la variedad utilizada y la presencia de residuos de siembras anteriores. BI B. contaminadas con enfermedades. Los niveles o magnitud de cada uno de éstos factores pueden favorecer el desarrollo de distintas enfermedades. El sistema de producción también incide en la presencia de enfermedades, por el efecto que tienen las diferentes formas de preparación del terreno, la densidad de siembra, y el manejo agronómico que se le da al cultivo (Araya y Hernández, 2006) citado por (Yrigoín , 2017, p.23). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. En este cultivo, una de las enfermedades de mayor importancia económica que se presenta en las etapas fenológicas de germinación y plántula es la causada por Rhizoctonia solani, enfermedad denominada chupadera fungosa que puede reducir el número de plantas por hectárea y los rendimientos. Afecta la base o cuello de las plántulas en donde se aprecian inicialmente pequeños puntos rojizos alargados que con el tiempo crecen y pueden llegar a. AR IA S. formar cancros rojizos, hundidos, oscuros que comprometen todo el diámetro del tallo, las plantas mueren y se forman pequeñas estructuras tipo costra de forma irregular de color. oscuro a negro denominados esclerotes que son estructuras de conservación (Proyecto Red. CU. de Innovación Agrícola, 2012).. PE. (Arias,et al. 2007, p.107) indica que el hongo Rhizoctonia solani, se encuentra en la mayoría de los suelos agrícolas y puede infectar una gran cantidad de especies de plantas. RO. taxonómicamente diferentes. La especie Rhizoctonia solani tiene una gran cantidad de aislamientos patogénicos. Algunos son específicos para un cultivo, como el fríjol común,. AG. mientras que otros atacan un sinnúmero de hospedantes. La severidad de la enfermedad depende del grado de humedad del suelo, su temperatura, y el estado nutricional del inóculo y de los exudados de la planta y sus raíces, los cuales estimulan el crecimiento micelial. El. DE. inóculo puede sobrevivir en el suelo asociado con los residuos de cosecha y mediante su crecimiento saprofítico en la materia orgánica. Los niveles de población en el suelo dependen. TE CA. de la presencia de un cultivo susceptible. El patógeno puede ser diseminado por el agua de riego, el material de trasplante, el viento y la semilla infectada, ser trasportado tanto interna. O. como externamente en la semilla y sobrevivir también en partículas secas de suelo.. LI. Garrido (2016, p.2) cita a Rubio (2008) quien refiere que el control de los organismos. BI B. fitopatógenos del suelo es de los más difíciles de lograr; para ello se han desarrollado prácticas culturales, control biológico y el control químico, siendo este último, el más utilizado por ser económico y eficaz en comparación a otras medidas.. Guedez, et al, 2009, citado por Garrido, 2016, p.15 indica que actualmente se emplean agentes de control biológico u organismos vivos como hongos, bacterias, virus e insectos. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. que reducen la población de insectos plagas y patógenos que afectan a los cultivos. Los hongos en particular despiertan el interés de empresas y organismos de investigación por su papel en el control de insectos y enfermedades, sin dañar el medio ambiente. Camargo, 2005, citado Tovar, 2008, p.18 refiere que Trichoderma spp, es un habitante natural del suelo, caracterizado por un comportamiento saprófito o parásito, propiedades que. AR IA S. benefician su actividad antagónica.. El género Trichoderma en su estado vegetativo presenta micelio con septos simples. Las. CU. especies son haploides y su pared está compuesta por quitina y glucano. Se reproducen. asexualmente por conidias. Presentan conidióforos hialinos ramificados, fiálides simples o. PE. en grupos, conidias de 3 a 5 μm de diámetro, generalmente ovalados, unicelulares, coloreados (usualmente verdes); de rápido desarrollo en medios sintéticos. Tiene la. RO. capacidad de producir clamidosporas en sustratos naturales que, son unicelulares, pero pueden unirse entre dos o más. Estas estructuras son de vital importancia para la. AG. sobrevivencia del género en el suelo bajo condiciones adversas. El organismo crece y se ramifica desarrollando típicas hifas, de 5 a 10 μm de ancho. (Martinez , Infante, & Reyes,. DE. 2013, p.2). TE CA. El Centro de Biotecnología Genómica (CBG) de México, implementó una estrategia de control biológico para reducir la pudrición de la raíz del frijol por Rhizoctinia solani, a partir de aislamientos nativos del hongo Trichoderma. Este tipo de control biológico se implementó para combatir la presencia de un hongo patógeno por otro que lo elimina. BI B. LI. O. naturalmente (FAO, 2011). Las especies de Trichoderma durante el proceso de micoparasitismo crecen quimiotrópicamente hacia el hospedante, se adhieren a las hifas del mismo, se enrollan en ellas frecuentemente y las penetran en ocasiones. La degradación de las paredes celulares del hospedante se observa en los estados tardíos del proceso parasítico (25), que conlleva al debilitamiento casi total del fitopatógeno. (Infante, 2009).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. Tovar (2008, p.58) en su trabajo de investigacion demostro que 5 de los 6 aislamientos de Trichoderma aplicados en la rizosfera de esquejes de clavel de la vaiedad Everest en condiciones de invernadero ejercierón. buena accion antagonista frente al fitopageno. Rhizoctonia solani. Los aislamientos control Trichoderma, T3 y T 235 ademas de mostrar una escelente capacidad de biocontrol, favorecieron el crecimiento y vigor de las plantas.. AR IA S. El hongo T. harzianum tuvo mejor actuación cuando se aplicó sobre semilla contaminada, esto se explica porque los esclerotes de Rhizoctonia solani le sirvieron de alimento para sobrevivir y multiplicarse durante el desarrollo del ciclo de la planta. Los resultados. permiten inferir que el antagonista T. harzianum ejerce un buen control de R. solani bajo. CU. condiciones de campo, protegiendo al cultivo de la enfermedad. Este antagonista puede ser usado como un componente alternativo de biocontrol dentro del manejo integrado de la. RO. PE. rhizoctoniasis de la papa (Garcia, Garcia, & Gamica, 2002).. Evaluando la capacidad antagónica de cepas de Trichoderma spp. sobre F. oxysporum, se. AG. observó que la cepa 20 (Potosí 4) obtuvo el mayor promedio de crecimiento micelial con diferencias significativas en relación con los demás tratamientos (tabla 3), a excepción de las cepas C7 (Gualmatán 3) y C14 (Puerres 2) que hacen parte del grupo de las de mayor. DE. crecimiento en términos generales. Esto debido a la capacidad antagónica de las cepas, que durante el proceso de micoparasitismo crece quimiotrópicamente hacia el hospedante, se. TE CA. adhieren a las hifas del mismo, se enrollan en ellas y las penetran. (Eraso I, Acosta R, Salazar G, & Betancourth G, 2014). O. En este estudio se probaron 73 aislamientos de Trichoderma spp. mediante ensayos in vitro. LI. que presentaron grado de micoparasitismo variable, se observó que la tasa de crecimiento. BI B. del fitopatógeno no afecta la actividad micoparasítica de las especies de Trichoderma spp., es decir, una invasión temprana del medio de crecimiento por parte del fitopatógeno no impide o compite por crecimiento con Trichoderma, por el contrario, este crecimiento micelial precoz del hongo fitopatógeno puede ser rápidamente colonizado y parasitado por Trichoderma spp. (Hoyos , Duque, & Orduz, 2008).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. Por lo expuesto el objetivo de esta investigación fue determinar el antagonismo de. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. PE. CU. AR IA S. Trichoderma virens en el control de Rhizoctonia solani en Phaseolus vulgaris var.Comùn. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. CAPITULO II 2. MATERIALES Y MÈTODOS 2.1 Lugar de ejecución. AR IA S. El presente trabajo se realizó en el laboratorio de Sanidad Vegetal de la Escuela de. Agronomía de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Nacional de. CU. Trujillo. Ubicada en Av. Juan Pablo II s/n Trujillo, La Libertad.. 2.2.1 Material biológico. RO. Cepas de Trichoderma virens. PE. 2.2 Materiales. Cepas de Rhizoctonia solani. AG.  Semillas de frijol Caupí. DE. 2.2.2 Material de laboratorio. TE CA. Placas Petri. Medio de cultivo Papa-Dextrosa-Agar Anzas de Kolle Bisturi. O. Matraz de 250ml. BI B. LI.  Vasos de precipitación de 500ml Probetas Pipetas  Algodón Cinta Parafilm Pinzas Laminas cubre y porta objetos. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. Lactofenol  Colorante azul de algodón Tijeras Papel aluminio. AR IA S. Plumones Clorox al 4% Papel toalla Bolsas de polipropileno. CU. Alcohol puro de 96%. PE. 2.2.3 Equipos  Balanza analítica. RO. Microscopio binocular Autoclave. AG. Mechero Bunsen.  Sacabocado 1cm de diámetro. DE. 2.2.4 Material de escritorio Papel bond A4. TE CA. Libreta de apuntes.  Lápiz. Computadora. O.  Cámara fotográfica. LI. Calculadora. BI B. Memoria USB 4 GB. 2.2.5 Software Programa SPSS Excel. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. 2.3 Métodos. 2.3.1 Tipo de diseño. 2.3.2 Tratamientos. Tabla 2. 1.Descripción de los tratamientos. CU. En la tabla 2.1 se describen los tratamientos en estudio:. AR IA S. Los tratamientos fueron distribuidos empleando un diseño completamente al azar (DCA) con 5 tratamientos y 10 repeticiones por tratamiento. Los datos obtenidos fueron comparados mediante el análisis de varianza y la prueba de Tukey al 0.05 de significancia.. Descripción. T0. Testigo absoluto: Placas con arena estéril + siembra de frejol Caupí. T1. Testigo :Rhizoctonia solani + arena estéril y siembra de frejol Caupí. T2. T. virens cepa 1+ arena estéril Caupí. T3. T.virens cepa 2+ arena estéril y siembra de frejol Caupí. RO. AG. DE. y siembra de frejol. T. virens cepa 1 vs R. solani + arena estéril y siembra de frejol Caupí. TE CA. T4. PE. Trat.. T5. T. virens cepa 2 vs R. solani+ arena estéril y siembra de frejol Caupí. O. En la tabla 2.2 se muestra la forma como estuvieron distribuidos los tratamientos:. LI. Tabla 2. 2. Distribución de los tratamientos T2R5. T3R2. T4R10. T5R6. T2R9. T3R4. T0R5. T5R7. T1R4. T3R8. T2R3. T4R2. T3R7. T1R8. T5R5. T3R10. T2R1. T0R5. T5R10. T5R3. T0R2. T3R6. T1R5. T2R2. T4R6. T0R10. T5R1. T4R1. T2R7. T3R3. T4R9. T5R2. T0R9. T4R5. T2R10. T5R9. T04R. T4R3. T1R9. T2R4. T4R7. T1R3. T5R8. T4R8. T1R9. T2R8. T3R1. T0R7. T1R7. T2R3. T5R4. T1R2. T0R8. T1R6. T4R4. T3R9. T1R1. T2R6. T3R5. BI B. T0R3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. 2.3.4 Técnicas. 2.1.1.1. Micoparasitismo. AR IA S. De la zona de interacción de las confrontaciones entre patógeno y antagonista en el medio PDA, se analizó muestras mediante microscopia de acuerdo al siguiente método: se realizó cortes de agar de 2 x 2 mm de la zona de. interacción entre Trichoderma virens y R. solani, luego esta porción de agar. CU. se trasladó sobre una lámina portaobjeto con lactofenol luego se cubrió con. Germinación. RO. 2.1.1.2.. PE. la laminilla y se observó al microscopio óptico.. AG. En las placas donde se sembró el frijol caupì se contó el número de semillas germinadas por placa en todas las repeticiones por tratamiento, se promedió. Incidencia. TE CA. 2.1.1.3.. DE. y obtuvo el porcentaje (Figura 7.6).. Se contó el número de plantas afectadas por chupadera fungosa y se expresó. LI. O. en porcentaje.. BI B. 2.1.1.4.. Severidad. Para determinar la severidad se utilizó la siguiente formula. S= n (G0)+n (G1)+n (G2)+n (G3)+n (G4). X 100. N(G4) Para lo cual se procedió a extraer las plántulas que germinaron en cada placa, así como también las semillas que no germinaron, posteriormente. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. fueron lavadas y se evaluaron los síntomas de acuerdo a la siguiente escala (Tabla 2.3 y figura 7. 7 y 7.8):. . Grado. Descripción. AR IA S. Tabla 2. 3. Escala de evaluación de “chupadera fungosa”, según Delgado,. Sin daño en plántula o semilla. 1. Lesiones leves que comprometen el 25 % del diámetro del cuello de la plántula.. 2. Lesiones medias que corresponden al 50% del diámetro del cuello de la plántula y ausencia de hojas. 3. Lesiones graves que comprometen el 75% del diámetro del cuello de plántula y ausencia de hojas. 4. Planta muerta o pudrición de semilla. AG. RO. PE. CU. 0. DE. 2.3.3. Procedimiento de la investigación. TE CA.  Obtención de la cepa de Trichoderma virens. El Laboratorio de Sanidad Vegetal cuenta con dos cepas endófitas de Trichoderma virens (Figura 7.2 y 7.4) obtenidas de Ananas comosus. LI. O. procedente de Poroto que han sido identificadas a nivel molecular.. BI B.  Obtención y aislamiento de Rhizoctonia solani. En la micoteca del Laboratorio de Sanidad Vegetal se cuenta con una cepa de Rhizoctonia solani obtenida de frejol con síntomas de “chupadera fungosa” (Figura 7.1 y 7.5).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones.  Efecto de Trichoderma virens sobre Rhizoctonia solani. Para determinar el efecto de T. virens sobre R. solani se realizó una prueba de enfrentamiento dual en placas Petri con medio de cultivo a base de papa, dextrosa y agar (PDA) sembrado un disco de 0.5 cm. de agar con micelio. AR IA S. de T.virens a la izquierda de la paca y al lado derecho de la placa un disco de 0.5 cm. de agar con R. solani. Este procedimiento se repitió en 10 placas por cada cepa y de igual forma se sembró por separado en un mismo. número de placas solo T. virens y solo R. solani como referente. Este. CU. material se incubó a temperatura ambiente y se observó todos los días y midió con una regla graduada el crecimiento del micelio. Cuando los. PE. testigos llenaron la placa se procedió a extraer muestras para observar al. RO. microscopio óptico si presentaban micoparasitismo o no.. AG. Posteriormente, se llenó las placas con arena estéril y se sembró 8 semillas de frejol por placa se regaron con agua estéril y a los 25 días se procedió. BI B. LI. O. TE CA. DE. extraer las plantas y evaluar si tenían síntomas de chupadera fungosa.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. CAPITULO III 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN. AR IA S. 3.1 Micoparasitismo. Las dos cepas de Trichoderma virens evaluadas desarrollaron gran cantidad de micelio y esporas invadiendo totalmente la superficie de la placa Petri. CU. cubriendo así el área donde se desarrolló Rhizoctonia solani (Figura 3.1). Al observar en el microscopio la zona de confrontación de cada tratamiento, se. PE. evidencio invasión y lisis del micelio del hongo fitopatógeno Rhizoctonia. O. TE CA. DE. AG. RO. solani (Figura 3.2).. BI B. LI. Figura3. 1. Extracción de muestras de la zona de confrontación. Figura3. 2. Observación microscópica del enfrentamiento. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. 3.2 Germinación. En la figura 3.3 se muestran los datos correspondientes al porcentaje de germinación obtenido en cada tratamiento, se puede apreciar que el porcentaje. AR IA S. de germinación de los tratamientos es uniforme excepto en el tratamiento T1. que corresponde solo a R. solani que presenta un 5% de germinación lo que explica la acción del fitopatógeno sobre la semilla (pudrición y desintegración). El porcentaje de germinación en esta investigación resulto. CU. similar a la obtenido por Garrido , 2016 al evaluar 15 cepas de Tricoderma spp. frente a Rhizoctonia solani en frejol registrando una germinación de 71. PE. a 99%, así también Otayza en 1994, evaluó el efecto. T. harzianun sobre este fitopatógeno, registrando una germinación de 46.7 a. O. TE CA. DE. AG. RO. 80.3%.. BI B. LI. Figura3. 3. Porcentaje de germinación de frejol Caupi. El análisis de varianza de los datos del porcentaje germinación transformados a valores angulares mostro diferencia. estadística significativa entre los. tratamientos a un nivel de confianza (p< 0.05) (Tabla 3. 4).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. Tabla 3. 1. ANVA del porcentaje de germinacion de frejol Caupi Media cuadrática 5 11531,521. 31,538. 54. 57689,142. 59. Dentro de grupos Total. gl. F 19744,2 52. ,584. CU. CV = 1.003. Sig. ,000. AR IA S. Suma de cuadrados Entre grupos 57657,603. PE. Al realizar la prueba de Tukey al 0.05 % se observa la conformación de dos grupos .Un grupo donde se ubica el tratamiento de Rhizoctoni solani con el porcentaje más. RO. bajo de germinación con 6.82 % y el segundo grupo con los demás tratamientos lo que indica que todos los tratamientos de este grupo tuvieron igual efecto y sin. AG. diferencia estadística entre ellos (Tabla 3. 5).. TE CA. DE. Tabla 3. 2. Prueba de Tukey del porcentaje de germinación de frejol Caupì.. 1 6,82 a. 2 90,00 b 90,00. T3 T4. 90,00 90,00. T5. 90,00. BI B. LI. O. Tratamiento T1 T0 T2. 3.3 Incidencia de chupadera fungosa La figura 3.4 se muestran los datos correspondientes al porcentaje de incidencia de chupadera fungosa obtenido en cada tratamiento, podemos apreciar que el porcentaje de incidencia de los tratamientos T0, T2, T3, T4 y. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. T5 fluctuó entre 0 a 8.75 %; mientras que el tratamiento correspondiente a. PE. 8.75%. CU. AR IA S. R. solani (T1) presento 100% de incidencia. 0.00%. 2.50%. 6.25%. RO. 1.25%. DE. AG. Figura3. 4. Porcentaje de la incidencia de chupadera fungosa en frijol Caupí. El análisis de varianza de los datos del porcentaje de incidencia transformados. TE CA. a valores angulares presentó diferencias estadísticas significativas (p<0.05)(Tabla 3. 6). Al realizar la prueba de Tukey al 0.05 % de significancia, se observa la conformación de tres grupos, comparten ubicación y conforman un mismo grupo los tratamientos T1,T2,T3 y T4 que. O. tuvieron igual efecto sin diferencia entre ellos. El tratamiento T0 testigo. LI. absoluto con 5,74 % se ubica en el grupo a y tratamiento T1 con 31,02 % de. BI B. incidencia que se ubica en grupo c (Tabla 3.7).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. Tabla 3. 3. ANVA del porcentaje de incidencia de chupadera fungosa en frijol caupì. Dentro de grupos Total. Media gl cuadrática 5 860,520. 69,280. 54. 4,3871,882. 59. F 2,645. Sig. ,033. AR IA S. Entre grupos. Suma de cuadrados 4302,602. 25,357. CU. CV = 13.786. RO. PE. Tabla 3. 4.Prueba de Tukey (0.05%) del porcentaje de incidencia de frijol caupi. 1 5,74 a. AG. Tratamiento T0 T3 T4 T2. 3. 7,24 b 8,73 12,65 14,36 31.02 c. TE CA. T1. DE. T5. 2. Severidad. LI. O. 3.1.. BI B. En la tabla 3.8 y figura 3.5. se muestra los datos correspondientes a la severidad de chupadera fungosa obtenido en cada tratamiento. Aquí, podemos observar que el tratamiento testigo T0 obtuvo 0% de severidad dado que ninguna de las plántulas presento síntomas de la enfermedad, mientras que en el tratamiento de R. solani las semillas no germinaron presentaron pudrición. lo que correspondió al 100% de severidad y de acuerdo a la escala al máximo grado (G4). Los demás tratamientos presentaron una severidad que fluctuó entre 0.31 a 2.8 % estos valores son. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. inferiores al índice de severidad del grado 1 (G1) lo que indicaría que las plantas presentan lesiones leves que comprometen menos del 25 % del diámetro del cuello de la plántula, estos porcentajes resultaron ser muy similares a lo obtenido por Garrido en 2016, quien refirió que las plantas que. AR IA S. desarrollaron en las placas que contenían solo R. solani alcanzaron un 100% de severidad.. Plantas afectadas por grado de la escala. PE. Trat.. CU. Tabla 3. 5. Determinación del porcentaje de severidad de chupadera fungosa.. 80 plantas G0. T1. 80 plantas G4. T2. 73 plantas G0 +2 plantas G1 + 2 plantas G2. AG. RO. T0. Porcentaje de Severidad 0% 100 % 2.18%. DE. + 3 plantas G3. 79 plantas G0 + 1 planta G1. 0.31%. T4. 78 plantas G0 + 2 plantas G1. 0.63 %. TE CA. T3. 75 plantas G0 + 3 plantas G1 + 2 plantas G3. 2.8 %. BI B. LI. O. T5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. CAPITULO IV 4. CONCLUSIONES. AR IA S. 4.1 Las cepas de Trichoderma virens evaluadas, ejercieron un efecto antagónico sobre Rhizoctonia solani, produciendo fragmentación del micelio y micoparasitismo.. CU. 4.2 El porcentaje de incidencia de chupadera fungosa en el tratamiento solo con R. solani fue del 100% , en los demás tratamientos en estudio la incidencia de la enfermedad. RO. PE. fue baja y fluctuó entre 1.25 y 8.75 %.. 4.3 Los tratamientos T2, T3,T4 y T5 presentaron el 100% de germinación de las semillas. AG. de Phaseolus vulgaris var. caupì. y la severidad de chupadera fungosa fluctúo entre 0.31 a 2.8%. Mientras que el tratamiento solo con R. solani presento un 5% de. BI B. LI. O. TE CA. DE. germinación y el 100 % de severidad de la enfermedad.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. CAPITULO V 5. RECOMENDACIONES. AR IA S.  Asegurarse que los instrumentos que se va utilizar estén desinfectados adecuamenté para evitar contaminación. CU.  Realizar la investigación en condiciones de campo. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. PE.  Realizar estudios con otras especies de Tricoderma para el control de chupadera fungosa asi como también en otros hongos fitopagenos de importancia agrícola.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. CAPITULO VI. AR IA S. 6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. CU. Aceves, a. c. (2001). cepas nativas de trichoderma spp euascomycetes: hypocreales, su ambiosis y micoparasitismo sobre fusarium subglutinans y F. oxysporum (hyphomycetes:hyphales). mexico.. RO. PE. Agencia Agraria Trujillo ( 2013). Cultivo de frijol. http://www.agrolalibertad.gob.pe/sites/default/files/VOZAGRARIA%20N%C2%A A%2006-2013_%20CULTIVO%20DE%20FRIJOL.pdf. Recuperado el 2 de febrero de 2019. AG. Agricola, P. R. (2012). Guia de identificacion y manejo integrado de enfermedades en frijol http://www.fao.org.hn/l/imágenes/doc/Enfermdades Frijol.pdf. Recuperado el 25 de Enero de 2019. TE CA. DE. Andres, r. v. (2014). aislamiento, selecion e identificacion de especies masivas de Tricoderma con efecto biocontrolador sobre nematodos noduladores que afectan al cultivo de Asparagus afficinalis de la empresa Agroindustrial camposol S:A.. Arias, R., Rengifo, M., & Jaramillo, C. (2007). http://www.fao.org/3/a-a1359s.pdf. Recuperado el 25 de enero de 2019. BI B. LI. O. Castaño, j. c. (2008). evaluacion de la capacidad antagonica "in vivo" de aislamientos de Trichoderma spp frente al hongo fitopagenos Rhizoctonia solani. Bogota.. Danay Infante, B. M. (enero - abril de 2009). Mecanismos de acción de trichoderma frente a hongos fitopatógenos. proteccion vegetal, 24(1).. Delgado, J. (1978). Métodos de evaluación de las enfermedades de los cultivos principales del Dpto de Piura. Universidad Nacional de Piura. Dpto. de Sanidad Vegetal. Piura.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

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(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. Otayza, C., & Vallejos, O. (s.f.). biocontrol de chupadera fungosa con Trichoderma harzianum en algodonero.. AR IA S. Rojas V., W. (2014). Aislamiento, seleccion e identificacion de especies nativas Trichoderma con efecto biocontrolador sobre nematodos nodulares que afectan al cultivo de Asparagus officinalis de la empresa Agroinduisdustial camposol S.A:. Truhillo.. PE. CU. Tovar C, J. (2008). Evaluacion de la capacidad antagonista "in vitri" de aislamientos de Trichoderma spp frente al hongo fitopatogeno Rhizoctonia solani. trabajo de grado presentado como requisito parcial para optar al titulo de microbilogo Agricola y Veterinario, Bogota.. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. Yrigoín P, A. (2017). Diagnóstico, incidencia y severidad de enfermedades fungosas en ecotipos regionales de phaseolus vulgaris l. en el fundo aucaloma de la unsm -T. Para optar el título profesional de ingeniero agronòmo, Tarapoto.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(34) RO. PE. CU. AR IA S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. ANEXOS. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(35) PE. CU. AR IA S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. Figura 7. 2. Placas con micelio de Trichoderma virens cepa 1. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. Figura 7. 1. Placas con el micelio de Rhizoctonia solani. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(36) CU. AR IA S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. TE CA. DE. AG. RO. PE. Figura 7. 3. Confrontación de Tricoderma virens cepa 2 y Rhizoctonia solani. Figura 7. 4. Observacion microscópica de Tricoderma virens. BI B. LI. O. .. Figura 7. 5. Micelio de Rhizoctonia solani. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(37) AG. RO. PE. CU. AR IA S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. BI B. LI. O. TE CA. DE. Figura 7. 6. Germinación de frejol Caupi. Figura 7. 7. Prueba de patogenicidad Rhizoctonia solani. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(38) CU. AR IA S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. PE. Figura 7. 8. Escala de evaluación. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(39) BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. PE. CU. AR IA S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

(40) BI B. LI. O. TE CA. DE. AG. RO. PE. CU. AR IA S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/.

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