Acción reductora in vitro del extracto hidroalcohólico de hojas de Tessaria integrifolia R et P sobre el ión férrico

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. M. IC. A. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. UI. TESIS I. O. Q. “Acción reductora in vitro del extracto hidroalcohólico de hojas de Tessaria. RM. AC. IA. Y. BI. integrifolia R. et P. sobre el ión férrico”. FA. AUTORES:. QUINTANA TUESTA, Magda Karina. . RAMÍREZ REYES, Elvis Ronary. IO. TE CA. DE. . BI BL. ASESOR:. . Mg. RENGIFO PENADILLOS, Roger Antonio. TRUJILLO – PERÚ 2018. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA. A Dios, que siempre guía nuestros pasos e ilumina y nos da toda la fortaleza necesaria para lograr nuestros objetivos.. A. A nuestros amados padres, por su. M IC. orientación, apoyo incondicional, y sobre. FA. A nuestros hermanos y hermanas, por. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. todo su amor, para con nosotros.. haber sido parte de nuestra realización. BI BL IO. TE CA. DE. continua.. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTO. Gracias a nuestros maestros de la Facultad de Farmacia y Bioquímica por brindarnos sus enseñanzas, consejos e. FA. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M IC. A. instruirnos en el camino del éxito.. Agradecimiento especial a nuestro asesor. DE. Q.F. Roger Antonio Rengifo Penadillos, por su tiempo, su amistad y porque nos. TE CA. enseñó que todo proyecto emprendido debe. realizarse. con. pasión. y. BI BL IO. profesionalismo.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR: De conformidad con las disposiciones legales y vigentes del reglamento de Grados y. M IC. Sometemos a su criterio el presente informe de investigación titulado:. A. Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo,. Q. UI. “Acción reductora in vitro del extracto hidroalcohólico de hojas de Tessaria integrifolia R.. Y. BI. O. et P. sobre el ión férrico”. AC I. A. Al mismo tiempo, aprovechar para manifestar agradecimiento a nuestra Querida Universidad. FA. brindado por medio de sus enseñanzas.. RM. y nuestros Maestros, por su calidad de educadores y la formación profesional que nos han. DE. Dejo a su consideración Señores Miembros del Jurado, la respectiva calificación del presente. TE CA. informe.. BI BL IO. Trujillo, Mayo del 2018. RAMÍREZ REYES, Elvis Ronary. QUINTANA TUESTA, Magda Karina. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. JURADO DICTAMINADOR. -----------------------------------Q.F. Yuri Curo Vallejos. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI. M. IC. A. PRESIDENTE. RM. ------------------------------------. MIEMBRO. BI BL. IO. TE CA. DE. FA. Q.F. Rubén Aro Díaz. -----------------------------------------Q.F. Roger Rengifo Penadillos MIEMBRO. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. El finalidad del presente trabajo fue determinar la acción reductora in vitro del extracto hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P. sobre el ión férrico, procedentes de la ribera del río Chamán, provincia de Chepén; recolectados en Febrero 2018, para ello, se colocaron 10 g de polvo de hojas en 200 mL de etanol 70°G.L. y agitándose por un lapso de 48 horas, luego se filtró, repitiéndose este procedimiento por tres veces, los filtrados se reunieron y fueron concentrados en evaporador rotatorio,. A. determinándose el extracto seco en 10 mL de extracto hidroalcohólico, se prepararon. IC. soluciones a las concentraciones de 1,180; 0,944; 0,755; 0,604; 0,483 mg de extracto. UI. M. seco/mL, las cuales constituyeron las muestras de trabajo. La capacidad del poder. Q. reductor se determinaron mediante el método modificado de Oyaizu M. teniendo como. BI. O. estándar ácido gálico a concentraciones de 0,02; 0,06 y 0,1 mg/mL. La marcha. Y. fitoquimica nos muestran que contiene flavonoides, sesquiterpenlactonas, taninos,. IA. saponoinas y compuestos fenólicos, la acción reductora es equivalente a 8,117 g de ácido. AC. gálico /100 g de muestra y un porcentaje máximo de 98,1% y un mínimo de 38,85%, en. TE CA. DE. FA. RM. comparación a ácido gálico a una concentración de 0,1 mg/mL.. BI BL. IO. Palabras claves: Tessaria integrifolia R. et P, ión férrico, poder reductor. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. The purpose of this work was to determine the in vitro reductive action of the hydroalcoholic extract of the leaves of Tessaria integrifolia R. et P. on the ferric ion, coming from the banks of the river Chamán, province of Chepén; collected in February 2018, for this, 10 g of leaf powder were placed in 200 mL of 70 ° G.L. ethanol, and stirred for a period of 48 hours, then filtered, repeating this procedure for three times, the filtrates. A. were combined and concentrated in a rotary evaporator, when the dry extract was. IC. determined in 10 mL of hydroalcoholic extract, solutions were prepared at the. UI. M. concentrations of 1.180; 0.944; 0.755; 0.604; 0.483 mg of dry extract/mL, which. Q. constituted the work samples. The capacity of the reducing power was determined by the. BI. O. modified method of Oyaizu M. having as a standard gallic acid at concentrations of 0.02;. Y. 0.06 and 0.1 mg / mL. The phytochemical march shows us that it contains flavonoids,. IA. sesquiterpenlactones, tannins, saponoins and phenolic compounds; the reducing action is. AC. equivalent to 8.117 g of gallic acid / 100 g of sample and a maximum percentage of 98.1%. DE. FA. RM. and a minimum of 38.85 %, compared to gallic acid at a concentration of 0.1 mg / mL.. BI BL. IO. TE CA. Keywords: Tessaria integrifolia R. et P, ferric ion, reducing power. vi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE DEDICATORIA.....................................................................................................i AGRADECIMIENTO .......................................................................................... ii PRESENTACIÓN. ................................................................................................ iii JURADO DICTAMINADOR… .......................................................................... iv ÍNDICE .................................................................................................................. v RESUMEN. ...........................................................................................................vi. IC. INTRODUCCIÓN ......................................................................................... 1. M. I.. A. ABSTRACT .......................................................................................................... vii. UI. PROBLEMA .......................................................................................................... 4. BI. O. Q. HIPÓTESIS ............................................................................................................ 4. Y. II. MATERIAL Y MÉTODO ............................................................................ 5. IA. MATERIAL ........................................................................................................... 5. AC. MÉTODO ............................................................................................................... 6. FA. RM. ANÁLISIS ESTADÍSTICO… ............................................................................. 10. DE. III. RESULTADOS ............................................................................................ 11. TE CA. IV. DISCUSIÓN… ............................................................................................. 13. IO. V. CONCLUSIONES ....................................................................................... 15. BI BL. VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS .......................................................17 VII. ANEXOS ...................................................................................................... 22. vii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCIÓN. Desde la década de los años setenta se ha producido una explosión en las áreas de investigación y clínica, relativas a los radicales libres y los antioxidantes, siendo estos de mucho interés en diferentes campos industriales como la industria cosmética, farmacéutica y alimenticia; ya que son considerados protectores de los sistemas biológicos 1. Los antioxidantes sintéticos y naturales de las plantas se utilizan de forma rutinaria en. IC. A. alimentos y medicamentos, especialmente aquellos que contienen aceites y grasas para. M. proteger los alimentos contra la oxidación, pero el alto costo de antioxidantes naturales. UI. ha llevado a que se utilicen más los antioxidantes sintéticos; sin embargo los estudios. O. Q. realizados han demostrado que los antioxidantes naturales ofrecen una mejor efectividad. BI. en comparación con los antioxidantes sintéticos, además los antioxidantes sintéticos. Y. tienen efectos tóxicos y en consecuencia se han impuesto restricciones a su uso; por lo. AC. IA. tanto, los investigadores han centrado sus estudios en antioxidantes naturales derivados. RM. de plantas 2,3,4.. FA. Los antioxidantes naturales protegen el cuerpo humano de los radicales libres, pueden reducir la trombosis, activar macrófagos e inhibir la tendencia a la peroxidación,. DE. retardando el progreso de muchas enfermedades crónicas, de procesos patológicos y de. TE CA. envejecimiento prematuro, así como la rancidez oxidativa de los lípidos en los alimentos, estas propiedades biológicas de estos antioxidantes naturales se han atribuido en gran. IO. medida a sus altos niveles de diversos compuestos fenólicos, como las antocianinas, los. BI BL. flavonoides y los taninos 5,6. Un antioxidante es una molécula lo suficientemente estable como para donar un electrón a un radical libre agresivo, neutralizarlo y terminar la reacción en cadena, antes de que se alteren las moléculas vitales retrasando o inhibiendo el daño celular 7. Con el fin de encontrar alternativas rentables y eficaces, la búsqueda de nuevos fármacos se dirige hacia la exploración de fuentes naturales. El reino de las plantas siempre ha servido como una fuente inagotable para el descubrimiento de fármacos con diversidad estructural y molecular sin límites que ha favorecido la búsqueda de terapias más eficaces y seguros, contra las enfermedades. Se recomienda a menudo el uso de extractos de plantas, para la contención de enfermedades y se afirma que las preparaciones crudas o. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. semipurificadas de partes de la planta o plantas enteras pueden ser más eficaces terapéuticamente 8, 9,10. Nuestro país cuenta con especies vegetales de reconocida actividad medicinal y otras muy poco conocidas, urge que a través de técnicas científicas modernas de investigación, se evalúe científicamente los productos naturales procedentes de plantas medicinales, especialmente la actividad antioxidante, cuya importancia es vital para la prevención e interferencia de muchas enfermedades 11. Tessaria integrifolia R. et P. (Pájaro bobo), perteneciente a la familia de las Asteraceae,. IC. A. es un arbusto de 3 a 10 metros de alto, con hojas alternas lanceoladas y flores marginales,. M. inflorescencias terminales con capítulos amarillos; forma parte de la vegetación ribereña. Q. UI. de la costa y selva de nuestro país. Es una especie ampliamente distribuida desde el sur. .. BI. 12. Y. Paraguay, Brasil, Bolivia y Perú. O. de América Central hasta América del Sur, incluyendo Panamá, Colombia, Venezuela,. IA. Dentro de uso tradicional, se menciona que es antiasmático, antipirético, antiinflamatorio,. AC. diurético, analgésico, antiespasmódico y leishmanicida. La composición química de. RM. Tessaria integrifolia incluye taninos, flavonoides, triterpenoides de esteroides, azúcar. FA. reductor, principios amargos y astringentes, aminoácidos, cumarinas, resinas y catequinas. En la parte aérea y raíz de Tessaria integrifolia R. et P. se han encontrado:. DE. escualeno, acetato de β-amirino, derivados del bistienilo, α-tertienilo, lignano,. TE CA. sesquiterpenos, flavonas, derivados de eudesmanos y ácido cafeoilquínico. 13,14.. IO. Masachi E. et al. (Japón) en el año 2008; reporta la presencia de compuestos como. BI BL. flavonoles, flavonas, flavononas, derivados del ácido cinámico, derivados del ácido benzoico, lignano entre otros componentes en el extracto metanólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P. 15. Pérez F. et al. (Trujillo, Perú) en el año 2007; informa la presencia de esteroides, flavonoides, compuestos fenólicos en el extracto metanólico de las flores y hojas de Tessaria integrifolia R. et. P. y adicionalmente saponinas en las hojas 16. Masateru O. et al. (Japón) en el año 2000; se determinó que Tessaria integrifolia tiene una alta actividad antioxidante proporcionada por sus numerosas componentes que presenta, Chrysosplenol-D; Quercetin; Hyperin; trifolin; Pinoresinol; 4-di (4-hydroxy-3methoxybenzyl) tetrahydrofuran; Methyl 3,4-di-O-caffeoyl quinate; Methyl 3,5-di-O-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. caffeoyl quinate; 4,5-di-O-caffeoyl quinic acid; Methyl 4,5-di-O-caffeoyl quinate; 3,4di-O-caffeoyl isoquinic acid; estos compuestos mostraron un efecto antioxidante en el extracto metanólico de la Tessaria integrifolia, además algunos de estos compuestos como el ácido cafeico quínico del propóleo evidenciaron fuertes actividades hepatoprotectoras contra la toxicidad de CCl4 en ratas 17. Los estudios de antioxidantes naturales con el extracto metanólico de la parte aérea de la planta de Tessaria integrifolia mostraron una mayor actividad antioxidante que la 3-tertbutyl-4-hydroxyanisole (BHA) utilizando el método tiocianato férrico 17.. IC. A. Existen diversos métodos para determinar la capacidad reductora de los extractos de las. M. plantas entre ellas se encuentra el método de transferencia de electrones de el hierro. El. UI. poder reductor de los compuestos fenólicos se determina mediante la capacidad de reducir. O. Q. el Fe+3 (férrico) a Fe+2 (ferroso) que luego reacciona con el cloruro férrico para formar un 18. .. Y. BI. complejo ferroso férrico que tiene un máximo de absorción a 700 nm. IA. La OMS ha determinado que aproximadamente un 80 % de la población mundial en vías. AC. de desarrollo utiliza la medicina tradicional para atender las necesidades primarias de. RM. asistencia médica. El interés por parte de la población de encontrar una alternativa cercana. FA. y cómoda de bajo costo y alta concentración de antioxidante para su atención primaria y. DE. el mundo científico de investigar nuevas alternativas que proporciones resultados seguros eficaces ante las enfermedades relacionadas con deficiencias de antioxidantes, nos lleva. TE CA. a realizar este trabajo de investigación pretendiendo generar conocimiento y proporcionar. BI BL. mundo científico.. IO. información para para la población y ser un canal para nuevas investigaciones en el. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1.. PROBLEMA ¿Tiene acción reductora in vitro el extracto hidroalcohólico de hojas de Tessaria integrifolia R. et P. sobre el ión férrico?. 2.. HIPÓTESIS El extracto hidroalcohólico de hojas de Tessaria integrifolia R. et P. tiene acción. IC. OBJETIVOS. M. 3.. A. reductora in vitro sobre el ión férrico.. Q. Determinar la acción reductora in vitro del extracto hidroalcohólico. O. . UI. 3.1 Objetivo General:. BI. de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P. sobre el ión férrico. Realizar la marcha fitoquímica del extracto hidroalcohólico de las. IA. . Y. 3.2 Objetivos Específicos:. Determinar la acción reductora del extracto hidroalcohólico de las. RM. . AC. hojas de Tessaria integrifolia R. et P.. FA. hojas de Tessaria integrifolia R. et P. expresado como el equivalente. Determinar el porcentaje de reducción del ión férrico por las. TE CA. . DE. de ácido gálico g/100 g de muestra.. diferentes concentraciones del extracto hidroalcohólico de las hojas. BI BL. IO. de Tessaria integrifolia R. et P.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.. MATERIAL Y MÉTODOS. 1. Material a) Equipos: Agitador magnético. . Balanza analítica - Sartorius - Modelo 8P315-13005198. . Baño María - Memmert - Modelo D1N12877 – Kl. . Centrifugadora - Boeco Germany – 0001096. . Cocina eléctrica. . Espectrofotómetro - Thermo scientific Modelo Genesis20 – 3560080003 Estufa - Memmert - Modelo100 – 1990. . Lámpara UV. . Molino mecánico – Corona. BI. O. Q. UI. M. . IC. A. . IA. b) Reactivos y Solventes:. Y. Rotavapor Heidolph Laborota 4003 control. Ácido acético glacial 99,8% de pureza, calidad Sigma. . Ácido clorhídrico 37% de pureza, calidad Sigma. . Ácido gálico, calidad Sigma. . Ácido sulfúrico 98% de pureza, calidad Sigma. . Ácido tricloroacético de Merck. TE CA. DE. FA. RM. AC. . Agua destilada. Alcohol etílico de 70º GL.. . Anhídrido acético 98% de pureza, calidad Sigma. BI BL. IO. . . Cloruro de mercurio (II) 99,5% de pureza, calidad Sigma Cloruro férrico hexahidratado 97% de pureza, calidad Sigma Ferricianuro de potasio de Loba Chemie Reactivo Dragendorft. . Solución buffer fosfato 0,2 M (pH 6,6) Yoduro de potasio de Scharlau Cloruro de Sodio 99,5% de pureza, calidad Sigma. . Hidróxido de sodio 98% de pureza, calidad Sigma. . Magnesio metálico. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Gelatina from porcin skin, calidad Sigma Amoniaco . Ácido pícrico. . Hidróxido de potasio Benceno. c) Material Biológico: . 2 Kg de hojas de Tessaria integrifolia R. et P. (Asteraceae) “Pájaro bobo” procedentes de la ribera del Río Chamán,. A. Provincia de Chepén, (07º13’36” Latitud sur, 79º25’45”. IC. Longitud oeste, Altitud: 135 msnm) departamento de La. 2. Métodos. BI. O. 2.1. Recolección de la especie vegetal 19. Q. UI. M. Libertad.. Y. Se recolectó las hojas de Tessaria integrifolia R.et P (Pájaro bobo) en la. AC. IA. ribera del río Chamán, ciudad de Chepén. Provincia de Chepén.. RM. Departamento de La Libertad, en el mes de Febrero 2018.. FA. 2.2. Selección e identificación taxonómica 13. La muestra se transportó al laboratorio de Química Física de la Facultad. DE. de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo y se. TE CA. procedió a la selección de la materia vegetal separando las partes deterioradas y material extraño.. BI BL. IO. La planta medicinal seleccionada se llevó al Herbarium Truxillensis de la Universidad Nacional de Trujillo para su identificación taxonómica. Depositándose con el código 59447 (Ver ANEXO 01). 2.3. Lavado, secado, molienda y tamización de muestras vegetales 20, 21,22.. Las hojas se lavaron con un chorro de agua y se enjuagaron con agua destilada, colocándose sobre papel kraft en un lugar fresco y seco durante 24 horas. Luego se llevaron a estufa a una temperatura de 40 °C, durante 48 horas.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Una vez secado el material vegetal, se procedió a su molienda con la ayuda de un mortero, tamizándose el polvo obtenido utilizando el tamiz N° 0,75 y se almacenó en frascos ámbar en un lugar sin humedad y luz directa hasta su posterior utilización. 2.4. Preparación del extracto hidroalcohólico de Tessaria integrifolia R. et P 20, 21,22. Se utilizó 10 g de polvo de hojas que fueron sometidas a maceración con 200 mL de etanol 70° G.L.; utilizando agitador magnético, por un lapso de. IC. A. 48 horas.. M. Terminado el tiempo de maceración el extracto se filtró mediante papel. Q. UI. filtro Whatman N°1, el marco se volvió a macerar 2 veces más con el. O. respectivo solvente y luego los extractos se juntaron para ser concentrados. BI. en evaporador rotatorio a 35 °C hasta un volumen de 50 mL. El extracto. IA. Y. concentrado fue guardado en frascos color ámbar.. AC. 2.5. Determinación del extracto Seco en el extracto hidroalcohólico de. FA. RM. Tessaria integrifolia R. et P 23.. Del extracto hidroalcohólico concentrado en evaporador rotatorio a 35 °C. DE. se midieron 10 mL en una capsula de porcelana y se llevó a una estufa a. TE CA. 50 °C hasta que el peso no varíe en más de 0,5 mg. Se realizaron los cálculos para determinar la cantidad de extracto seco. BI BL. IO. contenido en el extracto hidroalcohólico. 2.6. Marcha Fitoquímica preliminar de los fitoconstituyentes de los extractos de Tessaria integrifolia R. et P. 20. Se realizaron la identificación fitoquímica mediante reacciones de coloración y precipitación a la gota. 2.6.1. Identificación de Flavonoides . Reacción de Shinoda. Se colocó una cantidad de muestra, se agregó etanol y luego una pequeña porción de limaduras de magnesio y dos gotas de ácido clorhídrico concentrado. El ensayo se consideró positivo cuando se dio la coloración amarillo, naranja o rojo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.6.2. Identificación de Esteroles y Terpenoides. . Reacción de Lieberman – Buchard. Se colocó un 1 mL de la muestra y se añadió 10 gotas de anhídrido acético, 20 gotas de ácido acético y una gota de ácido sulfúrico. La coloración verde oscuronegro indicó reacción positiva.. 2.6.3. Identificación de Alcaloides. . Ensayo de Dragendorff. Permite reconocer en un extracto la presencia de alcaloides, para ello, si la alícuota del extracto está. A. disuelta en un solvente orgánico, este se deberá evaporar en baño de. IC. agua y el residuo redisolverse en 1 mL de HCl al 1% en agua. Para. UI. M. realizar el ensayo se añadió tres gotas de reactivo de Dragendorff,. Q. ante la opalescencia se consideró (+), turbidez definida (++),. BI. . O. precipitado (+++).. Y. Reacción de Mayer. Se aforó 1,35 g de bicloruro de mercurio y 4 g. IA. de yoduro de potasio en una fiola de 100 mL con agua destilada.. AC. Luego la muestra se aciduló con una solución de ácido clorhídrico. RM. al 1%. Si se observó opalescencia se consideró (+), turbidez definida. FA. (++), precipitado coposo (+++). 2.6.5. Identificación de Sesquiterpenlactonas.. DE. . Reacción de Baljet. Se emplearon dos soluciones que se. TE CA. mezclaran en volúmenes iguales antes de usarse. Solución A, 1 g de ácido pícrico en 100 mL de etanol de 96º, solución B, 10 g de. BI BL. IO. hidróxido de sodio en 100 mL de agua. Para la prueba se colocó 23 mg de muestra y unas 3-4 gotas de reactivo. Se consideró un ensayo positivo la aparición de coloración o precipitado rojo.. 2.6.6. Identificación de Taninos. . Reacción con gelatina al 1%. Se preparó una solución de gelatina al 1% que además contendrá NaCl (10 %), en 1 mL de esta solución se agregó 1 mL del extracto observando la aparición de precipitado.. 2.6.7. Identificación de Antraquinonas. . Reacción de Bortranger. Se colocó en un tubo de ensayo una pequeña porción de muestra y se añadió unos 5 mL de benceno, agitando. El benceno tomó color amarillo. Luego se trasvasó el. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. benceno a otro tubo de ensayo y añadió unas gotas de solución de KOH. El ensayo fue positivo cuando la fase acuosa alcalina (superior) se coloreó de rosado o rojo. 2.6.8. Identificación de Saponinas. . Prueba de saponinas. Se tomó 1mL de la muestra en un tubo de ensayo y se llevó a 5mL con agua destilada. Se agitó vigorosamente durante 30 segundos, dejando en reposo por 15 minutos, siendo positivo tras la persistencia de la espuma.. 2.6.9. Identificación de Compuestos fenólicos. A. . IC. Reacción de Tricloruro férrico. Se preparó una solución de. UI. M. Tricloruro de hierro al 3% y se agregó 20 gotas al extracto. La. BI. O. Q. presencia de coloración rojo-vino, verde o azul indicó positivo.. Y. 2.7. Preparación de las concentraciones de las muestras de extracto. IA. hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P. para. AC. determinar el porcentaje de reducción de ion férrico 23.. RM. Se midió volumenes de 10; 8; 6,4; 5,1; 4,1 mL del extracto hidroalcohólico. FA. concentrado, aforándose a 10 mL con alcohol de 70° G.L.; de esta solución se tomó 2,5 mL y se aforo a 100 mL con alcohol de 70° G.L.; las cuales. TE CA. DE. constituyeron las muestras de trabajo.. 2.8. Acción reductora in vitro del extracto hidroalcohólico de las hojas. IO. de Tessaria integrifolia R. et P. sobre el ión férrico 18, 24, 25, 26.. BI BL. La capacidad del poder reductor del extracto hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P. sobre el ion férrico, se realizó aplicando el método modificado de Oyaizu M. 1 mL de la muestra de trabajo, se mezcló con 5 mL de buffer fosfato 0,2 M (pH 6,6) y 5 mL de ferricianuro de potasio al 1%, se incubó a 50° C por 20 minutos, luego se adicionó 5mL de ácido tricloroacético 10%, la mezcla resultante se centrifugó a 4 000 r.p.m. por 15 min; se midió una alícuota del sobrenadante de 5 mL y se diluyó en 5 mL de agua destilada, inmediatamente se agregó 1 mL de cloruro férrico 1%. Se midió la absorbancia a una longitud de onda de 700 nm realizando tres lecturas. La acción reductora del extracto fue expresado como el equivalente a ácido. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. gálico g/100 g de muestra. El poder reductor de los extractos guardó una relación directa con el valor de la absorbancia. Una vez obtenido las lecturas de las absorbancias, el equivalente de ácido gálico se cuantificaron a partir de una curva estándar de Absorbancia vs. ácido gálico a concentración de 0,02; 0,06; 0,1 mg/mL., mediante la siguiente ecuación. �−� � )∗ ∗ � ∗ 100 � �. A. � =(. M. IC. Donde:. UI. c: Ácido gálico g/100 g de muestra.. O. Q. y: La absorbancia promedio medida.. BI. b: La ordenada en el origen.. AC. v: volumen de dilución (mL).. IA. Y. m: La pendiente de la recta.. f: factor de dilución. RM. w: Peso de la muestra (mg).. FA. Y el porcentaje de reducción del ión férrico de las muestras del extracto. DE. hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P., de acuerdo a. TE CA. la siguiente formula:. %R = �� �100 ��. BI BL. IO. Donde:. %R: Porcentaje de reducción. Am: Absorbancia de la muestra. Ap: Absorbancia del patrón de ácido gálico al 0.1 mg/mL. 2.9. Análisis de resultados obtenidos La evaluación de los resultados obtenidos se hizo un tratamiento estadístico usando media, desviación estándar y prueba de Análisis de Varianza (ANOVA) con el programa SPSS® ver.19 para Microsoft® Windows.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III.. RESULTADOS. Tabla 1: Tamizaje fitoquímico del extracto hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P.. Fitoconstituyentes. Ensayos. Resultados. Reacción de Shinoda. +. Esteroles y Terpenoides. Lieberman – Buchard. -. Alcaloides. Dragendorff. -. Mayer. -. A. Flavonoides. Baljet. Taninos. Gelatina al 1%. Antraquinonas. Bortranger. Saponinas. Espuma. Compuestos fenólicos. Tricloruro férrico. UI. M. IC. Sesquiterpenlactonas. +. O. Q. -. BI. +. Y. +. AC. IA. + Presencia, - Ausencia.. +. RM. FUENTE: Datos obtenidos en el Laboratorio de Farmacognosia de la Facultad de. FA. Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, Marzo – Abril 2018.. nm. 0,060 0,100. Promedio. desviación. A1. A2. A3. (P). 0,168. 0,169. 0,169. 0,169. 0,00057735. 0,540. 0,543. 0,541. 0,541. 0,00152753. 0,860. 0,859. 0,863. 0,861. 0,00208167. BI BL. 0,020. Absorbancia. IO. []mg/mL. TE CA. DE. Tabla 2: Absorbancia de la acción reductora del ión férrico por ácido gálico a 700. FUENTE: Datos obtenidos en el Laboratorio de Química - Física de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, Marzo – Abril 2018.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 3: Absorbancia de la acción reductora del ion férrico por el extracto hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P. a 700 nm []mg/mL Absorbancia desviación Promedio A1. A2. A3. (P). 1,180. 0,845. 0,844. 0,844. 0,844. 0,00057735. 0,944. 0,654. 0,654. 0,653. 0,654. 0,00057735. 0,755. 0,534. 0,536. 0,536. 0,535. 0,00115470. 0,604. 0,442. 0,443. 0,443. 0,443. 0,00057735. 0,483. 0,335. 0,335. 0,333. 0,334. 0,00115470. IC. A. FUENTE: Datos obtenidos en el Laboratorio de Química - Física de la Facultad de. Q. UI. M. Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, Marzo – Abril 2018.. O. Tabla 4: Gramos de ácido gálico por cada 100 g de muestra de hojas de Tessaria. BI. integrifolia R. et P. []2. []4. []5. []mg/mL. 1,180. 0,944. 0,755 0,604 0,483. Ácido gálico g/100 g de muestra.. 8,209. 7,959. 8,126 8,384 7,904. Promedio desviación (P) 8,117. 0,1938037. FA. RM. AC. IA. []3. Y. []1. FUENTE: Datos obtenidos en el Laboratorio de Química - Física de la Facultad de. TE CA. DE. Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, Marzo – Abril 2018.. IO. 100 80 60. 98.10. y = 82.59x - 0.2016 R² = 0.9963. BI BL. Porcentaje de reducción. 120. 75.95 62.20 51.43. 40. 38.85. 20 0 0.000. 0.200. 0.400. 0.600. 0.800. 1.000. 1.200. 1.400. Concentración de muestra mg/mL Figura 1: Porcentaje de reducción del ión férrico por las hojas de Tessaria integrifolia R. et P.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1 0.861y = 8.65x + 0.0047 R² = 0.9981. 0.844. y = 0.7108x - 0.0017 R² = 0.9963. 0.7. 0.654. 0.6 0.5. 0.541. 0.535 0.443. 0.4 0.334. 0.3 0.2 0.1 0 0.000. Ácido gálico. 0.169. Tessaria integrifolia. 0.200. 0.400. 0.600. 0.800. 1.000. A. 0.8. IC. Absorbancia a 700 nm. 0.9. UI. M. Concentración mg/mL. 1.200. O. Q. Figura 2: Comparación de las absorbancias de la reducción del ion férrico por ácido. BI. gálico y extracto hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P. a 700. BI BL. IO. TE CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. nm.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. Los antioxidantes naturales constituyen una amplia gama de sustancias que incluyen compuestos fenólicos o que contienen nitrógeno y carotenoides. La calidad de estos antioxidantes es una medida de la eficacia, presentes como compuestos puros o una mezcla de sustancias 27,28. El efecto antioxidante de las plantas se debe principalmente a sus componentes fenólicos, tales como flavonoides, ácidos fenólicos, y diterpenos fenólicos. La actividad. A. antioxidante de los compuestos fenólicos se debe principalmente a sus propiedades redox,. IC. que pueden desempeñar un papel importante en la absorción y la neutralización de los. UI. M. radicales libres o reactivos, reduciéndolos en especies más estables y no reactivos 29,30.. O. Q. Los resultados del análisis fitoquímico cualitativo del extracto hidroalcohólico de las. BI. hojas de Tessaria integrifolia R. et P. presentados en el tabla 1 muestran que contiene. Y. flavonoides, sesquiterpenlactonas, taninos, saponinas y compuestos fenólicos que son. AC. IA. importantes antioxidantes y por lo tanto involucrado en la prevención de enfermedades.. RM. Se han propuesto numerosos métodos y modificaciones para evaluar la actividad. FA. antioxidante y explicar cómo funcionan; dentro del cual está el ensayo de determinación. DE. de capacidad de reducción total que se basa en el principio del aumento de la absorbancia de las mezclas de reacción ante un aumento de las concentraciones de muestras, que. TE CA. indica un aumento de la actividad antioxidante 31.. IO. Mediante la medición de la formación del azul de Prusia se determinó las absorbancias. BI BL. de la concentración de ion Fe2+ realizándose la curva de calibración del estándar de ácido gálico (ver tabla 2) con un coeficiente de determinación de 0,998 (ver ANEXO 05) Los resultados del tabla 2 y tabla 3 muestran las absorbancia de la acción reductora del ion férrico de ácido gálico y las absorbancias de la acción reductora del ion férrico del extracto hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P.; la relación que guardan con sus respectivas concentraciones es directa. La figura 2 nos muestra que a concentraciones menores de ácido gálico su absorbancia es mayor a la absorbancia de la muestra de Tessaria integrifolia; para obtener una absorbancia de aproximadamente de 0,54 y 0,85 se requiere una concentración de 0,06 y 0,1 mg/mL de ácido gálico frente a una concentración de 0,755 y 1,18 mg/mL de muestra de Tessaria integrifolia, de esto. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. se puede inferir que la cantidad de muestra de Tessaria integrifolia es de aproximadamente 12 veces la cantidad de ácido gálico para obtener absorbancias similares. En el tabla 4 se observa la representación de ácido gálico en gramos por cada 100 g de muestra dando como un resultado promedio de 8,117; esto significa que 1 gramo de ácido gálico equivale a 12,3 gramos de muestra de Tessaria integrifolia; dicho resultado nos muestra que la acción reductora de Tessaria integrifolia tiene un poder competitivo en comparación con ácido gálico que es un estándar puro, por lo que puede ser una planta. IC. A. que puede ser utilizada en la búsqueda de moléculas antioxidantes para el tratamiento de. UI. M. salud pública.. Q. En un estudio de Mazumdar M. et al. (2017), el contenido fenólico total del extracto. BI. O. metanólico de Tetracera sermentosa demostró que tiene una fuerte capacidad reductora,. IA. Y. equivalente a 14,034 g de estándar de ácido gálico /100 g de extracto seco 32.. AC. En diversos estudios se muestra que la capacidad reductora de estándares está en el. RM. siguiente orden ácido ascórbico > ácido gálico > BHA > trolox 33,34.. FA. Keffous F. et al. (2016) determinó el poder reductor del extracto acuoso de Limoniastrum. DE. feei encontrándose que la capacidad reductora es equivalente a 23,339 g de ácido. TE CA. ascórbico/100 g de muestra 35.. Deepa B. et al. (2013) encontró que las capacidades reductoras de los extractos de. BI BL. IO. “Triphala” equivale a 2,906 y 0,7125 g de ácido ascórbico/100 g de muestra 36. Bhatt A. et al. (2013) determinó el poder reductor de diferentes extractos de ajo, encontrándose que el extracto químico de ajo crudo, el extracto enzimático de ajo crudo y el extracto químico del ajo cocinado; son equivalentes a 0,05764; 0,3084 y 0,1147 gramos de estándar trolox/ 100 g de muestra respectivamente 37. De esto se puede analizar que los resultados del poder reductor del extracto hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P. no se encuentra muy lejos de las plantas que tienen un elevado poder antioxidante, y la misma planta muestra un poder reductor mucho más eficaz que otras convirtiéndose en una opción para las posteriores investigaciones.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Los compuestos con poder reductor pueden donar electrones y reducir moléculas como los compuestos intermedios oxidados por procesos de peroxidación de lípidos, de modo que puedan actuar como antioxidantes primarios y secundarios 38. En la figura 1 se observa el porcentaje de reducción del ión férrico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P.; tomando como referencia la absorbancia de ácido gálico a una concentración de 0,1 mg/mL. Se obtuvo un porcentaje máximo de 98,1% y un mínimo de 38,85%, esto indica que a una mayor concentración de extracto hidroalcohólico de Tessaria integrifolia mayor es el porcentaje de reducción del ión férrico, teniendo un. IC. A. mayor potencial reductor y por lo tanto mayor actividad antioxidante 39.. UI. M. Los estudios muestran que la absorbancia está asociada a la concentración. Saha M. et al.. Q. (2008). El poder reductor del extracto de Mimusops elengi fue notable y se observó que. BI. O. el poder reductor del extracto aumentaba a medida que la concentración del extracto aumentaba gradualmente. En Nishaa S. et al. (2012). El extracto de Maranta arundinacea. Y. 40,28. .. AC. IA. la absorbancia fue dependiente de la concentración. RM. Las sustancia que tienen poder reductor, reacciona con ferricianuro de potasio (Fe3 +) para. FA. formar ferrocianuro de potasio (Fe2 +), que luego reacciona con cloruro férrico para formar complejo férrico ferroso; el color amarillo de la solución de prueba cambia a tonos verde. TE CA. DE. azulados, que tiene un máximo de absorción a 700 nm 39. Las propiedades reductoras se asocian generalmente con la presencia de reductonas, que. IO. se ha demostrado que ejercen una acción antioxidante al romper la cadena de radicales. BI BL. libres mediante la donación de un átomo de hidrógeno. También se informa que las reductonas reaccionan con ciertos precursores de peróxido, evitando así la formación de peróxido. Sin embargo, la actividad de los antioxidantes ha sido asignada a diversos mecanismos tales como prevención del inicio de cadena, unión de catalizadores de iones metálicos de transición, descomposición de peróxidos, prevención de la extracción de hidrógeno continuada, capacidad de reducción y eliminación de radicales 39,41.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.. CONCLUSIONES. 1. El extracto hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P.; contiene flavonoides, sesquiterpenlactonas, taninos, saponinas y compuestos fenólicos. 2. La acción reductora promedio del extracto hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P. equivalente a 8,117 g de ácido gálico/100 g de muestra. 3. El extracto hidroalcohólico de las hojas de Tessaria integrifolia R. et P. tiene un. BI BL. IO. TE CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI. M. del ion férrico en comparación al 0,1 mg/mL ácido gálico. IC. A. 98,1% como porcentaje máximo y 38,85 % como porcentaje mínimo de reducción. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1. Suhartono E. et al. Total flavonoid and antioxidant activity of some selected. medicinal plants in South Kalimantan of Indonesian. APCBEE Procedia. 2012; 4: 235-39. 2. Papas A. Diet and antioxidant status. Food Chem Toxicol. 1999; 37(9-10):999 -. 1007. 3. Aksoy L. et al. Free radical scavenging activity, total phenoliccontent, total. antioxidant status, and total oxidant status of endemic Thermopsis turcica. Saudi. M. IC. A. Journal of Biological Sciences. 2013; 20(3): 235 - 39.. UI. 4. Fahmi H. et al. Comparative study of herbal plants on the phenolic and flavonoid. O. Q. content, antioxidant activities and toxicity on cells and zebrafish embryo. Journal. Y. BI. of Traditional and Complementary Medicine. 2017; 7(4): 452 - 65.. IA. 5. Álvarez R. y col. Actividad antioxidante de cinco variedades de maíz cultivadas. AC. en Campeche, México. Bol Latinoam Caribe Plant Med Aromat. 2013; 12(6): 558. RM. - 71.. FA. 6. Koolen H. et al. Antioxidant, antimicrobial activities and characterization of. DE. phenolic compounds from buriti (Mauritia flexuosa L. f.) by UPLC–ESI-MS/MS.. TE CA. Food Research International. 2013; 51(2): 467 - 73. 7. Lobo V. et al. Free radicals, antioxidants and functional foods: Impact on human. BI BL. IO. health. Pharmacogn Rev. 2010; 4(8): 118 - 26. 8. Carneiro S. et al. The cytotoxic and antileishmanial activity of extracts and. fractions of leaves and fruits of Azadirachta indica (A Juss). Biol Res. 2012; 45(2): 111 - 16. 9. Chouhan G. et al. Leishmanicidal activity of Piper nigrum bioactive fractions is. interceded via apoptosis in vitro and substantiated by Th1 imunostimulatory potential in vivo. 2015; 6(1): 1368. 10. Jiménez M. y col. Las plantas medicinales de México como fuente de compuestos. activos contra la leishmaniasis. Revista Mexicana de Ciencias Farmacéuticas. 2014; 45 (2):19 - 30.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

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(30) Y. BI. O. Q. UI. M. IC. A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE CA. DE. FA. RM. AC. IA. ANEXOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI. M. IC. A. ANEXO 01: Identificación taxonómica de la planta medicinal en el Herbarium Truxillensis de la Universidad Nacional de Trujillo. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 02: Determinación del extracto Seco en el extracto hidroalcohólico de Tessaria integrifolia R. et P. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI. M. IC. A. DATOS DE LA MUESTRA Volumen de la muestra = 10 mL Peso de cápsula + Muestra = 23808,3 mg Peso de cápsula + Muestra 4h = 23336,7 mg Peso de cápsula + Muestra 5h = 23336,4 mg CONDICIONES Temperatura 50 °C Diferencia de pesadas consecutivas ≤ 0,5 mg DPC = 0,3 mg Cálculos mg extracto seco/mL. = [(Peso de cápsula + muestra) - (Peso de cápsula + muestra 5h)]/10 mg extracto seco/mL. = (23808,3 g - 23336,4 g)/10 mg extracto seco/mL. = 47,19. RM. ANEXO 03: Preparación de las concentraciones del estándar de ácido gálico. TE CA. DE. 25 25 1. Dilución Conc. mg/mL mL 100 0,02 100 0,06 100 0,1. IO. Peso mg Volumen mL Conc. mg/mL. Muestra tomada en mL 2 6 10. FA. Datos del estándar. BI BL. ANEXO 04: Preparación de las concentraciones de la muestra y sus respectivos cálculos para determinar Gramos de ácido gálico por cada 100 g de muestra de hojas de Tessaria integrifolia R. et P. 1° 1° 1° 2° 2° 2° 3° Muestra Concentración Dilución Concentración Muestra Dilución Concentración tomada tomada 471.90 10 47.19 2.5 100 1.180 10 377.52 10 37.75 2.5 100 0.944 8 302.02 10 30.20 2.5 100 0.755 6.4 241.61 10 24.16 2.5 100 0.604 5.1 193.29 10 19.33 2.5 100 0.483 4.1. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. �−� � �=( )∗ ∗ � ∗ 100 � � 0,844−0,0046 �1=(. 10 )∗. 8,65. 471,9. 0,654−0,0046 �2=(. 100 ∗(. 2.5. �1 = 8,209. ) ∗ 100. 10 )∗. 377,52. ∗ (100/2.5) ∗ 100. �2 = 7,959. ∗ (100/2.5) ∗ 100. �3 = 8,126. 0,535−0,0046 �3=(. IC. A. 8,65. 0,443−0,0046 �4=(. O. Q. 302,02. UI. )∗. 8,65. M. 10. 0,334−0,0046 �5=(. �4 = 8,384. �5 = 7,904. ∗ (100/2.5) ∗ 100. DE. 193,29. FA. )∗. RM. 10. 8,65. Y. ∗ (100/2.5) ∗ 100. IA. 241,61. AC. )∗. 8,65. BI. 10. IO. 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.0 0.000. BI BL. Absorbancia a 700 nm. TE CA. ANEXO 05: Curva estándar de ácido gálico de absorbancia vs concentración. 0.861. y = 8.65x + 0.0046 R² = 0.998 0.541. 0.169. 0.020. 0.040. 0.060. 0.080. 0.100. 0.120. Concentración de ácido gálico mg/mL.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

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