PREPARA INSTRUMENTAL Y EQUIPO DE LABORATORIO DE ACUERDO A PROCESOS ESTANDARIZADOS

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(1)Manual de Laboratorio. PREPARA INSTRUMENTAL Y EQUIPO DE LABORATORIO DE ACUERDO A PROCESOS ESTANDARIZADOS. MANUAL DE PRÁCTICAS Datos del Alumno Nombre: _________________________________________ Grupo: _____________. Turno: _________________. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. “Sin laboratorios los hombres de ciencia son como soldados sin armas” Louis Pasteur. 1.

(2) Manual de Laboratorio. PRESENTACIÓN El manual que tienes en tus manos es una recopilación de diferentes fuentes bibliográficas y en el encontraras los principios básicos para el buen manejo de los equipos y materiales principales que encontraras en un laboratorio de Química y de Análisis Químico. PREPARA INSTRUMENTAL Y EQUIPO DE LABORATORIO DE ACUERDO A PROCESOS ESTANDARIZADOS es una materia que permitirá que desarrolles tus habilidades en el manejo de equipo y materiales de laboratorio, así como en el mantenimiento de los mismos. En este manual las prácticas están diseñadas para que apliques tus conocimientos teóricos en la manipulación, mantenimiento y calibración conforme al manual o los procesos estandarizados nacionales e internacionales. Los equipos estudiados están divididos como sigue: 1) Equipo de pesado: a) Balanza granataria b) Balanza analítica c) Balanza de dos platos. 4) Equipo de calentamiento: a) Estufa eléctrica b) Mufla c) Baño María d) Horno Pasteur. 2) Equipo para microbiología y biología: a) Autoclave b) Incubadora c) Microscopio óptico d) Microscopio estereoscópico e) Cuenta colonias. 5) Equipo de análisis específico: a) Centrifuga b) Potenciómetro (pHmetro) c) Viscosímetro d) Sistema para determinación de densidad. 3) Equipo óptico: a) Refractómetro de Abbe b) Polarímetro c) Turbidimetro (Nefelómetro) d) Espectrofotómetro UV – Visible. 6) Equipo de separación: a) Cromatografía en placa fina b) Cromatógrafo de gases c) Sistema de destilación d) Sistema de filtración e) Sistema de extracción. Espero de ante mano que sea de gran utilidad este manual tanto para el profesor como para ti como alumno.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 2.

(3) Manual de Laboratorio. OBJETIVO DE LA ASIGNATURA. Al término del curso el alumno será capaz de manipular y calibrar el equipo del laboratorio según sus manuales de operación y los procedimientos estandarizados para cada material conforme a las normas, así como decidir el tipo de equipo necesario para realizar un determinado análisis conforme a la muestra que se proporciona. El curso está diseñado para impartirlo a estudiantes del segundo semestre del nivel medio superior con la carrera técnica de Laboratorista Químico y al término del mismo logrará el: -. Dominio de la lectura, interpretación y comprensión de los manuales de operación para el manejo de diversos equipos. Preparar instrumental y equipo de laboratorio de acuerdo a procesos estandarizados. Responsabilidad en el manejo de equipos del laboratorio de acuerdo al manual de operaciones y a las normas de seguridad. Capacidad para decidir el equipo adecuado según el análisis, muestra y prueba que debe realizar. Limpia el instrumental y equipo de laboratorio aplicando normas de seguridad y asumiendo una actitud constructiva. Control en los registros de calibración y bitácoras de mantenimiento de los diferentes equipos. Horas Teóricas: 2 hrs. Horas Prácticas: 4 hrs. RECOMENDACIÓN PARA EL ALUMNO. El presente manual de prácticas es un apoyo para ti, en él se encuentra las prácticas a realizar durante la asignatura. Recuerda que el nuevo Modelo Educativo por Competencias propone un aprendizaje activo, mediante la investigación, el análisis y la discusión, así como el utilizar materiales de lectura complementarios. Por ello te recomiendo seguir las siguientes sugerencias: -. Maneja el manual de laboratorio como texto orientador de los contenidos temáticos a revisar en clase y en laboratorio. Realiza las instrucciones previas a cada sesión de laboratorio ya que de aquí se desprende gran parte del trabajo en el laboratorio. Resuelve la autoevaluación, que se encuentra al final de cada práctica para reafirmar tu aprendizaje. Recuerda que tu manual de prácticas es la guía para realizar tu bitácora de laboratorio.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 3.

(4) Manual de Laboratorio. COMPETENCIAS DOCENTES: 1) Domina y estructura los temas para facilitar el aprendizaje de los alumnos. 2) Planifica el proceso de enseñanza y de aprendizaje conforme al enfoque por competencias. 3) Lleva a la práctica procesos de enseñanza y de aprendizaje de manera efectiva, creativa e innovadora a su contexto institucional. 4) Evalúa el aprendizaje con un enfoque formativo según corresponda la escala propuesta por academia. 5) Construye ambientes para el aprendizaje autónomo y colaborativo. 6) Contribuye a la generación de un ambiente que facilite el desarrollo sano e integral de los estudiantes. 7) Participa en los proyectos de mejora continua de su escuela y apoya la gestión institucional.. ENTREGA DEL REPORTE DE LABORATORIO Todos los repostes de laboratorio son individuales, deberá tener un folder de color ROJO con broche BACO y forrado de plástico. Se realizaran en hojas blancas y se deberán entregar ocho días después de realizada la practicas. Todas las practicas deberán tener su respectiva rubrica de evaluación de reporte con la firma de su padre o tutor, si no tiene dicha rubrica el reporte no será calificado. Los reportes deberán ser entregados a mano con las siguientes características: 1.- Titulo de la práctica, Objetivo y competencia. 2.- Marco Teórico referencial (máximo una cuartilla). 3.- Investigación previa. 4.- Diagrama de flujo del procedimiento experimental. 5.- Resultados y observaciones, en esta sección se colocan mediante palabras o dibujos lo que sucedió durante la práctica así como anotaciones que se propongan durante la práctica. Es recomendable que en algunas ocasiones se diseñen tablas para ir anotando lo que sucede. 6.- Cuestionario debe estar contestado, cada pregunta no contestada equivale a un punto menos en la rúbrica. 7.- Conclusiones, a partir de los resultados y observaciones se escribe un argumento sobre lo que sucedió, para poder elaborar su conclusión hágase 3 preguntas: ¿Por qué sucedió? ¿Cómo sucedió? ¿Qué aprendió? Procure no colocar “Me gusto la práctica”, “Se me hizo interesante”, “Fue entretenida”; ya que estas palabras no son objetivas. Se recomienda que empiece con una explicación breve sobre lo que realizo y de ahí conteste las tres preguntas. La conclusión se recomienda que se elabore de media cuartilla. 8.- Bibliografía, anota siempre tu bibliografía consultada, NO SACAR INORMACIÓN DE WIKIPEDIA, RINCON DEL VAGO, TAREAS.COM. Mínimo usar 2 libros.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 4.

(5) Manual de Laboratorio. REGLAMENTO DE LABORATORIO El presente reglamento estipula las reglas y normas generales que deberá seguir el alumno dentro del laboratorio Polifuncional y de Química Industrial. Este deberá ser leído en su totalidad tanto por el alumno y por el padre o tutor, firmado por ambos, en caso de no seguir el presente reglamento el alumno será sancionado según corresponda. Antes de iniciar la práctica: 1) Tendrá una tolerancia de 10 minutos para entrar al laboratorio ya que si llega después de ese tiempo no podrá entrar. 2) Deberá entrar al laboratorio con bata blanca que deberá estar abotonada y deberá estar limpia. En caso de no traerla no podrá entrar al laboratorio. 3) Cuando entre deberá dejar sus cosas en los anaqueles correspondientes para sus mochilas. Por equipo tiene que llevar su equipo de limpieza que consta de lo siguiente: 3 Franelas (sino las lleva no entrara al laboratorio), un jabón líquido, un paquete de servitoallas, 2 escobillones para tubos de ensaye y una fibra para trastes. 4) Enseguida que entre deberán pedir por mesa su material de la práctica con los encargados del laboratorio en forma ordenada, presentado 3 credenciales de los que integran el equipo. 5) Deberán verificar que el material que se les entrega está en buen estado y limpio, en caso de no ser así pedir el cambio correspondiente. Si el alumno durante el transcurso de la práctica descubre que está roto el material deberá reponerlo en su totalidad por no haber revisado el material con detenimiento. 6) Deberá portar en cada practica una copia de su carnet del seguro social por si llegase a existir algún accidente y deba ser llevado a una estancia medica no exista algún problema con la atención médica. 7) Antes de entrar al laboratorio deberá haber leído su práctica para que tenga las dudas pertinentes durante su realización, así como haber realizado las actividades previas y un diagrama de flujo o bloques del procedimiento a seguir.. Durante la práctica: 1) Las chicas deberán recogerse el cabello, sin maquillaje ya que algunos equipos ópticos pueden quedar manchados; tanto chicos como chicas no podrán usar pulseras o anillos (se permite reloj). 2) No deberá probar, tocar y oler cualquier sustancia sin la previa supervisión del profesor. 3) No podrá ingerir ningún tipo de alimento dentro del laboratorio, si necesita tomar agua podrá salir del laboratorio y tomarla afuera. 4) Cuando no se utilicen los bancos estos deberán estar debajo de su mesa y dejar libres los espacios de mesa en mesa para permitir el libre paso. 5) En su mesa de trabajo deberá haber solo su material de laboratorio, su bitácora, un cuaderno de anotaciones y sus plumas en las bolsas de la bata. 6) No deberá maltratar el material y equipo de laboratorio, si se le sorprende causando algún daño será sancionado de la siguiente forma: a) Si rompiese y fracturara material de vidrio, metal o porcelana deberá ser comprado o mandado a reponer (si es que tenga remedio), en no más de 2 semanas para lo cual su credencial será retenida y no se le entregara hasta. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 5.

(6) Manual de Laboratorio que reponga dicho material, así también no podrá entrar al laboratorio a la tercer semana que rompió y/o fracturo el material sino lo ha repuesto. b) Si descompusiese y causara algún daño al equipo que se encuentra en el laboratorio por las siguientes causas: mal uso, jugar con él, desarmar el equipo sin la presencia del profesor o alguna otra causa injustificable por el alumno, deberá pagar en su totalidad el equipo. c) Si se le encuentra maltratando las mesas, gavetas, sillas y/o bancos del laboratorio será reportado con las autoridades pertinentes y será suspendido del laboratorio hasta que se presenten sus padres o tutores. 7) Las tarjas no son basureros, si se le descubre tirando la basura en las tarjas se le llamara la atención y realizara el aseo durante dos sesiones seguidas.. Al terminar la práctica: 1) Diez minutos antes de terminar la práctica deberá entregar su material de laboratorio. Deberá limpiar su mesa completamente y lavara todo su material. 2) Deberá colocar los reactivos donde los tomo. 3) Deberá lavarse las manos perfectamente para evitar ingerir sustancias que se hayan impregnado en ellas. 4) Entregará el material que recibió limpio y parciamente seco, se le revisara el material en el momento y en caso de estar roto o fracturado se procederá como ya se mencionó. Si después que el alumno haya entregado el material los encargados del laboratorio encuentran material roto y/o fracturado no podrán obligar al alumno a pagarlo. 5) Podrán recoger sus credenciales si su material ya fue revisado. 6) Por equipo de trabajo cada semana barrerán el laboratorio para dejarlo limpio. Evaluación: 1) El laboratorio tiene un determinado valor sobre su calificación el cual ya fue informado por su profesor. 2) Deberá tener su manual de prácticas engargolado o en una carpeta, no se aceptan manuales sueltos o con grapas. 3) Es importante que realices las actividades propuestas ya que a partir de estas actividades se realizara las prácticas. 4) El alumno deberá entregar la bitácora en tiempo y forma para su evaluación, será criterio del profesor si recibe reportes fuera de tiempo. Recuerda que este reglamento es para tu seguridad dentro del laboratorio. Hago constar que el alumno __________________________________________________ he leído completamente el presente reglamento y mi padre/madre o tutor _____________________________________________ también, por ello aceptamos las condiciones aquí planteadas.. ____________________________ Firma Alumno. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. ______________________________ Firma del Padre/Madre/Tutor. 6.

(7) Manual de Laboratorio. Pega aquí la copia de tu carnet. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 7.

(8) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 1. “RECONOCIMIENTO DEL MATERIAL DE LABORATORIO” Tiempo: 100min COMPETENCIA PROFESIONAL Prepara el instrumental de laboratorio explicando su funcionamiento y siguiendo instrucciones.. OBJETIVO GENERAL Identifica cada uno de los materiales del laboratorio, clasificándolos según su COMPETENCIA GENÉRICA material de fabricación y uso.. Asume una actitud constructiva, congruente con los conocimientos y habilidades con los que cuenta dentro de distintos equipos de trabajo.. INTRODUCCIÓN Se entiende por clasificación al proceso que permite la ordenación sistemática en categorías basadas en un plan definido en un criterio preestablecido, también, es la acción de distribuir o agrupar las cosas por clases, calidades, tamaños, etc. El material de laboratorio puede ser clasificado de varias maneras, atendiendo al: a) Elemento de fabricación b) Por su forma c) Por su uso Los elementos más comunes de fabricación son: metales, madera, plástico y vidrio (pyrex o borosilicato). El material de laboratorio es variado desde vasos de precipitados, matraces, buretas, crisoles, etc. INVESTIGACIÓN PREVIA 1.- A partir de una monografía o de imágenes recorte los diferentes materiales de laboratorio. Laboratorio Material y Equipo Material variado. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. Reactivos N.A.. Alumnos Material Colores Pegamento Recortes. 8.

(9) Manual de Laboratorio PROCEDIMIENTO 1.- Identifique cada uno de los materiales de laboratorio de las charolas de cada equipo. 2.- Realice un enlistado con las imágenes colocando nombre, material de fabricación y su uso. 3.- Identifique de ambos laboratorios los equipos de seguridad con que se cuentan y los señalamientos de seguridad. Llene la Tabla No.1: Imagen. Significado / Uso. 4.- Diga cuales son los señalamientos que harían falta para que existan mejores medidas de seguridad. 5.- Realice un listado de los diferentes servicios con los que cuenta el laboratorio. CUESTIONARIO a) Explique porque algunos materiales deben estar fabricados de porcelana. b) De qué tipo de metal están construidos algunos materiales de laboratorio. c) Explique la importancia de tener equipos y medidas de seguridad en el laboratorio. d) Explique los colores de cada tubería en el laboratorio. e) Investigue otros materiales de laboratorio que se utilizaban antes o algunos que sean de uso muy específico.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 9.

(10) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 2. “RECONOCIMIENTO DEL EQUIPO DE LABORATORIO” Tiempo: 100min COMPETENCIA PROFESIONAL Prepara el instrumental de laboratorio explicando su funcionamiento y siguiendo instrucciones.. OBJETIVO GENERAL Identifica cada uno de los equipos con los que cuenta el laboratorio y genera sus COMPETENCIA GENÉRICA diagramas de manipulación. Asume una actitud constructiva,. congruente con los conocimientos y habilidades con los que cuenta dentro de distintos equipos de trabajo. INTRODUCCIÓN Los equipos de laboratorio también son conocidos como instrumentos de laboratorio, estos nos permiten medir propiedades físicas o químicas de una sustancia, la mayoría de ellos son mecánicos o eléctricos y de alto precio. Las condiciones de operación para estos son específicas y necesitan de su propio software para que funcionen, la mayoría de ellos ya son digitales por lo cual necesitan cuidados muy específicos. El mantenimiento preventivo y correctivo lo debe realizar gente especializada en el equipo ya que ellos conocen los errores comunes y pueden arreglarlos.. INVESTIGACIÓN PREVIA 1.- Investigue las aplicaciones de cada uno de los siguientes equipos y genere un cuadro o mapa: Polarímetro / Potenciómetro / Espectrofotómetro UV-Visible / Nefelómetro Cuanta colonias / Cromatógrafo de gases / Mufla / Estufa de calentamiento Horno Pasteur / Balanza granataria / Balanza analítica / Autoclave / Incubadora Rotovapor / Refractómetro / Centrifuga / Microscopio óptico / Microscopio estereoscópico Laboratorio Material y Equipo Equipo variado. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. Reactivos N.A.. Alumnos Material Colores Plumines. 10.

(11) Manual de Laboratorio PROCEDIMIENTO 1.- Ponga atención a la explicación que dará el profesor para cada equipo con el que se cuenta en el laboratorio. 2.- Tome nota de las partes que explicara para cada equipo, aun no realice los dibujos. 3.- Al finalizar la explicación de cada equipo, por integrantes de mesa de laboratorio elijan 3 equipos y realicen un dibujo de los equipos anotando sus partes explicadas. 4.- Finalizado el dibujo, se le repartirá el manual de operación para dos equipos, léalo en equipo y realice el diagrama de flujo del funcionamiento del equipo que le toco. 5.- Pida a los demás equipos que le proporcionen su diagrama de flujo para completar su reporte. CUESTIONARIO a) Investigue cual es el mantenimiento preventivo para los tres equipos que dibujo. b) Investigue cuales son los principales errores que aparecen en el funcionamiento de la mufla y del refractómetro. c) Indique los cuidados principales de dos equipos que reviso en la práctica.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 11.

(12) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 3. “LIMPIEZA DEL MATERIAL DE LABORATORIO”. OBJETIVO GENERAL Realizar el proceso de limpieza a los materiales de laboratorio.. Tiempo: 100min COMPETENCIA PROFESIONAL Limpia el instrumental y equipo de laboratorio aplicando normas de seguridad y asumiendo una actitud constructiva. COMPETENCIA GENÉRICA Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo cómo cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.. INTRODUCCIÓN Para desarrollar correctamente cualquier trabajo en el laboratorio es necesario mantener siempre limpio el material y la mesa de trabajo. El material debe estar limpio y seco antes de empezar la práctica. La limpieza del material se debe realizar inmediatamente después de cada operación ya que es mucho más fácil y además se conoce la naturaleza de los residuos que contiene. Para limpiar un objeto, en primer lugar se quitan los residuos (que se tiran en el recipiente adecuado) con una espátula o varilla y después se limpia con el disolvente apropiado. El agua con jabón es uno de los mejores métodos de limpieza. Ocasionalmente, se utilizan ácidos, bases o disolventes orgánicos para eliminar todos los residuos difíciles. La última operación de lavado consiste en enjuagar todo el material con agua destilada. El material limpio se seca en un soporte adecuado inclinado o vertical, colocando el material boca abajo, o bien se utiliza una estufa de secado. En este último caso el material debe ser introducido en la estufa sin tapones ni llaves. Existen otros métodos para lavar el material que comportan la utilización de agentes más agresivos (ácidos, bases, agua regia, mezcla crómica, potasa alcohólica, etc.). En caso de tener un residuo intratable consultar al profesor. INVESTIGACIÓN PREVIA 1.- Investigue los diferentes tipos de soluciones limpiadoras que existen y como se preparan. 2.- Describa en qué consisten los procesos de esterilización de material de vidrio. 3.- Realice un diagrama de flujo donde describa como se lava el material de vidrio, metal y porcelana. 4.- Describe en que consiste la esterilización y como se clasifica.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 12.

(13) Manual de Laboratorio. Laboratorio Material y Equipo 10 Pipetas serológicas 5 Matraces Erlenmeyer 2 Probetas 10 Tubos de ensaye 3 Cajas Petri 3 Vasos de precipitados 1 Bureta Estufa eléctrica Horno Pasteur. Reactivos. Agua Soluciones limpiadoras. Alumnos Material Jabón liquido Alcohol Equipo de limpieza Papel manila Algodón Gasas. PROCEDIMIENTO A) Limpieza del material de vidrio. 1.- Realice una solución de jabón, para ello mida 50ml de jabón líquido y agréguelos a 500ml de agua fría si la suciedad no es grasa, pero en agua caliente si la suciedad es grasa o tiene materia incrustada. Precaliente una estufa eléctrica a 90°C. 2.- Agregue la solución a una charola y coloque ahí el material a limpiar, déjelo reposar por 15 minutos. 3.- Mientras el material reposa escuche la explicación del profesor para limpiar las pipeteas, los matraces y los tubos de ensaye, vaya realizando un diagrama (puede utilizar el que ya realizo previamente) del proceso de limpieza. 4.- Lave el material de la charola según la explicación que se dio, al finalizar enjuague con agua destilada y seque parcialmente con una franela. Coloque el material en la estufa eléctrica por 15 minutos más. 5.- Cuando haya finalizado el tiempo retire el material y deposítelo en su charola. 6.- Escuche la explicación de las soluciones limpiadoras y anote lo más importante. B) Preparación de material para esterilización 1.- Ponga atención a la explicación del profesor para preparar material que se esterilizara, realice un diagrama donde describa el proceso. 2.- Después de la explicación prepare el material que tiene en su charola, lleve el material para su evaluación y colóquelo en un horno Pasteur a 150°C. CUESTIONARIO a) Investigue y describa en que consiste la esterilización por vía húmeda. b) Describe en qué tipo de suciedad se aplica cada solución limpiadora.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 13.

(14) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 4. “MANIPULACIÓN DE BALANZAS”. OBJETIVO GENERAL Manipula y calibra balanzas que serán utilizadas en mediciones analíticas.. Tiempo: 100min COMPETENCIA PROFESIONAL Opera el equipo de laboratorio siguiendo instrucciones y procedimientos de manera reflexiva y explicando su funcionamiento aplicando las buenas prácticas de laboratorio. COMPETENCIA GENÉRICA Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo cómo cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.. INTRODUCCIÓN La balanza es un instrumento que mide la masa de una sustancia o cuerpo, utilizando como medio de comparación la fuerza de la gravedad que actúa sobre dicha masa. Existen 2 tipos de balanza muy comunes en los laboratorios: 1) Balanza Granataria: Dispone de tres masas conocidas que se pueden desplazar sobre escalas, una con una graduación macro y la otra con una graduación micro. Al colocar una sustancia de masa desconocida sobre el plato, se determina su peso deslizando las masas sobre las escalas mencionadas hasta que se obtiene la posición de equilibrio. En dicho momento se toma la lectura sumando las cantidades indicadas por la posición de las masas sobre las dos escalas. 2) Balanza Analítica: Funciona mediante al principio de compensación de fuerza electromagnética, aplicable a desplazamientos o pares de fuerza, donde se combina la exactitud de los componentes mecánicos con los sistemas automáticos de lectura. La Organización Internacional de Metrología Legal (OIML) ha clasificado las balanzas en cuatro grupos [1]: 1. Grupo I: Balanzas de exactitud especial. 2. Grupo II: Balanzas de exactitud alta. 3. Grupo III: Balanzas de exactitud media. 4. Grupo IV: Balanzas de exactitud ordinaria. Como mínimo las balanzas electrónicas se deberían calibrar una vez al año. Para el caso de balanzas con calibración interna esto sólo es necesario si el resultado de dicha calibración interna es incompleto o insatisfactorio. Como aspecto fundamental la calibración se debe realizar con base a las especificaciones de la OIML o de otra entidad equivalente como puede ser la ASTM, instituciones que han desarrollado metodologías para clasificar las pesas o masas patrón, utilizadas para las calibraciones. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 14.

(15) Manual de Laboratorio INVESTIGACIÓN PREVIA 1.- Escriba la densidad del agua y del alcohol del 96%. 2.- Describa cuales son los diferentes tipos de errores al pesar en las balanzas y a que se le atribuyen cada uno. Laboratorio Material y Equipo. Reactivos. 1 Probeta de 25ml 1 Vaso de precipitados 250ml 1 Espátula 1 Vidrio de reloj 1 Termómetro Equipo de pesas patrón Balanza granataria Balanza analítica. Agua. Alumnos Material 1 Pincel de cerda delgada Sal de mesa Alcohol Equipo de limpieza. * El agua y el alcohol colocarlos en una pizeta. PROCEDIMIENTO A) Calibración de la balanza granataria. 1.- Transportar la balanza granataria hasta su mesa y colocarla deslizándola por la mesa, procure que la mesa no se mueva. 2.- Con el pincel de cerda delgada limpiar el platillo, tomar las pesas móviles del brazo y colocarlas en cero. 3.- Debajo del platillo se encuentra el tornillo nivelador que sirve para calibrarla, al final del brazo que soporta las pesas móviles (lado derecho) se encuentra el índice de fiel, gire el tornillo nivelador para que la marca del índice de fiel quede exactamente igual a la marca del soporte θ. 4.- Tome una pesa patrón y colóquela sobre el platillo, con ayuda de las pesas móviles muévalas a la derecha hasta nivelar la marca del índice de fiel y la marca del soporte. 4.- Apunte el valor en la Tabla No. 2, vuelva todas las pesas a cero para liberar la balanza. 5.- Pase la pesa el siguiente equipo y que la pese de nuevo. Tabla No. 2 Calibración con pesas patrón Pesas patrón (g). Balanza granataria (g). Balanza analítica (g). B) Calibración de la balanza analítica. 1.- Con el pincel de cerda delgada limpie el platillo procurando limpiar también los huecos que están en el platillo. 2.- Cierre todas las puertas de la balanza y busque la burbuja de nivelación (que se encuentra en la parte de enfrente), con los tornillos niveladores (que se encuentran. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 15.

(16) Manual de Laboratorio debajo, en la parte de atrás) comience a girarlos procurando que la burbuja de aire quede en medio. 3.- Prenda la balanza oprimiendo el botón ON, déjela un minuto prendida para que se estabilice. 4.- Abra la puerta izquierda o derecha de la balanza y coloque la primera pesa patrón. 5.- Cierre la puerta y espere a que el peso quede estable, apunte el valor en la tabla No. 2 6.- Abra la puerta izquierda o derecha y retire la pesa, cierre y espere unos segundos a que se equilibre. 7.- Realice el mismo procedimiento con las pesas hasta llenar la tabla. 8.- Al finalizar las pesadas apague la balanza con el botón de OFF. C) Peso por diferencia: Determinación de la densidad del agua y el alcohol. 1.- Con la balanza granataria calibrada, pese una probeta de 25ml vacía, anote el peso como P1 pese la misma probeta en la balanza analítica, anote los valores en la tabla No. 3 2.- Libera ambas balanzas (regrese las pesas a cero), llene con agua la probeta hasta la marca de 25ml y pese nuevamente P2*, pese la probeta en la balanza analítica anote los valores en la tabla No. 3. 3.- Libere la balanza y realice el mismo procedimiento con el alcohol, anote valores en la tabla No. 4. Tabla No. 3 Densidad del agua Agua Balanza Granataria Balanza Analítica Peso de la probeta vacía (P1) Peso de la probeta llena (P2) Peso del líquido (P3). Tabla No. 4 Densidad del alcohol Alcohol Balanza Granataria Balanza Analítica Peso de la probeta vacía (P1) Peso de la probeta llena (P2) Peso del líquido (P3). D) Peso por adición. 1.- Con la balanza analítica calibrada, abrir una de las puertas izquierda o derecha y colocar el vidrio de reloj; apuntar como M1 en la tabla No. 5. 2.- Apretar el botón TARA y se colocara en cero la pantalla. 3.- Abrir nuevamente la puerta, con ayuda de una espátula agregar la cantidad de 1.362g de sal aproximadamente; apuntar como M2 en la tabla No. 5. 4.- Apretar el botón TARA y sacar el vidrio de reloj procurando de no tirar sal. 5.- En la balanza granataria pese el vidrio de reloj y anote el peso como M1, a ese peso súmele la cantidad de sal a pesar que es de 1.362g. 6.- Mueva las pesas móviles hasta el peso que debe alcanzar, con cuidado agregue sal con la espátula hasta que la marca de fiel coincida con la marca del soporte (M2). 7.- Retire el vidrio de reloj, limpie cada una de las balanzas con mucho cuidado.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 16.

(17) Manual de Laboratorio. Tabla No. 5 Peso de sal Balanza Granataria Balanza Analítica M1 M2. NOTAS: θ Para que el brazo que mantiene las pesas no se pandee puede sostenerlo mientras gira el tornillo nivelador. * Si se moja la probeta por fuera séquela bien. CÁLCULOS 1) Consiga todos los resultados de peso de los otros equipos y genere una tabla. 2) Calcule para cada pesa: 𝑎) 𝑏) 𝑐). 𝑃𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜 = ∑. 𝑀𝑒𝑑𝑖𝑐𝑖𝑜𝑛𝑒𝑠 𝑁𝑢𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑐𝑖𝑜𝑛𝑒𝑠. 𝐷𝑒𝑠𝑣𝑖𝑎𝑐𝑖ó𝑛 = 𝑀𝑒𝑑𝑖𝑐𝑖ó𝑛 − 𝑃𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜. 𝐼𝑛𝑐𝑒𝑟𝑡𝑖𝑑𝑢𝑚𝑏𝑟𝑒 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑎 = 𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝐷𝑒𝑠𝑣𝑖𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑀𝑎𝑦𝑜𝑟 4). 𝐼𝑛𝑐𝑒𝑟𝑡𝑖𝑑𝑢𝑚𝑏𝑟𝑒 𝑅𝑒𝑙𝑎𝑡𝑖𝑣𝑎 =. 𝐼𝑛𝑐𝑒𝑟𝑡𝑖𝑑𝑢𝑚𝑏𝑟𝑒 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑎 𝑃𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜. 3) Calcule la densidad del agua y del alcohol: 𝜌=. 𝑃3 25𝑚𝑙. 4) Calcule el porciento de error (%E) para la densidad del agua y del alcohol: %𝐸 =. 𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑡𝑒ó𝑟𝑖𝑐𝑜 − 𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑒𝑥𝑝𝑒𝑟𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑙 𝑥 100 𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑡𝑒ó𝑟𝑖𝑐𝑜. 5) Reporte cuál de las dos balanzas es más exacta y precisa, que será la que tenga menor valor de incertidumbre relativa y menor %E.. CUESTIONARIO a) Describa los cuidados que debe tener cada una de las balanzas. b) Especifique que sustancias NO se recomienda pesar en las balanzas. c) ¿Por qué motivo no deben pesarse sustancias calientes?. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 17.

(18) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 5. “CURVAS DE SECADO: ACONDICIONAMIENTO DE ESTUFAS” Tiempo: 150min COMPETENCIA PROFESIONAL Opera el equipo de laboratorio siguiendo instrucciones y procedimientos de manera reflexiva y explicando su OBJETIVO GENERAL Realiza una curva de secado para funcionamiento aplicando las buenas identificar el funcionamiento correcto y el prácticas de laboratorio. calentamiento homogéneo de una estufa eléctrica. COMPETENCIA BASICA DISCIPLINAR. Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y equipo en la realización de actividades de su vida cotidiana. INTRODUCCIÓN Las estufas de calentamiento son equipos para calentar y secar materiales con un desarrollo preciso y fiable, destinados a ser utilizados en la investigación, el desarrollo, la manufactura, las actividades comerciales y el control de calidad. Las estufas de laboratorio se caracterizan por su disposición modular y cuentan con una amplia gama de equipamientos y accesorios opcionales. Su versión básica – en función del tipo de aparato – se fabrica con un volumen que oscila entre los 22 y los 707 litros y cuenta con circulación de aire natural o forzado y posibilidad de vacuidad [2]. Las estufas de laboratorio deben cumplir con los requerimientos de reproducción y precisión en la distribución de temperatura, que se desprenden de normas de calidad como la ISO 9000 o la ISO/17025 que son: 1) Volumen de la cámara: 22, 55, 111, 222, 404 y 707 [litros] 2) Rango de temperatura: desde los 5ºC por encima de la temperatura ambiente hasta los 300ºC 3) Líneas de automatismo del control básico: Línea estándar y Línea confort INVESTIGACIÓN PREVIA 1.- Realice un organizador grafico donde explique cada tipo de estufa eléctrica: circulación natural, circulación forzada y con vacuidad. 2.- Investigue los siguientes términos: Secado / Humedad superficial / Humedad crítica / Agua de cristalización 3.- Investigue de la fruta que selecciono la máxima humedad que puede tener.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 18.

(19) Manual de Laboratorio Laboratorio Material y Equipo Reactivos 1 Vidrio de reloj 1 Espátula 1 Cuchillo 1 Pinzas para crisol Balanza Analítica. Alumnos Material Fruta fresca dura no con gajo Equipo de limpieza Papel aluminio Cronometro. N.A.. PROCEDIMIENTO 1.- Se precalienta la estufa a 80°C mientras que se corta la fruta en rodajas lo más finas posibles*. Debe verificar que el termómetro este instalado en la chimenea y que indique la temperatura deseada. 2.- Se pesa la rodaja de la fruta en una balanza analítica con ayuda de una charolita de aluminio y se anota el peso en la Tabla No. 6 θ. 3.- Se coloca la charola de aluminio en la estufa y deje correr el cronometro, se dejan pasar 10 minutos. 4.- Al término retirar la charola con ayuda de las pinzas para crisol, dejar enfriar un poco y pesar en la balanza analítica anotando el resultado en la tabla. 5.- Volver a colocar la charola en la estufa y dejar 10 minutos más y seguir este procedimiento hasta obtener 3 pesos constantes.. Peso 1 3 5 7 9 11 13 15. Tabla No. 6 Peso de la Fruta Peso de la rodaja Tiempo Peso Peso de la rodaja Tiempo Pi= 0 min 2 4 6 8 10 12 14 16. NOTAS: * Pida una media hora antes de empezar la práctica que se precaliente la estufa ya que tarda en calentarse. θ Pueden llevarse ya las rodajas de la fruta, pero para que no se oxiden untar limón. CÁLCULOS 1) Obtener la humedad para cada medición: 𝑋=. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 𝑃𝑖 − 𝑃𝑗 𝑃. 19.

(20) Manual de Laboratorio X= Humedad (g agua/g fruta) Pi = Peso inicial (g) Pj = Peso siguiente (g) P= Ultimo Peso (g fruta) 2) Generar una tabla de resultados. 3) Obtener la gráfica tiempo (eje de las x) & humedad (eje de las y) identificar el punto donde se encuentra un máximo de humedad constante. 4) Compare la humedad máxima experimental con la humedad máxima teórica. CUESTIONARIO a) ¿Qué utilidad tiene la curva de secado? b) ¿En que otro ámbito industrial sería útil realizar una curva de secado? c) ¿Qué tipo de estufa se utilizó en esta práctica? d) ¿Por qué la temperatura no fue mayor a 80°C? e) ¿Qué nos dice el resultado teórico con respecto al resultado práctico?. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 20.

(21) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 6. “DETERMINACIÓN DE PESO CONSTANTE Y CENIZAS”. OBJETIVO GENERAL Desarrollar el proceso de peso constante y obtener las cenizas de un alimento.. Tiempo: 200min COMPETENCIA PROFESIONAL Opera el equipo de laboratorio siguiendo instrucciones y procedimientos de manera reflexiva y explicando su funcionamiento aplicando las buenas prácticas de laboratorio. COMPETENCIA BASICA DISCIPLINAR Obtiene, registra y sistematiza la información para responder a preguntas de carácter científico, consultando fuentes relevantes y realizando experimentos pertinentes.. INTRODUCCIÓN En los procedimientos analíticos, frecuentemente aparecen instrucciones de que las muestras, crisoles, vidrios de reloj, pesafiltros, etc., se deben secar, calentar o calcinar “a peso constante”. Este término requiere ciertas explicaciones, es obvio que cualquier variación del peso de un objeto no será detectable cuando sea de magnitud inferior a la sensibilidad de la balanza. Por lo tanto, el “peso constante” depende de la precisión obtenida en la pesada [10]. Esto hace necesario que se calcule la precisión de la balanza analítica, generalmente la precisión oscila entre 0.2 – 0.3 [mg], el proceso de peso constante consta de 3 pasos: 1) Calentamiento del recipiente 2) Enfriamiento del recipiente 3) Pesar el recipiente Llevándose a cabo este proceso con el recipiente hasta peso constante con una diferencia de peso + 0.2mg, posteriormente se pesa una cierta cantidad de muestra, que oscila entre 2g – 6g y se le aplica el mismo proceso llevándose a cabo el secado de la muestra. El método más generalizado para la determinación de materia volatilizable y orgánica, se basa en el proceso de calcinación de la materia orgánica por calentamiento a temperaturas elevadas, hasta llegar a un peso constante. Equipos diseñados especialmente para lograr temperaturas elevadas son las muflas u hornos que pueden trabajar en condiciones de presión normal o de vacío, con o sin circulación de aire.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 21.

(22) Manual de Laboratorio INVESTIGACIÓN PREVIA 1.- Investigue las aplicaciones de la calcinación en el análisis químico 2.- Mencione las reglas de seguridad al utilizar la mufla Laboratorio Material y Equipo 1 Pinzas para crisol 1 Crisol 1 Par de guantes 1 Tripie 1 Triangulo de porcelana 1 Mechero Bunsen Balanza analítica Estufa Eléctrica Mufla Desecador. Reactivos. Alumnos Material. Alimento N.A.. PROCEDIMIENTO A) Crisol a peso constante. 1.- Con ayuda de unas pinzas para crisol, pesar en la balanza analítica un crisol previamente limpio Ω. 2.- Anotar el peso del crisol, pasar el crisol a una estufa eléctrica previamente precalentada a 110°C durante 15 minutos. 3.- Mientras se calienta el crisol, precalentar la mufla a 500°C; después de que hayan pasado los 15 minutos con ayuda de unas pinzas para crisol y un guante pasar el crisol a la mufla* por 45 minutos. 4.- Cuando haya pasado el tiempo retirar el crisol y pasar a la estufa eléctrica por 15 minutos posteriormente retirar el crisol, esperar a que se enfrié a temperatura ambiente, esto puede ser por 5 minutos. 5.- Pasar el crisol al desecador para que repose por 10 minutos procurando abrir el desecador deslizando la tapa θ. 6.- Posteriormente pesar en la balanza analítica y anotar el peso. 7.- Repetir el procedimiento hasta que se alcance el peso constante, anote resultado en la tabla No. 7. Notas: Ω Cuando lave el crisol procure secar el crisol con un paño que no suelte pelusa. * La mufla se abre con el cuerpo colocado al lado de la palanca de apertura, NUNCA de frente. θ No cierre por completo el desecar, deje una pequeña apertura. π Se puede dejar 15 minutos más del tiempo encontrado para que toda el agua se evapore.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 22.

(23) Manual de Laboratorio. Tabla No. 7 Crisol a peso constante Corrida Peso 1 2 3 4 5 6 B) Pre – tratamiento.* 1.- Colocar el sistema como se muestra en la imagen A:. Imagen A 2.- Colocar en el crisol tarado (que está a peso constante) la muestra de alimento, sobre el triángulo de porcelana en un ángulo de 15° aproximadamente. 3.- Prender el mechero con una flama máxima y dejar quemar la muestra por 10 minutos, precalentar la mufla a 550°C. 4.- Observara como salen humos negros, deje que se siga quemando hasta que ya no salgan esos humos, poco a poco se verán humos grises en ese momento retirar de la flama. C) Calcinación. 1.- Pasar el crisol a la mufla con mucho cuidado y dejar ahí por 25 minutos. 2.- Finalizado el tiempo retirar de la mufla el crisol con mucho cuidado y dejar enfriar por aproximadamente 5 minutos al aire. 3.- Ya frio pasar al desecador por 15 minutos, pesar anotando el resultado en la tabla No. 8 y seguir con el mismo procedimiento desde la mufla hasta peso constante. Notas: * Este paso no es necesario si se sabe que la cantidad de materia orgánica es muy poca.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 23.

(24) Manual de Laboratorio Tabla No. 8 Cenizas Corrida Peso 1 2 3. CÁLCULOS 1) Obtener la cantidad de cenizas: 𝑃𝑍 = 𝑃𝑆 − 𝑃𝐶 PZ= Peso de las cenizas (g) PS= Peso de crisol + cenizas (g) PC= Peso del crisol a peso constante (g) 2) Obtener el porcentaje de cenizas: %𝐶 =. 𝑃𝑍 𝑥 100 𝑃𝐼. CUESTIONARIO a) ¿Por qué es necesario calentar primeo el crisol antes de colocar en la mufla? b) ¿Por qué cuando se saca el crisol de la mufla no se deja enfriar al aire? c) Explique porque antes de pasar el crisol a la mufla primero se calienta en el mechero. d) ¿Por qué debe tenerse tanta precaución al abrir la mufla? e) El enfriamiento del crisol después de salir de la mufla, ¿Puede verse afectado el peso? Explique su respuesta.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 24.

(25) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 7. “PREPARACIÓN DE SOLUCIONES” Tiempo: 100min. OBJETIVO GENERAL Manipular el material volumétrico para la preparación de soluciones y diluciones.. COMPETENCIA PROFESIONAL Prepara el instrumental de laboratorio explicando su funcionamiento y siguiendo instrucciones y procedimientos de manera reflexiva. COMPETENCIA GENERICAS Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo cómo cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.. INTRODUCCIÓN Las disoluciones son mezclas homogéneas de dos o más componentes, llamándose disolvente al que está en mayor proporción y soluto al que está en menor proporción. La medida de volúmenes, operación muy frecuente en el laboratorio, puede realizarse con diferentes utensilios (probetas, buretas, etc) en función de la precisión y exactitud deseadas. Cuando se introduce agua u otro líquido en la probeta, pipeta serológica, pipeta volumétrico, bureta o matraz volumétrico se observa que la superficie presenta una curvatura denominada menisco. Para realizar la lectura correcta deberás colocar los ojos a la altura del menisco, existen dos tipos de menisco el cóncavo y el convexo, para el caso de un menisco cóncavo, la lectura se realiza a la altura del punto más bajo de la superficie del líquido. Donde el punto más bajo del menisco debe tocar el borde superior de la división de la escala. Para medir volúmenes con una pipeta debe introducirse el líquido a la pipeta por absorción con ayuda de una propieta, se enrasa en una medida determinada que nos indica el volumen exacto del líquido contenido en la pipeta para evitar que salga el líquido de la pipeta debe cerrarse el orificio de la parte superior con el dedo índice procurando que no quede ningún espacio entre el dedo y la boca de la pipeta, algunas propiteas evitan que el líquido no salga. Cuando se mide se debe retirar la pipeta del líquido ya que el empuje provoca un error en este.. INVESTIGACIÓN PREVIA 1.- Investigue los tipos de menisco y como se deben observar. 2.- Indique cuales son los errores típicos en la medición de volúmenes.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 25.

(26) Manual de Laboratorio. Laboratorio Material y Equipo 1 Vidrio de reloj 1 Espatula 1 Probeta de 50ml 2 Vasos de precipitados de 250ml 1 Varilla de vidrio 2 Matraces Erlenmeyer de 250ml 2 Vasos de precipitados de 100ml 1 Pizeta 2 Matraces Volumétricos de 100ml 2 Vasos de precipitados de 50ml 2 Pipetas de 5ml 2 Pipetas Volumetricas de 10ml 1 Propipeta Balanza analítica. Reactivos. Na2CO3 NaCl. Alumnos Material. Sobre de Tang. PROCEDIMIENTO A) Preparación de soluciones porcentuales 1.- Pesar 1.25g de sal mesa y medir con una probeta 50ml de agua de la llave. 2.- Agregar la sal en un vaso de precipitados y agregar el agua. 3.- Agitar con una varilla de vidrio hasta que la sal disuelva por completo. 4.- Rotule el vaso con una etiqueta colocando la cantidad de sal y de agua que se agregó. 5.- Pesar 1.25g de tang y medir con probeta 50ml de agua de la llave. 6.- Agregar el tang en un vaso de precipitados la sal y agregar el agua. 7.- Agitar con una varilla de vidrio hasta que el tang se disuelva por completo. 8.- Rotule el vaso con una etiqueta colocando la cantidad de tang y de agua que se agregó. 9.- Tome la probeta de 50ml y mida 15ml de la solución de sal, agréguelos en un matraz Erlenmeyer de 250ml. 10.- Seque la probeta de 25ml y mida 15ml de la solución de tang, agréguelos en el matraz Erlenmeyer de 250ml. B) Soluciones valoradas con sólidos. 11.- Pesar 1.3460g exactos de carbonato de sodio, agregue el reactivo en un vaso de precipitados de 100ml. Procure lavar el sobrante de reactivo que queda en el vidrio de reloj con gotas de una pizeta. 12.- Agregue aproximadamente 20ml de agua y disuelva el carbonato de sodio, lo que se pueda disolver. 13.- Transvase el carbonato disuelto a un matraz volumétrico de 100ml, procure que solo pase el líquido. 14.- Agregue nuevamente 20ml más de agua al vaso de precipitados y disuelva el sobrante de carbonato, vuelve a transvasar al matraz volumétrico de 100ml. 15.- Si aún queda reactivo sin disolver agregue más agua, pero sin exceder de 80ml. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 26.

(27) Manual de Laboratorio 16.- Proceda a aforar con agua con cualquiera de los dos métodos: a) Coloque una varilla de vidrio en 30° en la boca del matraz y con ayuda de la pizeta o un vaso con agua agregue poco a poco agua hasta que llegue al aforo. b) Agregue con la pizeta o con el vaso lo que falta de agua procurando que sea gota a gota hasta que se llegue al aforo. 17.- Tape el matraz volumétrico y agite soportando el cuerpo con una mano y el cuello con la otra. Destape el matraz volumétrico y rotúlelo. 18.- Vuelva a realizar el mismo procedimiento con el tang. C) Soluciones valoradas con líquidos. 19.- Coloque el frasco del reactivo líquido en la campa de extracción, ábralo y agregue un poco a un vaso de precipitados de 50ml. 20.- En otro vaso de precipitados coloque 20ml de agua aproximadamente y colóquelo a lado del vaso que contiene el reactivo a medir. 21.- Coloque la propipeta en la pipeta graduada y mida 1ml de ácido clorhídrico o ácido sulfúrico. Introduzca la punta de la pipeta hasta la parte inferior del líquido y poco a poco succione el reactivo según lo que utilice para succionar: a) Si utiliza jeringa procure que el embolo se encuentre hasta abajo, de no ser así retire la jeringa y expulse el aire, mueva el embolo hacia arriba con el pulgar suavemente, procure que el reactivo no llegue hasta la parte superior. b) Si utiliza pera de succión, fuera del vaso apriétela para retirar el aire, no deje de apretar, después deje de apretar poco a poco dentro del líquido hasta obtener el volumen necesario sin dejar de presionar. c) Si utiliza propipeta de tres vías retire primero el aire y comience a succionar apretando el botón de succión. 22.- Coloque el ácido poco a poco en el vaso de precipitados con agua agregándolo por las paredes del vaso. 23.- Al matraz volumétrico de 100ml agregue 20ml de agua y agregue el contenido del vaso de precipitados con el ácido, afore con agua y agite con mucho cuidado. D) Preparación de una dilución 24.- Vierta en un vaso de precipitados de 250ml toda la solución de bicarbonato de sodio. Vierta en otro vaso de precipitados de 250ml toda la solución de ácido. 25.- Tome del primer vaso 10ml de la solución con una pipeta volumétrica y agréguela a un matraz volumétrico de 100ml y afore con agua de la llave. Procure que la punta de la pipeta toque el fondo del matraz volumétrico. 26.- Tome del segundo vaso 10ml de la solución con una pipeta volumétrica y agréguela a un matraz volumétrico de 100ml y afore con agua de la llave. Procure que la punta de la pipeta toque el fondo del matraz volumétrico.. CUESTIONARIO a) Diga tres tipos de errores que encontró en la práctica. b) Especifique porque es necesario colocar una cama de agua antes de agregar el ácido directo. ¿se debe colocar la misma cama para otras sustancias?. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 27.

(28) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 8. “PROCESO DE TITULACIÓN” Tiempo: 100min. OBJETIVO GENERAL Realizar el proceso de titulación de manera manual.. COMPETENCIA PROFESIONAL Prepara el instrumental de laboratorio explicando su funcionamiento y siguiendo instrucciones y procedimientos de manera reflexiva. COMPETENCIA GENERICAS Asume una actitud constructiva, congruente con los conocimientos y habilidades con los que cuenta dentro de distintos equipos de trabajo.. INTRODUCCIÓN Las buretas son tubos largos, graduados, de diámetro interno uniforme, provistas de una llave en su parte inferior. Se usan para verter cantidades variables de líquido, y por ello están graduadas con pequeñas subdivisiones (dependiendo del volumen, de décimas de mililitro o menos). Su uso principal se da en volumetrías, debido a la necesidad de medir con precisión volúmenes de líquido variables. Las llaves están fabricadas con materiales como el vidrio, que no es atacado por bases, y teflón, inerte, resistente y muy aconsejable para disolventes orgánicos. En el caso de usar llaves de vidrio, es necesario usar un lubricante para asegurar un buen cierre. Al usar una bureta es muy importante evitar errores sistemáticos. Para ello debe tenerse en cuenta el paralaje a la hora de hacer la lectura, procurando tener el ojo a la misma altura del nivel del líquido. Otras fuentes de error son las gotas que quedan adheridas en la parte inferior (error por defecto), pequeñas burbujas de aire situadas tras la llave (también error por defecto) y procurar que el vaciado no sea demasiado rápido, para evitar que quede líquido adherido al interior de la bureta. También es conveniente proteger la parte superior para evitar contaminación por polvo. Al llegar al punto final, si queda una gota colgando del orificio de salida, es conveniente recogerla tocándola suavemente con el recipiente receptor (usualmente será un matraz), para evitar errores por defecto. Esto es debido a que una gota son aproximadamente 0,05 ml y en ocasiones en volúmenes pequeños puede suponer un error importante.. INVESTIGACIÓN PREVIA 1.- Describa en que consiste la Franja de Schellbach.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 28.

(29) Manual de Laboratorio. Laboratorio Material y Equipo 2 Soportes universal 1 Pinzas para bureta 1 Nuez 1 Pinzas de 3 dedos 3 Matraces Erlenmeyer de 250ml 2 Pipetas volumétricas de 10ml 1 Propipeta 1 Bureta de 50ml 2 Vasos de precipitados de 250ml Parrilla eléctrica Mosca. Reactivos Sln. de Na2CO3 Sln. De HCl Anaranjado de metilo. Alumnos Material. N.A.. PROCEDIMIENTO 1.- Monte el sistema de titulación con el soporte universal y las pinzas para bureta, monte un soporte sobre la parrilla eléctrica. 2.- Llene la bureta con la solución de ácido clorhídrico, recuerde colocar la bureta a 45° y llene antes de que la solución llegue a la boca. 3.- Monte la bureta al soporte universal alineándola verticalmente, coloque el vaso de precipitados de la solución debajo de la punta de la bureta, abra la llave y deje salir el líquido hasta que el aforo coincida con la marca de cero. Cierre la llave de la bureta y verifique con la franja. 4.- Mida 10ml de la solución de carbonato de sodio con la pipeta volumétrica y agréguelos en un matraz Erlenmeyer de 250ml, procure que la punta de la pipeta toque el fondo. 5.- Agregue al matraz 2 gotas de anaranjado de metilo, coloque el matraz debajo de la punta de la bureta procurando que la punta este a la mitad de la boca del matraz. 6.- Comience a abrir la llave gota a gota, no se fije en la escala de la bureta observe el matraz hasta que observe el cambio de color y cierre de inmediato la llave. 7.- Tome el volumen de líquido que se gastó con la bureta, vacié el líquido hasta alcanzar un número entero y realice el mismo procedimiento con otros 10ml de carbonato de sodio. 8.- Cuando haya finalizado desmonte la bureta y vuelve a llenarla, ahora colóquela en el soporte sobre la parrilla. 9.- Vuelve a tomar 10ml de carbonato de sodio y agrega 2 gotas de anaranjado de metilo. 10.- Agrega al matraz Erlenmeyer de 250ml un agitador magnético (también conocido como mosca), inclina el matraz y colócalo. 11.- Prende la parrilla colocando el botón de stir en nivel 3 observaras como se crea un remolino en la solución, comienza a titular hasta el cambio de color. CUESTIONARIO a) ¿Cuál es la diferencia entre la titulación manual y la titulación con agitador? b) ¿Porque se debe vaciar la bureta primero y no se titula directamente sin vaciar? c) Explique porque en la titulación manual es necesario cruzar las manos para abrir la llave. d) Investigue donde se aplica la titulación.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 29.

(30) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 9. “CALIBRACIÓN DE MATERIAL VOLUMÉTRICO” Tiempo: 100min. COMPETENCIA PROFESIONAL Prepara el instrumental de laboratorio explicando su funcionamiento y siguiendo instrucciones y procedimientos de OBJETIVO GENERAL Llevar a cabo el proceso de calibración en manera reflexiva. materiales volumétricos estandarización del material.. para. la. COMPETENCIA GENERICAS Asume una actitud constructiva, congruente con los conocimientos y habilidades con los que cuenta dentro de distintos equipos de trabajo.. INTRODUCCIÓN La calibración y en general el uso de los equipos volumétrico debe realizarse de acuerdo con el uso previsto por los fabricantes de materiales o bien, los establecidos en normas internacionales. Es necesario conocer cuáles son las particularidades de cada material y la manera de comprender esa información que se encuentra en el cuerpo de los materiales volumétricos. Las principales inscripciones en el material son:  Capacidad nominal.  Temperatura de referencia.  Clase  Volumen contenido y volumen vertido  Tiempos de entrega o tiempo de escurrimiento  Tiempo de espera Para obtener el volumen calibrado a partir de la masa de agua es importante tener en cuenta que:  La densidad del agua varía con la temperatura  El volumen del recipiente de vidrio varía con la temperatura  El agua que llena el recipiente se pesa en aire INVESTIGACIÓN PREVIA 1.- Realice un diagrama donde indique como se clasifica el material volumétrico. 2.- Realice un diagrama donde indique la clasificación y características de las pipetas. 3.- Realice un diagrama donde indique la clasificación y características de las micropipetas. 4.- Indique que significa cada descripción del material. 5.- Defina los siguientes conceptos: Precisión, exactitud, incertidumbre, desviación estándar, calibración, repetibilidad y reproducibilidad.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 30.

(31) Manual de Laboratorio. Laboratorio Material y Equipo 2 Matraces Volumétricos de 100ml 1 Soporte universal 1 Pinzas para bureta 1 Bureta de 25ml 1 Pinzas para matraz 3 Pipetas volumétricas de 10ml 1 Propipeta 3 Pipetas serológicas de 10ml 2 Vasos de precipitados de 100ml 2 Matraces Erlenmeyer de 150ml 1 Termómetro de 100°C Balanza analítica. Reactivos N.A.. Alumnos Material Colores Pegamento Recortes. PROCEDIMIENTO A) Calibración de pipetas volumétricas 1.- Coloque en un vaso de precipitados 100ml de agua destilada y tome su temperatura. 2.- Lavar y secar completamente un matraz Erlenmeyer de 150ml, tomar el matraz con unas pinzas no con las manos. Pesar dicho matraz en la balanza analítica y tarar. 3.- Tome con mucho cuidado 10ml de agua con una pipeta volumétrica y agregue el líquido poco a poco dejándolo correr por 10 segundos, inmediatamente pese la cantidad de agua anote el valor. 4.- Retire el matraz Erlenmeyer y tire el agua, séquelo nuevamente, realice el mismo procedimiento dos veces más. B) Calibración de buretas 5.- Coloque el sistema de titulación totalmente vertical la bureta, afore con agua a la cual se midió su temperatura previamente. 6.- Pese un matraz Erlenmeyer de 150ml completamente seco en la balanza analítica, retire el matraz y agregue 1ml de agua con la bureta. 7.- Inmediatamente pese el matraz con agua y anote el valor. Retire el matraz otra vez y agregue 1ml más de agua, vuelva a pesar. 8.- Seguir el mismo procedimiento hasta completar 10ml de agua. C) Matraz volumétrico 9.- Pese un matraz volumétrico de 100ml completamente seco y limpio en una balanza analítica. Retire el matraz sin tocarlo con las manos. 10.- Llene el matraz con agua hasta la marca de aforo e introdúzcalo a la balanza y tome el peso que marca. 11.- Realice el mismo procedimiento con un matraz volumétrico de 250ml.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 31.

(32) Manual de Laboratorio CUESTIONARIO a) ¿Qué errores pudo encontrar en la calibración del material volumétrico? b) Según los resultados que obtuvo ¿el material volumétrico con el que se cuenta coincide con el grado de error experimental que marca el material? c) Explique qué beneficios tendrá el calibrar el material volumétrico.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 32.

(33) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 10. “MANEJO DEL MICROSCOPIO” Tiempo: 100min. COMPETENCIA PROFESIONAL Opera el equipo de laboratorio siguiendo instrucciones y procedimientos de manera reflexiva y explicando su funcionamiento aplicando las buenas y prácticas de laboratorio.. OBJETIVO GENERAL Manipular el microscopio óptico estereoscopio con diferentes muestras biológicas. COMPETENCIA BASICA DISCIPLINAR. Obtiene, registra y sistematiza la información para responder a preguntas de carácter científico, consultando fuentes relevantes y realizando experimentos pertinentes. INTRODUCCIÓN El microscopio óptico es sumamente útil para observar objetos que se hallen fuera del límite de resolución del ojo humano (tamaño inferior a 100nm). Este microscopio también es llamado compuesto (en oposición al simple que consta de una sola lente biconvexa y se conoce como lupa) consta de tres sistemas:  Sistema mecánico.  Sistema de iluminación  Sistema óptico El microscopio estereoscópico tiene dos lentes objetivos y posee una profundidad de foco mucho mayor que la del microscopio compuesto; ambas características le permiten producir imágenes tridimensionales. El poder de resolución y de aumento del estereoscopio son mucho menores que las del microscopio compuesto y por esta razón el estereoscopio se usa para estudiar objetos y especímenes relativamente grandes (razón por la cual también se le llama microscopio de disección). Las partes de este microscopio son prácticamente las mismas que las discutidas para el microscopio compuesto. En este ejercicio se aprenderá el uso correcto del estereoscopio. INVESTIGACIÓN PREVIA 1.- Realice un resumen de los antecedentes históricos del microscopio. 2.- Realice un diagrama donde describa los tres sistemas con los que cuenta el microscopio óptico.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 33.

(34) Manual de Laboratorio Laboratorio Material y Equipo 1 Pinzas de disección 3 Portaobjetos 3 Cubreobjetos 3 Pipetas Pasteur 1 Mechero Bunsen 1 Pizeta con agua Microscopio óptico Microscopio estereoscópico Muestras Preparativas. Reactivos Azul de metileno Lugol Safranina Aceite de inmersión Cristal violeta Alcohol – Cetona. Alumnos Material Insecto Capa de cebolla Pañuelo para lentes Asa bacteriológica Equipo de limpieza. PROCEDIMIENTO A) Microscopio óptico. 1.- Enchufe el microscopio óptico, encienda el iluminador y ajuste la intensidad de luz a un nivel cómodo. 2.- Ajuste la distancia interocular para adaptar la distancia entre los lentes oculares a la distancia entre sus ojos; mueva lateralmente la base de los lentes oculares hasta que vea claramente una sola imagen. El propósito principal de tener dos lentes oculares, en vez de uno, es eliminar el cansancio que se produce al mantenerse un ojo cerrado y reducir la interferencia de luz ambiental y de otras imágenes si se mantiene el ojo abierto. Los dos lentes oculares no proporcionan una imagen estereoscópica porque hay un solo lente objetivo. La distancia interpupilar varía para cada persona y por lo tanto debe ajustarse cada vez que se use el microscopio. 3.- Colóquela el lente objetivo de 4x (el más corto) en posición vertical, girándolo con el revólver y no directamente con el lente objetivo. 4.- Abra la grapilla o gancho de la platina mecánica, monte el porta objetos con la muestra ya preparada en el centro sin tocar el lente objetivo con el porta objetos y cierre la grapilla suavemente. Use los dos tornillos de la platina para centralizar el porta objetos debajo del lente objetivo*. 5.- Use el tornillo macrométrico para subir la platina hasta la posición más alta. Mirando por los lentes oculares (los estudiantes que usan lentes pueden removerlos para facilitar el uso del microscopio), use el tornillo macrométrico para bajar la platina hasta que el objeto quede en foco. 6.- Cierre el ojo izquierdo y use el tornillo micrométrico para obtener una imagen en perfecto foco. Cierre el ojo derecho y gire el ajuste del lente ocular izquierdo hasta obtener una imagen perfectamente enfocada. Al igual que la distancia interpupilar, este ajuste debe hacerse al comienzo de cada laboratorio. 7.- Observe el porta objetos. Para ver más detalles, cambie al lente objetivo de 10x y luego al de 40x, ajustando el foco solamente con el tornillo micrométrico. El espécimen debe mantenerse en el centro del campo de visión. Después de cambiar el lente objetivo, aumente ligeramente la apertura del diafragma y la intensidad del iluminador (los lentes objetivos de mayor aumento requieren mayor apertura del diafragma y mayor intensidad de iluminación). 8.- Si nota partículas de polvo al observar el porta objetos, use este procedimiento para determinar dónde se encuentran: a) Si lo sucio se mueve al mover el portaobjetos, está en el portaobjeto. b) Si lo sucio se mueve al rotar los lentes oculares, está en los lentes oculares. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 34.

(35) Manual de Laboratorio c) Si lo sucio desaparece al cambiar el lente objetivo, está en el lente objetivo anterior. d) Si lo sucio entra y sale de foco al subir y bajar el condensador, está en el condensador. e) Si lo sucio no está en ninguno de los lugares anteriores, debe estar dentro del microscopio. En este caso notifique al profesor de laboratorio; no remueva ninguna parte del microscopio. 9.- Antes de remover el porta objetos coloque el lente objetivo de 4x en la posición vertical, anotar observaciones en la tabla No. 9. B) Microscopio estereoscópico. 1.- Tome un porta objetos y coloque una patita de un insecto monte en la platina del microscopio estereoscópico. 2.- Prenda y ajuste la fuente de luz. Algunos microscopios tienen la fuente de luz integrada al microscopio mientras que otros la tienen aparte. Asegúrese de que la fuente de luz esté iluminando su espécimen. 3. Enfoque el objeto que desea ver y muévalo hacia arriba o hacia abajo, anotar observaciones en la tabla No. 10. NOTA: * Siempre que monte o remueva el portaobjeto de la platina, el lente objetivo colocado en posición vertical debe ser el de 4x o el de 10x. Los objetivos de 40x o 100x quedan muy cerca del portaobjeto, lo que aumenta grandemente la probabilidad de rayar el objetivo o romper el portaobjeto. ° Pida al profesor más muestras para observar y dibuje lo que se ve en cada uno. C) Tinciones. 1.- Tomar con un asa bacteriológica una colonia de microorganismos de las cajas de Petri que se proporcionaran y colocarlo en un portaobjetos. 2.- Pasar el porta objetos por la llama de un mechero de bunsen rápidamente para fijar el microorganismo. 3.- Colocar una gota de cristal violeta durante un minuto, lavar con agua corriente con ayuda de una pizeta. 4.- Cubrir la placa con lugol durante un minuto, lavar con agua corriente con ayuda de una pizeta. 5.- Cubrir con alcohol – cetona por 5 segundos, lavar con agua corriente con ayuda de una pizeta. 6.- Cubrir la placa con fucsina (safranina) durante un minuto, lavar con agua corriente con ayuda de una pizeta. 7.- Dejar secar al aire. 8.- Observar al microscopio con aceite de inmersión, con objetivo 100x, condensador abierto totalmente. 9.- Observe en el microscopio estereoscópico, pero ahora con la capa de cebolla pero utilizando azul de metileno. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 35.

(36) Manual de Laboratorio. Muestra. Tabla No. 9 Microscopio óptico Objetivo Observaciones. Tabla No. 10 Microscopio estereoscópico Muestra Observaciones. CUESTIONARIO a) ¿Por qué el microscopio estereoscópico solo cuenta con un solo lente? b) Diga quien fue el inventor del microscopio óptico. c) Para cada viñeta diga que microscopio utilizaría:  Virus  Bacteria procariota  Grano de azúcar  Espora  Glóbulos rojos  Hoja de cebolla  Polvo  Protozoario. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 36.

(37) Manual de Laboratorio. PRÁCTICA No. 11. “PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO, INCUBADORA Y CUENTA COLONIAS” Tiempo: 100min. COMPETENCIA PROFESIONAL Opera el equipo de laboratorio siguiendo instrucciones y procedimientos de manera reflexiva y explicando su OBJETIVO GENERAL Aprender a preparar los medios de cultivo funcionamiento aplicando las buenas utilizados en microbiología y prácticas de laboratorio. posteriormente contar los microorganismos en una caja de Petri. COMPETENCIA GENÉRICA. Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo cómo cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo. INTRODUCCIÓN La palabra incubadora proviene del latín Incubare que significa empollar. La Incubadora es un equipo con funciones específicas que permite controlar, según su diseño, temperatura y humedad para crear un ambiente adecuado apto para la reproducción y desarrollo de organismos vivos. Algunas de las aplicaciones más comunes son los cultivos microbiológicos, micológicos y virales, entre otros. La investigación de los microorganismos, de su estructura, función e interrelación con el ambiente conlleva multitud de aplicaciones, que tienen una exigencia común: la precisión de la incubación. Y para ello no hay nada más decisivo que la selección de la tecnología de temperatura. Por este motivo se utiliza la tecnología correcta garantizada para una exactitud absoluta de la temperatura que sea reproducible y conformes a las normas. Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado más 10.000 medios de cultivo diferentes.. es el de de. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Cuando los microorganismos han crecido es necesario saber cuántos existen, ellos se agrupan en colonias y el equipo que se utiliza para contabilizar las colonias, se llamaba precisamente cuenta colonias automatico. El contador de colonias tiene un contador tipo pluma y de tecla. Tiene un fondo obscuro para la fácil visualización de colonias e incluye un fondo claro para colonias con tinción. Cuenta con iluminación indirecta por una lámpara fluorescente para no calentar las muestras, el contador cuenta con una alarma auditiva configurable para avisar cuando ha capturado un dato y un magnificador de 3X y de 4 pulgadas con brazo flexible que le permitirá posicionarlo en la forma más cómoda.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 37.

(38) Manual de Laboratorio. Laboratorio Material y Equipo 2 Matraces Erlenmeyer de 500ml 2 Vasos de precipitados de 250ml 1 Probeta de 100ml 1 Espátula 7 Tubos de ensaye con tapa 1 Gradilla 1 Mechero Fisher Parrilla eléctrica Balanza granataria Incubadora Cuenta colonias. Reactivos Medio de cultivo nutritivo Benzal. Alumnos Material Cajas de Petri Algodón Asa bacteriológica. PROCEDIMIENTO A) Medio de cultivo en caja y en tubo de ensaye. 1.- Pesar la cantidad requerida de medio de cultivo en una balanza granataria, construya una caja de papel para pesar el medio de cultivo. 2.- Tome un matraz Erlenmeyer de 500ml y agregue el medio de cultivo pesado, agregue agua destilada hasta la marca de 300ml. 3.- Disuelva el medio de cultivo hasta su totalidad y coloque el matraz sobre una parrilla eléctrica hasta nivel 7. 4.- Mueva el medio de cultivo de vez en cuando para que no se vaya a quemar, caliente hasta que el medio comience a ebullir, retire y coloque el matraz sobre una franela. 5.- Sople dentro del matraz para bajar la espuma que se haya formado. Siga calentando por 20 minutos más, al terminar el medio de cultivo coloque un tapón de algodón. 6.- Si el medio de cultivo es para tubos de ensaye realice el mismo procedimiento. B) Plaqueado de cajas y llenado de tubos. 7.- Retirar los matraces con el medio de cultivo, cerrar la puerta y ventanas. Colocarse el cobre bocas. 8.- Limpiar una mesa con Benzal y algodón, flamear la mesa con los mecheros Fisher y dejarlos en el centro. 9.- Abrir el paquete de cajas de Petri en la mesa sin salir del área limpia, con la mano derecha abrir un matraz flamear la boca del matraz y con la mano izquierda abrir una caja sobre la mesa. 10.- Vaciar el medio a la caja, sin llenarla y tapar la caja. Seguir este procedimiento hasta que se termine el medio de cultivo. 11.- Dejar solidificar el medio, solidificado tomar un asa bactereológica y flamear. Tomar un poco de muestra (en este caso leche) y sembrar en la caja. Seguir este procedimiento con las demás cajas. 12.- Para llenar los tubos de ensaye abra un tubo cerca del mechero tome la tapa con el dedo pulgar y agregue el medio de cultivo hasta llenar las tres cuartas partes del tubo. Tape el tubo y colóquelo en la posición que se necesite. 13.- Colocar las cajas de Petri y los tubos de ensaye en la incubadora, programarla a 37.5°C +5°C y dejarlas ahí todo un día.. Elaborado por: I.Q.I Eder Jair Carmona Arenas. 38.

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