Actividad Antimicotica Del Extracto Etanólico De Propoleo Sobre El Crecimiento In Vitro De Candida Albicans

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(1)Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. FO R. MA TI. CA. ESCUELA DE ESTOMATOLOGÍA. IN. “ACTIVIDAD ANTIMICOTICA DEL EXTRACTO. E. ETANOLICO DE PROPOLEO SOBRE EL. MA S. CRECIMIENTO IN VITRO de Candida albicans”. TE. TESIS. PARA OPTAR EL GRADO DE. DE. SI S. BACHILLER EN ESTOMATOLOGÍA AUTOR. OF. IC. IN. A. MANUEL ENRIQUE DE LA CRUZ LEON.. ASESOR DR. MANUEL GUILLEN GALARZA. CO-ASESOR DRA. ELVA MEJIA DELGADO. TRUJILLO – PERÚ 2013 1. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ÍNDICE. CA. DEDICATORIA. MA TI. AGRADECIMIENTOS. FO R. RESUMEN. 1. E. INTRODUCCION. MA S. I.. Pág.. IN. ABSTRACT. 13. III. RESULTADOS. 24 29. SI S. IV. DISCUSIÓN. TE. II. MATERIAL Y MÉTODOS. 32. DE. V. CONCLUSIONES. 33. A. VI. RECOMENDACIONES. 34. OF. IC. IN. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. ANEXOS. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. DEDICATORIA. A Dios, Padre Celestial, por su inmenso amor, por esta vida llena de. CA. bendiciones y también de dificultades, por permitirme progresar y así. E. IN. FO R. MA TI. ganarme una morada eterna junto a Él.. MA S. A mi Padres: Catalino y Teodora, mis Hermanas y a mi madrina Domitila por todo el amor y paciencia que han sabido brindarme, a. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. ellos motor y motivo de mi vida.. A todos mis amigos, familiares y profesores que han ayudado en mi formación profesional y como ser humano.. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. AGRADECIMIENTOS. A mis asesores el Dr. Manuel Guillen Galarza, y la Dra. Elva. CA. Mejía Delgado. MA TI. Por compartir sus conocimientos, consejos, alegrías y por. IN. FO R. ayudarme en la realización de esta investigación.. E. A todas aquellas personas que contribuyeron desinteresada y. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. cordialmente con la elaboración de esta investigación.. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. RESUMEN. con. variadas. propiedades. medicinales. entre. ellas. MA TI. Mellifera. CA. El propóleo es un producto natural fabricado por la abaja Apis. antimicótica, El propósito de esta investigación de tipo experimental. FO R. “in vitro”, fue evaluarel efecto antimicótico de cuatro concentraciones de extracto etanólico de propóleo sobre el crecimiento de Candida. E. IN. albicansy a La ves compararlo con el antimicótico sistetico Nistatina.. 4 concentraciones del extracto. MA S. Este estudio se realizó utilizando. etanólico de propóleo (25%, 50%, 75% y ,100%), y el medicamento. TE. Nistatina (100 000 UI solución) las cuales fueron puestas en. SI S. contacto con el microorganismo de estudio y mediante el método de halos de inhibición se pudo determinar el efecto en el crecimiento de. DE. este, a las 24 horas.. IN. A. Los resultados indicaron que la actividad antimicótica del extracto. IC. etanólico de propóleo fue aumentando conforme aumentaba la. OF. concentración siendo la concentración del 100% la de mayor efecto antimicótico, pero este no fue superior al medicamento sintético Nistatina utilizado como referencia.. Palabras Claves: PRÓPOLIS, Nistatina, Candida albicans. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. ABSTRACT. The propóleo is a natural product made by the Apis mellífera bee. MA TI. with varied medicinal properties between them antimicótica, The purpose of this investigation of experimental of type “in vitro” It was. FO R. evaluated antimicótico effect of four concentrations of extract etanólico of propóleo on the growth of Candida albicans and instead. using. MA S. This study was realised. E. IN. compare it with the antimicótico synthetic Nistatina.. 4 concentrations of the extract. etanólico of propóleo (25%, 50%, 75% and ,100%), and the medicine. TE. Nistatina (100 000 UI solution) Which were put in contact with the. SI S. microorganism of study through of the method of halos of inhibition. DE. could determine the effect in the growth of these, to the 24 hours.. A. The results indicated that the antimicótica activity of the extract. IN. etanólico of propóleo was increasing as increased the concentration. IC. being the concentration of 100% the greater antimicótico effect, but. OF. this was not upper to effect of the synthetic medicine Nistatina used like reference.. Key words: PRÓPOLIS, Nistatina, Candida albicans.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. I.. INTRODUCCION. CA. Una de las regiones del cuerpo humano que posee la flora microbiana más. peculiares. de. nutrientes,. pH. y. humedad,. MA TI. variada y compleja es la cavidad oral, esto es debido a las condiciones a. diferentes. ambientes. FO R. fisicoquímicos y nutricionales, como la mucosa del carrillo, la lengua, las hendiduras gingivales y la superficie de los dientes, que favorecen la. E. IN. adherencia y el crecimiento de tipos selectos de microorganismos 1, 2.. MA S. Aunque las enfermedades causadas por hongos no son causa habitual de muerte, afectan a millones de personas en todo el mundo.. TE. Virchow acuña en 1858 el término micosis para designar a las enfermedades. SI S. cuyos agentes patógenos son los hongos3.. DE. Desde el punto de vista clínico, la micosis se divide en superficiales y profundas. Las primeras infectan las superficies corporales y sus faneras. IN. A. (piel, mucosas, uñas, pelos), las micosis profundas o sistémicas afectan a las 3,4, 5.. OF. IC. vísceras profundas y diversos tejidos de la economía. La candidiasis es una micosis superficial producida por agentes del género Cándida. Existen más de 150 especies de Cándidas, pero solo 9 se consideran patógenas para el hombre: C. albicans, C. guilliermondii, C.. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. krusei, C. parapsilisis, C. tropicalis, C. pseodotropicalis, C. lusitaniae, C. 5, 6. .. CA. dubliniensis y C. glabrata3, 4,. La mayoría de las infecciones en el ser humano son de origen endógeno,. MA TI. dado que la candidiasis es una infección oportunista por excelencia3.. FO R. La transmisión interhumana es posible como es el caso del muguet del recién nacido que suele adquirirlo a partir de la vagina materna, y la balanitis. IN. del hombre o circuncidado contagiado por su pareja con vaginitis. E. candidiasica. Para que un microorganismo comensal humano se transforme. MA S. en patógeno es necesario que se interrumpa mecanismos de defensa. TE. normales3.. SI S. El desarrollo de candidiasis oral requiere factores propiciatorios que permitan que un microorganismo saprofito de la boca se transforme. en. DE. patógeno. Estos factores pueden clasificarse en generales y locales. Entre. A. los generales puede mencionarse a la diabetes, donde la hiperglucistia que. IN. acompaña a esta enfermedad favorece el desarrollo del hongo, el uso de. IC. antibióticos al suprimir la flora microbiana normal favorece el desarrollo de. OF. cándidas. También son factores generales las leucemias, los linfomas, los canceres diseminados y los estados caquécticos, el embarazo, las anemias, los trastornos endocrinos, las enfermedades inmunodepresoras primarias o. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. adquiridas como el SIDA y, por último los recién nacidos y los ancianos por. CA. los desajustes del sistema inmunitario inmaduro y senil respectivamente3, 4.. MA TI. Los factores locales también son de importancia, entre ellas se encuentra la xerostomía, la falta de higiene oral o, por el contrario el uso abusivo de antisépticos bucales y el uso de prótesis mucosoportadas o de aparatos de. FO R. ortodoncia, la perdida de dimensión vertical, las lesiones erosivas de la mucosa bucal, las lesiones queratinizadas, el habito de fumar en exceso y la. E. IN. lengua escrotal.. MA S. La candidiasis bucal se clasifica: candidiasis aguda (seudomembranosa, atrófica), candidiasis crónica (atrófica, hipertrófica/hiperplasica), formas. SI S. TE. mucocutáneas (localizada, familiar, relacionada con síndromes) 3,4, 5. Las lesiones bucales de las distintas categorías pueden tener una aparición y. se. deben. DE. diferente. estudiar. por. separado,. la. candidiasis. A. seudomembranosa aguda es una de las categorías más comunes de la. IN. enfermedad. Se origina a cualquier edad, pero por lo regular ocurre en. IC. personas débiles o crónicamente enfermas, o en lactantes. Las lesiones. OF. bucales se caracterizan por la aparición de placas ligeramente elevadas, de color blanco, blandas que con frecuencia se presentan en la mucosa bucal o la lengua, pero también se observa en paladar, encías y piso de la boca. Las placas que a menudo se describen como muy toscas, semejantes a coágulos 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. de leche, consisten principalmente en masas enredadas de hifas fungoides con epitelio descamado, queratina, fibrina, restos necróticos, leucocitos y. CA. bacterias entremezcladas. Las placas blancas por lo regular se pueden eliminar con una gasa y dejar ya sea una mucosa relativamente normal o un. MA TI. área eritematosa 4, 6, 8.. FO R. La candidiasis atrófica crónica cutánea se presenta ya sea como una secuela de la candidiasis seudomembranosa aguda, o se origina de novo. Las. IN. lesiones son más rojas o eritematosas que blancas, y de esta manera se. E. parecen al tipo seudomembranosa, en el cual se ha eliminado la membrana. MA S. blanca. Puede aparecer en cualquier sitio. Según Lehner es la única variedad 4, 6. .. TE. de candidiasis bucal q causa dolor. SI S. La candidiasis hiperplásica crónica es del tipo “leucoplásico” de la candidiasis las lesiones bucales consisten en placas firmes de color blanco, persistentes. A. DE. que se localizan en labios, lengua y carrillos 6.. IN. La candidiasis mucocutanea crónica presenta lesiones bucales de todo tipo,. IC. en general su apariencia clínica es similar a las lesiones descritas en la. OF. candidiasis. hiperplásica. crónica. y. aparecen. en. los. mismos. sitios. intrabucales.5. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. En la actualidad la candidiasis atrófica crónica se considera un fenómeno de la enfermedad conocida como “boca ulcerada por el uso de prótesis total”. 6,7. .. MA TI. presenta con una queilitis angular. CA. una inflamación difusa del área que soporta la dentadura, y que a menudo se. El desarrollo de nuevos antimicóticos como la nistatina ha sido benéfico para. FO R. el tratamiento de la candidiasis. Las suspensiones de nistatina, mantenidas en contacto con las lesiones bucales, han tenido éxito cuando se han. IN. empleado incluso en casos crónicos y graves de la enfermedad. En el caso. E. que se relacione con el uso de prótesis puede emplearse nistatina en crema. MA S. sobre los tejidos afectados y en el aparato para prolongar el contacto y. TE. eliminar el hongo del mismo.4, 5, 6, 7.. SI S. La nistatina es un macrólido tetraénico producido por Streptomyces noursei. Estructuralmente es semejante a la anfotericina B y posee el mismo. DE. mecanismo de acción, no se absorbe en las vías gastrointestinales, piel o. A. vagina. La suspensión de nistatina suele ser eficaz en candidiasis oral del. IN. individuo inmunocompetente, salvo su sabor amargo y a veces problemas. OF. IC. ocasionales como nauseas los efectos adversos son infrecuentes9, 10.. Los extractos y/o aceites esenciales son sustancias olorosas obtenidas a partir de plantas mediante destilación en corriente de vapor o por expresión del material vegetal. (11) 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Debido a esto es que se ha desplegado un gran interés de parte de los investigadores por estudiar sustancias naturales que posean algunas. CA. propiedades farmacológicas con efecto antimicótico; el própolis es un. MA TI. producto muy utilizado como complemento alimenticio y suscita un interés extraordinario para la medicina y la industria farmacéutica debido a sus diversos actividad entre ellos el antimicótico y se presenta como una. FO R. alternativa de solución a diversos problemas de salud oral 12.. IN. El propóleo (o própolis) es un producto apícola que las abejas recolectan de. E. las resinas y secreciones de las yemas de álamo, abedul, roble, castaño. MA S. silvestre y otros árboles. Debido a su contenido en aceites esenciales, el propóleo suele ser aromático y en función de su origen botánico y de la. TE. época de recolección, es de color amarillo claro a castaño oscuro, con un. SI S. sabor amargo, ligeramente picante o insípido y consistencia más o menos. DE. sólida13.. A. El término propóleo proviene del griego “pro'` entrada y “polis" ciudad -. IN. entrada de la colmena. En la antigüedad se usaba como remedio para. IC. disminuir el dolor nervioso, sanar las úlceras y en los abscesos difíciles de. OF. curar14.. El propóleo es muy bien tolerado y su uso continuado no produce ningún efecto secundario relevante. Es prácticamente insoluble en agua, pero 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. soluble en alcohol, razón por la cual la mayoría de las aplicaciones se. Algunas. de. sus. propiedades. son. muy. CA. realizan a través de extractos etanólicos15.. conocidas. y. están. bien. MA TI. documentadas16 Entre sus principales efectos cabe destacar: Efecto bacteriostático y bactericida sobre un importante número de bacterias de los. o la Escherichia coli. Por otra parte, el. FO R. géneros Streptococcus, Staphylococcus, Salmonella, Lactobacillus. Proteus propóleo aumenta la eficacia de. IN. algunos antibióticos potenciando su efecto. Asimismo, algunos estudios. E. ponen de manifiesto una gran susceptibilidad de ciertos patógenos a la del. própolis,. Efectos. antifúngico,. MA S. acción. antiviral,. antinflamantario,. analgésico, cicatrizante, estimulando y favoreciendo la regeneración tisular 16, 17. SI S. TE. .. Presenta una consistencia variable, según su origen y temperatura. Hasta los. DE. 15°C es duro y se torna más maleable a medida que aumenta la. A. temperatura. Su color también es variable, dependiendo del origen vegetal,. IN. de amarillo claro a marrón oscuro, pasando por una gran cantidad de tonos. IC. castaños. Su olor también es muy variable, generalmente es agradable, y en. OF. algunos casos recuerda a su origen vegetal, mientras que en otros casos posee olor predominante a cera.18. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Básicamente se compone de un 50-55% de resinas y bálsamos, 30-40% de cera de abeja, 5-10% de aceites esenciales o volátiles, 5% de polen y 5% de. CA. materiales diversos (orgánicos y minerales). Se han identificado más de 160. MA TI. compuestos, de los cuales un 50% son fenólicos, a los cuales se les atribuye acción farmacológica. Los principales son; flavonoides, ácidos aromáticos y sus ésteres, aldehídos aromáticos (vainillina e isovainillina), cumarinas,. FO R. triglicéridos fenólicos18, 19.. IN. El própolis presenta distintos efectos funguicidas frente a numerosas. E. especies de hongos y levaduras como Candida albicans, Aspergillus Higer,. MA S. Botrytis cinerea, Ascosphaera apis, Plasmopara viticola, Alternaria alternata y Penicillium digitatum. La mayor inhibición sobre hongos patógenos se. Candida. Candida. guilliermondii. y. Malassezia. DE. pachydermatis.12. krusei,. SI S. tropicalis,. TE. observa en Trichophyton mentagrophytes, Candida albicans, Candida. A. Las propiedades antimicóticas del propóleo han sido estudiadas por. IN. numerosos investigadores, esta actividad depende del origen del propóleo y. OF. IC. del solvente usado para su extracción. (Cafarchia et al., 1.999) 15, 20.. Al determinar la acción antifúngica del extracto alcohólico de propóleos sobre el género Cándida, con valoraciones de diferentes periodos de exposición de las cepas estudiadas al propóleos pudieron establecer que los valores de 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. concentración fungicida mínima (CFM) del propóleos disminuyen con el incremento del tiempo de exposición. Los valores obtenidos correspondieron. CA. a 8.6 y 9.6 mg/ml en dos horas de exposición para veinticuatro y cuarenta y. MA TI. ocho horas de incubación respectivamente, ya los valores de 5.4 y 7.0 mg / ml para un tratamiento de veinticuatro horas e incubaciones de veinticuatro y cuarenta y ocho horas respectivamente. Estos valores siempre se. FO R. compararon con los controles de alcohol. ( Rojas y Lugo, 1988) 20.. IN. Kovalik (1979) investigaron 12 pacientes que sufren de La sinusitis crónica, Se encontró. E. causada por Candida albicans.. que el hongo in vitro fue. MA S. sensible a propóleos en ocho casos, sensible débil en dos y resistente en los otros dos pacientes. Los pacientes fueron tratados con un alcohol-aceite La emulsión (2-4 ml) se introdujo. TE. emulsión de propóleos.. en los senos. SI S. después de la irrigación con solución salina isotónica (cada día o cada dos días). Después de 1-2 tratamientos con propóleos, hubo una mejoría en el. DE. estado de los pacientes después 5-8 tratamientos, la recuperación clínica se. A. produjo en nueve pacientes. y la mejora en los otros tres pacientes.. IC. IN. Recuperación se produjo después de 10-17 días21.. OF. Pepeljnjak et al (1982) encontraron que, por pura propóleo extractos, a una concentración de 15 a 30 mg / ml se necesita para inhibir el crecimiento de Candida albicans, Aspergillus flavus, A.ochraceus, Penicillium viridicatum y. P. notatum21. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Ota et al (2001) estudiaron la actividad antifúngica de los propóleos. en las. pruebas de sensibilidad en 80 cepas de levaduras del género Candida: 20. CA. cepas de Candida albicans, 20 cepas de Candida tropicalis, 20 cepas de Candida krusei y 15 cepas de Candida mostraron una clara actividad antifúngica sensibilidad: C.. Las levaduras. MA TI. guilliermondii.. con el siguiente orden de. albicans> C.tropicalis> C. krusei> C. guilliermondii.. Los. FO R. pacientes con completa dentaduras postizas que utilizaron un extracto de propóleos hidroalcohólico mostró una disminución en el número de Cándida. E. IN. 21.. MA S. Fajuri et al (2004), estudio el efecto del. propolis sobre diferentes. microorganismos patógenos orales entre los cuales incluyo Streptococcus. TE. mutans Porphyromonas gingivalis, Streptoccocus pyogenes, Staphyloccocus. SI S. aureus y Candida albicans. Sus resultados mostraron inhibibion del crecimiento de todos ellos, excepto de Porphyromonas gingivalis, fueron. A. DE. susceptibles al propóleo 22.. IN. Reyes et al (2011), realizo un estudio sobre la Concentracion Minima. IC. Inhibitoria del Efecto Antibacteriano del Extracto Etanólico del Propóleo. OF. Sobre el Enterococcus faecalis. Donde encontró que al 30% y 40% no se observa acción antibacteriana, pero al 50% el extracto etanólico de propóleo mostro halos de inhibición promedio de 7.5 mm de diámetro y además no. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. permitió el crecimiento normal bacteriano, por lo que dicha concentración. CA. resulto ser la concentración mínima inhibitoria23.. MA TI. Esta investigación fue planteada debido a la búsqueda de un antimicótico ideal contra la candidiasis oral en base a la biodiversidad de plantas medicinales que permita conseguir los objetivos en los tratamientos de la. IN. FO R. medicina oral, libre de cualquier efecto secundario posible.. E. Los resultados de esta investigación permitirá conocer los efectos. MA S. antimicóticos del extracto etanólico de propóleo a diversas concentraciones sobre cepas de Candida albicans, con la finalidad de elaborar un producto. TE. ideal libre de cualquier posible citotoxicidad en los tratamientos de medica. SI S. oral.. DE. Los datos obtenidos serán de intereses para todo odontólogo tanto. A. especialista como a los no especialistas, pero que en la práctica clínica. IN. ejercen la Medicina odontológica, permitiendo elaborar un antimicótico. IC. biocompatible libre de cualquier posible efecto adverso. Además, los. OF. resultados de este estudio servirán como punto de partida para que otros investigadores puedan profundizar en otras variables que se encuentren en relación con las ya mencionadas.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 1.1 ENUNCIADO DEL PROBLEMA: ¿Cuál es la actividad antimicótica de cuatro concentraciones del. CA. extracto etanólico de propóleo sobre el crecimiento in vitro de Candida. MA TI. albicans?. 1.2 HIPÓTESIS. FO R. El extracto etanólico de propóleo posee actividad antimicótico sobre Candida albicans y este efecto es proporcional a las concentraciones. MA S. E. IN. utilizadas.. TE. 1.3 OBJETIVOS:. SI S. 1.3.1 Objetivo General:. Conocer la actividad antimicótica del extracto etanólico de. DE. propóleo a 4 concentraciones sobre el crecimiento in vitro de. IC. IN. A. Candida albicans.. OF. 1.3.2- Objetivos Específicos:  Determinar la actividad antimicótica del extracto etanólico de propóleo al 25%, 50%, 75% y 100% sobre el crecimiento in vitro de Candida albicans.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT.  Determinar cuál es la concentración de mayor actividad antimicótica del extracto etanólico de propóleo sobre el. CA. crecimiento in vitro de Candida albicans.. MA TI.  Determinar a qué concentración el extracto etanólico de. MATERIAL Y MÉTODOS:. MA S. E. II.. IN. FO R. propóleo tiene efecto similar a la nistatina.. 2.1. MATERIAL DE ESTUDIO. TE. 2.1.1 Tipo y área de estudio.. SI S. El presente trabajo de investigación corresponde al tipo aplicada, experimental “in vitro”, y comparativo24, el cual se desarrolló en el. DE. Laboratorio del Departamnto de Microbiología de la Facultad de. OF. IC. IN. A. Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.. 2.1.2 Definición de la población muestral El universo muestral estuvo constituido por las cepas de Candida albicans obtenidas en el laboratorio de la Sección de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo. 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.1.3 Consideraciones Éticas: El presente estudio contó con la autorización de la Facultad de. CA. Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo, en concordancia. MA TI. con las recomendaciones establecidas en la declaración de Helsinki, adoptada por la 18º Asamblea Médica Mundial en Helsinki, Finlandia, junio 1964 y modificada por la Asamblea. E. IN. FO R. Médica Mundial en Tokio, enero 2004.(25). MA S. 2.1.4 Diseño estadístico del muestreo. Unidad de Análisis. TE. La unidad de análisis lo constituyó cada repetición realizada (con. SI S. diferentes concentraciones del extracto etanólico de propóleo) en. DE. cada placa petri con la cepa de Candida albicans.. A. Unidad de Muestreo. IN. La unidad de muestreo lo constituyó cada repetición realizada (con. OF. IC. diferentes concentraciones del extracto etanólico de propóleo) en cada placa petri con la cepa de Candida albicans.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Tamaño muestral.. CA. El cálculo para el número de ensayos se determinó mediante la. MA TI. fórmula: (Zα/2 + Zβ)2 2PQ. FO R. n= ( p1- p2)2. E. Zα/2 = 1.96 para un α = 0.05. IN. Donde:. MA S. Zβ = 0.84 para un β = 0.20. = 0.8 (p1-p2) / donde 0.8 es valor asumido x no haber. TE. PQ. SI S. estudios previos.. Lo cual dio como resultado diez, que es el número mínimo de. DE. repeticiones por intervención.. IN. A. Para efectos de este trabajo se tomarán 5 grupos para la. OF. IC. evaluación..  Grupo 1: 10 repeticiones en placas petri con siembra de Candida albicans, utilizando extracto etanólico de Propóleo al 100%.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT.  Grupo 2: 10 repeticiones en placas petri con siembra de Candida albicans, utilizando extracto etanólico de Propóleo al. CA. 75%.. MA TI.  Grupo 3: 10 repeticiones en placas petri con siembra de Candida albicans, utilizando extracto etanólico de Propóleo al 50%.. FO R.  Grupo 4: 10 repeticiones en placas petri con siembra de Candida albicans, utilizando extracto etanólico de Propóleo al. IN. 25%.. E.  Grupo 5: 10 repeticiones en placas petri con siembra de. TE. MA S. Candida albicans, utilizando Nistatina 100.000 U.I. (solución). SI S. 2.1.5 Criterios de control y balance. DE. Fueron excluidos del estudio, aquellos cultivos en los que se. IN. A. observaron deficiencias de manipulación.. IC. 2.2 METODOS Y TECNICAS.. OF. 2.2.1 Instrumento de recolección de datos Los datos obtenidos fueron registrados en una Ficha (Anexo 01), que contendrá datos sobre la efectividad antimicótica sobre Candida albicans y la sustancia química utilizada.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.2.2 Material biológico y químico Material botánico.. CA. Para la obtención del extracto etanólico de propóleo, se utilizó. MA TI. propóleo procedente de la región de Lambayeque obtenido por el centro de apicultura “Happy Bee” de la ciudad de Trujillo, con la ayuda de un especialista con experiencia en la recolección de. IN. FO R. este recurso natural de dicho Centro de Apicultura.. Cepa del hongo:. E. Cepa de Candida albicans fue proporcionada por la Sección de. MA S. Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad. TE. Nacional de Trujillo.. SI S. Sustancia antimicótica. DE. Nistatina 100,000 UI (solución).. IN. A. 2.2.3 Procedimientos. OF. IC.  Obtención de las sustancias antimicótica. Se preparara 4 concentraciones del. extracto etanólico de. propóleo, al 25% ,50% y 75% y 100% por maceración durante 7 días a 37ºC en estufa; luego se filtró varias veces con papel. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. filtro whatman número 40 y se obtuvo la solución etanólica del propóleo.. CA. Luego fue sometido al calor de una estufa a 50ºC para extraer. MA TI. el etanol, para evitar que queden residuos de etanol dentro del extracto, el cual fue eliminado totalmente.. FO R. Cada una de las concentraciones se almacenó en frascos de color ámbar debidamente rotulados, que inmediatamente fueron. IN. esterilizadas en autoclave por 15 minutos 121ºC a 15 libras de. MA S. E. presión para su posterior experimentación.. TE.  Nistatina (producto farmacéutico). SI S. La Nistatina es una sustancia producida mediante el cultivo de. DE. Streptomyces noursei, posee acción fungistática y fungicida sobre los géneros Candida.. OF. IC. IN. A. Nombre comercial Nistatina 100,000 UI (solucion).. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT.  Preparación de la cepa de Candida albicans. CA. i.- Sembrado. MA TI. El crecimiento de la cepa de Candida albicans se realizó mediante cultivo durante 24 horas a 37 0C en el caldo de. IN. FO R. Sabouraud.. MA S. E. ii.-Prueba de susceptibilidad. Prueba de efectividad antimicótica Se utilizó el método de Kirby y Bauer, difusión de discos, el cual. TE. consiste en preparar discos de papel de filtro estériles, los. SI S. cuales serán sumergidos dentro de cada disolución de propóleo 25 %, 50%, 75% y 100%, por el periodo de 1 hora, luego con. DE. una aguja estéril éstos se colocaron sobre los cultivos de. A. Candida albicans en las placas petri previamente preparados;. OF. IC. IN. las placas se mantuvieron en la misma posición por un periodo de 5 minutos.. Luego de este tiempo las placas se voltearon de posición y se incubaron a una temperatura de 37º C durante 24 horas. Todo. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. el procedimiento ser llevó a cabo dentro del diámetro de 10 cm. CA. de la llama de un mechero.. MA TI. La lectura se llevó a cabo a las 24 horas mediante la inspección visual de cada placa. Se efectuó tomando el registro en milímetros de los halos de inhibición del crecimiento de Candida. IN. FO R. albicans.. MA S. E. 2.2.4 Variables y escalas de medición. a.- Variables Independientes. Nistatina.. IN. A. DE. . Extracto etanólico de propóleo. SI S. . TE. Soluciones inhibitorias de Candida albicans. OF. IC. b.- Variables dependientes . Susceptibilidad de cepas de Candida albicans.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ESCAL. TIPO DIMENSION. INDICAD. ES. OR. A DE. VARIABLE. Naturale. 100%. Etanólico de Propóleo. independie. 50%. a. Cualitativ. independie. a. nte. Cuantitati. dependient. De. va. e. razón. IN. nte. E. I. Solución. MA S. (control). Efecto. sobre el. Susceptibilid. Diámetro. SI S. TE. antimicótico. ad. del halo. bacteriana. en mm.. Nominal. OF. IC. IN. A. DE. crecimiento en. albicans. Cualitativ. 100.000U. Nistatina. Candida. 75%. 25%. ON. FO R. Extracto. MEDICI. MA TI. za. CA. Función. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.2.5 Definiciones operacionales. CA. Soluciones inhibitorias de Candida albicans.. MA TI. a.- Propóleo (extracto etanólico). Definición conceptual: El propóleo es una resina de consistencia cérea, de composición compleja y consistencia. FO R. viscosa. Las abejas lo elaboran a partir de resinas, aceites esenciales provenientes de diferentes vegetales, polen y cera. IN. y lo utilizan para la construcción, reparación, aislamiento y. E. protección de la colmena12. operacional:. MA S. Definición. Según. a. designación. de. la. SI S. b.-Nistatina. TE. concentración utilizada: 25 %, 50%, 75%, 100%.. Definición. conceptual:. Es. un. antibiótico. poliénico,. DE. antifungoso altera la permeabilidad de la membrana del. A. hongo, al formar canales en la misma, impidiendo su. OF. IC. IN. crecimiento. se obtiene por el crecimiento de la cepa del Streptomyces noursei. La suspensión de Nistatina está indicada para el tratamiento de la candidiasis en la cavidad oral 9.. Definición operacional: nistatina 100.000 U.I. (solución) 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Susceptibilidad bacteriana en cepas de Candida. albicans.. Definición conceptual: Sensibilidad o resistencia de la cepa de. CA. Candida albicans bajo la acción de las diferentes concentraciones. MA TI. de extracto etanólico de propóleo.. Definición operacional: Correspondió a la medida del diámetro. FO R. del halo de susceptibilidad en placas petri con siembra de este microorganismo medido a las 24 horas en milímetros de cada. E. IN. UFC.. MA S. 2.2.6 Análisis estadístico. Procesamiento y análisis de datos. TE. Luego de la aplicación del instrumento, los datos fueron. SI S. procesados de manera automatizada, en una computadora Pentium IV, utilizando los siguientes Software: Procesador de. DE. texto Microsoft Word 2007, Microsoft Excel 2007, Programa. A. Estadístico SPSS 12.. IN. El análisis de la información se realizó mediante la aplicación de la. OF. IC. estadística descriptiva (tablas de frecuencias y porcentajes, gráficos. de. barras). y. la. estadística. inferencial. para. la. comprobación de la hipótesis y el cumplimiento de los objetivos. Para el análisis estadístico se empleó la Prueba de análisis de varianza, la Prueba de Duncan y la prueba t de Student. 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. III.- RESULTADOS. CA. En el presente estudio de tipo experimental “in vitro”, cuyo propósito fue. MA TI. evaluar la actividad antimicótica de cuatro concentraciones del extracto etanólico de propóleo sobre el crecimiento de cepas de Candida albicans y. antimicótico Nistatina. Dicha. FO R. también comparar cuál de estas concentraciones tiene efectos similar al concentraciones fueron (25%, 50%, 75% y. IN. 100%) de extracto etanólico de propóleo y (100,000 UI/ml gotas) de. MA S. E. Nistatina, se hallaron los siguientes resultados:. Con respecto al promedio de. medición del diámetro de inhibición, las. TE. concentraciones de extracto etanólico de propóleo al 25% con diámetro de. SI S. 7.5 mm, al 50% con 8.4 mm; al 75% con 8.4 mm y al 100% presento un diámetro de 10 mm. el cual fue el de mayor actividad contra Candida. DE. albicans. (Tabla: 01). IN. A. Con respecto al antimicotico Nistatina (100,000 UI/ml solución) utilizado. IC. como referencia presento un diámetro de 22 mm el cual presento sin duda el. OF. mejor efecto antimicotico contra Candida albicans.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. PROMEDIO. DE. HALO. DE. INHIBICIÓN. SEGÚN. MA TI. DIÁMETRO. CA. TABLA 01. CONCENTRACIÓN DE EXTRACTO ETANÓLICO DE PROPÓLEO SOBRE. Promedio. Propóleo 50%. 10. Propóleo 75%. 10. Propóleo 100%. 10. 7.5. 0.972. MA S. 10. 8.4. 0.516. 8.4. 0.843. 10. 0.471. OF. IC. IN. A. DE. SI S. Propóleo 25%. (mm). TE. Investigación. Desv. Est.. IN. ni. E. Grupos de. FO R. CRECIMIENTO IN VITRO DE Candida albicans.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. TABLA 2. MA TI. ANÁLISIS DE VARIANZA PARA COMPARAR EL DIÁMETRO PROMEDIO DE HALO DE INHIBICIÓN SEGÚN CONCENTRACIÓN DE EXTRACTO ETANÓLICO DE PROPÓLEO SOBRE CRECIMIENTO IN VITRO DE. Fuentes de. 32.47. 3. 5 19.3. SI S. Error. TE. Tratamientos. Gl. MA S. SC Variación. E. IN. FO R. Candida albicans.. 36. CM. F. P. 10.825. 20.192. 0.000. 0.536. 51.77 Total. 39. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. IC. IN. A. DE. 5. OF. El análisis de varianza muestra que existe diferencia significativa entre las diferentes concentraciones de Extracto Etanólico de Propóleo sobre el crecimiento in vitro de Candida albicans esto dado que el valor de p de la prueba estadística es menor que 0.05 (p < 0.05). 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA 03 PRUEBA DE DUNCAN PARA COMPARAR EL DIÁMETRO PROMEDIO DE. CA. HALO DE INHIBICIÓN SEGÚN CONCENTRACIÓN DE EXTRACTO. MA TI. ETANÓLICO DE PROPÓLEO SOBRE CRECIMIENTO IN VITRO DE Candida albicans.. Grupos Significativos para Alfa =. FO R. Tratamient Ni. 0.05. Propóleo 25% Propóleo 50%. SI S. Propóleo. 10. DE. 75% Propóleo. 10. 8.4. 8.4. 10. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. IC. IN. A. 100%. G3. TE. 10. 7.5. MA S. 10. G2. E. G1. IN. o. OF. La prueba de DUCAN muestra que el diámetro promedio más grande es el de propóleo al 100% seguido del grupo de las concentraciones de 50%y 75% ambas estadísticamente iguales y finalmente del grupo de concentración del 25%. 27. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. TABLA 4. MA TI. PRUEBA T DE STUDENT PARA COMPARAR EL DIÁMETRO PROMEDIO DE HALO DE INHIBICIÓN ENTRE LA CONCENTRACIÓN DE EXTRACTO ETANÓLICO. DE. PROPÓLEO. AL. 100%. VS. SOBRE. IN. FO R. CRECIMIENTO IN VITRO DE Candida albicans.. NISTATINA,. Desv.. t. gl. P. -20.78. 10. 0.000. Est.. Propóleo 10 100% 10. 22. 0.47. 1.76. DE. SI S. Nistatina. 10. TE. Investigación. Media. MA S. ni. E. Grupo de. A. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. IN. En la prueba de t de Student se muestra que existe diferencia significativa. IC. entre concentración etanólico de propóleo al 100% con Nistatina sobre el. OF. crecimiento in vitro de Candida albicans esto dado que el valor de p de la prueba estadística es menor que 0.05 (p < 0.05). 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IV.. DISCUSIÓN. CA. La presente investigación experimental in vitro evaluó la actividad. MA TI. antimicótica de cuatro concentraciones de extracto etanólico de propóleo (25%, 50%, 75% y 100%) y de Nistatina (100,000 UI), frente a la cepa de. FO R. Candida albicans.. IN. Según los resultados obtenidos (Tabla 1 y 3), al realizar la comparación de. E. una forma global, se obtuvo que de las cuatro concentraciones de extracto. MA S. etanólico de propóleo estudiados la del 100% presento in vitro una mayor actividad antimicótica con un halo de inhibición de 10mm; seguida de las. TE. concentraciones de 75% y 50%, con efectos similares 8.4mm; y finalmente la. SI S. concentración de 25% con halo de inhibición de 7.5mm; sin embargo al hacer la comparación de la concentración de extracto etanólico (100%) que tuvo. DE. mayor efecto antimicótico, con la Nistatina se obtuvo que esta ejerció el mayor efecto antimicótico con un halo de inhibición de 22mm, superando. IN. A. notablemente in vitro a la concentración de extracto etanólico de propóleo al. OF. IC. 100%. (Tabla 4). En este caso el propóleo peruano procedente de la región de Lambayeque si tuvo efecto sobre la cepa de Candida albicans pero este efecto no fue. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. superior al medicamente nistatina utilizado como referencia. Los estudios de la actividad antifúngica del propóleo se han restringido casi exclusivamente. CA. al género Candida, considerando que los sesquiterpenos, especialmente el bisabolol y flavononas (pinocembrina) son los principales. actividad.26 y que la presencia de éstos compuestos. MA TI. responsables de esta. compuestos. con estas actividades puede variar de una región a otra ya que su presencia. FO R. se asocia en parte las resinas que recolectan las abejas de las plantas presentes en su entorno. Debido a esto es que propóleos obtenidos de. IN. diferentes regiones y estudiados en el laboratorio arrojan datos superiores. MA S. E. con respecto a otros propóleos provenientes de otras regiones 15, 20.. Londoño Orosco y cols; estudiaron el extracto etanólico al 15% de propóleo. TE. de la abeja Apis mellifera procedente del apiario de la Facultad de Estudios. SI S. Superiores Cuautitlán, UNAM, tuvo un efecto inhibitorio sobre el crecimiento de las levaduras Candida albicans y Cryptococcus neoformans, y sobre el Aspergillus fumigatus, el cual demuestra el potencial. DE. hongo filamentoso. A. antimicótico del propóleo no solo en hongos levaduriformes sino también. IN. hongos filamentosos, en nuestro estudio utilizamos la concentración minima. IC. de 25% de extracto etanólico de propóleo en el cual obtuvimos un halo de. OF. inhibición de 7.5mm sobre el crecimiento de las cepas de candida albicans y. este halo fue aumentando conforme aumentaba la concentración.. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Desde 1988 se reportó la actividad del extracto etanólico de propóleo contra 23 cepas de levaduras aisladas de diferentes partes del cuerpo humano,. CA. encontrando que fue fungistático a una concentración de 0,55 mg/mL12.. MA TI. Otros autores reportaron que la mínima concentración fungicida del extracto etanólico de propóleo contra 15 cepas probadas fue de 3 a 7 mg/mL siendo C. albicans más susceptible que otras especies como C. tropicalis, C. krusei,. FO R. y C. guilliermondii, se ha reportado que el extracto etanólico de propóleo podría ser usado como una medicina alternativa en el tratamiento de las. IN. candidiasis de pacientes HIV positivos, siendo tan efectivo como la nistatina. E. y superando a otros antifúngicos como clotrimazol, econozol y fluconazol 26. 12,. MA S. , en el presente estudio la concentración del extracto etanólico de propóleo. al 100% fue el que ejerció mayor efecto antimicótico con un halo de inhibición. TE. de 10mm, pero su efecto no fue similar a la nistatina como refiere el estudio. SI S. realizado por Martins et al., 2002. Ya que este tuvo un halo de inhibición de. DE. 22mm.. A. Hay que tener en cuenta que la composición química del propóleos es. IN. heterogénea y depende de la vegetación que predomina alrededor de la. IC. colmena (aproximadamente en un radio de 2 km), la estación del año. OF. (Midorikawa y col., 2003), así como de su origen geográfico (Asis, 1989; Trusheva y col., 2003).29 Y esta es una de las causas de que el propóleo Peruano procedente de Lambayeque sea inferior a la nistatina en este estudio. 31. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CONCLUSIONES. CA. V.. Todas las concentraciones de extracto etanólico de propóleo. MA TI. 1.. utilizadas en el presente estudio tuvieron efecto sobre el crecimiento. IN. 2.. FO R. in vitro de Candida albicans.. Se observó que a mayor concentración del extracto etanólico de. MA S. E. propóleo mayor es el efecto antimicótico siendo la concentración de. La concentración del extracto etanólico de propóleo al 100%. SI S. 3.. TE. 100% la más efectiva.. presento el mayor efecto antimicótico, pero este no fue superior al. DE. medicamento. Nistatina. (solución). utilizado. para. hacer. la. OF. IC. IN. A. comparación.. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Realizar estudios sobre otros patógenos de la cavidad oral, para. MA TI. . RECOMENDACIONES. CA. VI. ampliar el conocimiento sobre el propóleo y su uso en odontología. Comparar los propóleos provenientes de diferentes regiones del. FO R. . Perú para determinar la efectividad de los diversos extractos, así. IN. como, su variación en su actividad y así ampliar el estudio. . MA S. E. alternativas de prevención de enfermedades bucales. Se recomienda realizar estudios in vivo para valorar la efectividad o. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. toxicidad del propóleo peruano en las diferentes regiones.. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Murray P., Tenover F., Yonken R. “Manual de Microbiología Clínica”,. MA TI. 1.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. CA. VII. 6a eEd. Washington, DC 1995.. Nolte W. Microbiología odontológica,Ed. Interamericana,México D. F.. FO R. 2.. 1985.. Ceccotti. Sforza, Carzoglio Luberti. Flichman. “El Diagnostico en Clinica. IN. 3.. E. Estomatologica”; Editorial Medica Panamericana; 1° Edicion Buenos. 4.. MA S. Aires Argentina, 2007.. Joseph A. Regezi, James J. Sciubba. Patologia Bucal. 1era ed. Mexico. J.Philip Sapp, Lewis R. Eversole, George P. Wysocki. Patologia Oral y. SI S. 5.. TE. Interamericana-McGraw-Hill; 1991. pag. 114-5.. Maxilofacial Contemporanea. 3era ed. España. Harcourt Brace de. Shafer W, Hine M, Levy B. Tratado de patología bucal. 3a ed. México:. A. 6.. DE. España S. A. 1998. Pag 228-3. Lewis R. Eversole; “Patologia Bucal Diagnostico y Tratamiento”, Ed.. OF. 7.. IC. IN. Editorial Interamericana 1977. Pag. 401-403. Medica Panamericana S.A. Buenos Aires- Argentina 1986. Pp 40. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 8.. Dr. Malcolm A. Lynch, “Medicina Bucal de Burket Diagnóstico y Tratamiento”, 7ma Edición, editorial Interamericana S. A. México 1987.. Goodman E. Gilman, “Las Bases Farmacológicas de la Terapeutica”,. MA TI. 9.. CA. PP. 214, 215.. 11ava Edición; Editorial Mac Hill Interamericana, Mexico 2007. Pp1240 Consuelo. Rodríguez. Palomares,. Arturo. Rodríguez. FO R. 10.. Palomares;. “Farmacología Clinica”; Editorial Mac Hill Interamaricana; mexico 2005.. IN. 11. Martínez A. Aceites esenciales. Facultad Química Farmacéutica de la. MA S. E. Universidad de Antioquia, Medellín 2003. 12. Salas LLinares, Albert. “El propolis y el Regaliz” Evidencia científica y. Galiano A. “El Propóleo”, (creado el 5 de noviembre del 2007). SI S. 13.. TE. actividad biológica, Universidad de Barcelona, 2009. pp 5. 14.. DE. disponible en: http://www.iqb.es/monografia/fichas/ficha082.htm. 2007. Gardelle. D.. Propolis,. extraits. et. utilisations.. Clemont-Ferrand:. Z. Moreno H., P.Martínez A., J.Figueroa. : Efecto antimicrobiano In vitro. OF. 15.. IC. IN. A. Publications sur la propolis Apimab Laboratoires. 1983.. de propóleos argentinos, colombianos y cubano sobre Streptococcus mutans. Universidad Nacional de Colombia Facultad de Odontología.. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 16. Derevitch A, Popesco Al, Popesco N. Considérations sur les qualités de alcoolique. l’extrait. de. própolis.. Disponible. en. URL:. CA. http://biogassendi.ifrance.com/dossierpópolis.htm.. MA TI. 17. Eguizábal A, Moromi H. Actividad antibacteriana in vitro del extracto etanólico de propóleo peruano sobre Streptococcus mutans y. FO R. Lactobacillus casei. Odontología Sanmarquina 2007; 10(2): 18-20. 18. Lavie P. Du côté des chercheurs, les substances antibiotiques de la. IN. própolis. Bull tech Apic 198; 3: 13-24.. E. 19. Farré R, Frasquet I, Sánchez A. El própolis y la salud. Ars. MA S. Pharmaceutica, 2004 pp 21-43,.. 20. Lozina, L; Acosta de Perez, O.; Boehringer, S.; Teibler, P.; “Acción de. TE. propóleos sobre levaduras Asociadas a Otitis externa en Caninos”;. SI S. Universidad Nacional del Nordeste, Comunicaciones Cientificas y. DE. Tecnologicas 2004. Argentina. 21. Mahmoud Lotfy; “Biological Activity of Bee Propolis in Health and. A. Disease” (sede Wed) volume 7 ;(actualizado en enero del 2006). IC. IN. disponible en: www.apocp.org/cancer_download/.../Lotfy.pdf. OF. 22. Pinheiro E. T., Gomes B.P., Evaluation of root canal microorganisms isolated from teeth with endodontic failure end their antimicrobial susceptibility. Oral microbiology and Inmunology.. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 23. Reyes Alfaro, Diego (2011);. “Concentracion Minima Inhibitoria del. Efecto Antibacteriano del Extracto Etanólico del Propóleo Sobre el. CA. Enterococcus faecalis”, Trabajo de investigación para optar el grado de. MA TI. Bachiller en Estomatologia, Facultad de Medicina Escuela de Estomatología, Univarsidad Nacional de Trujillo. FO R. 24. Bocanegra D. F. Bases Metodológicas de la Investigación Científica. Perú. PubliCiencia, 2002.. Asociación Médica Mundial. Declaración de Helsinki de la Asociación. IN. 25.. humanos.. 2011.. MA S. seres. E. Médica Mundial – principios éticos para las investigaciones médicas en Disponible. http://www.wma.net/es/30publications/10policies/b3/Consultado. Mayo. TE. 11, 2011.. en:. SI S. 26. Londoño Orozco, Amparo; Penieres Carrillo, José Guillermo; García. DE. Tovar, Carlos Gerardo; Carrillo M., Liborio; Quintero Mora, María Leonor; García Vázquez, Susana Elvira; Mendoza Saavedra, Marco. A. Antonio; Cruz Sánchez, To natiuh Alejandro. “Estudio de la actividad. IN. antifúngica de un extracto de propóleo de la abeja Apis mellifera. OF. IC. proveniente del estado de México” Tecnología en Marcha, Vol. 21-1, Enero-Marzo. 2008,. P.. 49-55.. Disponioble. en:. www.tec.ac.cr/sitios/Vicerrectoria/vie/editorial.../49-55.pdf.. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 27. Campos Fernández, Mercedes, “Estudio Químico de Propóleos Rojos Cubanos” Tesis en Opción al Título de Doctor en Ciencias. CA. Farmacéuticas, Instituto de Farmacia y Alimentos Universidad de la. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. Habana; Ciudad de la Habana 2007.. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) IN. FO R. MA TI. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. ANEXOS. 39 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO N° 01. Control 24 Horas. Extracto Etanólico. Medición de los halos de inhibición en mm. de Propóleo al……. 4 5. TE. 6. SI S. 7. 9. Resistente. MA S. 3. 8. Sensible. E. 2. repeticiones. Observaciones. IN. 1. Número de. FO R. Concentración de. MA TI. CA. FICHA PARA RECOLECCION DE DATOS.. OF. IC. IN. A. DE. 10. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO N° 02 EVALUACION DE LA TESIS. Consignar las observaciones y objeciones pertinentes relacionadas a los siguientes ítems. Anotar el calificativo final.. c.. Firmar los tres miembros del jurado.. FO R. b.. MA TI. a.. CA. El Jurado deberá:. TESIS:................................................................................................................. IN. ............................................................................................................................. 1.. DE LAS GENERALIDADES:. E. ...................................................................................................... MA S. Titulo:………………………………………….………………………. Tipo de Investigación:……………………………………………… 2.. DEL PLAN DE INVESTIGACIÓN:. TE. Antecedentes:.................................................................................. SI S. Justificación:................................................................................... Problema:......................................................................................... DE. Objetivos:........................................................................................ Hipótesis:......................................................................................... A. Diseño de contrastación: …........................................................... IN. Tamaño Muestral:............................................................................ IC. Análisis Estadístico:....................................................................... OF. 3. RESULTADOS:...................................................................................... 4. DISCUSIÓN: .......................................................................................... 5. CONCLUSIONES: ................................................................................. 6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:..................................................... 7. RESUMEN:.............................................................................................. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 8. RELEVANCIA DE. LA. INVESTIGACIÓN:……………………...………. CA. ORIGINALIDAD: ........................................................................................... 10. SUSTENTACION. Formalidad:…………………..…………………………………. MA TI. 10.1. 10.2 Exposición:……………………………………………………. FO R. 10.3 Conocimiento del Tema:..................................................... Nombre. Código. MA S. JURADO:. E. (Promedio de las 03 notas del Jurado). IN. CALIFICACIÓN:. TE. Presidente: Dr. (a).......................... Firma. Docente. ..................... ……………….... SI S. Grado Académico: …………………………………………………………… Secretario: Dr. (a).......................... ..................... …….…….….…. Grado Académico: …………………………………………………………… Dr. (a)........................ DE. Miembro:. .................... …………………. OF. IC. IN. A. Grado Académico: …………………………………….…………………….... 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO N° 03 RESPUESTA DE TESISTAS A OBSERVACIONES DEL JURADO. MA TI. jurado a manuscrito en el espacio correspondiente:. CA. El Tesista deberá responder en forma concreta a las observaciones del. Fundamentando su discrepancia. b.. Si está de acuerdo con la observación también registrarla.. c.. Firmar. IN. FO R. a.. TESIS:.......................................................................................................... E. .................................................................................................................... DE LAS GENERALIDADES:. MA S. 1.. Titulo:…………………………………………….………………………. 2.. TE. Tipo de Investigación:……………………………………………… DEL PLAN DE INVESTIGACIÓN:. SI S. Antecedentes:................................................................................. Justificación:.................................................................................... DE. Problema:........................................................................................ Objetivos:......................................................................................... A. Hipótesis:......................................................................................... IN. Diseño de contrastación: …........................................................... IC. Tamaño Muestral:............................................................................ OF. Análisis Estadístico:....................................................................... 3. RESULTADOS:...................................................................................... 4. DISCUSIÓN: .......................................................................................... 5. CONCLUSIONES: ................................................................................. 6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:...................................................... 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(50) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 7. RESUMEN:............................................................................................. 8. RELEVANCIA DE LA INVESTIGACIÓN:……………………...………. CA. 9. ORIGINALIDAD: ..................................................................................... MA TI. 10. SUSTENTACION 10.1. Formalidad:…………………..…………………………………. 10.2. Exposición:………………………………...……………………. FO R. 10.3 Conocimiento del Tema:..................................................... IN. ........................................... E. Nombre:. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. Firma. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(51) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. CONSTANCIA DE ASESORAMIENTO DE PROYECTO. Lo suscribe, profesor Dr. MANUEL GUILLEN GALARZA, Profesor Asociado. MA TI. de la Escuela de Estomatología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo, deja constancia del asesoramiento de la Tesis titulada: ANTIMICOTICA. DEL. EXTRACTO. FO R. “ACTIVIDAD. ETANOLICO. DE. PROPOLEO SOBRE EL CRECIMIENTO EN VITRO DE Candida albicans”. IN. perteneciente al alumno: Manuel Enrique De La Cruz León; identificado con. E. el número de matrícula: 0012100306, de la Escuela de Estomatología de la. MA S. Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. Por lo que se expide la presente constancia para fines del interesado.. Trujillo 22 de octubre del 2012. _____________________________ Asesor: Dr. Manuel Guillen Galarza COP: 5191. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(52) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CONSTANCIA DE ASESORAMIENTO. CA. La suscribe, profesora Dra. ELVA MEJÍA DELGADO, Profesora Asociado. MA TI. del Departamento de Ciencias Básicas Medicas de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo, deja constancia del asesoramiento de la Tesis titulada: : “ACTIVIDAD ANTIMICOTICA DEL EXTRACTO. FO R. ETANOLICO DE PROPOLEO SOBRE EL CRECIMIENTO EN VITRO DE Candida albicans” perteneciente al alumno: Manuel Enrique De La Cruz. IN. León; identificado con el número de matrícula: 0012100306, de la Escuela. E. de Estomatología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de. TE. MA S. Trujillo.. OF. IC. IN. A. DE. SI S. Por lo que se expide la presente constancia para fines del interesado.. Trujillo 22 de octubre del 2012. _____________________________ Co- Asesor: Dra. Elva Mejía Delgado COD. 3147. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

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