Influencia del método de extracción soxhlet y reflujo en la acción reductora del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum
41
0
0
Texto completo
(2) UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IA. Y. BI. O. Q. DEDICATORIAS. AC. A Dios.. RM. Por estar a nuestro lado en cada paso que damos, por fortalecer nuestro corazón e iluminar nuestra mente y por. DE. FA. haber puestoen el camino a aquellas maravillosas personas que han sido nuestrosoporte y compañía durante todo. BI BL. IO. TE. CA. el periodo deestudio.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. O. A nuestros Padres.. Q. UI M. IC A. AGRADECIMIENTOS. IA. Y. Porhabernoseducado.Graciasporsusconsejos,porsuapoyo,porsuamor,cariñoycomprensiónbrindadaen. DE. FA. RM. AC. cadamomento de nuestras vidas.. CA. A nuestros maestros.. IO. TE. Gracias por su tiempo dedicado, por su apoyo así como por la sabiduría que nos transmitieron en el desarrollo de. BI BL. Tesis I, en especial a nuestro asesor Roger Antonio Rengifo Penadillos, por su apoyo desinteresado, por sus conocimientosyenseñanzasimpartidas, porsuinterminablepaciencia,porsubuenadisposiciónycomprensiónen la ejecución de este trabajo, pero sobre todo por ser amigo y compañero.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN. Señores miembros del jurado dictaminador:. IC A. De conformidad con las disposiciones legales de grados y títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad nacional de Trujillo, sometemos a vuestro. UI M. elevado criterio el presente informe de investigación intitulado:. O. Q. “Influencia del método de extracción soxhlet y reflujo en la acción reductora del. Y. BI. extracto etanólico de hojas de Piper aduncum”. IA. Esperando vuestra aprobación señores miembros del jurado dejamos a su criterio la. CA. DE. FA. RM. AC. calificación del presente informe.. BI BL. IO. TE. Trujillo, Septiembre del 2018. _ Adrianzén Tolentino, Mario Andrés. Alvarado Luis, Leonel Jesus. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UI M. Dr. Segundo Guillermo Ruiz Reyes. IC A. JURADO DICTAMINADOR. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. Presidente. Miembro. BI BL. IO. TE. CA. Mg. Roger Antonio Rengifo Penadillos. Dra. Marilú Roxana Soto Vásquez Miembro. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. El presente trabajo de investigación tuvo como objetivo determinar la influencia del método de extracción en la acción reductora del extracto etanólico de hojas de Piper. IC A. aduncum. Se compararon dos métodos de extracción, soxhlet y reflujo, mediante la acción. UI M. reductora del extracto etanólico sobre el ión férrico, para lo cual se empleó el método modificado de Oyaizu M, preparándose cinco muestras a partir de diferentes volúmenes. BI. O. Q. de cada extracto. Se obtuvieron como porcentajes de reducción 67,162%, 73,403%,. Y. 79,049%, 84,993% y 91,530% para las muestras preparadas a partir del. AC. IA. método de soxhlet y 58,544%, 64,933%, 70,282%, 76,374% y 82,318% para las que se. RM. prepararon a partir del método de reflujo; encontrándose diferencias estadísticamente. FA. significativas (p<0,05) en la acción reductora del extracto etanólico, sobre el ión férrico,. DE. obtenido por los métodos de soxhlet y reflujo.. CA. Se concluyó que el método de extracción influye en la acción reductora del extracto. TE. etanólico de hojas de Piper aduncum, evidenciándose un mayor porcentaje de reducción. BI BL. IO. sobre el ión férrico con el extracto etanólico obtenido por el método de soxhlet.. Palabras clave: Extracción por reflujo, extracción por soxhlet, acción reductora, ión férrico, Piper aduncum.. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. The present research aims to determine the influence of the extraction method on the reductive action of the ethanolic extract of Piper aduncum leaves. Two methods of extraction, soxhlet and reflux were compared by the reductive action of the ethanolic. IC A. extract on the ferric ion, for which the modified method of Oyaizu M was used, preparing. UI M. five samples from different volumes of each extract. 67.162%, 73.403%, 79.049%,. Q. 84.993% and 91.530% for the samples prepared from the soxhlet method and 58.544%,. BI. O. 64.933%, 70.282%, 76.374% and 82.318% for those prepared were obtained as. IA. Y. percentages of reduction. from the reflux method; finding statistically significant. AC. differences (p <0.05) in the reductive action of the ethanolic extract, on the ferric ion,. RM. obtained by the methods of soxhlet and reflux.. FA. It was concluded that the extraction method influences the reductive action of the. DE. ethanolic extract of Piper aduncum leaves, evidencing a greater percentage of reduction. BI BL. IO. TE. CA. on the ferric ion with the ethanolic extract obtained by the soxhlet method.. Keywords: Extraction by reflux, extraction by soxhlet, reducing action, ferric ion, Piper aduncum.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE. RESUMEN ....................................................................................................................... i. ABSTRACT .....................................................................................................................ii. INTRODUCCIÓN.......................................................................................... 1. II.. MATERIAL Y MÉTODOS ...........................................................................5. III.. RESULTADOS ............................................................................................10. IV.. DISCUSIÓN................................................................................................. 11. V.. CONCLUSIONES........................................................................................ 14. VI.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS .........................................................15. VII.. ANEXOS ..................................................................................................... 18. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. I.. ii i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCIÓN. La extracción es una de las operaciones básicas del laboratorio. Se define como la acción de separación de una mezcla de sustancias por disolución de cada componente, sirviéndose de uno o varios disolventes, donde siempre se obtienen por lo menos dos componentes: La solución extraída en su disolvente (solución extractiva) y su residuo1. Se pueden realizar desde los tres estados de la materia, y se llaman de la siguiente manera: Extracción sólido – líquido; extracción líquido – líquido y extracción gas – líquido1.. IC A. La extracción sólido-líquido es la más utilizada y se emplea cuando la sustancia que se. UI M. desea extraer está contenida en un material sólido, junto con otros componentes, los. Q. cuales deberán ser prácticamente insolubles en el disolvente utilizado. Es muy usada para. O. aislar sustancias naturales de origen vegetal. Para esto, se suele emplear un equipo. IA. método directo llamado calentamiento a reflujo2.. Y. BI. Soxhlet, que es un aparato de extracción continua pero también puede utilizarse un. AC. Soxhlet es un sistema de extracción, la cual se efectúa en un aparato que consta de un. RM. matraz de fondo plano, un cuerpo extractor y un refrigerante. En el cuerpo extractor se. FA. coloca el disolvente y la droga, generalmente envuelta en un material poroso que permita el contacto con el disolvente. En el matraz de fondo plano se coloca el disolvente. DE. orgánico, se lleva a ebullición y los vapores del disolvente ascienden por el tubo lateral y. CA. llegan al refrigerante donde condensan y caen sobre la droga situada en el cuerpo. TE. extractor. Cuando el cuerpo extractor se llena de líquido extractivo, éste se vacía por el. IO. sifón lateral interno y desemboca en el matraz inferior. El disolvente se va reciclando inferior3.. BI BL. durante el proceso mientras que los principios activos se van concentrando en el matraz. Por otro lado, en el método de reflujo el material sólido se va calentando junto con el disolvente en un matraz y se coloca un refrigerante en posición vertical para que se condense y no se pierda el disolvente que está hirviendo2. La elección del método de extracción es de gran importancia para obtener un mayor rendimiento y evitar que se altere la naturaleza química de los compuestos que están presentes en los componentes de especies vegetales. Por ello es vital tener en cuenta la polaridad del solvente ya que existen principios activos polares y apolares. Al embeber la droga con el líquido de extracción se disuelven primero las sustancias a los que el. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. disolvente puede llegar sin obstáculos; al triturar la droga se destruyen varias células donde el grado de finura creciente favorece la disolución4. Actualmente las plantas tienen un uso directo e indirecto, cuando se emplean indirectamente es para obtener moléculas activas que ofrecen modelos químicos en la síntesis de nuevos fármacos. El uso directo es lo que se conoce como fitoterapia o la aplicación terapéutica de fitofármacos obtenidos directamente de las plantas medicinales pulverizadas o extractos sencillos5. Nuestro país cuenta con vegetales de reconocida actividad medicinal, entre ellos la familia. IC A. Piperácea que comprende unas 1300 especies. La especie Piper aduncum, es oriunda de América del Sur, abunda en el Perú, Ecuador, Bolivia, Paraguay, Brasil y norte de. UI M. Argentina. Crece particularmente en lugares húmedos a orillas de riachuelos y de fangos.. Q. Es un arbusto de 2 – 3 m. de altura, la hoja entera es ampliamente aovada y acorazonada. BI. O. en la base, con el ápice terminal en punta, de color gris verdoso, pubescente por el envés,. Y. olor aromático que recuerda un poco a la menta y sabor cálido amargo no desagradable.. IA. En la actualidad, su uso etnomedicinal es múltiple y variado siendo empleado en infusión. AC. para aliviar y curar enfermedades del tracto respiratorio (antiinflamatorio, antitusígeno y. RM. antiséptico, bueno para bronquitis, amigdalitis, otitis), en dolencias gastrointestinales. FA. (diarreas agudas o crónicas, disentería) y como vulnerario en decocto (para el lavado de heridas externas). La especie Piper aduncum, crece como silvestre en muchos lugares del. DE. Perú, siendo aprovechada por menos del 5% de la población, por desconocimiento de su. CA. poder antioxidante y propiedades medicinales, o por no tener confianza en la planta. TE. natural y tener preferencia por los productos sintéticos6.. IO. Los efectos colaterales de las drogas sintéticas y la falta de drogas efectivas hacen que. BI BL. muchas enfermedades no sean resueltas eficazmente, siendo aún una característica insalvable de la farmacología moderna. Sin embargo, estudios epidemiológicos han sugerido asociaciones positivas entre el consumo de especies vegetales ricas en fenoles y la prevención de enfermedades; efectos atribuidos a los componentes de la naturaleza polifenólica. La actividad antioxidante de estos compuestos se atribuye a su facilidad para ceder átomos de hidrógeno de un grupo hidroxilo aromático a un radical libre y a la posibilidad de deslocalización de cargas en el sistema de dobles enlaces del anillo aromático7, 8.. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Los compuestos fenólicos poseen además una estructura química ideal para captar iones metálicos (principalmente hierro y cobre) y por tanto para inhibir la formación de radicales libres. Además de las propiedades antioxidantes, a estos compuestos se les atribuyen actividades biológicas beneficiosas para salud. Entre estas destacan sus efectos vasodilatadores, anticarcinogénicos, antiinflamatorios, bactericidas, estimuladores de la respuesta inmune, antialérgicos, antivirales, efectos estrogénicos, o inhibidores de enzimas prooxidantes, como cicloxigenasa, lipooxigenasa y xantina oxidasa9, 10, 11. Existen diversos métodos químicos para determinar la acción reductora de extractos. IC A. obtenidos de vegetales, uno de ellos es el método espectrofotométrico ferric reducing/antioxidant power (FRAP) que se fundamenta en la capacidad de los extractos. UI M. para reducir el Fe3+ a Fe2+, esta reacción se basa en el poder reductor de la sustancia. Q. polifenólica que transforma el ferricianuro de potasio en ferrocianuro de potasio, este. BI. O. compuesto reacciona con el FeCl3 formándose un complejo Fe4[Fe(CN)6]3 (Azul de Prusia) de intensa coloración verde esmeralda, cuya intensidad es dependiente de la. IA. Y. concentración de los polifenoles que se encuentran en la muestra12.. AC. Blas S, en su trabajo de investigación intitulado “Acción reductora del extracto etanólico. RM. de Zingiber oficcinale Roscoe (jengibre) sobre el ión férrico” concluye que el máximo. FA. porcentaje relativo de poder reductor del extracto etanólico de Zingiber officinale Roscoe (jengibre) fue de 6,5% 13.. DE. Romero A y col., en su trabajo de investigación intitulado “Propiedades antioxidantes de. CA. compuestos polifenólicos presentes en extractos hidroalcohólicos de soja fermentada”. TE. concluyen que el mínimo y máximo porcentaje de poder reductor del extracto. IO. hidroalcohólico de soja fermentada fue de 29,46% y 92,17% respectivamente14. Por todo. BI BL. lo expuesto anteriormente, el presente trabajo de investigación no solo pretende determinar la influencia del método de extracción sobre la acción reductora del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum, sino de promover estudios científicos de carácter similar que permitan contribuir de esta manera a optimizar la utilización de los productos naturales que, por desconocimiento, actualmente no son considerados una alternativa farmacológica eficiente pero que posteriormente formarán parte del “arsenal” terapéutico de diversas patologías.. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En la presente tesis se planteó el siguiente problema: ¿Influye el método de extracción en la acción reductora del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum?. El objetivo general del presente trabajo fue: Determinar la influencia del método de extracción en la acción reductora del extracto. UI M. IC A. etanólico de hojas de Piper aduncum.. Q. Los objetivos específicos del presente trabajo fueron:. BI. O. Establecer diferencias en la acción reductora, sobre el ión férrico, que tienen los. Y. extractos etanólicos de las hojas de Piper aduncum, obtenidos por el método de. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. soxhlet y reflujo.. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.. MATERIAL Y MÉTODO. 1. MATERIALES 1.1.. Material de Estudio 1.1.1 Material biológico 1 kg de hojas de Piper aduncum procedente del centro poblado de Coina, distrito de Usquil, provincia de Otuzco, departamento La Libertad. 1.2.. IC A. recolectadas en junio del 2018.. Material de Laboratorio. UI M. 1.2.1. Materiales de vidrio. Q. El de uso común en el laboratorio.. Mortero. -. Tamiz N° 0,75. -. Soxhlet. -. Cocina eléctrica. -. Balanza Analítica “Sartorius” serie BP301S. -. Baño maría “Memmert” serie DIN12877-K1. -. Bomba al vacío “Emerson” serie E22922. -. Espectrofotómetro Visible “Genesys 20” serie 20356G080003. -. Estufa “Memmert” serie DIN12880-K1. -. Centrífuga “Boego Germany” serie 0001096. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. -. Potenciómetro “Metrohm” serie 38946. BI BL. -. 1.3.. O. 1.2.2. Equipos de laboratorio. Reactivos y solventes -. Agua destilada. -. Etanol 96 º Gay Lussac. -. Ácido gálico. -. Ácido tricloroacético al 10%. -. Buffer fosfato pH 6,6. -. Cloruro férrico al 1%. -. Ferricianuro de potasio al 1%. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2. MÉTODO 13, 15, 16, 17 2.1.. Recolección de la muestra Se recolectó 1 kg de hojas de Piper aduncum, en junio del 2018, procedente del centro poblado de Coina: Latitud sur: 7°48’18.7’’, Longitud oeste: 78°21’56.5’’, Altitud: 1 942 m.s.n.m., del distrito de Usquil, provincia de Otuzco, departamento La Libertad.. 2.2.. Preparación de la muestra. IC A. 2.2.1. Identificación de la muestra El material biológico se identificó en el Herbarium Truxillense de la. UI M. Universidad Nacional de Trujillo, asignándole el Nº 58178 para su. BI. O. Q. depósito. (Anexo 1). Y. 2.2.2. Selección y lavado. IA. Se seleccionaron las hojas considerando su forma y su estado de. RM. AC. conservación, luego se lavaron con agua destilada.. FA. 2.2.3. Secado. El secado de las hojas se realizó a temperatura ambiente sobre papel Kraft. DE. por 72 horas, se continuó con el secado en estufa a 40 °C hasta peso. CA. constante; las hojas puestas en la estufa estuvieron contenidas en bolsas. IO. TE. de papel Kraft agujereadas.. BI BL. 2.2.4. Pulverizado Las hojas secas se pulverizaron en un mortero hasta obtener partículas de tamaño uniforme.. 2.2.5. Tamizado El polvo obtenido se tamizó empleando el tamiz Nº 0,75; el producto obtenido se almacenó herméticamente en frascos de vidrio de color ámbar hasta el momento de la extracción.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.3.. Obtención del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum por el método de soxhlet Se pesó 10 g de polvo de hojas de Piper aduncum, luego se colocaron en un cartucho de papel filtro y se introdujeron en la cámara del equipo soxhlet. Se extrajeron los principios activos con 250 mL de alcohol etílico de 96° GL durante 3 horas; el producto obtenido se filtró y llevó a una fiola de 250 mL aforándose con alcohol etílico de 96° GL para obtener el extracto. Obtención del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum por el. UI M. 2.4.. IC A. etanólico.. Q. método de reflujo. O. Se pesó 10 g de polvo de hojas de Piper aduncum, luego se reflujaron con. BI. 250 mL de alcohol etílico de 96° GL durante 3 horas, el producto obtenido. IA. Y. se filtró y llevó a una fiola de 250 mL aforándose con alcohol etílico de 96°. 2.5.. RM. AC. GL para obtener el extracto etanólico.. Determinación del extracto seco a partir del extracto etanólico de. DE. FA. hojas de Piper aduncum. De los extractos etanólicos obtenidos a partir de hojas de Piper aduncum, se. CA. midió 10 mL y se colocó en una cápsula de porcelana, luego se llevó a estufa. TE. a 50 ºC hasta que el peso no varió en más de 0,2 g.. IO. Se realizaron los cálculos y la determinación de la concentración del. BI BL. extracto etanólico expresándose en mg de extracto seco/mL de extracto. (Anexo 2). 2.6.. Preparación de las muestras de extracto etanólico de hojas de Piper aduncum para la reducción del ión férrico Se midió 0,1 mL, 0,2 mL, 0,3 mL, 0,4 mL y 0,5 mL del extracto etanólico a fiolas de 25 mL, aforándose con alcohol etílico de 96º GL, las cuales constituyeron las muestras de trabajo. Este procedimiento se realizó tanto para el extracto etanólico obtenido por el método de soxhlet, así como para el obtenido por el método de reflujo. 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.7.. Acción reductora del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum sobre el ión férrico La evaluación del poder reductor del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum sobre el ión férrico (Fe, III) se realizó aplicando un método modificado de Oyaizu M. 1 mL de cada muestra de trabajo, se mezcló con 5 mL de buffer fosfato, a pH 6,6 y con 5 mL de Ferricianuro de potasio [K3Fe(CN)6] al 1%. Después de un periodo de incubación de 20 minutos a una temperatura de 50 ºC a la. IC A. mezcla reaccionante se le adicionó 5 mL de Ácido tricloroacético al 10% y. UI M. se centrifugó a 4000 r.p.m. por 15 minutos. 5 mL del sobrenadante de la. Q. solución se mezcló con 5 mL de agua destilada y 1 mL de Cloruro férrico al. BI. O. 1%. La absorbancia se midió a 700 nm.. Y. Se utilizó una solución de ácido gálico como patrón, a una concentración de. IA. 0,124 mg/mL (Anexo 3), y se le sometió al procedimiento antes. AC. mencionado.. RM. Este procedimiento se realizó por triplicado para cada muestra de trabajo y. FA. para el patrón.. DE. Una vez obtenidas las lecturas de las absorbancias, se procedió a evaluar el. CA. porcentaje de reducción del ión férrico por las muestras del extracto. TE. etanólico de hojas de Piper aduncum, obtenido a partir de cada método de. BI BL. IO. extracción, de acuerdo a la siguiente ecuación:. Donde: %R. = Porcentaje de Reducción. Am. = Absorbancia de la muestra. Ap. = Absorbancia del patrón. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.8.. Análisis estadístico de datos A los datos obtenidos se le realizó un tratamiento estadístico usándose estimadores como media aritmética, desviación estándar y ANOVA. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. utilizando el programa Microsoft Excel18.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESULTADOS. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. % DE REDUCCIÓN DEL IÓN FÉRRICO. IC A. III.. IO. Gráfico 1. Comparación del porcentaje de reducción del ión férrico de los. BI BL. extractos etanólicos de hojas de Piper aduncum obtenidos por los métodos de soxhlet y reflujo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. La correcta elección del método de extracción permite obtener los principios activos contenidos en las plantas para luego usar estas sustancias beneficiosas en formas farmacéuticas adecuadas19. En la actualidad el rendimiento en función de la eficiencia, que proporciona la aplicabilidad del fundamento y los principios básicos de extracción constituye con solidez. IC A. el principal criterio de selección19. En el presente trabajo de investigación se determinó la influencia del método de. UI M. extracción en la acción reductora del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum. Q. ejecutándose dos métodos de extracción, soxhlet y reflujo. La diferencia se estableció. BI. O. mediante la evaluación del poder reductor sobre el ión férrico de los extractos etanólicos. IA. M. debido a su precisión, rapidez y versatilidad.. Y. obtenidos; para lo cual se optó por el método espectrofotométrico modificado de Oyaizu. AC. En el gráfico 1 se presenta la comparación del porcentaje de reducción del ión férrico de. RM. los extractos etanólicos de hojas de Piper aduncum obtenidos por los métodos de soxhlet. FA. y reflujo, en donde se aprecia que al aumentar el volumen de extracto etanólico también. DE. aumenta el poder reductor. En la muestra 1 y 5 se obtuvieron porcentajes de reducción de 67,162% y 91,530% para el método de soxhlet, mientras que para el método de reflujo. CA. 58,544% y 82,318%; al aplicar el análisis estadístico ANOVA de un factor, se. TE. encontraron diferencias estadísticamente significativas (p<0,05) entre ambos métodos.. IO. En términos generales se puede manifestar que el porcentaje de reducción del extracto. BI BL. etanólico obtenido por el método de soxhlet es superior al obtenido por el método de reflujo, debido a una mayor presencia de metabolitos con poder reductor (mayormente flavonoides); afirmación que puede ser corroborada por la determinación de la concentración de los extractos etanólicos en función a mg de extracto seco/mL de extracto, que se obtuvieron a partir de cada tipo de extracción; con 6,20 mg/mL para el método de soxhlet y 4,91 mg/mL para el de reflujo (Anexo 2). Rojas M y Rumay A, en su trabajo de investigación intitulado “Determinación de la actividad antioxidante in vitro del extracto hidroalcohólico de hojas de Piper aduncum procedentes de la Provincia de San Marcos – Departamento de Cajamarca” en el año. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2010, obtuvieron una concentración de 0,57 mg/mL (mg de extracto seco/mL de extracto) para el extracto hidroalcohólico de hojas de Piper aduncum obtenido por el método de reflujo20. Neira C y Pereda E, en su trabajo de investigación intitulado “Efecto del extracto etanólico de las hojas de Piper acutifolium en el crecimiento de Streptococcus pyogenes, ATCC 19615, in vitro” en el año 2017, obtuvieron una concentración de 22,0 mg/mL (mg de extracto seco/mL de extracto) para el extracto etanólico de hojas de Piper acutifolium obtenido por el método de soxhlet21.. IC A. Los procesos de extracción de la mayoría de las sustancias tiene muy baja eficiencia, es decir, una vez que se agrega el solvente, lo que está en contacto íntimo con lo extraíble. UI M. disminuye su acción en seguida, por lo que hay que filtrar y volver a tratar con solvente. O. BI. atención personalizada que la operación requiere1, 22.. Q. fresco. Eso implica gran cantidad y mucha manipulación del solvente a parte de la. Y. Para extraer los principios activos con disolventes se puede realizar de forma continua o. IA. discontinua; en una extracción de forma continua, como el soxhlet, el disolvente utilizado. AC. se va renovando y actúa en una sola dirección, manteniendo en todo momento el. RM. desequilibrio entre la concentración de principio activo en la droga y el disolvente;. FA. mientras que en una extracción discontinua, como el reflujo, se sumerge la droga en el disolvente, por lo que la totalidad de la droga contacta con el disolvente utilizado para la. CA. alcanzar el equilibrio1.. DE. extracción y la difusión de los principios activos se producirá en todas direcciones hasta. TE. El control de la difusión celular manteniendo la aplicabilidad de la ley de Fick, la cual. IO. estipula que la velocidad de difusión a través de una membrana es directamente. BI BL. proporcional al gradiente de concentración de la sustancia a ambos lados de la misma e inversamente proporcional al grosor de la membrana, es la base teórica y uno de los factores más importantes a considerar para realizar una extracción eficiente en materia de rendimiento3, 23. Una correcta difusión se consigue cuando la droga ofrece un grado de división adecuado (mayor superficie de difusión) y cuando se renueva correctamente el disolvente utilizado en la extracción. Dicha difusión se produce hasta alcanzar el equilibrio. Conviene que el disolvente se renueve para evitar que se detenga la extracción porque se ha alcanzado una situación de equilibrio. Al renovar el disolvente se mantiene una. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. diferencia de concentración de principios activos entre la droga y el disolvente, lo cual permite que se produzca la difusión celular pasiva3, 24. En resumen, lo que hace el extractor soxhlet a diferencia del reflujo es realizar un sinfín de extracciones de manera automática, con el mismo solvente que se evapora y condensa llegando siempre de manera pura al material permitiendo así obtener un extracto con una mayor cantidad de principios activos, producto que luego por técnicas de purificación podrá ser utilizado con fines terapéuticos18, 25. Las farmacopeas han incluido dentro de sus especificaciones regulaciones con. IC A. fundamento científico para garantizar la calidad de estos preparados, los cuales no. UI M. precisan de un control tan exacto como los medicamentos oficiales, pero deben observarse algunos cuidados en cuanto a la conservación y tiempo de almacenamiento18.. O. Q. Pensando en el mañana se busca perfeccionar las técnicas extractivas en base a la. BI. eficiencia y rendimiento con el fin de anticiparse a una gran demanda en la producción. Y. de fitofármacos en el futuro. Si bien es cierto, hasta hoy no han tomado mayor auge ni. AC. IA. han logrado desplazar a los fármacos sintéticos pese a su inocuidad y menores reacciones. RM. no deseadas, pero posteriormente gracias a la farmacovigilancia este tema será el punto de partida para optar por la utilización de productos naturales como tratamientos más. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. seguros para la población.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.. CONCLUSIONES. El método de extracción influye en la acción reductora del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum, evidenciándose un mayor porcentaje de reducción sobre el ión. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. férrico con el extracto etanólico obtenido por el método de soxhlet.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1. Núñez C. Extracciones con equipo Soxhlet. Argentina: Texto libre. p: 1-3. 2008 2. Hurtado M. Caracterización fitoquímica de dos extractos alelopáticos obtenidos de Cinnamon. canella. y. Piper. angustifolium,. mediante. cromatografía. y/o. espectrofotometría. Proyecto de Titulación previo a la obtención del Título de. 3. Kuklinski C. Farmacognosia. España: Omega. p: 35. 2000. IC A. Ingeniera en Biotecnología. Universidad de las Fuerzas Armadas Ecuador. 2015. UI M. 4. Rojas L, Jaramillo C, Lemus M. Métodos Analíticos para la Determinación de. Q. Metabolitos Secundarios de Plantas. Ecuador: UTMACH. p: 72. 2015. 2008.. [Citado. 19. Abr. 2018].. BI. [Internet].. O. 5. Ismael M. Fitofármacos. Intervención Educativa. Misión Barrio Adentro. Venezuela. Disponible. en:. IA. Y. http://files.sld.cu/mednat/files/2012/01/fitofarmacos-intervencion-educativa.pdf. AC. 6. Rengifo R. Determinación de la actividad antibacteriana, in vitro de los extractos de. RM. hoja de Piper aduncum sobre Staphylococcus aureus y Streptococcus pyogenes.. FA. Tesis para optar el grado de maestro en Farmacia y Bioquímica. Mención Productos Naturales Terapéuticos. Universidad Nacional de Trujillo. 2009. DE. 7. Guimet A. Evaluación de la actividad Antioxidante y Determinación de polifenoles. CA. totales in vitro, de las hojas de ocho morfotipos de Bixa orellana L. Universidad. TE. Nacional de la Amazonía Peruana. 2012. IO. 8. Baldeón C. Formulación y evaluación de un alimento deshidratado dulce a partir de. BI BL. una mezcla de harina y residuos sólidos de oca púrpura (Oxalis tuberosa). Universidad Nacional del Centro del Perú. 2013 9. Osorio E, Montoya G, Bastida J. Caracterización Fitoquímica de una fracción de biflavonoides de Garcinia madruno: Su inhibición de la oxidación de LDL humana y su mecanismo de estabilización de especies radicalarias. Rev. Vitae [Internet]. 2009.. [Citado. 22. Abr. 2018];. 16(3):. 369-377.. Disponible. en:. http://www.scielo.org.co/pdf/vitae/v16n3/v16n3a11.pdf 10. Gutiérrez J. Qué sabe usted a cerca de radicales libres. Rev. Mexicana de Ciencias Farmacéuticas. [Internet]. 2006. [Citado 24 Abr 2018]; 37(4): 69-73. Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=57937409. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 11. Montes D. Contenido fenólico y actividad antioxidante de extractos metanólicos obtenidos de las hojas y los frutos de Pittosphorum pentandrum. Universidad Central “Marta Abreu” de las Villas. 2014 12. Kuskoski M, et al. Aplicación de diversos métodos químicos para determinar actividad antioxidante en pulpa de frutos. Rev. Ciênc. Tecnol. Aliment. [Internet]. 2005.. [Citado. 25. Abr. 2018];. 25(4):. 726-732.. Disponible. en:. http://www.scielo.br/pdf/cta/v25n4/27642.pdf 13. Blas S. Acción reductora del extracto etanólico de Zingiber oficcinale Roscoe. IC A. (jengibre) sobre el ión férrico. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional de Trujillo. 2017. UI M. 14. Romero A, et al. Propiedades antioxidantes de compuestos polifenólicos presentes. Q. en extractos hidroalcohólicos de soja fermentada. Universidad Nacional del. BI. O. Nordeste. Argentina. [Internet]. 2003. [Citado 26 Abr 2018]. Disponible en:. Y. http://www.unne.edu.ar/unnevieja/Web/cyt/cyt/2003/comunicaciones/08-. IA. Exactas/E-054.pdf. AC. 15. Alva S, Gutiérrez M, Rengifo R. Efecto del extracto etanólico de hojas de Piper. RM. aduncum en la oxidación de LDL humana y concentración efectiva media para la. [Citado. 22. Abr. FA. estabilización de la especie radicalaria in vitro. Pharmaciencia [Internet]. 2014. 2018];. 2(2):. 88-95.. Disponible. en:. DE. http://revistas.unitru.edu.pe/index.php/farmabioq/article/view/798. CA. 16. Pintado L, Sanchez M. Efecto del extracto etanólico de las hojas de Piper. TE. Acutifolium, procedentes de Coina, distrito de Usquil, en la oxidación de LDL. IO. humana, in vitro. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional de. BI BL. Trujillo. 2016. 17. Tamices. Tabla comparativa. Normas Tamices ISO/ASTM. [Internet]. 2015. [Citado 5. Jun. 2018].. Disponible. en:. http://www.tamices.es/wpcontent/uploads/2015/07/Tabla_comparativa_normas.pdf 18. Celis A. Bioestadística. México: Manual Moderno. pp: 169-170. 2004 19. Temas de Farmacognosia. Métodos de extracción. [Internet]. 2012. [Citado 15 Jul 2018].. Disponible. en:. https://www.plantas-medicinal-. farmacognosia.com/temas/m%C3%A9todos-de-extracci%C3%B3n/ 20. Rojas M, Rumay A. Determinación de la actividad antioxidante in vitro del extracto hidroalcohólico de hojas de Piper aduncum procedentes de la Provincia de San. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Marcos – Departamento de Cajamarca. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional de Trujillo. 2010 21. Neira C, Pereda E. Efecto del extracto etanólico de las hojas de Piper acutifolium en el crecimiento de Streptococcus pyogenes, ATCC 19615, in vitro. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional de Trujillo. 2017 22. Bruneton J. Farmacognosia. España: Acribia. p: 242. 2001 23. Ley de Fick. Diccionario Médico. [Internet]. 2015. [Citado 19 Jul 2018]. Disponible en: https://www.cun.es/diccionario-medico/terminos/ley-fick. [Internet].. 2016.. [Citado. 20. Jul. 2018];. 544:. IC A. 24. Puerto R. Valera C. Fitoterapia y Farmacia Galénica (1ª Parte). Rev. Acofar. 52-53.. Disponible. en:. UI M. http://www.revistaacofar.com/revista/images/stories/revistas/2016.%20Revista-. Q. 544-Sept-Oct.pdf. 2016.. [Citado. 20. Jul. 2018];. 545:. 52-56.. Disponible. en:. Y. [Internet].. BI. O. 25. Puerto R. Valera C. Fitoterapia y Farmacia Galénica (2ª Parte). Rev. Acofar.. IA. http://www.revistaacofar.com/revista/images/stories/revistas/2016.%20Revista-. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. 545-Nov-Diciembre.pdf. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(26) AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. ANEXOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 1: Identificación taxonómica de Piper aduncum (matico). BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Nº del material botánico. Ejemplar de la hoja de Piper aduncum. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 2: Cálculos de los extractos secos en el extracto etanólico de hojas de Piper aduncum. Se determinó la concentración del extracto etanólico en función a mg de extracto seco/mL de extracto que se obtuvieron a partir de cada tipo de extracción:. IC A. 1. Método de extracción reflujo 0,0491 g. 1 mL de extracto etanólico. X = 0,00491 g. BI. O. Q. UI M. 10 mL de extracto etanólico. FA. 2. Método de extracción soxhlet. RM. AC. IA. Y. Concentración del extracto etanólico mg/mL = 4,91 mg/mL. 0,0620 g. CA. DE. 10 mL de extracto etanólico. X = 0,00620 g. IO. TE. 1 mL de extracto etanólico. BI BL. Concentración del extracto etanólico mg/mL = 6,20 mg/mL. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 3: Cálculos para la preparación del patrón (Ácido gálico). Para la preparación del patrón se tomó como referencia la Muestra 5 (de mayor concentración):. Concentración del extracto etanólico obtenido por soxhlet: 6,20 mg/mL. BI. O. Q. UI M. IC A. Concentración de la Muestra 5:. IA. Y. Preparación de la solución patrón:. AC. Se pesó 3,1 mg de Ácido gálico y se transfirió a una fiola de 25 mL, posteriormente se. DE. FA. RM. diluyó y aforó con agua destilada.. BI BL. IO. TE. CA. Concentración de la solución patrón:. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 4: Cálculos del porcentaje de reducción del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum sobre el ión férrico. Tabla 1. Absorbancias de la reducción del ión férrico por el extracto etanólico de hojas de Piper aduncum obtenido por el método de reflujo. ABSORBANCIAS. MEDIA. DESVIACIÓN. M2. M3. ARITMÉTICA. ESTÁNDAR. 1. 0,394. 0,397. 0,392. 0,394. 0,003. 2. 0,435. 0,438. 0,439. 0,437. 0,002. 3. 0,470. 0,473. 0,476. 0,473. 0,003. 4. 0,516. 0,512. 0,515. 0,514. 0,002. 5. 0,552. 0,555. 0,556. 0,554. 0,002. IA. Y. BI. O. Q. IC A. M1. UI M. MUESTRAS. AC. Tabla 2. Absorbancias de la reducción del ión férrico por el extracto etanólico de. RM. hojas de Piper aduncum obtenido por el método de soxhlet. MUESTRAS. ABSORBANCIAS. MEDIA. DESVIACIÓN. M2. M3. ARITMÉTICA. ESTÁNDAR. 1. 0,450. 0,452. 0,455. 0,452. 0,003. 2. 0,494. 0,495. 0,493. 0,494. 0,001. 3. 0,529. 0,532. 0,535. 0,532. 0,003. 4. 0,571. 0,574. 0,572. 0,572. 0,002. 0,615. 0,618. 0,614. 0,616. 0,002. DE. CA. TE. IO BI BL. 5. FA. M1. Tabla 3. Absorbancias de la reducción del ión férrico por la solución patrón. PATRÓN. Ácido gálico. ABSORBANCIAS. MEDIA. DESVIACIÓN. M1. M2. M3. ARITMÉTICA. ESTÁNDAR. 0,673. 0,671. 0,676. 0,673. 0,003. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El porcentaje de reducción se determinó con la siguiente ecuación:. Donde: = Porcentaje de Reducción. Am. = Absorbancia de la muestra. Ap. = Absorbancia del patrón. UI M. IC A. %R. 1. Porcentaje de reducción del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum. Y. BI. O. Q. obtenido por el método de reflujo sobre el ión férrico:. FA. RM. AC. IA. a. Muestra 1:. BI BL. IO. c. Muestra 3:. TE. CA. DE. b. Muestra 2:. d. Muestra 4:. e. Muestra 5:. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2. Porcentaje de reducción del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum obtenido por el método de soxhlet sobre el ión férrico:. a. Muestra 1:. UI M. IC A. b. Muestra 2:. IA. Y. BI. O. Q. c. Muestra 3:. FA. RM. AC. d. Muestra 4:. BI BL. IO. TE. CA. DE. e. Muestra 5:. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 5. Evaluación de la acción reductora del extracto etanólico de hojas de. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. % DE REDUCCIÓN DEL IÓN FÉRRICO. Piper aduncum sobre el ión férrico. AC. Gráfico 2. Porcentaje de reducción del ión férrico del extracto etanólico de. DE CA TE IO BI BL. % DE REDUCCIÓN DEL IÓN FÉRRICO. FA. RM. hojas de Piper aduncum obtenido por el método de reflujo.. 1. 2. Gráfico 3. Porcentaje de reducción del ión férrico del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum obtenido por el método de soxhlet.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 6. Análisis estadístico para la reducción del ión férrico utilizando ANOVA. Cuenta. Suma. Promedio. Varianza. R1. 3. 1.183. 0.39433333. 6.3333E-06. R2. 3. 1.312. 0.43733333. 4.3333E-06. R3. 3. 1.419. 0.473. 9E-06. R4. 3. 1.543. 0.51433333. 4.3333E-06. R5. 3. 1.663. 0.55433333. 4.3333E-06. S1. 3. 1.357. 0.45233333. 6.3333E-06. S2. 3. 1.482. S3. 3. 1.596. S4. 3. S5. 3. 0.000001. 0.532. 9E-06. 1.717. 0.57233333. 2.3333E-06. 0.61566667. 4.3333E-06. IA. Y. BI. 0.494. AC. O. Q. IC A. Grupos. UI M. Análisis de varianza de un factor. DE. FA. RM. 1.847. IO. Suma de cuadrados. BI BL. Origen de las variaciones Entre grupos Dentro de los grupos. TE. CA. Análisis de varianza. Total. Grados de libertad. Promedio de los cuadrados. F. Probabilidad. Valor crítico para F. 0.1222943. 9. 0.01358826 2647.06277 9.40782E-29 2.392814108. 0.000102667. 20. 5.1333E-06. 0.122396967. 29. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1. Entre grupos H0 = No existe diferencia significativa. Ha = Existe diferencia significativa entre la acción reductora del extracto etanólico de las hojas de Piper aduncum obtenido por reflujo y el obtenido por soxhlet sobre el ión férrico. Criterio Pexp. < Ptab. 9,40782E-29 < 0,05. IC A. Decisión: Rechazar H0. UI M. Entre grupos: Existe diferencia significativa entre la acción reductora del extracto etanólico de las hojas de Piper aduncum obtenido por reflujo y el obtenido por soxhlet. AC. IA. Y. BI. O. Q. sobre el ión férrico.. RM. 2. Dentro de los grupos. FA. H0 = No existe diferencia significativa.. Ha = Existe diferencia significativa entre la acción reductora de las muestras. DE. preparadas a partir del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum obtenido por. CA. reflujo así como para el obtenido por soxhlet sobre el ión férrico.. IO. Eexp. > Ftab.. TE. Criterio. BI BL. 2647,06277 > 2,392814108 Decisión: Rechazar H0 Dentro de los grupos: Existe diferencia significativa entre la acción reductora de las muestras preparadas a partir del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum obtenido por reflujo así como para el obtenido por soxhlet sobre el ión férrico.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 7. Esquema del trabajo realizado. O. Q. UI M. IC A. 1. Recolección de la muestra. IA. Y. BI. Hojas de Piper aduncum. RM. AC. 2. Preparación de la muestra. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. 2.1. Secado. Secado de las hojas de Piper aduncum a temperatura ambiente por 72 horas. Secado de las hojas de Piper aduncum a 40 °C hasta peso constante. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UI M. IC A. 2.2. Pulverizado. AC. IA. Y. BI. O. Q. Las hojas secas se pulverizaron en un mortero hasta obtener partículas de tamaño uniforme. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. 2.3. Tamizado. El polvo obtenido se tamizó empleando el tamiz número 0,75. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. O. Q. UI M. IC A. 3. Obtención del extracto etanólico por el método de soxhlet. RM. AC. IA. Y. De 10 g de polvo de hojas de Piper aduncum se extrajeron los principios activos con 250 mL de alcohol etílico durante 3 horas, posteriormente el producto obtenido se filtró y aforó en una fiola de 250 mL con el mismo solvente para obtener el extracto etanólico. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. 4. Obtención del extracto etanólico por el método de reflujo. 10 g de polvo de hojas de Piper aduncum se reflujaron con 250 mL de alcohol etílico durante 3 horas, posteriormente el producto obtenido se filtró y aforó en una fiola de 250 mL con el mismo solvente para obtener el extracto etanólico. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. O. Q. UI M. IC A. 5. Preparación de las muestras a partir de los extractos etanólicos. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. Muestras 1, 2, 3, 4 y 5 preparadas a partir del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum obtenido por el método de reflujo. Muestras 1, 2, 3, 4 y 5 preparadas a partir del extracto etanólico de hojas de Piper aduncum obtenido por el método de soxhlet. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 6. Acción reductora de los extractos etanólicos sobre el ión férrico. Se incubó en baño maría a 50 °C por un período de 20 minutos. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Se mezcló 1 mL de cada muestra de trabajo con con 5 mL de buffer fosfato, a pH 6,6 y con 5 mL de Ferricianuro de potasio al 1%. Se centrifugó cada mezcla a 4000 r.p.m. por 15 minutos. BI BL. IO. TE. CA. A la mezcla reaccionante se le adicionó 5 mL de Ácido tricloroacético al 10%. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A 5 mL de cada sobrenadante se le adicionó 5 mL de agua destilada y 1 mL de Cloruro férrico al 1%. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Las absorbancias se midieron a 700 nm. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.
(42)
Documento similar
