Efecto antibacteriano del extracto alcohólico de Uncaria tomentosa en el crecimiento de Listeria monocytogenes y Listeria ivanovii

Texto completo

(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Ó CI. CA. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. N. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. UN I. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÌA Y. IN. FO. RM. ÁT IC. A. Y. CO. M. PARASITOLOGÍA. DE. Efecto antibacteriano del extracto alcohólico de Uncaria. Listeria ivanovii.. SI S. TE. M. AS. tomentosa en el crecimiento de Listeria monocytogenes y. DE. TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE. CC. IO. N. BIÓLOGO - MICROBIÓLOGO. Br. CYNTHIA ELIZABETH TUCTO RODRIGUEZ. DI. RE. AUTOR:. ASESOR:. Dr. PEDRO MERCADO MARTÍNEZ. TRUJILLO – PERÚ 2014. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE. UN I. CA. CI. Ó. N. TRUJILLO. CO. M. Dr. Orlando Velásquez Benites. AS. DE. IN. FO. RM. ÁT IC. A. Y. RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. TE. M. Dra. Vilma Julia Méndez Gil. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI S. VICERECTORA ACADÉMICA. Dr. Pedro Lavalle Dios. SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS. UN I. CA. CI. Ó. N. BIOLÓGICAS. CO. M. Dr. José Mostacero León. DE. IN. FO. RM. ÁT IC. A. Y. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. AS. Dr. César Jara Campos. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI S. TE. M. SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Dr. Bertha Soriano Bonilla. DIRECTORA DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA.. iii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. Ó. N. Señores Miembros del Jurado:. CI. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados. UN I. CA. y Títulos de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y Parasitología. M. de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo,. Y. CO. pongo a vuestra consideración y criterio el presente trabajo de tesis titulado:. ÁT IC. A. “Efecto antibacteriano del extracto alcohólico de Uncaria tomentosa en el. RM. crecimiento de listeria monocytogenes y listeria ivanovii.”, con el cual pretendo. AS. DE. IN. FO. obtener el Título Profesional de Biólogo Microbiólogo.. CC. IO. N. DE. SI S. TE. M. Trujillo, Marzo del 2014. RE. ___________________________. DI. Br. Cynthia Elizabeth Tucto Rodríguez. iv. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MIEMBROS DEL JURADO. Ó. N. Los suscritos, miembros del jurado, declaran que la presente tesis ha sido ejecutada en. CI. concordancia con las normas de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y. Y. CO. M. UN I. CA. Parasitología de la Universidad Nacional de Trujillo.. ÁT IC. A. _________________________________. AS. DE. IN. FO. RM. Ms. C. Pedro Alvarado Salinas PRESIDENTE. Dr. Pedro Mercado Martínez SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI S. TE. M. _________________________________. _________________________________ Ms. C. Nelly Vásquez Valles VOCAL v. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. N. Los profesores que suscriben, miembros del Jurado Examinador, declaran que el. CI. Ó. presente Informe de Tesis titulado: “Efecto antibacteriano del extracto alcohólico de. UN I. CA. Uncaria tomentosa en el crecimiento de listeria monocytogenes y listeria ivanovii.”, ha. M. cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo APROBADO por. RM. ÁT IC. A. Y. CO. UNANIMIDAD.. FO. _________________________________. TE. M. AS. DE. IN. Ms. C. Pedro Alvarado Salinas PRESIDENTE. Dr. Pedro Mercado Martínez SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI S. _________________________________. _________________________________ Ms. C. Nelly Vásquez Valles VOCAL vi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR. Ó. N. El que suscribe, profesor asesor de la tesis titulada: “Efecto antibacteriano del. CI. extracto alcohólico de Uncaria tomentosa en el crecimiento de listeria monocytogenes. M. UN I. CA. y listeria ivanovii.”. CO. CERTIFICA:. Y. Que ha sido desarrollada, de acuerdo al reglamento establecido por la Facultad. ÁT IC. A. de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, estando en conformidad. RM. con su correspondiente proyecto, y que el informe ha sido redactado acogiendo las. IN. FO. observaciones y sugerencias alcanzadas.. DE. Por lo tanto, autorizo a Cynthia Elizabeth Tucto Rodríguez, continuar con el. TE. M. AS. trámite del reglamento correspondiente.. CC. IO. N. DE. SI S. Trujillo, Marzo del 2014. RE. _________________________________. DI. Dr. Pedro Mercado Martínez ASESOR. vii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. CI. Ó. N. A Dios, por enseñarnos a. CA. Creer en la sincera amistad. mis. padres. ejemplos. de. RM. A. ÁT IC. A. Y. CO. M. UN I. y cuidar de nuestras vidas.. FO. abnegación y sacrificio; por su. M. AS. DE. IN. constante y desinteresado apoyo.. SI S. TE. A nuestros profesores, por su. DE. constante empeño en darnos lo. N. mejor de ellos como maestros y. DI. RE. CC. IO. amigos.. viii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTO. Mi sincero y profundo agradecimiento al:. Ó. N. Dr. Pedro Mercado Martínez, Profesor del Departamento de Microbiología y. CA. CI. Parasitología de la Facultad de Ciencias Biológicas, por su amable disposición en la. UN I. asesoría de la presente tesis y por permitirme participar del grupo de trabajo del. A. Y. CO. M. Laboratorio de Fisiología y Genética Microbiana.. ÁT IC. Personal de la Sección Técnica del Departamento Académico de Microbiología y. RM. Parasitología por facilitarme los equipos para culminar la parte experimental en la. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI S. TE. M. AS. DE. IN. FO. ejecución de la presente tesis.. ix. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. En el presente trabajo se determinó cuál de las concentraciones del extracto etanólico de. Ó. N. Uncaria tomentosa presenta mayor actividad antibacteriana en el crecimiento tanto para. CI. Listeria monocytogenes como para Listeria ivanovii, para esto se emplearon cultivos. UN I. CA. de Listeria monocytognes, de Listeria ivanovii y corteza de Uncaria tomentosa. Para la. M. preparación del extracto alcohólico, corteza se cortó en pequeños fragmentos, se secó al. CO. ambiente durante 3 días, se volvió a pesar y luego se pulverizó; seguidamente en un litro. Y. de alcohol 96% se dejó macerar por 10 días en un frasco color ámbar, se realizó. ÁT IC. A. filtraciones y el extracto fue recolectado y conservado a 4ºC. A partir del extracto al. RM. 100% se prepararon concentraciones del extracto hasta 0.5%, 1%, 2%, 5% y 10%; las. FO. muestras fueron protegidas de la luz.. IN. En cuanto a la preparación de los inóculos bacterianos; los cultivos de Listeria. DE. monocytogenes y Listeria ivannovii,, fueron reactivados en Caldo Frasier por 18 horas a. AS. 37 °C. Se tomaron una pequeña cantidad de colonias estandarizadas al tubo N° 0.5 del. TE. M. Nefelómetro de Mac Farland (1.5x108 ufc/mL). La actividad antibacteriana del extracto. DE. por triplicado.. SI S. alcohólico U. tomentosa se determinó utilizando técnica de difusión en Agar en placas,. IO. N. Las placas contenían agar Mueller-Hinton temperado a 45°C inoculado con una. CC. suspensión de cultivo bacteriano joven. A cada placa se le realizó 4 orificios de 4mm de. RE. diámetro cada uno utilizando un sacabocado estéril. A estos orificios se añadió 10 uL de. DI. cada una de las concentraciones de extracto alcohólico y las placas se incubó a 37°C durante 24 horas.. x. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. La actividad antibacteriana del extracto acuoso se determinó midiendo el halo de inhibición alrededor de cada orificio. Se considera inhibitorio un valor de 2 mm. También se realizó tres placas control con discos de antibióticos. El procesamiento y. Ó. N. análisis de los resultados obtenidos para la actividad antibacteriana del extracto. CI. alcohólico de uncaria tomentosa que presenta para Listeria monocytogenes y Listeria. UN I. CA. ivannovii se efectuó mediante el programa SPSS versión 18.0. Se realizó ANAVA. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI S. TE. M. AS. DE. IN. FO. RM. ÁT IC. A. Y. CO. M. unifactorial, a los datos obtenidos para determinar si hay diferencias significativas.. xi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT The present work is determined which of the concentrations of ethanol extract of Uncaria tomentosa has greater antibacterial activity in Listeria monocytogenes growth. Ó. N. both as Listeria ivanovii, Listeria cultures for this monocytognes, Listeria ivanovii and. CA. CI. Uncaria tomentosa bark were used. For the preparation of alcoholic extract, bark was. UN I. cut into small pieces, dried at ambient for 3 days, reweighed and then pulverized, then. M. in one liter of 96% alcohol was allowed to macerate for 10 days in a jar amber ,. CO. filtration was performed and the extract was collected and stored at 4 ° C. From the. A. Y. extract at 100% concentrations of the extract were prepared as 0.5%, 1%, 2%, 5% and. ÁT IC. 10%, the samples were protected from light.. RM. As for the preparation of bacterial inoculant, crops Listeria monocytogene and Listeria. IN. FO. ivanovii were reactivated Frasier Broth for 18 hours at 37 ° C. A small amount of. DE. colonies standardized tube of No. 0.5 McFarland nephelometer (1.5x108 cfu / mL). AS. were taken. The antibacterial activity of U. tomentosa alcoholic extract was determined. TE. M. using agar diffusion method on plates in triplicate.. SI S. The plates containing Mueller-Hinton agar tempered to 45 ° C inoculated with a. DE. suspension of young bacterial culture. Each plate was performed 4 holes 4 mm in. IO. N. diameter each using a sterile punch. These holes are added 10 uL of each of the. CC. concentrations of the aqueous extract and the plates were incubated at 37 ° C for 24. DI. RE. hours.. The antibacterial activity of the water extract was determined by measuring the inhibition zone around each hole. Inhibitory considered a value of 2 mm. Three control plates antibiotic discs were also performed. The processing and analysis of the results xii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. obtained for the antibacterial activity of alcoholic extract of Uncaria tomentosa posing for Listeria monocytogenes and Listeria ivannovii was performed using SPSS version 18.0 program. Univariate ANOVA was performed on the data obtained to determine if. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI S. TE. M. AS. DE. IN. FO. RM. ÁT IC. A. Y. CO. M. UN I. CA. CI. Ó. N. there are significant differences.. xiii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONTENIDO. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO……............. ii. N. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS……………...iii. CI. Ó. PRESENTACIÓN…………………………………………………..………..……...….iv. UN I. CA. MIEMBROS DEL JURADO………………………………..………..……...….............v APROBACIÓN……………………………………………………………..………..…vi. CO. M. DEL ASESOR…………………………………………………………………….........vii. Y. DEDICATORIA………………………………………………………………..….......viii. ÁT IC. A. AGRADECIMIENTO…...………………………………………………………….......ix. RM. RESÚMEN…...……………………………………………………………...………......x. FO. ABSTRACT…...………………………………………………………………………xii. IN. CONTENIDO…...………………………………………………………………........xiv. DE. INTRODUCCIÓN…………………………………………………………………...…..1. AS. MATERIAL Y MÉTODO…………………………………………………………...…10. TE. M. RESULTADOS…………………………………………………………………..…….15. SI S. DISCUSIÓN……………………………………………………….……………...……19. DE. CONCLUSIONES………………………………………………………………...……24. N. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS…………………………………………………25. CC. IO. ANEXOS………………………………………………………………………..……...29. RE. ANEXO 01. Variación de la sensibilidad en el crecimiento de Listeria moncytogenes. DI. frente a diferentes concentraciones del extracto de Uncaria tomentosa, expresando en halos de inhibición……………………………………………….…………………..30. xiv. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 02. Variación de la sensibilidad de cultivos de Listeria moncytogenes frente a diferentes concentraciones del extracto de Uncaria tomentosa, expresando en halos de inhibición……………………………………………………………………………..31. CI. Ó. N. ANEXO 03. Variación de la sensibilidad en el crecimiento de Listeria ivanovii frente a. CA. diferentes concentraciones del extracto de Uncaria tomentosa, expresando en halos de. UN I. inhibición……………………………………………………………..………………32. diferentes concentraciones. del extracto de Uncaria tomentosa,. Y. ivanovii frente a. CO. M. ANEXO 04 Variación de la sensibilidad en el crecimiento sub cultivos de Listeria. ÁT IC. A. expresando en halos de inhibición………………………………..…………………..33. RM. ANEXO 05. Figura 01………………………………..……………………...…………34. FO. ANEXO 06. Figura 02………………………………..…………….…………...……..35. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI S. TE. M. AS. DE. IN. ANEXO 07. Fotografía de la técnica de Difusión en Agar…………………………...36. xv. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. I.. INTRODUCCIÓN. En la antigüedad se han usado sustancias naturales extraídas de las plantas, como. AC IÓ. N. los extractos vegetales, para combatir enfermedades y preservar alimentos. Hoy en día, estas sustancias han perdido su uso debido a la aparición de sustancias. IC. químicas, las cuales estas sustancias, que tienen la ventaja de que no representan. CO. M UN. peligro para la vida y salud del hombre. 1. Y. Entre los productos naturales se encuentran los aceites esenciales (compuestos. IC. A. aromáticos y extracto vegetales producidos por varios géneros de plantas que. RM ÁT. poseen actividad biológica) y/o extractos de vegetales con actividad antifúngica. IN FO. y antibacteriano (contienen compuestos que son sintetizador por las plantas como mecanismo de defensa contra algunos microorganismos) 2,3. Las plantas. DE. poseen un enorme y desconocido reservorio de sustancias derivado de sus. AS. actividades metabólicas enfocado a sus sistemas de defensa en contra de. EM. microorganismos, insectos y herbívoros. Aunque se han identificado algunas. SI. ST. sustancias simples como fenoles, derivados de los fenoles (quinonas, flavonas,. DE. flavonoides, flavonoles, taninos y cumarinas, terpenoides, aceites esenciales,. N. alcaloides, pectinas y polipéptidos, los extractos de plantas completas. DI. RE CC IO. permanecen en uso.4. Los extractos vegetales son líquidos aceitosos obtenidos a partir de diferentes partes de las plantas como flores, yemas, semillas, hojas, ramas, corteza, hierbas, madera, frutos y raíces. Son mezclas complejas de ésteres, aldehídos, cetonas y terpenos. Además son compuestos olorosos, muy solubles en alcohol y poco. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. solubles en agua. Para la extracción de estos compuestos se pueden utilizar distintos solventes (acetato, etanol, y cloruro de etileno). Los aceites esenciales y extractos son derivados de plantas son conocidos por su actividad. AC IÓ. N. antimicrobiana contra un amplio rango de bacterias y hongos. 5. IC. La planta Uncaria tomentosa es una liana espinosa muy popular por sus. M UN. propiedades curativas, ya que posee actividades antibacterianas, antivirales,. CO. anticancerígenas, antioxidantes, antiinflamatorias e inmuno estimulantes.. Y. Actualmente se recomienda para múltiples usos terapéuticos, como por ejemplo,. IC. A. tratamiento de abscesos, alergias, artritis, asma, cáncer, efectos secundarios de la. RM ÁT. quimioterapia, prevención de enfermedades, fiebre, úlcera gástrica, hemorragias,. IN FO. inflamación, irregularidades menstruales, reumatismo, afecciones dérmicas,. DE. inflamación del tracto urinario, infecciones víricas y heridas. 6,7,8. AS. La infusión, la decocción y el extracto de la corteza Uncaria tomentosa han sido. EM. empleados para el tratamiento de enfermedades inflamatorias, artritis,. SI. ST. reumatismo, abscesos, fiebre, asma, alergias, infecciones virales, ulceras. N. DE. gástricas, lupus, disenterías. 9. RE CC IO. En la corteza de Uncaria tomentosa se encuentran alcaloides oxindolicos. DI. (rincofilina. e. isorincofilina),. pentaciclicos. (pteropodina,isopteropodina,. especiofilina yunarinaE) flavonoides, saponinas, naftoquinonas, antraquinonas, taninos, lactonas terpenicas y saponinas. En la decocción de la corteza se. 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. encuentran los compuestos fenólicos proantocianidina, catequina, epicatequina, ácido cafeico, ácido siringo, derivados del p-cumarico.9 En la actualidad, el mundo ha optado por el consumo de agentes antimicrobianos. AC IÓ. N. de origen natural (derivados de vegetales), debido a que se ha asociado el consumo excesivo de conservadores químicos con intoxicaciones, y al uso. IC. irracional de antibacterianos que ha traído como consecuencia la resistencia de. CO. M UN. microorganismos a diversos antibióticos. 10. Y. La mayoría de enfermedades transmitidas por alimentos (ETA), son de origen. IC. A. bacteriano, siendo uno de los problemas con mayor impacto en el mundo, debido. RM ÁT. a que estas enfermedades se adquieren por el consumo de alimentos y/o agua. IN FO. contaminados, representan un gran riesgo para la población en general. 11,12. DE. Estos microorganismos con sus amplios patrones de resistencia, que incluyen. EM. AS. agentes antibacterianos de diversos grupos, han estimulado la búsqueda de. ST. tratamiento alternativo constituyendo una extensa línea de investigación en los. DE. SI. últimos años.13. RE CC IO. N. En estudios realizados con alimentos, se ha demostrado que existe un gran riesgo de contraer la enfermedad cuando se ingieren alimentos listos para consumir y. DI. aquellos conservados por un periodo largo de tiempo bajo refrigeración. Hasta el día de hoy, se han realizado una gran cantidad de estudios de sobrevivencia de L.. monocytogenes. sobre distintos alimentos, sobre todo de aquellos que se. 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. conservan a temperatura de refrigeración. Por ello se ha evaluado su supervivencia en carnes y productos lácteos. 14,15. AC IÓ. N. No obstante, actualmente la exportación de ciertos productos alimenticios, obliga a que estos se mantengan refrigerados o congelados hasta llegar a su. IC. destino; dentro de estos alimentos se encuentran algunas frutas como el mango,. M UN. pepino, palta, sandía, melón y actualmente la exportación de mango genera un. Y. CO. gran interés. 16, 17. IC. A. El género Listeria se encuentra ampliamente distribuida en la naturaleza, puede. RM ÁT. encontrarse en el suelo, vegetales y formando parte de la flora fecal de muchos. IN FO. mamíferos; siendo capaz de sobrevivir a diversas condiciones ambientales. Asimismo, se ha aislado de vegetales crudos, leche, carne de pescado, pavo ya. DE. sean frescas o procesadas8. Dentro de este género existen 7 especies donde las. AS. especies L. ivanovii y L. monocytogenes se consideran patógenas; sin embargo,. EM. la primera se encuentra asociada a infecciones en animales, mientras que la. DE. SI. ST. segunda se relaciona tanto con infección en animales como en humanos. 18. N. Este microorganismo supone un problema grave para las empresas alimentarias. RE CC IO. debido a la dificultad que presenta su control en las plantas de procesado. Por. DI. todo ello, desde el punto de vista de la higiene y la salud alimentaria y pública, L. monocytogenes es un organismo prioritario en los planes de análisis de. peligros y puntos de control críticos (APPCC) llevados a cabo en las industrias alimentarias, así como en los planes de prevención de enfermedades de las 4. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. instituciones sanitarias. En algunos países como Estados Unidos, las medidas adoptadas por la industria alimentaria en los últimos años han hecho disminuir la. AC IÓ. N. incidencia de la listeriosis humana.19. La listeriosis causada por L. monocytogenes, es una enfermedad de interés en. IC. salud pública ya que provoca meningitis, septicemia, abortos, infecciones. M UN. gastrointestinales en los pacientes contagiados; además del desarrollo de. CO. secuelas, como retardo psicomotor en las personas infectadas. La patogenicidad para adherirse, invadir y. Y. de L. monocytogenes se debe a la capacidad. IC. A. multiplicarse dentro de una gran variedad de células no fagocíticas (enterocitos,. RM ÁT. hepatocitos, fibroblastos, células endoteliales y células dendríticas), sumados a. IN FO. otros factores que pueden aumentar la susceptibilidad. El período de incubación. AS. un promedio de 31 días.20. DE. de la infección invasiva es desconocido pero se cree que va de 11 a 70 días con. EM. Se tomaron como referencia plantas con propiedades antimicrobianas con el. SI. ST. objetivo de analizar la actividad antibacteriana de los extractos etanólicos y. DE. hexánicos de Guayaba agria (Psidium friedrichsthalianum) y Ciruela (Spondias. N. purpurea). Tanto la hoja como la corteza, se colectaron, secaron y molieron. Se. RE CC IO. obtuvieron los extractos en etanol o hexano en agitación a temperatura ambiente. DI. por 24 horas. En la determinación de la actividad antimicrobiana mediante el Método de Difusión en Agar sobre Staphylococcus aureus, Salmonella typhimurium y Bacillus cereus, se encontró que los extractos etanólico y hexánico de la corteza de Pfriedrich sthalianum no presentaron actividad 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. antimicrobiana. contra los tres microorganismos probados. No obstante, los. extractos de las hojas de esta especie presentaron actividad antimicrobiana para dos de ellos: S. aureus y B.cereus. Se encontró que los extractos de hoja y. N. corteza de S. purpurea, no presentaron actividad antimicrobiana contra los tres. M UN. IC. AC IÓ. microorganismos.21. CO. Se han obtenido y purificado alrededor de 12 000 compuestos con actividad. Y. antimicrobiana procedentes de organismos vegetales y se estima que constituyen. IC. A. sólo el 10% de los metabolitos secundarios. 22 Probablemente los extractos con. RM ÁT. poder antimicrobiano mejor caracterizados del reino vegetal son los obtenidos de ajos (Allium sativum) y cebollas (Allium cepa). Es común el empleo de partes. IN FO. vegetales con la finalidad de obtener varios efectos terapéuticos y que han sido. DE. respaldados por estudios científicos. Entre las variadas aplicaciones terapéuticas. AS. de los vegetales se incluye la acción antibacteriana. Los hallazgos obtenidos del. EM. estudio de vegetales con potencial terapéutico podrán servir como instrumento. ST. de apoyo médico-social para un mayor grupo poblacional, principalmente el más. DE. SI. carente, estando también la industria farmacéutica más interesada en los. RE CC IO. N. conocimientos de esta área.23. DI. En los últimos años se ha presentado una fuerte demanda comercial de productos elaborados a partir de uña de gato y en más de 30 países se comercializan los derivados de esta planta. No obstante, a nivel mundial el procesamiento de los compuestos medicinales de U. tomentosa es muy limitado, concentrándose en un 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. grupo de industrias situadas en Sudamérica, Estados Unidos y Canadá. En Costa Rica existe poca explotación comercial de esta planta como materia prima para. AC IÓ. N. la producción de pastillas y píldoras elaboradas a partir de este recurso natural. 24. La actividad antimicrobiana de diferentes concentraciones de Uncaria tomentosa. IC. en diferentes cepas de microorganismos aislados de la cavidad oral humana.. M UN. Uncaria tomentosa pulverizada fue probada in vitro para determinar la. CO. concentración mínima inhibitoria (MIC) de acuerdo al método de dilución en. Y. agar Mueller-Hinton, en una serie de placas que contenían Uncaria tomentosa al. IC. A. 0,25%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4% y 5%. La prueba oral fue realizada con cepas. RM ÁT. clínicas de Streptococcus mutans, Staphylococcus spp. Candida albicans, de. IN FO. enterobacterias y Pseudomonas aeruginosa. La prueba de las concentraciones de Uña de gato osciló entre 0,25-5 % en Mueller-Hinton agar. Uncaria tomentosa. DE. al 3 % inhibió el 8% de los aislamientos de enterobacterias, el 52 % de S. mutans. EM. AS. y el 96 % de los Staphylococcus spp.. SI. ST. Las concentraciones de prueba no presentaron efecto inhibitorio sobre P.. DE. aeruginosa y C. albicans. Uncaria tomentosa pulverizada presentó actividad. N. antimicrobiana de las enterobacterias, S. mutans y Staphylococcus spp.. RE CC IO. Aislados.35 En investigaciones realizadas por Uriol en el año1998 se encontró. DI. que la Uncaria tomentosa “uña de gato” tuvo efecto inhibitorio del crecimiento in vitro de cepas de Shigella flexnerii, Staphylococcus aureus y Salmonella. typhi.25. 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Teniendo en cuenta todos los estudios acerca de la gran variedad de plantas medicinales para la cura de sus enfermedades debido a las múltiples ventajas que aporta tanto en el aspecto medicinal como económico, sobre todo si se tiene en. AC IÓ. N. cuenta que la capacidad adquisitiva de la población; es así que esta alternativa de tratamiento constituye la forma más barata y segura; y además que posee la. Perú son dos las especies. Y. El presente trabajo se justifica, ya que en el. CO. M UN. IC. ventaja de presentar poco o ningún efecto secundario 17. IC. A. principales de “uña gato”: la Uncaria tomentosa y la Uncaria guianensis que. RM ÁT. existe un aspecto de extrema importancia en relación al uso etnomédico de las dos especies, El extracto alcohólico de Uncaria tomentosa puede servir como. IN FO. conservante natural sustituyendo los conservantes químicos y utilizándolo como. DE. antimicrobiano en la industria de los alimentos conservados, también se puede. AS. sugerir como desinfectante natural y para uso medicinal en los tratamientos de. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. enfermedades causados por Listeria monocytogenes y Listeria ivanovii.. 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Por todo lo referido anteriormente, en el presente estudio cumplieron los objetivos:. AC IÓ. N. Se determinó cuál de las concentraciones del extracto etanólico de Uncaria tomentosa presenta mayor actividad antibacteriana en el crecimiento tanto para. M UN. IC. Listeria monocytogenes como para Listeria ivanovii.. CO. Se demostró si existe diferencia significativa entre la sensibilidad de Listeria. IC. A. Y. monocytogenes y Listeria ivanovii.. RM ÁT. Se demostró si existe diferencia significativa entre la sensibilidad de Listeria. IN FO. monocytogenes y Listeria ivanovii frente al extracto alcohólico de “uña de gato”. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. DE. (Uncaria tomentosa).. 9. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II.. MATERIAL Y MÉTODO. 2.1. Material Biológico 6 cultivos de Listeria monocytogenes, proporcionados por el. AC IÓ. N. -. Laboratorio de Fisiología y Genética Bacteriana. (001FGB-TS;. IC. 002FGB-TS; 003FGB-TS; 004FGB-TS; 005FGB-TS; 006FGB-. M UN. TS).. CO. - 6 cultivos de Listeria ivanovii, proporcionados por el Laboratorio. Y. de Fisiología y Genética Bacteriana. (001FGB-TS; 002FGB-TS;. RM ÁT. Corteza de Uncaria tomentosa.. IN FO. -. IC. A. 003FGB-TS; 004FGB-TS; 005FGB-TS; 006FGB-TS).. 2.2. Metodología. Obtención de la muestra. ST. EM. AS. 2.2.1.1.. DE. 2.2.1. Obtención del extracto alcohólico de Uncaria tomentosa. Obtención del extracto alcohólico. DI. RE CC IO. N. DE. SI. 2.2.1.2.. Se adquirió la corteza de Uncaria tomentosa. A. Preparación del pulverizado vegetal 1.. La. corteza. se. cortó. en. pequeños. fragmentos. 2.. Luego se secó al medio ambiente x 3 días.. 3.. Se volvió a pesar y luego se procedió a pulverizar, haciendo uso de un molinillo manual de acero inoxidable. 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. B. Preparación de Extracto alcohólico. Para la preparación del extracto alcohólico a diferentes concentraciones se procedió de. AC IÓ. . N. acuerdo al siguiente protocolo. Para 0,5% se peso 0,5g de muestra en. IC. 99,5ml de etanol 96%, se dejó macerar por. Para 1% se peso 1g de muestra en 99ml de. CO. . M UN. 15 días en un frasco color ámbar.. A. Y. etanol 96%, se dejó macerar por 15 días en. RM ÁT. . IC. un frasco color ámbar. Para 2% se peso 2g de muestra en 98ml de. IN FO. etanol 96%, se dejó macerar por 15 días en un frasco color ámbar. Para 5% se peso 5g de muestra en 95ml de etanol 96%, se dejó macerar por 15 días en un frasco color ámbar. . SI. ST. EM. AS. DE. . Para 10% se peso 10g de muestra en 90ml. DE. de etanol 96%, se dejó macerar por 15 días. DI. RE CC IO. N. en un frasco color ámbar . Luego se procedió a realizar filtraciones de la. muestra,. utilizando. papel. filtro. WHATMAN N° 5.. 11. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. C. Recolección de la muestra El extracto fue recolectado en frascos ámbar de. M UN. IC. inestables fotoquímicamente.. AC IÓ. N. 200 ml de capacidad, debido a que son. CO. D. Almacenamiento. A. Y. El extracto alcohólico se embazo en frascos. RM ÁT. IC. color ámbar y conservado en refrigeración a 4. IN FO. ºC para los análisis posteriores.. DE. 2.2.2. Preparación de los inóculos bacterianos. EM. AS. 2.2.2.1. Obtención de los Cultivos bacterianos. ST. -. Los seis cultivos bacterianos que se utilizó para. SI. comprobar la actividad antibacteriana del extracto. DE. alcoholico son: Listeria monocytogenes y Listeria. RE CC IO. N. ivannovii, los que hicieron un total de 12 cultivos que son proporcionados por el Laboratorio de. DI. Fisiología y Genética Bacteriana de la Universidad Nacional de Trujillo. -. Los doce cultivos bacterianos se reactivaron, cultivándolos en Caldo Frasier por 18 horas a 37 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. °C. 2.2.2.2. Estandarización de los inóculos bacterianos. Se tomó una pequeña cantidad de colonias, para luego. AC IÓ. N. ser suspendidas en Solución salina fisiológica estéril hasta alcanzar la turbidez equivalente al tubo N° 0.5 del. CO. M UN. IC. Nefelómetro de Mac Farland (1.5x108 ufc/mL).. IC. A. Y. 2.2.3. Prueba de Sensibilidad. RM ÁT. La actividad antibacteriana del extracto alcohólico U. tomentosa se determinó utilizando los cultivos bacterianos, siguiendo la. IN FO. técnica de difusión en Agar en placas (12), por triplicado.. DE. Las placas contenían de 22 a 25 ml de agar Mueller-Hinton. AS. temperado a 45°C inoculado con una suspensión de cultivo joven. EM. bacteriano a la concentración de 106 ufc/mL (previamente. SI. ST. estandarizado). A cada placa se le realizó 5 orificios de 4mm de. orificios se le añadió 50 uL de cada una de las concentraciones de. DI. RE CC IO. N. DE. diámetro cada uno utilizando un sacabocado estéril. A estos. extracto alcohólico y las placas se incubó a 37°C durante 24 horas. La actividad antibacteriana del extracto alcohólico se determinó midiendo el halo de inhibición alrededor de cada orificio (la distancia desde el borde del orificio hasta donde termina el halo), 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. el tamaño de esta zona de inhibición indicó si las bacterias objeto de análisis tienen sensibilidad frente a las soluciones del extracto alcohólico. Se considera inhibitorio un valor de 2 mm.. 3,4. AC IÓ. N. También se realizó tres placas control:. sulfametoxazol.. +. trimetropin,. gentamicina. M UN. antibiótico. IC. Para Listeria monocytogenes y listeria ivannovii se utilizó el. CO. ciprofloxacina.. y. RM ÁT. IC. A. Y. 2.2.4. Análisis Estadístico. El procesamiento y análisis de los resultados obtenidos para la. IN FO. actividad antibacteriana del extracto alcohólico de uncaria tomentosa que presenta para Listeria monocytogenes y Listeria. DE. ivannovii. se efectuó mediante el programa SPSS versión 18.0.. AS. Para realizar los análisis se tuvo en cuenta los valores promedio. EM. de inhibición de cada concentración del extracto alcohólico. SI. ST. evaluado; ya que se realizó tres repeticiones por tratamiento. Se. unifactorial, a los datos obtenidos para determinar si hay. DI. RE CC IO. N. DE. realizó el análisis de varianza, específicamente un ANAVA. diferencias significativas en la actividad antibacteriana entre los dos grupos de bacterias así como con los antibióticos utilizados (controles). La significancia se reportará con un nivel de confianza del 95%.. 14. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. III.. RESULTADOS. N. Los resultados del presente trabajo de investigación Efecto antibacteriano del extracto Listeria monocytogenes y. AC IÓ. alcohólico de Uncaria tomentosa en el crecimiento de. M UN. IC. Listeria ivanovii. se presenta a continuación:. En la figura N° 1 se demuestra el promedio de la medición de los halos de inhibición de. CO. los cultivos de la especie de L. monocytogenes tratadas con el extracto de U. tomentosa. A. Y. a concentraciones de 0.5%, 1% y 2% y se observa que poseen el mismo efecto. RM ÁT. IC. bactericida, solo se evidencia diferencia significativa entre las concentraciones de 5% y 10%.. IN FO. En la figura Nº 2 las concentraciones de 0.5 %, 1% y 2% del extracto de U. tomentosa,. DE. el rango de mediciones para la concentración de 0.5%, la medición de los halos fluctúan. AS. entre 0.5 mm y 2.2 mm, en 1% se encuentra entre 1.5 mm y 2.2 mm aproximadamente. EM. y la concentración de 2 % similar a la concentración 0.5% pero con la mediana que. ST. tiende a valores bajos de la medición de halos. No obstante las concentraciones de 5% y. DE. SI. 10% presentan un amplio rango de mediciones y con la mediana, para el caso de la. RE CC IO. del rango.. N. concentración de 10% que tiende a ubicarse entre los valores altos en cuanto al límite. En la figura N°3 no se encontró diferencia significativa entre las especies de Listeria. DI. monocytogenes y Listeria ivanovii, pero las dos especies si presentan diferencia significativa para todas las concentraciones del extracto alcohólico.. 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. Figura Nº 1: Variación del promedio de los halos de inhibición en el crecimiento (mm). AC IÓ. de Listeria monocytogenes frente a diferentes concentraciones del extracto de Uncaria. M UN CO. 12. IC. A. Y. 10. RM ÁT. 8. IN FO. 6 4. DE. 2. % 00 1,. ST. % 50 0,. EM. AS. 0. % 00 2,. % 00 5,. 0% ,0 0 1. m ta n ge. na ici. c xa o fl ro p Ci. a in. lfa Su. Extracto alcoholico de Uncaria tomentosa. DE. SI. Promedios de Halos de sensibilidad (mm)- Listeria monocytogenes. IC. tomentosa.. DI. RE CC IO. N. Presentan diferencia significativa entre grupos (p<0.05).. 16. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. Figura Nº 2: Variación del promedio de los halos de inhibición en el crecimiento (mm). AC IÓ. de Listeria ivanovii frente a diferentes concentraciones del extracto de. IC M UN CO. 12. A. Y. 10. RM ÁT. IC. 8 6. IN FO. 4. 0. % 00 , 2. AS. % 00 , 1. EM. % 50 , 0. DE. 2. % 00 , 5. % 00 , 10. am nt e g. na ici C. c xa lo f ro ip. a in. lfa Su. Extracto alcoholico Uncaria tomentosa. ST. Promedios de Halos de sensibilidad(mm) Listeria ivanovii. Uncaria tomentosa.. DI. RE CC IO. N. DE. SI. Presentan diferencia significativa entre grupos (p<0.05). 17. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Figura Nº 3: Comparación de promedios de los halos de sensibilidad (mm) de Listeria monocytogenes y de Listeria ivanovii a diferentes concentraciones del extracto de. AC IÓ. N. Uncaria tomentosa (p>0,05). M UN CO. 5. Y. 4. RM ÁT. IC. A. 3 2 1 0 1%. 2%. 5%. DE. 0.50%. IN FO. Promedios de halos isensibilidad(mm). IC. 6. L. monocytogen es. 10%. EM. AS. Extracto alcoholico de Uncaria tomentosa. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. No presentan diferencia significativa entre grupos. 18. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IV.. DISCUSIÓN. AC IÓ. N. La extracción de los metabolitos esenciales de vegetales de importancia en salud. pública, han originado un vertiginoso estudio de sus características en cuanto a la. M UN. IC. antibiosis de microorganismos patógenos. En el presente estudio se investigó el efecto antibacteriano del extracto etanólico de Uncaria tomentosa en el crecimiento de frente a distintas concentraciones del. CO. Listeria monocytogenes y Listeria ivanovii,. RM ÁT. IC. A. Y. extracto de la popular “uña de gato”. 10,4,1. IN FO. Uncaria tomentosa para el propósito de la investigación, se define como el peridermo desecado proveniente del bejuco de esta especie vegetal, el cual posee taninos. DE. condensados e hidrosolubles y alcaloides de suma importancia. 2 En base a esta. AS. característica, al ser sometidos a proceso de maceración en etanol para la extracción de. EM. sus principios activos, quienes probablemente posean propiedades similares a las. SI. ST. presentadas por la Ilex paraguariensis St. Hil conocida como “yerba mate” estudiada. DE. por su importancia biológica atribuida principalmente a los compuestos fenólicos,. RE CC IO. N. donde se evaluó la actividad antimicrobiana de extractos metanólicos y etanólicos contra microorganismos patógenos de alimentos y entre ellos al estudio de Listeria monocytogenes y L. ivanovii a través de la CMI Y CMB, donde inhibieron todos los. DI. microorganismos excepto Escherichia coli, concluyendo que el extracto etanólico. mostró el más bajo MIC/MBC comparado con el contenido fenólico ( 193,9 g.GAE / kg) siendo de elevada eficacia. 28 19. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Los componentes de extractos de Uncaria tomentosa se han desarrollado y estandarizado casi en su totalidad para efectos antiinflamatorios e inhibición de Los primeros estudiados y descritos. N. 25,28. AC IÓ. melanomas causantes de neoplasias. 7,. inicialmente en 1967 son los alcaloides de oxindol, en segundo lugar a un conjunto. M UN. IC. de moléculas conocido como carboxi alquil ésteres (CAE) y algunos flavonoides de uso teórico como antimicrobianos identificado y descrito en 1997 como ingredientes. RM ÁT. IC. A. Y. CO. bioactivos para soluciones de experimentación.24. En estos trabajos, se describe la actividad antimicrobiana de las isoteropodina,. IN FO. alcaloide oxindólico mayoritario de U. tomentosa y la actividad antioxidante presente en extractos seriados de la planta y de las cortezas. Para este fin se empleó. DE. la corteza triturada de U. tomentosa que fue macerada en disolventes para así. AS. obtener los extractos hexanico, metanico y etanólico, debido a que no son solubles los cuales se sometieron a purificación aislándose un compuesto. EM. en agua,. SI. ST. identificado como el alcaloide oxindolico pentaciclico comprobándose su actividad. DE. bactericida contra cepas de Klebsiella pneumoniae, Pseudomona aeruginosa,. N. Bacillus subtilis Staphylococcus aureus, Micrococcus flavus, Escherichia coli y. DI. RE CC IO. Salmonella aviatum.10,12. Tomando en referencia la posible eficacia antibacteriana de U. tormentosa, a través del efecto del alcaloide oxindolico pentaciclico (AOP); en la Figura Nº 1 se expresan, mediante el uso de barras con patillas, que en cuanto a la medición de los 20. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. halos de inhibición la concentración de 0.5% presenta variabilidad en cuanto a la dispersión de datos, además que la mediana muestra que las mediciones poseen valores superiores a 2.0 mm de diámetro hasta un máximo de 4.0 mm. Así mismo. AC IÓ. N. las mediciones que corresponden al tratamiento con 1% del extracto donde el rango promedio de las mediciones se encuentran entre 2.0 y 4.0 mm, con variación similar. IC. a la anterior concentración, su mediana se encuentra casi en posición central; sin. M UN. embargo para las demás concentraciones, la variabilidad es menor, con sus. CO. medianas respectivas casi en posición central. La presencia de patillas en cada barra,. Y. tanto de las concentraciones problema, como de los patrones antibióticos, demarca. IC. A. el nivel de datos extremos los cuales exceden tanto en los valores mínimos, como. RM ÁT. máximos; lo que infiere que; el efecto de los principios activos del extracto. DE. IN FO. etanólico de U. tomentosa es variable para los cultivos de Listeria monocytogenes.. AS. En cuanto a la diferencia significativa de cada concentración de U. tomentosa, en el. EM. anexo Nº 1 se demuestra la medición de los halos de inhibición de los cultivos de la. ST. especie de L. monocytogenes tratadas con el extracto de U. tomentosa a. DE. SI. concentraciones de 0.5%, 1% y 2% y se observa que poseen el mismo efecto. N. bactericida, solo se evidencia diferencia significativa entre las concentraciones de. RE CC IO. 5% y 10%, las cuales corroboran estudios que afirman que a mayor concentración. DI. del extracto etanólico, mayor la antibiosis frente a las especies de Listeria. 30.4. Según la figura Nº 2, los halos de inhibición del crecimiento de los cultivos de L. ivanovii son parcialmente variables, teniendo resultados que se alejan del rango 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. establecido por las barras y expresado en la posición de la mediana que en algunos casos tiende a ubicarse en su mayoría con mediciones centrales, y pocas mediciones promedio. Asi tenemos que para el tratamiento con las concentraciones de 0.5 %,. AC IÓ. N. 1% y 2% del extracto de U. tomentosa, el rango de mediciones para la concentración de 0.5%, la medición de los halos fluctúan entre 0.5 mm y 2.2 mm, en 1% se. IC. encuentra entre 1.5 mm y 2.2 mm aproximadamente y la concentración de 2 %. M UN. similar a la concentración 0.5% pero con la mediana que tiende a valores bajos de la. CO. medición de halos. No obstante las concentraciones de 5% y 10% presentan un. Y. amplio rango de mediciones y con la mediana, para el caso de la concentración de. IC. A. 10% que tiende a ubicarse entre los valores altos en cuanto al límite del rango. Asi. RM ÁT. mismo las patillas inciden en el factor de datos extremos para todos las. DE. IN FO. concentraciones.. AS. Además se demuestra la diferencia en cuanto a la sensibilidad de los cultivos de. EM. Listeria denotando que los cultivos 18, 21 y 22 son inhibidos en mayor intensidad. ST. que los cultivos 20, 23 y 24 los cuales poseen la misma sensibilidad al tratamiento. RE CC IO. N. DE. SI. con las distintas concentraciones del extracto etanólico para L monocytogenes.. Así mismo para L. ivanovii, se demuestra que los halos que corresponden a la. DI. concentración de 0.5% y 1% no son significativamente diferentes, es decir que el efecto del tratamiento con estas concentraciones sería muy parecido para los cultivos de esta especie, de diferente forma es el efecto de las concentraciones de 2%, 5% y 10% las cuales si tienen un efecto notorio frente al crecimiento de las 22. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. especies de L. ivanovii. En tal sentido y según el cuadro Nº 4, al comparar la sensibilidad de los cultivos al tratamiento con las distintas concentraciones del extracto se tiene que el único efecto preponderante se encuentran en los cultivos 28. AC IÓ. N. y 29; puesto que el rango de sensibilidad de los cultivos 25, 26, 27 y 30 sus diferencias estadísticas son irrelevantes, es decir que estos cultivos tienen un efecto cultivos. IC. parecido al ser sometidas al extracto para la antibiosis de todos los. Y. CO. M UN. correspondientes a la especie en estudio.. IC. A. Cabe resaltar que la presencia de los antibióticos como gentamicina, ciprofloxacina. RM ÁT. y sulfametoxasol + trimetropim, solo se consideran como patrón bactericida, debido a que científicamente se conoce su capacidad para producir antibiosis para todas las. IN FO. especies del genero Listeria. Asi mismo en la figura Nº 3 se refleja que entre las. DE. especies de Listeria, tanto L. monocytogenes como L. ivanovii no presentan una. AS. marcada diferencia en cuanto a la sensibilidad como especies, es decir que ambas, al. EM. haber sido tratadas con las distintas concentraciones del extracto etanólico son. ST. sensibles a su efecto, de manera diferente la sensibilidad varia para cada cultivo de. DE. SI. cada especie utilizado, por lo que es posible afirmar que U. tomentosa como. N. antibiótico no presenta una eficacia notable para el control de Listeria. RE CC IO. monocytogenes ni para Listeria ivanovii, en comparación a otras especies de. vegetales de actividades mucho más activa, como es el caso de la “yerba mate”,. DI. antes mencionada. 30. 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIONES. AC IÓ. N. V.. Las concentraciones del extracto etanólico de Uncaria tomentosa al 2%, 5% y. M UN. IC. 10% presentan mayor actividad antibacteriana frente al crecimiento tanto para. CO. Listeria monocytogenes como para Listeria ivanovii.. A. Y. Si existe diferencia significativa entre la sensibilidad de Listeria monocytogenes. RM ÁT. IC. y Listeria ivanovii frente al extracto alcohólico de “uña de gato” (Uncaria. IN FO. tomentosa).. No existe diferencia significativa entre la sensibilidad de. Listeria. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. DE. monocytogenes y Listeria ivanovii.. 24. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VI.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. AC IÓ. N. 1. Hersom, A. y Hulland E.; Conservas Alimenticias. Editorial Acribia S.A.. IC. Zaragoza. España. 1974; 61-62.. M UN. 2. Fuertes C.; Roque M.; Tristan M.; Flavonoides y Alcaloides de Lupinus. CO. ballianus con actividad antibacteriana y antifúngica. Instituto de Microbiología. A. Y. UNMS; 1997.. RM ÁT. IC. 3. Thuille N."Bactericidal activity of herbal extracts." INt. J. Hyg. Environ. Health, 2003; 206: 1-5.. IN FO. 4. García R. Microorganismos de los alimentos. Su significado, métodos de. DE. enumeración. Edit. Acribia S.A. 2000; 2da edición. 48.. AS. 5. Ayala J. Los aceites esenciales poseen propiedades antimicrobianas, uno de los. EM. más estudiados es el aceite de ajo, aplicación en productos vegetales (2005). Los. ST. aceites esenciales poseen propiedades antimicrobianas, uno de los más. DE. SI. estudiados es el aceite de ajo, aplicación en productos vegetales.. RE CC IO. N. 6. Keplinger K, Laus G, Wurm M, Dierich M, Teppner H. Uncaria tomentosa (Willd.) DC.--ethnomedicinal use and new pharmacological, toxicological and. DI. botanical results. J Ethnopharmacol. 1999; 64(1):23-34.. 7. Gonçalves C.; Dinis T.; Batista M. Antioxidant properties of proanthocyanidins of Uncaria tomentosa bark decoction: a mechanism for anti-inflammatory activity. Phytochemistry.2005; 66: 89–98. 25. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 8. Akesson C.; Lindgren H., Pero R.; Leanderson T., and Ivars F. An extract of Uncaria tomentosa inhibiting cell division and NF-kappa B activity without inducing cell dedeath. IntImmunopharmacol 2003;3(13-14):1889-1900.. AC IÓ. N. 9. Laus G.; brossner D.; Keplinger K. Alkaloids of Peruvian Uncaria. IC. tomentosa.will. Staphylococcus aureus ex roem 2006.. M UN. 10. Ccahuana R., Solío S. Antimicrobial activity of Uncaria tomentosa against oral. CO. human pathogens. Braz Oral Res. 2007; 21(1):46-50.. A. Y. 11. García R. Microorganismos de los alimentos. Su significado, métodos de. RM ÁT. IC. enumeración. Edit. Acribia S.A. 2000; 2da edición. 48.. 12. Müller, G. Microbiología de los Alimentos Vegetales. Editorial Acribia S.A.. IN FO. Zaragoza. España. 1981. 152-153.. DE. 13. Gil M.: Microbiología y aspectos moleculares de resistencia a la meticilina. Rev. AS. Chil infect.2000;.17(2): 145-152.. ST. EM. 14. Nelson J; Bednarczyk R; Nadle J; Clogher P; Gillespie J; Daniels A; Plantenga. SI. M; and et al FoodNet survey of food use and practices in long-term care. DE. facilities. Pub. Med. 2008; 71(2):365-72.. RE CC IO. N. 15. Cataldo G, Conte M, Chiarini F, Seganti L, Ammendolia M, Superti F. Acid adaptation and survival of Listeria monocytogenes in Italian-style soft cheeses.. DI. PubMed. 2007; 103(1):185-93.. 16. Carmona G. Rol de la temperatura en el almacenamiento de productos frescos. Guia técnica postcosecha. Consejo Nacional de Producción. 2001; 5: 45-50. 26. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 17. Centro de Desarrollo de Agronegocios. Infraestructura para empacadoras y cadenas de frío. Honduras. 2001; pp. 80. 18. Seeliger H; Jones R. y Genus D. Listeria Pirie. Bergey’s Manual of Systematic. AC IÓ. N. Bacteriology. Sncath P H A, Mair N S, SharpeM E, Holt J G. Baltimore,. IC. Williams and Wilkins 1986; 2: 1235-1245.. M UN. 19. López V.;Suárez M.; Chico-Calero I.; Navas J.; Martínez J. Listeria. CO. monocytogenes en alimentos: ¿son todos los aislamientos igual de virulentos?. A. Y. Rev. Argent. Microbiol. 2006; 38(4): 83-91.. Graham J; Lanser S.; Bignardi G.; Pedler SHollyoak V. Hospital. RM ÁT. IC. 20.. Acquired Listeriosis. J. Hosp Infect. 2002; 51: 136-139.. IN FO. 21. Espinoza J.; Centurión D.; López B.; Vera J.; Cázares J.; Actividad. DE. antibacteriana de ciruela Spondiaspuperea y guayaba agria Psidium.. AS. 22. Schultes R.The kingdom of plants. En: Thomson, W.A.E. (Ed.) Medicines from. ST. EM. the Earth. McGraw-Hill Book Co., New York.1978.. SI. 23. De Paula J.; Martínez A. Acción antibacteriana de extractos hidroalcohólicos de. N. DE. Rubus urticaefolius. Rev. Cubana Plant. Med. 2000; 5(1): 26-9.. RE CC IO. 24. Falkiewicz B.; Fukasiak J. Cat’s claw. CaseRep.Clin.Pract. 2001; 2: 305-316.. DI. 25. Uriol Z. Uncaria tomentosa: Determinación de fitoconstituyentes y efecto antibacteriano in Vitro de su extracto acuoso. (Tesis Maestral). Trujillo: Universidad Nacional de Trujillo; 1998. Perú Biol. Lima. 2003. 10 (2): 125-132.. 27. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 26. Martínez M. Aceites Esenciales. Facultad de Química Farmacéutica. Medellín. Universidad de Antioquía. 2001; Pp. 1-12. 27. Marzocca M; Marucci M; Sica A. Detección de Listeria monocytogenes en. AC IÓ. N. distintos productos alimenticios y en muestras ambientales de una amplia cadena. de supermercados de la ciudad de Bahía Blanca (Argentina). Revista Argentina. M UN. IC. de Microbiología. 2002; 36 (4):36-39.. CO. 28. Matamoros L. Aumenta el uso de antimicrobianos naturales en la UE para. A. Y. garantizar la seguridad de los alimentos manteniendo sus características; 1998.. RM ÁT. IC. 29. Conner D. Naturally occurring compounds, Antimicrobials in foods. New York. 1993. 441-468.. IN FO. 30. Viuda M.; Ruiz N.; Fernández L.; Pérez A. Antifungal Activities of Thyme,. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. DE. Clove and Oregano Essential Oils. J Food Safety.2007; 27:91-101. 20.. 28. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) RM ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. DE. IN FO. ANEXOS. 29. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO Nº 1 Variación de la sensibilidad en el crecimiento de Listeria moncytogenes frente a diferentes concentraciones del extracto de Uncaria tomentosa, expresando en. o. 1. 0.5%. 18. 2. 3. AC IÓ. 4. 5. IC. Medición de Halos de inhibición. M UN. N. 2,305. 6. CO. Tratamient. N. halos de inhibición.. Y. 56 2,500. A. 18. IC. 2%. 18. 2,611. IN FO. 1%. RM ÁT. 00. 11 18. 3,388. DE. 5%. 4,472. EM. 18. 22. SI. ST. 10%. AS. 89. 18. 6,722. RE CC IO. Genta. N. DE. Sulfa. DI. Cipro. 22. 18. 7,805 56. 18. 9,6388 9. 30. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO Nº 2. Listeria moncytogenes frente a. N. Variación de la sensibilidad de cultivos de. AC IÓ. diferentes concentraciones del extracto de Uncaria tomentosa, expresando en. M UN. IC. halos de inhibición Cultiv N. Medición de Halos de inhibición. o. 1. 20. 24. 24. 24. CO. 24. Y. 23. A. 24. IC. 22. 3,85417. RM ÁT. 24. 4,75000. IN FO. 21. 4. 3,16667. 5,79167 5,87500 6,14583. DE. 24. 3. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. 18. 2. 31. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO Nº 3. Variación de la sensibilidad en el crecimiento de Listeria ivanovii frente a. AC IÓ. N. diferentes concentraciones del extracto de Uncaria tomentosa, expresando en. IC. halos de inhibición.. 1. 2. 3. 4. 5. 7. 1,75000. 1%. 18. 1,94444. 2%. 18. 5%. 18. 10%. 18. Genta. 18. Cipro. 18. RM ÁT. 18. DE. 3,02778. IN FO. 0.5%. IC. A. Y. to. 6. CO. Tratamien N. M UN. Medición de Halos de inhibición. AS. 5,02778. ST. EM. 5,77778. DE. SI. 7,00000. RE CC IO. N. 7,86111. 18. 9,0000. DI. Sulfa. 32. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

Figure

Actualización...

Referencias

Actualización...