Caracterización de Aceites Esenciales en Especies Vegetales de la Familia Labiaceae de la Región La Libertad y Estudio de su Actividad Antibacteriana in vitro

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ESCUELA DE POSTGRADO. PO. SG. RA DO. SECCIÓN DE POSTGRADO EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA. “Caracterización de Aceites Esenciales en Especies Vegetales. DE. de la Familia Labiaceae de la Región La Libertad y Estudio de. DI G. IT. AL. su Actividad Antibacteriana in vitro”. AUTOR: Br. SEGUNDO SANTIAGO VIGO ALCÁNTARA. BI BL. IO. TE C. A. ASESOR: Dr. MARIO ALVA ASTUDILLO. TESIS PARA OPTAR EL GRADO DE MAESTRO EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA MENCIÓN EN PRODUCTOS NATURALES TERAPÉUTICOS. TRUJILLO – PERU 2004. Nº de Registro ......................... -1-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. Los aceites esenciales de Satureja sericeae, muña, y Mintothachys tomentosa, muña shalgarromero, fueron extraídos, mediante destillación por arrastre. RA DO. con vapor, con rendimientos de 0,12 y 0,14%, respectivamente.. El cromatograma de gases del aceite de Satureja sericeae muestra 29 diferentes,. de. los. cuales. 23. fueron. identificados. SG. compuestos. mediante. PO. espectrometría de masas, destacando como componentes mayoritarios el transcarifileno (18,3 %), la pulegona (12,6 %) y el p-cimeno (8,27 %). En el aceite de. DE. Mintosthachys tomentosa se detectaron 32 componentes, 26 de los cuales pudieron. AL. ser identificados pos espectrometría de masas. Como componentes principales del. IT. aceite de Mintosthachys tomentosa se tienen el 1,7,7-trimetil-biciclo[2.2.1]heptan-2-. DI G. ol (10,1 %), el acetato de endobornilo (9,7 %) y el 6,6-dimetil-biciclo[3.1.1]hept-2eno-carboxaldehído (7,6 %). Se identificaron ocho compuestos comunes a ambos. TE C. A. aceites.. Los espectros IR de ambos aceites muestran la presencia de los grupos. IO. hidroxilo, carbonilo y dobles enlaces carbono–carbono, lo que es coherente con los. BI BL. resultados de GC/MS. Sin embargo el aceite de Mintosthachys tomentosa muestra un mayor contenido de compuestos carbonílicos que el aceite de Satureja sericeae.. Los aromatogramas frente a Estafilococcus aureus, Estreptococcus βhemolítico y Klebsiella sp muestran sensibilidad de estos microorganismos frente a estos aceites esenciales.. -2-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. Essential oils were isolated from Satureja sericeae, “muña” and Mintosthachys tomentosa, “shalgarromero”, by steam distillation in yields of 0,12 and 0,14,. RA DO. respectively.. SG. The gas chromatogram of Satureja sericeae oil shows 29 different compounds, 23 of them were identified by mass spectrometry, the principal. PO. components being trans-caryphyllene (18,3 %), pulegone (12,6 %) and p-cymene. DE. (8,27 %). 32 different compounds were detected In Mintosthachys tomentosa oil, 26 of them were identified by mass spectrometry.. The principal components in. AL. Mintosthachys tomentosa oil are 1,7,7-trimethyl-bicyclo[2.2.1]heptan-2-ol (10,1 %),. IT. endobornyl acetate (9,7 %) and 6,6-dimetil-bicyclo[3.1.1]hept-2-eno-carboxaldehído. DI G. (7,6 %). Eight compounds common to both oils were identified.. TE C. A. The IR spectra of both oils show hydroxyl and carbonyl groups, as well as carbon–carbon double bonds, which is coherent with the GC/MS results. However. BI BL. IO. the Mintosthachys tomentosa oil shows a higher content of carbonylic compounds.. The aromatogram of Estafilococcus aureus, β- hemolytic Estreptococcus and. Klebsiella sp shows that these microorganisms are sensible to both essential oils .. -3-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I. INTRODUCCION El hombre, desde su aparición sobre la Tierra, ha hecho uso de la naturaleza para la satisfacción de sus necesidades primarias, incluyendo el tratamiento de sus. RA DO. dolencias físicas. En todas las culturas se ha practicado el uso medicinal de las plantas para la curación de las enfermedades; habiéndose atribuido, en muchos. SG. casos, propiedades mágicas a ciertas especies vegetales.. PO. Con el advenimiento de la agricultura, no sólo fue posible disponer de mayores reservas de alimentos, sino que también se pudieron cultivar determinadas. DE. especies medicinales, que anteriormente solo se podían encontrar en estado silvestre. Los antiguos pobladores llegaron a dominar el empleo medicinal de las. AL. plantas, el cual se perfeccionó a través de los años, dando lugar a tratamientos que. DI G. medicina convencional. (18). IT. han subsistido hasta la fecha y que, en muchos casos han sido incorporados a la. TE C. A. La Organización Mundial de la Salud estima que aproximadamente el 80% de los 4,000 millones de habitantes de la Tierra confían en medicinas tradicionales para. IO. satisfacer sus principales necesidades de atención primaria de salud. Se puede. BI BL. afirmar que el 85% de las terapias tradicionales entrañan el uso de extractos de plantas o de sus principios activos. (4) (7). Las plantas son consideradas como un laboratorio biosintético que no sólo elabora compuestos químicos fisiológicamente activos o metabolitos primarios (carbohidratos, proteínas y lípidos), sino también una gran cantidad de sustancias relativamente complejas, como flavonoides, alcaloides, saponinas, esteroides,. -4-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. cardiotónicos,. aceites. esenciales,. entre. otros,. denominados. metabolitos. secundarios. (3). En el Perú, los curanderos utilizan aproximadamente unas mil especies. RA DO. diferentes de plantas en su trabajo diario, tal como lo reporta Mostacero en su obra: “Plantas Medicinales en la Región Norte del Perú, Usos y Ecología”. A pesar de ello, son relativamente escasos los trabajos de investigación fitoquímica y de aplicación. Muchas de estas especies vegetales aún se encuentran sin clasificar y se. PO. país.. SG. terapéutica que se han realizado con las especies vegetales oriundas de nuestro. estima que más del 90% de ellas aún no disponen de estudios químicos y. AL. IT. 1.1 ACEITES ESENCIALES. DE. farmacológicos previos, (16). DI G. El hombre, desde tiempos remotos, se ha interesado en las fragancias asociadas con algunas plantas.. Hace ya mucho tiempo se descubrió. que los. A. principios activos o esencias a que se deben esos olores tenían consistencia oleosa. TE C. y podían ser separados por calentamiento o arrastre con vapor de agua, por lo que se les denominó aceites esenciales. Posteriormente, se amplió esta caracterización. BI BL. IO. para abarcar compuestos aislados por procesos de extracción. (2) (21). Los aceites esenciales generalmente son mezclas complejas de hasta más de. 100 componentes, entre los que se identifican compuestos alifáticos de bajo peso molecular (alcanos, alcoholes, aldehídos, cetonas, ésteres y ácidos), monoterpenos, sesquiterpenos y fenilpropanos. (23) (26). -5-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La mayoría de los aceites esenciales son líquidos muy fluidos, aunque algunos, como el alcanfor, son sólidos a temperatura ambiente. Suelen ser menos densos que el agua y presentan un olor penetrante, que en general recuerda a la planta de donde proviene o a la droga en la que se emplea. Los olores de los. RA DO. aceites esenciales son característicos, pero pueden modificarse por exposición al aire.. SG. En cuanto al sabor, algunos aceites esenciales son irritantes, otros dulces,. refrigerantes.. PO. picantes, cáusticos o ardientes. Debido a sus elevadas presiones de vapor son muy Los índices de refracción son generalmente muy elevados.. La. DE. mayoría de los compuestos presentes en los aceites esenciales tienen centros de. AL. asimetría, por lo que son ópticamente activos, siendo su rotación específica un. DI G. IT. valioso dato para su identificación. (21). La mayoría son incoloros cuando están puros y frescos, pero en general son Son solubles en. A. amarillentos y por exposición al aire toman diferentes colores.. TE C. aceites y grasas, en alcohol, éter, cloroformo, sulfuro de carbono y otros disolventes orgánicos. Algunas esencias son inflamables. Los puntos de ebullición suelen llegar. IO. hasta 150°C, pero muchos volatilizan antes de los 100°C. Si se dejan en reposo, en. BI BL. un lugar frío, se separan en dos fases: una líquida llamada oleptano, constituida de hidrocarburos, y la otra sólida llamada estearoptano, formada por productos de oxidación. (20). La mayor parte de los aceites esenciales están compuestos de terpenos, sesquiterpenos, compuestos oxigenados y una pequeña cantidad de residuos no. -6-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. volátiles.. De manera general, los compuestos presentes en los aceites esenciales. pueden ser divididos en dos grandes grupos: hidrocarburos y compuestos oxigenados.. RA DO. Entre los hidrocarburos se han identificado alcanos, olefinas, hidrocarburos aromáticos y terpenos (olefínicos, monocíclicos, bicíclicos y tricíclicos), diterpenos y azulenos. Los terpenos y sesquiterpenos constituyen el grupo más importante de. PO. SG. compuestos presentes en algunos aceites esenciales.. Los compuestos oxigenados constituyen el grupo de componentes del cual. DE. dependen las grandes diferencias de olor observadas en varios aceites esenciales.. AL. Este grupo comprende alcoholes, aldehídos, cetonas y ésteres, que pueden ser. IT. saturados, alifáticos, aromáticos, terpénicos y sesquiterpénicos. Existen muy pocas. DI G. excepciones de compuestos conteniendo otros elementos como nitrógeno o azufre,. algunos. aceites. TE C. En. A. entre los que destacan algunos isocianatos, disulfuros y aminas.. esenciales. predomina. un. compuesto. químico. característico. Así por ejemplo, anisol constituye 98% del aceite de anís, el linalol. BI BL. IO. 85% del aceite de palo de rosa, el safrol 80% del aceite de sasafrás. (13). Prácticamente todos las aceites esenciales contienen terpenos, los cuales. derivan estructuralmente del isopreno, C5H8, 1. Los terpenos propiamente dichos, C10H16, constan de dos unidades de isopreno y pueden ser de cadena abierta, como el mirceno, 2; monocíclicos, por ejemplo limoneno, 3 y β-felandreno, 4 o bicíclicos, tales como pineno, 5 y camfeno, 6.. -7-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) 2. 4. 5. 3. 6. DE. PO. SG. 1. RA DO. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AL. Los sesquiterpenos, C15H24, constan de tres unidades isoprénicas y pueden. IT. ser de cadena abierta, como el farnesol, 7; monocíclicos, por ejemplo el humuleno,. TE C. A. DI G. 8, o bicíclicos, tal como el cadineno, 9.. IO. HO. 8. 9. BI BL. 7. La condensación de unidades isoprenoides oxigenadas o de los mismos. terpenos oxigenados forman alcoholes de cadena abierta como el geraniol, 10, y el. linalol, 11; aldehídos, tales como el geranial, 12,. y el citral 13; alcoholes. monociclicos, como por ejemplo el mentol, 14 y el terpineol 15; cetonas, por ejemplo la fencona, 16 y el camfor, 17 y ésteres terpénicos, como el acetato de endobornilo, 18, que también aparecen en muchos aceites esenciales. (14) (20) -8-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. OH. CHO. OH. 10. 12. CHO. 14. OH. 15. O O O. 17. 18. TE C. A. 16. DI G. IT. O. AL. DE. 13. PO. OH. SG. RA DO. 11. 1.2. CARACTERIZACION DE ACEITES ESENCIALES. IO. La separación de los componentes de los aceites esenciales suele realizarse. BI BL. mediante métodos cromatográficos y la caracterización de los mismos se efectúa mediante la determinación de sus propiedades físicas como color, olor, índice de refracción, rotación específica y por técnicas espectroscópicas.. Los métodos físicos de análisis presentan considerables ventajas sobre las técnicas tradicionales de análisis químico, ya que en ellos no se altera la naturaleza de las muestras; es decir son técnicas no destructivas. Otra de las ventajas de los. -9-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. métodos espectroscópicos consiste en que requiere cantidades muy pequeñas de muestra, la cual puede ser recuperada en la mayoría de los casos. Además, estos métodos son sumamente rápidos, en comparación con los análisis químicos y son. RA DO. no contaminantes para el medio ambiente.. La espectroscopia de infrarrojo se basa en la absorción de energía radiante en el rango de longitud de onda de 2,5 a 25 µm. La energía absorbida contribuye a. Sin embargo, cada compuesto orgánico sólo puede absorber un. PO. orgánicas.. SG. incrementar la amplitud de las vibraciones de los enlaces de las moléculas. determinado número de frecuencias, que es característico de los enlaces químicos. DE. presentes en la molécula, lo que constituye su espectro de infrarrojo.. (cm-1).. De. AL. expresar las frecuencias absorbidas en unidades de número de onda. Es usual. IT. tal manera que las frecuencias absorbidas reflejan la presencia de los enlaces. DI G. químicos, y por lo tanto sirven para identificar los grupos funcionales característicos. A. de cada compuesto orgánico.. TE C. El espectro infrarrojo permite detectar los grupos funcionales, pero brinda limitada información acerca del esqueleto carbonado. En el caso del análisis de los. IO. aceites esenciales, que como norma general contienen terpenos, la espectroscopía. BI BL. IR permite detectar la presencia de dobles enlaces carbono-carbono, el grado de substitución y la configuración de los mismos. Así mismo, se pueden identificar anillos aromáticos y determinar su grado de substitución. En cuanto a las cadenas alifáticas, mediante la espectroscopía IR pueden detectarse ciertos fragmentos como grupos isopropilo y terc-butilo.. -10-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. De otro lado, mediante la espectroscopía IR se pueden identificar los grupos funcionales oxigenados característicos de ciertos terpenoides y otros compuestos característicos de los aceites esenciales. Por ejemplo, fácilmente se identifican los grupos hidroxilo, carbonilo, éster de cadena abierta o lactónica, así como éteres y. RA DO. otras funciones típicos de estos compuestos naturales. Es posible también mediante la espectroscopía IR diferenciar a aldehídos de cetonas y aún detectar si se. SG. encuentran o no conjugados con dobles enlaces carbono-carbono.. PO. Otras técnicas espectroscópicas de elucidación estructural incluyen la espsctroscopía ultravioleta visible y la resonancia magnética nuclear.. La. DE. espectroscopía de ultravioleta-visible se fundamenta en la absorción de energía. AL. radiante en el rango de 200 a 800 nm.. Dicha absorción produce transiciones. electrónicas entre los diferentes niveles energéticos de los orbitales enlazantes y Mediante la longitud de onda y la. DI G. IT. antienlazantes de las moléculas orgánicas.. intensidad de las diferentes frecuencias absorbidas es posible el reconocimiento de. TE C. A. grupos funcionales y cromóforos presentes en las estructuras orgánicas.. De manera general, la espectroscopía ultravioleta tiene utilidad limitada en el. IO. estudio de la gran mayoría de los aceites esenciales terpénicos, ya que pocos terpenos. BI BL. presentan grupos cromóforos. Sin embargo, en la fracción no volátil de los aceites esenciales cítricos se encuentran componentes carotenoides o con núcleos heterocíclicos oxigenados (cumarinas, furocumarinas sustituidas y polimetoxiflavonas), cuya presencia puede ser detectada mediante espectroscopía. La espectroscopía de resonancia magnética nuclear es la técnica de mayor aplicación para la caracterización estructural de todo tipo de compuestos orgánicos, -11-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. incluidos los aceites esenciales. Este método se basa en la absorción de energía radiante en el rango de radiofrecuencias, en presencia de un campo magnético, lo que produce cambios en los estados de spin de determinados átomos, tales como 1. Hy. C. En la actualidad con bases de datos de los espectros, especialmente de. C-NMR para los monoterpenos y sesquiterpenos más frecuentes. (26). RA DO. 13. 13. La espectrometría de masas constituye un método de análisis diferente a los. SG. anteriores, debido a que en rigor no es una técnica física, sino que implica la. PO. destrucción definitiva de la muestra empleada. Sin embargo, esta desventaja se compensa por el hecho de que utiliza cantidades muy pequeñas de muestra,. DE. usualmente mucho menores que 1 mg. La muestra debe ser volatilizada a muy baja. AL. presión y luego es ionizada mediante impacto con un haz electrónico de alta energía. IT. (70 eV). Algunos de los iones se descomponen en fragmentos característicos que. DI G. son acelerados en un campo eléctrico y luego son enfocados hacia un detector, bien por un campo magnético variable o por un sistema cuadrupolar, en función de su. A. relación masa/carga. El espectro de masas se presenta como una gráfica de la. TE C. relación carga/masa de los fragmentos en función de su abundancia relativa y permite determinar las masa molecular del compuesto, así como determinados. BI BL. IO. fragmentos estructurales de la molécula.. Uno de los avances más notables de la espectrometría de masas consiste en el. diseño de sistemas acoplados de cramatografía de gases/espectrometría de masas (GC/MS). En dichos instrumentos, se inyecta una muestra consistente en una mezcla de compuestos y, luego de la separación cromatográfica, cada uno de los componentes alcanza sucesivamente el detector, consistente en un espectrómetro. -12-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. mezcla de compuestos y, luego de la separación cromatográfica, cada uno de los componentes alcanza sucesivamente el detector, consistente en un espectrómetro de masas, que registra automáticamente los espectros de masas. La interfase con una computadora permite la posterior manipulación de los datos y la comparación con las. RA DO. librerías de espectros con la finalidad de poder identificar los componentes individuales por comparación con patrones existentes en las bases de datos.. SG. 1.3. APLICACIONES TERAPEUTICAS DE LOS ACEITES ESENCIALES. PO. En el Perú, las infecciones respiratorias agudas (IRA), tales como bronquitis, neumonía, rinitis, faringitis, etc., ocupan el primer lugar como causa de enfermedad y. mayoría. de. las. infecciones. respiratorias. agudas. son. causadas. por. AL. La. DE. muerte; siendo más frecuentes en niños durante la estación fría. (6) (11) (15) (18).. Dentro de estos microorganismos, los causantes más comunes son. DI G. población.. IT. microorganismos miembros de la flora normal, debido a una alteración en su. A. Staphylococcus aureus, Streptococcus α y β hemolíticos y Klebsiella. (11) (12) (17). TE C. El género Streptococcus. abarca un grupo heterogéneo de cocos gram positivos, los cuales pueden producir hemólisis α, hemólisis β o no producir. IO. hemólisis cuando se desarrollan en agar sangre. Los hemoliticos-β son el principal. BI BL. patógeno para el ser humano y están relacionados con invasiones locales y generalizadas.. La infección más común debida a esta especie es la faringitis. estreptocócica. También pueden producir neumonía que progresa con rapidez y, que con frecuencia, es secuela de una infección viral. (1) (11) (12) (17). -13-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La Klebsiella pneumoniae es un bacilo gram-negativo y es la especie aislada con más frecuencia en neumonía lobular primaria adquirida en la comunidad. (12) (18) (11) (17). respiratorias agudas es muy común.. RA DO. En nuestro medio, el uso de antibióticos en el tratamiento de infecciones Las penicilinas (penicilina G, amoxicilina,. ampicilina) constituyen el tratamiento estándar, excepto en casos de infecciones. SG. graves o en microorganismos resistentes (productores de β-lactamasa). En estos. PO. casos, el tratamiento consiste en combinarlos o sustituirlos por otros antibióticos de mayor espectro, a los cuáles el microorganismo es sensible, como la eritromicina,. AL. DE. vancomicina, o cefasloporinas (cefalotina, cefazolina). (09) (11) (17) (22). IT. En la actualidad, la principal estrategia del programa de la OMS de lucha. DI G. contra las IRA se opone al uso indiscriminado de antibióticos, ya que éstos deben limitarse al tratamiento de enfermedades graves de las vías respiratorias bajas,. TE C. A. como casos concretos de neumonía en niños. (09) (19). Debido a esto, los medicamentos naturales constituyen una alternativa dentro. IO. de una política de salud; para resolver los problemas que acarrean los. BI BL. medicamentos de síntesis química que actualmente se utilizan. (8) El Perú posee una extraordinaria y variada flora cuyas aplicaciones terapéuticas en el ámbito folclórico se hacen cada día más necesarias.. Los aceites esenciales se emplean actualmente en aromaterapia.. Desde. hace mucho tiempo se han usado el mentol, eucaliptol y alcanfor, entre otras. -14-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. esencias, en el tratamiento de dolencias leves de las vías respiratorias y como coadyuvante en las enfermedades agudas del sistema respiratorio. (27). La mayoría de especies vegetales de la familia labiadas son ricas en aceites esenciales, de aplicación terapéutica popular. Por ejemplo, la Satureja sericeae, que crece en la. RA DO. sierra de La Libertad y es conocida como shalgarromero, es muy utilizada en infusión como carminativo, estomáquico, estimulante, relajante muscular y en el. SG. tratamienbto del paludismo.. PO. Otra de las labiaceas de la sierra liberteña es la Mintosthachys tomentosa o muña, a la cual se le asignan propiedades analgésicas, digestivas, antidiarreicas, miorrelajantes,. espectorantes,. DE. antiespasmódicas,. carminativas,. antimicóticas,. AL. antirreuméticas, así como antiinflamatorio bucal y dermico y en el tratamiento de. DI G. IT. afecciones, renales, bronquiales y menstruales.. Sin embargo, hasta la fecha no se ha realizado un estudio sistemático que. A. permita establecer las propiedades terapéuticas de los aceites esenciales de las. TE C. especies vegetales del género Labiaceae, por lo que el presente trabajo de investigación tiene como propósito la extracción, caracterización y la determinación. IO. de la actividad antibacteriana in vitro de los aceites esenciales de algunas especies. BI BL. de dicho género que se encuentran en la Región La Libertad.. -15-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. OBJETIVOS. El presente trabajo de investigación tiene como objetivos: 1. Identificar las especies de la familia Labiaceae de la Región La Libertad que, de acuerdo al uso tradicional, poseen beneficios terapéuticos.. RA DO. 2. Extraer y caracterizar los componentes de los aceites esenciales de las plantas Labiaceae identificadas como medicinales.. SG. 3. Verificar in vitro la actividad antibacteriana de los aceites esenciales.. PO. PROBLEMA. ¿Cuáles son los componentes de los aceites esenciales de Satureja sericeae. AL. DE. y Mintosthachys tomentosa y si estos poseen actividad antibacteriana in vitro?. aceites. esenciales. de. las. especies. de. Satureja. sericeae. y. DI G. Los. IT. HIPOTESIS. BI BL. IO. TE C. A. Mintosthachys tomentosa poseen actividad antibacteriana in vitro?. -16-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II. MATERIALES Y METODOS. 2.1.. MATERIALES. 2.1.1.. MATERIALES BIOLÓGICO. RA DO. 2.1.1.1 MATERIALES BOTÁNICOS. El presente trabajo de investigación fue realizado con la hojas de dos. SG. especies de la familia Labiaceae de la sierra de la Región La Libertad: Satureja sericeae, shalgarromero, y Mintosthachys tomentosa, muña. Las muestras fueron. DE. meses de Julio de 2003 y Febrero de 2004.. PO. recolectadas en las alturas de la localidad de Otuzco, provincia de Trujillo, en los. AL. Se realizó la identificación y clasificación taxonómica de ambas especies,. DI G. IT. caracterizando su hábitat, hojas, inflorescencia, flores y frutos.. CLASIFICACIÖN TAXONOMICA Según Eugler (1974) (10) (16). A. Satureja sericeae División. :. Angiospermae. Clase. :. Dicoty ledoneae. IO. TE C. A.. :. Tubiflorae. Familia. :. Labiate. Género. :. Satureja. Especie. :. Sericeae (Presl.) Beiq. Nombre Vulgar. :. Shalgarromero. BI BL. Orden. -17-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Mintosthachys tomentosa :. Angiospermae. Clase. :. Dicoty ledoneae. Orden. :. Lamiales. Familia. :. Labiate. Género. :. Mintosthachys (Benth) Spach. Especie. :. Tomentosa (Benth) Epl.. Nombre vulgar. :. Muña. SG. RA DO. División. PO. B.. Los aceites esenciales fueron extraídos de las hojas de dichas plantas al. DE. estado fresco, la extracción de los aceites esenciales se realizó por arrastre con. MATERIALES MICROBIOLOGICOS. DI G. 2.1.1.2.. IT. AL. vapor de agua. (26). En los ensayos microbiológicos de los aceites esenciales se utilizaron las. A. siguientes cepas bacterianas:. Staphylococcus aureus. •. Streptococcus ß-hemolíticos. •. Klebsiella sp.. BI BL. IO. TE C. •. Dichas cepas fueron proporcionadas por el Departamento de Microbiología de la. Universidad Nacional de Trujillo.. -18-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.1.2. MATERIALES DE LABORATORIO 2.1.2.1. Material de vidrio .. •. Agar nutritivo. •. Agar sangre. 2.2. METODOS. SG. 2.2.1. EXTRACCION DE LOS ACEITES ESENCIALES. RA DO. 2.1.2.2. Medios de Cultivo. PO. Los aceites esenciales fueron extraídos mediante destilación por arrastre con vapor de agua a presión ambiente, siguiendo el método descrito en la literatura (26).. DE. Los aceites esenciales fueron secados sobre cloruro de calcio y guardados en. IT. AL. frascos ámbar en atmósfera de nitrógeno.. DI G. 2.2.2. DETERMINACION DEL INDICE DE REFRACCIÓN. El índice de refracción, n,. de una determinada sustancia química es la. A. relación de las velocidades de la luz en dicha substancia y en un medio de. BI BL. IO. TE C. referencia.. De acuerdo a la ley de Snell:. sen α. c1 n. =. c2. =. sen β. -19-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. =. velocidad de la luz en el medio 1. c2. =. velocidad de la luz en el medio 2. α. =. ángulo de incidencia. β. =. ángulo de refracción. DE. PO. c1. AL. Donde:. c2. SG. β. RA DO. α. c1. Como medio de referencia usualmente se usa el aire. El índice de refracción. DI G. IT. se refiere a la relación de velocidades de la luz en el medio y en el aire. El índice de refracción y es una propiedad física intrínseca característica de cada sustancia. Los n. 20 D. y se refieren a medidas. A. índices de refracción suelen expresarse como. TE C. efectuadas a 20° C y con luz monocromática correspondiente a la línea D del espectro de sodio (589 nm). En el presente trabajo los índicess de refracción se. BI BL. IO. registraron mediante un refractómetro Carl-Zeiss-Jena modelo I.. 2.2.3. ROTACION ESPECIFICA. La rotación específica es una propiedad física intrínseca de las sustancias. ópticamente activas y se refiere la desviación del plano de la luz polarizada por efecto de la asimetría de sus moléculas. La actividad óptica se determina mediante el polarímetro.. -20-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El grado de desviación del plano la luz polarizada depende de la naturaleza de la substancia y del número de moléculas ópticamente activas que la luz polarizada encuentra en su trayectoria entre el polarizador y el analizador.. El. número de moléculas activas es función de la concentración y de la longitud de la. RA DO. trayectoria del haz luminoso. La rotación específica, en función de los parámetros que la determinan, queda definida por la siguiente relación:. c. .. l. =. Rotación específica. α. =. lectura polarimétrica. c. =. concentración, g/mL. l. =. longitud de la trayectoria, dm. AL. DE. PO. [α]. IT. Donde :. =. SG. [α]. α. ó. DI G. La rotación específica se reporta como una medición a una temperatura de 20 25 °C, correspondiente a la línea D del espectro de sodio. En el presente. A. trabajo, las determinaciones se efectuaron utilizando un polarímetro de círculo de la. TE C. firma Carl-Zeiss-Jena.. IO. 2.2.4. CROMATOGRAFIA DE GASES - ESPECTROMETRIA DE MASAS. BI BL. La cromatografía de gases es un método analítico de separación de los. componentes de una mezcla de compuestos orgánicos que se basa en la distribución de dichos componentes entre una fase estacionaria y el gas portante.. Cada uno de los componentes de la mezcla, en función de su polaridad, posee un diferente grado de afinidad por adsorción respecto a la fase estacionaria. A través de una serie de procesos de equilibrio adsorción/desabsorción, los diferentes. -21-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. compuestos van avanzando a lo largo de la columna cromatográfica de la cual eluyen sucesivamente. El detector mide y registra el tiempo de retención de cada uno de los componentes y la concentración relativa de cada uno de ellos.. RA DO. Existen diferentes tipos detectores, entre los actualmente que destaca el uso de un espectrómetro de masas directamente acoplado a la salida del cromatógrafo. En dicho sistema, el espectrómetro continuamente registra los espectros de masas. SG. de los compuestos que van eluyendo del cromatógrafo. Los datos espectroscópicos. PO. son digitalizados y almacenados en la memoria de una computadora para su. DE. posterior procesamiento.. AL. En el espectrómetro de masas, que opera en fase gaseosa y a muy alto. IT. vacío, las moleculas efluentes del cromatógrafo son continuamente bombardeadas. DI G. por un haz electrónico de elevada energía, lo que les causa la pérdida de un electrón, transformándose en cationes radicálicos que constituyen los iones Como consecuencia del impacto electrónico,. A. moleculares de cada compuesto.. TE C. muchos de estos iones sufren un posterior fraccionamiento, formando partículas neutras y iónicas.. Cada uno de los iones moleculares y los fragmentos catiónicos. IO. se caracterizan por una determinada relación carga/masa. Siendo usualmente la. BI BL. carga unitaria, la relación carga/masa realmente indica la masa, en unidades dalton, de cada ion.. Los cationes son acelerados en un campo eléctrico y posteriormente separados en un analizador cuadrupolar, en funcion de su relación carga/masa, con lo cual sucesivamente son enfocados hacia el detector. El instrumento mide la masa. -22-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. de cada catión y registra su intensidad relativa, que se expresa en función del ion de más intenso, , al cual se le asigna una abundancia relativa del 100% y se le denomina el pico base. La abundancia relativa de los demás fragmentos, incluido el ion molecular se expresa en función del pico base.. La masa del ion molecular. RA DO. corresponde a la masa molecular del compuesto, de tal manera que la espectrometría de masas actualmente constituye el método más exacto de. SG. determinación de masas moleculares.. PO. Los sistemas acoplados de cromatografía de gases/espectrometría de masas permiten además la identificación de los componentes de la mezcla por comparación. DE. de sus espectros de masas con los espectros contenidos en las librerías de. AL. espectros instaladas en sus sistema computarizado. Esto constituye una valiosa. IT. ayuda para la identificación de compuestos conocidos, cuyos espectros se. DI G. encuentren entre los muchos miles de datos disponibles y, en el caso de compuestos nuevos, presenta alternativas análogas que permiten efectuar. TE C. A. aproximaciones estructurales.. En el presente trabajo, la separación cromatográfica de los componentes de. IO. ambos aceites esenciales se efectuó en un sistema acoplado de cromatografía de. BI BL. gases-espectrometría de masas GC/MS, Perkin- Elmer, Turbochrom/Turbomass, utilizando una columna capilar PE-17 MS de 20 metros de longitud y diámetro interior de 0.18 mm, con una película de 0.18 µm. Como gas portante se utilizó helio.. -23-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.5. ESPECTROSCOPIA DE INFRARROJO. La espectroscopía de infrarrojo se basa en la absorción de energía radiante en el rango IR por parte de las moléculas orgánicas.. La energía absorbida. incrementa la amplitud de vibración de los diferentes enlaces químicos. Cada tipo. RA DO. de enlace posee una determinada frecuencia natural de vibración que lo caracteriza, de tal manera que el espectro de frecuencias absorbidas identifica los tipos de. SG. enlaces presentes en la molécula y por tanto los grupos funcionales.. PO. Los espectros de infrarrojo fueron registrados en un espectrómetro Perkin-. DE. Elmer 700 como líquidos puros en discos de cloruro de sodio.. AL. 2.2.6. ENSAYOS MICROBIOLOGICOS. 2.2.6.1. ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA POR EL METODO DE DIFUSION DE. DI G. IT. KIRBI BAUER (5) (25). Este método se funda en la difusión de una muestra a través de una capa de. A. agar solidificado, en una extensión tal que el crecimiento de microorganismos. TE C. sensibles es inhibido en zonas alrededor de la zona que contiene una concentración. IO. conocida de la muestra de aceite esencial.. BI BL. A. PREPARACION DEL INOCULO. Se tomaron tres a cuatro colonias del cultivo original de cada germen a. ensayar con el asa baceriológica y se suspendieron en 5 mL de solución salina fisiológica. Se dejó en reposo hasta alcanzar una densidad bacteriana similar a la turbidez del tubo N° 3 de Nefelómetro de Mac Parland (900 millones de bacterias por mL).. -24-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. B. PREPARACION DEL MEDIO DE CULTIVO. En el caso de Sthaphylococcus aureus y Klebsiella se utilizó como medio de cultivo agar nutritivo DIFCO y para el Streptococcus β hemolíticos se usó agar infusión cerebro corazón (BHI). Se vertieron 20 mL en placas petri hasta obtener un. RA DO. grosor homogéneo de aproximadamente 4 mm de espesor. Las placas fueron mantenidas a 37° en una estufa, durante a 60 min, con la finalidad de eliminar la. SG. humedad de la superficie.. PO. C. SIEMBRA DE LAS PLACAS. Mediante una pipeta esteril, se vierten 2 mL del inóculo sobre las placas de. DE. agar nutritivo y agar BHI sobre la superficie de las. placas petri.. Se realiza la. AL. siembra con el asa de Digralski; se inclina y se elimina el exceso con una. IT. micropipeta. Se deja secar de 3 a 5 minutos antes de depositar la muestra de aceite. DI G. esencial.. D. DILUCION DE LOS ACEITES ESENCIALES. TE C. A. Se prepararon diluciones de los aceites esenciales en tween 80 a 75 y 50%. E. APLICACION DEL ACEITE ESENCIAL. IO. Sobre las placas sembradas se colocan a la gota 30 µL del aceite esencial y sus. BI BL. respectivas diluciones en los pozos. Una vez depositados los aceites, se procede a sellar cada pozo con agar. Luego, las placas se colocan a 4° C por un tiempo de 15 minutos. A continuación, se deja 5 minutos a temperatura ambiente. Finalmente, se coloca en incubación aeróbica a 37° C durante 24 horas.. -25-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. F. MEDIDA DE LOS HALOS DE INHIBICIÓN. Transcurridas. 24 horas se procedió a medir el diámetro de los halos de. inhibición del crecimiento bacteriano de cada una de las muestras de aceites. RA DO. esenciales.. G. TRATAMIENTO ESTADÍSTICO. SG. Los resultados de los ensayos antibacterianos in vitro fueron sometidos a un. PO. tratamiento estadístico de análisis de varianza ANOVA (One-way Analysis of. BI BL. IO. TE C. A. DI G. IT. AL. DE. Variante). Ver anexo 3. -26-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III. RESULTADOS. Tabla 1. Rendimiento de Aceites Esenciales. SG. Tabla 2. Propiedades físicas de los Aceites Esenciales. RA DO. En los resultados se presentan 5 Tablas y 4 Figuras :. PO. Tabla 3. Posibles componentes de los Aceites Esenciales de Satureja sericeae,. DE. Shalgarromero.. AL. Tabla 4. Posibles componentes de los Aceites Esenciales de Mintosthachys. DI G. IT. tomentosa, Muña.. Tabla 5. Diámetros promedios de los halos de inhibición en mm., desviación. TE C. A. estándar (x ± D.S) y su tratamiento estadístico de los aceites esenciales de Satureja sericeae, Shalgarromero y Mintosthachys tomentosa, Muña frente. BI BL. IO. a Staphylococcus aureus, Streptococcus ß hemolíticos y Klebsiella.. Tabla 6. Comparación de la actividad antibacteriana de los aceites esenciales y antibióticos comunes.. Tabla 7. Compuestos Comunes en los Aceites Esenciales de Satureja sericeae y Mintosthachys tomentosa. -27-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 8. Propiedades Físicas de algunos Terpenos. Figura 1. Cromatograma de Gases de Iones Totales (TIC) de Satureja sericeae,. RA DO. Shalgarromero.. Figura 2. Cromatograma de Gases de Iones Totales (TIC) de Mintosthachys. del. Infrarrojo. de. aceite. esencial. de. Satureja. sericeae,. PO. Figura 3. Espectro. SG. tomentosa, Muña.. DE. Shalgarromero.. AL. Figura 4. Espectro del Infrarrojo de aceite esencial de Mintosthachys tomentosa,. DI G. IT. Muña.. Figura 5. Compuestos Comunes en los Aceites Esenciales de Satureja sericeae y. BI BL. IO. TE C. A. Mintosthachys tomentosa. -28-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3.1.. EXTRACCION DE ACEITES ESENCIALES. La destilación por arrastre con vapor de las muestras de Satureja sericeae, shalgarromero y. tomentosa, muña, dio los siguientes rendimientos en aceite. RA DO. esencial, referidos al peso original de la muestra. Se presentan en la Tabla 1.. MUESTRA. % Rendimiento. Satureja sericeae. SG. Tabla 1. Rendimiento de Aceites Esenciales. DETERMINACION DE PROPIEDADES FISICAS. AL. 3.2.. 0,14. DE. Mintosthachys tomentosa. PO. 0,12. IT. Los aceites esenciales fueron caracterizados mediante su índice de refracción y su. DI G. rotación especifica. Los resultados se muestran en la Tabla 2.. TE C. A. Tabla 2. Propiedades Físicas de los Aceites Esenciales DMUESTRA. IO. Aceite de Satureja sericeae. BI BL. Aceite de tomentosa. Mintosthachys. n 20 D. d. [ α ] 20. 1,487. 0,840. + 1,21. 1,479. 0.826. + 1,50. D. -29-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3.3.. CROMATOGRAFIA DE GASES – ESPECTROMETRIA DE MASAS. Los cromatogramas de gases de iones totales (TIC) de los aceites esenciales Satureja sericeae y Mintosthachys tomentosa se presentan en las Figuras 1 y 2, respectivamente, y muestran la presencia de 29 componentes principales en el Las Tablas 3 y 4 presentan los tiempos de. RA DO. primer caso, y 32 en el segundo.. retención y los porcentajes de cada uno de los posibles componentes en los aceites. SG. esenciales de Satureja sericeae y Mintosthachys tomentosa, respectivamente.. PO. En los Anexos 1 y 2 se presentan los espectros de masas de los componentes de los aceites esenciales de Satureja sericeae y Mintosthachys. AL. ESPECTROSCOPIA INFRARROJA. IT. 3.4.. DE. tomentosa, respectivamente.. DI G. Las Figuras 3 y 4 muestran los espectros infrarrojos de los aceites esenciales de Satureja sericeae y Mintosthachys tomentosa, registrados como líquidos puros en. TE C. A. discos de KBr.. 3.5 ENSAYOS MICROBIOLOGICOS. IO. En el Tabla 5 se presentan los diámetros promedio de los halos de inhibición, en. BI BL. mm, su desviación standard (x ± DS) y su tratamiento estadísitico de los aceites. esenciales de Satureja sericeae (shalgarromero) y Mintosthachys tomentosa (muña).. -30-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 3. Posibles Componentes de los Aceites Esenciales de Satureja Sericeae, Shalgarromero. COMPONENTE. T. R.. 1. 3.43. Bicyclo [3.1.0] Hexane, 4-Methyl-1-(1-Methylethyl)-Didehydro. 0.2384. 2. 3.52. Alpha-Pinene (-). 1.0660. 3. 3.70. Camphene. 4. 3.93. Sabinene. 5. 3.99. Beta-Pinene. 6. 4.06. Beta-Myrcene. 7. 4.46. P-Cymene. 8. 4.48. Lyratyl. Acetate. 9. 4.51. 1,8-Cineole. 10. 4.59. Beta-Ocimen. 11. 4.71. Gamma-Terpinene. 3.1427. 12. 5.07. Linalool. 4.3493. 13. 5.57. Cyclohexanone.5-methyl-2-(1-Methylethyl). 9.3187. 14. 5.64. Cyclohexanol, 1-methyl-4-(1-methylethyl). 2.3918. 15. 5.69. Bicyclo [2.2.1] heptan-2-OL, 1,7,7-Trimethyl. 1.3512. 16. 6.069. 1(7), 3, 8-O-Menthatriene. 0.4495. 17. 6.18. 19. SG PO DE. AL. IT. DI G. A. %. 0.344 1.0062 1.9586 0.3372 8.2706 4.3493 0.4311 2.2126. 12.5789. 6.40. 4-(Cis-2,5,6,6-Tetramethylcyclohex-2-EN-1-yl) Butan-2-ONE. 1.4649. 7.00. Alpha-Copaene. 0.1831. 7.07. Beta-Boubonene. 0.8237. 22. IO. 20. Pulegone. TE C. 18. RA DO. Nº. 7.54. Alpha-humulenne. 4.3380. 23. 7.70. Aromadendrene2. 7.7970. 24. 7.77. Bicyclogermacrene. 2.8393. 25. 7.83. Delta-Cadinene. 0.4527. 26. 8.069. Nerolidol. 3.6179. 27. 8.30. Dispiro[Cyclopropane – 1,6’: 2,6”-BIS (Exo-6-Bicyclo[3.1.1]Hep. 4.4427. 28. 8.34. Bergamotene. 1.4975. 29. 8.69. 2, 3, 5, 8, 10, 11-Hexamethyenedodecane. 0.4557. BI BL. 21. 7.38. Trans-Caryphyllene. 18.2895. -31-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 4. Posibles Componentes de los Aceites Esenciales de Mintosthachys Tomentosa, Muña. RT. 1. 3.55. Alfha – Pinene. 2. 3.723. Camphene. 3. 3.948. Sabinene. 4. 4.000. Beta-Pinene. 5. 4.065. Beta-Myrcene. 6. 4.465. DL-Limonene. 7. 4.58. Beta-Ocimen. 8. 4.69. Beta-Phellandrene. 9. 7.82. Gamma-Terpinene. 1.2758. 10. 5.04. DE. COMPONENTE. Nº. Trans-cyclobutylsesquilavandulol. 1.6899. 11. 5.448. (1R, 5S, E)-2-Methyl-4-[2,2,3-Trimethyl-6-Methylidenecyclo]. 0.5758. 12. 5.51. Cyclohexanone, 5-Methyl-2-(1-Methylethyl). 2.6496. 13. 5.707. Bicyclo[2,2,1] Heptan-2-OL, 1,7,7,-Trimethyl.-, exo. 14. 5.857. Bicyclo[3,1,1] Hept-2-ENE-Carboxaldehide, 6,6 – Dimethyl. 7.5974. 15. 6.048. Cis-Sesquilavandulol. 3.4730. 16. 6.12. Z-citral. 3.5129. 17. 6.18. 2-Cyclohexen-1-ONE-2-Methyl-5-(1-Methylethenyl). 1.7611. 18. 6.248. RA DO SG PO. AL. IT. DI G. 4.0796 2.7013 1.3227 5.2975 2.9878 0.1117. 10.0999. 6.34. E-Citral. 5.0086. 6.448. Endobornyl acetate. 9.7407. 6.657. Sabinyl acetate. 3.4432. 6.749. Citronellyl Acetate. 0.9420. 23. IO. 21. 3.2158. A. 20. 3.7717. 1.4222. 5-(8-Nonenyl) – 3 - Methylisoxazole. TE C. 19. %. 6.81. Neryl. Acetate. 1.9102. 24. 6.96. Linalyl. Acetate. 7.2358. 25. 7.165. 1,2-Epoxymenthyl. Acetate. 0.5776. 26. 7.324. Trans-caryphyllene. 5.7283. 27. 7.507. Alpha-Humulene. 1.1168. 28. 7.64. Germacrene. 1.0127. 29. 7.73. Bicyclogermacrene. 1.8245. 30. 8.26. Dispiro[Cyclopropane – 1,6’: 2,6”-BIS (Exo-6-Bicyclo[3.1.1]Hep. 1.3221. 31. 8.31. (-) - Caryophylleneoxide. 2.3405. 32. 8.43. (E)-2-Methyl-5-[(1-alpha.,6.Alpha,7.Alpha)-3. 0.2501. BI BL. 22. -32-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 5.-. Diámetros promedios de los halos de inhibición en mm., desviación estándar (x ± D.S) y su tratamiento estadístico de los. aceites. esenciales de Satureja sericeae, Shalgarromero y Mintosthachys tomentosa, Muña frente a Staphylococcus aureus, Streptococcus ß. aureus Streptococcus. β hemolitico. 50% (C). _ X ± DS. _ X ± DS. PURO (D) _ X ± DS. 18.00 ± 2.00. 12.00 ± 3.46. 13.33 ± 1.15. 14.00 ± 1.00. 16.33 ± 1.53. 20.00 ± 2.62. 18.00 ± 2.65. 8.00 ± 2.00. 10.00 ± 2.00. 10.00 ± 1.00. 12.00 ± 2.00. 75% (E) _ X ± DS. 16.00 ± 265. ANOVAa (P). 50% (F). 7.33 ± 2.08. LSDb. _ X ± DS. 12.00 ± 1.73. P < 0.05. EBFCDA. 20.60 ± 3.06. 12.00 ± 1.00. P < 0.05. DFACB E. 14.00 ± 1.00. 12.00 ± 0.00. P < 0.05. ABCFED. AL. Klebsiella. 75% (B). PO. Stafilococcus. PURO (A) _ X ± DS. DE. Microorganismo. Aceite Esencial Mintosthachys tomentosa. SG. Aceite Esencial Satureja cericeae. RA DO. hemolíticos y Klebsiella.. = Análisis de Varianza α = 0.05 (5.12 g.l.). b. = Las barras bajo las letras expresan no diferencia estadística significativa.. P. = Nivel de significancia.. DI G. IT. a. TE C. A. L.S.D. = Mínima diferencia significativa. TABLA Nº 6 Comparación de la actividad antibacteriana de los aceites esenciales y antibióticos. IO. comunes.. Aceite Esencial. Aceite Esencial. Satureja cericeae. Mintosthachys tomentosa. Amox.. Cefx.. 50% _ X ± DS. Amox. 25 µg. Cefx 30 µg. BI BL. Microorganismo. Stafilococcus Aureus. Streptococcus. β hemolitico Klebsiella. PURO _ X ± DS. 75% _ X ± DS. 50% _ X ± DS. PURO _ X ± DS. 75% _ X ± DS. 18.00 ± 2.00. 12.00 ± 3.46. 13.33 ± 1.15. 14.00 ± 1.00. 7.33 ± 2.08. 12.00 ± 1.73. 30.00 ± 1.00. 30.00 ± 0.00. 16.33 ± 1.53. 20.00 ± 2.62. 18.00 ± 2.65. 8.00 ± 2.00. 20.60 ± 3.06. 12.00 ± 1.00. 42.00 ± 0.30. 20.00 ± 1.05. 10.00 ± 2.00. 10.00 ± 1.00. 12.00 ± 2.00. 16.00 ± 265. 14.00 ± 1.00. 12.00 ± 0.00. 13.00 ± 1.05. 25.10 ± 1.00. -33-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Amox. : Amoxicilina Cefx. : Cefotaxima Cromatograma de Gases de Iones Totales (TIC) de Satureja sericeae, Shalgarromero. BI BL. IO. TE C. A. DI G. IT. AL. DE. PO. SG. RA DO. Figura 1.. -34-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Cromatograma de Gases de Iones Totales (TIC) de Mintosthachys tomentosa “Muña”. BI BL. IO. TE C. A. DI G. IT. AL. DE. PO. SG. RA DO. Figura 2.. -35-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Espectro del IR Shalgarromero. de. aceite. esencial. de. Satureja. sericeae. DE. PO. SG. RA DO. Figura 3.. DI G. Espectro del IR de aceite esencial de Mintosthachys tomentosa, Muña. BI BL. IO. TE C. A. Figura 4.. IT. AL. FREQUENCY (CM-1). FREQUENCY (CM-1). -36-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV. DISCUSION 4.1.. EXTRACCION DE ACEITES ESENCIALES. El tratamiento de las muestras de Satureja Sericeae, shalgarromero y. RA DO. Mintosthachys Tomentosa, muña mediante destilación por arrastre con vapor permitió aislar aceites esenciales con rendimientos de 0,12 y 0,14 %, respectivamente, lo cual. SG. indica la presencia de compuestos insolubles en agua y suficientemente volátiles.. PO. Al ser insolubles en agua, dichos compuestos ejercen su presión de vapor como si estuvieran puros y no proporcionalmente a sus respectivas fracciones molares. De. DE. tal manera que, de acuerdo a la Ley de Dalton, la presión total de vapor es igual a la. =. PA. A. Donde:. +. P1. DI G. PT. IT. temperatura de operación.. AL. suma de la presión de vapor del agua y las de los compuestos a destilara la. TE C. PT :. PA :. P2. +. .... +. Pn. Presión de vapor total Presión de vapor del agua Presiones de vapor de los compuestos 1 - n. IO. P1 - Pn :. +. BI BL. De este modo, es posible destilar compuestos de puntos de ebullición. relativamente altos a temperaturas por debajo del punto de ebullición del agua, ya que todos los compuestos volátiles suman sus presiones de vapor a la del agua en ebullición para igualar la presión atmosférica, que es de 760 mm de Hg a nivel del mar. En todo caso, al encontrarse el vapor de agua en su punto de ebullición, su aporte a la presión total de vapor es muy elevado en relación al efectuado por los demás. -37-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. componentes,. por lo que éstos son destilados, conjuntamente con el agua, a. temperaturas inferiores al punto de ebullición del agua.. Al realizarse la destilación por arrastre con vapor a temperaturas moderadas,. RA DO. por debajo de 100° C, no se produce degradación de los componentes de los aceites esenciales, con lo que conservan sus propiedades fisicoquímicas, organolépticas y. SG. terapéuticas.. PO. Los rendimientos obtenidos en el presente trabajo, aunque aparentemente moderados, son bastante aceptables, si se tiene en cuenta que las muestras contienen. DE. principalmente celulosa, hemicelulosas y otros tejidos vegetales que constituyen la. AL. mayor parte de la misma y que los metabolitos secundarios presentes son siempre. 4.2.. DI G. IT. sólo una pequeña fracción del peso total de la muestra.. DETERMINACION DE PROPIEDADES FISICAS. A. Las propiedades físicas obtenidas para ambos aceites esenciales se. TE C. encuentran dentro del rango de los componentes de otros aceites esenciales. IO. conocidos. En la Tabla 8 se muestran las propiedades físicas de algunos terpenos.. BI BL. Los valores de densidad obtenidos para los aceites esenciales de Satureja. sericeae y Mintosthachys tomentosa son de 0,840. y. 0,826, respectivamente.. Dichos valores indican que la densidad de ambos aceites esenciales es inferior a la del agua, y se encuentra en el rango de densidades de los terpenos.. -38-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 8. Propiedades Físicas de Algunos Terpenos. d. Geraniol. 1,4760. 0,89. Limoneno. 1,4730. 0,84. Mirceno. 1,4710. 0,80. Nerol. 1,4750. 0,86. [α]D20. + 123°. SG. RA DO. nD20. Compuesto. PO. Los índices de refracción de los aceites esenciales de Satureja sericeae y. DE. Mintosthachys tomentosa son de 1,487 y 1,479, respectivamente. Tales valores se encuentran en el rango de índices de refracción de los terpenos. Sin embargo, en el. AL. caso del aceite de Satureja sericeae, el valor del índice de refracción ligeramente. DI G. mayor polaridad.. IT. superior parecería indicar la presencia de algunos componentes no terpenoides de. A. Las rotaciones específicas de los aceites esenciales de Satureja sericeae y. TE C. Mintosthachys tomentosa obtenidos son de +1,21° y +1,50° indican la presencia de Los bajos valores de la. IO. componentes quirales en ambos aceites esenciales.. BI BL. rotación específica parece indicar bien una baja concentración de productos ópticamente activos o una parcial compensación entre componentes dextrógiros y levógiros.. -39-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 4.1. CROMATOGRAFIA DE GASES-ESPECTROMETRIA DE MASAS Los cromatogramas de gases de iones totales de los aceites esenciales de la. Satureja sericeae y Mintosthachiys tomentosa que se muestran en las Figuras 1 y 2 indican la presencia de al menos 29 y 32 compuestos principales, respectivamente,. RA DO. lo cual indica que se trata de mezclas muy complejas de metabolitos secundarios.. Los tiempos de retención de los componentes de los aceites esenciales. SG. varían entre 3,43 y 8,69 min, en el caso de las Satureja sericeae y entre 3,55 y 8,43. PO. min. Para el aceite de Mintosthachiys tomentosa. Esto indica que ambos aceites son muy similares en cuanto a su polaridad, lo cual era de suponerse para aceites. AL. DE. provenientes de especies de la misma familia.. IT. De otro lado, el hecho que la diferencia en tiempos de retención entre el. DI G. primer y el último componente en eluir en cada caso es relativamente pequeña, alrededor de cinco minutos para ambos casos, es un indicador de que las Es de. A. diferencias en las polaridades de los componentes no es muy grande.. TE C. esperarse que primero hayan eluído los componentes de menor polaridad, como los terpenos del tipo hidrocarburo y que posteriormente lo hayan hecho los. BI BL. IO. componentes oxigenados del tipo etérico, carbonílico e hidroxílico.. De manera automática, cada uno de los componentes de los aceites. esenciales conforme abandonan la columna cromatográfica fueron alimentados al espectrómetro de masas, registrándose sus espectros. Con la finalidad de facilitar la identificación de cada compuesto, sus espectros de masas fueron analizados y comparados con la bibliotecas Wiley y NIST disponibles en la computadora del. -40-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. instrumento. La búsqueda y comparación computarizada reporta aproximaciones para cada caso. En la Tablas 3 y 4 se presentan los tiempos de retención de cada uno de los componentes, su porcentaje y la primera aproximación estructural. Las estructuras propuestas por el. RA DO. reportada por las librerías (Hit 1).. sistema computarizado para cada. compuesto no corresponden necesariamente a la estructura real del mismo, sino. SG. que sólo constituyen las mejores aproximaciones disponibles en las citadas librerias.. PO. Sin embargo, se han tomado estas propuestas como una primera aproximación. DE. estructural, tal como se reporta en la Tablas 3 y 4.. 4.1.1. ESPECTROMETRIA DE MASAS DE LA SATUREJA SERICEAE. AL. En el cromatograma de gases del aceite de Satureja sericeae (Fig. 1, Tabla 3). IT. se puede observar que 5 componentes (Fracciones 7, 13, 17, 21 y 23) constituyen el. DI G. 56% del total de la muestra. Es de esperarse que las propiedades organolépticas y. A. gran parte de su actividad terapéutica sea determinada por dichos compuestos.. TE C. Por razones obvias de espacio, no es posible discutir los espectros de masas. IO. de todas las fracciones del aceite esencial, por lo que el análisis se limita al primer. BI BL. componente que eluye de la columna y al más abundante, es decir a las fracciones 1 (RT 3,43 min/0,2384 %) y 21 (7,38 min/18,2895 %).. A) PRIMERA FRACCION La búsqueda computarizada en las bibliotecas digitales Nist y Wiley reporta. para para el primer compuesto en eluir (Fracción 1) como primera propuesta el 4Metil-1-(1-metiletenil)-biciclo[3.1.0]hexano.. -41-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El Anexo 1 muestra el espectro de masas real de la Fracción 1 y el espectro del 4-Metil-1-(1-metiletenil)-biciclo[3.1.0]hexano, propuesto por la librería como primera opción. La comparación de ambos espectros muestra un similar patrón de fraccionamiento, identificándose el mismo ion molecular M (m/e, 136) y el mismo. RA DO. pico base a m/e = 93. Similarmente coinciden los mismos fragmentos principales a m/e: 121, 94, 91, 77 y 41, entre otros, de donde se puede concluir que el compuesto de la Fracción 1 efectivamente tiene la estructura del monoterpeno bicíclico. PO. SG. insaturado propuesta por el sistema computarizado.. El hecho de que el primer compuesto en eluir sea un terpeno del tipo. DE. hidrocarburo insaturado está de acuerdo con la baja polaridad de este tipo de. AL. compuestos. A continuación se presentan los patrones de fraccionamiento para las. DI G. IT. principales señales del espectro de masas de dicho componente.. El pico del ion molecular presenta una abundancia relativa de sólo el 5%, lo. A. cual indica la baja estabilidad del ion molecular, posiblemente debido a la elevada. TE C. tensión angular del sistema bicíclico. Siendo el compuesto un alqueno bicíclico, es de esperarse que presente fraccionamiento alílico. Existen tres posibilidades de. IO. fraccionamiento alílico en torno al carbono cuaternario cabeza de puente del biciclo,. BI BL. pero la escisión del enlace entre ambas cabezas de puente conduce a una significativa reducción de la tensión angular, por lo que el sistema bicíclico se. reordena a un hexaciclo insaturado, conjugado con el doble enlace exocíclico., tal como se representa en el Esquema 1.. -42-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Esquema 1. m/e = 136. RA DO. m/e = 136. El pico base a m/e 93 corresponde a la eliminación de propileno a partir del. SG. ion molecular, mediante una ruptura de dos enlaces (reacción retro Diels-Alder), seguida de la pérdida de un átomo de hidrógeno para formar el catión alílico, a m/e =. PO. 93, de acuerdo al Esquema 2.. m/e = 94. CH2 - H m/e = 93. A. m/e = 136. DI G. -. IT. AL. DE. Esquema 2. TE C. El catíón alílico se encuentra muy estabilizado por el elevado grado de deslocalización de la carga positiva por conjugación con los tres enlaces dobles.. BI BL. IO. Esta elevada estabilidad se refleja en la elevada abundancia relativa de dicho catión.. La señal que aparece a m/e 91 en el espectro del 4-Metil-1-(1-metiletenil)-. biciclo[3.1.0]hexano corresponde al catión tropilio y su elevada abundancia relativa indica la gran esatbilidad de dicho fragmento. El catión tropilio se forma a partir del ion molecular por eliminación de la cadena lateral insaturada como radical alilo y aromatización del anillo por eliminación de hidrógeno, tal como puede apreciarse en el Esquema 3.. -43-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Esquema 3. - 4H. - C2H C H C H2. C H2 m/e = 136. m/e = 91. RA DO. m/e = 95. La señal a m/e =77 corresponde al catión fenilo. Este catión se forma a partir. SG. del ion a m/e = 95, descrito en el Esquema 3, mediante eliminación de metilo y. DE. Esquema 4. PO. posterior oxidación. Tal proceso se ilustra en el Esquema 4.. AL m/e = 77. DI G. m/e = 95. IT. CH3. - CH3 - 3H. B) VIGESIMOPRIMERA FRACCION. TE C. A. La comparación del espectro de masas de este componente, que eluye a RT = 7,386 minutos, con los datos disponibles en las bibliotecas digitales Nist y Willey. IO. reporta como las cinco primeras alternativas al trans-Cariofileno. Dicha estructura es. BI BL. nuevamente propuesta cinco veces más en el análisis de las bases de datos.. Al comparar los espectros de la fracción 21 con el del trans-Cariofileno, se. encuentra coincidencias en ion molecular, M (m/e = 204) y en el pico base (m/e = 41). Coinciden así mismo la mayor parte de los picos correspondientes a los iones con mayor abundancia relativa, de donde se concluye que efectivamente dicha. -44-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. fracción tiene la estructura del propuesto sesquiterpeno.. A continuación de. RA DO. presentan dos fórmulas representativas de dicho compuesto:. SG. En el espectro de masas del trans-Cariofileno, es posible observar la señal del. PO. ion molecular (m/e = 204), con una intensidad relativa de sólo 4%, lo cual es típico. DE. en hidrocarburos insaturados de alto peso molecular.. AL. Por ser un compuesto insaturado, es de esperarse que el ion molecular sufra fraccionamiento alílico. Entre las varias posibilidades de fraccionamiento alílico es. DI G. IT. más favorecida la que implica la apertura del tenso anillo de cuatro átomos de carbono para generar un trieno. Este proceso tan sólo implica la isomerización del. Esquema 5. BI BL. IO. TE C. A. compuesto, tal como se muestra en el Esquema 5.. m/e = 204. m/e = 204. El catión radicálico isomerizado sufre luego un nuevo fraccionamiento alílico. Tal como se ha representado el catión radicálico, el fraccionamiento ocurriría en el. -45-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. enlace σ que es alílico respecto a ambos sistemas π. Este fraccionamiento alílico es ilustrado en el Esquema 6.. SG. RA DO. Esquema 6. m/e = 204. PO. m/e = 204. Como es característico en los hidrocarburos saturados, el nuevo catión. La eliminación de un catión alílico en el alqueno terminal. AL. un alqueno terminal.. DE. radicálico sufre múltiples migraciones del doble enlace, adquiriendo la estructura de. explica el pico base del espectro (m/e = 41) y los típicos fraccionamientos de las. DI G. IT. cadenas alifáticas indican la serie de agrupamientos homólogos de señales en torno. A. a 189, 175, 161, 147, 133, 119, 105, 91, etc.. TE C. El análisis de los espectros de masas de las diferentes fracciones del aceite de Satureja sericeae indica la presencia de los siguientes compuestos 4-metil-1-(1-. IO. metiletenil)-biciclo[3.1.0]hexano,. α-pineno,. camfeno, sabineno, β-pineno, β-. BI BL. mirceno, p-cimeno, 1,8-cineol, 1,3,6-octatrieno, γ-terpineno, linalool, cis-5-metil-2-. isopropil-ciclohexanona, biciclo[2.2.1]heptan-2-ol,. 1-metil-4-isopropil-ciclohexanol, 1-(7)-3,8-0-mentatrieno,. pulegona,. 1,7,7-trimetil-. α-copaeno, β-. bourboneno, trans-carifileno, α-humuleno, aromadendreno-2, biciclogermacreno, δcadineno, nerolidol.. -46-. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.