Características fisicoquímicas y efecto del aceite esencial de las hojas de satureja boliviana sobre el íleon aislado de cavia porcellus”

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD FARMACIA Y BIOQUÍMICA. UI. M. IC. A. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. AC. IA. TESIS II. Y. BI. O Q. “CARACTERÍSTICAS FISICOQUÍMICAS Y EFECTO DEL ACEITE ESENCIAL DE LAS HOJAS DE Satureja boliviana SOBRE EL ÍLEON AISLADO DE Cavia porcellus”. FA R. M. PARA OPTAR EL GRADO ACADÉMICO DE:. DE. BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA. CA. AUTORES:. IO TE. Alvarado Oruna, Cesar Sneider. BI. ASESOR:. BL. Aroca Sevillano, Eduard Diego Alonso. Dra. Q.F. Marilú Roxana Soto Vásquez. Co-ASESOR: Dr. Q.F. Iván Quispe Díaz. TRUJILLO – PERÚ 2017. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA. A ti mi Dios mío por no abandonarme, por ayudarme a levantarme, en mis fracasos por aprender de ellos y principalmente por permitirme realizar. UI. M. IC. A. todos mis sueños…. O Q. A mis padres Wilson y María que me dieron la vida y estuvieron. BI. conmigo en todo momento.. Y. Gracias por todo papa y mama por darme una carrera para mi. IA. futuro y por creer en mí; aunque hemos pasado momentos. AC. difíciles siempre han estado apoyándome y brindándome su. M. amor. Por todo esto les agradezco de corazón y este trabajo es. IO TE. CA. DE. FA R. para ustedes…. BL. A mi hermana Yoselin por estar conmigo. BI. siempre y apoyarme siempre y a todos mis tíos, abuelos y primos los quiero mucho…. Cesar Alvarado Oruna. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A Dios por ser mi guía, cuidar de mí y toda mi familia y no abandonarnos espiritualmente, y siendo un motivo para la alcanzar todos mis objetivos y metas…. IC. incondicional sin esperar nada a cambio.. A. A los motores de mi vida, mis padres Elvira y Eduard por su apoyo. UI. M. Gracias mamá por la motivación diaria, estando siempre atrás mío. O Q. guiando mis pasos para la superación y con tus palabras nunca me dejaste decaer y aprender a ser perseverante.. BI. Gracias papá por el apoyo, palabras incondicionales y confianza;. IA. Y. esto es una manera de retribuirles su amor llenándolo de gozo al. FA R. M. AC. saber que logre uno de mis anhelos.. DE. A mis hermanas Marine, Marice, Lucero, Mafer y Maricielo a. CA. pesar de momentos difíciles siempre estamos unidos; tíos,. BI. BL. IO TE. abuelos, primos y sobrino los quiero mucho…. Y por último está dedicado a las personas que han influenciado en mi vida, dándome buenos consejos, guiándome y haciéndome una persona de bien…. Diego Aroca Sevillano. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTO. Nuestro agradecimiento en primer lugar a Dios por darnos salud. A nuestro profesores, que hoy pueden ver un reflejo de lo que han formado y que sin duda han calado hondo en nuestras vidas, permitiéndonos. IC. A. fortalecernos como estudiantes y a su amor que hemos visto en el desarrollo. O Q. UI. M. profesional.. BI. A nuestra asesora la Dra. Q.F. Marilú Roxana Soto Vásquez y co-asesor Dr.. por ser excelentes profesores como. AC. Universidad Nacional de Trujillo,. IA. Y. Q.F. Iván Quispe Díaz docentes de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la. FA R. M. personas; y brindaron su apoyo desde el primer momento, por darnos esa oportunidad de trabajar con ellos y a la vez trasmitir sus conocimientos hacia. DE. nosotros que han sido tan útiles en el desarrollo de esta tesis. Gracias por. CA. confiar en nosotros y por la exigencia que hizo dar un esfuerzo cada día y. IO TE. también a nuestra casa de estudios la Universidad Nacional de Trujillo, en. BL. especial a nuestra Facultad de Farmacia y Bioquímica donde conocimos. BI. muchas personas que llevaremos siempre en nuestros corazones y. a las. instalaciones de la misma.. Los Autores. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. JURADO DICTAMINADOR. __________________________________________ Dr. José Gavidia Valencia. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. IC. A. PRESIDENTE. FA R. M. __________________________________________ Dra. Carmen Ayala Jara. BI. BL. IO TE. CA. DE. MIEMBRO. __________________________________________ Dra. Marilú Soto Vásquez MIEMBRO. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN. Señores miembros del Jurado Dictaminador:. De conformidad con las Disposiciones Legales y vigentes del. A. Reglamento de Grados y Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la. M. IC. Universidad Nacional de Trujillo, sometemos a vuestro elevado criterio el. BI. O Q. UI. presente informe intitulado:. FA R. M. AC. IA. Y. “CARACTERÍSTICAS FISICOQUÍMICAS Y EFECTO DEL ACEITE ESENCIAL DE LAS HOJAS DE Satureja boliviana SOBRE EL ÍLEON AISLADO DE Cavia porcellus”. Facultad. de. Farmacia. y. Bioquímica,. y. manifestar. nuestro. CA. gloriosa. DE. Aprovechamos para manifestar nuestra honra por pertenecer a la. IO TE. reconocimiento a toda su plana docente de alta calidad, que influenciaron en. BL. nuestra formación profesional.. BI. Dejamos a vuestro criterio señores miembros del jurado dictaminador la calificación del presente trabajo de investigación científica.. Los Autores. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. INDICE. DEDICATORIA …………………………………………………………… i AGRADECIMIENTO ……………………………………..……………….ii. IC. A. JURADO DICTAMINADOR ……………………………….……………..iii. O Q. UI. M. PRESENTACION …………………………………………………………iv. Y. BI. RESUMEN ……………………………………………..………………….1. AC. IA. ABSTRACT …………………………………………………………..……2. FA R. M. INTRODUCCION …………………………………………..……………..3. DE. OBJETIVOS ………………………………………………..…………….13. IO TE. CA. MATERIAL Y METODOS …………………..……………..……………14. BL. RESULTADOS …………………………………………….……………..30. BI. DISCUSION ……………………………………………..………………..36 CONCLUSIONES ……………………………………….……………….42 REFERENCIAS ……………………………………….………………….43 ANEXOS ………………………………………………..…………………49. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. El presente trabajo tuvo como objetivo determinar las características fisicoquímicas y evaluar el efecto del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana sobre íleon aislado de Cavia porcellus. Para la obtención del aceite esencial se utilizo el método de hidrodestilación de Clevenger con un rendimiento de 1.33%. A partir de la obtención del aceite esencial se determino. IC. A. las características organolépticas que fueron olor agradable; color amarillento;. UI. M. sabor freso y mentolado y textura aceitosa, la densidad relativa, el pH y el. O Q. índice de refracción del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana. Y. BI. fueron 0.876, 5.37 y 1.481 respectivamente; posteriormente para determinar el. IA. efecto antiespasmódico del aceite esencial Satureja boliviana se evaluó. M. AC. concentraciones al 0.05%, 1.0%, 2.5% y 5.0% sobre las contracciones inducida. FA R. por acetilcolina, respecto a la amplitud y frecuencia en el íleon aislado,. DE. utilizando seis especímenes de Cavia porcellus. Se utilizo como medicamento. CA. patrón el N-metilbromuro de hioscina. Se concluyo que el tratamiento de aceite. IO TE. esencial de las hojas de Satureja boliviana 0,5% a la dosis de 0,2mL fue el. BL. más efectivo (p < 0,05) en comparación a los demás tratamientos de 0,25%,. BI. 0,1%, 0,05%; pero no tanto como el tratamiento de N-Butilbromurohioscina (p < 0,05), sobre la motilidad inducida por la acetilcolina referente a la amplitud y la frecuencia en íleon aislado de Cavia porcellus.. Palabras claves: Satureja boliviana, aceite esencial, antiespasmódico.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT The present work had as objective to determine the physicochemical characteristics and to evaluate the effect of the essential oil of the leaves of Satureja boliviana on ileum isolated from Cavia porcellus. To obtain the essential oil, the Clevenger hydrodistillation method was used with a yield of 1.33%. From the obtaining of the essential oil we determined the organoleptic. IC. A. characteristics that were pleasant smell; Yellowish color; Strawberry and. UI. M. mentholate flavor and oily texture, relative density, pH and refractive index of. O Q. the essential oil of Bolivian leaves were 0.876, 5.37 and 1.481 respectively; To. BI. determine the antispasmodic effect of the essential oil Satureja boliviana was. IA. Y. evaluated concentrations at 0.05%, 1.0%, 2.5% and 5.0% on the contractions. AC. induced by acetylcholine, regarding the amplitude and frequency in the isolated. FA R. M. ileum, using six specimens of Cavia porcellus . Hyoscine N-methylbromide. DE. was used as the standard drug. It was concluded that the treatment of essential. CA. oil of leaves of Satureja boliviana 0.5% at the dose of 0.2mL was the most. IO TE. effective (p <0.05) compared to the other treatments of 0.25%, 0, 1%, 0.05%; But not so much as the treatment of N-Butylbromurohioscine (p <0.05), on. BI. BL. acetylcholine-induced motility related to the amplitude and frequency of ileum isolated from Cavia porcellus.. Key words: Satureja boliviana, essential oil, antispasmodic.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCION. El dolor es una sensación desencadenada por el sistema nervioso. El dolor puede ser agudo o sordo. Puede ser intermitente o ser constante. Puede sentir dolor en algún lugar del cuerpo, como en la espalda, el abdomen, el pecho o la pelvis. Los espasmos abdominales. IC. A. aparecen en forma de crisis provocando dolor o una sensación de. UI. M. molestia abdominal, que puede durar desde unos pocos segundos a. O Q. varias horas o incluso días. Puede deberse a una obstrucción del. BI. intestino delgado o una inadecuada digestión normalmente son. AC. FA R. M. en el tránsito digestivo 1, 2.. IA. Y. acompañados de otros síntomas como náuseas, vómitos o alteraciones. DE. En los últimos debates y congresos de urgencias se ha llegado a. IO TE. CA. la conclusión que el dolor abdominal es la causa más frecuente de consulta médica y de enfermería urgente, es un motivo frecuente de. BI. BL. consulta constituyendo un 10% en el ámbito hospitalario y subiendo hasta un15% en atención primaria, aunque en muchas ocasiones es de causa banal. El espasmo abdominal, de igual manera, en pediatría general en un 2 a 4%, como en gastroenterología infantil en un 7 a 25% de las consultas de acuerdo a estudios internacionales. Un estudio poblacional demostró que el 28-46% de los niños en edad escolar se quejan de dolor abdominal semanalmente. 3,4. .. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Puede aparecer como consecuencia de una patología abdominal, pero también aparecer de forma espontánea sin causa aparente. A veces, los espasmos pueden ocurrir debido a la indigestión crónica. También puede ocurrir si la persona tiene un desequilibrio hormonal o si ingiere algo que es difícil de digerir. A veces, los espasmos intestinales. A. también pueden ser de naturaleza idiopática. Otra condición llamada. M. IC. síndrome del intestino irritable, que también se conoce como colon. Y. BI. O Q. UI. espástico, también puede conducir a espasmos intestinales5, 6.. AC. IA. El intestino delgado (ID), se encuentra subdividido en: duodeno,. FA R. M. yeyuno e íleon. El duodeno tiene la forma de una "U" o una "C" y se sitúa alrededor de la cabeza del páncreas. Se extiende desde el píloro a. DE. la flexura duodenal, donde se encuentra el ligamento de Treitz que fija a. CA. esta parte del intestino, a la pared posterior del abdomen (caracterizado. IO TE. por ausencia de mesenterio). El ligamento de Treitz es la marca. BL. anatómica del inicio del yeyuno. Este, convencionalmente, mide 2/5 del. BI. intestino distal al duodeno (alrededor del 40% de longitud intestinal), mientras que los restantes 3/5, se conocen como íleon debido a que no existe un límite macroscópico definido entre ambos; el ID es el órgano de absorción y digestión alimenticia más importante en el organismo6, 7.. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La. motilidad. gastrointestinal. o. peristaltismo. consiste. en. contracciones de secciones sucesivas del músculo liso circular, provocando el movimiento del contenido intestinal en forma anterógrada, controlados por el tronco cerebral. La segmentación se realiza por contracciones y relajaciones sucesivas y alternantes de la musculatura circular del tubo digestivo. Los segmentos de contracción presentan una. A. longitud de 1 a 4 centímetros y el tiempo de cada contracción es de unos. M. IC. 5 segundos. El número y frecuencia de segmentaciones es mayor a nivel. O Q. UI. duodenal y desciende en dirección al íleon. La función más importante. BI. es el "amasado" que se produce entre el quimo y las secreciones, estos. FA R. M. AC. IA. Y. son los principales tipos de movimientos intestinales8, 9.. Existen mecanismos que explican cómo se genera la contracción. DE. del musculo liso. Son varios los agonistas que se unen a receptores. CA. específicos y activan la contracción del músculo liso. Subsecuentemente. IO TE. a esta unión, la respuesta de las células es incrementar la actividad de la C,. generando. segundos. mensajeros. a. partir. del. BL. fosfolipasa. BI. fosfatidilinositol 4, 5 bifosfato de la membrana; diacilglicerol (DAG) e inositol 1,4,5trifosfato (IP3), los cuales permitirán la entrada del calcio a nivel citoplasmático. El calcio se une a calmodulina provocando la activación de la cinasa de la cadena ligera de la miosina (MLC cinasa), la cual fosforila la cadena ligera de miosina, y junto con la actina llevan a cabo el proceso iniciando el acortamiento de la célula del músculo liso8, 9,10. .. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Sin embargo, la elevación en la concentración de calcio dentro de la célula es pasajera, y la respuesta contráctil es mantenida por un mecanismo sensibilizado por el calcio proporcionado por la inhibición de la actividad de la miosina fosfatasa por Rho cinasa. Este mecanismo sensibilizado al calcio es iniciado al mismo tiempo que la fosfolipasa C es activada, e involucra la activación de la pequeña proteína RhoA unida. A. a GTP. La naturaleza precisa de la activación de RhoA por el receptor. M. IC. acoplado a proteína G no es completamente clara, pero involucra un. O Q. UI. factor de intercambio del nucleótido guanina (RhoGEF) y migración de. BI. RhoA a la membrana plasmática. Por encima de la activación, RhoA. Y. incrementa la actividad de la Rho-cinasa, conduciendo a la inhibición de. AC. IA. la miosina fosfatasa. Esto fomenta el estado contráctil, ya que la cadena. DE. FA R. M. ligera de miosina no puede ser desfosforilada10, 11.. CA. Con respecto al tratamiento farmacológico más empleados de los. IO TE. espasmos abdominales tenemos a los fármacos anticolinérgicos. BL. muscarínicos que son fármacos capaces de bloquear la acción de la. BI. acetilcolina sobre sus receptores muscarínicos presentes en el músculo liso intestinal y las glándulas exocrinas. Sobre la motilidad intestinal, reducen significativamente el tono muscular y la frecuencia y amplitud de las contracciones, lo que redunda en un enlentecimiento del tránsito intestinal. Se prefieren compuestos con nitrógeno (N) cuaternario que supuestamente actúan más selectivamente en los plexos ganglionares mientéricos11, 12.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Entre. los. fármacos. anticolinérgicos. que. actúan. más. selectivamente en los plexos ganglionares mientéricos tenemos: el efecto espasmolítico del bromuro de butilescopolamina, solo o asociado a tiamazol (metimazol) u oxazepam ha sido muy utilizado con éxito en pacientes con SII (síndrome del intestino irritable) durante las fases de hipermotilidad acompañada de espasmos y diarrea motora. Otros. A. preparados utilizados con éxito son el bromuro de otilonio a dosis de 40. M. IC. mg administrados cada 8 horas, y el bromuro de pimaverio 50 mg cada 8. O Q. UI. horas. La utilidad real de todos estos fármacos en el tratamiento de las. BI. alteraciones motoras digestivas (cólicos, espasmos o distonías) continúa. FA R. M. AC. IA. Y. siendo muy controvertida13.. DE. En los últimos años se retomó el interés por las plantas. CA. medicinales y aromáticas, que crecen en forma silvestre, atendiendo a. IO TE. sus crecientes campos de aplicación industrial: fines farmacéuticos,. BL. alimenticios, cosméticos, perfumísticos. Además, no sólo son de interés. BI. por la presencia de ciertos principios activos sino por la acción combinada que los componentes de sus aceites esenciales ejercen con efectos terapéuticos. En este último aspecto es conveniente seleccionar plantas de la región donde son utilizadas porque su composición y características varían con las condiciones del suelo, clima, altura, etc., con la probable variación en sus propiedades físicas, químicas, y también en su acción14.. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Los aceites esenciales son compuestos formados por varias substancias orgánicas volátiles, que pueden ser alcoholes, acetonas, cetonas, éteres, aldehídos, y que se producen y almacenan en los canales secretores de las plantas. Normalmente son líquidos a temperatura ambiente, y por su volatilidad, son extraíbles por destilación en corriente de vapor de agua, aunque existen otros métodos. En. O Q. UI. M. IC. A. general son los responsables del olor de las plantas 15.. BI. Se definen, según AFNOR (2006), como: “Productos obtenidos a. Y. partir de una materia prima vegetal, bien por arrastre con vapor, bien por. AC. IA. procedimientos mecánicos a partir del epicarpio de los Citrus, o bien por. FA R. M. destilación seca. El aceite esencial se separa posteriormente de la fase acuosa por procedimientos físicos en los dos primeros modos de. DE. obtención; puede sufrir tratamientos físicos que no originen cambios. BI. BL. .. IO TE. 17. CA. significativos en su composición (por ejemplo, redestilación, aireación) 16,. Los aceites esenciales son usados como agentes carminativos, estimulantes, diuréticos y antireumáticos; algunos poseen propiedades insecticidas, antifúngicas y antibacterianas frente a microorganismos patógenos y han sido considerados como ingredientes activos en algunos plaguicidas botánicos, debido a su eficacia frente a un número. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. considerable de plagas, su toxicidad mínima en mamíferos y su disponibilidad general 16,17.. Dentro de las plantas que poseen aceite esencial tenemos a la. M. IC. A. Satureja boliviana.. O Q. UI. La Familia Lamiaceae (221 géneros y 5600 especies), entre ellas,. usadas. con. objetivos. alimenticios,. terapéuticos. o. Y. perennes,. BI. Salvia officinalis pertenecientes a esta Familia, son especies anuales y. AC. IA. sencillamente ornamentales, cuyas propiedades provienen de sus. FA R. M. aceites esenciales, constituyentes principales la alfa y beta tujona; alcanfor; 1,8 cineol; las cuales brindan propiedades antisépticas,. DE. antibacterianas, antiespasmódicas, carminativas, expectorantes, etc. Así. CA. mismo también tenemos a Minthosta chysmollis Griseb. (peperina). IO TE. subarbusto del NO y centro del país que se usa en la preparación de. BL. infusiones por sus propiedades digestivas. Mentha x rotundifolia. BI. (L.) Huds. (Yerba buena) la infusión de sus hojas se utiliza como digestivo,. contra. dolores. de. estómago,. contra. menstruaciones. abundantes y como somnífero18.. Con. respecto. al. género. Satureja,. tienen. características. aromáticas y medicinales. Los aceites esenciales tanto como las partes. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. aéreas de estas especies tienen sabor distintivo, las hojas, flores y tallos son usados como infusión y en medicina tradicional, para tratar dolores musculares, náuseas, diarreas, como antiespasmódico, enfermedades infecciosas18, 19.. A. La Satureja boliviana; del género Satureja (Familia Lamiaceae);. M. IC. crecen en la zona alto andina de Perú, Bolivia y noroeste de Argentina. Y. BI. O Q. UI. reciben la denominación genérica popular de “orégano del inca” 18, 19.. AC. IA. Según estudios realizados esta especie presenta las siguientes. FA R. M. características: es subarbustiva y de perenne con una altura promedio entre 60- 80cm. de longitud, hojas pequeñas muy aromáticas, flores después. de. DE. abundantes. la. estación. de. lluviosa,. su. habitad,. CA. preferentemente en la zona de estudio es en el talud de las carreteras. BI. BL. IO TE. laderas adyacentes18, 19.. Se ha realizado el estudio Botánico, Etnobotánico y Físico Químico de la Satureja boliviana, que validan científicamente sus propiedades farmacológicas: antisépticas, antiespasmódicas (problemas de estómago, cólicos y empachos), analgésicas, antiescabióticas, carminativo, etc. También es utilizado como conservante de alimentos frescos como insecticida y ectoparaticida 18, 19.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Investigaciones Fitoquímicas de la Satureja boliviana, evidencian los siguientes metabolitos: monoterpenos, grupos cetonicos, compuestos fenólicos, flavonoides, sesquiterpenos. Así mismo en reportes de investigación se evidencia que en el aceite esencial contiene: monoterpenos y sesquiterpenos. El principal compuesto es gammaterpinene, E-cariofileno, germacreno-D y biciclogermacreno. También se. A. encuentran Hidrocarburos monoterpenos, monoterpenos oxigenados,. M. IC. hidrocarburos sin sesquiterpénicas y sesquiterpenos oxigenados, timol,. Y. BI. O Q. UI. 1,8 cineol, linalol, carvacrol, etc20.. AC. IA. La Satureja boliviana, al contener cincuenta y seis componentes. FA R. M. químicos, en su aceite esencial, estaría dándole una alta bioactividad farmacológica al extracto vegetal en conjunto. Este género Satureja es. DE. caracterizado por poseer grupos funcionales cetonicos (mentona,. CA. pulgenona e isomentona), es un potente antiséptico y biocida, se. IO TE. relaciona con las propiedades antiespasmódicas y carminativas, el grupo. BL. funcional alcohol (linalol), es un antimicrobiano moderado, estomacal y. BI. también carminativo; los diferentes metabolitos mencionados actúan de manera sinérgica con los componentes mayoritarios 20, 21.. Estudio desarrollado por Hajhashemi V, Sadraei H, Jhon W, Güllüce, donde concluyen que el principal compuesto del aceite de los géneros Satureja fue el timol y carvacrol. Este último es el responsable. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. de las actividades biológicas como: antimicrobiano, antigenotóxicas, analgésico,. antiespasmódico,. antiinflamatorio,. antiparasitarios,. antiplaquetario, inhibición del dolor, insecticida, antihepatotóxica y hepatoprotector. Y en un estudio realizado en comparación con el diciclomina,. se. comprobó. que. tiene. una. similar. actividad. antiespasmódica, y además, que inhibe la hiperactividad contráctil del. A. íleon en ratones en comparación con el aceite de ricino, haciendo que. M. IC. tenga actividad antidiarreica en base a tratamientos de problemas. Y. BI. O Q. UI. gastrointestinales21, 22.. AC. IA. Existe gran cantidad de productos terapéuticos hechos a base de. FA R. M. plantas medicinales y su uso por la población ha ido en aumento, bajo la creencia de que las plantas medicinales son inocuas por ser naturales.. DE. Sin embargo, esta falsa creencia hace que inmersos en un tratamiento. CA. farmacológico se presenten fallas terapéuticas, ya que al igual que los. IO TE. medicamentos, las plantas medicinales pueden producir efectos. BL. secundarios, cuadros de toxicidad y contraindicaciones que son muchas. BI. veces ignoradas22.. Con lo antes mencionado y conociendo la mega diversidad de plantas medicinales en nuestro país sabemos que toda existencia en el planeta depende de las plantas y no estando ajenos a las propiedades que tienen sus aceites esenciales. Planteamos esta investigación para. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ampliar nuestros conocimientos científicos en el valor que tiene Satureja boliviana, con sus múltiples propiedades, en especial el efecto antiespasmódico.. IC. A. OBJETIVO. Determinar las características fisicoquímicas y evaluar el efecto del. Y. -. BI. O Q. UI. M. OBJETIVO GENERAL.. AC. IA. aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana sobre íleon. DE. FA R. M. aislado de Cavia porcellus.. Determinar el rendimiento y las características organolépticas del. BL. -. IO TE. CA. OBJETIVOS ESPECÍFICOS.. BI. aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana.. -. Determinar las características fisicoquímicas como densidad relativa, índice de refracción, pH; del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. - Evaluar el efecto del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana al 0.05%, 0.1%, 0.25% y 0.5% sobre la motilidad inducida por la acetilcolina referente a la amplitud y la frecuencia en íleon aislado de Cavia porcellus.. MATERIAL Y METODO. IC. A. II.. O Q. UI. M. 2.1 MATERIALES. IA. Y. BI. 2.1.1Material Botánico. AC. Las muestras de Satureja boliviana procedentes de la Isla. FA R. M. del Sol, Distrito Copacabana, Provincia Manco Capac, Bolivia; la cual fue identificada y depositada en el Herbarium Trujillenses. IO TE. CA. DE. (HUT) (Trujillo).. BI. BL. 2.1.2 Material biológico. Se utilizóseis especies de Cavia porcellus, de ambos. sexos, con peso entre 350-450 g, procedentes del Bioterio de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo.. Los especímenes seleccionados tuvieron un periodo de aclimatación de una semana antes del experimento. Así mismo se 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. controló su microambiente; con jaulas adecuadas para su tamaño e individuales para evitar la sobre densidad, con alimento a base de panca choclo. En el ambiente, se evitó el uso de desinfectantes que emanen olores, que sean irritantes y mucho menos desodorizantes dentro del bioterio, minimizando el ruido excesivo e intermitente en el ambiente de alojamiento de los. A. especímenes, mediante la no utilización de radios, celulares,. M. IC. alarmas y otros generadores de sonido, aun con auriculares o. O Q. UI. audífonos y con un ciclo luz/oscuridad de 12 horas (luz a las 07:00. Y. BI. am).. -. Cámaras. FA R. M. AC. IA. 2.1.3 Equipos:. de. baño. de. órgano. aislado. de. 25. mL,. DE. PanlabML1110. -. Tanque de agua de 32X19X60 cm, plexiglás (60ºC max), vol. BI. BL. -. IO TE. 50.. CA. Termostato, Panlab serie 0505482, V230, A4.1, W 960, Hz. -. 8 L. Transductor. de. fuerza. isométrica. o. isotónica,. AD. instruments, rango 10mg-25g resolución +/- 5mg, MLT0210. -. Bridge pod, AD instruments, ML 301.. -. Powerlab 26 T, AD instruments, V 100, mA20, ML 856.. -. Bomba de oxígeno, Gong Yang Bang, HP 100.. -. Estufa eléctrica “Memmert”. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. -. Balanza analítica “Sartorius”. -. Equipo Clevenger – extracción de aceites volátiles.. A. 2.1.4 Material de vidrio y porcelana. Mortero y pilón.. -. Pipetas 1 y 5 ml.. -. Vasos de precipitación de 50 y 100 ml.. -. Fiolas de 500 y 1000 ml.. DE. 2.1.5 Reactivos. FA R. M. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. IC. -. Cloruro de calcio.. -. Bicarbonato de sodio.. -. Glucosa anhidra.. -. Cloruro de sodio.. -. Cloruro de potasio.. -. Cloruro de magnesio.. -. Fosfato monobásico de sodio.. -. Hidrogeno fosfato de dipotasio.. -. Agua destilada.. -. Acetilcolina.. BI. BL. IO TE. CA. -. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.1.6 Medicamentos:. - N- metil bromuro de Hioscina.. -. Tijeras rectas.. -. Pinza de disección recta.. IC. Pinzas mosquito curvas.. BI. O Q. UI. M. -. A. 2.1.7 Material quirúrgico. M. AC. IA. Y. 2.1.8 Otros. Jeringas de 1 cc.. -. Viales de 5 cc, color ámbar.. -. Algodón hidrofílico.. -. Termómetro.. -. Placas petri.. BL. IO TE. CA. DE. FA R. -. BI. -. Papel filtro.. -. Cocina eléctrica.. -. Frascos color ámbar.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2 MÉTODO. 2.2.1 Diseño. Estudio experimental con estimulo creciente 23. FASE: Determinación de la amplitud frente a acetilcolina.. E1´. E1. Grupo 1. UI. M. IC. A. Água. Grupo 1 (x). O Q. Satureja boliviana 0.5%. Grupo 2. BI. Grupo 2 (x). Y. Satureja boliviana1%. Grupo 3. AC. IA. Grupo 3 (x). M. Satureja boliviana2.5%. FA R. Grupo 4 (x). Grupo 4. Satureja boliviana5%. Grupo 5 (x). CA. DE. Grupo 5 Hioscina. Grupo 6. BL. IO TE. Grupo 6 (x). BI. LEYENDA: E1: Estuvo conformado por el íleon de Cavia porcellus, que fue sometida a la secuencia de los seis grupos. x: Acetilcolina x: Fue aplicadas según secuencia de orden respectivamente.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.2 Procedimiento. 2.2.2.1 Recolección e identificación taxonómica:. Se recolectó un kilogramo de la planta de Satureja. A. boliviana “orégano del inca” de la Isla del Sol, Distrito. M. IC. Copacabana, Provincia de Manco Capac, Bolivia.. O Q. UI. Un ejemplar completo de la planta fue identificado y depositado. FA R. M. AC. IA. Y. Universidad Nacional de Trujillo.. BI. con el código Nº 58166 en el Herbario Truxillense (HUT) de la. DE. 2.2.2.2 Preparación de la muestra:. IO TE. CA. a. Selección. BL. La planta recolectada fue transportada al laboratorio de. BI. Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, donde se eliminaron las sustancias extrañas presentes en la muestra.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. b. Lavado. Luego de la separación de las sustancias extrañas, se procedió a lavar la planta entera (hojas y tallo) con agua destilada, seguido de una desinfección donde se utilizó hipoclorito de sodio,. A. a una concentración de 200 ppm.. O Q. UI. M. IC. c. Secado. BI. Se colocó la planta entera (hojas y ramas) sobre papel. Y. kraft, se secó a temperatura ambiente y por últimose separó las. FA R. M. AC. IA. hojas de los tallos.. 2.2.2.3 Obtención del aceite esencial de las hojas de Satureja. CA. DE. boliviana “orégano del inca”24, 25. IO TE. El aceite esencial fue extraído a partir de las hojas (secas). BL. por el método de hidrodestilación en equipo Clevenger. Se pesó. BI. 100 g de hojas (secas) y se colocaron en un balón y se agregó 400mL de agua destilada y finalmente se calentó hasta punto de ebullición. durante. 3. h.. Como. producto. del. proceso de. condensación se obtuvo dos fases una de aceite esencial y otra del agua; posteriormente se separó el aceite esencial y se tuvo que deshidratar las impurezas de agua en el aceite esencial con Na2SO4 anhidro, se filtró y se guardó en un frasco de vidrio color. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ámbar. (para. evitar la. descomposición por la luz),. bajo. refrigeración a una temperatura de 4oC.. 2.2.2.4 Determinación del rendimiento de aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana “orégano del inca”24, 25. A. A partir de 100 g de hojas de Satureja boliviana“orégano. M. IC. del inca”, se obtuvo un determinado volumen que fue medido.. O Q. UI. Por el método gravimetría-volumétrico para lo cual se determinó el. BI. porcentaje de rendimiento del aceite esencial (%RAE), donde. AC. IA. Y. aplicamos la siguiente fórmula:. FA R. M. %RAE = Vol. AE (mL)/ Pmuestra (g) x 100. DE. Dónde:. CA. Vol. AE: Volumen del aceite esencial obtenido en mililitros.. BL. IO TE. Pmuestra: Peso de la muestra a destilar en gramos.. BI. 2.2.2.5 Preparación de las diferentes concentraciones del aceite esencial hojas de Satureja boliviana “orégano del inca”24, 25. Se tomaron del aceite esencial puro (100%), volúmenes de 0,05mL, 0,1mL, 0,25mL y 0,5mL y, se colocaron en una fiola de 10mL. Luego se completó a volumen con Tween 80, para obtener. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. las concentraciones de 0,5%, 1,0%, 2,5% y 5,0% (v/v) respectivamente.. Posteriormente, se colocaron cada concentración en frascos de color ámbar, para protegerlas de la luz. Las diluciones. M. IC. A. se guardaron a 4 ºC para el estudio farmacológico.. BI. O Q. UI. 2.2.2.6 Características fisicoquímicos del aceite esencial 24, 25. AC. IA. Y. A. Determinación de las características organolépticas.. FA R. M. Los caracteres organolépticos incluyen olor, color, sabor y. DE. textura.. IO TE. CA. a. Determinación de olor. BL. Se tomó una tira de papel secante de aproximadamente 1. BI. cm de ancho por 10cm de largo y se introdujo en un extremo en la muestra de ensayo, después de oler se determinó la característica del producto que se reconoce como un factor de calidad que puede afectar en la aceptabilidad.. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. b. Determinación del color. Se llenó en un tubo de ensayo, bien limpio y seco, hasta las tres cuartas partes con la muestra de ensayo, se observó el color, la transparencia, la presencia de partículas y la separación en. A. capas.. procedió. a. degustar. pequeña. alícuota. y. AC. IA. Y. técnicamente se evaluóel sabor.. una. BI. Se. O Q. UI. M. IC. c. Determinación del sabor. FA R. M. d. Determinación de textura. BL. IO TE. CA. consistencia.. DE. Se colocó una alícuota y se sintiócon el tacto la textura y. BI. B. Determinación de la densidad relativa. Se pesó el picnómetro vacío y seco, se llenó con la porción de ensayo, manteniendo la temperatura de 25 °C (±1°C) durante 15 min y luego se ajustó el líquido al nivel empleado. Se pesó cuidadosamente el picnómetro con la porción de ensayo y se repitió la operación con el agua destilada a 25 °C.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Expresión del resultado. La densidad relativa a 25 ° C se calculó por la siguiente fórmula.. M1 - M ------------------. A. D25 =. M. IC. M2 - M. O Q. UI. Dónde:. BI. M1: peso del picnómetro con la muestra (g). Y. M2: peso del picnómetro con el agua (g). AC. IA. M: peso el picnómetro vacío (g).. DE. FA R. M. Los resultados se aproximan hasta la tercera cifra.. IO TE. CA. C. Determinación del índice de refracción. BL. Se colocó sobre el prisma de medición una gota de agua. BI. destilada, se utilizó para ello una varilla de vidrio que no tenga cantos agudos, se ajustó el equipo seleccionando la zona del espectro visible que aparece en la línea límite del campo visual, moviendo el compensador cromático y colocando la intersección del retículo sobre la línea límite de los campos claro y oscuro. Después de haber realizado el ajuste del refractómetro, se colocó una gota de la muestra de ensayo sobre el prisma de medición, se. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. cerró el termo prisma y se enfocó la luz por medio del espejo, de modo tal que la misma incida sobre la apertura de entrada del prisma de medición.. D. Determinación del pH. A. Se ajustó el equipo con la solución reguladora de pH. M. IC. adecuada al rango en que se realizó la determinación,. O Q. UI. posteriormente se determinó el valor del pH del aceite. Los. Y. BI. resultados se dieron apreciando hasta la décima.. FA R. M. AC. IA. 2.2.2.7 Preparación de la solución Tyrode 24, 25, 26. Se añadió 64 g de cloruro de sodio en un recipiente de. DE. plástico que contiene 4 L de agua destilada, se agitó hasta. CA. disolución, luego se añadió 1.6 g de cloruro de potasio, 1.6 g de. IO TE. cloruro de calcio, 0.08 g de cloruro de magnesio y agitó hasta. BL. disolución, se agregó 2 L de agua destilada, posteriormente se. BI. añadió 0.4 g de fosfato de sodio monobásico, 8 g de glucosa anhidra, 8 g de bicarbonato de sodio hasta disolución, finalmente se agregó agua destilada hasta completar los 8 L. Esta solución fue preparada 1 hora antes del trabajo experimental.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.2.8 Preparación del íleon de Cavia porcellus24, 25, 26. . Aislamiento del íleon de Cavia porcellus. Los especímenes se privaron de alimentos 24 horas antes del experimento y se siguió los lineamientos o criterios éticos en. IC. A. base al comité institucional de ética para el uso de animales en. UI. M. experimentación (CIEA) y normas internacionales para el manejo. O Q. y sacrificio de animales de experimentación27.. BI. El sacrificio de los especímenes será mediante dislocamiento. IA. Y. cervical (CIEA)27. Posteriormente se abrió la cavidad abdominal. AC. mediante incisión longitudinal para extraer un segmento de íleon,. FA R. M. que se colocó en una placa petri para ser lavado (para retirar los. DE. residuos del contenido intestinal), con solución de Tyrode y. CA. temperatura de 37° C. Se cortó un segmento de 3 cm y se fijó con. BI. BL. IO TE. hilo de seda Nº6/0, sin ocluir la luz intestinal.. . Montaje del íleon de Cavia porcellus. Para el montaje de la preparación se utilizó, baño de órgano de 25mL conteniendo solución Tyrode a 37°C con aireación constante.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.2.9 Determinación de la amplitud frente a acetilcolina 24, 25, 26. . Evaluación del efecto del agua destilada sobre el íleon aislado, respecto a la amplitud. A. Se dejó estabilizar la muestra de íleon, al menos, por 20. M. IC. minutos y luego se añadirá 0.2mL de acetilcolina 5x10-4M y en la. O Q. UI. mayor amplitud se agregó 0.2mL de agua destilada al órgano. BI. aislado, se registró el tono por 10 minutos, luego se realizó el. IA. Y. lavado de la cámara de órgano aislado (2 veces) y se dejó. Evaluación del efecto de Satureja boliviana 0.5%, sobre el. DE. . FA R. M. AC. estabilizar la muestra por 10 minutos.. IO TE. CA. íleon aislado, respecto a la amplitud. BL. Se añadió a cada cámara de órgano aislado 0.2mL de. BI. acetilcolina 5x10-4 M, y en la mayor amplitud se agregó 0.2 Ml Satureja boliviana 0.5%, se registró el tono durante 10 minutos, luego se realizó el lavado de la cámara de órgano aislado (2 veces) y se dejó estabilizar la muestra por 10 minutos.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. . Evaluación del efecto de Satureja boliviana 1%, sobre el íleon aislado, respecto a la amplitud. Se añadió a cada cámara de órgano aislado 0.2mL de acetilcolina 5x10-4 M, y en la mayor amplitud se agregó 0.2mL Satureja boliviana 1%, se registró el tono durante 10 minutos,. A. luego se realizó el lavado de la cámara de órgano aislado (2. Y. Evaluación del efecto de Satureja boliviana 2.5%, sobre el. IA. . BI. O Q. UI. M. IC. veces) y se dejó estabilizar la muestra por 10 minutos. FA R. M. AC. íleon aislado, respecto a la amplitud. Se añadió a cada cámara de órgano aislado 0.2mL de. DE. acetilcolina 5x10-4 M, y en la mayor amplitud se agregó 0.2mL. CA. Satureja boliviana 2.5%, se registró el tono durante 10 minutos,. IO TE. luego se realizó el lavado de la cámara de órgano aislado (2. BI. BL. veces) y se dejó estabilizar la muestra por 10 minutos.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. . Evaluación del efecto de Satureja boliviana 5%, sobre el íleon aislado, respecto a la amplitud. Se añadió a cada cámara de órgano aislado 0.2mL de acetilcolina 5x10-4 M, y en la mayor amplitud se agregó 0.2mLSatureja boliviana 5%, se registró el tono durante 10. A. minutos, luego se realizó el lavado de la cámara de órgano. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. IC. aislado (2 veces) y se dejó estabilizar la muestra por 10 minutos.. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III.. RESULTADOS. Tabla 1. Rendimiento del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana Örégano del Inca¨.. Satureja boliviana. 100g.. 1,33. desviación Estándar. A. Media (n=3). IC. Cantidad. 0,0057. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. Especie. FA R. M. Tabla2. Características Organolépticas del aceite esencial de las hojas de. IO TE. CA. DE. Satureja boliviana Örégano del Inca¨.. Descripción. Olor Color Sabor Textura. Agradable Amarillo Fresco y mentolado aceitoso. BI. BL. CaracterísticasOrganolépticas. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla3. Características Físico-químicas del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana Örégano del Inca¨.. Desviación estándar. Densidad relativa. 0,876. 0.0005. pH. 5,37. Índice de Refracción. 1,481. IC M UI. 0.0111 0.0003. Y. BI. O Q. Características Fisicoquímicas. A. Satureja boliviana (n=3). IA. Análisis de la Varianzadel efecto del aceite esencial de las hojas de. AC. Tabla 4.. DE. FA R. M. Satureja boliviana sobre la amplitud en el íleon aislado de Cavia porcellus.. ANOVA (p<0,05; Nivel de confianza 95%). SUMA DE CUADRADOS. IO TE. gl. MEDIA CUADRATICA. F. Sig.. 0,133. BL. 5. 44,657. 4,733. 0,001. 9,435. BI. Entre grupos. CA. AMPLITUD. Dentro de grupos. 0,413. 30. Total. 0,546. 35. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 5. Test de Tukey del efecto del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana sobre la amplitud en el íleon aislado de Cavia porcellus.. HSD Tukey AMPLITUD 1. N-butilbromurohioscina. 6. 0,0475. Satureja boliviana 0,5%. 6. Satureja boliviana 0,25%. 6. Satureja boliviana 0,1%. 6. Satureja boliviana 0,05%. 6. agua destilada. 6. 3. O Q. 0,1613. UI. 0,0492. Y. BI. 0,1287. IA. Sig.. 2. IC. N. M. TRATAMIENTO. A. Subconjunto para alfa = 0,05. 0,2122 0,2265. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. 0,05. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. IC. A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. Grafico 1. Boxplot del efecto del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana sobre la amplitud en el íleon aislado de Cavia porcellus.. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 6. Análisis de la Varianzadel efecto del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana sobre la frecuenciaen el íleon aislado de Cavia porcellus.. ANOVA (p<0,05; Nivel de confianza 95%) FRECUENCIA gl. MEDIA CUADRATICA. F. Sig.. Entre grupos. 142,556. 5. 4,658. 4,991. 0,001. Dentro de grupos. 1278,667. 30. 8,546. Total. 1421,222. 35. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. IC. A. SUMA DE CUADRADOS. FA R. M. Tabla7. Test de Tukey del efecto del aceite esencial de las hojasSatureja. DE. boliviana sobre la frecuencia en el íleon aislado de Cavia porcellus.. IO TE. FRECUENCIA. CA. HSD Tukey. BI. BL. TRATAMIENTO N-butilbromurohioscina Satureja boliviana 0,5% Satureja boliviana 0,25% Satureja boliviana 0,1% Sauteja boliviana 0,05% agua destilada Sig.. Subconjunto para alfa = 0,05 2 3 0,0433 0,0494 0,1333 2,5 5,6667 5,8333 0,05. N 6 6 6 6 6 6. 1. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. IC. A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Grafico 2. Boxplot del efecto del aceite esencial de las hojas Satureja boliviana sobre la frecuencia en el íleon aislado de Cavia porcellus.. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. En el presente trabajo titulado “Características Fisicoquímicas y Efecto del aceite esencial de hojas de Satureja boliviana sobre íleon aislado de Cavia porcellus”, se muestra que los resultados presentan variables asociadas que fortalecen la investigación, lo cual satisface y da un valor significativo parael aporte cientísta, no solo por la dedicación puesto en el. O Q. UI. M. IC. A. sino tambiénser un estudio que enriquece al conocimiento.. Y. BI. Por ello el estudio conundiseñometodológico bien estructurado, cuya. IA. finalidad fue el análisis fisicoquímico del aceite esencial de Satureja. M. AC. boliviana que para ello serealizóuna serie de ensayos, en primera instancia. FA R. se orientó a la caracterizacióndel aceite esencial de la planta y luego. IO TE. CA. DE. evaluar el efecto farmacológico.. BL. En la Tabla 1 se observa el rendimiento del aceite esencial de las hojas. BI. de Satureja boliviana, obteniéndose por cada 100 gramos de hojas secas 1,33mL de aceite esencial que hacen un rendimiento promedio (n=3) de 1,33% con desviaciónestándar de 0,057 lo cual disminuye el probabilidad de algún error y que el valor sea confiable.. Según el organismo de Ciencia y Tecnología para el desarrollo (CYTED Argentina), cuando los valores de rendimiento son menores a 5 ml/kg se 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. consideran bajos, los valores entre 5ml/kg y 10 ml/kg intermedios y los valores superiores a 10 ml/kg altos, entonces podemos inferir que de acuerdo a esta categoría, nuestra experiencia resultó el porcentaje de rendimiento 1.33% (13,3mL/Kg) lo cual indica que el valor es alto.Según el estudio de Urunaga y Acurio, titulado “Investigación de la Satureja boliviana, planta medicinal y andina”, reporta un rendimiento de 10,2mL por. A. kilogramo de planta es decir 1,02%28. Por otro lado según el estudio Viturro. M. IC. y Juarez, titulado “Evaluación de la composición de los aceites esenciales. O Q. UI. de los géneros de Saturejas como S. boliviana, S. odora y S. parvifolia”,. BI. reporta los datos de porcentajes de rendimiento enS. boliviana 0,22 a 0,31. Y. %;S. Odora 0,56% y S. parvifolia0,96%20. Otro estudio realizado por Ricald. AC. IA. y Martínez, titulado “Cromatografía de gases – espectrometría de masas de. FA R. M. compuestos fitobioactivos de aceite esencial de Satureja incana”, obtiene como rendimiento de 0,49% en hojas secas29, por lo cual podemos inferir. DE. que el géneroSatureja tiene uníndice de rendimiento intermedio – alto, así. CA. mismo los datos obtenidos del aceite esencial del presente trabajo de. BI. BL. IO TE. investigación se encuentran dentro de este rango. En la Tabla 2 se aprecia las características organolépticas del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana Örégano del Inca¨, cuya descripción de las mismas son un olor agradable, color amarillo, sabor fresco y mentolado y por último la textura aceitosa. Así mismo SegúnCarhuapoma M., López S., Veliz F., en el estudio “Composición química, actividad antioxidante y toxicidad aguda del aceite esencial de. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Satureja pulchella “Panizara””, reportan que el aceite esencial presenta un color ligeramente amarillo y textura aceitosa 30. Por otro lado,. Sare O.,. Varas S., en el estudio “Característicasfisicoquímicas y efecto del aceite esencial de las hojas de Satureja brevicalyx epling”, reporta que el sabor es alcanforado y ligeramente picante, el olor es aromático y textura aceitosa22, entonces podemos inferir a partir de estos estudios que en su. O Q. UI. M. IC. A. mayoría el géneroSatureja presenta características agradables al gusto.. BI. En la Tabla 3 se muestra las características fisicoquímicas del aceite. Y. esencial de las hojas deSatureja boliviana Örégano del Inca¨, donde el. AC. IA. aceite esencial presenta valores promedios de densidad relativa de 0.876 a. FA R. M. una temperatura de 25 °C, pH de5,37; índice de refracciónde 1.481 Estos valores al contrastar con otros trabajos de investigación, según Urunaga y. DE. Acurio reportan para la misma especie valores de densidad de 0,9247 a 20. CA. ºC28. Por otro lado otros estudios realizados al género Satureja; Ricald y. IO TE. Martínez, obtienen una densidad relativa de 0,9816 a 20 ºC del aceite. BL. esencial de Saturejaincana29. En el estudio de Jaramillo B.; Stashenko E.;. BI. Martínez J.; titulado “Composición química volátil de Satureja brownei, colombiana y determinación de su actividad antioxidante”, refieren que la densidad relativa fue de 0,904731. Encomparaciónconlos resultados obtenidos podemos concluir que existe una relativa igualdad entre la familia Laminaceae y género Satureja, sin embargo, debemos tener en cuenta la metodología de extracción del aceite esencial y las condiciones climáticas que pueden influenciar en los resultados.. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Respecto al pH, los aceites esenciales normalmente son soluciones ácidas, sin embargo, existen algunas excepciones. El pH ácido de un aceite esencial explica en parte las propiedades bactericidas, fungicidas y viricidas que muchos de ellos presentan. Como ya antes mencionado el pH del. A. aceite esencial de Satureja boliviana está en el margen de aceptabilidad y. M. IC. comparando con otros estudios de plantas del mismo género es muy. Y. BI. O Q. UI. semejante32.. AC. IA. El índice de refracción de una sustancia dada es la relación entre la. FA R. M. velocidad de un rayo de luz en el vacío y la velocidad de la luz a través de la sustancia. Por conveniencia práctica se refiere a la relación aire sustancia.. BL. IO TE. CA. ángulo de refracción33.. DE. Es igualmente la relación del seno del ángulo de incidencia al seno del. BI. En el presente trabajo el valor de índice de refracción (1,481), se encuentra cercano a los valores reportados trabajos de investigación del aceite esencial de Satureja incana (1,487)29; Satureja puchella (1,475)30 y Satureja brevicalyx (1,498)22.. En la Tabla 4 se reportan los valores del análisis de la varianza del efecto del aceite esencial de Satureja boliviana sobre la amplitud en el. 39 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. íleon aislado de Cavia porcellus,donde los resultados respecto al parámetro de la amplitud que representa la altura de las ondas emitidas por el sistema, lo cual refiere a la intensidad. Se tuvo en cuenta un intervalo de confianza del 95%y. se observóuna diferenciasignificativa (p < 0,001) al. hacer la comparación entre grupos de tratamiento en la motilidad inducida con respecto a la amplitud y para saber la diferencia existente en aquellos. son. significativos. y. cuales. difieren,. IC. tratamiento. el. N-. M. cuales. A. grupos conlleva al análisis Post Hoc – Test de Tukey (Tabla 5), para ver. O Q. UI. Butilbromurohioscina, medicamento que sirvió como referencia, seguido de. BI. las diferentes concentraciones de Satureja boliviana ordenas por. Y. efectividad; siendo el aceite esencial de Satureja boliviana al 0.5% (0.2mL). AC. IA. el más efectivo sobre las contracciones inducidas por acetilcolina respecto a. que. existe. diferencia. FA R. M. la amplitud en íleon aislado de Cavia porcellus, por ello podemos inferir significativas. entre. los. tratamientos. de. N-. DE. butilbromurohioscina y el de Satureja bolivianaal 0,5%, (p< 0,05), y los. CA. demás tratamientos no difieren entre ellos. Como también es representado. IO TE. en el grafico 1 donde se aprecia el boxplot, en el cual, la mediana del. BL. tratamiento deSatureja boliviana al 0,5% es efectivo pero no tanto como el. BI. tratamiento de N-butilbromurohioscinaconun P < 0,0522, 34.. En la Tabla6 se muestra los valores del análisis de la varianza obtenidos del efecto del aceite esencial de Satureja boliviana sobre la frecuencia en el íleon aislado de Cavia porcellus, se presenta los resultados respecto al parámetro de la frecuencia que representa el número de contracciones. 40 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. (ondas) que ocurren en la unidad de tiempo, se cuantifica a partir de la base (valle) de una, hasta la base de la siguiente.La frecuencia está relacionada con la fase de la relajación del músculo. La relajación del músculo liso se da como resultado de remover estímulos contráctiles o por la acción directa de una sustancia que estimule la inhibición del mecanismo contráctil, donde de igual modo se aplicó el test de ANOVA, donde al comparar los grupos se. A. observóuna diferencia significativa (p = 0,001), por ende se aplicó la análisis. M. IC. de Post Hoc- Test de Tukey ( Tabla 7), de igual modo el medicamento sirvió se. O Q. UI. como padrón y los tratamientos están ordenados por efectividad;. BI. observó que el tratamiento del aceite esencial de la Satureja Boliviana al 0,5. Y. % es efectivo pero no tanto como el tratamiento de N-butilbromurohioscina. AC. IA. (p=0,05), en comparación con los demás tratamientos en los cuales no. FA R. M. existe diferencia significativa. De igual modose observóen el grafico 2 el diagrama de boxplot, se aprecia que en el segundo cuartil de ambos. DE. tratamientos de Satureja boliviana al 0,5% y N-Butilbromurohioscina la. compuestos. químicos. IO TE. los. CA. semejanza pero no igualdad, la posible actividad terapéutica se le atribuye a como. el. linalol,. mentona,. pulgenona,. BL. biciclogermacreno, germacreno-D y carvacrol acetato, los cuales son. BI. encontrados en el aceite esencial del género Satureja boliviana22, 35, 36.. 41 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.. CONCLUSIONES. - El rendimiento del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana fue de 1.33% y las características organolépticas del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana fueron, olor agradable; color. IC. A. amarillento; sabor fresco y mentolado y textura aceitosa.. UI. M. - Las características fisicoquímicas del aceite esencial de las hojas de. O Q. Satureja boliviana fueron de densidad de 0.876; pH de 5,37 e índice. IA. Y. BI. de refracción de 1.481.. M. Cavia porcellus. fue antiespasmódico;. FA R. el íleon aislado de. AC. - El efecto del aceite esencial de las hojas de Satureja boliviana sobre. obteniéndose que la concentración de 0.5% a la dosis de 0.2mL fue. DE. la más efectiva (p<0,05) que los otros tratamientos de aceite esencial,. IO TE. CA. sin embargo, mostró menor efecto que el tratamiento de NButilbromurohioscina (p<0,05), sobre la motilidad inducida por la. BI. BL. acetilcolina referente a la amplitud y la frecuencia en íleon aislado de Cavia porcellus.. 42 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(50) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. REFERENCIAS. 1. Celada, J.; Dolor Abdominal y Abdomen Agudo. 2004. Fecha de acceso: 25. de. noviembre. del. 2015.. Disponible. en:. http://remi.uninet.edu/descarga/dolorabdominal.pdf 2. Organización Mundial de la Salud. Dolor Abdominal. Organización. IC. A. Panamericana de la Salud. 2004. Fecha de acceso: 25 de noviembre del. UI. M. 2015. Disponible en: http://sld.cu/galerias/pdf/sitios/gericuba/guia12.pdf. O Q. 3. Hernández C.; Aguilera G.; Castro E.; Situación de las enfermedades. Y. BI. gastrointestinales en México. 2011. Fecha de acceso: 02 de diciembre. IA. del 2015. enfinfmicrobiol 2011. 31. 4: 137-151. Disponible en:. M. AC. http://www.medigraphic.com/pdfs/micro/ei-2011/ei114f.pdf. FA R. 4. Errázuriz G.; Corona H.; Dolor Abdominal de origen Orgánico en niños y. del. 2015.. 22. v.2.. pag.. 168-175.. Disponible. en:. CA. noviembre. DE. adolescentes. Rev. Med. Clin. Condes. 2011. Fecha de acceso: 29 de. IO TE. http://www.clc.cl/clcprod/media/contenidos/pdf/MED_22_2/4_Dr_Errazuri. BL. z.pdf. C.;. Abordaje. práctico. de. los. trastornos. funcionales. BI. 5. Moliner. gastrointestinales. Pediatra EAP.2010. Fecha de acceso: 30 de noviembre. del. 2015.. pag.. 277-278.. Disponible. en:. http://www.aepap.org/congresos/pdf_reunion_2010/gastro.pdf 6. Ferrufino C.; Histología normal del intestino. 2005. Fecha de acceso: 30 de. noviembre. del. 2015.. Disponible. en:. http://www.scielo.org.pe/pdf/rmh/v7n1/v7n1tr2.pdf. 43 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.