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“Frecuencia de Escherichia coli productoras de Beta lactamasas de espectro extendido aislados de muestras de orina de pacientes con infecciones urinarias atendidos en clínica particular de Trujillo 2017”

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICA. IC AS. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE. AS. BI O. LO. G. MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. DE. CI. EN CI. “Frecuencia de Escherichia coli productoras de Betalactamasas de espectro extendido aislados de muestras de orina de pacientes con infecciones urinarias atendidos en clínica particular de Trujillo - 2017”.. TESIS. CA. PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE:. TE. BIÓLOGO - MICROBIÓLOGO. BI. BL. IO. AUTOR: Br. RIOJA RAMÍREZ CARMEN MARIA Br. MARTIN ZAVALETA KATHERINE ASESOR: Dr. LUIS ALBERTO LLENQUE DÍAZ TRUJILLO – PERÚ 2017. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G. Dr. ORLANDO GONZÁLES NIEVES. IC AS. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. EN CI. AS. BI O. LO. RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. CI. Dr. RUBÉN VERA VÉLIZ. BI. BL. IO. TE. CA. DE. VICE-RECTOR ACADÉMICO DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. Dr. STEBAN ALEJANDRO ILICH ZERPA. SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G. LO. Dr. FREDDY ROGGER MEJIA COICO. IC AS. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. EN CI. AS. BI O. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. CI. Dr. WILLIAM ZELADA ESTRAVER. BI. BL. IO. TE. CA. DE. SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Dra. BERTHA SORIANO BERNILLA DIRECTORA DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. IC AS. Señores Miembros del Jurado:. G. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados y Títulos. LO. de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y Parasitología de la Facultad de. BI O. Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, pongo a vuestra consideración y elevado criterio la presente Tesis titulada:. “Frecuencia de Escherichia coli productoras de Beta-lactamasas de espectro extendido. AS. aislados de muestras de orina de pacientes con infecciones urinarias atendidos en clínica. EN CI. particular Trujillo- 2017” con el cual pretendo obtener el Título Profesional de Biólogo. Trujillo, Enero del 2018. TE. CA. DE. CI. Microbiólogo.. BI. BL. IO. Br. Carmen María Rioja Ramírez. Br. Martin Zavaleta Katherine. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. CERTIFICACION DEL ASESOR. G. El que suscribe, profesor asesor de la Tesis titulada:. LO. “Frecuencia de Escherichia coli productoras de Beta- lactamasas de espectro. atendidos en clínica particular Trujillo- 2017”. BI O. extendido aislados de muestras de orina de pacientes con infecciones urinarias. AS. Que ha sido desarrollada, de acuerdo al reglamento establecido por la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, estando en conformidad con su. EN CI. correspondiente proyecto, y que el informe ha sido redactado acogiendo las observaciones y. CI. sugerencias alcanzadas.. DE. Por lo tanto, autorizo a la Br. Carmen María Rioja Ramírez y Br. Katherine Lizeth. CA. Martin Zavaleta continuar con el trámite del reglamento correspondiente.. BL. IO. TE. Trujillo, Enero 2018. BI. _________________________________ Dr. Luis Alberto LLenque Diaz ASESOR. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G. LO. Dr. RAÚL ANHUAMÁN AZABACHE. IC AS. MIEMBROS DEL JURADO. EN CI. AS. BI O. PRESIDENTE. CI. Dr. LUIS LLENQUE DIAZ. BI. BL. IO. TE. CA. DE. SECRETARIA. Ms.C. DAVID ZAVALETA VERDE VOCAL. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACION Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que. IC AS. el presente informe de tesis ha cumplido con los requisitos formales y. BI O. LO. G. fundamentales, siendo aprobado por unanimidad.. Dr. RAÚL ANHUAMÁN AZABACHE. CI. EN CI. AS. PRESIDENTE. SECRETARIA. BI. BL. IO. TE. CA. DE. Dr. LUIS LLENQUE DIAZ. Ms.C. DAVID ZAVALETA VERDE VOCAL. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIAS A Dios. IC AS. Ante todo gracias a Dios, por guiarme, cuidarme, darme la voluntad y fuerza para no dejarme vencer por las adversidades y estar conmigo en todos los momentos de mi vida.. LO. G. A mi madre Rocio,. BI O. Por creer en mi capacidad como profesional, por su ayuda incondicional, por darme esa fuerza, motivación y empuje para lograr mis objetivos, por inculcar en mi sabio don de. AS. la responsabilidad, siempre serás el pilar fundamental en mi vida ¡Gracias por estar siempre. EN CI. conmigo!. A mi tía Anita y ABUELITOS. CI. Por su sacrificio y esfuerzo al darme una carrera, por sus sabios consejos que me. A mi tío German. CA. DE. ayudaron a seguir adelante para que sea perseverante y cumpla con mis ideales.. Estaré eternamente agradecida contigo, tú supiste encaminarme por el buen camino. A mi familia. BL. IO. TE. de ser una buena profesional, desde el cielo te siento tan cerca.. BI. Por estar conmigo y por llenar mi vida de alegría en cada momento, a pesar de la. distancia siempre les tengo presento.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. DEDICATORIAS. G. A:Dios. BI O. DE. CI. EN CI. AS. A mí amado hijo Sebastián Por ser la luz y la fuerza que me impulsa a ser cada día mejor. LO. Porque sin Él, nada es posible, por colocarme en el mejor camino, iluminando cada paso de mi vida. Vidal y Luisa Gracias por ser mi inspiración, fortaleza y motivación. Gracias por su incesante lucha en esta vida por darme siempre lo mejor, por sus sabios consejos y enseñanzas. Por estar junto a mí y servirme de guía en los momentos más difíciles y sus palabras de aliento para salir adelante en todo momento.. BI. BL. IO. TE. CA. A mis padres. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. AGRADECIMIENTO. A mi asesor, Dr. Luis Alberto Llenque Díaz, por brindarme su tiempo, apoyo y dedicación, así como las sugerencias constructivas durante el desarrollo de la presente. LO. G. investigación, además por brindarme su amistad y conocimientos académicos durante mi. AS. BI O. formación profesional.. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. .. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. IC AS. La presente investigación descriptiva, tuvo por objetivo determinar la frecuencia de Escherichia coli productoras de Beta-lactamasas de espectro extendido (BLEE) en pacientes. G. con infecciones urinarias atendidos en la clínica Trujillo - 2017. La muestra estuvo. LO. constituida por 209 urocultivos. Se utilizó Método de difusión en disco (Kirby-Bauer) para detectar E. coli productoras de BLEE y el Método de Jarlier (Comité de la Sociedad Ϩ. BI O. Francesa de Microbiología) para determinar la presencia de BLEE. Se aisló 209 cultivos. AS. de pacientes con infecciones urinarias atendidos en una clínica particular Trujillo; 70 de estos (33.5%) dieron positivos para Escherichia Coli y 139 (66.5%) dieron negativo. Se identificó. EN CI. los cultivos de Escherichia coli en las 70 muestras que dieron positivo para E. Coli (Tabla 1) el 37.5% (26 cultivos) dieron positivo para BLEE. 62.5 % (44 cultivos) dieron negativo para producción de BLEE. Se determinó la producción de beta-lactamasas de espectro. CI. la. DE. extendido en los cultivos identificados con Escherichia coli. De los 26 cultivos que presentaron BLEE 19.2% (5 cultivos) presentaron producción BLEE frente a ceftazidima,. CA. 26.9% (7 cultivos) presentaron producción de BLEE frente a la Ceftriaxona, 73.1% (19. TE. cultivos) presentaron producción de BLEE frente al aztreoanam, y un 61.5% (16 cultivos). IO. presentaron producción de BLEE frente a la cefotaxima,. BI. BL. Palabras Clave: Escherichia Coli, Betalactamasa, Espectro extendido, Infecciones urinarias.. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT The objective of this descriptive investigation was to determine the frequency of Escherichia. IC AS. coli producing extended-spectrum beta-lactamases (ESBL) in patients with urinary infections attended in a particular clinic Trujillo - 2017. The sample consisted of 209 uro cultures. Disc. G. diffusion method (Kirby-Bauer) to detect E. coli producing ESBL and the Jarlier Method. LO. (Committee of the French Society of Microbiology) to determine the presence of ESBL. We. BI O. isolated 209 cultures of patients with urinary tract infections attended in a particular clinic Trujillo; 70 of these (33.5%) tested positive for Escherichia Coli and 139 (66.5%) tested. AS. negative. Escherichia coli cultures were identified in the 70 samples that tested positive for E. coli (Table 1), 37.5% (26 cultures) tested positive for ESBL. 62.5% (44 crops) were. EN CI. negative for the production of ESBL. The production of extended-spectrum beta-lactamases was determined in the cultures identified with Escherichia coli. Of the 26 crops that presented. CI. ESBL 19.2% (5 crops) presented ESBL production against ceftazidime, 26.9% (7 crops). DE. presented ESBL production against Ceftriaxone, 73.1% (19 crops) presented ESBL. cefotaxime,. CA. production against aztreoanam, and 61.5% (16 crops) presented ESBL production against. BI. BL. IO. TE. Keywords: Escherichia Coli, Betalactamase, Extended Spectrum, Urinary Infection.. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INDICE Autoridades de la Universidad Nacional de Trujillo ........................................... ii. IC AS. Autoridades de la Facultad de Ciencias Biológicas ............................................. iii Presentación ......................................................................................................... iv. G. Certificado de Asesor ........................................................................................... v. LO. Miembros del Jurado ............................................................................................ vi. BI O. Aprobación ........................................................................................................... vii Dedicatoria............................................................................................................ viii. AS. Agradecimientos ................................................................................................... x Resumen ............................................................................................................... xi. EN CI. Abstract ................................................................................................................. xii Índice .................................................................................................................... xiii INTRODUCCIÓN .......................................................................................... 1. II.. MATERIAL Y MÉTODOS ........................................................................... 10. III.. RESULTADOS .............................................................................................. 14. IV.. DISCUSIÓN ................................................................................................... 18. V.. RESUMEN .................................................................................................... 22. VI.. RECOMENDACIÓN ..................................................................................... 23. BL. IO. TE. CA. DE. CI. I.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ........................................................... 24. BI. VII.. VIII.. ANEXOS.................................................................................................................. 34. xiii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN. IC AS. Las infecciones del tracto urinario (ITU) constituyen un importante problema de salud que afecta a millones de personas cada año en el mundo y son la segunda causa de. G. infección más frecuente en los humanos. Existe un renovado interés en estas infecciones. LO. dada su elevada prevalencia en poblaciones aparentemente sanas y porque su morbilidad. BI O. y mortalidad han permanecido estáticas, pese a que se dispone de nuevos y efectivos agentes antimicrobianos.1. AS. Las infecciones urinarias se definen como la presencia y multiplicación de. EN CI. microorganismos en el tracto urinario, desde la uretra hasta el córtex renal. Esto genera presencia de gérmenes en la orina y síntomas característicos del síndrome miccional. CI. como disuria, polaquiuria, tenesmo y dolor supra púbico presentándose con mayor frecuencia en mujeres y se estima que entre el 20 y el 50 % de ellas durante su vida. DE. presentan algún episodio de infección urinaria y entre el 25 y 30 % presentan posteriores. CA. infecciones recurrentes.2, 3. TE. Las infecciones de tracto urinario (ITU) son la complicación médica más frecuente en el. IO. embarazo, con una prevalencia de 7 a 10%. Además, un tratamiento inadecuado se asocia. BL. a un alto riesgo de padecer complicaciones maternas y fetales, que precisan de exámenes complementarios para su diagnóstico y terapia apropiada. Entre los factores de riesgo. BI. descritos en la literatura se encuentran, entre otros, aumento en la frecuencia de actividad sexual en el último mes, un nuevo compañero sexual en los últimos 12 meses, uso de espermicidas, la inserción de catéteres de drenaje o de derivación sobre la vía urinaria. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. posquirúrgicos y episodios previos de ITU. En adultos mayores, estos factores incluyen además la presencia de incontinencia urinaria, una pobre higiene del área genital o vivir. IC AS. en hogares de cuidado geriátrico.4, 5. Las ITU son producidas generalmente por bacilos gramnegativos (entero bacterias) de. G. los cuales la mayor frecuencia corresponde a serotipos de Escherichia coli, seguidas. LO. de Klebsiella spp, Proteus spp, Enterococos spp, Staphylococos spp, así como especies. BI O. de Pseudomonas y hongos del género Candida. Sin embargo, en la mayoría de los casos se desconoce el agente etiológico de la infección y la sensibilidad antimicrobiana. AS. correspondiente, por lo que resulta mucho más adecuada la realización del cultivo de las. EN CI. muestras de orina o uro cultivo, antes del inicio del tratamiento antibacteriano.6, 7. Muchos microorganismos pueden infectar las vías urinarias, entre ellos el de mayor. CI. prevalencia encontrado en los cultivos de orina es E. coli, afectando en mayor proporción. DE. a mujeres en edad fértil. El diagnostico de este tipo de infección se sustenta en el cuadro clínico, presencia en el uro análisis de leucocituria (leu ≥8 / ml3) y bacteriuria en. CA. cualquier cantidad; se confirma con el Gram de Orina Sin Centrifugar cuando se. TE. encuentra una o más bacterias por campo de alto poder y solo, si está indicado, por uro cultivo cuando se documenta la presencia de microorganismos en cantidad igual o mayor. IO. de 100.000 unidades formadoras de colonias (UFC) por ml de orina; por lo tanto el. BL. tratamiento inicial de esta enfermedad generalmente es empírico, siendo en la actualidad. BI. considerado una buena opción terapéutica.8,9. E. coli es una de las principales causas de infección en humanos tanto de origen nosocomial como comunitaria, el agente etiológico más frecuente en la infección del 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. tracto urinario y una de las causas principales de meningitis neonatal; también puede ocasionar una amplia variedad de infecciones intestinales y extra intestinales, como. IC AS. neumonía nosocomial, colecistitis y colangitis, peritonitis, celulitis, osteomielitis y artritis infecciosa, además de figurar como una de las causa más frecuentes de. G. bacteriemia. Todo esto supone un importante impacto médico y económico.10. LO. E. coli, contaminan las zonas perianal, perineal y genital, ingresan por la uretra y. BI O. ascienden hacia la vejiga, este mecanismo es por el cual se producen la mayoría de las ITUs y es llamada vía ascendente. Cuando las bacterias ascienden a la vejiga, colonizan. AS. el urotelio de la vejiga. Estas células tienen una membrana asimétrica apical el cual le. EN CI. sirve de barrera impermeable a la vejiga aunque también sirve como receptor de bacterias como E. coli uro patógena. E. coli se puede introducir a la vejiga adhiriéndose a la superficie vesical con ayuda de los pili tipo 1, y así penetrar y replicarse en el citoplasma. CI. celular luego las bacterias salen de su nicho intracelular y se adhieren a otras células del. DE. huésped, logrando así un ciclo infeccioso. Durante este proceso las células infectadas de la vejiga son arrojadas a la orina mientras que los neutrófilos son atraídos al sitio de la. TE. CA. infección. 11, 12. Existen diferencias en el perfil etiológico y el patrón de sensibilidad de los uro patógenos. IO. aislados en pacientes hospitalizados y no hospitalizados, debido a que los pacientes. BL. hospitalizados tienen mayor exposición a antibióticos, por lo tanto más riesgo de hacer. BI. resistencia. El fenotipo salvaje de E. coli presenta una gran sensibilidad a la mayoría de los tratamientos disponibles, aunque en las dos últimas décadas se ha producido un aumento de infecciones por patógenos multirresistentes, entre los que se encuentra E. coli. Este aumento de las resistencias ya ha sido recogido en diferentes estudios; a nivel 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. nacional la resistencia global en aislamientos urinarios llega en la ampicilina (AMP) al 58,7%, en el ciprofloxacino al 22,8% y al 33,9% en el trimetoprim-sulfametoxazol. IC AS. (SXT). 13, 14,15. Los betalactámicos son los antimicrobianos más utilizados; son activos frente a las Gram. G. positivas, Gram-negativas y Espiroquetas. Su eficacia está en continuo reto debido a la. LO. emergencia de cepas bacterianas resistentes que producen Betalactamasas de Espectro. BI O. Extendido (BLEE), un grupo de enzimas producidas por bacilos Gram-negativos que hidrolizan Cefalosporinas de amplio espectro, los Monobactàmicos y últimamente las. AS. Cefamicinas, pero no a los Carbapenèmicos. Las cuales son generalmente plásmidos y. las Cefotaximasas (CTX). 16,17. EN CI. derivan de otras enzimas con menor espectro hidrolítico; principalmente las del grupo de. CI. Las BLEE, son una familia de enzimas producidas por bacilos gramnegativos, que en su. DE. mayoría derivan de las betalactamasas clásicas TEM y SHV a partir de una serie de mutaciones puntuales que alteran su centro activo, como respuesta a la presión ejercida. CA. por el amplio uso a la cefalosporinas de tercera generación permitiéndoles modificar su. TE. perfil de sustrato, mejorando su capacidad de hidrólisis frente a los betalactámicos. Se han descrito más de 200 β-lactamasas diferentes, algunas son específicas para penicilinas. IO. (penicilinasas) o cefalosporinas (cefalosporinasas), mientras que otras tienen un espectro. BL. amplio de actividad (BEEAs), incluyendo algunas que son capaces de inactivar la. BI. mayoría de antibióticos β- lactámicos. Este último grupo BEEAs es problemático porque con frecuencia están codificadas en plásmidos y pueden transferirse de un organismo a otro. 18, 19. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Las Betalactamasas de Espectro Extendido tienen capacidad de hidrolizar y causar resistencia a penicilinas, oximino-cefalosporinas (cefotaxima, ceftriaxona, ceftazidima,. IC AS. cefepima) y monobactámicos (aztreonam), pero no a cefamicinas (cefoxitina) ni a carbapenémicos (imipenem, meropenem y ertapenem), siendo inhibidas por el ácido. G. clavulánico. Los genes que las codifican se encuentran en elementos móviles que facilitan. LO. su diseminación y con frecuencia presentan coresistencia a otros antibacterianos como. BI O. aminoglucósidos, cotrimoxazol y quinolonas.20. El uso de ciprofloxacina en microorganismos como E. coli, K. pneumoniae y P.. AS. aeruginosa añade un riesgo de selección de resistencia bacteriana a diferentes tipos de. EN CI. antibióticos por mecanismos como betalactamasas de espectro extendido (BLEE), carbapenemasas tipo KPC, activación de bombas de eflujo, cierre de porinas y mutaciones en el DNA, entre otros.. 25. El mecanismo más importante y utilizado por E.. CI. coli y K. pneumoniae es la producción de betalactamasas, enzima que degrada el anillo. DE. betalactámicos, base estructural de las penicilinas, cefalosporinas, carbapenems y. CA. monobactámicos. 21, 22.. TE. Según estudios sobre sensibilidad antimicrobiana realizados en patógenos urinarios E.. IO. coli es sensible a imipenem.23 En Japón se detectó la BLEE-FEC-1 en E. coli, la cual fue posteriormente detectada en Alemania, Argentina, Francia e Italia denominándose. BI. BL. BLEE-CTX-M. 17. En el Perú, se tienen reportes locales sobre el avance de la resistencia antimicrobiana en. varios hospitales en Lima, Arequipa y Cajamarca. Zavala 200624, reportó que el 81.89% de las Entero bacterias estudiadas fueron productoras de BLEE y determinó, además, que 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. este grupo poseía una mayor multirresistencia (12.9%) que el grupo no productor de BLEE (3.96%). Mercado 200725, en un estudio realizado en Trujillo en E. coli aislados. IC AS. de orina encontró que 44% son BLEE positivos. Rivera 200826, evaluó 45 cultivos de Entero bacterias de importancia clínica, de los cuales 12 presentaron BLEE, cuatro E.. G. coli y cuatro E. cloacae fueron los más relevantes.. LO. Otros estudio realizado por García 201127, reportó que E. coli es el microorganismo más. BI O. frecuentemente implicado en bacteriemias nosocomiales y comunitarias, y el aislamiento. AS. de cepas productoras de BLEE se sitúa en torno al 10%.. Yupanqui (2016)71 encontró de 220 cultivos de Escherichia coli aislados se detectó la. EN CI. producción de betalactamasa clásica y betalactamasa de espectro ampliado mediante la técnica yodométrica y de doble difusión en placa, respectivamente; encontrándose una. CI. frecuencia de betalactamasa clásica de 31,8% y de betalactamasa de espectro ampliado. DE. del 6,8%; al evaluarse estadísticamente estos valores fueron altamente significativos, en ambos (p<0,05). En cuanto a la producción de betalactamasa de espectro ampliado de los. CA. 15 cultivos de Escherichia coli en relación a los números de combinaciones de los. TE. antibacterianos usados como ceftazidima, cefuroxima, aztreonam y cefotaxima aplicando el test Chi cuadrado, se encontró que existe diferencia significativa (P<0,05) en su patrón. IO. de resistencia, presentando a aztreonam y cefotaxima como los antimicrobianos de mayor. BI. BL. aporte al test, con 11 y 9 cultivos resistentes, respectivamente. Paredes (2013)72 encontró en que la prevalencia de entero bacteriáceas productoras de BLEE entre Marzo -Agosto del 2012 en la Clínica Good Hope fue de 21.2%. Las entero bacteriáceas BLEE (+) aisladas proceden principalmente de las muestras para uro cultivo 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. (86.4%) y cultivo de secreción vaginal (11.0%), siendo el uro cultivo el examen en el cuál se detectó en mayor cantidad las entero bacteriáceas BLEE (+) de los pacientes. IC AS. hospitalizados (96.7%) y ambulatorios (86.4%). El 91.5% de las entero bacteriáceas BLEE (+) fueron detectadas en muestras de pacientes ambulatorios mientras que el 8.5%. G. fueron de muestras de los pacientes hospitalizados en la Clínica Good Hope. La co-. LO. resistencia a otros antibióticos por parte de las entero bacteriáceas BLEE (+) fue:. BI O. Escherichia coli a amoxicilina/ácido clavulánico, ciprofloxacino y sumetropin. La sensibilidad a otros antibióticos por parte de las entero bacteriáceas BLEE (+) aisladas. AS. fue: Escherichia coli a imipenem y amikacina.. EN CI. Además de los objetivos y las preguntas de investigación es necesario justificar las razones que motivan el estudio. La mayoría de las investigaciones se efectúan con un propósito definido y existen ejes de justificación, para que tenga bases más sólidas para. DE. CI. justificar su realización. Las razones que justifican la presente investigación son: Conveniencia: servirá para determinar el nivel de incidencia de Escherichia coli. CA. productoras de beta lactamasas de espectro extendido, contribuyendo a la comprensión. TE. de la evolución de resistencia de la bacteria E. Coli.. IO. Relevancia Social: permitirá beneficiar a la comunidad de salud, al tener conocimiento. BL. del nivel de crecimiento de la drogo resistencia de una de las causas principales de infecciones del tracto urinario, contribuyendo a la solución de este problema de salud de. BI. la sociedad. Implicancias prácticas: contribuirá aportando instrumentos, métodos, procedimientos sobre la determinación de frecuencia e incidencia de un microorganismo patógeno 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. determinado bajo determinadas condiciones (una clínica particular) contribuyendo a la comunidad de microbiólogos como referencia y consulta. Además de disponer de. IC AS. nuestros resultados para contrastar futuras investigaciones. Con respecto al valor teórico, y siguiendo las recomendaciones de (Hernández Sampieri;,. G. Fernández Collado, & Baptista Lucio, 2003) responde a la pregunta ?, ¿se podrá conocer. LO. en mayor medida el comportamiento de una o diversas variables o la relación entre ellas?,. BI O. y la principal frecuencia de E. coli es un tema desconocido en nuestra ciudad, y en clínicas particulares, en general existe pocos estudios, si bien existe el marco teórico, la. AS. aplicación de esta a nuestra realidad muestra un gran vacío, por lo que preciso analizar. EN CI. y documentar la naturaleza de este fenómeno en las condiciones estudiadas. Utilidad Metodológica: la presente investigación tiene utilidad metodológica, pues. CI. permite configurar variables de estudio adaptadas a la realidad investigada, dimensionarlas y adaptar instrumentos de medición y análisis a fin de que estas variables. DE. se puedan medir y analizar y de esta manera tener una idea objetiva, científica y técnica. OBJETIVOS:. CA. sobre la realidad que se investiga.. IO. TE. General Determinar la frecuencia de Escherichia coli productoras de Beta lactamasas de espectro. BL. extendido (BLEE) en pacientes con infecciones urinarias atendidos en la clínica particular. BI. Trujillo - 2017.. Específicos 1. Aislar cultivos de Escherichia coli a partir de muestras de orina de pacientes con infecciones urinarias atendidos en clínica particular de Trujillo - 2017 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2. Identificar los cultivos de Escherichia coli productoras de Beta-lactamasas de espectro extendido (BLEE) aislados a partir de muestras de orina en pacientes. IC AS. con infecciones urinarias atendidos en una clínica particular de Trujillo - 2017 3. Determinar la frecuencia de producción de Beta-lactamasas de espectro. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. extendido en los cultivos identificados con Escherichia coli.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y MÉTODOS. MATERIAL BIOLÓGICO. IC AS. 1.. 70 cultivos de Escherichia coli obtenidos en la clínica particular de Trujillo – 2017.. LO. Universo Muestral El universo muestral estuvo constituido por las muestras de orina de pacientes con. BI O. 1.1. G. (ANEXO 1).. infecciones urinarias en una clínica particular donde se realizó la investigación. AS. durante el periodo de investigación 1.2 Selección de la Muestra. EN CI. 1.2.1 Tamaño. La muestra estuvo constituida por 209 uro cultivos calculado a través de la. CI. fórmula para determinar el tamaño de las muestras en estudios de un solo. DE. grupo y que evalúa variables cualitativas73. Siendo la cantidad 209 urocultivos.. BI. BL. IO. TE. CA. El detalle del cálculo se detalla en el ANEXO 1.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PROCEDIMIENTO. 2.1. OBTENCIÓN DE CULTIVOS PUROS Los cultivos se identificaron diariamente a partir de la base de datos (informes de. IC AS. 2.. resultados en el laboratorio) de la clínica.. LO. G. Fueron separados todos aquellos que procedían de muestras de orina, y cuyo. BI O. patógeno encontrado fue Escherichia coli.. 2.1.1. Reactivación de cultivos Los cultivos de Escherichia coli, fueron inoculadas en Caldo Infusión Cerebro. EN CI. 2.1.2. Siembra en Agar Mac Conkey. AS. Corazón (BHI) e incubadas a 37 °C por 18 horas.. Del crecimiento en caldo BHI se procedió a sembrar por agotamiento en. DE. CI. medio sólido Agar Mac Conkey y se incubó a 37 °C por 24 horas.. CA. 2.2 PREPARACION DEL INOCULO. TE. Se procedió a preparar las suspensiones una de Escherichia coli aisladas en Agar Mac Conkey, con Solución Salina Fisiológica y se ajustó la turbidez al. BI. BL. IO. tubo 0.5 de la escala de Mc. Farland (1.5x108 UFC/mL).28. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.3. DETERMINACIÓN DE CULTIVOS PRODUCTORES DE BETALACTAMASAS DE ESPECTRO. IC AS. EXTENDIDO (BLEE).. 2.3.1Test de Tamizaje:. G. Método de difusión en disco (Kirby-Bauer).. LO. Se procedió a preparar agar Mueller Hintón (MH), se vertió en placas Petri y. BI O. luego de los 15 minutos de preparado se inoculó, se sembró, se secó en estufa por 5 minutos. Luego se procedió a colocar los. discos individuales de. AS. antibióticos: aztreonam (30 ug), cefotaxima (30 ug), ceftazidima (30 ug) y ceftriaxona (30 ug) 18, sobre la superficie del agar con la ayuda de una pinza. EN CI. estéril presionando suavemente sobre cada disco. Se incubó por 24 horas a 37°C. Lectura: si el cultivo evaluado presenta halos de inhibición, para al menos. CI. uno de estos antibióticos, iguales o inferiores a los diámetros referidos en las. DE. tablas de CLSI deberá realizarse un test confirmatorio de la presencia de BLEE. CA. (Beta-lactamasas de espectro extendido). 29 2.2.2. Test Confirmatorio:. TE. Método de Jarlier (Comité de la Sociedad Ϩ Francesa de Microbiología). test. IO. Los cultivos positivos al tamizaje anterior fueron evaluados con el. BL. confirmatorio para betalactamasas de espectro extendido (BLLE), según Clinical. BI. Laboratory Standars Insitute29. De cada cultivo se prepararó la suspensión en Solución Salina Fisiológica. ajustando la turbidez al tubo 0.5 de la escala de Mc. Farland. Después de 15 minutos se inoculó en la placa que contenía agár MH con un hisopo estéril 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. estriando en tres direcciones, y secado por 5 minutos en estufa. Posteriormente se colocó en el centro de la placa un disco con amoxicilina/ácido clavulánico. IC AS. (30/10 μg) y alrededor se colocaran a una distancia de 25 mm, discos con cefotaxima (30 μg), ceftazidima (30 μg), ceftriaxona (30 μg), y aztreonam (30. G. μg). E incubó a 37°C por 24 horas. Lectura: la presencia de una zona de. LO. inhibición que indica sinergia entre el antibiótico central con uno o varios de la periferia es un resultado positivo para la producción de Βlee (Beta-lactamasas de. BI O. espectro extendido).30. 31. , para verificar estadísticamente si existe relación significativa de la. producción. de. EN CI. Pearson. AS. 2.4 ANÁLISIS DE RESULTADOS Con los resultados obtenidos se los sometió al estadístico chi-cuadrado (X2) de. betalactamasa. ente. los. antibióticos. cefaloporinas. y. CI. monobactamicos, mediante el programa computarizado SPSS vr.17 con un grado. DE. de significancia de 0,05. Además se determinó mediante Estadística Descriptiva con Distribuciones de Frecuencias, Porcentajes y la prueba No Paramétrica Chi. BI. BL. IO. TE. CA. Cuadrada.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. RESULTADOS. En la tabla 1, también se aprecia que del total de los uro cultivos procesados (209), el 35.5%. LO. G. (70) fueron positivos (presencia de E. coli), en tanto que, el 66.5% (139) fueron negativos.. En la tabla 2 se aprecia que de los 70 cultivos de Escherichia coli (Tabla 1) el 37.5% (26. BI O. cultivos) presentaron halos de inhibición, a por lo menos a uno de los antibióticos evaluados,. AS. de igual o inferior tamaño de diámetro referido de la tabla de CLSI.. En la tabla 3 se puede apreciar que de los 26 cultivos de E. coli analizados, el 19.2% (5) son. EN CI. productoras de BLEE para ceftazidima, 26.9% (7) producen BLEE para Ceftriaxona, 73.1% (19) producen BLEE para aztreoanam, y un 61.5% (16) producen BLEE frente a la. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. cefotaxima.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 1 Frecuencia de Escherichia coli en muestras de orina de pacientes con. %. P. POSITIVAS. 70. 33.5. NEGATIVAS. 139. 66.5. TOTAL. 209. 100. G. URO CULTIVOS. AS. BI O. LO. MUESTRAS. IC AS. infecciones urinarias atendidos en una clínica particular Trujillo-2017.. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. Fuente: Base de datos laboratorio clínica particular de Trujillo.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 2 Frecuencia de cultivos de E. coli productores o no de BLEE aislados de. BLEE* CULTIVOS. P. %. POSITIVOS. 26. 37.5. NEGATIVOS. 44. TOTAL. 70. p < 0.05 Significativo. 100. AS. N: cultivos de Escherichia coli. p = 0.021. 62.5. BI O. Escherichia coli. G. N°. LO. ESPECIE. IC AS. muestras de orina en pacientes atendidos.. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. *detectada mediante el Método Doble Difusión en Placa.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 3 Producción de BLEE de los cultivos de Escherichia coli en relación a los antibacterianos evaluados, Ceftazidima, Ceftriaxona, Aztreonam y. IC AS. Cefotaxima aislados de muestras de orina de pacientes con infecciones urinarias en una clínica particular de Trujillo -2017.. G. LO. BI O. CI. DE. +. +. IO BL BI. p. EN CI. +. Ceftriaxona aztreoanam cefotaxima CRO ATM CTX + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 7 19 16 26.9 73.1 61.5. AS. ceftazidima CAZ +. TE. 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 Total %. Antibacterianos. CA. Cultivos de Escherichia coli N° 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16. + 5 19.2. 0.001 (p < 0.05). +: Cultivo productor de betalactamasas de espectro ampliado para el antibiótico evaluado.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN. IC AS. Nuestros resultados muestran un 33.5% de frecuencia de casos de Escherichia coli en las pacientes con infecciones urinarias (tabla 1), de las cuales un 37.5% mostraron positivos para. G. BLEE (tabla 2), estos resultados difieren con los hallados por Zavala (2006) quien reportó. LO. un 81.89%, la diferencia entre su estudio y el nuestro es que el antecedente lo realizó en. BI O. hospitales y el nuestro es en una clínica, donde las condiciones de higiene, el nivel socioeconómico y cultural de los pacientes es completamente diferente, así, en la clínica. AS. donde se realizó nuestro estudio, los pacientes tienen seguro privado, en el antecedente son. EN CI. pacientes precarios que demandan los servicios públicos.. Nuestros resultados se aproxima más a los hallados por Mercado (2007) en Trujillo, donde encontró un 44% de cultivos de E. Coli con BLEE, su investigación difiere de la nuestra en. CI. que también fue en un nosocomio público a diferencia del nuestro una clínica privada.. DE. Nuestros resultados encontraron mayor producción en Aztreonam, 73.1%, un 61.5% En. CA. Cefotaxima, de otro lado los antibióticos que presentaron más resistencia a la producción de BLEE fueron ceftazidima 19.2% y Ceftriaxona 26.9%. Estos difieren con Yupanqui (2013). TE. quien encontró también alta efectividad con la cefotaxima y aztreonam, sin embargo,. BL. IO. nosotros encontramos alta efectividad con ceftazidima y ceftriacona, Nuestros resultados coinciden con los de Paredes (2013) quien los realizó en una clínica de. BI. Lima, y encontró una prevalencia de 21.2%, sin embargo la resistencia encontrada fue a imipenem y amikacina, no se utilizaron los mismos antibióticos que en nuestro estudio. De los antecedentes y nuestro estudio, las poblaciones han estado sujetas a diferentes. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. exposiciones y usos previos de antibióticos y de microrganismos, lo que puede dar indicios de porque la diferencia de sensibilidades en los diferentes estudios.. IC AS. Con respecto a la presentación en otros países, en Estados Unidos y España se han observado una frecuencia de aislamiento de E. coli en uro cultivos de 73% y 64,17%. LO. presentado frecuencias de 75%-90%, 41.3% y 56%, respectivamente.. G. respectivamente3843. En Latinoamérica como Uruguay44, Mexico45, Venezuela46, se han. BI O. La importancia de determinar la cantidad de betalactamasa producida por un microorganismo pasa por el hecho de que una hiperproducción de la enzima podría ser causa de resistencia. AS. frente a inhibidores como el ácido clavulánico, subastan, entre otros; aunque un alto número. EN CI. de bacterias producen la enzima en grandes cantidades de forma inducida o constitutivamente de tal manera que este fenómeno inactivaría a todo antibiótico betalactamico, por ejemplo. CI. cuando la bacteria es capaz de adquirir secuencias de inserción de plásmidos en su gen promotor de betalactamasas, no se han hallado reportes que permitan comparar nuestros. DE. resultados. Por tanto si el grado de resistencia que determinan las betalactamasas se. CA. correlaciona con la concentración de la enzima producida y siendo estadísticamente igual en las cepas aisladas, esto indicaría una importancia semejantes en ellas, aun cuando sus. IO. TE. mecanismos de producción de la enzima podrían ser diferentes 48 Los resultados emitidos por Mendoza, Loayza, Sánchez y Yupanqui coinciden con lo. BL. obtenido en la Clínica , esto se debe a que la bacteria tiene la capacidad de sintetizar esta. BI. enzima al entrar en contacto con betalactámicos, puesto que la bacteria E. Coli puede poseer en forma nativa la información genética de plásmidos o genes cromosomales, necesaria para la producción de betalactamasa (de forma estable o estimulada por la exposición a un. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. antibiótico betalactámicos) o adquirir la capacidad de hacerlo por mutación en sus genes de resistencia por transferencia del DNA de una generación de cepa a otra49,50,51. La universidad. IC AS. Nacional del Nordeste Argentina, reporta a la bacteria gram negativa, E. Coli con más frecuencia de producción de betalactamasa clásica en pacientes ambulatorios con ITU 52,53.. 57,66. ; en cambio García reporto. LO. Sánchez quienes reportan más resistencia a aztreonam. G. E. Coli presento más resistencia a aztreonam y cefotaxima datos semjantes a Loayza y. BI O. resistencia a cefotaxima 56. Esto difiere con lo de Mendoza (2003), quien reporta resistencia a cefuroxima55. Según el MINSA, en el 2004, las cefalosporinas de tercera generación,. AS. cefotaxima, ceftazidima y aztreonam presentan mayor estabilidad frente a betalactamasas58.. EN CI. Estadísticamente fue significativo (P<0.05), es decir los valores obtenidos en cada grupo de antibiótico son diferentes, constituyendo mejores niveles de resistencia de E. Coli productora. CI. de BLEA para unos antibióticos más que otros.. Los determinantes genéticos de ADN que codifican las BLEA generan resistencia. DE. transferibles entre distintas cepas de la misma especie bacteriana facilitando su diseminación 68. que podría ser causa de resistencia frente a. CA. con incremento en su espectro de hidrolisis67,. inhibidores inactivando a ciertos antibióticos betalactámicos como cefalosporinas de tercera. TE. generación y monobactámicos. La resistencia se atribuye al uso incorrecto de antibiótico por. IO. desconocimiento del agente causal de la infección sin pruebas diagnósticas, retraso del inicio. BL. de una terapia, inadecuada duración del tratamiento, falta de un seguimiento periódico. BI. institucional de la misma para poder optimizar el tratamiento, controlar, limitar la resistencia a los betalactámicos y disminuir la mortalidad del paciente69.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. La resistencia de microorganismos a los antibióticos se trata de un problema progresivo con tendencia a empeorar si no se toman medidas al respecto. Existen herramientas para ayudar. IC AS. a optimizar el uso de antibióticos en un establecimiento de salud y hacer un manejo racional de los mismos es aquí donde el laboratorio juega un rol importante con la detección y. G. tipificación de gérmenes en el menor tiempo posible dando además su perfil de. LO. susceptibilidad para pasar de la terapia empírica a la especifica con el antibiótico indicado. BI O. para el germen identificado a través de la instauración de formularios de antibióticos 70. Considerando los resultados de esta investigación es necesario indicar la necesidad de que se. AS. realicen más estudios en clínicas que permitan elaborar cuadros de evolución de las enzimas. EN CI. bacterianas toda vez que los patrones de resistencia han venido cambiando con mucha celeridad sobre todo en servicios hospitalarios críticos donde los pacientes están más. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. expuestos a los antibióticos betalactámicos.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ENUNCIADO RESUMEN. IC AS. De los 209 uro cultivos procesados en pacientes con infecciones urinarias atendidos en una clínica particular Trujillo-2017; el 33.5% (70) dieron positivos para Escherichia coli y 66.5%. G. (139) dieron negativo. Asimismo, de los 70 cultivos de E. coli, el 37.5% (26) fueron. LO. considerados productores de BLEE (Beta-lactamasas de espectro extendido) mediante la. BI O. prueba de tamizaje, mientas que el 62.5% (44) dieron negativo para la producción de BLEE ((Beta-lactamasas de espectro extendido). Finalmente, se determinó que de los 26 cultivos. AS. de E. coli BLEE, 19.2% (5) fueron BLEE para ceftazidima, 26.9% (7) fueron BLEE (Betalactamasas de espectro extendido) para la Ceftriaxona, 73.1% (19) fueron BLEE (Beta-. EN CI. lactamasas de espectro extendido) para aztreoanam, y un 61.5% (16) fueron BLEE para. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. cefotaxima,. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RECOMENDACIONES . Se recomienda en el protocolo de atención de infección urinaria, hacer el uro cultivo. IC AS. y proceder a la medicación estándar los 3 primeros días a la confirmación del análisis y corregir el tratamiento según resultados del urocultivo, sobre todo en caso de. G. presentarse infección con BLEE (Beta-lactamasas de espectro extendido) y de esta. Difundir el correcto aseo y limpieza al realizar los procesos fisiológicos de excreción,. BI O. . LO. manera restituir rápidamente la salud y calidad de vida del paciente. ya que la infección es una consecuencia de la falta de aseo y desconocimiento de. . AS. adecuados hábitos de limpieza después de las excreciones.. Evitar la automedicación y siempre asistir a la consulta con el médico, tomar la dosis. evitar futuras resistencias.. Realizar trabajos de investigación referentes a la tipificación de beta-lactamasas. CI. . EN CI. correcta de los medicamentos prescritos y el tiempo recomendado por el médico y así. DE. producidas por Escherichia coli, así como la identificación de factores de patogenicidad y toxinas producidas por este microorganismo. Realizar estudios de susceptibilidad antimicrobiana según áreas geográficas para así. CA. . BI. BL. IO. TE. ser más eficientes en la prescripción y abastecimiento de antibióticos.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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