Efecto de una dieta hipocalórica suplementada con extracto de Bidens pilosa sobre radicales libres en hígado y cerebro de ratas seniles

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. AS. BI. O. LO. G. IC. AS. ESCUELA PROFESIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. CI EN. CI. Efecto de una dieta hipocalórica suplementada con extracto de Bidens pilosa sobre radicales libres en hígado y cerebro de ratas seniles. BIÓLOGO. IO. TE. CA. DE. TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE:. ASESOR: Ms C. Calderón Peña, Abhel Arthur. BI. BL. AUTOR: Br. Barreto Salcedo, Candy Estrella. Trujillo – Perú 2019. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. AS. A Dios padre, fuente de sabiduría, más allá de toda ciencia… Por cada nuevo amanecer. IC. al darme la oportunidad de seguir luchando. BI. O. LO. G. por mis ideales.. AS. A mi padre Ronald por su comprensión, paciencia y confianza, a mi madre Rosa por. CI. su gran sacrificio para que pueda formarme. CI EN. profesionalmente. A mis hermanos Robby y Neils por su apoyo constante. A mamá. TE. CA. DE. Ysabel por cuidarme durante tantos años.. A mi querida hermana Geymy, mis primas. IO. Cristina y Paola, que con sus logros. BL. alcanzados fueron mi motivación y ejemplo. BI. para cumplir mis sueños.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTO. A mi asesor el profesor Ms C. Abhel Arthur Calderón Peña, por hacer crecer mi interés. AS. por la investigación, por los conocimientos compartidos, por su tiempo y paciencia al. IC. guiarme en cada fase de la tesis.. LO. G. A los profesores Ms FBQ. Karyn Alicia Olascuaga Castillo, Dr. Orlando Enrique Pretel Sevillano, Ms C. Cinthya Lissett Aspajo Villalaz, Ms C. Patricia Elizabeth Torres. BI. O. Plasencia, quienes contribuyeron grandemente en la realización de este proyecto.. AS. A Katherine Massiel Rojas Mariños, Stefano Rodríguez Torres y María Isabel Cárcamo Salcedo, quienes brindaron su apoyo desinteresado y formaron parte de esta grata. CI EN. CI. experiencia.. A todos los maestros, familiares y amigos que constantemente se preocuparon por la. DE. culminación de este proyecto.. BI. BL. IO. TE. CA. A todos ellos, por todo el apoyo brindado, mi más profundo agradecimiento.. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. JURADO DICTAMINADOR. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. BI. O. LO. G. IC. AS. Los profesores que suscriben, miembros del jurado, declaran que la presente tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo aprobado por UNANIMIDAD.. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE. AS. Págs. Dedicatoria ..................................................................................................................... ii. IC. Agradecimiento ............................................................................................................. iii. LO. G. Jurado Dictaminador ...................................................................................................... iv Indice ...............................................................................................................................v. BI. O. Presentación .................................................................................................................... vi Del Asesor ................................................................................................................... vii .................................................................................................................... viii. Abstract. ...................................................................................................................... ix. CI. AS. Resumen. Introducción ............................................................................................................1. II.. Material y Métodos ..................................................................................................5. III.. Resultados ................................................................................................................9. IV.. Discusión ...............................................................................................................11. V.. Conclusiones. VI.. Recomendaciones ...................................................................................................16. DE. CI EN. I.. TE. CA. ......................................................................................................15. IO. VII. Referencias Bibliográficas .....................................................................................17. BI. BL. Anexos ...........................................................................................................................26. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AS. Señores Miembros del Jurado Dictaminador:. IC. En cumplimiento con las disposiciones reglamentarias vigentes de la Escuela Profesional. G. de Ciencias Biológicas de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional. LO. de Trujillo, pongo a vuestra consideración y criterio el presente informe de tesis titulado:. O. “Efecto de una dieta hipocalórica suplementada con extracto de Bidens pilosa sobre. BI. radicales libres en hígado y cerebro de ratas seniles”, con el que pretendo obtener el Título. Trujillo, Diciembre del 2019. Barreto Salcedo Candy Estrella Br. Ciencias Biológicas. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. Profesional de Biólogo.. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR. El que suscribe, en calidad de asesor de la tesis titulada: “Efecto de una dieta hipocalórica. AS. suplementada con extracto de Bidens pilosa sobre radicales libres en hígado y cerebro de. IC. ratas seniles” para optar el título de Biólogo, deja constancia que esta ha sido desarrollada. LO. sido revisado y acoge las observaciones y sugerencias alcanzadas.. G. en conformidad con los objetivos propuestos en su perfil académico y que el informe ha. BI. O. Por lo tanto, autorizo a la Bachiller Candy Estrella Barreto Salcedo a continuar con los. CA. DE. CI EN. CI. AS. trámites correspondientes.. ASESOR. BI. BL. IO. TE. Ms C. Abhel Arthur Calderón Peña. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN Esta investigación se realizó con la finalidad de evaluar que efecto produce una dieta. AS. hipocalórica asociada al extracto acuoso de Bidens pilosa sobre los radicales libres en. IC. hígado y cerebro de ratas seniles. Se trabajó con cuatro grupos, dos grupos control: control. G. negativo, constituido por una dieta estándar; control positivo, por una dieta hipocalórica;. LO. y dos grupos experimentales, a los cuales se adicionó extracto acuoso de Bidens pilosa a 150 mg.Kg-1 y 350 mg.Kg-1 de peso corporal, respectivamente. En todos los grupos se. BI. O. evaluó la concentración de MDA en µ.g-1 de órgano, mediante el método de las sustancias. AS. reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS), determinando la lipoperoxidación en tejido hepático y cerebral. Se demostró el efecto antioxidante en ambos órganos mediante el. CI. ANAVA (p < 0.05); y se observaron diferencias entre pares de tratamientos mediante la. CI EN. prueba de Tukey (p < 0.01), con excepción del grupo control negativo vs grupo experimental 2 y grupo control positivo vs grupo experimental 1 (p > 0.01),. DE. adicionalmente, se evaluaron los pesos durante 5 semanas, observándose la pérdida de los mismos, mostrando diferencias significativas entre los grupos experimentales de los. CA. grupos control (p < 0.05). Se concluye que la dieta hipocalórica asociada al extracto. TE. acuoso de Bidens pilosa (150 mg. Kg-1 de PC) presentó un efecto antioxidante en los. IO. órganos analizados.. BI. BL. Palabras claves: Dieta hipocalórica, extracto acuoso, Bidens pilosa, radicales libres.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT This research was carried out with the purpose of evaluating the effect produced by a. AS. hypocaloric diet associated with the aqueous extract of Bidens pilosa on the free radicals. IC. in the liver and brain of senile rats. We worked with four groups, two control groups:. G. negative control, consisting of a standard diet; positive control, by a hypocaloric diet; and. LO. two experimental groups, to which aqueous extract of Bidens pilosa was added at 150 mg.kg-1 and 350 mg.kg-1 body weight, respectively. In all groups, the concentration of. BI. O. MDA in µ.g-1 of organ was evaluated by means of the thiobarbituric acid reactive. AS. substances (TBARS) method, determining lipoperoxidation in liver and brain tissue. The antioxidant effect on both organs was demonstrated by ANAVA (p <0.05); and. CI. differences between pairs of treatments were observed by the Tukey test (p <0.01), with. CI EN. the exception of the negative control group vs experimental group 2 and positive control group vs experimental group 1 (p> 0.01), additionally, weights were evaluated during 5. DE. weeks, observing their loss, showing significant differences between the experimental groups of the control groups (p <0.05). It is concluded that the hypocaloric diet associated. CA. with the aqueous extract of Bidens pilosa had an antioxidant effect on the organs. TE. analyzed.. BI. BL. IO. Key words: Hypocaloric diet, aqueous extract, Bidens pilosa, free radicals.. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. I.. INTRODUCCIÓN. AS. Los radicales libres (RL) son átomos o moléculas que poseen un electrón desapareado, que pueden surgir por cualquiera de estas tres vías: 1) por la ruptura homolítica del enlace. IC. covalente de una molécula, con la retención de un e-; 2) por la pérdida de un e- ; o 3) por. LO. G. la adición de un e-, y que al combinarse con otras moléculas mediante reacciones de óxido reducción, producen una reacción en cadena1. Están clasificados de acuerdo al grupo. BI. O. funcional en diversas moléculas, siendo más importantes las de oxígeno y nitrógeno, debido a su participación en los procesos aeróbicos, constituyendo a las especies reactivas. CI. AS. de oxigeno (ROS) y las especies reactivas de nitrógeno (RNS)2.. CI EN. Los RL se forman de manera natural como subproducto del metabolismo mitocondrial, sin embargo, ciertos hábitos de vida y la contaminación desencadenan su producción excesiva, desequilibrando el sistema de neutralización endógeno del. DE. organismo, conllevando al estrés oxidativo y al desarrollo de enfermedades3. El sistema de neutralización endógeno está compuesto por enzimas como glutatión peroxidasa,. CA. catalasa y superóxido dismutasa; y por antioxidantes como vitamina A, coenzima Q10,. TE. ácido úrico y glutatión4.. IO. La dieta y la nutrición son dos factores necesarios para garantizar y mantener la buena. BL. salud a lo largo de todo el ciclo vital. Su función está bien establecida pues son factores. BI. determinantes ante la presencia de enfermedades crónicas convirtiéndolos en componentes fundamentales de las actividades de prevención. La dieta es el conjunto de alimentos que conforman nuestros hábitos alimentarios que conduce a seleccionar,. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. preparar y consumir un determinado alimento o menú como una parte más de las costumbres sociales, culturales y religiosas5.. AS. Hay una amplitud de tipos de dieta y estilos de alimentación, las cuales incluyen a las dietas modificadas en calorías (hipocalórica, hipercalórica), dietas modificadas en. IC. proteínas (hipoproteica, hiperproteica, baja en gluten), dietas modificadas en minerales. LO. G. (hiposódica ligera, hiposódica moderada), dietas bajas en grasas (Ornish, LEARN, Weigth Watchers), dietas bajas en carbohidratos (Atkins), dietas bajas en azúcar (Zone),. BI. O. dieta cetogénica, dieta mediterránea, dieta de eliminación y ayuno intermitente6,7,8.. AS. La dieta hipocalórica (con aporte nutricional) en ciertas cepas de roedores, extiende. CI. la vida útil y disminuye el impacto de las enfermedades propias del senescente9,10, ya sea. CI EN. estimulando la autofagia en neuronas corticales mediante la activación de receptores de grelina y neuropéptidos Y11 o disminuyendo las especies reactivas de oxígeno en órganos como cerebro12,13 e hígado14,15, mejorando la salud neurovascular, cognitiva y mental16,. DE. disminuyendo la lipofuscina del epitelio pigmentario de la retina17.. CA. Por otro lado, también se menciona la actividad de los extractos vegetales como una. cáncer,. TE. intervención preventiva de enfermedades mediadas por radicales libres tales como: enfermedades. cardiovasculares,. trastornos. neurodegenerativos,. y. el. IO. envejecimiento18,19, donde los compuestos fenólicos funcionan como potentes. BL. eliminadores de radicales libres, agentes reductores, inhibidores de especies reactivas de. BI. oxígeno, y protectores contra la peroxidación lipídica20,21. Una especie de suma importancia es Bidens pilosa L. perteneciente a la familia. Asteraceae, originaria de América del Sur y distribuida en casi todos los países de regiones tropicales y subtropicales. Respecto a su descripción botánica, es una hierba 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. anual, glabra o algo pubescente de 30 a 100 cm de altura y ramificada; con hojas pinnatipartidas, opuestas a veces alternas, 1-3 yugadas, sus segmentos son aovados o lanceolados, de 2 a 8 cm de alto, aserrados, agudos o acuminados. Las cabezuelas florales. AS. terminales, están compuestas por flores tubulares y radiadas de color amarillo intenso y. IC. las radicales con sobresalientes pétalos blancos. El aquenio es fusiforme, de. G. sección triangular, y ligeramente acanalado de 5 a 13 mm de largo. El receptáculo plano. LO. o casi plano. Tallo erguido, tetrágono; la inflorescencia está agrupada en capítulos. BI. espatulado, unidos a la base y pubescentes en el margen22.. O. terminales y axilares, amarillos, con las lígulas lineales, consta de un involucro. AS. El estudio fitoquímico de los extractos y fracciones de la planta total de Bidens pilosa. CI. L. (conocida popularmente como “amor seco”) evidencia la presencia de chalconas,. CI EN. glucósidos del ácido fenilpropanoico, poliacetilenos, un diterpeno, flavonoides, glucósidos de flavona y compuestos fenólicos23. Determinándose las siguientes. DE. propiedades: antihipertensiva24, antiulcerosa25, hepatoprotectora26,27, antidiabética28, antiinflamatoria29,. y. antimicrobiana33,34,. antifúngica34,. CA. inmunosupresora. antileucémica30,. quimioprotectora. de. antimalárica31,32,. neoplasia. gástrica35. y. TE. adenocarcinoma mamario36.. IO. También se demuestra que el extracto acuoso, presenta efectos positivos sobre el. BL. aumento de la contractilidad en útero de ratas37,38, disminuye los niveles de citocinas. BI. proinflamatorias (1β, FasL, TNF-α) en ojo seco por deficiencia de andrógenos en ratas39, y reduce la incubación, crecimiento y supervivencia de Subulina octona40. En la Amazonía Peruana, se utiliza para la fiebre aftosa, angina, diabetes, disentería, dismenorrea, edema, hepatitis, retención de agua e hidropesía41.. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Otros aportes, demuestran que los extractos vegetales de Bidens pilosa exhiben una actividad antioxidante significativa y un efecto inhibitorio sobre la producción de óxido nítrico (un mediador inflamatorio) en los macrófagos. De esta manera, el metabolismo y. AS. la biodisponibilidad de estos compuestos fenólicos in vivo se correlacionan bien con sus. IC. propiedades antioxidantes observadas in vitro42,43,44.. LO. G. Diversos estudios han demostrado que tanto la dieta como los extractos vegetales, son una herramienta exógena eficaz capaz de reforzar los sistemas del organismo, pues. BI. O. prevendrían el envejecimiento y desarrollo de diversas patologías. Es por ello que la presente investigación tiene por objeto, determinar el efecto de una dieta hipocalórica. AS. suplementada con extracto de Bidens pilosa sobre los radicales libres en hígado y cerebro. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. de ratas seniles.. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II.. MATERIAL Y MÉTODOS. Animales. AS. Se utilizaron 20 especímenes de Rattus norvegicus, variedad albina raza Holtzman, de 18. IC. meses de edad, procedentes del Laboratorio de Neurofisiología de la Universidad. LO. G. Nacional de Trujillo (UNT).. Hasta el desarrollo de la investigación, los animales se mantuvieron en jaulas de. BI. O. polipropileno con camas de viruta, 12 horas luz/oscuridad, alimentación y agua a libre disponibilidad en el laboratorio de Neurofisiología del Departamento de Química. AS. Biológica y Fisiología Animal - Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad. CI EN. CI. Nacional de Trujillo.. Recolección e identificación de Bidens pilosa. Las plantas de B. pilosa se recolectaron en el Jardín Botánico Manuel Fernández Honores. DE. de la UNT, posteriormente fueron herborizados para su identificación en el Herbarium. CA. Truxillense (HUT), obteniendo el código 59867.. TE. Preparación del extracto acuoso de Bidens pilosa. IO. La planta fue lavada cuatro veces: tres con agua potable y una con agua destilada. Se. BL. extrajeron las hojas, se secaron a sombra y trituraron hasta obtener un polvo fino. El. BI. extracto acuoso se obtuvo agregando 100 g de polvo fino a 1 L de agua destilada24. La. infusión se preparó con 2 minutos de ebullición y 10 minutos a temperatura ambiente45, posteriormente se filtró al vacío con papel Whatman N° 4 y se llevó a secar por pervaporación, obteniéndose un polvo negro que se almacenó en un frasco ámbar, a una refrigeración entre 2 a 6 °C. 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Formación de los grupos de investigación Se aplicó el diseño experimental en estímulo creciente con doble control.. AS. Grupo control negativo (GCN): conformado por 5 ratas albinas, que fueron mantenidas. IC. con agua a libre disponibilidad, dieta estándar (DS) y solución salina fisiológica (SSF) de. G. acuerdo al peso corporal (PC) vía sonda orogástrica.. LO. Grupo control positivo (GCP): conformado por 5 ratas albinas, que fueron mantenidas. O. con agua a libre disponibilidad, dieta hipocalórica (DH) y SSF de acuerdo al PC vía sonda. AS. BI. orogástrica.. Grupo experimental 1 (GE1): conformado por 5 ratas albinas, que fueron mantenidas con. CI. agua a libre disponibilidad, DH y una dosis del extracto de B. pilosa en solución acuosa. CI EN. de 150 mg.Kg-1 de PC, vía sonda orogástrica.. Grupo experimental 2 (GE2): conformado por 5 ratas albinas, que fueron mantenidas con. DE. agua a libre disponibilidad, DH y una dosis del extracto de B. pilosa en solución acuosa. CA. de 350 mg.Kg-1 de PC, vía sonda orogástrica.. TE. Preparación de las dietas estándar e hipocalórica. IO. Dieta estándar: constituida por alimento balanceado de la marca Thor que por cada 100 g. BL. contenía: proteínas: 18%, lípidos: 6%, carbohidratos: 61%, fibra: 5% y oligoelementos:. BI. 10%46. Se realizaron los cálculos obteniendo una ración diaria de 28 g que equivalen a 103,6 Kcal.. Dieta hipocalórica: constituida por alimento balanceado de la marca Thor, y Cucumis sativus L., que por cada 100 g contiene: proteínas: 0,69%, lípidos: 0,13%, carbohidratos:. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2,76%, fibra: 0,8%, para dar sensación de saciedad. Se realizaron los cálculos para la dieta hipocalórica al 60%, obteniendo una ración diaria de 10,5 g de alimento balanceado y. AS. 17,5 g de “pepino” que equivale a 41,44 Kcal.. IC. Dosificación del extracto. G. Se utilizaron dos dosis: una de 150 mg.Kg-1 de PC que constituía el GE1, y otra de 350. LO. mg.Kg-1 de PC que constituía el GE245. Los animales recibieron este tratamiento durante. O. 5 semanas24.. AS. BI. Procedimiento quirúrgico. A las ratas se les aplicó eutanasia utilizando una sobredosis de pentobarbital sódico vía. CI. intraperitoneal. Se les practicó una laparotomía para extraer el hígado y la decapitación. CI EN. para extraer el cerebro, estos órganos fueron analizados de inmediato.. DE. Determinación del efecto antioxidante. La determinación del efecto antioxidante se realizó mediante el método de las sustancias. CA. reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS), determinando la lipoperoxidación en tejido. TE. hepático y cerebral47. El procedimiento consistió en colocar los órganos en solución de Krebs entre 2 a 4 C°, despojando las meninges del cerebro, mientras que al hígado se le. IO. lavó por perfusión, manteniendo siempre la misma temperatura, se pesaron 1 g de cada. BL. órgano, se trituraron en morteros y homogenizaron. Luego se procedió como en la. BI. presente tabla: Tabla 1. Procedimiento para la determinación de la lipoperoxidación en tejidos hepático y cerebral mediante el método de las sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS).. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Testigo (mL). Solución de Krebs. 1,6. 1,7. Muestra. 0,1. 0,0. Fe. 0,1. 0,1. Ascorbato. 0,2. 0,2. IC. AS. Problema (mL). 1,0. 1,0. O. Baño maría 100° C por 15 minutos. LO. TCA. G. Incubación a 37° C por 30 minutos. 1,0. 1,0. AS. TBA. BI. Centrifugación a 3500 r.p.m., trasvasado a un tubo limpio y seco. CI. Baño maría 100° C por 15 minutos. CI EN. Centrifugación a 3500 r.p.m. por 30 minutos Lectura en espectrofotómetro a 535 nm (obtener absorbancias). Análisis estadístico. DE. Transformación de las absorbancias a concentración de MDA µ.g -1 de tejido. CA. Los resultados obtenidos se analizaron a través de las medidas de tendencia central y de. TE. dispersión: media, análisis de varianza (ANAVA), Tukey, normalidad de Shapiro-Wilk y T de Student para muestras relacionadas, con una probabilidad de p < 0,05. Para ello se. IO. utilizaron los programas estadísticos Statgraphics Centurion (XV) 16.1.15 y SPSS. BI. BL. clásico.. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. III.. RESULTADOS. En la Tabla 2 se muestran las medias y desviaciones estándar de las concentraciones de. AS. malondialdehído en µg.g-1 de cerebro, por cada grupo de ensayo. En la prueba ANAVA. IC. se obtuvo un p < 0,05 (Anexo 5), que indica la presencia de diferencias significativas en. G. los grupos, mientras que en la prueba de Tukey, se identificaron dichas diferencias con. LO. un p < 0,01: entre los grupos control; grupo control negativo y grupo experimental 1,. O. grupo control positivo y grupo experimental 2; y entre ambos grupos experimentales, con. AS. BI. un nivel de confianza del 95% (Anexo 6).. En la Tabla 3 se muestran las medias y desviaciones estándar de las concentraciones de. CI. malondialdehído en µg.g-1 de hígado, por cada grupo de ensayo. En la prueba de ANAVA. CI EN. se obtuvo un p < 0,05 (Anexo7), que indica la presencia de diferencias significativas en los grupos, mientras que en la prueba de Tukey, se identificaron dichas diferencias con. DE. un p < 0,01: entre los grupos control; grupo control negativo y grupo experimental 1, grupo control positivo y grupo experimental 2; y entre ambos grupos experimentales, con. BI. BL. IO. TE. CA. un nivel de confianza del 95% (Anexo 8).. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 2. Concentraciones de malondialdehído en (µg.g-1 de cerebro) vs desviación estándar media (DSM) correspondiente a los grupos: control negativo, dieta estándar; control positivo: dieta hipocalórica; y experimentales, dieta hipocalórica con B. Pilosa a 150 mg.Kg-1 y 350 mg.Kg1. 4,551 ± 0,359. GCP. 2,882 ± 0,151. GE1. 2,631 ± 0,044. GE2. 4,071 ± 0,605. IC. GCN. G. MDA (µg.g-1)/DSM. AS. BI. O. LO. Grupos. AS. , respectivamente.. CI. Tabla 3. Concentraciones de malondialdehído en (µg.g-1 de hígado) vs desviación estándar media. CI EN. (DSM) correspondiente a los grupos: control negativo, dieta estándar; control positivo: dieta hipocalórica; y experimentales, dieta hipocalórica con B. Pilosa a 150 mg.Kg-1 y 350 mg.Kg-1, respectivamente.. MDA (µg.g-1)/DSM. GCN. 5,095 ± 0,239. GCP. 3,778 ± 0,206. GE1. 3,638 ± 0,279. GE2. 4,824 ± 0,206. BI. BL. IO. TE. CA. DE. Grupos. GCN: Grupo Control Negativo; GCP: Grupo Control Positivo; GE1: Grupo Experimental 1; GE2: Grupo Experimental 2.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IV.. DISCUSIÓN. La dieta hipocalórica protege de enfermedades asociadas con el estrés oxidativo: enfermedades neurodegenerativas, cardiovasculares y cáncer; y presenta una actividad. AS. preventiva frente a enfermedades asociadas con la edad: pérdida de neuronas mientéricas,. IC. músculo esquelético y audición, resistencia a la insulina y cataratas, además incrementa. G. la longevidad en una gran diversidad de especies que comprenden a las levaduras,. LO. rotíferos, moscas, arañas, gusanos, peces, primates y roedores48. No obstante, la dieta esta. O. mediada por factores como duración, sexo, edad, especie, genes, tejido examinado, tipos. AS. BI. de ROS, enzimas antioxidantes49.. Es importante mencionar dichos factores, pues por mucho tiempo se ha generalizado el. CI. concepto de que la restricción calórica (RC) disminuye el estrés oxidativo, sin embargo,. CI EN. su efecto suele ser variable50. Como puede verse en la presente investigación, en ambos órganos no existen diferencias significativas entre los grupos control negativo (GCN) y. DE. experimentales (GE2) con un p > 0,05 (Tablas 2 y 3). Tal es así, que la RC también puede disminuir la expresión de enzimas antioxidantes, a causa de una producción reducida de. CA. ROS50; y esto ha sido demostrado en especies de vertebrados longevos, pues poseen una. IO. corta51.. TE. menor generación mitocondrial de ROS y enzimas antioxidantes, que las especies de vida. BL. Se ha esclarecido también que aunque los antioxidantes protegen de muchas. BI. enfermedades, en algunos casos pueden no controlar la velocidad del envejecimiento; y cuando se aumentan los antioxidantes mediante su suplementación en la dieta, inducción farmacológica o técnicas transgénicas, la longevidad media aumenta a veces moderadamente52. Por otro lado, se llegó a concluir que los efectos de la RC sobre el daño. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. oxidativo durante el envejecimiento pueden deberse no a los cambios en la producción de ROS o a la actividad enzimática antioxidante, sino a los efectos de la RC sobre la síntesis. AS. o degradación de macromoléculas de proteínas49. En un análisis de la literatura en roedores, la producción de ROS puede verse reducida. IC. con la RC, en tejidos como cerebro (60%), riñón (57%), corazón (50%), músculo. LO. G. esquelético (46%) e hígado (23%). Sin embargo, en 157 observaciones, se descubrió que la producción de ROS mitocondrial, en un 62% de las mediciones, no mostraban ningún. BI. O. cambio; mientras que en un 37%, se mostraba la disminución de su producción49. En esta investigación se ha demostrado que la dieta hipocalórica ejerce una reducción sobre los. AS. radicales libres entre los grupos control negativo (GCN) y grupo control positivo (GCP). CI EN. CI. (p < 0,05) presentes en cerebro e hígado (Tablas 2 y 3).. Por otro lado, se ha reconocido la influencia de la dieta hipocalórica en individuos con sobrepeso y obesidad, al disminuir los niveles de colesterol y triglicéridos53, cambiar la. DE. estructura y función cardiovascular, reducir la hipertrofia muscular54, mejorar el flujo sanguíneo microvascular de la piel55, reducir el peso56. Además de optimizar el control. CA. glucémico, disminución de niveles urinarios y tisulares de TGB-β, en un modelo. TE. experimental de lesión renal en animales obesos y diabéticos57. La reducción de peso. IO. corporal se evidenció en la presente investigación mediante la prueba de normalidad de. BL. Shapiro – Wilk y la prueba T de Student para muestras relacionadas, encontrándose. BI. diferencias significativas entre los grupos control positivo (GCP) y experimental (GE1 Y GE2) (Anexos 9 y 10). La dieta hipocalórica también ejerce un efecto beneficioso en mujeres con síndrome de ovario poliquístico, al producir cambios en la reducción - distribución de grasa en los 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. tejidos adiposo intraabdominal e intermuscular, en la conservación de la masa magra58; y en mujeres que se están recuperando del tratamiento temprano del cáncer de mama, al aumentar el cortisol salival matutino en la regulación del eje hipotalámico-hipofisario-. AS. suprarrenal, reducir síntomas depresivos y promover el bienestar psicológico59.. IC. En lo que respecta a la actividad de los extractos vegetales, se sabe que han sido utilizados. LO. G. por siglos como ingredientes o suplementos dietéticos, por ser compuestos ricos en antioxidantes, proteínas, vitaminas, betacarotenos, minerales, bajos en grasas y. BI. O. carbohidratos. B. pilosa ha demostrado que posee grandes actividades biológicas, tales como antidiabética, antitumoral, antiinflamatoria, anticancerígena y antibacteriana. Y que. AS. todas estas actividades se atribuyen principalmente a la presencia de flavonoides como. CI. isoquercitrina; vitexina; astragalina; 5,6,7,4'-tetrametoxilflavona; 5,3',4 trihidroxi -3,7-. CI EN. dimetoxilflavona; quercetina; y otros compuestos fenólicos60. Actualmente, los mecanismos por los cuales la dieta hipocalórica prolonga la vida se. DE. deben a la atenuación del daño oxidativo, con la generación de mecanismos protectores; a la alteración del sistema glucosa/insulina, pues se reducen para ocasionar la pérdida de. CA. los sistemas señalizadores de la insulina; a la alteración de la HCG/IGF-1, pues se. TE. estimulan el crecimiento, reproducción y generación celular; y a la hormesis, que actúa. IO. como un estresante suave al elevar la expresión de genes (daf-2, pit-1, amp-1, clk-1,. BL. p66Shc y SIR2) produciendo una respuesta adaptativa48,61. En esta investigación, se. BI. confirmó que la dieta hipocalórica (GCP) vs la dieta estándar (GCN), obedece al mecanismo de atenuación del daño oxidativo producido por radicales libres, con un p < 0,05 (Tablas 2 y 3).. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. De manera general, esta investigación demuestra que la dieta hipocalórica por si sola como asociada al extracto de B. pilosa indujo a que sus principios activos reduzcan la tasa de radicales libres en ambos órganos (Tablas 2 y 3), evidenciándose en el ANAVA que. AS. indica la existencia de diferencias significativas sobre la producción de ROS en cerebro. IC. e hígado, con un p = 0,00000045 y un p = 0,000000027, respectivamente (Tablas 2 y 3),. LO. G. confirmándose mediante la prueba de Tukey aplicada a cada par de tratamientos.. A pesar que se ha dilucidado la actividad antioxidante de los compuestos fenólicos,. BI. O. algunos estudios han informado que también pueden comportarse como prooxidantes, por condiciones que favorecen la autooxidación, por la presencia de compuestos fenólicos. AS. pequeños como quercetina y ácido gálico62, actividades duales de los ácidos vanílico,. CI. gálico, elágico; y rutina63, en menor cantidad, por compuestos de alto peso molecular. CI EN. (taninos condensados e hidrolizables), mientras que otros estudios, señalan que no actúan de la misma manera in vitro que in vivo, al no tener en cuenta las transformaciones. BI. BL. IO. TE. CA. DE. metabólicas que afectan la biodisponibilidad64.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. V.. CONCLUSIONES. La dieta hipocalórica suplementada con extracto de Bidens pilosa a una dosis de 150 mg.. IC. AS. Kg-1 de PC redujo la concentración de radicales libres en hígado y cerebro de ratas seniles.. La dieta hipocalórica suplementada con extracto de Bidens pilosa a una dosis de 350 mg.. LO. G. Kg-1 de PC no presentó diferencias significativas sobre la reducción de radicales libres en. O. hígado y cerebro de ratas seniles.. BI. La dieta hipocalórica redujo la concentración de radicales libres en hígado y cerebro de. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. ratas seniles.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VI.. RECOMENDACIONES. AS. Se deben evaluar los factores como sexo, edad, especie, genes, tejido examinado, tipos de ROS, enzimas antioxidantes y duración de la dieta hipocalórica pues cada organismo. G. IC. tiene diferentes características, diferente estilo de vida y diferente metabolismo.. LO. Se deben realizar más estudios del extracto acuoso de Bidens pilosa que confirmen sus. O. efectos sobre los radicales libres.. BI. Se deben realizar más estudios que esclarezcan los controvertidos efectos de la influencia. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. de la dieta hipocalórica sobre la producción de especies reactivas de oxígeno.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. Corrales, L., Muñoz, M. Estrés oxidativo: origen, evolución y consecuencias de la toxicidad del oxígeno. Ciencia Biomédicas, 2012; 10(18), 135–250.. Nogueira, E. Estudio de la respuesta celular a SOK1 y mecanismos de regulación.. IC. 2.. AS. 1.. Martínez, G. Especies reactivas del oxígeno y balance redox, parte I: aspectos básicos. LO. 3.. G. [tesis doctoral]. Chile: Universidad de Santiago de Compostela; 2008.. Recuperado. en. 08. de. junio. BI. 39(3).. O. y principales especies reactivas del oxígeno. Revista Cubana de Farmacia, 2005; de. 2019,. de. AS. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S003475152005000300009&. Rahman, K. Studies on free radicals, antioxidants and co-factors. Clin. Inverv. Aging,. CI EN. 4.. CI. lng=es&tlng=es.. 2007; 2: 219–236.. Varela-Moreiras, G., Avila, J., Cuadrado, C., Del Pozo, S., Ruiz, E., Moreiras, O.. DE. 5.. Evaluation of food consumption and dietary patterns in Spain by the Food. CA. Consumption Survey: updated information. Eurpean Journal Clinical Nutrition,. 6.. TE. 2010; 64: S37-S43.. Matarese, L., Pories, W. Adult Weight Loss Diets: Metabolic Effects and Outcomes.. BL. IO. Nutrition in clinical practice, 2014; 29(6): 759-67. doi: 10.1177/0884533614550251.. Aragon, A., Schoenfeld, B., Wildman, R., Kleiner, S., VanDusseldorp, T., Taylor,. BI. 7.. L., … Antonio, J. International society of sports nutrition position stand: diets and. body composition. Journal of the International Society of Sports Nutrition, 2017; 14, 16. Doi: 10.1186/s12970-017-0174-y. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 8.. Rodríguez, O., Hodelín, M., González, M., & Flores, F. Dietas en las instituciones hospitalarias. MEDISAN, 2012; 16(10), 1600-1610. Recuperado en 06 de septiembre de. 2019,. de. AS. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S102930192012001000015&. McCay, C., Crowell, M., Maynard, L. The effect of retarded growth upon the length. G. 9.. IC. lng=es&tlng=es.. LO. of life span and upon the ultimate body size. Journal of Nutrition, 1935; 10, 63-79.. O. 10. Swindell, W. Dietary restriction in rats and mice: a meta-analysis and review of the. BI. evidence for genotype-dependent effects on lifespan. Ageing Res Rev., 2012; 11(2):. AS. 254–270.. CI. 11. Ferreira-Marques, M., Aveleira, C. A., Carmo-Silva, S., Botelho, M., Pereira de. CI EN. Almeida, L., Cavadas, C. Caloric restriction stimulates autophagy in rat cortical neurons through neuropeptide Y and ghrelin receptors activation. Aging, 2016; 8(7): 1470–1484. doi:10.18632/aging.100996.. DE. 12. Sanz A, Caro P, Ibañez J, Gómez J, Gredilla R, Barja G. Dietary Restriction at Old. CA. Age Lowers Mitochondrial Oxygen Radical Production and Leak at Complex I and Oxidative DNA Damage in Rat Brain.. Journal of Bioenergetics and. TE. Biomembranes. 2005; 37: 83–90.. IO. 13. Shintani, T., Klionsky, D. Autophagy in health and disease: a double-edged sword.. BL. Science, 2004; 306(5698): 990-995.. BI. 14. Gredilla R, Barja G, López-Torres M. Efecto de la restricción calórica a corto plazo sobre la producción de H2O2 y el daño del ADN oxidativo en las mitocondrias de hígado de rata y la ubicación de la fuente de radicales libres. Revista de Bioenergética y Biomembranas, 2001; 33: 279–287.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 15. Faulks, S.C., Gutiérrez, L., García, J. R., Rincón, M. J., Ceballos, G. M., Olivares, I. M. Effect of a hypocaloric diet in the oxidative stress in obese subjects without prescription of exercise and antioxidants. Medicina Clínica, 2015; 145(1), 1-6.. AS. doi.org/10.1016/j.medcli.2013.12.015.. IC. 16. Parikh, I., Guo, J., Chuang, K. H., Zhong, Y., Rempe, R. G., Hoffman, J. D., … Lin,. G. A. L. Caloric restriction preserves memory and reduces anxiety of aging mice with. LO. early enhancement of neurovascular functions. Aging, 2016; 8(11), 2814–2826.. O. doi:10.18632/aging.101094.. BI. 17. Katz, M.L., White, H.A., Gao, C.L., Roth, G.S., Knapka, J.J., Ingram, D.K. Dietary. AS. restriction slows age pigment accumulation in the retinal pigment epithelium. Invest. CI. Ophthalmol &Vis Sci., 1993; 34(12):3297-302.. 2000; 408: 239–247.. CI EN. 18. Finkel, T., Holbrook, N. Oxidants, oxidative stress and the biology of ageing. Nature,. 19. Esposito, E., Rotilio, D., Di Matteo, V., Di Giulio, C., Marisa, C., Algeri, S. A review. DE. of specific dietary antioxidants and the effects on biochemical mechanisms related to. CA. neurodegenerative processes. Neurobiology of Aging, 2002; 23: 719-735. 20. Montoro, P., Carbone, V., De Simone, F., Pizza, C., De Tommasi, N. Studies on the. TE. constituents of Cyclanthera pedata fruits: isolation and structure elucidation of new. IO. flavonoid glycosides and their antioxidant activity. Journal of Agricultural and Food. BL. Chemistry, 2001; 49: 5156-5160.. BI. 21. Osawa, T. Novel natural antioxidants for utilization in food and biological systems. In: Uritani, I., Garcia, V.V., Mendoza, E.M. (Eds.), Postharvest Biochemistry of Plant Food-Materials in the Tropics. Japan Scientific Societies Press, Tokyo, Japan; 1994. pp. 241-251.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 22. Lastra, H. A., y Ponce de León, H. Bidens pilosa Linné. Revista Cubana de Plantas Medicinales, 2001; 6(1): 28-33. Recuperado el 14 de mayo de 2019, de http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1028-. AS. 47962001000100007&lng=es&tlng=es.. IC. 23. Jemal, A., Murria, T., Ward, E., Samuel, A., Tiwari, R., Ghafoor, A., Fever, E., Thun,. G. M. Cancer Statistics. CA: A Cancer Journal for clinicians, 2005; 55: 10-30.. LO. 24. Dimo, T., Azay, J., Tan, P., Pellecuer, J., Cros, G., Bopelet, M., Serrano, J. Effects. O. of the aqueous and methylene chloride extracts of Bidens pilosa leaf on fructose-. AS. BI. hypertensive rats. Journal of Ethnopharmacology, 2001; 76: 215-221.. CI. 25. Tan, P., Dimo, T., Dongo, E. Effects of methanol, cyclohexane and methylene. CI EN. chloride extracts of Bidens pilosa on various gastric ulcer models in rats. Journal Ethnopharmacology, 2000; 73(3): 415-21.. 26. Chih, H., Lin, C., Tang, K. The hepatoprotective effects of Taiwan folk medicine. DE. Ham-hong-chho in rats. American Journal of Chinese Medicine, 1996; 24: 231- 240.. CA. 27. Kviecinski MR, Felipe KB, Correia JFG, Ferreira EA, Rossi MH, Gatti MFD, Filho DW, Pedrosa RC. Brazilian Bidens pilosa Linné yields fraction containing quercetin-. TE. derived flavonoid with free radical scavenger activity and hepatoprotective effects.. IO. Libyan J Med., 2011; 6: 56-51.. BL. 28. Chien, S., Young, P., Hsu, Y., Chen, C., Tien, Y.J., Shiu, S., Li, T., Yang, C.,. BI. Marimuthu, P., Tsai, L.F., Yang, W. Anti-diabetic properties of three common. Bidens pilosa variants in Taiwan. Phytochemistry, 2009; 70: 1246-1254.. 29. Jager, A., Hutchings, A., vanStaden, J. Screening of Zulu medicinal plants for prostaglandin-synthesis inhibitors. Journal of Ethnopharmacology, 1996; 52: 95-100.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 30. Chang, J., Chiang, L., Chen, C., Liu, L., Wang, K., Lin, C. Antileukemic activity of Bidens pilosa L. var. minor (Blume) Sherff and Houttuynia cordata Thunb. American Journal of Chinese Medicine, 2001; 29: 303-312.. AS. 31. Brandão, M.G., Krettli, A., Soares, L.S., Nery, C.G., Marinuzzy, H. Antimalarial. IC. activity of extracts and fractions from Bidens pilosa correlated with the presence of. G. acetylene and flavonoid compounds. Journal Ethnopharmacology, 1997; 57: 131-. LO. 138.. O. 32. Oliveira, F.Q., Andrade-Neto, V., Krettli, A.U., Brandão, MGL. New evidences of. BI. antimalarial activity of Bidens pilosa roots extract correlated with polyacetylene and. AS. flavonoids. Journal Ethnopharmacology, 2004; 93: 39-42.. CI. 33. Rabe, T., vanStaden, J. Antibacterial activity of South African plants used for. CI EN. medicinal purposes. Journal of Ethnopharmacology, 1997; 56(1):81-7. 34. Deba F, Xuan TD, Yasuda M, Tawata S. Chemical composition and antioxidant, antibacterial and antifungal activities of the essential oils from Bidens pilosa Linn.. DE. var. Radiata. Food Control, 2008; 19: 346-352.. CA. 35. Arroyo, J., Bonilla, P., Ráez, E., Suárez, S., Palomino, R., Terán, S., et al. Compuestos fenólicos de la fracción metanólica de Bidens pilosa, sobre la neoplasia. TE. gástrica, inducida en ratas. Anales de la Facultad de Medicina, 2007; 68(2): 105-12.. IO. 36. Arroyo, J., Bonilla, P., Ráez, E., Barreda, A., Huamán, O. Efecto quimioprotector de. BL. Bidens pilosa en el cáncer de mama inducido en ratas. Anales de la Facultad de. BI. Medicina, 2010; 71(3):153-9.. 37. Frida, L., Rakotonirina, S., Rakotonirina, A., & Savineau, J. P. In vivo and in vitro effects of Bidens pilosa L. (Asteraceae) leaf aqueous and ethanol extracts on primed-. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. oestrogenized rat uterine muscle. African journal of traditional, complementary, and alternative medicines: AJTCAM, 2007; 5(1), 79–91. 38. Aliaga, C., De la Cruz, C. Efecto del decocto de planta entera de Bidens pilosa L. en. AS. útero aislado de Rattus rattus var albinus [tesis de pregrado]. Perú: Univ. Nac.. IC. Trujillo; 2014.. G. 39. Zhang, C., Li, K., Yang, Z., & Wang, Y., Si, H. The Effect of the Aqueous Extract. LO. of Bidens Pilosa L. on Androgen Deficiency Dry Eye in Rats. Cell Physiol Biochem.,. O. 2016; 39(1): 266-77. doi: 10.1159/000445622.. BI. 40. Souza, B.A., Silva, L.C., Chicarino, E.D., Bessa, E.C. (2013). Preliminary. AS. phytochemical screening and molluscicidal activity of the aqueous extract of Bidens. CI. pilosa Linné (Asteraceae) in Subulina octona (Mollusca, Subulinidade). An Acad. CI EN. Bras Cienc., 85(4): 1557-66. doi: 10.1590/0001-37652013111812. 41. Duke, J., Vasquez, R. Amazonian ethnobotanical dictionary. CRC Press, Boca Raton; 1994.. DE. 42. Morand, C., Crespy, V., Manach, C., Besson, C., Demigné, C., Rémésy, C. Plasma. CA. metabolites of quercetin and their antioxidant properties. American Journal of. 219.. TE. Physiology-Regulatory Integrative and Comparative Physiology, 1998; 275: 212-. IO. 43. Simonetti, P., Gardana, C., Pietta, P. Plasma levels of caffeic acid and antioxidant. BL. status after red wine intake. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2001; 49:. BI. 5964-5968.. 44. Rose, J., Kasum, C. Dietary flavonoids: bioavalibility, metabolic effects, and safety. Annual Review of Nutrition, 2002; 22: 19-34.. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 45. Abajo, C., Boffill, M., del Campo, J., Mendez, M., González, Y., Mitjans, M., Vinarell, M. In vitro study of the antioxidant and immunomodulatory activity of aqueous infusion of Bidens pilosa. Journal of Ethnopharmacology, 2004; 93: 319-. AS. 323.. IC. 46. Pitsikas, N., Carli, M., Fidecka, S., Algeri, S. Effect of life-long hypocaloric diet on. G. age-related changes in motor and cognitive behavior in a rat population.. LO. Neurobiology of Aging, 1990; 11: 417-423.. O. 47. Halliwell, B., Chirico, S. Lipid peroxidation: it´s mechanism, measurement and. BI. significance. American Journal of Clinical. Nutrition, 1993; 57: 715S-725S.. CI. de Farmacia, 2009; 75 (2): 273-30.. AS. 48. Cascales, M. Dieta hipocalórica y longevidad. Anales de la Real Academia Nacional. CI EN. 49. Walsh, M. E., Shi, Y., & Van Remmen, H. The effects of dietary restriction on oxidative stress in rodents. Free radical biology & medicine, 2014; 66, 88–99. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2013.05.037.. DE. 50. Judge S, Judge A, Grune T, Leeuwenburgh C. Short-term CR decreases cardiac. CA. mitochondrial oxidant production but increases carbonyl content. American Journal of Physiology -Regulatory, Integrative and Comparative Physiology, 2004; 286:. TE. R254–R259.. IO. 51. Barja, G. Aging in vertebrates and the effect of caloric restriction: a mitocondrial free. BL. radical production-DNA damage mechanism? Biol Rev., 2004; 79: 235-51.. BI. 52. Lopez-Torres, M., y Barja, G. Restricción calórica, estrés oxidativo y longevidad. Revista Española de Geriatría y Gerontología, 2008; 43(4): 252-60.. 53. Foster, G. D., Shantz, K. L., Vander Veur, S. S., Oliver, T. L., Lent, M. R., Virus, A., … Gilden-Tsai, A. A randomized trial of the effects of an almond-enriched,. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. hypocaloric diet in the treatment of obesity. The American journal of clinical nutrition, 2012; 96(2): 249–254. doi:10.3945/ajcn.112.037895. 54. De las Fuentes, L., Waggoner, A. D., Mohammed, B. S., Stein, R. I., Miller, B. V.,. AS. 3rd, Foster, G. D., … Davila-Roman, V. G. Effect of moderate diet-induced weight. College. of. Cardiology,. 2009;. 54(25):. 2376–2381.. G. American. IC. loss and weight regain on cardiovascular structure and function. Journal of the. LO. doi:10.1016/j.jacc.2009.07.054.. O. 55. Mastantuono, T., Di Maro, M., Chiurazzi, M., Battiloro, L., Starita, N., Nasti, G., …. BI. Colantuoni, A. Microvascular Blood Flow Improvement in Hyperglycemic Obese. AS. Adult Patients by Hypocaloric Diet. Translational medicine @ UniSa, 2016; 15: 1–. CI. 7.. CI EN. 56. Cortes-Oliveira, C., Nicoletti, C.F., De Souza M.A., De Oliveira, B.A…Nonino, C.B. UCP2 expression is associated with weight loss after hypocaloric diet intervention. Eur J Clin Nutr, 2016; 71(3): 402-406. doi: 10.1038/ejcn.2016.185.. DE. 57. Abadía, R. Efecto renoprotector de los ARAs y la dieta hipocalórica en un modelo. CA. experimental de lesión renal precoz en ratas obesas y diabéticas (fa/fa). [Tesis doctoral]. España: Universidad de Zaragoza; 2016.. TE. 58. Gower, B. A., & Goss, A. M. A lower-carbohydrate, higher-fat diet reduces. IO. abdominal and intermuscular fat and increases insulin sensitivity in adults at risk of 2. BL. type. diabetes.. The. Journal. of. nutrition,. 2014;. 145(1),. 177S–83S.. BI. doi:10.3945/jn.114.195065.. 59. Saxton, J. M., Scott, E. J., Daley, A. J., Woodroofe, M., Mutrie, N., Crank, H., … Coleman, R. E. Effects of an exercise and hypocaloric healthy eating intervention on indices of psychological health status, hypothalamic-pituitary-adrenal axis regulation. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. and immune function after early-stage breast cancer: a randomised controlled trial. Breast cancer research: BCR, 2014; 16(2), R39. doi: 10.1186/bcr3643. 60. Falowo, A.B, Muchenje, V., Hugo, A., Aiyegoro, O.A., Fayemi, P.O. Antioxidant. AS. activities of Moringa oleifera L. and Bidens pilosa L. leaf extracts and their effects. IC. on oxidative stability of ground raw beef during refrigeration storage. CyTA-Journal. G. of food, 2016; 15(2): 249-256. doi.org/10.1080/19476337.2016.1243587.. LO. 61. Ribas, B., y Cascales, M. Restricción calórica y longevidad. Anales de la Real. O. Academia Nacional de Farmacia, 2016; 82: 76-86.. BI. 62. Cotoras M., Vinvanco H., Melo R., Aguirre M., Silva E., Mendoza L. In vitro and in. AS. vivo evaluation of the antioxidant and prooxidant activity of phenolic compounds. CI. obtained from grape (Vitis vinifera) pomace. Molecules, 2014; 19(12): 21154–. CI EN. 21167. doi: 10.3390/ moléculas191221154.. 63. Fukumoto, L.R, Mazza, G. Assessing antioxidant and prooxidant activities of phenolic compounds. J. Agric. Food Chem., 2000; 48, 3597–3604. 10.1021 /. DE. jf000220w.. CA. 64. Veskouis AS, Kyparos A., Nikolaidis MG, Stagos D., Aligiannis N., Halabalaki M., et al. The Antioxidant Effects of a Polyphenol-Rich Grape Pomace Extract In Vitro Not. Correspond. TE. Do. In. Vivo. Using. Exercise. as. an. Oxidant. IO. Stimulus. Oxido Medicin. Cell. Longev., 2012; 1-14. doi: 185867.10.1155 /. BI. BL. 2012/185867.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) BI. O. LO. G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. ANEXOS. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. BI. O. LO. G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BI. BL. ANEXO 1. Identificación taxonómica de B. pilosa en el Herbarium Truxillense.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. B. CI EN. CI. AS. BI. O. LO. G. A. D. E. F. BI. BL. IO. TE. CA. DE. C. ANEXO 2. Proceso de preparación del extracto acuoso de B. pilosa. A) Lavado de hojas; B) Secado a sombra; C) Filtración del decocto; D) Secado por pervaporación; E) Molienda del extracto; F) Obtención del polvo negro.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) BI. O. LO. G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A. B. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. ANEXO 3. A) Pesaje semanal de animales; B) Pesaje de alimento para la suministración de las dietas.. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) A. CI EN. CI. AS. BI. O. LO. G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BI. BL. IO. TE. CA. DE. B. C. ANEXO 4. Determinación del efecto antioxidante. A) Preparación de la mesa de trabajo; B) Obtención de los tejidos hepático y cerebral; C) Lectura de absorbancias para determinación de la lipoperoxidación.. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. SC. F. p-valor. Tratamiento. 12,8122. 32,8515. 0,00000045. Error. 2,0800. Total. 14,8923. LO. G. IC. AS. Fuente. O. p < 0,05. Valor p. CI EN. Pares de ttos. CI. AS. BI. ANEXO 5. Prueba de ANAVA para cerebro, correspondiente a los grupos: control negativo, dieta estándar; control positivo: dieta hipocalórica; y experimentales, dieta hipocalórica con B. Pilosa a 150 mg.Kg-1 y 350 mg.Kg-1, respectivamente.. HSD. Tukey. 0,0010053. p < 0,01. 0,0010053. p < 0,01. GCN vs GE2. 0,1935720. No signif.. GCP vs GE1. 0,6782590. No signif.. CGP vs GE2. 0,0010053. p < 0,01. GE1 vs GE2. 0,0010053. p < 0,01. DE. GCN vs GCP. BI. BL. IO. TE. CA. GCN vs GE1. ANEXO 6. Prueba de Tukey que demuestra las diferencias honestamente significativas (HSD) entre las concentraciones de MDA en (µg.g-1 de cerebro) por grupos: control negativo, dieta estándar; control positivo: dieta hipocalórica; y experimentales, dieta hipocalórica con B. Pilosa a 150 mg.Kg-1 y 350 mg.Kg-1, respectivamente.. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. SC. F. p-valor. Tratamiento. 8, 0621. 48, 9587. 0,000000027. Error. 0,8782. Total. 8,9403. LO. G. IC. AS. Fuente. O. p < 0,05. Valor p. CI EN. Pares de ttos. CI. AS. BI. ANEXO 7. Prueba de ANAVA para hígado, correspondiente a los grupos: control negativo, dieta estándar; control positivo: dieta hipocalórica; y experimentales, dieta hipocalórica con B. Pilosa a 150 mg.Kg-1 y 350 mg.Kg-1, respectivamente.. HSD. Tukey. 0,0010053. p < 0,01. GCN vs GE1. 0,0010053. p < 0,01. GCN vs GE2. 0,2960537. No signif.. GCP vs GE1. 0,7591434. No signif.. CGP vs GE2. 0,0010053. p < 0,01. GE1 vs GE2. 0,0010053. p < 0,01. BI. BL. IO. TE. CA. DE. GCN vs GCP. ANEXO 8. Prueba de Tukey que demuestra las diferencias honestamente significativas (HSD) entre las concentraciones de MDA en (µg.g-1 de hígado) por grupos: control negativo, dieta estándar; control positivo: dieta hipocalórica; y experimentales, dieta hipocalórica con B. Pilosa a 150 mg.Kg-1 y 350 mg.Kg-1, respectivamente.. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Estadístico. Sig.. Pi. 0,938. 0,518. Pf. 0,847. 0,233. Pi. 0,987. 0,939. Pf. 0,993. 0,970. Pi. 0,950. 0,713. Pf. 0,963. 0,795. Pi. 0,964. 0,833. Pf. 0,933. G. IC. AS. Pesos. LO. Shapiro – Wilk. O. 0,614. Pesos. t. Sig (bilateral). Pi – Pf. 1,629. 0,245. DE. GCN. CI EN. CI. AS. BI. ANEXO 9. Prueba de normalidad Shapiro – Wilk aplicada a los pesos iniciales (Pi) y finales (Pf) en cada grupo: control negativo, dieta estándar; control positivo: dieta hipocalórica; y experimentales, dieta hipocalórica con B. Pilosa a 150 mg.Kg-1 y 350 mg.Kg-1, respectivamente.. Pi – Pf. 27,861. 0,000. GE1. Pi – Pf. 6,334. 0,008. GE2. Pi – Pf. 3,789. 0,019. IO. TE. CA. GCP. BL. ANEXO 10. Prueba T de Student para muestras relacionadas aplicada a los pesos iniciales (Pi). BI. y finales (Pf) en cada grupo: control negativo, dieta estándar; control positivo: dieta hipocalórica; y experimentales, dieta hipocalórica con B. Pilosa a 150 mg.Kg-1 y 350 mg.Kg-1, respectivamente.. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Dieta estándar/día/rata 370 Kcal………….100 g ? Kcal…………..28 g. AS. ? Kcal = 103.6 Kcal. IC. Dieta hipocalórica/día/rata. Kcal.……...…60%. LO. ?. G. 103.6 Kcal…………100%. O. ? Kcal = 62.16 Kcal. BI. Entonces:. AS. 103.6 Kcal – 62.16 Kcal = 41.44 Kcal. Gramos de pepino. 28 g………103.6 Kcal. 28 g – 11.2g = 16.8 g. CI EN. CI. Gramos de Thor. ? g.……....41.44 Kcal. Kcal de pepino. 100 g………14.97 Kcal. TE. Por lo tanto:. IO. 11.2 g……...41.44 Kcal ? g……...38.85 Kcal. BL. 16.8 g……... ? Kcal. ? Kcal = 2.52 Kcal. CA. DE. ? g = 11.2 g. ? g……..2.625 Kcal ? g = 17.5 g pepino. BI. ? g = 10.5 g Thor. 16.8 g………2.52 Kcal. ANEXO 11. Cálculos realizados para la suministración de las dietas estándar e hipocalórica.. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. BI. O. LO. G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. BI. O. LO. G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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