Efecto Citotóxico y Genotóxico del Lauril Sulfato de Sodio sobre el ciclo celular en meristemos radiculares de Allium cepa “cebolla”

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. IC. CI. AS. BI. O. LO. G. DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. AS. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL. CA. DE. CI EN. Efecto Citotóxico y Genotóxico del Lauril Sulfato de Sodio sobre el ciclo celular en meristemos radiculares de Allium cepa “cebolla” TESIS. BIÓLOGO. BI. BL. IO. TE. PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE. AUTOR: ASESOR:. Br. CLAUDIA LUCIA DELGADO ZAVALETA Mg. JUAN CARLOS RODRÌGUEZ SOTO TRUJILLO – PERU 2017. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AS. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. _________________________________________. G. IC. Dr. ORLANDO GONZÁLES NIEVES. CI. AS. BI. O. LO. RECTOR. CI EN. __________________________________________ Dr. RUBÉN VERA VÉLIZ. BI. BL. IO. TE. CA. DE. VICERRECTOR ACADÉMICO. __________________________________________ Dr. WEYDER PORTOCARRERO CÁRDENAS VICERRECTOR DE INVESTIGACIÓN. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AS. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. G. Dr. FREDDY ROGGER MEJÍA COICO. IC. __________________________________________. AS. BI. O. LO. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. CI. _____________________________________________. CI EN. Dr. FREDDY PELÁEZ PELÁEZ DIRECTOR ESCUELA ACADÉMICA PROFESIONAL DE CIENCIAS. TE. CA. DE. BIOLÓGICAS. BI. BL. IO. _____________________________________________ Dr. ANGELITA CABRERA DE CIPRIANO. DIRECTOR DEL DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AS. Señores miembros del Jurado. IC. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el régimen de Grados y Títulos. G. de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, pongo a. LO. vuestra consideración y elevado criterio el presente informe de tesis titulado:. AS. meristemos radiculares de Allium cepa “cebolla”. BI. O. Efecto Citotóxico y Genotóxico del lauril sulfato de sodio sobre el ciclo celular en. CI EN. CI. Con el cual pretendo obtener el Título Profesional de Biólogo.. BI. BL. IO. TE. CA. DE. Trujillo, Setiembre del año 2017. __________________________________________ Br. Claudia Lucia Delgado Zavaleta. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR. El que suscribe, Mg. Juan Carlos Rodríguez Soto, asesor de la tesis titulada: “Efecto Cito-. AS. tóxico y Genotóxico del lauril sulfato de sodio sobre el ciclo celular en meristemos. IC. radiculares de Allium cepa “cebolla”” deja constancia que ha sido desarrollada, de. G. acuerdo al reglamento establecido por la Facultad de Ciencias Biológicas de la. LO. Universidad Nacional de Trujillo, estando en conformidad con su correspondiente. O. proyecto, y que el informe ha sido redactado acogiendo las observaciones y sugerencias. AS. BI. alcanzadas.. CA. DE. CI EN. trámite del reglamento correspondiente.. CI. Por lo tanto, autorizo a la Br. Claudia Lucia Delgado Zavaleta, continuar con el. BI. BL. IO. TE. Trujillo, Setiembre de 2017. Mg. Juan Carlos Rodríguez Soto. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MIEMBROS DEL JURADO. Los suscritos, miembros del jurado, declaran que la presente tesis ha sido ejecutada en. AS. concordancia con las normas de la Escuela Académico Profesional de Ciencias. O. LO. G. IC. Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo.. CI EN. CI. AS. PRESIDENTE. BI. Dr. Juan César Muro Morey. SECRETARIO. BI. BL. IO. TE. CA. DE. MsC. Abhel Arthur Calderón Peña. Mg. Juan Carlos Rodríguez Soto VOCAL. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben, miembros del Jurado, declaran que el presente Informe de. AS. Tesis titulado: “Efecto Citotóxico y Genotóxico del lauril sulfato de sodio sobre el ciclo celular en meristemos radiculares de Allium cepa “cebolla””, ha cumplido con. BI. O. LO. G. IC. los requisitos formales y fundamentales, siendo …………………………………………... AS. Dr. Juan César Muro Morey. CI EN. CI. PRESIDENTE. SECRETARIO. BI. BL. IO. TE. CA. DE. MsC. Abhel Arthur Calderón Peña. Mg. Juan Carlos rodríguez Soto VOCAL. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. Esta tesis se la dedico a mi Dios quién supo guiarme por el buen camino, darme. AS. fuerzas para seguir adelante y no desmayar en los problemas que se presentaban,. IC. enseñándome a encarar las adversidades sin perder nunca la dignidad ni desfallecer en el. G. intento; a la Virgen de la Puerta quien me guío en cada paso que he dado, cada decisión. LO. que he podido tomar a lo largo de mi vida.. O. A mi familia quienes por ellos soy lo que soy. Para mis padres Angelita. BI. Zavaleta Mariños y Wladimir Delgado Daza por su apoyo, consejos, comprensión, amor,. AS. ayuda en los momentos difíciles, y por ayudarme con los recursos necesarios para. CI. estudiar. Me han dado todo lo que soy como persona, mis valores, mis principios, mi. CI EN. carácter, mi empeño, mi perseverancia, mi coraje para conseguir mis objetivos. A mis hermanos por estar siempre presentes, Carolina Delgado Zavaleta y mi hermano. profesionalmente.. quien fue mí inspiración para poderme realizar. DE. mayor Oscar Delgado Zavaleta. CA. Mis abuelos Hortensio y Idelfonso que desde el cielo me guían, cuidan y protegen ,son. TE. mis ángeles que a través de mis sueños se presentan y me hacen sentir su presencia , son. BL. IO. mi motivo que aunque no están quiero demostrarle lo lejos que puedo llegar .. BI. Un agradecimiento muy especial al Dr. Juan Cesar Muro Morey por haberme. dado la confianza y haberme apoyado brindándome las instalaciones del Laboratorio Multifuncional I de la gloriosa Escuela Académica Profesional de Ciencias Biológicas para la ejecución de mi tesis .. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTO. AS. Este proyecto es el resultado del esfuerzo conjunto de todos los que formamos el grupo. IC. de trabajo. Por esto agradezco a mi asesor Mg. Juan Carlos Rodríguez Soto, quien a lo. G. largo de este tiempo ha puesto a prueba sus capacidades y conocimientos en el desarrollo. LO. de este nuevo plan estratégico, la cual ha finalizado llenando todas nuestras expectativas.. O. Agradezco al Dr. Juan A. Muro Morey, por el apoyo constante en mi trabajo de. BI. investigación. A mis profesores que contribuyeron en mi formación profesional, a quienes. AS. les debo gran parte de mis conocimientos, con especial mención a los profesores Dra.. CI. Aida Carbajal, Dr. Carlos León, Dr. José A. Saldaña Jiménez, MsC. Carlos H. Quijano. CI EN. Jara, Dr. Gaspar Ayquipa, Dr. Roberto Rodríguez, Dr. Freddy Peláez, Dr. Fredy Mejía y Dr. José Mostacero, gracias a todos por su paciencia y enseñanzas, gracias a la prestigiosa Universidad Nacional de Trujillo, la cual abre sus puertas a jóvenes como nosotros,. BI. BL. IO. TE. CA. DE. preparándonos para un futuro competitivo y formándonos como personas de bien.. ¡Gracias!. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE Pág.. AS. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO………......ii. IC. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.…………...iii. G. PRESENTACIÓN……………….………………………………………………….. iv. LO. DEL ASESOR.………….…………………………………………………..………...v. BI. O. MIEMBROS DEL JURADO……………………………………………………..….vi. AS. APROBACIÓN……………..……………………….…………………………..…..vii. CI. DEDICATORIA.……………………………………………………………………viii. CI EN. AGRADECIMIENTO………………………………………………………….…….ix ÍNDICE ……………...………………………………………………………….…......x. DE. RESUMEN…..………………………………………….……………………………xi. CA. ABSTRAC...….…………………………...…………….…………………………...xii. TE. I. INTRODUCCIÓN….………………………………………………………….…....1. IO. II. MATERIAL Y MÉTODOS….……….…….………………………………..….....6. BL. III. RESULTADOS………….………………...…………………………………......11. BI. IV. DISCUSIÓN…………………………………………………………………......27. V. CONCLUSIÓN……………………………………………………………....…...38. VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.…………………...……………….…..…39 VII. ANEXOS.……………………………………………………...……………….43 x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. En el presente trabajo se determinó el efecto de seis concentraciones de lauril sulfato de sodio (0%, 0,25 %, 0,5%, 1% ,2%, 4%) sobre el ciclo celular en. AS. poblaciones celulares de meristemos radiculares de Allium cepa “cebolla” var.. IC. roja arequipeña. Para lo cual, se indujo el crecimiento de raicillas de 2 a 3 cm de. LO. G. longitud, para luego ser expuestas a los tratamientos consistentes en las diferentes concentraciones SLS. Posteriormente se realizó la coloración con la técnica de. BI. O. Tijo y Levan, finalmente la lectura al microscopio. Los resultados obtenidos a una hora de recuperación evidenciaron una disminución del índice mitótico de 1.834. AS. %) a concentración 4% (T6) pero a la vez una disminución significativa del índice. CI. profásico (15.152 %) con el mismo tratamiento. Resultados similares se dieron a. CI EN. cuatro horas de recuperación, donde la disminución máxima del índice mitótico llegó a 2,085%, a la vez una disminución del índice profásico (19,418 %); lo que. DE. nos indicaría que al paso del tiempo la recuperación de los índices normales del ciclo celular se restablecen. Se observó además un efecto genotóxico,. CA. evidenciándose con la presencia de puentes telofásicos, células binucleadas y. TE. telofases amorfas. El análisis de varianza evidenció la presencia de diferencias significativas entre los tratamientos y la prueba de comparación de media. BL. IO. estableció la conformación de diferentes grupos homogéneos estadísticamente.. BI. Palabras claves: Lauril sulfato de sodio, citotoxicidad, genotoxicidad, Allium cepa.. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT. The effect of six concentrations of sodium lauryl sulfate (0%, 0.25%, 0.5%, 1%, 2%, 4%) on the cell cycle in cell populations of root meristems of Allium cepa "onion" var. red. AS. arequipeña. For this, the growth of rootlets of 2 to 3 cm in length was induced, and then. IC. exposed to treatments consistent with the different SLS concentrations. Subsequently the. G. staining was done with the technique of Tijo and Levan, finally the reading under the. LO. microscope. The results obtained at one hour of recovery showed a decrease in the mitotic. O. index of 1.834%) at concentration 4% (T6) but at the same time a significant decrease of. BI. the prophase index (15,152%) with the same treatment. Similar results occurred at four. AS. hours of recovery, where the maximum decrease in the mitotic index reached 2.085%,. CI. while a decrease in the prophase index (19.418%); which would indicate that to the. CI EN. passage of the time the recovery of the normal indexes of the cell cycle are restored. It was also observed a genotoxic effect, evidenced with the presence of telophase bridges, binucleate cells and amorphous telophase. The analysis of variance evidenced the. DE. presence of significant differences between treatments and the comparison test of mean. TE. CA. established the conformation of different homogeneous groups statistically.. BI. BL. IO. Key words: Sodium lauryl sulfate, cytotoxicity, genotoxicity, Allium cepa. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN. Desde hace más de 40 años, el campo de aplicación de los surfactantes es. AS. probablemente el más interdisciplinario de la ciencia y de la tecnología moderna;. IC. la multiplicidad de las aplicaciones atribuidas al uso de los agentes tensoactivos. G. o también llamados surfactantes ha sido motivo de interés para la investigación. LO. en diversas industrias, tales como petrolera, farmacéutica, alimentaria, cosmética,. BI. O. de detergentes, de pinturas, de pesticidas, etc. (Rosen, 1989).. AS. Lauril sulfato de sodio (SLS) es un molécula aniónica que tiene una alta. CI. afinidad por las moléculas de proteínas, tiene buen poder de humectación y ayuda. CI EN. al mojado, es un excelente formador de espuma (agente espumante), incluso en aguas duras, cuenta con buenas propiedades de detergencia, al ser una sustancia tensoactiva, tiene afinidad con el agua y la grasa, reduce la tensión superficial del. DE. líquido emulsificando las grasas y facilitando el proceso de limpieza (Marta,. TE. CA. 2009).. IO. Uno de los surfactantes más empleados en las industrias es justo lauril. BL. sulfato de sodio (SLS), las concentraciones de este varían según el producto y. BI. propiedades que brinda, sin embargo, se carece de los estudios de citotoxicidad y genotoxicidad que permitan conocer los efectos que este surfactante (SLS) pueda ocasionar. Lauril sulfato de sodio o lauril sulfato sódico (SLS) que es una mezcla de alquilsulfatos sódicos, cuyo componente principal es el lauril sulfato sódico. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 1.

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. presenta dentro de sus propiedades su poder tensoactivo, detergente y adhesión (Recep, 2015). El efecto tensoactivo del SLS está referido al rompimiento de la tensión. AS. superficial. Los agentes tensoactivos utilizados en pequeñas cantidades del orden. IC. de 0.001M abaten fuertemente la tensión superficial de solventes como es el caso. G. del agua. Este abatimiento puede calcularse por la relación de Gibbs-Duhem.. LO. Estas moléculas anfifílicas tienen una cadena hidrocarbonada suficientemente. O. larga hidrófoba y lipófila, y una cabeza polar hidrófila y lipófoba. Es. BI. adsorbiéndose en la interfase, como estos tensoactivos disminuyen la tensión. CI EN. CI. interfacial (Goodger, 1997).. AS. interfacial y estabilizan esta interfase, por aumento del área de contacto o área. SLS además es un detergente de carácter aniónico, que es efectivo tanto. DE. en medio ácido como en medio básico, y también en agua dura. Muy utilizado en la fabricación de champús y para la limpieza de la piel. También se usa en la. CA. preparación de la cera, es emulsionante (alcohol cetoestearílico + lauril sulfato. TE. sódico en proporción 9:1) con la cual se preparan emulsiones aceite en agua. La propiedad del SLS de adhesión, al sólido del detergente, se hace por el. BI. BL. IO. añadiéndola sobre bases grasas o parafínica. (Latorre ,1996). desplazamiento del contaminante y su conversión bajo la forma de glóbulo, favorece la eliminación de la impureza. A partir de cierta concentración de tensoactivo, se obtiene una micela teniendo como núcleo el glóbulo grasoso y alrededor las moléculas de tensoactivo, lo que facilita su suspensión en la. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 2.

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. solución. Como los detergentes son generalmente iónicos, las micelas están rodeadas de cargas eléctricas lo cual impide su agrupamiento micelar (Alfonso, 2003). AS. Lauril sulfato de sodio o sodio dodecil sulfato, en su descripción comercial se presenta como polvo fino blanco, con débil olor característico. Su fórmula. G. IC. empírica es C12H25NaO4S, que alcanza un peso molecular de 288.38, y cuya. LO. solubilidad se da en agua (soluble 1:10) donde se obtiene una solución. O. opalescente, en etanol es parcialmente soluble, en cloroformo es prácticamente. AS. BI. insoluble (Negroni, 2009).. Longobardi (1992) argumenta que SLS un ingrediente común en los. CI. productos de higiene personal, es un aditivo que permite que los productos de. CI EN. limpieza formen espuma. Su manejo acarrea un "peligro moderado" que se relacionó con el cáncer, la neurotoxicidad, la toxicidad en los órganos, la irritación. DE. de la piel y el trastorno endócrino. Entre sus efectos adversos es tenemos el poder producir irritación, y entre las observaciones de su uso se señala que interacciona. CA. con surfactantes catiónicos, perdiendo actividad, es incompatible con iones. IO. TE. metálicos polivalentes y con medio ácido de pH inferior a 2.5.. BL. Por otro lado, el ciclo celular marca el comportamiento de la célula en su. BI. tiempo de vida, el ciclo se divide en distintas fases: en la fase G0 las células están en reposo o quiescentes; en la fase G1 las células se recuperan de la división celular o inician un nuevo ciclo; en la fase S se replica el ADN para que tras la división cada célula hija posea una copia completa del material genético; en la fase G2 termina la síntesis de ADN y las células se preparan para la división; y. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 3.

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. finalmente en la fase M o mitosis se produce la división en dos células hijas. En general, el daño en el ADN celular puede dar lugar a dos consecuencias: el ciclo celular se detiene en puntos específicos para que la maquinaria de reparación actúe. AS. sobre el ADN dañado, o bien si el daño no puede ser reparado la célula entra en. G. IC. apoptosis y muere (Pierce, 2009).. LO. La cantidad de ADN es diferente entre organismos de distintas especies,. O. pero es la misma en todas las células del mismo organismo (salvo determinadas. BI. excepciones: células meióticas, células cancerígenas), por esto la cantidad de. AS. ADN en las células puede ser usada para estudiar la evolución del ciclo celular de una determinada población celular e identificar anomalías, principalmente. CI. relacionadas con diversas patologías y procesos cancerígenos. La citometría de. CI EN. flujo es la metodología idónea para llevar a cabo el análisis del ciclo celular porque emplea marcadores que se unen específicamente al material genético. DE. proporcionando información exacta de la cantidad ADN presente en cada momento. Esto permite su cuantificación e identificación de las células normales. CA. diploides o en reposo, aquellas que están en la fase de síntesis de nuevo ADN, y. IO. TE. aquellas que se encuentran en fase premitótica o mitótica (Silva, 2003).. BL. Fiskesjo (1998), argumenta que la aplicación del test Allium en bulbos de. BI. cebolla, permite evaluar el riesgo citotóxico y genotóxico de una sustancia o una mezcla de sustancias, así como también de otras que podrían poseer efectos protectores frente a daños oxidativos. Este test nos permitirá determinar el efecto de lauril sulfato de sodio sobre la población celular en meristemos radiculares de Allium cepa.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 4.

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Estudios microscópicos de células radicales de cebolla, creciendo en diferentes medios tóxicos, han mostrado un amplio rango de alteraciones citológicas, lo que indica la fina sensibilidad de las raíces de A. cepa para detectar. AS. sustancias potencialmente peligrosas tanto para la salud humana como para el. G. IC. medio ambiente en general (Barazorda, 2017).. LO. Cuando las células del tejido meristemático de A. cepa se encuentran en. O. equilibrio proliferativo, la duración de cada uno de los períodos del ciclo celular. BI. permanece constante; de esta forma, el número de células que están en una fase. AS. determinada es también constante y proporcional a la duración en tiempo de la misma; pero cuando se lleva a cabo en presencia de sustancias tóxicas, la división. CI. celular de los meristemos radiculares puede inhibirse, ya sea retardando el proceso. CI EN. de mitosis o destruyendo las células. Este tipo de alteraciones generalmente. DE. impide el crecimiento normal de la raíz y por tanto su elongación (Díaz, 2007).. El uso diario de surfactantes que realiza la población humana va. CA. aumentando considerablemente en los últimos años debido a la gran cantidad de. TE. aplicaciones que tienen en diversas industrias, por ello es necesario que los. IO. productos fabricados con SLS sean seguros tanto para la salud humana como para. BL. el medio ambiente. Por lo tanto, el presente estudio se orientó a determinar el efecto citotóxico y genotóxico de SLS sobre el ciclo celular de meristemos. BI. radiculares de Allium cepa “cebolla”.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 5.

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. METODOLOGÍA. AS. 1. Obtención y manejo de material biológico. IC. El material biológico se adquirió en el centro de abastos “La Hermelinda”. G. del distrito de Trujillo. Los bulbos de Allium cepa L. variedad Roja Arequipeña. LO. tuvieron, un peso aproximado de 75 gramos, en forma de perilla y buen estado. BI. O. de conservación.. AS. Se utilizaron 80 bulbos de Allium cepa “cebolla” a los cuales se les quitó y limpió cuidadosamente de las catafilas y raicillas secas, eliminando dichos. CI EN. CI. restos sin dañar el disco germinativo (Anexo1) En la parte ecuatorial de los bulbos se introdujeron tres palitos mondadientes distribuidos equidistantemente para sostener el bulbo en la boca de envases de 8 onzas, lo que promovió la. TE. CA. (Anexo 2).. DE. ventilación y el crecimiento de las raicillas en agua, previamente declorinada. BI. BL. IO. 2. Instalación del sistema biológico. Los bulbos de las cebollas se mantuvieron en un sistema de soporte. diseñado especialmente hecho de triplay y dentro de una cámara oscura (Anexo 3); se utilizó un motor de pecera para proporcionar aireación constante a razón de 10-20ml/min., el tiempo de aireación diaria fue de 1 hora y la renovación del agua declorinada contenida en los vasos también fue diaria. (Anexo 4). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 6.

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Luego de 72 horas se seleccionaron aquellos bulbos que tuvieron más de 10 raicillas, con longitud promedio de 2 a 3 cm, a fin de asegurar la presencia de. AS. la cinética del ciclo celular.. LO. G. IC. 3. Obtención del agente químico. O. Lauril Sulfato de Sodio (Dodecil sulfato de sodio), fue obtenida de casa. AS. presentación polvo fino blanco (Anexo5).. BI. comercial, de marca J.T.Baker, de origen estadounidense, en calidad ultra pura y. CI EN. CI. 4. Diseño experimental. Se realizó un diseño completamente al azar con tres repeticiones para cada. DE. tratamiento con diferentes concentraciones de SLS, estableciéndose seis. BI. BL. IO. TE. CA. tratamientos que incluye al control, según el siguiente esquema.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 7.

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Diseño experimental. T1. T2. T3. T4. T5. Control. 0,25 % SLS. 0,5% SLS. 1% SLS. 2% SLS. AS. T6. 72h.. 72h.. O. 72h.. 72h.. 72h.. BI. 72h.. LO. G. IC. 4% SLS. AS. Aplicación de los tratamientos: diferentes concentraciones de SLS (1 hora de. CI EN. CI. exposición). 1h. 3h. z 4 horas: Evaluar la alteración del ciclo celular (4 horas). BI. BL. IO. TE. CA. DE. 1 hora: Evaluación del índice mitótico e índice de fases. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 8.

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 5. Obtención de preparados citológicos Luego de la aplicación de los tratamientos y el transcurso del tiempo de recuperación, las raicillas de los bulbos de cebolla fueron disectadas y fijadas en. AS. Carnoy´s (Anexo 6). Previo al preparado se lavó tres veces con agua destilada para retirar de esta manera los restos del fijador. Luego se procedió a secarlas en. G. IC. papel toalla para eliminar el resto de agua en superficie. Luego fueron,. LO. depositadas en una luna de reloj, y se procedió a colorear con 9 gotas de orceina. O. acética al 2% y 1 gota de HCl 1N por 30 minutos de acuerdo a la técnica de Tjio. BI. y Levan (1956). Pasado el tiempo de coloración, fueron disectados los ápices de. AS. las raicillas y colocados sobre una lámina portaobjetos, se agregó una gota de gelatina fenicada, como sustancia cementante y luego se colocó sobre esta una. CI. laminilla cubreobjetos, y se procedió a utilizar la técnica del “squash” o del. CI EN. aplastamiento. Las láminas preparadas fueron selladas en sus bordes con glass y. DE. manteniendo en refrigeración hasta su lectura correspondiente.. 6. Análisis citológico para la determinación de la citotoxicidad y genotoxicidad. CA. Para la observación de los preparados citológicos se utilizó un microscopio. TE. compuesto Olympus CX 21 con el objetivo de 40x. Posteriormente, se procedió. IO. a contar en promedio unas 2000 células meristemático por cada repetición, para. BI. BL. cada tratamiento ensayado, utilizando la técnica de barrido (Anexo 7). Para la evaluación de la citotoxicidad se estimaron los valores del índice. mitótico e índice de fases (Anexo 8 y 9) .Para la evaluación de la genotoxicidad se evaluó la presencia anomalías del material hereditario como. puentes. telofásicos, células binucleadas y telofases amorfas, los resultados fueron expresados en porcentajes.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 9.

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 7. Manejo y Análisis de los resultados Con los datos tabulados, los resultados fueron presentados en tablas, gráficos y figuras. Se aplicó además el respectivo análisis de varianza y. AS. comparación de promedios entre los diferentes tratamientos, utilizando el. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. BI. O. LO. G. IC. programa Statgraphics Centurion 18 versión de prueba para Windows.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 10.

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS. En el presente trabajo, se determinó el efecto de diferentes concentraciones. AS. (0%, 0,25%, 0,5%,1%,2%,4%) de lauril sulfato de sodio sobre el ciclo celular en. IC. meristemos radiculares de Allium cepa, obteniéndose los siguientes resultados.. LO. G. En la tabla 1 y 2, se observa los índices mitóticos, índice de fases, y porcentaje de anomalías del material hereditario, en tejido. meristemático. BI. O. radicular de Allium cepa expuesta a diferentes concentraciones de SLS con una y cuatro horas de recuperación respectivamente, los índices con tratamiento de SLS. CI. AS. obtuvieron valores menores que el tratamiento control.. CI EN. En el gráfico 1 y 2, se muestra el porcentaje del índice mitótico a una y cuatro horas de recuperación respectivamente, donde se observa una disminución. DE. del índice a medida que aumenta la concentración de SLS.. CA. En el gráfico 3 y 4 se observa el porcentaje del índice de fases a una y. TE. cuatro horas de recuperación respectivamente, a medida que aumenta la. IO. concentración de SLS, el índice profásico disminuye, mientras que el índice. BL. metafásico aumenta. Así mismo se observa el aumento del índice anafásico en relación al control, siendo más alto el índice frente a concentraciones más altas de. BI. SLS. El índice telofásico disminuye conforme aumenta la concentración de SLS.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 11.

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En la Figura 1 se observa las fases normales del ciclo celular en tejido meristemático radicular de Allium cepa observadas durante el conteo de los. AS. tratamientos con SLS.. En la figura 2 se muestran las anomalías del ciclo celular en tejido. G. IC. meristemático radicular de Allium cepa observadas durante el conteo de los. LO. tratamientos con SLS , entre las cuales está la presencia de puentes telofasicos,. BI. O. células binucleadas y telofases amorfas.. AS. En la tabla 3 y 4, se muestra el análisis de varianza del índice mitótico, índice de fases e índice de anomalias del material hereditario en tejido. CI. meristemático radicular de Allium cepa sometido a diferentes concentraciones de. CI EN. Lauril Sulfato de Sodio a una y cuatro horas de recuperación, encontrándose. DE. diferencias significativas entre los tratamiento para cada uno de los índices.. En los cuadros 1 y 2, se muestra el análisis de comparación de medias de. CA. los índices mitóticos, índice de fases e indices de anomalías del material. TE. hereditario en tejido meristemático radicular de Allium cepa sometido a diferentes. IO. concentraciones de SLS a una y cuatro horas de recuperacion, encontrando. BI. BL. diferentes grupos homogéneos para cada índice.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 12.

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. Tabla 1. Porcentajes de índices mitóticos, índice de fases e índice de anomalías en el material hereditario en tejido meristemático radicular de Allium cepa expuestos a diferentes concentraciones de lauril sulfato de sodio con una hora de. Índice. Índice. Mitótico. Profásico. Metafásico. T1. 13,503 ± 0,00. 44,760 ± 0,67. T2. 2,895 ± 0,05. 28,847 ± 0,31. 40,506 ± 0,42 14,188 ± 0,53 16,459 ± 0,33. 0 ± 0,00. T3. 2,692 ± 0,14. 20,074 ± 0,12. 50,381 ± 0,59 17,244 ± 0,58 12,301 ± 0,25. 1,258 ±0,91. T4. 2,474 ± 0,11. 18,345± 0,47. 51,529 ± 0,50 19,738 ± 0,32 10,388 ± 0,16. 1,339 ±0,03. T5. 2,108 ± 0,01. 16,269 ± 0,62. 55,748 ± 0,93 19,569 ± 0,38. 8,414 ± 0,46. 1,525 ±0,03. T6. 1,834 ± 0,02. 15,152± 0,15. 55,031 ± 0,46 21,338 ± 0,17. 8,479 ± 0,32. 1,669 ±0,04. Índice. Índice. Índice. Anafásico. Telofásico. anomalías. BI. CI AS. CI. EN. 14,983 ± 0,33 10,250 ± 0,00 30,010 ± 0,00. O. TE CA. TRATAMIENTOS. O. Índice. DE. LO. G. recuperación.. BI. BL I. Leyenda: T1: 0%SLS, T2: 0,25%SLS, T3: 0,5%SLS, T4: 1%SLS, T5: 2%SLS, T6: 4%SLS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 13. 0 ± 0,00.

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. Tabla 2. Porcentajes de índices mitóticos, índice de fases e índice de anomalías en el material hereditario en tejido meristemático radicular de Allium cepa expuestos a diferentes concentraciones de lauril sulfato de sodio con cuatro. LO. G. horas de recuperación.. Índice. Índice. Mitótico. Profásico. Metafásico. T1. 13,950 ± 0,29. 45,203 ± 1,62. 15,097 ± 0,12. 10,817 ± 0,63. 28,877 ± 0,50. 0 ± 0,00. T2. 3,855 ± 0,11. 29,347 ± 0,66. 34,711 ± 0,22. 13,355 ± 0,08. 22,587 ± 0,48. 1,00 ± 0,00. T3. 3,397 ± 0,06. 24,906 ± 0,61. 44,044 ± 0,86. 14,663 ± 0,19. 16,026 ± 0,45. 1,449 ± 0,04. T4. 2,573 ± 0,05. 23,222 ± 0,14. 48,332 ± 0,68. 15,706 ± 0,43. 12,739 ± 0,42. 1,558 ± 0,01. T5. 2,256 ± 0,05. 21,030 ± 0,41. 49,711 ± 0,91. 17,212 ± 1,17. 12,046 ± 0,02. 1,713 ± 0,02. T6. 2,085 ±0,01. 19,418 ± 0,33. 49,594 ±0,18. 19,251 ± 0,38. 11,736 ± 0,13. 1,887 ± 0,02. BI. Anafásico. CI AS. EN. CI. DE. TE CA. Índice. O. Índice. TRATAMIENTOS. BI. BL I. O. Leyenda: T1: 0% SLS, T2: 0,25% SLS, T3: 0,5% SLS, T4: 1% SLS, T5: 2% SLS, T6: 4%SLS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 14. Índice Telofásico. Índice anomalías.

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. Gráfico 1. Porcentajes de índices mitóticos en meristemos radiculares de Allium cepa expuestos a diferentes. LO. G. concentraciones de lauril sulfato de sodio a una hora de recuperación.. BI. a. CI AS. 14. O. 16. EN. 10. CI. 8. 13,503% 6. b. TE CA. 4. DE. % de Indice Mitótico. 12. 2. 2,895%. T2. BL I. T1. O. 0. b 2,692%. c 2,474 %. T3. T4 Tratamientos. BI. Leyenda: T1: 0% SLS. T2: 0,25 % SLS. T3: 0,5 % SLS. T4: 1% SLS. T5: 2% SLS. T6: 4% SLS Nota: Letras semejantes indican un mismo grupo homogéneo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 15. d. e. 2,108 %. 1,834%. T5. T6.

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. Gráfico 2. Porcentajes de índices mitóticos en meristemos radiculares de Allium cepa expuestos a diferentes. G. concentraciones de lauril sulfato de sodio a una cuatro horas de recuperación.. LO. 16. a. BI. O. 14. CI AS EN. 10. 8. CI. 13,95% 6. b. TE CA. 4. DE. % de Indice Mitótico. 12. 2. T1. BL I. 0. O. 3,855%. C. 3,397%. T2. d. 2,573%. T3. T4 Tratamientos. BI. Leyenda: T1: 0% SLS. T2: 0.25 % SLS. T3: 0.5 % SLS. T4: 1% SLS. T5: 2% SLS. T6: 4% SLS Nota: Letras semejantes indican un mismo grupo homogéneo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 16. d e. e. 2,256%. 2,085%. T5. T6.

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. Gráfico 3. Porcentajes de índices de fases en meristemos radiculares de Allium cepa expuestos a diferentes concentraciones. LO. G. de lauril sulfato de sodio a una hora de recuperación.. C. b 40. a. 40,506%. b. EN. 50.381%. 20. 30.01%. b. a. b 28.847%. a. C. CI. 30 44.76. BI CI AS. a. DE. % de índice de fases. C 50. 10. C. TE CA 14.188%. 10.25% 0. 1. 55,748%. C. d. 19.569%. 19.738%. Tratamientos. Índice Metafásico. 4. Índice Anafásico. Índice Telofásico. BI. Nota: Letras semejantes indican un mismo grupo homogéneo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 17. e 8,479%. 8.414%. 5. Leyenda: T1: 0% SLS T1: 0.25% SLS T3: 0.5% SLS T4: 1% SLS T5: 2% SLS T6: 4% SLS. 21,338%. 15,152%. 10.388% 18.345%. 3. e. e. 16.269%. 12.301%. e. d. e. BL I. O. Índice profasico. d. d. 17.244%. 20.074%. 2. 55,031%. 51.529%. 16.459%. 14.983. d. d. O. 60. 6.

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. Gráfico 4. Porcentajes de índices de fases en meristemos radiculares de Allium cepa expuestos a diferentes concentraciones. G. de lauril sulfato de sodio a cuatro horas de recuperación.. a. b. 30 45,203% 20. a. 22,587%. 29,347%. 48,332%. 14,663% 16,026% 24,906%. 15,097%. 49,711%. c. d. b, c c. b. 10,817%. c. 0. 2. TE CA. 1. 3. 4. e. d, e 17,212% 21,03%. 5. Tratamientos Índice Metafásico. Índice Anafásico. BL I. Leyenda: T1: 0% SLS. T2: 0.25% SLS. T3: 0.5% SLS. T4: 1% SLS. T5: 2% SLS. T6: 4% SL. BI. Nota: Letras semejantes indican un mismo grupo homogéneo. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 18. 19,251% 19,418%. 12,046. 12,739%. O. Índice profasico. d. e. d. d. 15.706 % 23,222%. 13,355%. DE. .. 49,594%. BI. 28,877%. c. b. 34,711%. a 10. 44,044%. EN. a. b e. CI AS. 40. O. c. d. d. d. CI. % de índice de fases. 50. LO. 60. Índice Telofásico. 11,736%. 6.

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G. IC AS. Gráfico 5. Porcentajes de anomalías del material hereditario en meristemos radiculares de Allium cepa expuestos a diferentes concentraciones de lauril sulfato de sodio a una hora de recuperación.. LO. 1.8. d. O. 1.6. c. 1.4. BI. b. CI AS. 1.2 1 0.8. 1,669%. 1,525%. EN. % de Anomalías. e. 0.6. a. a. 1,258%. 0%. DE. 0.4 0.2 0. T2. T3. TE CA. T1. CI. 1,339%. T4. T5. Tratamientos. BL I. O. Leyenda: T1: 0% SLS. T2: 0,25% SLS. T3: 0,5% SLS. T4: 1% SLS. T5: 2% SLS. T6: 4% SL. BI. Nota: Letras semejantes indican un mismo grupo homogéneo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 19. T6.

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G. IC AS. Gráfico 6. Porcentajes de anomalías del material hereditario en meristemos radiculares de Allium cepa expuestos a diferentes concentraciones de lauril sulfato de sodio a cuatro horas de recuperación.. 1.8. O. c. BI b. 1.2 1. EN. 0.8. 1,558%. 1,887%. CI. 0.6. 1,713%. 1,449%. 0.4 1%. a. TE CA. 0. DE. % de Anomalías. CI AS. 1.4. 0.2. e. d. 1.6. f. LO. 2. T1. T2. T3. T4. T5. Tratamientos. BL I. O. Leyenda: T1: 0% SLS. T2: 0,25% SLS. T3: 0,5% SLS. T4: 1% SLS. T5: 2% SLS. T6: 4% SL. BI. Nota: Letras semejantes indican un mismo grupo homogéneo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 20. T6 :.

(33) B. CI EN. CI. AS. BI. O. LO. A. G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. D. BI. BL. IO. TE. CA. DE. C. E. Figura 1. Fases normales del ciclo celular en tejido meristemático radicular de Allium cepa. Observadas a un aumento de 40 x en el conteo de los tratamientos con lauril sulfato de sodio . A: célula en interfase. B: célula en profase. C: célula en metafase. D: célula en anafase. E: célula en telofase.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 21.

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. LO. G. IC. AS. A. BI. BL. IO. TE. CA. DE. C. CI EN. CI. AS. BI. O. B. Figura 2. Anomalías del ciclo celular en tejido meristemático radicular de Allium cepa. Observadas a un aumento de 40 x en el conteo de los tratamientos con SLS . A: puente telofasico. B: célula binucleada. C: telofase amorfa. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 22.

(35) IC AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 3. Análisis de varianza de índices mitóticos, índice de fases e índices de anomalías del material hereditario en. G. tejido meristemático radicular de Allium cepa sometido a diferentes concentraciones de lauril sulfato de sodio. Gl. O. Suma de Cuadrados. Cuadrado. BI. Fuente de variación. LO. con una hora de recuperación.. Razón-F. Valor-P. 62,0802. 4346,26. 0.0000 *. Entre Índice Profásico. 1919,6. 5. 383,92. 849,12. 0.0000 *. Entre Índice Metafásico. 3625,07. 5. 725,014. 1181,47. 0.0000 *. Entre Índice Anafásico. 259,287. 5. 51,8574. 172,25. 0.0000 *. Entre Índice Telofásico. 1017,84. 5. 203,568. 1188,61. 0.0000 *. 5. 1,73778. 1178,56. 0.0000 *. EN. 5. CI. 310,401. TE CA. DE. Entre Índice Mitótico. CI AS. Medio. 8,6889. O. Entre Índice Anomalías. BI. BL I. * Diferencias significativas (p < 0.05). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 23.

(36) IC AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 4. Análisis de varianza de índices mitóticos, índice de fases e índices de anomalías del material hereditario en. G. tejido meristemático radicular de Allium cepa sometido a diferentes concentraciones de lauril sulfato de sodio. Suma de Cuadrados. Gl. Cuadrado. Razón-F. Valor-P. 63,1842. 1775,65. 0,0000*. 5. 269,066. 216,77. 0,0000 *. BI. Fuente de variación. O. LO. con cuatro horas de recuperación.. 315,921. 5. Entre Índice Profásico. 1345,33. Entre Índice Metafásico. 2768,29. 5. 553,658. 782,06. 0,0000 *. Entre Índice Anafásico. 130,852. 5. 26,1704. 36,83. 0,0000 *. Entre Índice Telofásico. 728,833. 5. 145,767. 500,03. 0,0000 *. 7,13308. 5. 1,42662. 1564,84. 0,0000 *. TE CA. DE. EN. Entre Índice Mitótico. CI. CI AS. Medio. O. Entre Índice Anomalías. BI. BL I. * Diferencias significativas (p < 0.05). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 24.

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 3 3 3 3 3 3. 1.834 2.10767 2.47433 2. 69233 2.89467 13,5033. X. 6 5 4 3 2 1. 3 3 3 3 3 3. 15,152 16,269 18,345 20,0737 28,8467 44,76. X X. 1 2 3 4 6 5. 3 3 3 3 3 3. CI EN. METAFÁSICO. 6 5 4 3 2 1. TE. BI. BL. IO. TELOFÁSICO. ANOMALÍAS. IC. X. G. X X. O. X. X X. X X. 14,9833 40,506 50,381 51,5293 55,0307 55,7477. X X X X X X. 1 2 3 5 4 6. 3 3 3 3 3 3. 10,25 14,188 17,244 19,5693 19,7377 21,3383. X. 5 6 4 3 2 1. 3 3 3 3 3 3. 8,41433 8,47867 10,3883 12,3013 16,459 30,01. X X. 2 1 3 4 5 6. 3 3 3 3 3 3. 0,000 0,000 1,258 1,33867 1,52467 1,66867. X X. DE. CA. ANAFÁSICO. X. BI. PROFÁSICO. Grupos Homogéneos. AS. MITÓTICO. Media. LO. Tratamientos Casos. CI. Índice. AS. Cuadro 1. Análisis de comparación de medias de los índices mitóticos, índice de fases e índices de anomalías del material hereditario en tejido radicular de Allium cepa sometido a diferentes concentraciones de lauril sulfato de sodio con una hora de recuperación mediante LSD.. X X X X X. X X X X. X X X X. Leyenda: T1: 0%SLS, T2: 0,25%SLS, T3: 0,5%SLS, T4: 1%SLS, T5: 2%SLS, T6: 4%SLS. LSD: Límite de significancia de diferencias de medias de Fisher.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 25.

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANOMALÍAS. IC. 19,418 21,03 23,222 24,9063 29,347 45,2033. G. 3 3 3 3 3 3. X XX X X. LO. 6 5 4 3 2 1. X. X. X X. X X. X X. 15,0967 34,7113 44,4043 48,3323 49,5943 49,7113. X. 1 2 3 4 5 6. 3 3 3 3 3 3. 10,8167 13,3553 14,6633 15,7063 17,2123 19,2513. X. 6 5 4 3 2 1. 3 3 3 3 3 3. 11,7363 12,046 12,739 16,0263 22,5867 28,8767. X XX X. 2 1 3 4 5 6. 3 3 3 3 3 3. 0,000 1,000 1,449 1,558 1,713 1,887. CI EN. 3 3 3 3 3 3. DE. CA TE BI. BL. IO. TELOFÁSICO. 2,08467 2,25633 2,57333 3,39733 3,85467 13,95. 1 2 3 4 6 5. METAFÁSICO. ANAFÁSICO. 3 3 3 3 3 3. BI. PROFÁSICO. 6 5 4 3 2 1. AS. MITÓTICO. Media Grupos Homogéneos. O. Tratamientos Casos. CI. Índice. AS. Cuadro 2. Análisis de comparación de medias de los índices mitóticos, índice de fases e índices de anomalías del material hereditario en tejido radicular de Allium cepa sometido a diferentes concentraciones de lauril sulfato de sodio con cuatro horas de recuperación mediante LSD.. X X X X X. X XX X X X. X X X X X X X X X. Leyenda: T1: 0%SLS, T2: 0,25%SLS, T3: 0,5%SLS, T4: 1%SLS, T5: 2%SLS, T6: 4%SLS. LSD: Límite de significancia de diferencias de medias de Fisher.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 26.

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN. AS. Es el estudio de la toxicología de SLS ha revelado que su toxicidad. IC. depende de multitud de factores; sin embargo, hay cierta controversia en torno a. G. los posibles efectos citotóxicos inducidos por SLS (Mudry, 2011). En nuestro. LO. estudio se determinó el efecto de diferentes concentraciones de SLS sobre tejido. O. meristemático radicular de Allium cepa, evaluado a una y cuatro horas de. AS. BI. recuperación.. CI. Los resultados muestran en la Tabla 1 y Gráfico 1, los índices mitóticos e. CI EN. índices de fases en tejido meristemático radicular de A. cepa expuesto a diferentes concentraciones de SLS con una hora de recuperación, en donde se observa una disminución importante del índice mitótico de los tratamientos frente al control. DE. (13,503%), en razón que a mayor concentración de SLS se observa menor índice. CA. mitótico, es así que el T2 (0,25% SLS) bajó a 2,895 %, el T3 (0,5% SLS) lo hizo a 2,692 %, el T4 (1 % SLS) alcanzó un 2,474 %, T5 ( 2% SLS) alcanzó 2,108 %. IO. TE. y el T6 (4% SLS) disminuyó a 1,834 %.. BL. Esta disminución importante del índice mitótico en los diferentes. BI. tratamientos se estaría debiendo a que SLS a dichas concentraciones y tiempos actúan bajo el correspondiente, complejo ciclina B – CDK 1(FPM: Factor Promotor de la Mitosis), el mismo que permite el paso de G2 hacia el periodo M (Pierce, 2012; Klug, 2013), por lo tanto al verse afectado dicho complejo, las células no transitarían normalmente de G2 hacia la mitosis, observándose menor. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 27.

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. número de células en división que lo normal. Semejantes variaciones del índice mitótico se observaron con las medidas realizadas a cuatro horas de recuperación; donde los índices de todos los tratamientos con SLS (Tabla 2 y Gráfico 2). AS. mostraron una disminución frente al índice de control (13,95%), teniendo que a mayor concentración menor índice mitótico; es así que el T2 (0,25% SLS). G. IC. disminuyó a un 3.855 %, el T3 (0,5% SLS) lo hizo a un 3,397 % , el T4 (1% SLS). LO. llegó hasta un 2,573% , T5(2% SLS) llego a disminuir un 2,256% y T6 (4% SLS). O. lo hizo a un 2,085 %. Debemos notar además que los índices de los tratamientos. BI. con SLS de cuatro horas son ligeramente superiores a los de una hora de. AS. recuperación, lo que nos indicaría que la recuperación del índice mitótico del ciclo celular, frente a la acción del surfactante, se va restableciendo lentamente con el. CI EN. CI. tiempo.. El desarrollo del análisis de varianza de los índices mitóticos evidenció la. DE. existencia de diferencias significativas entre los diferentes tratamientos ensayados tanto para una hora (Tabla 3) y como para cuatro horas de recuperación (Tabla 4).. CA. Así mismo, el análisis de comparación de medias arrojó la presencia de diferentes. TE. grupos homogéneos. Es así que, para una hora de recuperación (Cuadro 1) se. IO. diferencian cinco grupos homogéneos donde los tratamientos T3 (0,5% SLS) y. BL. T2 (0,25% SLS) conforman un mismo grupo homogéneo y los restantes se. BI. comportan independientemente; mientras que el análisis para cuatro horas de recuperación (Cuadro 2) también señaló la existencia de cinco grupos homogéneos, donde el tratamiento T6 (4% SLS) y el T5 (2% SLS) conforman un grupo homogéneo, así como los tratamientos T5 (2% SLS) y T4 (1% SLS). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 28.

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. conforman un segundo grupo homogéneo, el resto de tratamientos posee un comportamiento independientemente.. AS. En referencia al índice profásico (Tabla 1 y Gráfico 3) evaluado en tejido meristemático radicular de A. cepa expuesto a diferentes concentraciones de SLS. G. IC. con una hora de recuperación, se observa una disminución sustancial frente al. LO. tratamiento control (44,76 %), donde a mayor concentración de SLS se observó. O. menor índice profásico; es así que, el T2 (0,25 % SLS) disminuyó a 28,847%, el. BI. T3 (0,5 % SLS) lo hizo a 20,074% , el T4 (1 % SLS) alcanzó un 18,345%, el T5. AS. (2 % SLS) llego a 16,269% y el T6 (4 % SLS) alcanzó 15,152%. Esta disminución en el índice profásico en diferentes tratamientos se debería a que el SLS, a dichas. CI. concentraciones y tiempos, actúa sobre el correspondiente complejo ciclina B –. CI EN. CDK 1 que promueve el paso de G2 a M (Pierce, 2012; Klug, 2013) logrando disminuir de forma importante la proporción de células que llegan al periodo. DE. profásico; sin embargo, no estaría actuando sobre la función del mismo complejo que a este nivel de la división celular, actúa sobre la formación de los centros de. CA. organización de microtúbulos (COMT), el mismo que induce el ensamblaje del. TE. huso mitótico, y que al verse afectado evitaría el paso de profase a metafase. IO. (Pierce, 2009, Klug, 2013). Lo que nos da entender que las células si transitan. BL. normalmente de profase a metafase, entonces la importante disminución del índice. BI. profásico se debería por dos razones, la primera que llegan pocas células a profase. y segundo que las que están en profase transitan libremente a metafase; diferentes. índices se obtuvieron al evaluar el efecto citotóxico de otras sustancias sobre el mismo tejido (Rebaza, 2017; Otiniano, 2014; Andrioli y Mudry, 2011; Kalcheva et al, 2009).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 29.

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Semejantes variaciones se observaron con las medidas realizadas a cuatro horas de recuperación; donde los índices profásicos de todos los tratamientos con SLS (Tabla 2 y Gráfico 4) mostraron una disminución frente al índice de. AS. tratamiento control (45,203%), teniendo que a mayor concentración de SLS menor índice profásico; es así que el T2 (0,25% SLS) disminuyó a un 29,347 %,. G. IC. el T3 (0,5% SLS) lo hizo a un 24,906 % , el T4 (1% SLS) llegó hasta un 23,222%. LO. ,T5 (2% SLS) disminuyó un 21,03 % y en T6 (4% SLS) alcanzó un 19,418% .. O. Debemos notar además que los índices de los tratamientos con SLS de una hora. BI. son inferiores a los de una cuatro hora de recuperación, ello nos indicaría que la. AS. recuperación de los índices normales del ciclo celular se está restableciendo con. CI. el tiempo.. CI EN. El análisis de varianza de los índices profásicos evidenció la existencia de diferencias significativas entre los diferentes tratamientos ensayados tanto para. DE. una hora (Tabla 3) como para cuatro horas de recuperación (Tabla 4). Así mismo, el análisis de comparación de medias para una hora de recuperación arrojó la. CA. presencia de cinco grupos homogéneos donde el T6 (4% SLS) y el T5 (2% SLS). TE. conforman el mismo grupo homogéneo y el resto de tratamientos presentan un. IO. comportamiento independiente. El análisis de comparación de medias para cuatro. BL. horas de recuperación nos mostró solo cuatro grupos homogéneos donde los. BI. tratamientos T6 (4% SLS) y T5 (2% SLS) conforman un grupo homogéneo, los T4 (1% SLS) y T3 (0,5% SLS) otro grupo homogéneo, mientras que los T2 (0,25% SLS) y T1 (0% SLS) presentan comportamiento independiente (Cuadro 1 y Cuadro 2 respectivamente).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 30.

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. La Tabla 1 y Gráfico 3, nos muestran a la vez, los resultados de la evaluación del índice metafásico en tejido meristemático radicular de A. cepa expuesto a diferentes concentraciones de SLS con una hora de recuperación,. AS. donde se observa un aumento sustancial frente al tratamiento control (14,983%), donde a mayor concentración de SLS se observó mayor índice metafásico; es así. G. IC. que, el T2 (0,25% SLS) alcanzó un 40,506%, el T3 (0,5% SLS) aumento a. LO. 50,381% y el T4 (1 % SLS) alcanzó un 51,529%, T5(2% SLS) aumento a 55,748%. O. y T6(4% SLS) llegó a 55,031%. Estas variaciones importantes del índice. BI. metafásico en los diferentes tratamientos probablemente se deben al libre tránsito. AS. de células en profase a metafase, puesto que las SLS a dichas concentraciones y tiempos, no intervienen con el accionar del complejo ciclina B – CDK 1, el mismo. CI. que actúa a este nivel del ciclo celular sobre la formación de los centros de. CI EN. organización de micro túbulos (COMT), que induce el ensamblaje del huso mitótico (Pierce, 2009; Klug, 2013). Contrarios índices se obtuvieron al evaluar. DE. el efecto citotóxico de otras sustancias sobre el mismo tejido (Barazorda, 2017;. CA. Rebaza, 2017; Otiniano, 2014; Andrioli y Mudry, 2011).. TE. Las evaluaciones observadas a cuatro horas de recuperación nos muestran. IO. resultados semejantes, donde los índices de todos los tratamientos con SLS (Tabla. BL. 2 y Gráfico 4) mostraron un aumento frente al índice del control (15,097%),. BI. teniendo que a mayor concentración de SLS mayor índice metafísico; es así que el T2 (0,25% SLS) alcanzó 34,711%, el T3 (0,5% SLS) lo hizo a un 44,044 % y el T4 (1% SLS) llegó hasta un 48,332%, T5 (2% SLS) aumentó un 49,711% y el T6 (4% SLS) aumentó 49,594% . Debemos notar además que los índices de los tratamientos con SLS de cuatro horas son menores a los de una hora de. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 31.

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. recuperación, ello nos indicaría que la recuperación es lenta de los índices normales del ciclo celular se está restableciendo con el tiempo.. AS. El análisis de varianza de los índices metafísicos de estos resultados evidenció la existencia de diferencias significativas entre los diferentes. G. IC. tratamientos ensayados tanto para una hora (Tabla 3) como para cuatro horas de. LO. recuperación (Tabla 4). Así mismo, el análisis de comparación de medias arrojó. O. la presencia de diferentes grupos homogéneos. En el análisis de los resultados a. BI. una hora de recuperación (Cuadro 1) se observó la presencia de solo cuatro grupos. AS. homogéneos, donde el T3 (0,5% SLS) y T4 (1% SLS) conforman un grupo homogéneo, así como T6 (4% SLS) y T5 (2% SLS), siendo el resto de tratamientos. CI. de comportamiento independiente. En el análisis de los resultados a cuatro horas. CI EN. de recuperación (Cuadro 2), se observa cuatro grupos homogéneos donde el T4 (1%SLS), T6 (4% SLS) y T5 (2% SLS) conforman un mismo grupo homogéneo. DE. siendo el resto de comportamiento independiente. La Tabla 1 y Gráfico 3, nos muestran a la vez, los resultados de la. CA. evaluación del índice anafásico en tejido meristemático radicular de A. cepa. TE. expuesto a diferentes concentraciones de SLS con una hora de recuperación,. IO. donde se observa un aumento sustancial frente al tratamiento control (10,25%),. BL. donde a mayor concentración de SLS se observó mayor índice anafásico; es así. BI. que, el T2 (0,25% SLS) alcanzó un 14,188%, el T3 (0,5% SLS) aumentó a 17,244%, el T4 (1 % SLS) alcanzó un 19,738%, T5(2% SLS) aumentó a 19,569% y T6(4% SLS) llegó a 21,338%. Estos altos índices anafásicos en los diferentes tratamientos probablemente se deben al alto y libre tránsito de células de metafase hacia anafase, ello nos da a entender que SLS no interfiere sobre el accionar del. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 32.

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. complejo promotor de la anafase (APC), el mismo que revisa que todos los cromosomas se encuentren unidos al huso mitótico y si detecta que uno de los cinetocoro no se encuentra unido, manda una señal negativa al sistema de control,. AS. inactivando proteínas implicadas en la separación de las cromátides hermanas, específicamente APC-cdc20, lo que genera que las separadas no degraden a las. G. IC. cohesinas impidiendo que las cromátides hermanas migren a los polos ecuatoriales. LO. (Pierce, 2012; Klug, 2013).. O. Las evaluaciones observadas a cuatro horas de recuperación nos muestran. BI. resultados semejantes, donde los índices anafásicos de todos los tratamientos con. AS. SLS (Tabla 2 y Gráfico 4) mostraron un aumento frente al índice del control (10,817%), teniendo que a mayor concentración de SLS mayor índice metafísico;. CI. es así que el T2 (0,25% SLS) alcanzó 13,555%, el T3 (0,5% SLS) lo hizo a un. CI EN. 14,663 %, el T4 (1% SLS) llegó hasta un 15,706%, el T5 (2% SLS) aumentó un 17,212% y el T6 (4% SLS) aumentó a 19,251% . Debemos notar además que los. DE. índices de los tratamientos con SLS de cuatro horas son menores a los de una hora de recuperación, ello nos indicaría que la recuperación es lenta de los índices. TE. CA. normales del ciclo celular se está restableciendo con el tiempo.. IO. El análisis de varianza de los índices anafásicos de estos resultados. BL. evidenció la existencia de diferencias significativas entre los diferentes. BI. tratamientos ensayados tanto para una hora (Tabla 3) como para cuatro horas de recuperación (Tabla 4). Así mismo, el análisis de comparación de medias arrojó la presencia de diferentes grupos homogéneos. En el análisis de los resultados a una hora de recuperación (Cuadro 1) se observó la presencia de cinco grupos homogéneos, donde el T5 (2% SLS) y T4 (1% SLS) conforman un grupo. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. 33.