Efecto del extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium corymbosum “arándano” sobre tolerancia a la glucosa oral en Rattus norvegicus var albinus

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. Y. BI O. Q UI. M. IC. A. ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. FA RM. AC I. A. TESIS I. Efecto del extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium corymbosum. REYES GIL, Verónica Lisette.. BL. AUTOR (es):. albinus.. IO TE. CA. DE. “arándano” sobre tolerancia a la glucosa oral en Rattus norvegicus var.. BI. SALCEDO CRUZ, Joysy Lizbeth. ASESORA:. Dra. MANTILLA RODRIGUEZ, Ana Elena. TRUJILLO - PERÚ. 2 0 17. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. i. DEDICATORIA:. A Dios Por ser quien dirige mi vida, por ser mi fortaleza para seguir adelante y por llenar mi corazón con la luz de su santo espíritu dejando que cumpla esta meta porque con el. A. todo lo puedo, sin el nada soy.. M. IC. A mi madre Cila. Q UI. Por su apoyo constantes e incondicional, por su sacrificio que permitió que pueda. BI O. cumplir todas mis metas, por ser la razón de mi existencia, por su comprensión en todo. A. Y. momento y por brindarme su infinito amor.. FA RM. AC I. A mi padre Santos Por ser mi admiración de esfuerzo y sacrificio, por enseñarme a no darme por vencida. DE. ante cualquier dificultad que se me presente en el camino.. IO TE. CA. A mi hermana Melissa. Por su inmenso amor, por ser una segunda madre para mí, por guiar mis pasos y. BI. BL. apoyarme en todo momento y por brindarme aliento ante cualquier dificultad que se me presenta.. LISETTE REYES GIL. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ii. A Dios: Por ser quien me iluminó en el camino y me dio la sabiduría necesaria para concluir mi carrera. A mis padres Raúl y Cristina:. IC. A. Por haberme brindado el apoyo, el amor y la confianza para seguir adelante y sus. Q UI. M. consejos para nunca darme por vencida y mejorar cada día.. BI O. A mis tíos Gabriel y Rufina:. Y. Por estar a mi lado brindándome su compañía, su paciencia y sus palabras de afecto. AC I. A. que han hecho de mí una mejor persona.. FA RM. Y a todas las personas cercanas a mí que han experimentado día a día a lado mío las emociones de vivir una experiencia universitaria y que de alguna manera han. BI. BL. IO TE. CA. DE. contribuido en el logro de mis objetivos.. JOYSY SALCEDO CRUZ. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. iii. AGRADECIMIENTO:. Nuestro especial y profundo agradecimiento a nuestra asesora Dr. Elena Mantilla Rodríguez, por guiarnos con sus enseñanzas, por brindarnos su apoyo incondicional y su valioso tiempo para la realización de este trabajo.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA RM. AC I. A. Y. BI O. Q UI. M. IC. A. MUCHAS GRACIAS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. iv. PRESENTACIÓN: Señores Miembros del Jurado Dictaminador: En cumplimiento con las normas dispuestas en el reglamento de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, sometemos a vuestra consideración y elevado criterio el presente Informe de Tesis tipo I, titulado: Efecto del extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium corymbosum “arándano” sobre. M. IC. A. tolerancia a la glucosa oral en Rattus norvegicus var. albinus.. Q UI. Es propicia la oportunidad para expresar mi más sincero reconocimiento a. BI O. nuestra Alma Mater y toda su plana docente que han contribuido con sus enseñanzas y. A. Y. experiencias en nuestra formación profesional.. Trujillo, Julio del 2017. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA RM. calificación de presente trabajo científico.. AC I. Dejamos a vuestro criterio, señores miembros del jurado dictaminador, la. Verónica Lisette Reyes Gil. Joysy Lizbeth Salcedo Cruz. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. v. JURADO DICTAMINADOR:. Dra. Ana María Guevara Vásquez. FA RM. AC I. A. Y. BI O. Q UI. M. IC. A. PRESIDENTE. MIEMBRO. BI. BL. IO TE. CA. DE. Dra. Elena Mantilla Rodríguez. Dr. Francisco Abanto Zamora MIEMBRO. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. vi. RESUMEN: El presente trabajo de investigación tuvo como objetivo determinar el efecto del extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium corymbosum “arándano” sobre la prueba de tolerancia a la glucosa oral en Rattus norvegicus var. albinus. Para ello se seleccionaron, lavaron y trituraron los frutos, se filtró y se obtuvo el extracto de arándano. Se trabajó con 28 especímenes de 4 meses de edad con un peso entre 300-350g distribuidos aleatoriamente en. A. 4 grupos de 7 especímenes cada uno: grupo blanco (Solución salina fisiológica al 0.9% a. M. IC. dosis de 5mL/kg de peso corporal durante 15 días por vía oral), grupo control (Solución salina. Q UI. fisiológica al 0.9% a dosis de 5mL/kg durante 15 días más una carga de glucosa 2g/kg p.c por. BI O. v.o), grupo problema 1 (40mg/kg del extracto crudo por v.o durante 15 días más una carga. Y. de glucosa 2g/kg p.c) y problema 2 (80mg/kg del extracto crudo durante 15 días más una. AC I. A. carga de glucosa 2g/kg p.c). Se inició la prueba de tolerancia a la glucosa oral luego de 15. FA RM. días de administrar el extracto crudo a los grupos problemas. La glicemia se tomó a tiempos 0, 30, 60, 90, 120 minutos post administración de glucosa utilizándose para ello el glucómetro. DE. Accu-Chek softclix, Lab. Roche Diagnostics. Los resultados muestran que la glicemia se. CA. mantuvo en valores basales en todos los tiempos en el grupo blanco, en el grupo control. IO TE. después de los 120 minutos los valores regresaron a los valores iguales al basal, en el grupo problema 1 y problema 2 después de los 120 minutos lo valores bajaron a valores menores. BI. BL. que el basal; el extracto crudo de arándano disminuyó los valores de glicemia en la curva de tolerancia a la glucosa oral (p<0.05). Se concluye que el extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium corymbosum a dosis de 40mg/kg y 80mg/kg disminuye la glicemia durante la prueba de tolerancia a la glucosa oral en Rattus norvegicus var. albinus, presentando mayor disminución en la dosis de 80mg/kg de extracto crudo de arándano.. Palabras claves: Prueba de Tolerancia a la glucosa oral, Rattus norvegicus var. albinus, extracto crudo Vaccinium corymbosum.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. vii. ABSTRACT: The objective of the present research was to analyze the effect of the crude extract of fresh fruits of Vaccinium corymbosum "cranberry" on the test of tolerance to oral glucose in Rattus norvegicus var. Albinus. For this purpose, the fruits were selected, washed and crushed, filtered and the cranberry extract was obtained. A total of 28 4-month-old specimens weighing 300-350g were randomly distributed in 4 groups of 7 specimens. A. each: white group (0.9% physiological saline at doses of 5mL / kg body weight for 15. M. IC. days by Oral solution), control group (0.9% physiological saline at a dose of 5mL / kg for. Q UI. 15 days plus a glucose load of 2g / kg bw per day), problem group 1 (40mg / kg of the. BI O. crude extract per vo for 15 days Plus a glucose load of 2g / kg bw) and problem 2 (80mg. A. Y. / kg of crude extract for 15 days plus a load of glucose 2g / kg bw). The oral glucose. AC I. tolerance test was initiated after 15 days of administering the crude extract to the problem. FA RM. groups. Glucose was taken at 0, 30, 60, 90, 120 minutes post-glucose administration using the Accu-Chek softclix glucometer, Lab. Roche Diagnostics. The results show that. DE. glycemia was maintained at baseline at all times in the white group, in the control group. CA. after 120 minutes values returned to values equal to baseline, in group 1 and 2 after 120. IO TE. minutes values were lowered to values lower than baseline; The crude extract of cranberry. BL. decreased the glycemia values in the oral glucose tolerance curve (p <0.05). It is. BI. concluded that the crude extract of fresh fruits of Vaccinium corymbosum at doses of 40mg / kg and 80mg / kg decreases glycemia during the oral glucose tolerance test in Rattus norvegicus var. Albinus, showing a greater decrease in the dose of 80mg / kg of crude extract of cranberry.. Key words: Oral glucose tolerance test, Rattus norvegicus var. Albinus, crude extract Vaccinium corymbosum.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. viii. ÍNDICE:. Pág. DEDICATORIA: ........................................................................................................................i. IC. A. AGRADECIMIENTO: ............................................................................................................. iii. M. PRESENTACIÓN: .................................................................................................................... iv. Q UI. JURADO DICTAMINADOR: .................................................................................................. v. BI O. RESUMEN: ............................................................................................................................... vi ABSTRACT: ............................................................................................................................ vii. AC I. A. Y. ÍNDICE: ................................................................................................................................... viii. I. INTRODUCCIÓN: ................................................................................................................1. FA RM. II. MATERIAL Y MÉTODO:.................................................................................................14 III. RESULTADOS: .................................................................................................................21. DE. IV. DISCUSIÓN: ......................................................................................................................22 V. CONCLUSIONES: ..............................................................................................................30. CA. VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: ............................................................................31. BI. BL. IO TE. VII. ANEXOS: ..........................................................................................................................39. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1. I.. INTRODUCCIÓN:. La diabetes mellitus (DM) es una de las enfermedades metabólicas crónicas más prevalente en el mundo y constituye un problema de salud pública creciente de causas múltiples caracterizado por la hiperglucemia crónica asociada a alteraciones en el metabolismo de hidratos de carbono, proteínas y grasas, que se producen como consecuencia de defectos en la secreción de insulina, de su acción o de ambas cosas a la. M. IC. A. vez. (Tebar y Escobar, 2009, Pp.1-3). Q UI. La insulina es una hormona que se fabrica en el páncreas y que permite que la glucosa. BI O. de los alimentos pase a las células del organismo, en donde se convierte en energía para. Y. que funcionen los músculos y los tejidos. Como resultado, una persona con diabetes no. AC I. A. absorbe la glucosa adecuadamente, de modo que ésta queda circulando en la sangre. FA RM. (hiperglucemia) causando daño a largo plazo, produciendo disfunciones o fracasos de diversos órganos, especialmente ojos, riñones, nervios, corazón y vasos sanguíneos.. DE. (Alberti y Zimmet, 2013; Farreras y Rozman, 2012, p. 159). CA. La homeostasis normal de la glucosa está regulada por tres procesos. IO TE. interrelacionados: producción hepática de glucosa, captación y utilización de glucosa por. BL. los tejidos periféricos sobre todo por el músculo estriado, acciones de la insulina y de las. BI. hormonas antagonistas como glucagón en la captación y el metabolismo de la glucosa. (Guyton y Hall, 2016, p. 983; López y López, 2008, Pp. 302-308) La insulina y el glucagón tienen efectos reguladores opuestos en la homeostasis de la glucosa. Durante el ayuno una concentración baja de insulina y alta de glucagón facilitan la gluconeogenesis y la glucogenólisis (degradación del glucógeno) hepáticas y disminuyen la síntesis de glucógeno evitando así la hipoglucemia. (Guyton y Hall, 2016, p. 983; López y López, 2008, Pp. 302-308). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2. Después de comer, la concentración de insulina sube y la de glucagón baja en respuesta a la carga de glucosa. La insulina promueve la captación y utilización de la glucosa por los tejidos. El músculo estriado es el órgano principal sensible a la insulina para el uso posprandial de la glucosa y es esencial para evitar la hiperglucemia y mantener la homeostasis de la glucosa. (Dvorkin, Cardinal y Lermoli, 2010, p.761; Tebar y Escobar, 2009, p.126). IC. A. El gen de insulina está expresado en las células beta de los islotes pancreáticos, la. Q UI. M. preproinsulina es sintetizada en el retículo endoplásmico rugoso a partir del ARNm donde. BI O. se desdobla para formar proinsulina y liberada al aparato de Golgi, allí una serie de pasos de descomposición proteolítica generan insulina madura y un péptido de separación,. A. Y. péptido C, tanto la insulina como el péptido C se almacenan en gránulos secretores y son. FA RM. AC I. secretados tras un estímulo fisiológico. (Fox, 2014, p. 159; Olivares y Arellano, 2008) El estímulo principal para la síntesis y liberación de insulina es la propia glucosa, un. DE. incremento de la glucemia provoca la captación de glucosa por las células beta. CA. pancreáticas facilitada por un transportador de glucosa independiente de insulina, GLUT-. IO TE. 2. Las células beta expresan en la membrana un canal K + sensible al ATP con dos. BL. subunidades: un canal K + de rectificación interna (Kir6.2) y el receptor de sulfonilurea. BI. (SUR1). (Fortich, 2010; Robbins y Cotran, 2010, p. 1133) El metabolismo de la glucosa por glucólisis genera ATP que inhibe la actividad del canal K + sensible al ATP con despolarización de la membrana y entrada de Ca 2+ a través de canales Ca 2+ dependientes de voltaje, el aumento resultante del Ca 2+ intracelular estimula la secreción de insulina, esta es la fase de liberación inmediata de insulina. Si se mantiene el estímulo secretor sigue una respuesta diferida y prolongada con síntesis activa de insulina. (Fox, 2014, Pp. 159.161; Robbins y Cotran, 2010, Pp. 1133-1134). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3. El receptor de la insulina (IR) es una proteína tetramérica con dos subunidades alfa y dos beta, la subunidad beta posee actividad tirosina cinasa, la unión de la insulina a la subunidad alfa activa la subunidad beta de la tirosina cinasa con autofosforilación del receptor y fosforilación de varias proteínas de sustrato intracelular, como la familia de las proteínas del substrato del receptor de insulina (IRS) que comprende IRS1-IRS4 y GAB1. (Dvorkin, et al, 2010, p.761; Tebar y Escobar, 2009, p.126). IC. A. Las proteínas sustrato de hecho activan múltiples cascadas de señalización. Q UI. M. anterógrada, como la vía de las cinasas activadas por mitógenos (MAP cinasas) y la via. BI O. de la fosfatidilinositol 3-cinasa (PI-3K), que intervienen en las actividades metabólicas y. Y. mitógenas de la insulina en la célula. (Fortich, 2010; Olivares y Arellano, 2008, Pp. 9-18). AC I. A. La señalización de insulina facilita el almacenamiento de las vesículas que contienen. FA RM. la proteína transportadora de glucosa GLUT-4 a la membrana plasmática, que promueve la captación de glucosa. Este proceso está mediado por proteína quinasa B (AKT), el. DE. efector principal de la vía PI-3K, aunque también de modo independiente por la proteína. CA. citoplasma CBL que es una diana de fosforilación directa del receptor de insulina.. IO TE. (Fortich, 2010; Olivares y Arellano, 2008, Pp. 9-18). BL. Según la Federación Internacional de Diabetes (FID) en el año 2013 se estimó que. BI. 382 millones de personas tenían DM, se espera que este número aumente a 592 millones en el 2035. La mayoría de las personas con DM viven en países de bajos y medianos ingresos y éstas experimentarán el mayor aumento de los casos de DM en los próximos 22 años. (FID, 2014) Según la Organización Mundial de la Salud (OMS) en el 2014 el número de personas con DM ha aumentado a 422 millones siendo el 8.5% la prevalencia mundial de DM en adultos mayores de 18 años, la prevalencia ha aumentado con mayor rapidez en países de. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 4. ingresos medianos y bajos, se estima que para el 2030 la DM será la séptima causa de mortalidad. (OMS, 2016) En nuestro país en el año 2014, según informes de la Oficina de Estadística e Informática del Ministerio de Salud (MINSA), la DM fue la décima causa de muerte con 3 695 casos (3.8%), siendo el sexo femenino el más afectado con 1902 casos, así mismo en la Región Libertad es la séptima causa de muerte con 299 casos (4.2%) de los cuales. IC. A. 161 casos son mujeres. La prevalencia de DM se estima a un 7% de la población peruana.. Q UI. M. (MINSA, 2014). BI O. La DM se clasifica en tres principales formas: Tipo 1, tipo2 y la gestacional. Varios. Y. procesos patológicos están involucrados en el desarrollo de la enfermedad. (ADA, 2017;. AC I. A. Gracia, Solis, Luque, Neyra y Manrique, 2007, Pp. 90-97; Robbins y Cotran, 2010, p.. FA RM. 1132). La DM tipo 1 es una enfermedad autoinmune donde se destruyen las células beta de. DE. los islotes pancreáticos, que conduce a deficiencia absoluta de insulina. Esta forma. CA. incluye los casos atribuibles a patogenia autoinmunitaria y comienza con más frecuencia. IO TE. en la infancia, se manifiesta en la pubertad y avanza con la edad, la mayoría de los. BL. pacientes con DM tipo 1 dependen de la insulina para sobrevivir ya que sin insulina. BI. padecen complicaciones metabólicas graves como cetoacidosis y coma. (ADA, 2017; Farreras y Rozman, 2012, p. 161; Robins y Cotran, 2010, p. 1132) La DM tipo 2 es una enfermedad compleja multifactorial. Se presenta en personas con grado variable de resistencia a la insulina, pero se requiere también que exista una deficiencia en la producción de insulina. Es indudable la participación de factores ambientales, como un estilo de vida sedentario y los hábitos dietéticos, por su asociación con la obesidad, también están implicados factores genéticos. Suele iniciarse de forma. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 5. progresiva después de los 40 años, aunque en los últimos años existe un incremento notable en personas jóvenes. (ADA, 2017; Farreras y Rozman, 2012, p. 161; Robins y Cotran, 2010, p. 1132) Diversos estudios epidemiológicos han establecidos una serie de factores de riesgo que se asocian a la aparición de DM tipo 2 dentro de las cuales tenemos; la obesidad, el sedentarismo, antecedentes familiares de diabetes, la edad mayor a 40 años, la. IC. A. alimentación, la presencia de diabetes mellitus gestacional, el bajo peso al nacer, la. Q UI. M. hipertensión arterial y la dislipidemia. (Gracia, et al, 2007, Pp. 90-95; Molena, Soares,. BI O. Silva y Nakamura, 2008; Ruiz, 2012, p. 303). Y. Las consecuencias agudas de la DM no controlada que ponen en peligro la vida son. AC I. A. la hiperglucemia con cetoacidosis o el síndrome hiperosmolar no cetósico. Las. FA RM. complicaciones a largo plazo se encuentran las microvasculares que son la retinopatía, la nefropatía, neuropatía y las complicaciones macrovasculares que son la cardiopatía. DE. isquémica, insuficiencia cardiaca, enfermedad cerebrovascular, enfermedad vascular. CA. periférica (pie diabético), aterosclerosis. (ADA, 2017; Mediavilla, 2008, Pp:132-137;. IO TE. Ramírez y Aguilar, 2012, Pp: 139-143; Sánchez, 2012; Nathan, et al, 2006). BL. Para el diagnóstico de la DM debe realizarse una detallada historia clínica del. BI. paciente, con la finalidad de identificar factores de riesgo y estilos de vida inadecuados, así como la presencia de otras características como la hipertensión arterial, el sobrepeso y la obesidad. Ministerio de Sanidad y Consumo (MSC, 2008) y Sociedad Peruana de Endocrinología (SPE, 2008) Los criterios diagnósticos aprobados por la Asociación de Diabetes Americana (ADA) y por la Organización Mundial de la Salud (OMS) son: Síntomas de diabetes (poliuria, polidipsia, polifagia y pérdida de peso), glucosa plasmática al azar (a cualquier. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 6. hora del día) >200 mg/dl, dos determinaciones de glucosa basal en plasma venoso >126 mg/dl en ausencia de ingesta calórica en las 8 horas previas, Hemoglobina glicosilada (HbA1C) ≥6.5%, Glucosa plasmática a las 2 horas ≥200 mg/dL durante una prueba oral de tolerancia a la glucosa. (MSC, 2008 y SPE, 2008) La prueba de tolerancia a la glucosa mide la capacidad del organismo para metabolizar la glucosa y regular su concentración en sangre después de la administración de una dosis. IC. A. de carga de glucosa por lo general 75g (1.75-2 g/kg de peso) disuelta en 250 ml de agua,. Q UI. M. la DM se caracteriza por disminución de la tolerancia a la glucosa. (Devlin, 2008, p. 618;. BI O. Murray, Bender, Botham, Kennelly y Rodwell, 2013, p. 171; Trujillo, 2007, Pp. 21-24). Y. Para la realización de la prueba se debe tener en cuenta que si el valor de glucosa en. AC I. A. ayunas es igual o mayor a 126 mg/dl, se diagnostica DM y la realización de la prueba está. FA RM. contraindicada, ya que se puede provocar un shock hiperglucémico, si la glucemia en ayunas es menor de 126 mg/dl, entonces se realiza la prueba y se toman muestras de. DE. sangre a intervalos regulares de tiempo, una muestra cada 30 minutos hasta las 2 horas,. CA. si la glucemia en la muestra de las dos horas es igual o superior a los 200 mg/dl, se. IO TE. diagnostica DM. Finalmente, con los valores de concentración de glucosa y tiempo. BL. obtenidos, se dibuja una gráfica que generalmente se representa como una curva. (Devlin,. BI. 2008, p. 618; Murray, et al, 2013, p. 171; Trujillo, 2007, Pp. 21-24) La terapia de la diabetes se centra en tres objetivos íntimamente relacionados: a) mejorar la utilización celular de la glucosa y otros nutrientes (aminoácidos, glicerol, ácidos grasos y cuerpos cetónicos); b) normalizar al máximo posible los niveles de glucemia y otras alteraciones, sin perturbar de manera notable el estilo de vida del paciente, y c) prevenir, como consecuencia, un buen número de graves complicaciones, tanto microvasculares como macrovasculares. (Flores, 2013, p. 151; Brunton, Lazo y. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 7. Keith, 2012, p. 1237; Katzung, 2010, p. 742; Rang, Dale, Ritter y Flower, 2008, p. 403 y Velásquez, 2008, p. 636) El tratamiento para la DM se basa en la realización de ejercicio físico adecuado a cada caso, en la dieta ajustada a las necesidades vitales de cada persona, cambios en el estilo de vida, en la insulina y en los diversos fármacos disponibles que consiguen reducir los valores de glucosa. A ello hay que añadir las acciones terapéuticas dirigidas a prevenir o. IC. A. tratar la obesidad y las complicaciones que produce la DM. (Flores, 2013, p. 151;. Q UI. M. Brunton, et al , 2012, p. 1237; Katzung, 2010, p. 742; Rang, et al, 2008, p. 403 y. BI O. Velásquez, 2008, p. 636). Y. En la actualidad hay una variedad de opciones terapéuticas farmacológicas para la. AC I. A. DM entre las cuales tenemos a la insulina de acción corta (Aspártica, lispro, regular),. FA RM. acción intermedia (NPH, lispro protamina) y acción prolongada (Detemir, glargina), a los antidiabéticos orales entre los cuales tenemos a las biguanidas (metfotmina), sulfonilureas. DE. (glibenclamida, glipizida, glimepirida), tiazolidinedionas (rosiglitazona, pioglitazona),. CA. meglitinidas (Repaglinida, nateglinida), inhibidores de la α-glucosidasa (Acarbosa,. IO TE. miglitol), incretinas (Exenatida, liraglutida), inhibidores de la dipeptidil peptidasa- 4. BL. (sitagliptina, vildagliptina), resinas fijadoras de acidos biliares (colesevelam). (Flores,. BI. 2013, p. 151; Brunton, et al, 2012, p. 1237; Katzung, 2010, p. 742; Rang, et al, 2008, p. 403 y Velásquez, 2008, p. 636) Desde tiempos inmemorables las plantas han sido una fuente ejemplar de la medicina a pesar de los avances de la ciencia en la producción de medicamentos, las plantas medicinales no han perdido su importancia, por el contrario, el desarrollo de los medicamentos modernos ha sido el resultado de formas cada vez más complejas de aprovechar las plantas medicinales y su producción sigue dependiendo en gran parte del uso de estas como materia prima. (Moreno y Pérez, 2015; Pérez y Rengifo, 2005, p. 2). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 8. La flora peruana constituye una de las mayores reservas de recursos fitoterapéuticos, desde tiempos remotos, numerosas especies han sido estudiadas, obteniéndose de ellas importantes compuestos biológicamente activos que han contribuido a aliviar las dolencias de la humanidad. (Moreno y Pérez, 2015; Pérez y Rengifo, 2005, p. 2) Muchas plantas están siendo usadas como complemento en el tratamiento de la DM sobre todo en aquellas poblaciones en donde la adquisición de medicamentos representa. IC. A. un problema económico, se han reportado muchas especies con actividad antidiabética. Q UI. M. entre ellas tenemos a Vaccinium corymbosum “arándano”. (Moreno y Pérez, 2015). BI O. Este es un frutal perteneciente al género Vaccinium, de la familia de las Ericáceas y. Y. constituyen un grupo de especies ampliamente distribuidas por el Hemisferio Norte,. AC I. A. básicamente por Norteamérica, Europa Central y Eurasia, encontrándose también en. FA RM. América del Sur, y unas pocas especies en África y Madagascar. (Ceder, 2012; García, 2007; Ministerio de medio Ambiente y Medio Rural y Marino [MARM], 2014 y. DE. Ministerio de Agricultura y Riego [MINAGRI], 2016). CA. De las 30 especies que constituyen el género Vaccinium, sólo un pequeño grupo de. IO TE. ellas tienen importancia comercial. Destacan Vaccinium corymbosum, que representa. BL. aproximadamente el 80% del total de la superficie cultivada, seguido en importancia por. BI. Vaccinium ashei, con un 15% aproximadamente, entre el 5% restante destacan Vaccinium angustifolium. (Ceder, 2012; García, 2007; MARM, 2014 y MINAGRI, 2016) Vaccinium corymbosum forma parte del grupo de las frutas denominadas comercialmente como berries, son arbustos que alcanzan alturas que van desde unos pocos centímetros hasta 2,5 metros, sus hojas son ovaladas, de borde entero, de color verde oscuro y generalmente con abundante pilosidad en el envés, sus flores son. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 9. inflorescencias (racimos), el fruto es una baya redondeada de 7 a 9 mm de diámetro, de color negro azulado, cubierta de pruina azul y con un ribete en lo alto a modo de corona, su carne, de un agradable sabor agridulce, es de color vinoso y en la parte central contiene semillas pequeñas. (Ceder, 2012; García, 2007; MARM, 2014 y MINAGRI, 2016) El fruto de Vaccinium corymbosum es de extensa producción en el mundo y el Perú no es ajeno a esta realidad llegando a una producción de mil hectáreas de arándano en el. IC. A. 2016 y concentrando el 90% de producción nacional en La Libertad siendo las empresas. Q UI. M. Camposol S.A. y TALSA las principales exportadoras de arándano, llevando a los. BI O. mercados destino más importantes: Estados Unidos, Holanda, Hong Kong, Rotterdan,. Y. Nuev Cork, Indonesia, Tailandia y Rusia. (La Republica, 2016). AC I. A. Vaccinium corymbosum es una planta de grandes virtudes medicinales. Es utilizado. FA RM. en enfermedades de las vías urinarias gracias a su acción depurativa y desintoxicante que ejerce sobre dicha zona, ayuda a prevenir la cistitis gracias a su acción antibacteriana,. DE. también es un buen preventivo de la inflamación de la vejiga y las infecciones de los. CA. riñones, próstata, uretra y todo el tracto urinario en general, es muy útil en la prevención. IO TE. o disolución de los cálculos de riñón debido que al acidificar la orina ayuda a expulsar. BL. los oxalatos de calcio. (Morcomb, Ted, Schmidt, Luebke y Carrell, 2009; Neri, Celis,. BI. León, Gutiérrez y Urquiza, 2009, Pp. 512-517; Rivera, Reyes, Alberdi y Zuñiga, 2010, Pp. 509-516; Ted, et al, 2008, Pp. 46-54) Poseen propiedades astringentes y anti eméticas, también son muy ricos en componentes gastroprotectores, antiespasmódicos y antiinflamatorios, siendo útil en el tratamiento de anomalías del aparato digestivo como diarreas, vómitos, malas digestiones, inflamaciones intestinales o gastroenteritis. Además, contribuyen a la pérdida de peso. (Rivera, et al, 2010, Pp. 509-516 y Ted, et al, 2008, Pp. 46-54). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 10. Importantes en problemas del sistema circulatorio ya que favorece la circulación sanguínea. Posee propiedades vasodilatadoras, antiagregantes, antihemorrágicas y fortalecedoras de los capilares. Su uso resulta eficaz en alteraciones como la arterioesclerosis, varices, hemorroides y flebitis, además eleva el nivel de colesterol de alta densidad (HDL). (Morcomb, et al, 2009; Neri, et al, 2009, Pp. 512-517; Rivera, et al, 2010, Pp. 509-516 y Ted, et al, 2008, Pp. 46-54). IC. A. Es utilizado para bajar los niveles de azúcar en sangre (diabetes). Está demostrado. Q UI. M. que su consumo habitual mejora considerablemente la percepción visual de las personas,. BI O. también se utiliza en afecciones oculares, así como para facilitar la regeneración de la retina. Recientemente, se ha encontrado que reducen los niveles de unas sustancias. A. Y. perjudiciales que producen el Alzheimer. (Morcomb, et al, 2009 y Neri, et al, 2009, Pp.. FA RM. AC I. 512-517). La acción antioxidante neutraliza la acción de los radicales libres, que son nocivos. DE. para el organismo estas propiedades pueden dar lugar a efectos fisiológicos muy diversos,. CA. acción antiinflamatoria, acción antibacteriana, contribuir a reducir el riesgo de. IO TE. enfermedades degenerativas, cardiovasculares e incluso del cáncer. (Morcomb, et al,. BL. 2009 y Ted, et al, 2008, Pp. 46-54). BI. Vaccinium corymbosum contiene diversas sustancias que le confieren sus grandes propiedades curativas: los taninos (catéquicos y proantocianidinas oligoméricas), flavonoides (astragalina, hiperósido, miricetina, quercetina, flavonol e isoquercetina), antocianinas (malvidina, cianidina, petunidina y heterósidos de delfinidina), acidos fenólicos derivados del ácido cinámico (ácidos cafeico y clorogénico), triterpenos (ácido usólico), iridoides (asperulósido y onotropeína), ácidos orgánicos (ácidos quínico, málico y cítrico), glúcidos (polisacáridos como la pectina), su alto contenido en fibra, libre de. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 11. grasas y sodio, su contenido de provitamina A, vitaminas C, E, magnesio, potasio, fósforo y calcio. (Neri, et al, 2009, Pp. 512-517 y Rivera, et al, 2010, Pp. 509-516) Esta fruta es de elección de fruta para los diabéticos debido a su bajo contenido calórico (21 cal / 55 g porciones), bajo índice glucémico (IG=52) y su favorable respuesta a disminuir la glucemia. (Foster, Holt y Brand, 2002; Morcomb, et al, 2009). En el trabajo realizado por Khanal, Rogers, Wilkes (2010) en la Universidad de. IC. A. Arkansas en EE. UU sobre el efecto del consumo dietético de polvo de arándano sobre. Q UI. M. los parámetros metabólicos en ratas con dieta alta en fructosa, donde se demostró que con. BI O. la inclusión de polvo de arándano en la dieta los niveles de glucosa, colesterol y. Y. triglicéridos disminuyeron, llegando a la conclusión que el arándano es eficaz en la. AC I. A. reducción de algunos parámetros metabólicos asociados con el síndrome metabólico.. FA RM. Además, en el estudio realizado por Gendron (2011) en la universidad de Maine, E.E.U.U. sobre el efecto del jugo de arándano sobre la glucemia y la saciedad, los. DE. resultados de este estudio mostraron que el jugo de arándano fue capaz de reducir. IO TE. de jugo de arándanos).. CA. significativamente la glicemia postprandial en ambos grupos (diferentes concentraciones. BL. En un estudio realizado por Lee, Chan, Lin (2008) en el Hospital General de. BI. Veteranos Taichung en Taiwan sobre el efecto del extracto de arándano en los perfiles lipídicos en sujetos con diabetes tipo 2, se concluyó que el arándano es eficaz en la reducción de los perfiles ateroscleróticas de colesterol LDL en diabéticos tipo 2. Una de las necesidades básicas del ser humano es la salud, la cual está relacionada para su satisfacción a través del acceso a las medicinas, pero gran parte de la población por razones económicas, no puede adquirir fármacos sintéticos siendo el uso de plantas medicinales una alternativa para la prevención y tratamiento de diversas enfermedades.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 12. En el caso del Perú existe una gran variedad de plantas medicinales de la cuales se pueden extraer sus principios activos para utilizarlos en la medicina, podemos sentirnos afortunados por ello. Por otro lado, la DM se trata de una enfermedad relativamente frecuente que ha aumentado a lo largo de los años, además es una importante causa de ceguera, insuficiencia renal, infarto de miocardio, accidente cerebrovascular y amputación de los. IC. A. miembros inferiores. (OMS, 2016). Q UI. M. Por ello la actividad física regular, el mantenimiento de un peso corporal normal y. BI O. sobre todo una dieta saludable pueden prevenir la diabetes o retrasar su aparición y es ahí. AC I. A. y frutos que ayudan a prevenir dicha enfermedad.. Y. donde la riqueza natural de Perú se pone en acción, sobre todo si existen muchas plantas. FA RM. Debido a esta realidad, este trabajo busca investigar si Vaccinium corymbosum (arándano) disminuye la glicemia en la prueba de tolerancia a la glucosa oral, por lo que. DE. nos planteamos el siguiente problema: ¿Cuál es el efecto del extracto crudo de frutos. CA. frescos de Vaccinium corymbosum “arándano” sobre tolerancia a la glucosa oral en. IO TE. Rattus norvegicus var albinus?. BL. A este problema se formuló la siguiente hipótesis: El extracto crudo de frutos frescos. BI. de Vaccinium corymbosum “arándano” disminuye los valores de glicemia en la tolerancia a la glucosa oral en Rattus norvegicus var. albinus Los objetivos planteados fueron: 1. Objetivo general:  Analizar el efecto del extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium corymbosum (arándano) sobre la prueba de tolerancia a la glucosa oral en Rattus norvegicus var. albinus.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 13. 2. Objetivos Específicos:  Determinar el efecto del extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium corymbosum (arándano) en dosis de 40mg/Kg y 80mg/Kg de peso en la concentración de glucosa en sangre en la prueba de tolerancia a la glucosa en Rattus norvegicus var. albinus sanos.  Comparar el efecto del extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium. A. corymbosum (arándano) en la prueba de tolerancia a la glucosa con. M. IC. respecto al grupo control en Rattus norvegicus var. albinus sanos.. Q UI.  Determinar la dosis del extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium. BI O. corymbosum (arándano) con mayor efecto en la concentración de glucosa. A. Y. en sangre en la prueba de tolerancia a la glucosa en Rattus norvegicus var.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA RM. AC I. albinus sanos.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 14. I.. MATERIAL Y MÉTODO:. 1. MATERIAL: 1.1. MATERIAL BIOLOGICO: A. Material botánico: Se emplearon 3 Kg de frutos frescos de Vaccinium corymbosum “arándano” comercializados en el mercado central de Trujillo.. A. B. Animales de experimentación: Se utilizaron 28 Rattus norvegicus. M. IC. var. albinus, machos, aparentemente sanos, con un peso aproximado. Q UI. de 300-350 gramos de 4 meses de edad, procedentes del Instituto. A. Y. 1.2. MATERIAL DE LABORATORIO:. BI O. Nacional de Salud de Chorrillos - Lima.. AC I. A. Reactivos: . B. Solventes:. FA RM. Glucosa anhidra q.p.. Agua destilada. . Cloruro de sodio 0.9%. CA. DE. . IO TE. C. Material de vidrio: Los de uso común en el laboratorio.. BL. . BI. D. Equipos de laboratorio: . Balanza analítica OHAUS GA 200. . Balanza triple brazo OHAUS 700/800 series. . Glucómetro ACCU-CHEK Roche Diagnostics.. E. Otros: . Caja de guantes quirúrgicos N°7.. . Papel filtro whatman N° 10.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 15. . Frascos color ámbar de 250 mL.. . Jeringas de 1 y 3 mL.. . Sonda nasogástrica Nº 04. MEDEX.. 2. MÉTODO: 2.1. Tipo de diseño: Experimental. A. Esquema: DESPUES. M. IC. A. ANTES. A. Estímulo Z. B2. C1. Estímulo Z. C2. D1. Estímulo Z. D2. A. B. Estímulo W. B1. C. Estímulo X. D. Estímulo Y. IO TE. CA. DE. FA RM. A. Y. BI O. Q UI. Estímulo W. AC I. Estímulo W. A. BL.  LEYENDA:. BI. . A = Grupo Blanco (n:7). . B= Grupo Control (n:7). . C = Grupo Problema 1 (n:7). . D = Grupo Problema 2 (n:7). . Estimulo W = Solución salina fisiológica 0,9%.. . Estímulo X = Extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium corymbosum “arándano” a dosis de 40 mg/kg de peso.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 16. . Estímulo Y = Extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium corymbosum “arándano” a dosis de 80 mg/kg de peso. . Estímulo Z = Prueba de tolerancia a la glucosa oral.. 2.2. Metodología de trabajo: A. RECOLECCIÓN DE LOS FRUTOS DE Vaccinium corymbosum “ARÁNDANO”.. A. Se emplearon 3 Kg de frutos frescos de Vaccinium corymbosum. M. IC. “arándano” procedentes de la provincia de Virú, comercializados en el. Q UI. mercado central de la provincia de Trujillo departamento La Libertad.. BI O. B. IDENTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN TAXONÓMICA DE. A. Y. LA ESPECIE. AC I. El fruto de Vaccinium corymbosum y partes de la planta se llevó al. FA RM. Herbarium Truxillensis de la Universidad Nacional de Trujillo para su identificación y verificación taxonómica de la especie. El material. DE. vegetal se encuentra depositado en el herbario bajo el siguiente código. CA. 59050. (Anexo 5). IO TE. C. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA. BL. El material recolectado se llevó al laboratorio de Farmacología de la. BI. Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, en donde se seleccionó los frutos de Vaccinium corymbosum los que se encontraron en mejor estado, descartando los que presentaron signos de alteración o deterioro, como picaduras o rupturas. Los frutos fueron lavados con agua corriente, y se eliminaron las sustancias extrañas presentes en el material vegetal. (Gutiérrez, 2015). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 17. D. PREPARACIÓN DEL EXTRACTO CRUDO DE FRUTOS FRESCOS DE Vaccinium corymbosum (ARÁNDANO). Diariamente 200 gr de frutos frescos fueron triturados con la ayuda de un mortero, después se filtró con papel filtro Whatman N° 10 y el filtrado se colocó en frascos color ámbar. (Gutiérrez, 2015) E. CÁLCULO DE LOS SOLIDOS TOTALES DEL EXTRACTO. A. CRUDO DE FRUTOS FRESCOS DE Vaccinium corymbosum. M. IC. (ARÁNDANO).. Q UI. A partir del extracto preparado, se obtuvo el extracto seco. Para lo cual. BI O. se midió 5 mL del extracto en un vaso de precipitación previamente. A. Y. tarado, se llevó a estufa a 105 ºC y se dejó hasta peso constante. AC I. (aproximadamente 3 h). Se retiró el vaso de precipitación de la estufa. FA RM. y se dejó hasta alcanzar temperatura ambiente. (Miranda, 2002, Pp. 5354). DE. El peso del extracto seco fue de 0.161g y el porcentaje de sólidos totales. CA. fue de 3.22%. (Anexo 7). IO TE. F. DOSIFICACIÓN DEL EXTRACTO CRUDO DE FRUTOS. BL. FRESCOS DE Vaccinium corymbosum (ARÁNDANO).. BI. Las dosis que se utilizaron fueron de 40 mg/kg y 80 mg/kg de peso. (Rodríguez y Rubio, 2016) Se calculó la dosis del extracto para cada espécimen de acuerdo al peso corporal basándose en el porcentaje de sólidos totales. (Urzúa, 2011). G. AMBIENTACIÓN. DE. LOS. ANIMALES. DE. EXPERIMENTACIÓN. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 18. Se utilizararon 28 Rattus norvegicus var. albinus, machos, aparentemente sanos, con un peso aproximado de 300-350 gramos de 4 meses de edad, procedentes del Instituto Nacional de Salud de Chorrillos - Lima. Fueron aclimatados durante 7 días al ambiente de experimentación a temperatura ambiente con agua y alimento balanceado estándar. Las. A. consideraciones éticas se tuvo según las normas del Instituto Nacional. Y. PREPARACIÓN. BI O. H. SEPARACIÓN. Q UI. laboratorio”. (Romero, et al, 2016). M. IC. de Salud, “El 1, 2, 3 de la experimentación con animales de. LOS. GRUPOS. A. Y. EXPERIMENTALES. DE. AC I. Las 28 ratas fueron seleccionadas de manera aleatoria, de las cuales se. FA RM. formaron 4 grupos: Blanco, Control, Problema 1 y Problema 2. a) GRUPO BLANCO: Los 7 especímenes se alimentaron con. DE. comida balanceada del bioterio que consiste en maíz, purina y. CA. agua ad libitum, además se les administró 5mL/Kg de solución. IO TE. salina fisiológica al 0.9% vía oral empleando una sonda. BI. BL. nasogástrica durante 15 días, luego se sometió a ayuno por 12 horas y se les tomó muestras de sangre basales y al tiempo 30, 60, 90 y 120 minutos. b) GRUPO CONTROL: Los 7 especímenes se alimentaron con comida balanceada del bioterio que consiste en maíz, purina y agua ad libitum, además se les administró 5mL/Kg de solución salina fisiológica al 0.9% vía oral empleando una sonda nasogástrica durante 15 días, luego se sometió a ayuno por 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 19. horas, se les tomó muestras de glicemia basales y se les realizó la Prueba de Tolerancia a la Glucosa Oral tomando muestras de sangre al tiempo 30, 60, 90 y 120 minutos. c) GRUPO PROBLEMA 1: Los 7 especímenes se alimentaron con comida balanceada del bioterio que consiste en maíz, purina y agua ad libitum, además se les administró extracto crudo de. A. frutos frescos de Vaccinium corymbosum “arándano” en dosis. M. IC. de 40mg/kg de peso vía oral empleando una sonda nasogástrica. Q UI. durante 15 días, luego se sometió a ayuno durante 12 horas, al. BI O. término de este tiempo se les tomó muestras de glicemia basales. A. Y. y se realizó la Prueba de Tolerancia a la Glucosa Oral tomando. AC I. muestras de sangre al tiempo 30, 60, 90 y 120 minutos.. FA RM. d) GRUPO PROBLEMA 2: Los 7 especímenes se alimentaron con comida balanceada del bioterio que consiste en maíz, purina y. DE. agua ad libitum, además se les administró extracto crudo de. CA. frutos frescos de Vaccinium corymbosum “arándano” en dosis. IO TE. de 80mg/kg de peso vía oral empleando una sonda nasogástrica. BI. BL. durante 15 días, luego se sometió a ayuno durante 12 horas, al término de este tiempo se les tomó muestras de glicemia basales y se realizó la Prueba de Tolerancia a la Glucosa Oral tomando muestras de sangre al tiempo 30, 60, 90 y 120 minutos.. I. PRUEBA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA ORAL. Los especímenes fueron privados de alimento por 12 horas, primero se obtuvo una muestra basal de glicemia. Luego se administró glucosa al 40% (2g/Kg de peso) por vía oral a través de una sonda nasogástrica. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 20. N°04. La glicemia post administración de glucosa se determinó recogiendo muestras de sangre en tiempo 30, 60, 90 y 120 minutos. Con los datos que se obtuvieron se construyó la Curva de Tolerancia a la glucosa oral. (Urzúa, 2011) J. DETERMINACIÓN DE LA GLICEMIA. Se limpió la cola de la rata con una torunda de algodón con alcohol. A. (70°), luego se frotó la cola de la rata de la parte proximal a la parte. M. IC. distal. Se realizó una punción en la vena caudal de la cola de la rata, la. Q UI. sangre obtenida se recolectó directamente en una tira reactiva,. BI O. previamente insertada en el glucómetro digital (Accu-Chek softclix. A. Y. Roche Diagnostics). (Urzúa, 2011). AC I. K. PRUEBA ESTADISTICA.. FA RM. Los datos fueron sometidos al análisis de varianza (ANOVA), con el objetivo de encontrar diferencias estadísticas entre los grupos. DE. experimentales, el control y el blanco, después se realizó la prueba de. CA. comparaciones múltiples a un intervalo de confianza del 95%. IO TE. empleando la prueba de Tukey HSD, para evaluar que grupos son. BL. similares y diferentes con respecto a los grupos experimentales y. BI. evaluar si existe disminución de la glicemia en la prueba de tolerancia a la glucosa oral con el consumo de este fruto en estudio. (Urzúa, 2011). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 21. II.. RESULTADOS:. Tabla 1: ANOVA entre valores de glucosa sanguínea (mg/dL) en Rattus norvegicus var. albinus durante la prueba de tolerancia a la glucosa 0´(Basal). 30´. 60´. 90´. 120´. BLANCO. 117.57±17.87. 109.29±8.94. 109.43±7.98. 110.71±7.48. 109.71±8.40. CONTROL. 110.00±4.69. 138.29±5.99. 153.43±5.94. 133.86±6.47. 113.57±3.26. PROBLEMA 1: 40mg/kg PROBLEMA 2: 80mg/kg ANOVA. 105.43±8.73. 135.29±4.07. 125.71±4.57. 119.00±1.83. 102.43±3.95. 106.00±3.11. 124.29±3.73. 118.71±2.69. 112.57±4.08. 104.57±4.69. p>0.05. p<0.05. P<0.05. p<0.05. IC. A. GRUPOS. Q UI. M. Fuente: Investigadoras.. p<0.05. BI O. Los valores son expresados como el promedio ± desviación estándar, n=7 animales de. AC I. A. Y. experimentación para cada grupo de trabajo.. FA RM. Curva de tolerancia a la glucosa oral en Rattus norvegicus var. albinus 180. DE. 160. CA. 120. 40 20. CONTROL PROBLEMA 1: 40mg/kg. BL. 80 60. BLANCO. IO TE. 100. PROBLEMA 2: 80 mg/kg. BI. Glicemia (mg/dL). 140. 0 0´. 30´. 60´. 90´. 120´. Tiempo (minutos). Gráfico 1: Comparación de los niveles promedios de glicemia en la curva de tolerancia a la glucosa oral en Rattus norvegicus var. albinus de los grupos blanco, control y problemas (extracto crudo de Vaccinium corymbosum) Para n=7 animales de experimentación por cada grupo de trabajo. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 22. III.. DISCUSIÓN:. La diabetes mellitus (DM) se ha convertido en uno de los más graves problemas sanitarios de nuestro país, existe por tanto un interés creciente en identificar individuos con alto riesgo de DM para planificar estrategias de prevención, ya que varios estudios han demostrado que, con cambios en el estilo de vida, modificaciones en la alimentación es posible prevenir o al menos retrasar la aparición de la enfermedad. (Mancillas, Gómez. IC. A. y Rodrigo, 2008, Pp. 63-68). Q UI. M. Esta investigación se basa en el objetivo de poder prevenir la aparición de DM con el. BI O. consumo de plantas naturales como es el fruto de Vaccinium corymbosum “arándano”.. Y. De los resultados obtenidos, los niveles de glucosa basales en los grupos blanco,. AC I. A. control, problema 1 y problema 2 según ANOVA y Tukey no hay diferencia significativa. FA RM. entre grupos con p>0.05 Tabla 1 y Anexo 11 (tabla 13), debido a que son valores basales de glucosa que ayudaron a comparar el aumento de glucosa luego de la prueba de. DE. tolerancia a la glucosa oral (PTGO).. CA. En la tabla 1 se observa que en el grupo blanco no se evidencia aumento significativo. IO TE. en los niveles de glucosa sanguínea lo que refleja que los factores ambientales y la. BL. manipulación del espécimen de experimentación no afecta a los resultados, tomándose. BI. como valores normales de glucosa, después de ayuno de 12h, desde 109.29 mg/dL a 117.57 mg/dL. La concentración de glucosa sanguínea en la PTGO en el grupo control muestra el patrón normal de aumento de glicemia para luego disminuir a sus valores basales a los 120 minutos, partiendo de valores de 110.00±4.69 mg/dL de glucosa, alcanzando su máximo valor de 153.43±5.94 mg/dL a los 60 minutos y disminuyendo a los 120 minutos a valores iguales al basal 113.86±3.26 mg/dL (Tabla 1), reflejándose la capacidad que. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 23. tiene el organismo para metabolizar a la glucosa, evidenciándose la respuesta normal del espécimen sano ante la PTGO, debido a que el páncreas de estas ratas están funcional y estructuralmente normal. Esta prueba refleja la eficiencia del cuerpo para metabolizar la glucosa excedente después de una sobrecarga de glucosa oral. (Trujillo, 2007, Pp. 21-24) En condiciones normales, el hígado regula la velocidad de la glicólisis y la gluconeogénesis para mantener los niveles de glucosa en sangre. La fructosa 2,6-. IC. A. bisfosfato estimula fuertemente a la fosfofructoquinasa (PKF) e inhibe a la 1,6-. Q UI. M. bisfosfatasa. Cuando la glucemia es baja, la fructosa 2,6-bisfosfato pierde un grupo. BI O. fosforilo y se convierte en fructosa 6-fosfato, la cual no sigue unida a la PFK. (Berg,. Y. Tymoczko y Stryer, 2008, Pp.460-468). AC I. A. Hay dos enzimas que regulan la concentración de esta enzima: una fosforila a la. FA RM. fructosa 6-fosfato y la otra desfosforila a la fructosa 2,6-bisfosfato. La fructosa 2,6bisfosfato se forma mediante una reacción catalizada por la fosfofructoquinasa 2 (PFK2),. DE. una enzima distinta de la fosfofructoquinasa, La fructosa 6-fosfato se forma por la. CA. hidrólisis de la fructosa 2,6-bisfosfato catalizada por una fosfatasa específica, la fructosa. IO TE. bisfosfatasa 2 (FBPasa 2). (Berg, et al, 2008, Pp.460-468). BL. Las actividades de predominio de estas actividades están controladas de forma. BI. recíproca por la fosforilación de un único residuo de serina. Cuando escasea la glucosa, como ocurre durante el ayuno, un aumento del nivel sanguíneo de la hormona glucagón dispara la señal de cascada del AMP cíclico conduciendo a la fosforilación de esta enzima bifuncional por la proteína quinasa A. (Baynes y Dominiczak, 2015, Pp. 81-87) Esta modificación activa a la FBPasa2 e inhibe a la PFK2, lo que hace bajar el nivel de F-2,6-BP. Entonces predomina la gluconeogénesis. La estimulación por glucagón de la proteína quinasa A también inactiva a la piruvato quinasa del hígado, el glucagón inhibe. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 24. la expresión de las tres enzimas glicolíticas regulables y estimula a su vez dos enzimas clave gluconeogénicos, la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa y la fructosa 1,6bisfosfatasa. (Baynes y Dominiczak, 2015, Pp. 81-87) Según la tabla 1 se observa la diferencia en las concentraciones de glicemia entre el problema 1 y el problema 2, debido a las diferencias en las concentraciones administradas a los especímenes de experimentación, se obtuvieron resultados para el problema 1:. IC. A. 40mg/kg valores basales de 105.43±8.73 mg/dL teniendo un incremento máximo de. Q UI. M. 135.29±4.07 mg/dL a los 30 minutos y disminuyendo a los 120 minutos a valores menores. BI O. que el basal 102.43±3.95 mg/dL, en el problema 2: 80mg/kg partiendo de valores basales de 106±3.11 mg/dL teniendo un incremento máximo de 124.29±3.73 mg/dL a los 30. A. Y. minutos disminuyendo a los 120 minutos a valores menores que el basal 104.57±4.69. FA RM. AC I. mg/dL.. En el Grafico 1 Se analiza las curvas de tolerancia a la glucosa oral en Rattus. DE. norvegicus var. albinus para los grupos blanco, control, problemas 1 y problema 2,. CA. podemos evidenciar que el grupo blanco mantiene una línea recta con valores normales. IO TE. de glucosa ya que no se les sometió a la PTGO, el grupo control tiene una curva más. BL. elevada que los grupos problemas, el grupo problema 2 tiene menor curva que el grupo. BI. control y problema 1, se evidencia que el extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium corymbosum disminuye los niveles de glicemia en la cuerva de tolerancia a la glucosa. Según Tukey (α=0.05) se observa que a los 30 minutos post PTGO (Anexo 11, tabla 14) que el grupo control difiere del grupo problema 2, sin embargo, tiene similares niveles de glicemia que el problema 1; con las medias de 138.29 mg/dL, 124.29 mg/dL y 135.29 mg/dL respectivamente; donde se evidencia que el problema 2 tiene mayor disminución en los niveles de glicemia.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 25. A los 60 minutos post PTGO (Anexo 11, tabla 15) se evidencia que el grupo control (133.86mg/dL) difiere de los grupos problemas, así mismo se observa similares resultados en los problemas 1 y 2, con las medias obtenidas de 125.71 mg/dL y 118.71 mg/dL respectivamente, observando nuevamente mejores resultados para el grupo 2. A los 120 minutos post PTGO (Anexo 11, tabla 17) se obtiene similitud entre los grupos blanco, problema 1 y 2 (109.71 mg/dL, 102.43 mg/dL y 104.57 mg/dL. IC. A. respectivamente), de todos estos resultados obtenidos a diferentes tiempos evidenciamos. Q UI. M. que el problema 2: 80mg/kg tiene mayor efecto en disminuir los niveles de glicemia en. BI O. la curva de tolerancia a la glucosa oral con respecto al grupo problema 1: 40mg/kg e. Y. incluso con mejores resultados que el grupo control (113.57mg/dL).. AC I. A. Según el estudio por ANOVA (Tabla 1) los resultados obtenidos entre los grupos. FA RM. control, problema 1 y problema 2 para los diferentes tiempos, si hay diferencia estadísticamente significativa p<0.05; evidenciando que el extracto crudo de frutos. DE. frescos de Vaccinium corymbosum disminuye los valores de glucosa durante la prueba. CA. de tolerancia a la glucosa oral en Rattus norvegicus var. albinus.. IO TE. Las disminuciones de los niveles de glucosa en sangre en la PTGO se deberían a la. BL. acción de los fitoconstituyentes del extracto crudo de frutos frescos de Vaccinium. BI. corymbosum, tales como flavonoides (miricetina, quercetina, flavonol) y antocianinas. (Morcomb, et al, 2009, Pp.900-906; Rivera, et al, 2010. Pp. 509-516 y Ted,et al, 2008, Pp. 46-54) En un estudio realizado por Ted, et al, (2008) sobre la respuesta glucémica humana y el contenido fenólico de jugo de arándano sin azúcar, donde se encontró que los principales componentes del arándano son el flavonol, la miricetina y quercetina,. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 26. llegando a la conclusión que el jugo de arándano se asocia con una respuesta glicémica favorable y puede ser beneficiosa para las personas con intolerancia a la glucosa. Así mismo, en el trabajo realizado por Singh, Ted y Kalk, (2009) sobre el aislamiento de los flavonoides específicos del arándano para la evaluación de la actividad biología, donde se identificó los principales componentes del arándano que son el flavonol, la miricetina y quercetina, llegando a la conclusión que la actividad antioxidante se le. IC. A. atribuye a los principales constituyentes del arándano.. Q UI. M. Existen estudios donde se ha demostrado que la miricetina revierte el defecto en la. BI O. expresión de receptor de insulina sustrato-1 (IRS-1) y la subunidad reguladora p85 de. Y. fosfatidilinositol 3-quinasa (PI 3-quinasa), a pesar de la expresión del receptor de insulina. AC I. A. (IR), hay un aumento de la fosforilación basal de IR y el IRS-1, así como Akt, también. FA RM. mejora la acción de la insulina en la translocación de la glucosa transportador 4 (GLUT 4). Estos hallazgos indican que miricetina mejora la sensibilidad a la insulina a través de. DE. la acción de la insulina asociada a IRS-1, PI 3-quinasa y GLUT- 4. (Liu, Fong, Shorong. CA. y Weig, 2007, Pp. 1473-1477; Strobel, Allard, Prez, Calderon y Aldunate, 2005, Pp. 471-. IO TE. 478). BL. Diversos estudios se ha demostrado que la quercetina se asocia a la inhibición de. BI. manera no competitiva al glucógeno fosforilasa (GP), enzima que cataliza la fosforilacion degradativa del glucógeno a glucosa 1-fosfato produciendo una inhibición de la glucogenólisis. Por otra parte, una relación estudio estructura-actividad reveló que la presencia de los grupos OH en posición 3 'y 4' en el anillo B y enlaces dobles entre C2 y C3 son factores importantes para el reconocimiento y unión a la enzima. Múltiples estudios en hepatocitos de ratas dieron como resultado que la quercetina suprimen la glucogenólisis. (Kato, Nasu, Takebayashi, Adachi y Sanae, 2008, Pp. 4469-4473 y Lee, Chan y Lin, 2008, Pp. 1473-1477). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 27. En el estudio realizado por Hye, et al, (2011) se demostró que la quercetina posee actividad inhibitoria de la α-glucosidasa in vitro. Estos actúan como inhibidores competitivos de las enzimas necesarias para la digestión de los carbohidratos en el intestino delgado, retrasando el aumento de glucosa en sangre después de una comida. En otro estudio realizado por Bardy (2013) se demostró que la quercetina induce la secreción de insulina por la activación directa de los canales de calcio de tipo L en las células beta. IC. A. pancreáticas.. Q UI. M. Asimismo, en el estudio realizado por Youl, et al, (2010) se demostró que la quercetina induce una disminución de glucosa en plasma, además regenera los islotes. BI O. pancreáticos, preservando la integridad de las células β pancreáticas a través de la vía. A. Y. ERK 1 y 2, disminuyendo el daño oxidativo y normalizando la prueba de tolerancia a la. AC I. glucosa. El estrés oxidativo, causado por un aumento de las especies de oxígeno reactivo. FA RM. intracelular (ROS), desempeña un papel central en la resistencia a la insulina y en la muerte de células β pancreáticas durante el deterioro progresivo de la tolerancia a la. CA. DE. glucosa y el desarrollo de diabetes tipo 2. La protección de las células β pancreáticas es. IO TE. esencial si se va a cambiar la historia natural de la diabetes después de la aparición de la. BI. enfermedad.. BL. enfermedad, pero también es crucial para prevenir o retrasar la aparición de la. Según el estudio realizado por Zhang y Liu, (2011) plantea que la actividad hipoglicemiante de un tipo de flavoniode (flavonol) estaría ligado a los receptores proliferadora de peroxisomas o antagonistas de receptores de glucagón, así como estaría favoreciendo la inhibición de la dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV), el cual es una enzima que degrada a la hormona incretina. Estas son sustancias que se producen en el intestino y se liberan en respuesta a la ingestión oral de nutrientes, sobre todo hidratos de carbono que producen aumento de. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 28. liberación de insulina, las 2 hormonas incretinas más importantes son el polipéptido inhibidor gástrico (GIP) y el péptido-1 similar al glucagón (GLP-1). La secreción de incretinas empieza a los 15 minutos después de la ingesta y alcanza su máximo a los 30 a 45 minutos, retornando a valores basales 2 a 3 horas después de la ingesta. Una vez en la sangre, la vida media de las incretinas es muy corta, son rápidamente degradadas por la enzima dipeptidil peptidasa 4 (DPP4). (Burgos, 2012, Pp. 213-218). IC. A. La estimulación de los receptores de GLP-1 localizados en el esfínter pilórico causa. Q UI. M. un vaciamiento gástrico retardado disminuyendo así el tránsito de nutrientes del estómago. BI O. al intestino delgado, con la consecuente atenuación de la elevación de glucosa plasmática inducida por alimentos, esto indicaría que el flavonol presente en el extracto crudo de. A. Y. frutos frescos de Vaccinium corymbosum podrían estar dificultando la absorción. FA RM. AC I. intestinal de glucosa. (Burgos, 2012, Pp. 213-218). La principal acción de GIP y GLP-1 ocurre en las células pancreáticas beta, estimulan. DE. secreción de insulina a través de la unión a sus receptores localizados en la superficie de. CA. la célula β del páncreas. La unión de GIP y GLP-1 con sus receptores causa una activación. IO TE. de la adenil ciclasa a través de la proteína G, produciendo un incremento intracelular del. BL. AMP cíclico lo cual activa a la proteína kinasa-A (PKA) y al factor tipo II de intercambio. BI. del nucleótido de guanina regulado por AMPc. Ambas proteínas generan una plétora de eventos intracelulares que involucran el cierre de los canales de potasio sensibles a ATP (k-ATP), despolarización de la célula β, elevación del calcio intracelular, inhibición de los canales de potasio dependientes de voltaje y exocitosis de los gránulos de insulina. (Quintanilla y Zuñiga, 2010, Pp. 509-520; Romero, 2007, Pp. 156-164) En estudios in vitro efectuados en células β, GIP y GLP-1 han demostrado que incrementa la diferenciación de nuevas células β a partir de células progenitoras en el epitelio de los conductos pancreáticos. Así mismo, GLP-1 ejerce un efecto citoprotector. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.