!
" # $
#
%
&
# & #
# '
Berardi, Andrea Beatríz
Etnofarmacología gastrointestinal de plantas medicinales argentinas del género
aloysia, familia verbenaceae : mecanismos de acción y relación con los principios activos. - 1a ed. - La Plata : Universidad Nacional de La Plata, 2012.
E-Book.
ISBN 978-950-34-0861-2
1. Plantas Medicinales. 2. Angiospermas. 3. Tesis. I. Título CDD 580
!
"
# $
#
%
&
#
'(
)
)*
&
+
$
( $
&
,
-
$
(
)
#
.
$
$
/
$
*
& 0
1
*
$
& 2 $ . $
3 $ $ % 4
+
+
. )
&
+ )
&
$/
*
# / 3
. $
5
(
$/
*
$
&
*
$/
%
! " #$ ! %
& ' ( ) " * !$ )( ! +
, $ )( # "(
-. "( " #$ ! * / (0$1 ! # "( %
- 2 " $ ( "( 3 !
&-4 3 " ' 5( &
'5 )( &
6 &
& " ) $ 7 ( &%
& & " " ! 3 ( 8 " ! ( &%
& , " " ! 3 $" &%
& . &%
& - " " ( ' ( 3 !( &%
& $ ( ! ) 3 ! &9
& ( $! ( * !$") ( :" $ ,+
& % "( (!( ( / " !( 3 !( * ! !$ ( " "( ,+
& 9 $ ( / (0$1 !( ,,
& 9 : " ! 3 !( ( ( / )( ( ,,
& 9 &: " ! 3 " ! ) 8 () 8 (" 4 ,.
& 9 ,: "/ / )( ( (" !"( ( " /1 ! ; < ,-& 9 .: " ! 3 " ! " ( !( ( ;:< ! ")( ("
,-& +: # ( ( 1 !( ,
,
, +
$ ( / "
!( 3 !(
,%, / ! ( 3 !( ( 8 " ! ( !$( ( ,9
, & / ! ( 3 !( $" " .
, , / ! ( ('" !( " ! $" 3 ! "( $! (" ( " 7 ! 3 ., , . / ! ( ('" !( " ! $" 3 ! "( $! (" ! !( ..
, - / ! ( ('" ( ! => ! !( .
, ) $ ! 3 ( ' ' " ! 3 ( .%
, / ! ( ('" / $5( " )# ! &> .9
, % / ! ( 3 !( ;:< ! ")( -&
, 9
$ ( / (0$1
!(
-., 9 " ! 3 !( ( ( / )( ( -.
, 9 & " ! 3 " ! ) 8 () 8
--, 9 --,: " ! " 7 ! 3 " ! / )( ( (" !"( ( " /1
-! ; <
&
. / ! ( ('" !? ,
. &: / ! ( " 5 !( " ! $" 3 ! .
. , ! ( !! 3
-. -. / ! ( ;:<:! ")(
. - $ ( / (0$1 !( %
. -
( ! $ (
2 2
@
&6
% $ 6 ! " #
$ % & '
" & & ( )
) *+, & ( *+, *
-./-0 1 % ( " & ' % %
$ ( *+,)& ( *2 3 " 4 3" 5 " 4 " 6
( 7 8 " # * - ' 7 *2 3
9 ( *+,)& (1 $ : !
9 /-1 ' & 3 ;" $ ' %
! ! $ + 1 $ 9
3 <; " & = 1 ' 7 ! )
! ./-0 " $ 9 % !
$ 1 '#* ) ) ( 7 " > ?>#* !
$ 1 9 ( % $
% " ) ) 9 $ :
% @ ( ! )
*+,)& ( +´ $ "3 4 3" *+,)* - +´ $ "6 4 3" B 1 9 9
$ 7 * - $ +,*)& (" #
9 $ ! % % $
9 ) $ 7 * - 1
$ ) ) 1 7 C
! " #$ !
% 1
@ $ ( " #
D;E1 ! 9 = 63 F !
! 1
" & %
$ ! 9
! 1 $% $ 1 D &
* ! * " 33 1 G?D BBB " E 1 %
: = $ ! 1 9
$ ! % 1 9 ( $%
E H B561 I BB 1 ; : BB51 # ( " BB61 &
+ ( 33 "
# = $ $= 9 :
! @ " J : H & !
9 % K 36 3 $ 1
63" F ( % B"B F $ = " E
9 ! " F ( $ @ 1
% 1 : * " 335 " +
% 1 $@ 1 1 : 1
1 1 1 $ =
! " D ! 9
1 7 ! 1 1 "
B
( ( = 1 ! 7
: "
: ! $
$ 9
@ " ; ( 7
! ) ) = " 2 1 L$ E @ 1
$
@ @ 7 " *
1 1 1 $ @ " & 7 1
3 3 " ' @ !
@ @ $ % " J $ 9 (
C !
9 % 1 $ @ 1 "1
! 1 = 1
= " E 1 9 9
" >
= ! 1 1 =
C 9 " 1 = 9
1 9 1 ! @
1 ! "
% 1 ( 9 K
$ ( 7 $ 1
% 1 $
" % 1 2M'& 1
! 1 (
7 ( 1 % : 1
1
9 7 = $ " # !
: 63 F 1
1 : 1 : 1 1
! 1 $ @ 1 @ 1 "
& ' ( ) " * !$ )( ! A
; ( 8
: 1 1 = 9 1
! " > 1
! ( ( $ ! " E
9 9 1 = % $
% 1 : ! ( C 9
= ! % 8 ! "
1 ( 9 (
( 1 % 1 % % $ H 1 > 1
1 %
! 1 7
" * 1
! 1
! " H 7 : 9 %
" # %$ 9
1 ! ( "
# %$ 1 = 1 ( K 9
$ ! N
! !
1 % ! @ $
$ ! 1 1 1 " & @ # * :
$ 3 C $ >MJ+
> M J + 1 BB5" $ BB6 K
9 C & @ # * 5 ( =
9 * 33 "
# ! & @
! 9 $ # @ 1
" # !
! 9 :
! " #
: ! "
1 9 ( $ $
$ " $ $
$ 1 ! = 1
! " # $ 9
% O ; 1 33 O
P Q = $ ! "
P 2 $ % !
P Q 1 "
P Q 9 "
P + ! $ ! (= 1 !
= "
P 1
= % 1 : ! 1
$ 1 ! : " , ! *
& = 1 " ( = "
P 2 $ 1 ! $ 1 ! ! "
P Q ! (
"
# $ ! (= (
! :
@ " # ! $=
! $
! 1 ! ! 1 9
@ @ "
$ 1 1 ! 1 !
1 9 7 1 % !
! $ 1 9
K " * 1 ! 1
% 1 !
7 7 "
# % ( 9 7
! 1 7 1
1 = " & %
O
& @ * 1 ! 1
$
% " = ! !
1 $
! : 1 7
" 2:9 1 BB6
1 % 7 @
K 9 1 1
: N % 1 1
@ $ N N
@ " * 1 33
O
@ = 1 ! = $%
= K 1 1 =$ 1 7 1
" 1 9 7 !
1 7O 1 @ 9 $ 1
7O " & = 1 (
: 7 = 1 $= 7
1 1 ! : =
= $ ( 1
! ! "
$ 1 : 1 7 = =
1 % 9 "
! !
9 1 ! $ !
%$ " ' @ ! ! ! 1
! $ ! 1 9 %
" 1 ! ! 1 %
1 = K $ 9 % 1
"
# 1
$ @ 1 @ " # @ $ 1
9 @ $ % $= 1
9 7 " $ @ 1 9
7 1 @
" > 7 1 ( 7 & $ ! !
: = : $ 1 @ " D 7
% 1 1 =
7 B 1 % ( 9 "
$ $ ! $
! 1 9
C = 1 1 9 1 "
# ! @
! 1 (
1 @
" E $ @ ! !
= 1 @ * >,D
# 1 7 1 0 "1 # "1 "1
$ $ ) " & " BBB "
, $ )( # "(
@ # ! 1
@ 1 9
! ; B6 1 + E : " 336 " @
@ ! 7 7 ) ) 1
! G
I : : 3 3 " > 1 % 1 9
( + E : " 336 " # %
! @ 0 @
! > 1 33 "
& ( 9 ! 1 = 1
% " 1
1 1 $ 1 ? " 5" 1 $ (C 1
$ % " # ! =
S ( 7 " ! 1 9 $ %
! " # ! 9 =
" J ( $
1 % 7 ; : * 1 B6 " J !
$ 1 9 $ !
7 ! $ " # @
! 1 " # !
: " @ $
" E ( : 1 = 3 "
% 1 $@ 1 " : K 1
$ % 7 1 9 =
9 " :
( : " > 7 1
% $% )9 % " # ! $
: " + 1
7 : $ 1 $ % ( " >
1 7 ! 1 $ C !
) 3 % ( " ?
9 % : $ " (
9 % 9 $ *!
T :C 1 333 "
? 1 % !
) ) *( & 33 1 $ !
) ) % 1 9 7
5
) 1 & 1
335 " E :! @ ! ) 1 ( 7
1 H 1 33 " ( @ 1
6 1 7 @ :8 1
) 58 3) U* C )
U*1 $ % ( " (
( 7 ! 1 " #
$ ( = ! 1 9
@ $ "
7 % 1 7
1 $ 1 1 "
@ $ $ ! 1
. "( " #$ ! * / (0$1 ! # "(
# 9 1 = 1
1 1 @ 1 $ :
1 ! ( 7 1 $
1 $ 1 @ $ % " E
1 ( % =$ 9 $
"
%$ $ @ ( ; %
# > 5 ) 6 B K * 2 " &
@ ! > 1 $
: % ! 1 $ ! =
E H B56N & + ( 1 33 " ' !
@ = @ 0 > " 33 % @
0 ; " H V 1 :
! " # ! >
( 1 % ( !
, " 335 $ , " 3 3 "
, 1 ( ! @
I : : " 336 1 9 @ 0 0% $ %
I " 9 = ! > " 33 @ "
D # 1 0% I "1 > " # :"1 1 @ ( $
! "
# %
B
< ( '" )$ "A ( " (
M %$ O
! " # $
+ 1 = O $ "
$ 1 ! )
N $ " 1 ( 9 K
> ) N $ " $ 1
1 9 ! ,
"1 33 N > "1 33B "
$ 7 = 1 $ 7 1
$ K 9 1 $ 1
1 7 "
$ $ % $ ( $ &
+ ( 33 " :
9 " E = ! & @ E 1 ;@ ( & "
% ( # > ( 1
E2H E 2 $ ! H 1 9
& ! > 9 M " # @
( 7 1 $ 1 7 $ $ ! "
> ( 7 1 ( = )$ ! 1
7 $ *! " E
( 7 " > 1
= $ $ ! 1 3 F $ = 1 9
! 9 % % $ $ ) 1
16) 1 1 1 1 ( 7 N $ 1
1 % 1 @ 1
1 ( 9 @ $ $ 1
9 " $ $ "
$ 1 9 " *
K ( 1 @
K 1 % !
% " $ 9
: $
" & % 7 1 $ + (
$ ! 1 9 % $ 9 % "
M ! ! 1 1
! 9
@ ! , 1 33 " $ ( 1
1 $ ! $ E "1 B6 " ' @
1 ! 1 $ ! "
& %1 1 $
$ ! " , 1 33 N > "1 33B1 ,
333 "
? $ ( ( $
$ ! 1 O !
! 1 ( 9 K , "1 33 1
$ 1 ! E ( S 1 335 1 1 1
M E 1 336 1 1 $ H : " 33BN ?
1 33B 1 I % 1 33 " ' @ %$
E "1 33 1 9
-E 1 1 33B "
'< ( '" )$ "A '$"" (
M %$ O I W ; S
@ @ 1 7 1 * 1
( 1 @ "
E 1 N $ 9 K 1 9 1
= " I =$ = & 1 H > "
% 1 ( 333 1
* 1 *! 1 E X 1 # , 7 1 E # 1 E 1 X 7 E Q@ &
+ ( 33 "
1 (
$ 7 " E $=
" # : ( 1 = 3 F
$ ! 1 , 1 33 "
! 9 % ( 9 1
1 H H 1 ) ) " & 1
! "
1 = 1
$ @
1 )
0%61 M K : " 33 "
$ !
@ & + ( 33 1 9 (
$ ! 9 $ ( " 1 (
% $ %
( (! ; "1 33 N ? )2 33 $
! $ : C 1 3 33 8S ? )
2 1 336N & 33B " $ % ! $
( : 8S 1 $ !
$ ! 1 '#* ? )2 1 336 " & 33B
! 9 % $
1 : " > $% ) %9 $
1 !
1 3 33 8S 1 " 8S " E ! 9 " " 33 8S
7 33 F 1
! EM*1 3 8S 7
! ) ! 9 !
" # 8S 1 7
! 3 F :
$ @ 1 " 8S 1
% 9 $ @ % & "
& = 1 !
! 1 ! & I 1
3 3 1 7 .
: H : 1 33B 1 1 !
( ( ' ) 9
7 G I := : 1 3 3 " * 1
@ 6 ( ! 1
! : 1 = ! %
" ! 1 $
" E (
) 6 F % G I := : " 3 3 " &
@ ( 7 $ ! # $
E " 336N I " 336 "
%
! > ! $ %
( ! ) & (
* - , 1 335 " & = ! ( !
1 7 ! ( :
: ' &1 9 9
) ! /-"
> ?>#*1 $ $ 1 1
$ (
( ! $ ( 1 $
: : , " 3 3 "
+ B H 1 !
! ! 1 (
$ ( ( + " 335 *
+ " 33 " # $ ! ! !
K ! ! 1 1
T )> " 33 "
D 1 ) $ " > ! $
1 9 ( : : %
" $
: 1 C :8 1
G V S ; 1 3 3 "
& ' ( ! )
% $
! ! "
; ; $
! C ! @ /
& 33 N $ "1 33 " D
& ( ; 9 O
+ + $ 7 1
)?' $ 1 $ $
< = ( !
4 B 2 C
$ C
$ @ 1 9 $
" > 1 ( :! 9
@ % I " 1 % $ 85 %
7 96 % 9 %
> ! ! "
2C D
! $ 1
I " 1 % $ 85 %
7 96 "
! $ ! ( 1 7 $
$
$ ! "
* ( $ $ 9 %
> ! $ !
5
* & + % ! ,
# ( = ( 7
I " O 1 % $ / I " ? S
$ ( % 1
+ " E :: ; * E :: #> Q *
J M # > "
* * - ) .
E ! 3F ( 7
( = " E $ $ : 1
B 3F 8 " #
33 3 !
' ! 8 33" # &
$ : ( ! 1
" > 1 = ! & *+, $
$ : 8 ! O 33 8 % $ : 8
! O 33 8 % $ Q " "
* / - ) !
E 33 ( 7 ( =
( 53U % " E $
'; 9 9 33 " # '; !
! 33 ! 31 3
! ' ! 8 33"
" E $ ! 53U"
* 0
7 ! :! 7
! M2? Y6 ) B6 " E : E )
+ V 33) 3 " = Q % 7
( :) ( ( 1 ( "
# @ % 7 $
= % 1 ! ' 7
"
* ' - # )
# % :
5U* 3 ! ' 7 " Q 7
$ !
! ! " E 7 $ 7
( 7% $ : @ G>2 2 1
JE& $ 'H; ;1 2 1 JE&
9 ! 7 &8+ JE& "
* 1 $ ! % )
E : , " 335
% % !
B
E( " BBBN M "1 33 " # $
'; $ $ "
# ! ! ! ) ) )
*+, & ( 1
'; "
> ! 1 $
*+, 1 : ./-0 3 ; " E :
$= 1 $ O E
3 ; 9 /- : !
! 1 3 ; 9
/- : ! ! $= 9 1 $
: ! *+, 1 ; 9 /-)
* - / T( " 33B " E !
M 9 + " E ! $ ) )
E *+, & ( *
-* 2 ! ! % 3 !
' ; O 3 M * 1 "5 /* 1 ; * 1 M ?*D 1 3" >D ? M 1 "6 * * "
7 $ ! 1 ? 6" 9 !
# B53 "
' )3* O ! 9 ' * * "
' )3* ) 3 ; /-O ! 3" ! /* 3F 3
' )3* " ! ! " " " E
1 $= ! : ! 7 $ $
! " E $ ! ! ( !
/- 3 ; : $ : )
*+,"
*+, & (O 3" & (
O 1 1 51 31 531 331 533 333 < 8 3 ' !
8 33 "
*+, * O 3"
* * O 3"661 "6 1 " " 6" 1 1 6 3 8 1 3 ' )
3* ! 8 33 "
* 4 - 5 ) 6 ! 6
*+, & (O $ *+, 1
*+, & ( 3
! C &1 '; !
" *+, ';1 :!
3" 53ZF : *+, ';1 @
7 ! 7 1 ! $ *+, " ' *+,
: $ 33F $ = *+,
= " & $ : *+, $
: ' ! ) 3 : ! "
*+, * - ' )3)* -) 3 ; /- O :
' * - :! ' )3)* - $ *+,
3" /* 3F 3 ; /-" &
! 1 $ *+, *
( *+, (
! " *+, ';1 :!
3" 53ZF : *+, ';1 @
7 ! 7 1 ! $ *+, Q "
' *+, : $ 33F $ =
*+, = 1 '; 8 9 !
*+, (% 53F N
" & $ : *+, $ : ' )3
* - ! ) 3 : ! "
* 7 ! O $ *+, & '; !
3 ; /- 3 < 8 & (1 * -" #
*+, & ';1 C
$ ! , " * $
9 $ 7 & ';1 $ ) 3
*+, 7 "
*+, & ( * -1 + [ ) * 3 ; 1
$ ( ! & ';1
! ! ( 3F *2 3 " ( !
$ F *+, 1
! 9 9
& '; $ ! @ " # *2 3
! ( ! 3F " # ( !
9 7 ( ! *+,
$ ! =
+´ [ \ .H]0 - . & \ &H] 8 & \ &H] ) 01 H] !
) 1 &1 &H] &H] =
$ & H] =
* 7 $ ! 5 8!9
* 7 &3 ) 5 %
E ! $ 1 ( 1
@ % % $ 1 C ! @
/ S $ I" ;@ : I @ : I @ % 333 "
* 7 & & - ) ! ) !
@ 7 $ 7
( 3 ED ? 3F 3 D? 3^
E $ ! $ !1 3 D? 3^
$ ! K ; % ( $ ! 3
K ( "
$ ! ! $ 3^* 3 "
1 % 9 9 ! 1
D? B ^ 3^*1 $ !
: $ 33 D? B ^"
$ ! 33 ! O 3 ! &
_ 6 & 6 $ ! J ) 2E '( E 1
? β
* 7 & * ! ) #
# ! ! ! ( E 3 D? 3^
! $ O 3 < 8 " # ! $ D? 3^
* 7 & / ) :" ( (!
( 1 $ ! J
_ 33) 33 $ _ 7 "
# $ O
& 1 : 1 F $
1 ( $ 8 33
* 7 *3 ) % . % .
-$ : ?>#*
$ =$ = 1 ( %
$ > ! , " 335 "
E :! ! $ I E&E1 )# )H 1 Q 1 J
$ 7 3 < ,( 1 * 1 *&1 JE& " = :!
=$ O $ # ( ,> 6 3
= 1 K % < 1
^* ! = " # $ ! $ O O ( $ O
O O 6 ? " N $ 7 ! $ "3 8 !
J $ " # $ : $ !
! 533 < 8 #1 $ ?>#*"
# = O 1
! 3 < 8 $ ! " * 7 $
! @ ! % 9
, "1 335 "
* [ *( &
&(
+ O
* O ! ! 1 < 8
*(O ! ! ( < 8
& O ! 6
* 7 /3 - 5 5 % 59
# $ $ **+1 Q ; S 31
$ ! 1 =$ O
* *? 8; D? B O * *? 8; D? BBO
& 8; D?8? D 33O 5O 3
5 & 8& $ 8& 8? D 33O O O $
E :! ! ! F 9 `1 E " # !
( $ **+ ! 7 : J
% 1 : !
! ! F = ) $ ! !
J "
E ! 3F @
% H H % $ >& 1
! 3F @ "
* 7 03 ) 3 %
E $ **+ ( = "" > 1 :!
$ O Q ; S 3" 1 $ !
O
' 8& 5O
' 8& B O
' 8 BO
# $ ( = 3F @
% H H % $ >& 1
$ ! ! J λ 1 :! : ! (
$C 3^* "
* &;3 +< 9
# 4 E; O C
*+, &MD & % 1
\ . 0 $ F " =
H $ !
*+, " !
$ a3"3 " # = % $ >
, +
$ ( / "
!( 3 !( A
, / ! ( 3 !( ( 8 " ! ( !$( ( A
, ;'$"" (<A
1 ( ! $ ) *+, & (
1 ME
3" " 8 Q " # *+, & ( ! + [ ) * 3 [ "55 4 3"
[B " # ! ( 3F *2 3 ! "6 4 3" 5
$ : 8 "
'
= ! & ) 1 )
8 $ : 6 ! 8 6 8 6 (
3;< 8 =>6 8 6 ?%@ A <%BC $ : % 'D- B )/ E E = B@%CC F G<%<<<? E E ?F?%H G<%<<<? 1 E I G<%<; )
-4 -3 -2 -1 0 1 2
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 control
A. polystachya 0.1 mg/ml A. p. 0.3 mg/ml
a.p. 1 mg/ml
a.p. 1.5 mg/ml A.p. 2 mg/ml
A.p. 3 mg/ml
* * * * * * * * *
-log [Ach] (ug/ml)
%
E
Curva de inhibición de la contracción de Ach
0 1 2 3 4
0 25 50 75 100 125
[extracto de Aloysia polystachya] (mg/ml
%
B
, & 9 ; ( " (<A
1 %$ ( ! $ ) *+, & (
3" $ : 8 1 ( 5" 4 5"6F [
Q " # ! ( F *2 ! 3" 5 4
3"355 $ : 8 "
'
= ! * ) 1 )
8 $ : 6 ! $ 8 6 8 6
( 3B; 8I G<%<; ) &.1 = ?B6 8 6% 'D- B )/ E E = B;%@J H G<%<<? E E @FH G<%<<? 1 E I G<%<; )
-3 -2 -1 0 1 2
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 control
Palo amarillo 0,1
Palo amarillo 0,3 Palo amarillo 1 *
* *
log [Ach] (µµµµg/ml)
%
E
Cálculo de C. I. 25% = 0.276 ± 0.077 mg/ml
0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25
, & / ! ( 3 !( $" " A
, & ;'$"" (<A
# ';1 ( ! $ ) *+, & (
3" 1 $ = = 9
& ( "5 4 " F [6 Q " # ! ( 3F *2 3
! " 4 3" 5 8 "
'
= ! / ) 1 )
8 $ $ : 6 8 6 8 6 (
3;< 8 =@6 8 6 H%?; A <%;C $ $ : % 'D- B )/ E E = ?@?%H J G<%<<<? E E ?>B%> @ G<%<<<? 1 E I G<%<? )
Curva de inhibición de la contracción de Ach
-1 0 1 2 3 4 5 6 7
0 25 50 75 100 125
-log [TM de Aloysia polystachya] (mg/ml)
%
E
-4 -3 -2 -1 0 1 2
0 20 40 60 80 100 120 control
A. polystachya TM 0.66 mg/ml A. polystachya TM 2 mg/ml A. polystachya TM 6.6mg/ml
*
*
* *
*
*
*
*
*
* *
*
*
*
*
*
* *
etanol 70%-log [Ach] (µµµµg/ml)
%
, & & 9 ; ( " (<A
# ';1 %$ ( ! $ ) *+, & (
3" 1 ( 5" 4 5"6F
[ Q " # ! ( 3F *2 3 !
" 4 " 6 8 "
'
= ! 0 ) 1 )
8 $ $ : 6 $ 8 68 6 (
3;< 8 = C6 8 6 ) ( ! % 'D- B )/ E E =
F?%HB J G<%<<<? E E FB%@> G<%<<<? 1 E I G<%<; ) &.1
-4 -3 -2 -1 0 1 2
0 20 40 60 80 100
120 control (n= 7)
A. gratissima TM 0.66 mg/ml
A. gratissima TM 2 mg/ml A. gratissima TM 6.6mg/ml A. gratissima TM 13 mg/ml
* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *
-log [Ach] (ug/ml)
%
E
Curva de inhibición de la contracción de Ach
-1 4 9 14
0 25 50 75 100 125
[TM Aloysia gratissima] (mg/ml)
%
, , / ! ( ('" !( " ! $" 3 ! "( $! (" ( " 7 ! 3 A
, , : ;'$"" (<A
1 $ ! !
: ! ' ) 3 ; /- Q " E ( :! 9 1
% ! /-1 $ ./-0"
, , & 9 ; ( " (<A
+ 9 &) $ / ( % ( *+, & (1 !
$ ';) %$ ! : !
' ) 3 ; /- 9 7 7 ! !
Q " E ( :! 9 ';) %$ % ( "
'
= ! ' K,L M * (! E 6
1 H 8<%H ? J $ : 6 )
8 = J6N 6 "#1 $ / B @ ?J $: 8 =J6 A +#%
0 50 100 150 200 250
0 50 100 150 200
E tO H T M 2 8 1 4 m g /m l TM - A . gr atissim a
t iem p o ( s )
% d e t ó n ic a K 4 0 m M
250 500 750 1000
-25 0 25 50 75 100 125 150 175 control (+ESM)
EA A polystachya (-ESM) A. polystachya
0.3 1 4
, . / ! ( ('" !( " ! $" 3 ! "( $! (" ! !( A
, . : ;'$"" (<A
1 % $ ! ! =
3 < 8 & ( 3" 8 1 7 $ $= 8 " # '; 7!
! ! ) Q "
' & ; 9 /- /* $ / !
! 9 ! ! 5" ± F ! & (1
! 7 ! & Q " E ( :! 9 : !
' & % $ ( * - 1 %
( +& % 7 "
= ! 1 "# % 8 6 8 6 " ? #
8 = J ! 6% ' <%H $: %
0 200 400 600 800 1000 1200
0 50 100 150
200 Ac h
Ac h + A. polys tac hya
E A-0.3--1---3 ---TM 2---TM8
tiem p o (s)
% d e t ó n ic a d e A c h
0 250 500 750 1000
25 75 125 175
T EA 1 m M + Ach + A. p o lysta ch ya
liof.0.3---1----3 ---TM 2---TM8
, . & ; ( " (<A
&) $ / 7! ! & ( $ &
1 ( $ $ $ ' & 3 ;
9 /-1 9 ! !
& ( Q 5 "
= ! 2 E 8 6 8 =J6
J< # " 8 =F6
* 8 6 "# 8<%C ?J%C $: 6
C<M% ' 1 * "#
% " J< #
8 =<%;? '+6%
2.5 5.0 7.5 10.0
-8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0 1
EA palo amarillo
TEA 40 mM + EA palo amarillo
[extracto] (mg liof./ml) EA burrito ∆∆∆∆ r p ta t ó n ic a d e A c h ( v )
Efectos de TM-A. gratissima
0 100 200 300 400 500
0 50 100 150 200
EtOH TM0.7 2.7 8.7 14.7 mg/ml
, - / ! ( ('" ( ! => ! !( A
> ';1 % % $ C
/-1 $
9 ' & 3 ; *+, & (" ' & ! $= 9 7!
3 1 *+, & ( Q "6 "
$ @E . $ $ $ " ?< # 8 * ( 6
$ ?< &. 8 6 $ $ "#1 %$ F &.
8 % 0 $ $ " "# )
CDR-5 TEA+paloam+Ach
0 1 2 3 4 5 6 7
0 200 400 600 800 1000 1200
TEA 10 mM -Ach CDR4
0 1 2 3 4 5 6 7 8
, - : ;'$"" (<A
# "#1 % ' & ! )
& (1 ( ! ' & Q B 1 9
/-"
, - & ; ( " (<A
# ( ! *+, & ( ';) $ / $
' & 3 ; Q 6 B
$ >E "# 8 6 8 6 F%F $:
" ?< # &. % I G<%<; ) &.1 O G<%<;
) "# 8 = J ! :"# ) 'D- B )/ 6%
-4 -3 -2 -1 0 1 2
0 20 40 60 80 100 120 control
T M A. polystachya 6,6 mg/ml T EA 10 mM
T EA 10 mM + T M A.polystachya 6.6
* * * * * * * * * * * ^ ^ ^
ANOVA 2 vías: trtto: F: 69.5, p<0.0001 * p<0.05 vs C, ^ p<0.05 vs TM A. polystachy a
-log [Ach] (µµµµg/ml)
%
E
-4 -3 -2 -1 0 1 2
0 20 40 60 80 100 120 c ontrol
A. gratissima 6,6 mg/ml
TEA 10 mM
TEA 10 mM + A. gratissima 6.6
ANOVA 2 vías: trtto: F: 42.86, p<0.0001 * p<0.05 vs C, ^p<0.05 vs. A.gratissima
* * * * * * * * * ^ * *
-log [Ach] (µµµµg/ml)
%
5
, ) $ ! 3 ( ' ' " ! 3 ( A
, : ;'$"" (<A
> ! $ ';1 % ' &
7 ! ! +& 9 9
/- ! 1 ! ';1 % 8
*+,)& ( 3 <; ; 1 + 8
' & 3 ;" # Q 3 9 ! % *+,
& (1 ! 9 ';1 % 5 ± 6 F
Q " B ± F Q " 3 " ' @ ! 9 ' &- ';1 %
±6 F Q " B B± F Q " 3 "
$ ?<E ';1 % 8F $: 6 &.
I G<%<; &. ) % 8 =J6%
-4 -3 -2 -1 0 1 2
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 control
metoclopramida 10µM
metoc 10µM+A. poly TM 6 mg/ml metoc10µM+TEA10mM+A.polyTM6
* *
* * * *
* * *
* * * *
ANOVA 2 vias: trtto: F: 368, p<0.0001, *p<0.05 vs control -log [Ach] (ug/ml)
%
, / ! ( ('" / $5( " )# ! &>A
, : ;'$"" (<A
> % C ( $ 7 * - @
1 : *+, * - : ./-0 * -" #
Q 9 & '; ( *+, * - $
1 9 '; ( : 1 *2 3 "6±3"36 8 "
= ! && ) 1 BP )
8 $ : 6 ! 8 6 8 6 )
* ) * F; ± BF
3;< 8 6 + * O "5B±3" 31 [5% 'D- B )/ E E = ?J%BJ J G<%<<<? E E ?JH G<%<<<? 1 E I G<%<; ) 6
CDR deA.polystachya
-5 -4 -3 -2 -1
0 25 50 75 100 125 Control
EA-Burrito 1.5 mg/ml EA-Burrito 2 mg/ml EA-burrito 4 mg/mol EA-Burrito 6 mg/ml
* * * * log[Ca] (M) % E
Curva de inhibición de Ca2+
0 1 2 3 4 5 6 7
0 20 40 60 80 100 120 140
[extracto Aloysia polystachya] (mg/ml)
%
B
= ! &* ) 1 BP )
8 $ $ : 6 8 6 8 6 )
* * 3;< 8 6 [ % 'D- B )/ E E =
B;@%> H G<%<<<? E E ;CC ; G<%<<<? 1 E I G<%<; ) 6
CDR de Ca
-5 -4 -3 -2 -1
0 25 50 75 100 125
Control
TM A. polystachya 0.66 mg/ml
TM A. polystachya 2 mg/ml
*
*
*
*
*
*
*
*
TM A.polystachya 6 mg/ml
*
*
*
*
*
log [Ca] (M)
%
E
Curva de inhibición de Ca2+
0 1 2 3 4 5 6 7
0 25 50 75
100 CI50: 1.8±±±± 0.08 mg/ml (n=4)
[TM Aloysia polystachya] (mg/ml)
%
, & 9 ; ( " (<A
# Q 9 '; % $ ( ! *+, * - $
1 *2 3 B" ± " 8 "
= ! &/ ) 1 BP )
8 $ $ : 6 $ 8 6 8 6 )
* * 3;< 8 6 [ % 'D- B )/ E E =
JJ>%H B G<%<<<? E E ?C;%J ; G<%<<<? 1 E I G<%<; )
CDR de Ca
-5 -4 -3 -2 -1
0 25 50 75 100 125 Control
TM A. gratissima 6.6 mg/ml
TM A. gratissima 20 mg/ml
*
*
*
*
*
*
*
*
log [Ca] (M)
%
E
Curva de inhibición de Ca2+
0 5 10 15 20 25
0 25 50 75
100 CI50: 9.276± 1.427 mg/ml (n=8)
[TM Aloysia gratissima] (mg/ml)
%
, % / ! ( 3 !( ;:< ! ")( A
> 9 ( ) %
G I := : " 3 3 1 $ !
" # Q 9 ) ) E ! $
! ( ! ) & (1 $
) +´ [ ) . 0 ; [ "33 4 3" 5
[ 3 " > 1 ) ) ( ! *+, * - )
1 +´ "6 4 3" B [ 6 Q " "
-4 -3 -2 -1 0 1 2
0 25 50 75 100
125 control
carvona 3 uM
carvona 10 uM carvona 30 uM carvona 100 uM carvona 300 uM
pD´2 carvona: 4.002± 0.117 (n= 20)
*
*
*
*
*
*
*
-log [Ach] (ug/ml)
%
E
= ! &0 816 ) &. % + &´B
) % 'D- )/ E E E JH%BH ; G<%<<<? * E
= ! &' 816 ) &. BP J< # ,% +
&´B ) % 'D- )/ E E E J%C<B ; =<%<<<F * E E ?>;%? C G<%<<<? I G<%<; ) %
-5 -4 -3 -2 -1
0 25 50 75 100 125
control
carvona 3 uM
carvona 10 uM
carvona 30 uM
carvona 100 uM
carvona 300 uM
*
*
*
pD´
2carvona: 3.86
±
±
±
±
0.19 (n=18)
log [Ca] (M)
%
, 9
$ ( / (0$1
!(
A/ 7 &3 ) 5 %
/ 7 & & $ :" ! ) ! . %
7 1 ( ( ! = _[ 6
( _[ 3 Q " " #
1 = _ 6 _ 3 Q " 1
:! ! _ 6 ( "
= ! &1E R- * * 8+ $ 6 8 6 *
/ 7 & * 5 %
# ( 1 %
7 1
( $! ( 8 " ! ) ( $! 3
4 "
;.+ E F < 2$"" ( ( " ( ' ("' !
&%-3" 5 3" 3 3" 55
( ! " ! 3 $! 3 A&+ ;E F <
)))
5" 5
G @ )( ( ( )
; / )( ( F ++ ) <
)))
" F " F
" ?E & ( ) !
, 9 & ) % . % .
$ : ?>#*
$ =$ = " # Q 5
" > 9 !
% = , " , "6
! % %
& H
* +
$ ?CE $ 7 0 * (
) ! ) ! 8 6 ! 8 6
/ 7 /3 , ) 5 % 59
# $ 6 3 ! **+
! ! " E $ $
: : $ ! 1 $ " +
=$ "B" ;@ 1 9
! 7 ! $ $ 6 " > 9
! ( ( 3 1
,$ 3" 3 "33" ! ,$
3" 3 $ " E C G H BB $
% $ = $ ) =
$ @ " = ! 1
1 ( ) 7 ,$O 3" 3N 3"63N 3"6 3"B3 %
$ $ ! 1 ,$ 3" 3" #
,$ 3"B3 $ 9 "
=$ 1 $ ,$
3"63 "33 ! ( : "
# **+ $ Q " B
! @ ,$ 3" N 3" 3 3"63 9
! 1 9 !
! ,$ 3" 3"63 "
# **+ ( Q " 3
,$ 1 ! "
5
= &4 . )
*) E :# D7:7BD ?<<E?CE?<
E S T
E S T
UE
. ) E D ) * R- B;J HFF
) ' P
= &7 . )
#E :# D7:7BD ?<<E?CE?<
#E S T % # *
E S T *
#E S T + % *
S T *
UE
. ) E D ) * R- B;J HFF
) ' P
??<V ;
? >* H* >' H' ? >* H* >' H'
= *; )
!
*) E :# D7:7BD ?<<E?CE?<
E S T * "E S T
S T * "E S T
7E
B
/ 7 03 ) 3 %
# **+ ( = @
$ $ :
: 1 ) ) " +
=$ 1 9 7 ! $
"B" ! ;@ " $
" # $ =$
" > ! J λ
,$ 3 3" 3 " J ,$ 3" 3
! ) ) N 9 9
$ " & J λ $ ,$ 3" 1
9 ( $C " > ( $C 1
5 1 = ,$
3" 3 ! = " E C '#*1 ( =
% ! :
@ " ( @ ) ) $ %
"
1 $ " 1 9
$ @ 1 ! @
,$ 3" " > 1
5 1 ,$ 3 3" 3 7 ! 1 9
$ " ,$ 3" 3
$ J 1 9 ( $C " ' @
,$ 3" 3 7 = ( $ 1
H >& *
H >& *
H >& *
= *& . .6
*) E " : >FEJ
E S T
E S T
E )
= ** . .6 #E " : >>E?
E S T
E S T
E )
#
! 1 9 9
$ : $ )
"
. $5 # >
& ( ! *+, & ( ( 3F
" # *2 3 ! "6 4 3" 5 $ : 8 $ &
! 9 " 4 3" B $ 8 , " 335 " 1
& $ ! ( ! ( F
9 *2 3" 5 4 3"355 $"8 $ *2 3 ! "
9 %
! 9 "
> 1 ! $
! $ @ 1 9
9 $ " '; 7!
! $ ! !
! " & % '; ( ! ) *+, & ( (
3F *2 3 " 4 3" 5 8 " # '; $
@ ( ! ) *+, & (1 ( 5F *2 3
" 4 " 6 8 " M ';1 !
$ 9 "
) *+, & ( 9
9 ! ( "
1 $ ! "
0 *3 $5 ? ! )
& % 7! ! 3 ; /- Q "
& ( Q " " E ( :! 9 1 % !
/-1 9 ( : ! $ 7 /
-1 : !
./-0" E 1 7 ! ! & ( & !
9 ( % ! 1
$ ! " > 1 !
$= 9 ! *+,"
> 1 '; % ! 7 ! ! & (1
! Q " " $ & ! 9
53F % 7 " # 7 !
& ( ! ( : 9 '; % /-1
:! 7 '; ' & ;1
! = 9 ! ( /-) *
-7 /- 7 ) / T( " 33B " # Q "
9 ( ! 7 ! 1 9 !
/-) * -" > 1 7 ! !1
! &
% $ & '; 7 & ( Q "5
'; 7! ! ./0 Q " $ 7 & & (
; Q " 5 " 9 & % $ % /-"
& = 1 '; ! 7 ! ! ) 9 &1 9
! 9 % " > 1 $
$ & *+,)& (1 '; 7
7 ! ! & ("
0 / + )
E ! = ( ! ) *+, & (
'; ! /- / /*
%$ ! ! " > 1 : *+,
& ( '; ! ! " 8
' & 3 ; 9 / /* " E ! !
3 ; ' & 9 ! ! $= 1
! ! 3 ;1 9 $ %
*+," # $ 6 B 9 $ 9 ';
$ 9 ' &1 9
$ " + 9 ! $= : !
' & 3 ; ( % % % *+,
';1 $ ! F & (1 9
( ! ) " # ( ! ' & $
'; 9 '; % /- C 1
% ( : 9 % $ 7 * -"
E 1 $ 9 ' & ; ! 7 !
% ! & (1 9 ' & 3 ;
$ ' & ! ( : 9 : ! ' &
% O (
+& : ! % 7 1
$ ( * - C % 9
' & C " # $ 3 9
3 <;1 9 9 ! +
1 ! $ '; % 1
9 $ 7 '; ' &
! + " > 9 %
$ ! *+, & (1 $ ! " E 1
! ( ) ';1
' & Q B " 9 %
C '; % "
Q 1 '; ( $
( ) *+, * - : " # *2 3 ';) %
*+, *2 3 "6 ± 3"36 8 $ 9 ';) % $
*2 3 B" ± " 8 1 $ & *+,)
& (" > 1 *2 3 *+,)* % $ %
9 *2 3 *+,)& (1 9 ( ! * - %
$ ( & (" 9 '; (
$ 7 * - @ 1 9 ( $ ) " #
O $
* - $ ! * - ( : 1 9 % (
$ 7 * - 7 ! !
5
9 ( ! *+, * - *2 3 " 4 3" 8 1 ( $
! /- , 335 "
0 0 $5 3 3 %
( : : $
! ) ) *+, & ( * - " (
6 F % 1 !
G )I := : " 3 3 " @
( ! 33 8S 1 )
! !
! I " 336 " E !
( 7 # ) 1 ! $ 7 ! /- 3 ;
% * 3 3 <;1 $ = 9 ! - )
E " 336 " 1 )
) ) *+, & ( * - 1
$ +´ ) / " 9
! 9 ) ) % 33 <; / 1 9
* 3 7 ! % " # +´ *+, & (
* - 9 ( ! ! & ( ( ! $ 7
* -"
0 ' $ ! 5 8!9
& $ ! , " 335 1
& % % $ ! $
! ( ) & (1 9 !
*+, * - , " 335 "
**+ & % % $ !
$ " 1 1 7 !
! N 1
: $ % 1 9
$ " $ 9 $ % $
" # ( %
" $ 1 ( 1
% " # $ %
1 9
7 C 1 ( $ 7 * - I( : ? : 1 33 "
, ! 1 $
=$ @ 1 1
,$ 31 3 !
1 C =$ % = $
@ "
& = 1 ( = %
! : @ " # @
) ) $ % 1
9 ! ( " E
( 9 7 7
./0 % 1 9
$ $ 7 * -1
B
( % 7 ) ) 1 ! 9
! ) & ( * -" > 1
% $ '; 9
&1 9 ! '; %
! " # ) ) =
$% : **+ " E
( 7 7 G I : : 3 3 9 6 " F ) )
"
E ( $% 9 *( *
7 ( @ = !
9 @ b) $ 3 5F 1
% $ ! , 33 " E C ( 1
@ : 9 % !
$ !
" 7 9 %
$ % ( % 5 F α)
1 9 :! = 7 (
% , 33 " #
% $ 1 ( % I " ; "
* @ 1 % $ !
9 1 7 1 "
# $ =$
"
% $ ! 7
: " E 1
= ! ! $ !
9 = % % = 7
5
0 '
!
!
$ 9 $ @ & ("
> ( ! ) ! & ( *2 3
! "
# ! ( 7
53F @
& (1 9
! ! 1 9
! = 7 "
P # $ & ( )
$ 7 * -1 9 *2 3 *+, "
P $ '; : 7 9
/-1 ! +& + "
$ '; % ) )
1 @ ( ! ) *+,
& (1 ( ! ) *+, * -"
( 7 ! $ 9 ( 1
"
& ! ( ! )
$ 7 * -1 ( ! 1
$ ! %
% /- ! $ 9 %
5 ) & N G"1 E( 1 E"1 , *"1 ' 1 ;"1 , 1 ;"1 ; 1 " > !
$ 1 $ 1 = " > !
! %$ *2*>H& " Q * "
& Q " JM#>" 2 E M H % , +H2D BBB"
* ">,D" O ( 88VVV" " " J ! 3 83B8 3 3
) & 1 ;"1 M K :1 ;"1 + S1 ?"1 H 1 &"1 , 1 X"1 E 1 >" + K
* ! " " & Q "
H O ) 31 33 "
) & 1 ;"1 M K :1 ;"1 + S1 ?"1 H 1 &"1 E 1 >"1, 1 X" *
1 ! $% O
" JMM )*DM2* '" VVV " " " 8 8 33 86) 8 )3 " $ 83B8 3 3
) & 1 ;"1 M K :1 ;"1 H 1 &"1 E 1 &"1 E 1 >"
I " ; " " # & X $
>( " O ) 1 335"
) & 1 Q"1 T 1 >"1 > 1&"1 T 1X"1 H 1I" H &
( I " ; "O $ " > 7
X! 2 M *! " 33B" O
VVV"$ $" " " 8 8 33B8 8 8& " $ " 83B8 3 3
) & 1 X"1 + ( 1 *" > ! & "
# $ # & #"D"#"&" 1 H & 1 = " 66)B 1 33
) & 7 1 *"1G 1 *" & $ " , >
Q M & O 6 )B 1 3 3"
) H 1 &"1 , 1 +"1 + # # 1 >"1 H 1 * " cE C
d H % # * > & = 6 O
5) 1 33B"
) H : 1 "1 E ( : *( 1 *"1 Q 1 &" * ! $
. % ' 7 e *
2 Q = " *( = 1 *( " 33B" H #
* > f 6 O 3) 1 33B" O VVV" "
C " 583B8 3 3"
) H : 1 "1 ; 1 &>1 Q 1 &&" 2 ) $
$ & ,( : ( " M "
> " * B O 65)B31 33B"
) H 1 #"1 # 1 *"1 ' !1X"1 E 1 >"1 + 1 M"1 I : :1 &"1 ; S 1#"
+ ( $ $ $ I "
) * 1 *"I" H % " ; & + 1 H = 33 " O ( 88VVV" " " " J " 3 83B8 3"
) * Q"1 '" I 1 I" I W &"&" 2:: " % E ) H % ? " 33 "
) * &" 1 , ;"2"1 ' &1 > &" *
> ; # > H & 1 & 1 +
33 )M 33 " # " & " X" >( " O B ) 1 335"
) * 1 &" "1 , 1 ;"2"1 ; 1 I"M"1 * $ 1 >"1 @1 ;"I" *
$$ $ ; " (
" X $ ( ( 3 1 B3)B 1 33 "
) + E 1 +">1 I 1 &"1 & 1 #"1 * 1 Q"1 M 1 g"1 H 1 X"1 H 1 X"
E ( $ $
" T" M $ (1 O 636)6 1 336"
) + 1 ;*"1 # 1 "1 + 1 *"1 E 1 &&"1 Q 1 I;"1 E 1 &"
& $ $ H : ( ( " X
( ( " O B5) 3 1 335"
))+ 1 ;*1 Q 1 I;"1 E 1 &"1 , ( 1 #1 + *" & )*=
$ H : " X ( ( " B5 O 3 ) 1 33 "
) $ 1 Q"1 $ 1 Q"1 H 1 Q"1 M 1 "Q"1 M 1 ,"1 * ( )Q ( 1 "1
* : 1 &";" $ ( $ H :
) " X $ >( >( E 61 )
61 33 "
) Q 1 I"1 ; :: 1 "1 , 1 X"1 , 1 &" & , C
& " = O 3) 1 B "
) I % 1 *"*"1 ' 1#"1 & 1 M"1 * 1 E"1 + ( :S 1 *"1 + 1 "H"1
$ $ $ E # 1 & " >( (
, " 5 B O 35 ) 1 33 "
) I( : / ? : >" 2 ( $ ( $
9 1 1 " >( 53O ) 1 33 "
) I ,;1 H ;&1 T X&" , $ $
V & & " > , " 1 3 3" ( $
) I X*,1 E D Q1 H ,H1 E +>1 & ,M1 & 7 +&;"
& $ ) ) O $ V ( (
" H " >( " H O 3 5) 3 31 336"
) I : : E1 Eh 1 , S Q1 *1 ; ( #"1 ; 1 & *"
*( $$ $0 $ 9 " , H
5
) I 1 ;">"BC< 3 1 " > 1 * " BB "
) I @ : I @ R21 ; ; % : ;1 ' M1 ' , % : &" !
@ $ @ $ ! $ 9
7 1 #" , * Q O 3) 1 333"
) ? )2 1 ;*"1 2 1 +&"1 ; 1 R"1 / 1 ;#"1 ? ( 1 D"1
* : 1 ;"1 Q 1 &"1 & 1 M"1 ' 1 X"1 + # 1 '*"1 ; 1 E" '(
) S $$ $ & ( I " ; S
" >( )5 O 56)6 1 336"
) ? )2 1 ;*"1 2 1 +&"1 ; 1 R"1 / 1 ;#"1 ? ( 1 D"1
* : 1 ;"1 ' 1 X"1 Q = :1 E"1 G V S 1 *"1 ; 1 ;"1 + # 1 '*"1
; 1 E" '( ) S $$ $ & ( I " ; S
" X ( ( " 3 O 33)61 33 "
) ? 1 *"&"1 # ( ( 1 ?"+"1 + E 1 *"H"1 + V1'"E"1 ' 1 E"H"
$ ( $ $$ $ $ $ & " > S X H
E " O 6 ) 1 33B"
) 2:9 1 X" ? O
% " 2EHM B65) ) 6)B 2 M %
& " ! )E 21 1 = " 51 BB6"
) / S 1 ?"1 D: S 1 ?"1 ? 1 ;"1 ; )E 1 ;"1 & 1 /)2"1 ? 1 /)2"1 ; 1 E"1
M S : V 1 ?"1 G 1 /)X"1 E 1 /"1 BB5" * 1 1 $
( " >( , V B 1 5) 3"
) / 1 *"1 & 1 E"1 33 " & $$ $ #" "
D" E (V : H ( " X $ ( ( 6 1
5 ) 5B"
) / S 1 '">"1 B6 " '( $ $ "
>( , V 1 ) "
) # ( 1 ?"H"1 X"&" ? 1 ;"X" H 1 #"E" X S V S 1 >" ? 1 W /" ; ( " " " # $ # & #"D"#"&" 1 H & " BB6"
) # N # E" B53" $ ! "
+ $ >( 1 J $ (1 (1 "
) #! :1 &"I"1 '( 1 ;"I"1 T 1 X"&"1 , 1 ?"," 33 " &
Q Q H "
; ( % 6 O )B
) ; 1 ?" # ! (% = > ! " 33 " 2M'& ; X = :)
) ; : * 1 ," > : * " Q "; # " ' = 1 " B1 B6 "
) ; : 1 &" - " " D ! =$ 1 H & "
BB5"
) ; 1 R"1 X 1 X"1 E :1 ;"1 ' 1 >"1 X 1 >"1 & 1 X" ' $
" * " * " ' " 6O 6 ) B6N B6 "
) ; 1 E"1 +% :) @ :1 I"1 ; = 1 ,"1 # 1 ?"1 ` ! 1 E"1 * ); 1 '"1
? )2 1 ;*" & ) S $$ $ ( (
$ & ( " >( H ( H ( " 6 O 5 )61 33 "
) M 1 2:: &&1 H Q1 * Q1 * ,1 > &1 E #1 ; M"
, $$ $ : ( " M E ( & (
>( O 65)B 1 33 "
) M E 1 +" i EHJ"
H J " 336" O VVV"$ " " 8 8
83B8 3 3"
) M E 1 +" i #
)& % 1 ` >( ( I >$ $$
O 1 i i "
( 88O " " 8?';#j 8$ ( 8 8 8 3 "( " J ! O
368 8 3 3"
) > 1 ;" "1 E V 1 /"1 * 1 "1 E= ( : ; 1 +"1 1 &" # O
1 ( ( O V" X $ ( ( 5 1 3 ) 1
33 "
) > 1 X" W I :1 ?" > H 9 M & " H"2","Q" O
VVV" " " J " , O 358368 3
) , 1 ;21 E 1 ;"1 * $ 1 >"1 @ ;I1 * & " '( $$ $
& 1 > E ( & !
" X ( ( " O 6) 1 335"
) , ;"2"1 E ;"1 > &"1 * &" " E $$ $
& 1 > " # & X $ >( B O 5B)
6 1 3 3"
) , 1 I"1 H 1 *"1 + # # 1 >1 , 1 &"1 H 1&"
$ / ' * " O VVV" $ " " 8 $ 33 8
( 83B jH &#j," 1 C O368 8 3 3
) , 1 I"1 ' 1 &"1 & M $$1 &"1 , 1&"1 H 1 *"H 1
&" K = $ / ) %$ I W ?"
55 ) , 1 &"1#"1 # : 1 +"1 + 1 "1 , 1 &" 2
9 $ % " M " 2g
E & g22 E # Q = " E !
Q Q 9 % " H " # " * > "; "& O 1
335" O VVV" " 8 7 8"""8H#&*>;&) )M )Q " $" J " 383B8 3 3 ) , 1 X"1 * 1 "1 ,@1 ;"E"1 ? 1 *"1 H 1 ,"1 & 1 *"1 >
7 = " > ! > ! =
" ! ? (( " Q *
& " & 1 33 " JM#>"
) E ?"1 I( &"1 ; S ( ( /"" , $$ $ $ #
" Q 5 O \ 1 33 "
) E 1 "1 J :1 ;"1 I : :1 &"1 ; : 1 R"1 , 1 I"1 + :)* 1 E"1 , 1
*" $ - " *(
( : " > )( ( 33B" * & 33B" O
VVV" " " J " , O 358368 3 ) E (V (1 /"?" J : f
' k 1 ,E" J "Q " , I E " 335" O
VVV" " $ " 8 " 83B8 3 3
) E 1 &"1 * 1 &"1 H :) 1 E"1 * 1 &"1 +% :1 #"1 I 1 "1 I 1 M"1 # : 1 *"1 ; 1 ;"1 ; @1 ;"1 ; 1 ;"1 M 1 X"1 > 1 "1 ' 7 1 *"1 G 1
>" Q & 1 % % " = O
) 1 33 "
) E( Q1 &( &1 /( S( ," & ( ( $
$ ) $ ( ) " X" ( ( " O ) 1
BBB"
) E( 1 M" ; $ @ "
Q % $ @ " *R' + * %
" H =1 * " 333 = )
) E 1 "1 + 1 "1 ; 1 >" * $ $ $ V
"> ; O 66)B31 B6 "
) E 1 E" W &" H " $ " & 1
H & " B56"
) H S1 Q"I"1 B55" I ( $ ) " + )
" * $ " 2 O , 1 X";" " 1 / $
+ & 1 E ) 1 H 1 ? 1 M V R S" B) "
) G 1 ? H 1 E" BB > " & ( ( ( "
) G V S 1 *"1 ; 1 ;" * $ V
$ ) $ " >( 3 3 B ( $
) G I := :1 X"D1 I :1 ;";1 ; 1 &">1 Q 1 &"&" H $
$ 1 ( E >
M : " " M > * O 3 ) 3 1 3 3"
) G?D"47D # $ " I " G?D1 BBB"
) T )> 1 "1 Q = :1 X"1 1 I"1 , >"1 * 1;&" >
$ ! $ !
( 9 " ' # " O6 )B31 33 "
) T :C1 I"1 + @1*"1 M 1," * : @ # (
I " ( "& E&2>&)E &
! > & = " 2g * M , M
= ; " *! g 2O " B )B 1 333"
) T ( >1 ? g1 G T1 ` T1 ? R1 # ?1 / R1 g G" + $$ $
( % $ ( $ ( ) " X
>( O ) 61 33B"
D $ O
) & 9 > H 9 M
= H2,Q 36 &," J "M " ,% 1 *! # " O
( O88 " " C 8358 3 3"
