Efecto del arsénico sobre el crecimiento y la actividad ascorbato peroxiodasa en rorippa nasturtium aquaticum (l ) hayek

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. IC. A. Y. “EFECTO DEL ARSÉNICO SOBRE EL CRECIMIENTO Y LA ACTIVIDAD ASCORBATO PEROXIODASA. IN FO. RM. ÁT. en Rorippa Nasturtium aquaticum (L.) Hayek.”. TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO DE. EM. AS. DE. BIÓLOGO. : Br. ANGELICA MERCEDES PAZ ARQUEROS. Asesora. : Dra. MERCEDES CHAMAN MEDINA. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. Autores. TRUJILLO-PERÚ 2014. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE. AC IÓ. N. TRUJILLO. UN IC. Dr. ORLANDO VELÁSQUEZ BENITES. ÁT. IC. A. Y. CO. M. RECTOR. RM. Dra. VILMA JULIA MÉNDEZ GIL. EM. AS. DE. IN FO. VICE-RECTOR ACADÉMICO. SI ST. Dra. FLOR MARLENE LUNA VICTORIA MORI. Dr. ALBERTO SANTIAGO UCEDA DUCLOS SECRETARIO GENERAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. VICE-RECTOR ADMINISTRATIVO. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. UN IC. Dr. JOSE MOSTACERO LEON. ÁT. IC. A. Y. CO. M. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. RM. Dr. WILLIAM ELMER ZELADA ESTRAVER. AS. DE. IN FO. SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. SI ST. EM. Dr. FREDDY PELÁEZ PELÁEZ. DIRECTOR DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE CIENCIAS. DI. RE. CC. IO. N. DE. BIOLÓGICAS. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AC IÓ. N. Señores miembros del jurado:. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el reglamento de Grados y. UN IC. Títulos de la Escuela Académico Profesional de Ciencias Biológicas, Facultad de. M. Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo; someto a vuestra. CO. consideración y criterio la presente tesis, titulado: “Efecto del arsénico sobre el. A. Y. crecimiento y la actividad ascorbato peroxiodasa en Rorippa Nasturtium aquaticum. RM. ÁT. IC. (L.) Hayek.”, con el propósito de obtener el título de profesional de Biólogo.. IN FO. Esperando que vuestro criterio sea de comprensión por algunos errores y omisiones en. AS. DE. su elaboración, me someto a su dictamen.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. Trujillo, 19 Febrero 2014. _______________________________________ Angelica Mercedes Paz Arqueros. BACHILLER EN CIENCIAS BIOLÓGICAS. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M. Dr. Elmer Alvitez. UN IC. _______________________________. AC IÓ. N. MIEMBROS DEL JURADO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. PRESIDENTE. IN FO. _______________________________ Dr. Roger Veneros. SI ST. EM. AS. DE. SECRETARIO. ______________________________. VOCAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. Dra. Mercedes Chaman Medina. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR. AC IÓ. N. El que suscribe, el profesor asesor de la presente tesis, declara que ha sido ejecutada de. conformidad con su correspondiente proyecto y con las orientaciones brindadas a la. M. UN IC. tesista.. CO. Respecto al informe; ha sido revisado, acogiendo las observaciones y sugerencias. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. pertinentes.. DE. ____________________________________________. ASESORA. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. Dra. Mercedes Chaman Medina. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE LA APROBACIÓN. AC IÓ. N. Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que la. presente tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo. CO. M. UN IC. aprobado por UNANIMIDAD.. DE. IN FO. RM. ÁT. PRESIDENTE. IC. Dr. Elmer Alvitez. A. Y. _______________________________. AS. _______________________________. SECRETARIA. ______________________________ Dra. Mercedes Chaman Medina VOCAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. Dr. Roger Veneros. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. N. A Dios, que me da la oportunidad. AC IÓ. de seguir aprendiendo y creciendo. sosteniéndome. en. UN IC. como profesional y como persona los. momentos. M. difíciles y ayudándome a sobresalir. IC. A. Y. CO. ante las dificultades.. Aspiros,. por. su. apoyo. IN FO. Paz. RM. Arqueros Gonzales y el Sr. Pedro. ÁT. A mis padres, la Sra. Marilú. incondicional, sus consejos, sus. DE. buenos ánimos y por sus grandes. AS. esfuerzos para lograr lo mejor de. A todos mis familiares quienes siempre. muestran. sus. buenos. ánimos y apoyo en todo momento de. mi. formación. académica. y. personal.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. mí.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTOS. A Dios por ser mi fortaleza en los momentos más difíciles de mi vida, dándome el. AC IÓ. N. apoyo y las oportunidades necesarias para seguir adelante.. UN IC. A mis padres, por acompañarme en cada uno de mis pasos, brindándome siempre sus. CO. M. consejos y comprensión en todas mis decisiones y la motivación para seguir adelante.. A. Y. A la Universidad Nacional de Trujillo por acogerme en sus aulas durante todos mis. ÁT. IC. años de estudio, a los profesores por compartir conocimientos, experiencias y consejos. IN FO. RM. para mi formación profesional.. A mi asesora, la Dra. Mercedes Chaman por sus enseñanzas y consejos académicos y. AS. DE. por su disposición en el asesoramiento del presente trabajo de tesis.. SI ST. EM. Al Personal Técnico de la UNT, Karina y Mora, al Técnico del Carlos del laboratorio. DE. de Química de la UPAO quien me apoyó con el equipo de espectrofotometría.. IO. N. A mis amigos con los que compartí los cinco años de la universidad. A Ana María,. CC. Linda Vásquez, Carlos Quijano, Cynthia Ramos, Ana Valderrama, por su apoyo en el. DI. RE. proceso de la elaboración de esta tesis.. A la empresa Best Berries por su interés y accesibilidad a los permisos con los cuales pude terminar mi tesis y a la vez cumplir con mi trabajo.. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ii. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. iii. AC IÓ. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. PRESENTACIÓN. iv. UN IC. MIEMBROS DEL JURADO. M. DEL ASESOR. CO. DE LA APROBACIÓN. A. Y. DEDICATORIA. ÁT. IC. AGRADECIMIENTO. RM. INDICE. IN FO. RESUMEN ABSTRACT. DE. vi vii viii ix x xi xii 1 6. III.. RESULTADOS. 9. IV.. DISCUSIÓN. 21. CONCLUSIONES. 25 26. V.. EM. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ANEXOS. 33. DI. RE. CC. VII.. IO. N. VI.. AS. MATERIAL Y MÉTODOS. SI ST. II.. INTRODUCCIÓN. v. DE. I.. N. ÍNDICE. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. El arsénico (As) es un elemento ubicuo en la naturaleza y considerado generalmente. AC IÓ. N. toxico; su efecto en las plantas puede ser evaluado mediante parámetros de crecimiento y actividades metabólicas. El presente trabajo tuvo como objetivo determinar el efecto. UN IC. del As en el crecimiento y actividad Ascorbato Peroxidasa en Rorippa nasturtium-. M. aquaticum. Plantas obtenidas por propagación vegetativa fueron tratadas con 0, 1, 3 y 5. CO. mg/L As y cultivadas durante 7, 14 y 28 días en condiciones de invernadero. Se disminuyen. A. Y. encontró que la longitud y peso seco de raíces, tallos y hojas. ÁT. IC. significativamente ante los distintos tratamientos y tiempos de exposición con As. La. RM. actividad APX en raíces y hojas aumentó significativamente a medida que se. IN FO. incrementó la concentración de As a los 7 días de tratamiento, para los siguientes días la actividad APX no mostró variación. Los resultados indican que el aumento de la. DE. actividad APX se produciría como mecanismo de defensa de Rorippa nasturtium-. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. aquaticum por la presencia de As a ciertas concentraciones y periodo de tiempo.. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT. AC IÓ. N. Arsenic (As) is a ubiquitous element in nature and generally considered toxic; its effect. on plants can be assessed by growth parameters and metabolic activities. This study. UN IC. aimed to determine the effect of As on growth and activity in ascorbate peroxidase. M. Rorippa nasturtium-aquaticum. Plants obtained by vegetative propagation were treated. CO. with 0, 1, 3 and 5 mg / L As and cultured for 7, 14 and 28 days under greenhouse. A. Y. conditions. It was found that the length and dry weight of roots, stems and leaves. ÁT. IC. decreased significantly with the various treatments and exposure times with Ace The. RM. APX activity in roots and leaves increased significantly as the concentration of As was. IN FO. increased to 7 days treatment for the following days the APX activity showed no variation. The results indicate that the increase in APX activity would occur as a. DE. defense mechanism of Rorippa nasturtium-aquaticum As for the presence of certain and. time.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. concentrations. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. I. INTRODUCCION. El arsénico (As) es un elemento ampliamente distribuido en el ambiente; el aire. AC IÓ. N. contiene aproximadamente 0.01 ug/m3 , detectándose concentraciones de hasta de 1.6. ug/m3 cuando hay contaminación; los océanos presentan valores próximos a 0.001-. UN IC. 0.008 ug/l, en los ríos la concentración es muy variable desde 0.01 a 1 ug/l pudiendo. M. llegar a 12.6 ug/l en zonas contaminadas; en los suelos el As está presente en un. CO. promedio de 2mg/kg aumentando notablemente en regiones contaminadas, donde puede. A. Y. llegar hasta 40mg/kg (Litter y col., 2009). Si bien una gran cantidad de As en el. ÁT. IC. ambiente proviene de fuentes naturales (meteorización, actividad biológica, emisiones. RM. volcánicas), también existe una importante contribución a partir de actividades. IN FO. antropogénicas, entre ellas, procesos industriales (curtiembres, colorantes, conservantes de madera, etc.), la agricultura (uso de pesticidas, herbicidas, etc.) y la minería (Castro. AS. DE. de Esparza, 2010).. SI ST. EM. La presencia de altos niveles de arsénico en el agua es un tema de preocupación ambiental prioritario, porque limita el uso del recurso para el consumo humano y. DE. regadío, afecta la calidad de vida de las personas y el desarrollo sostenible de la. IO. N. agricultura. Las poblaciones rurales son las más afectadas al no tener acceso a redes de. CC. agua potable y porque la instalación de grandes plantas de tratamiento serían muy. RE. costosas, ante esta preocupación actualmente se están desarrollando metodologías. DI. eficientes y económicas para la remoción de As en el agua (Smedley y col., 2002).. El contenido de arsénico en los cultivos dependerá de su concentración en el sustrato, sus características químicas, la especie vegetal, y su tiempo de exposición (Anke,. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2001).. Cuando se acumula por periodos cortos de tiempo no. disminuyen el. crecimiento de los cultivos; sin embargo, una contaminación continua por un tiempo extendido facilita su acumulación afectando el crecimiento de las plantas. (Lepp, 1981).. AC IÓ. N. El As no es esencial para el crecimiento y rendimiento de las plantas; no obstante, éstas pueden acumularlo en sus tejidos, por ejemplo, dentro de la familia de las umbelíferas,. UN IC. se ha reportado que Daucus carota L. “zanahoria”, acumula compuestos de As en su etapa de elongación celular que conlleva a la extensión del diámetro de raíz. CO. M. (Yathavakilla y col., 2008), también se ha reportado que Raphanus sativus L. “rábano”. Y. presenta compuestos azufrados con As en la raíz, tallo y hojas (Smith y col., 2008).. IC. A. Otros trabajos revelan que bajas concentraciones de arsénico estimulan el crecimiento. RM. ÁT. de guisantes, trigo y patatas, (Jacobs y col., 1970). Sin embargo, es conocido que altas. IN FO. concentraciones de arsénico interfieren con los procesos metabólicos de las plantas por la toxicidad que produce (Marin y col, 1993), afectando el crecimiento y el desarrollo de. (Carbonell y col., 1995; Kang y col., 1996), la. AS. crecimiento de brotes y frutos. DE. las plantas (Abedin y col., 2002), la acumulación de biomasa (Garg y Singla, 2011), el. EM. germinación de semillas y en otros casos pueden conducir a la muerte (Baker y col,. SI ST. 1976) al producir degradación de la pared y membrana celular de los tejidos (Kabala y. DE. col., 2008).. N. Existen varias especies que tienen la capacidad de crecer en medios contaminados por. CC. IO. As, se puede mencionar a Prosopis leavigata y Acacia farnesiana, encontradas en. RE. suelos ricos con As en Zimapán, México (Armienta y col., 2008), también a especies de. DI. gramíneas del género Agrostis (Porter y Peterson, 1975, De Koe, 1994, García y col., 1996) y algunos helechos como Pteris vittata L. que crecen en suelos con As contaminados por industrias y actividad minera (Mrittunjai y col., 2005).. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Rorippa nasturtium-aquaticum, “berro”, hierba perenne, rastrera o flotante, tiene tallos carnosos y ramificados con frecuencia provistos de raíces en los nudos, por lo que puede formar densas colonias; habita en medios acuáticos, principalmente aguas. AC IÓ. N. tranquilas como zanjas o estanques, también ha sido identificada en ríos con As en Tlaxala, México (Guevara, 2005); y en la Zona Volcánica de Taupo en Nueva Zelanda. UN IC. (Robinson y col. 2006), por lo tanto es una especie que está sujeta a la contaminación. M. química y microbiológica del agua en la que crece pudiendo presentarse como un riesgo. Y. CO. en la salud al ser usado en la alimentación (Edmonds, 2001).. IC. A. Diversos trabajos demuestran que el crecimiento de las plantas varía de acuerdo a la. RM. ÁT. especie, la concentración, y tiempo de exposición a los metales, así, en Nasturtium. IN FO. officinale sometida a 1, 3, 5, 10, y 50 mM de As durante 7 días, mostró incremento en su crecimiento a la menor concentración de As, mientras que las concentraciones más. DE. altas disminuyeron su crecimiento. (Ozturk y col, 2010). En Rorippa globosa, expuesta. AS. As y Cd, se observó que la altura de las plantas y el peso seco de los brotes fueron de. EM. hasta 35,9 cm y 2,2 g / maceta expuestas a 10 y 50 mg/kg de As y Cd respectivamente. SI ST. (Xue, 2007). En otra investigación se encontró que Nasturtium oficinale expuesta a Ni. DE. durante 1, 3, 5 y 7 días, muestra aumento de su biomasa a 1 mg / L y disminuye a 25. CC. IO. N. mg/L tanto en raíces como hojas, para el último día de exposición (Duman y col., 2009).. RE. La capacidad de las plantas para crecer en medios contaminados por metales, involucra. DI. mecanismos de defensa que se producen dentro de ellas (Baker y col., 1981), entre estos mecanismos tenemos la exclusión, la acumulación (Zenk, 1996), y la defensa oxidativa, esta última la realizan utilizando antioxidantes de bajo peso molecular (glutatión, ascorbato, carotenoides etc) y antioxidantes enzimáticos (superóxido dismutasa,. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. glutatión reductasa, catalasa, ascorbato peroxidasa), (Briat y Lebrun, 1999). Estos antioxidantes sirven para prevenir o revertir los efectos del estrés oxidativo producido por metales pesados (Surekha. 2012).. AC IÓ. N. La ascorbato peroxidasa (APX) es un enzima que forma parte del sistema antioxidante de las plantas, e interviene en el control de las concentraciones de H2O2 dentro de las. UN IC. células; para ello, la APX cataliza la reducción del H2O2 oxidando una molécula de. M. ascorbato, el cual actúa como dador de electrones. La APX pertenece a una superfamilia. CO. de peroxidasas de la clase I y presenta varias isoformas con un sitio activo muy. Y. conservado que varían entre sí por el peso molecular, pH óptimo, estabilidad,. IC. A. especificidad por el sustrato, localización y nivel de respuesta a diferentes condiciones. IN FO. RM. ÁT. de estrés (Dabrowska y col., 2007).. La actividad APX puede ser utilizada como biomarcador para el monitoreo y la. DE. predicción de los efectos de los metales pesados en las plantas (De la Rosa y col., 2005).. AS. Diversas investigaciones han reportado variación en la actividad APX en plantas. EM. expuestas a diferentes concentraciones de metales, así por ejemplo en Nasturtium. SI ST. officinale se encontró que la actividad APX fue elevada para las concentraciones más. DE. altas de Pb a las que fue sometida después de 14 días de exposición (Keser y col, 2009).. N. En otra investigación donde se estudió el efecto del Ni para la misma especie se observó. CC. IO. un aumento de la actividad APX en raíces y hojas cuando las plantas fueron sometidas a. RE. la concentración de Ni de 1 mg /L (Duman y col., 2009). Cuando se estudió el efecto. DI. del Cd y Ni en cultivos de células de Coffea arabica “café”, demostraron que la. actividad de APX aumentó en las concentraciones mínimas de esos metales, no detectándose actividad enzimática en las concentraciones mayores, estas evaluaciones fueron realizadas después de 24 horas (Gomes y col., 2006).. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Ante lo expuesto, se evidencia que las plantas son afectadas en su crecimiento cuando son expuestas a diferentes concentraciones de metales pesados y que estas reaccionan morfológica, fisiológica y químicamente, es por esto que en el presente trabajo se. AC IÓ. N. evaluará el efecto de diferentes concentraciones de As sobre el crecimiento y la. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. actividad APX en Rorippa Nasturtium-aquaticum a diferentes tiempos de exposición.. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II. MATERIALES Y METODOS 2.1. Material biológico Se utilizaron plantas de Rorippa Nasturtium-aquaticum obtenidas por propagación. AC IÓ. N. vegetativa, a partir de material recolectado de un cuerpo de agua del pueblo de. UN IC. Shiran, Distrito de Poroto, de la Provincia de Trujillo, departamento La Libertad.. Se obtuvieron esquejes homogéneos en tamaño y número de hojas, los cuales. CO. M. fueron colocados en contenedores con solución nutritiva y oxigenados con ayuda de. IC. A. Jardín botánico de la Universidad Nacional de Trujillo.. Y. aireadores para su enraizamiento. Los esquejes crecieron en el invernadero del. ÁT. Después de una semana los esquejes enraizados fueron seleccionados y colocados. IN FO. hidropónica “La Molina” al 50%.. RM. en recipientes individuales de 300 ml de capacidad conteniendo solución. DE. 2.2. Tratamiento de las plantas con Arsénico. AS. Se formaron aleatoriamente 4 grupos, cada grupo fue expuesto a las. EM. concentraciones de 0, 1, 3 y 5 mg/L de As, a partir de una solución patrón. SI ST. preparada con Trióxido de Arsénico, por un periodo de 7, 14, y 28 días. La unidad muestral estuvo constituida por una planta de Rorippa Nasturtium-aquaticum para. DI. RE. CC. IO. N. DE. cada concentración de As, considerando 4 repeticiones por tratamiento.. As. Especie.. 0,0 mg/l. 1,0 mg/l. 3.0mg/l. 5.0 mg/l. T1. T2. T3. T4. Rorippa Nastartium aquaticum. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.3. Medición del crecimiento 2.3.1 Longitud Se midió la longitud de raíz, tallo y hoja de Rorippa Nastartium- aquaticum,. AC IÓ. N. haciendo uso de una regla milimetrada. Las mediciones se hicieron después de los 7, 14, y 28 días de exposición a las diferentes concentraciones de. UN IC. arsénico (Anexo 3).. M. 2.3.2 Peso seco. CO. Después de finalizar el tiempo de exposición a las diferentes concentraciones. Y. de As, las partes correspondientes a raíz, tallo y hojas fueron separadas y. IC. A. colocadas en sobres de papel para ser deshidratadas dentro de una estufa a. RM. ÁT. 80°C hasta obtener un peso constante. Este dato se registró como peso seco. IN FO. (Anexo 4).. DE. 2.4. Cuantificación de la actividad Ascorbato peroxidasa (APX):. AS. La actividad APX se cuantificó mediante el método propuesto por Nakano y asada. EM. (1981). Se pesó 0.5 g de raíces, tallo y hojas por separado, los tejidos se trituraron. SI ST. con nitrógeno líquido en un mortero de porcelana, utilizando como buffer de. DE. extracción fosfato de sodio 0.1 M pH 7.0, 0.1 mM/L EDTA y 1% PVP. El. N. homogenizado se centrifugó a 10,000 g por 10 minutos. Se tomó 20 ul del. CC. IO. sobrenadante adicionando 1 mL de buffer fosfato 50 mM (pH 7.0), 5 μl de H2O2. RE. 30% y 40 μl de ácido ascórbico 10 mM. La actividad APX fue determinada. DI. midiendo la descomposición de ascorbato a 290 nm en el espectrofotómetro modelo Genesis 6 UV- VIS durante un lapso de 1 minuto. La actividad enzimática se calculó usando el coeficiente de extinción molar de 2.8 mM-1 cm-1.. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.5. Análisis estadístico Los datos obtenidos fueron procesados por el programa estadístico Statgraphics Plus 5.1 mediante Análisis estadístico de Varianza (ANOVA) y la prueba de Rango. AC IÓ. N. multiple de Duncan para la comparación de medias, con un nivel de significancia. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. de p< 0.05.. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. III. RESULTADOS 3.1. Efecto del Arsénico sobre el crecimiento. AC IÓ. N. Los resultados muestran que el crecimiento en Rorippa Nasturtium aquaticum. UN IC. presenta variaciones en relación a las concentraciones de As y a los tiempos de exposición. En la Tabla 1 se observa que la longitud de las raíces después de 7, 14. CO. M. y 28 días de estar expuestas a las concentraciones 1, 3 y 5 mg/l de As disminuyen. Y. en comparación con las plantas control, sin embargo al día 14 se observa que la. IC. A. longitud de los tallos y hojas fue mayor en la concentración de 1 mg/l y 3 mg/l de. ÁT. As respectivamente, manteniendo la misma longitud hasta el día 28 en el caso de. RM. las hojas. También se muestra de manera general que la longitud mayor en raíces y. IN FO. tallos fueron de 28.33 cm y 93.40 cm respectivamente que corresponden a las. DE. plantas control, y en hojas la longitud máxima fue de 12.87 cm correspondiente a la. EM. AS. concentración de 3mg/L de As al día 14 de exposición.. SI ST. Tabla 1. Longitud promedio de raíz, tallo y hojas de Rorippa nasturtium aquaticum después de 7, 14 y 28 días de exposición a diferentes concentraciones de. DE. arsénico.. CC. IO. N. Longitud (cm). Concentración. RAIZ. TALLO. HOJAS. 14 días. 28 días. 7 días. 14 días. 28 días. 7 días. 14 días. 28 días. 0. 17.47. 22.87. 28.33. 47.87. 50.80. 93.40. 9.07. 10.07. 11.10. 1. 10.20. 14.50. 18.40. 39.73. 62.27. 86.70. 9.13. 10.70. 12.47. 3. 9.10. 9.90. 11.13. 42.27. 50.93. 82.57. 7.47. 12.87. 12.87. 5. 8.20. 10.30. 10.30. 36.43. 40.53. 61.43. 5.90. 7.30. 8.70. RE. 7 días. DI. As mg/L. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En la Figura 1 se muestra que la disminución de la longitud de raíces es estadísticamente significativa entre las concentraciones 1, 3. y 5 mg/L de As en. comparación con el control después de 7, 14 y 28 días de exposición, no existiendo. AC IÓ. N. diferencias significativas entre las concentraciones de 1, 3 y 5 mg/L As. También para el día 28 se observa diferencias estadísticamente significativas entre las concentraciones. UN IC. de 1 y 3 mg/L As y 1 y 5 mg/L As. Al comparar los tiempos de exposición al As, se. M. muestra que hay un incremento significativo de longitud de raíces entre los días 7 y 28. CO. de las concentraciones de 0 mg/L As y 1mg/L As no encontrándose diferencias. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. significativas para las demás concentraciones.. IO. N. Figura 1. Longitud promedio de raíces de Rorippa nasturtium aquaticum expuestas a. CC. diferentes concentraciones de Arsénico después de 7, 14 y 28 días. Letras distintas. DI. RE. indican diferencias significativas, p<0.05 (Rango Múltiple de Duncan).. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En la Figura 2 se observa que la disminución de longitud de tallos es significativa entre las concentraciones de 0 y 5 mg/L As para el día 7 y 14 de exposición, no encontrándose diferencias significativas entre las concentraciones de 1, 3 y 5 mg/L As. AC IÓ. N. para el día 7. Sin embargo en el día 14 se observa un aumento significativo entre las concentraciones de 0 y 1 mg/L As, así mismo se encuentra una disminución. UN IC. significativa entre las concentraciones de 1 y 3 mg/L As, 1 y 5 mg/L As, y entre 3 y 5. M. mg/L As. En el día 28 se muestra disminución significativa en el crecimiento entre las. CO. concentraciones de 0 y 3 mg/L As, 0 y 5 mg/L As y entre 1 y 5 mg/L As. Al comparar. Y. los tiempos de exposición se observa diferencias significativas entre el día 7 y 28 para. IC. A. concentración de 0 mg/L As, entre los días 7, 14 y 28 para la concentración de 1 y 3. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. mg/L As, y entre los días 7 y 28 y 14 y 28 para la concentración de 5 mg/L As.. DI. Figura 2. Longitud promedio de tallos de Rorippa nasturtium aquaticum expuestas a diferentes concentraciones de Arsénico después de 7, 14 y 28 días. Letras distintas indican diferencias significativas, p<0.05 (Rango Múltiple de Duncan).. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En la Figura 3 se muestra que la disminución de la longitud en las hojas es significativa entre las concentraciones de 0 y 5 mg/L de As al día 7, 14 y 28 de exposición. Sin embargo también para el día 14 se observó un crecimiento significativo para la se observa. AC IÓ. N. concentración de 3 mg/L. Comparando los tiempos de exposición. diferencias significativas entre los días 7 y 28 para las concentraciones de 1 y 3 mg/L de. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. As, no encontrándose diferencias significativas entre los días de los otros tratamientos.. SI ST. Figura 3. Longitud promedio de hojas de Rorippa nasturtium aquaticum expuestas a diferentes concentraciones de Arsénico después de 7, 14 y 28 días. Letras distintas. DI. RE. CC. IO. N. DE. indican diferencias significativas, p<0.05 (Rango Múltiple de Duncan).. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En la Tabla 2 se observa que el peso seco de las raíces fue mayor a la concentración de 1mg/L As después del día 14 y 28. Así mismo los tallos presentaron un mayor peso seco a los días 7 y 28 después de estar expuestas a la concentración de 1mg/L As. En las. AC IÓ. N. hojas el mayor peso seco a los 14 días fue a la concentración de 5mg/L As y al día 7 y. UN IC. 28 el mayor peso seco fue a la concentración de 1mg/L As.. M. Tabla 2. Peso seco de raíz, tallo y hojas de Rorippa nasturtium aquaticum después de 7,. Y. Peso seco (gramos). CO. 14 y 28 días de exposición a diferentes concentraciones de As.. 7 días. 14 días 28 días. 7 días. 0.038. 0.051. 1. 0.029. 0.045. 0.086. 3. 0.015. 0.020. 0.045. 5. 0.010. 0.014. 0.391. A. HOJAS 7 días. 14 días. 28 días. 0.547. 0.831. 0.526. 0.664. 0.885. 0.464. 0.890. 0.580. 0.686. 1.398. 0.252. 0.289. 0.470. 0.331. 0.387. 0.648. 0.220. 0.379. 0.483. 0.276. 0.932. 0.987. 0.400. SI ST. EM. 0.022. 14 días 28 días. IN FO. 0.030. DE. 0. AS. mg/L. IC. ión As. TALLO. ÁT. RAIZ. RM. Concentrac. DE. En la figura 4 se muestra que no hay disminución significativa en el peso seco de raíces. IO. N. entre las diferentes concentraciones de As al día 7 de exposición. En el día 14 se. CC. muestra significancia en la concentración de 5 mg/L en comparación con 1 mg/L As.. DI. RE. Para el día 28 se observa un aumento significativo entre las concentraciones de 0 y 1 mg/L As y una disminución significativa ente 1 y 3 mg/L As y 1 y 5 mg/L As. Al comparar los tiempos de exposición se observa un incremento significativo entre los días 7 y 28 para la concentración de 1mg/L de As.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÁT. IC. Figura 4. Peso seco promedio de raices de Rorippa nasturtium aquaticum expuestas a. RM. diferentes concentraciones de Arsénico después de 7, 14 y 28 días. Letras distintas. IN FO. indican diferencias significativas, p<0.05 (Rango Múltiple de Duncan).. DE. En la figura 5 se observa una disminución significativa del peso seco en tallos entre las. AS. concentraciones de 0 y 3mg/L As y 0 y 5 mg/L As para el día 7. En el día 14 hay. SI ST. EM. disminución significativa para las concentraciones de 0 y 3 mg/L As, 0 y 5 mg/L y 1 y 3 mg/L As y un aumento significativo entre las concentraciones de 3 y 5 mg/L As. En el. DE. día 28 se observa una disminución significativa entre las concentraciones de 0 y 3 mg/L. IO. N. As, 0 y 5 mg/L As, 1 y 3 mg/L y 1 y 5 mg/L As y un aumento significativo entre las. CC. concentraciones de 0 y 1 mg/L As. Al comparar los tiempos de exposición se observa. RE. aumento significativo entre los días 7, 14 y 28 en las concentraciones de 0 y 5 mg/L As,. DI. también es significativo entre los días 7 y 28 para la concentración de 1 y 3 mg/L As.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A. Y. Figura 5. Peso seco promedio de tallos de Rorippa nasturtium aquaticum expuestas a. ÁT. IC. diferentes concentraciones de Arsénico después de 7, 14 y 28 días. Letras distintas. IN FO. RM. indican diferencias significativas, p<0.05 (Rango Múltiple de Duncan).. En la figura 6 se puede observar una disminución significativa del peso seco en hojas. DE. entre las concentraciones de 0 y 3mg/L As y 0 y 5 mg/L As para el día 7. En el día 14. EM. AS. hay diferencia significativa entre las concentraciones 0 y 3 mg/L As y 1 y 3mg/L As,. SI ST. también se observa un aumento significativo entre la concentración de 5mg/L As y las concentraciones de 0, 1 y 3 mg/L As. Para el día 28 se observa una disminución. DE. significativa entre las concentraciones de 0 y 3 mg/L As y 1 y 3 mg/L As así mismo se. IO. N. observa un aumento significativo entre las concentraciones de 0 y 1 mg/L As y entre 3 y. CC. 5 mg/L As. Al comparar los tiempos de exposición se observa aumento significativo. RE. entre los días 7 y 28 y 14 y 28 para la concentración de 0, 1 y 3 mg/L As, para la. DI. concnetracionn de 5mg/L As hay aumento significativo entre los día 7 y 14 y 7 y 28.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A. Y. Figura 6. Peso seco promedio de hojas de Rorippa nasturtium aquaticum expuestas a. ÁT. IC. diferentes concentraciones de Arsénico después de 7, 14 y 28 días. Letras distintas. IN FO. RM. indican diferencias significativas, p<0.05 (Rango Múltiple de Duncan).. 3.2. Efecto del As en la actividad ascorbato peroxidasa (AAPX). DE. Los resultados muestran que la AAPX presentó variaciones en relación a las. EM. AS. concentraciones de As y los tiempos de exposición. En la tabla 3, se observa que la. SI ST. AAPX en las raíces después del día 7 y 28 fue mayor en la concentración de 3mg/L en comparación con las plantas control, también se observa que en el día 14 las. DE. raíces tuvieron mayor AAPX. En los tallos la AAPX en el día 14 fue mayor a la. IO. N. concentración de 5mg/L. La AAPX en las hojas para el día 7 fue mayor en la. CC. concentración de 5mg/L. En general la AAPX tanto para raíz, tallo y hojas fue mayor. DI. RE. en el día 7 en comparación con los días 14 y 28.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 3. Actividad Ascorbato Peroxidasa (AAPX) promedio de raíz, tallo y hojas de Rorippa nasturtium aquaticum después de 7, 14 y 28 de exposición a diferentes concentraciones de As.. TALLO. HOJAS. AC IÓ. RAIZ 14 días. 28 días. 7 días. 14 días. 28 días. 7 días. 14 días. 0. 260.86. 444.20. 214.19. 513.84. 370.77. 318.60. 423.30. 490.15. 288.55. 1. 370.63. 437.25. 278.45. 487.04. 290.80. 273.70. 468.04. 247.05. 251.20. 3. 502.22. 413.60. 310.92. 412.62. 294.95. 288.45. 559.25. 304.95. 278.60. 5. 317.92. 310.10. 210.60. 476.34. 381.30. 308.70. 735.78. 362.85. 369.20. 28 días. IC. A. Y. CO. UN IC. 7 días. M. Concentr ación As mg/L. N. AAPX (umol ascorbato oxidado/minuto). RM. ÁT. En la figura 6 se observa aumento significativo en la actividad APX para el día 7 de. IN FO. exposición entre las concentraciones de 0 y 1 mg/L As, 0 y 3 mg/L As y entre 1 y 3 mg/L As así mismo se observa una disminución significativa entre las concentraciones. DE. de 3 y 5 mg/L As. En el día 14 se observa diferencia significativa en la concentración de. AS. 5 mg/L de As. Para el día 28 se observa una disminución significativa entre las. EM. concentraciones de 3 y 5 mg/L As. Al comparar los tiempos de exposición se observa. SI ST. un aumento significativo entre el día 7 y 14 para la concentración de 0 mg/L As, para la. DE. concentración de 1 mg/L se observa diferencias significativas entre los días 7 y 14 y una. N. disminución significativa para el día 28. En la concentración de 3mg/L As se observa. CC. IO. una disminución significativa entre el día 7, 14 y 28, y para la concentración de 5 mg/L. DI. RE. hay diferencia significativa para el día 28.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A. Y. Figura 6. Actividad Ascorbato peroxidasa promedio de raíces de Rorippa nasturtium. ÁT. IC. aquaticum expuestas a diferentes concentraciones de Arsénico después de 7, 14 y 28. RM. días Letras distintas indican diferencias significativas, p<0.05 (Rango Múltiple de. IN FO. Duncan).. DE. En la figura 7 se observa una disminución significativa para la concentración de 3mg/L. EM. AS. As en el día 7 de exposición. Para el día 14 se muestra aumento significativo entre la. SI ST. concentración de 1 y 5mg/L As y entre 3 y 5mg/L As. Para el día 28 no existen. DI. RE. CC. IO. N. DE. diferencias significativas en las concentraciones de 0, 1, 3 y 5 mg/L As.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A. Y. Figura 7. Actividad Ascorbato peroxidasa promedio de tallos de Rorippa nasturtium. ÁT. IC. aquaticum expuestas a diferentes concentraciones de Arsénico después de 7, 14 y 28. RM. días. Letras distintas indican diferencias significativas, p<0.05 (Rango Múltiple de. IN FO. Duncan).. DE. En la figura 8 se observa un aumento significativo de la actividad APX para las. EM. AS. concentraciones de 3 y 5 mg/L As en comparación a 0 y 1 mg/L As en el día 7 de. SI ST. exposición. Para el día 14 se muestra una disminución significativa entre las concentraciones de 1, 3 y 5 mg/L de As en comparación con 0 mg/L As, y un aumento. DE. significativo entre las concentraciones de 3 y 5mg/L en comparación a la concentración. DI. RE. CC. IO. N. de 1 mg/L As. Para el día 28 no se encuentra un aumento significativo.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC. A. Figura 8. Actividad Ascorbato peroxidasa promedio de hojas de Rorippa nasturtium. ÁT. aquaticum expuestas a diferentes concentraciones de Arsénico después de 7, 14 y 28. RM. días. Letras distintas indican diferencias significativas, p<0.05 (Rango Múltiple de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. Duncan).. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IV. DISCUSIÓN. Los metales pesados al ingresar en las plantas pueden alterar diversos procesos. AC IÓ. N. metabólicos trayendo como consecuencia variadas respuestas biológicas a nivel bioquímico, celular y fisiológico manifestándose en el crecimiento y desarrollo de las. M. UN IC. plantas (Ivanov y col., 2003).. CO. Los resultados obtenidos, muestran que la longitud de raíces de Rorippa nasturtium-. A. Y. aquaticum disminuye significativamente después de ser tratadas con 1, 3 y 5 mg/L de. ÁT. IC. As durante 7, 14 y 28 días respecto a las plantas control. Esta tendencia también ha sido. RM. observada en raíces de “maíz” y Lycopersicum esculentum cultivadas con 28 mg/Kg de. IN FO. As (Ruiz y col., 2011) y 10 ppm de As (Alférez y col, 1998) respectivamente. Los tallos y hojas de nuestro trabajo disminuyeron su longitud al ser tratadas con 5 mg/L de As y. DE. el peso seco con 3 y 5 mg/L de As. Estos resultados coinciden con investigaciones. AS. realizadas en tallos y hojas de Vicia faba expuestas a 13 mg/kg de As (Prieto y col.,. EM. 2007), en tallos de diferentes especies de Triticum sativum sometidas a 50 y 100 mg/Kg. SI ST. de As (Zhang y col., 2009), y en hojas de Nasturtium officinale tratadas con 50 μM de. IO. N. DE. As (Ozturk, 2010).. CC. La disminución de la longitud de Rorippa nasturtium-aquaticum podría deberse a la. RE. inhibición de la proliferación celular y la muerte de las células de los meristemos. DI. apicales (Jiang y col., 2001), así como a la alteración de la permeabilidad de las membranas celulares, por la unión de los iones de As a grupos sulfidrilos de proteínas y a la parte hidrofílica de fosfolípidos (Devi y Prasad, 1999), afectando la homeostasis iónica y la subsecuente alteración de la actividad de enzimas cruciales en el. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. metabolismo de las plantas (Janicka y col., 2008). También se reduciría la longitud por la baja concentración de fosforo en el medio donde se cultivó Rorippa nasturtiumaquaticum, una investigación realizada en semillas de cebada, demostró que el fosforo. AC IÓ. N. (fosfato) era un poderoso inhibidor de la toma de arsénico (arseniato), indicando que ambos iones son transportados por el. UN IC. mismo mecanismo (mayor afinidad por fosfato que arseniato) (Asher y Reay, 1979), por lo que en ausencia de fosforo el As entraría en la planta pudiendo alterar muchas. CO. M. reacciones celulares (Lepp, 1981) interfiriendo en los procesos ﬁsiológicos y. IC. A. Y. bioquímicos involucrados con el crecimiento (Wauchope, 1983).. RM. ÁT. Por otro lado, nuestros resultados también mostraron aumento del peso seco en raíces y. IN FO. hojas a la concentración de 1 mg/L de As después de 28 días de tratamiento. Este comportamiento coincide con lo observado en la biomasa de raíces y hojas de. DE. Nasturtium oficinale expuesta a 1 uM As (Ozturk, 2010) y a 1 mg/L de Ni (Duman y. AS. col., 2009). De forma similar, plantas de maíz, tuvieron mayor biomasa a la menor. EM. concentración de As (Ruiz y Armienta, 2011). No se ha demostrado que el arsénico sea. SI ST. un nutriente esencial para las plantas; sin embargo, se observa que bajas. DE. concentraciones de este metal estimula su crecimiento; este fenómeno podría producirse. N. por un aumento de proteínas de estrés de bajo peso molecular, o por la acumulación de. CC. IO. metabolitos secundarios con actividad antioxidante como parte del sistema de defensa. RE. de las plantas para tolerar el estrés oxidativo causado por la exposición al As (Woolson. DI. et al. 1971) siendo estos metabolitos los que aportarían biomasa a los tejidos de Rorippa nasturtium-aquaticum (Sharma y Dietz, 2006).. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En cuanto a la actividad enzimática, se sabe que las plantas están equipadas con un sistema de defensa para reparar el daño creado por especies reactivas de oxigeno (ROS) producidas por algún contaminante. Enzimas antioxidantes tales como la APX juegan. AC IÓ. N. un papel importante en este proceso. Se ha informado que la actividad de la enzima antioxidante puede aumentar, disminuir o permanecer sin cambios en respuesta. UN IC. a exposición a metales pesados (Zhang y col., 2007). Los resultados de nuestro trabajo. M. muestran aumento significativo de la actividad APX de Rorippa nasturtium-aquaticum. CO. en raíces y hojas a medida que las concentraciones de As aumentan durante 7 días de. Y. tratamiento. Esta tendencia coincide con investigaciones realizadas en raíces y hojas de. IC. A. Bacopa monnieri expuesta a 50 uM de As después de 7 días de exposición (Mishra y. RM. ÁT. col., 2013), en raíces de Triticum sativum tratadas con concentraciones de 5 a 20 mg/Kg. IN FO. As (Li, 2007), en Pteris vittata y Pteris ensiformis expuestas a 150 y 300 uM de As (Mrittunjai y col., 2005), en Trigonella foenum-graecum expuesta a 20 mg/kg de As. DE. (Talukdar, 2013), y en raíces y hojas de Zea mays expuestas a concentraciones de 134 a. AS. 668 uM de As después de 8 días (Duquesnoy y col., 2010).. EM. El aumento de la actividad APX en raíces puede darse como respuesta a la acumulación. SI ST. del As en esta parte de la planta ya que se ha reportado que plantas acuáticas acumulan. DE. mayor cantidad de metales en la parte sumergida que las emergentes (Albers, 1993),. N. ante esto la APX aumenta su actividad para protegerla del daño oxidativo producido por. CC. IO. el As (Shigeoka y col., 2002).. RE. La disminución de la actividad APX por la exposición a más días de tratamiento, se. DI. debería a la corregulación entre APX y otras enzimas antioxidantes como glutatión reductasa (GR), catalasa (CAT) y superóxidodismutasa (SOD) que forman parte del sistema de defensa antioxidante en las plantas (Shigeoka y col.; 2002).. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. La variación en los niveles de la actividad de la APX en Rorippa nasturtium aquaticum puede asociarse a una adaptación bioquímica de esta especie a la toxicidad producida por el arsénico, debido a que. la acumulación de metales en las plantas suele ir. AC IÓ. N. acompañada de una variedad de cambios metabólicos, asociado a cierto grado de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. tolerancia para poder sobrevivir (Prasad et al. 2011).. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. V. CONCLUSIONES. AC IÓ. aquaticum disminuyen cuando son tratadas con 1,3 y 5 mg/L de As.. N.  $La$ longitud y peso seco de raíces, tallos y hojas de Rorippa nasturtium.  El mayor efecto del crecimiento se produjo en la raíz de Rorippa nasturtium. UN IC. aquaticum expuesta a las concentraciones crecientes de As.. M.  Las concentraciones de 1,3 y 5 mg/L de As aumenta la actividad Ascorbato. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. peroxidasa en raíces y hojas de Rorippa nasturtium aquaticum.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VI.REFERENCIAS BIBLIOGRAFICA. . Abedin, M. J., Cottep-Howells, J., Meharg, A. A., 2002. Arsenic uptake and accumulation in rice (Oryza sativa L.) irrigated with contaminated water. Plant. . AC IÓ. N. and Soil. 240: 311-319.. Alférez, O.; Araiza, J.; y Jáuregui, J. 1998. Captación de arsénico por cultivos de. UN IC. raíces in vitro de lycopersicum esculentum, un modelo de fitorremediación.. M. Tomato Plant Nutrition as Affected by Arsenite Concentration. J. Plant Nutr.. A. Albers PH, Camardese MB (1993) Effects of acidification on metal. IC. . Y. CO. 21(2): 235-244.. . IN FO. RM. Environ Toxicol Chem 12(6):959–967. ÁT. accumulation by aquatic plants and invertebrates.I. Consructed Wetlands.. Anke, M. 2001. Arsenic in plants, soils and some foodstuffs, in trace and. Armienta M.A., Ongley L.K., Rodríguez R., Cruz O., Mango H., y Villaseñor G.. EM. . AS. DE. ultratrace elements in plants and soil, Boston, pp. 148–169.. SI ST. 2008. Arsenic distribution in mesquite (Prosopis laevigata) and huizache (Acacia farnesiana) in the Zimapán mining area, México. Geochem.: Explo.,. Asher C., y Reay P., 1979. Arsenic uptake by barley seedling.Aust. J. PLant Physiol. 6: 459-66.. DI. RE. CC. . IO. N. DE. Environ., Anal. 8, 1-7.. . Baker, A. J. M. y Walter, P. L. (1990). Ecophysiology of metal uptake by tolerant plants. En: Heavy metal tolerance in plants: Evolutionary aspects (A. J. Shaw, Ed.). CRC Press Inc., Boca Raton, FL, pp. 155-157.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. . Duquesnoy I., Champeau G., Evray G. y Leodoigt, G. 2010.Enzymatic. Duman, F., Leblebici, Z. y Temizgul, R. 2009. Nickel accumulation and its. AC IÓ. . N. adaptations to arsenic induced oxidative stress in Zea mays.CR Biol. 333:11-12. effect on biomass, protein content and antioxidative enzymes in roots and leaves. UN IC. of watercress (Nasturtium oficinale R. Br.). Department of Biology, Erciyes. Edmonds, C. 2001. Microbiological & Heavy Metal Contamination of. CO. . M. University, Kayseri 38039, Turkey.. Y. Watercress in the Wellington Region. Council. Publication No. WRC/RINV-T-. ÁT. García, A., Santa, I., Jiménez O. 1996. Arsenic environmental impact on mining. RM. . IC. A. 98, p. 11-20.. Garg N., Singla P. (2011). Arsenic toxicity in crop plants: physiological effects. DE. . IN FO. areas (Salamanca, Spain) Toxicol. Environ. Chem. 53, 137-141. Guevara J.A. (2005). Biorremediacion del agua de rio por plantas acuáticas en el. EM. . AS. and tolerance mechanisms. Environ. Chem. Lett. 9, 303–321. lavadero de verduras de tepetitla de lardizabal, tlaxcala. Mexico. Revista. Gomes R., Moldes C., Delite F., Pompeu G., Gratão P., Mazzafera P., Lea P.,. DE. . SI ST. CiBIyT,1(3),15-21. Azevedo R., 2006. Antioxidant metabolism of coffee cell suspension cultures in. Ivanov V., Bystrova E., Seregin I. 2003 Comparative impacts of heavy metals on root growth as related to their specificity and selectivity. Russian J Plant Physiol 50:398-406. DI. RE. CC. . IO. N. response to cadmium. Chemosphere. 65: 1330–1337..  Jacobs, L.W.; Keeney, D.R. y Walsh, L.M. 1970. Arsenic residue toxicity to vegetable crops grown on plainfield sand. Agron. J. 62: 588-91.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo.  Janicka M. Kaba1a K., Burzynski M., Grazyna K. 2008. Response of plasma membrane H+-ATPase to heavy metal stress in Cucumis sativus roots. Journal of Experimental Botany, Vol. 59, No. 13, pp. 3721–3728.. N.  Jiang W, Liu D, Liu X (2001) Effects of copper on root growth, cell division,. AC IÓ. and nucleolus of Zea mays. Biol. Plant. 44: 105-109.. UN IC.  Kabala K M, Janicka-Russak M, Burzynski M, Klobus G, 2008. Comparison of heavy metal efect on the proton pumps of plasma membrane and tonoplast in. Keser, G. y Saygideger, S. 2010. Effects of Lead on the Activities of. Y. . CO. M. cucumber root cells. Journal of Plant Physiology, 165: 278–288.. A. Antioxidant Enzymes in Watercress, Nasturtium officinale R. Br. Biol Trace. ÁT. IC. Elem Res (2010) 137:235–243. RM.  Lepp N.W. 1981. Effect of heavy metals pollution on plants. Vol. 1. Effects of. IN FO. trace metal on plant fuction. Applied Science Publishers. London and New. DE. Yersey.. AS.  Li C., Feng S., Jiang L., Lu, Hou X. 2007. Effects of Arsenic on seed. EM. germination and physiological activities of Triticum sativum seedlings. Environ. SI ST. Sci. China. 19 (6): 725-32.. DE.  Litter M., Armienta M., y Farías S. 2009. Metodologías analíticas para la. IO. N. determinación y especiación de arsénico en aguas y suelos. Argentina.. CC.  Marin, A. R., Pezeshki, S. R., Masscheleyn, P. H., Choi, H. S., 1993. Effect of. RE. dimethylarsinic acid (DMAA) on growth, tissue arsenic and photosynthesis of. DI. rice plants. J. Plant Nutr. 16, 865-880.  Mishra S., Srivastava S. Dwivedi, S. y Tripathi R. 2013. Investigation of biochemical responses of Bacopa monnieri upon exposure to arsenate. Environ Toicol 28: 419-430. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo.  Mrittunjai S., Lena Q., Nandita S., y Shraddha S. 2005. Antioxidant responses of hyper-accumulator and sensitive fern species to arsenic. Journal of Experimental Botany, Vol. 56, No. 415, pp. 1335–1342. N.  Ozturk, F., Duman, F., Leblebici, Z. y Temizgul, R. 2010. Arsenic accumulation. arsenite.. Turkey.. Environmental. AC IÓ. and biological responses of watercress (Nasturtium officinale R. Br.) exposed to and. Experimental. UN IC. DOI:10.1016/j.envexpbot.. Botany. CO. M.  Prasad M., Maleck P., Waloszek A., Bojka M., Strzallka K. 2001.Physiological responses of Lemna trisulca L. (duckweed) to cadmium and copper. IC. A. Y. bioaccumulation. Plant Sci 161:881–889.. ÁT.  Prieto F., Callejas J., Román A. 2007. Acumulación de arsénico en el cultivo de. IN FO. RM. habas (Vicia faba). Agronomía Costarricense 31(2): 101-109.  Porter, E y Peterson, P. Arsenic accumulation by plants on mine waste (United. DE. Kingdom) J. Sci. Total Environ., 1975, 4, 365–371.. AS.  Robinson B, Kim N, Marchetti M. 2006. Arsenic hyperaccumulation by aquatic. EM. macrophytes in the Taupo Volcanic Zone, New Zealand. Environmental and. SI ST. Experimental Botany 58 (2006) 206-215.. DE.  Ruiz, E. y Armienta M. 2011. Acumulación de arsénico y metales pesados en. N. maíz en suelos cercanos a jales o residuos mineros. Rev. Int. Contam. Ambie. 28. RE. CC. IO. (2) 103-117. DI.  Sharma S. y Dietz K. 2006. The significance of amino acids and amino acid derived molecules in plant responses and adaptation to heavy metal stress. Journal of Experimental Botany. 57 (4): 711-726..  Shigeoka S, Ishikawa T, Tamoi M, Miyagawa T, Yabuta Y. 2002 Regulation and function of ascorbate peroxidase isoenzymes. J Exp Bot 53:1305–1319 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo.  Smedley, P y Kinninburgh, D. 2002. A review of the source, behaviour and distribution of arsenic in natural waters. Appl. Geochem. 17 p. 517–568.  Smith, P. G., Koch, I., Kenneth, J. Reimer, K. J. 2008. Uptake, transport and. N. transformation of arsenate in radishes (Raphanus sativus). Environmental. AC IÓ. Sciences Group, Royal Military College, P.O. Box 17000 Station Forces,. Kingston, ON, Canada. K7K7B4 Science of the total environment 390, 188 -. UN IC. 197.. CO. M.  Surekha and Joginder Singh Duhan. Chromium stress on peroxidase, ascorbate peroxidase and acid invertase in pea (Pisum sativum L.) seedling. 2012.. A. Y. International Journal for Biotechnology and Molecular Biology Research Vol.. ÁT. IC. 3(2), pp. 15-21. RM.  Talukdar D. 2013. Arsenic induced changes in growth and antioxidant. IN FO. metabolism of fenugreek. Russian Journal of Plant physiology. Volumen 60:. DE. 652-660. AS.  Wauchope R., y McDowell L., 1984. “Adsorption of phosphate, arsenate,. EM. methanearsonate, and cacodylate by lake and stream sediments: comparisons. SI ST. with soils”. J. Environ. Qual. 13, 3: 499-504.. DE.  Woolson, E.A. 1975b. “Bioaccumulation of arsenicals”. ACS Symposium series.. CC. IO. N. Arsenical Pesticides. 7: 97-107.. RE.  Xue, H. 2007. Growth responses of Rorippa globosa and its accumulation. DI. characteristics of Cd and as under the Cd-As combined pollution. Key Laboratory of Terrestrial Ecological Process, Institute of Applied Ecology, Chinese Academy of Sciences, Shenyang 110016, China. Jun; 28, p. 55-60..  Yathavakilla, S. K V., Fricke, M., Creed, P. A., Heitkemper, D. T., Shockey,N. V. Schwegel, C., Caruso, J. A., Creed, J. T. 2008. Arsenic speciation and 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. identification of monomethylarsonous acid and monomethylthioarsonic acid in a complex matrix. Anal. Chem. 80/3.  Zenk, M H. 1996. Heavy Metals detoxification in higher plants. A review. Gene. N. 179. P. 21-30.. AC IÓ.  Zhang W., Liu D., Tian J y He H., 2009. Toxicidad y acumulación de arsénico y. . UN IC. variedades de Trigo. Phyton version online ISSN 1851-5657.. Zhang F Q, Wang Y S, Lou Z P, Dong J D, 2007. Effect of heavy metal stress on. mangrove. plant. seedlings. CO. M. antioxidative enzymes and lipid peroxidation in leaves and roots of two (Kandelia. candel. Bruguiera. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. gymnorrhiza).Chemosphere, 67: 44–50.. and. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. ANEXOS. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 01 Tabla 4. Análisis de Varianza Factorial para longitud de raíces de Rorippa nasturtium-. Cuadrado Medio Cociente-F. Concentracion As. 308.924. 2. 154.462. 10.74. Tiempo (B). 896.922. 3. 298.974. 20.79. INTERACCIONES. 66.1228. 6. 11.0205. 0.77. Error. 345.193. 24. Total (corr.). 1617.16. 35. 0.0005. 0.0000. CO. (A). 0.6037. Y. (A)x (B). P-Valor. AC IÓ. GL. UN IC. Suma de cuadrados. M. Fuente. N. aquaticum. IN FO. RM. ÁT. IC. A. 14.3831. DE. Tabla 5. Contraste mútiple de Rango (Duncan) para la longitud de raíces de Rorippa. 8.2. a. 7. 9.1. ab. 3. 14. 9.9. ab. 1. 7. 10.2. ab. 5. 14. 10.3. ab. 3. 28. 11.1333. abc. 1. 14. 14.5. abcd. 5. RE. CC. N. 3. DE. As mg/L. DI. EM. Significancia. SI ST. Promedio. IO. Factor. AS. nasturtium-aquaticum.. Días 7. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 28. 15.7333. bcd. 0. 7. 17.4667. cde. 1. 28. 18.4. de. 0. 14. 22.8667. ef. 0. 28. 28.3333. AC IÓ. N. 5. M. UN IC. f. CO. Tabla 6. Análisis de Varianza Factorial para longitud de tallos de Rorippa nasturtium-. Suma de. GL. 1812.69. 3. DE. (A). IN FO. cuadrados Concentracion As. Cuadrado Medio. RM. Fuente. ÁT. IC. A. Y. aquaticum. P-Valor. Cocient-F 604.23. 27.45. 0.0000. 10164.7. 2. 5082.35. 230.91. 0.0000. INTERACCIONES. 821.041. 6. 136.84. 6.22. 0.0005. DE. Error. 528.24. 24. 13326.7. 35. 22.01. DI. RE. CC. IO. N. Total (corr.). EM. SI ST. (A)x (B). AS. Tiempo (B). 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(48) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 7. Contraste mútiple de Rango (Duncan) para la longitud de tallos de Rorippa nasturtium-aquaticum. Promedio. Significancia. 1. 7. 39.7333. 5. 14. 40.5333. 3. 7. 42.2667. 0. 7. 47.8667. 0. 14. 3. 14. 5. 28. 1 3. IC. ÁT. ab ab bc c c. 61.4333. d. 14. 62.2667. d. 28. 82.5667. e. 28. 86.7. ef. 28. 93.4. f. DE. IN FO. 50.9333. DI. RE. CC. IO. N. DE. 0. ab. AS. RM. 50.8. EM SI ST. 1. a. UN IC. 36.4333. M. 7. CO. 5. Y. Días. A. As mg/L. AC IÓ. N. Factor. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..