Efecto del extracto crudo del fruto de morinda citrifolia en rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y. BI O. Q UI. M. IC. A. BIOQUÍMICA. AC I. A. Y. PROYECTO DE TESIS TIPO I. FA RM. “Efecto del extracto crudo del fruto de Morinda Citrifolia en Rattus novergicus. AUTORAS. CA. DE. cepa holtzman con hiperglicemia inducida”. IO TE. VÁSQUEZ MERCEDES YRMA NOEMÍ. BI. BL. ZAVALA OBANDO SANDI MARISOL. ASESOR: QUISPE DÍAZ IVÁN MIGUEL. TRUJILLO – PERU 2015. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Porque Jehová da la sabiduría. Y de su boca viene el conocimiento y la inteligencia. Fíate de Jehová de todo tu corazón,. M IC. A. y no te apoyes en tu propia prudencia.. UI. Reconócelo en todos tus caminos,. BI. O. Q. y él enderezará tus veredas. AC I. Agradecemos infinitamente a Dios por. A. Y. Proverbios 2:6; 3:5-6. FA. RM. brindarnos una vida llena de aprendizajes,. DE. experiencias y sobre todo felicidad, y por. TE CA. habernos acompañado y guiado en todo. BI BL IO. momento y por ser nuestra mayor fortaleza en los momentos de debilidad.. Yrma y Sandi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Mi eterna gratitud A mis queridos padres: Ángel y Elena Por su sacrificio y apoyo constante e incondicional, su eterno amor, por sus palabras de apoyo en cada momento de mi vida, por su confianza, por. M IC. A. corregirme cada vez que era necesario, comprensión y ejemplo de lucha,. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. sembraron en mí el buscar siempre salir adelante. Los amo.. Sandi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A mis tíos: José y Aracelly. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M IC. A. Por su gran apoyo incondicional, su amor y su confianza depositada en mí... Sandi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A mis mayores tesoros, mis padres: Francisco y Marisol Por estar siempre a mi lado brindándome consejos y apoyo incondicional, por dedicarme su tiempo para enseñarme y corregirme ante mis errores, por tener ese. M IC. A. carácter fuerte y dulce a la vez el cual me supo guiar por el camino del bien.. UI. Por su sacrificio constante y por la confianza que depositan en mí. Los amo. DE. FA. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. queridos padres. TE CA. A mis queridos hermanos:. BI BL IO. Marice, Jorman , Octiver , José y Ángel Jesús. Por sus palabras de aliento y compañía en esos momentos difíciles, por sus ocurrencias y regaños, por su apoyo. incondicional, por su sacrifico, por el simple hecho de existir los amo mucho.. Yrma. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A mis tíos: Irma y Ricardo. A. Por su apoyo incondicional, por sus consejos y tiempo dedicado hacia a. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M IC. mí por todo aquello que contribuyo para el logro de mis objetivos.. A mi amigo y compañero: Dilver. Por estar conmigo en todo momento por ayudarme y dedicarme su tiempo, por ser cual es sencillo y noble, porque el solo hecho de tenerlo a mi lado me hace feliz. Te amo. Yrma. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTO Nuestro especial y profundo agradecimiento a nuestro profesor y asesor:. Ivan Miguel Quispe Díaz. UI. desarrollo de nuestro trabajo.. M IC. A. Por ser guía, apoyo, dedicación y brindarnos su valioso tiempo para el. Y. BI. nuestro trabajo.. O. Q. Gracias por brindarnos su amistad, y ser consejero principal en el transcurso de. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. Que Dios le bendiga.. Yrma y Sandi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Un cordial agradecimiento a nuestra querida profesora y miembro de jurado Marilú Soto Vásquez. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M IC. A. Por su apoyo y sus consejos durante el desarrollo del presente trabajo.. Yrma y Sandi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Q. UI. M IC. A. JURADO DICTAMINADOR. Presidente. AC I. A. Y. BI. O. Roberto Ybañez Julca. Miembro. Miembro. BI BL IO. Ivan Quispe Díaz. TE CA. DE. FA. RM. Marilú Soto Velásquez. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN Señores Miembros del Jurado Dictaminador: Dando cumplimiento a lo establecido por el reglamento de Grados y Títulos de la. A. Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo - La Libertad,. M IC. sometemos a vuestra consideración y elevado criterio profesional el presente informe de. UI. investigación tipo I intitulado: “Efecto del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia en. O. Q. Rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida”.. BI. Es propicia esta oportunidad para manifestar nuestro más sincero reconocimiento a. AC I. contribuyeron a nuestra formación profesional.. A. Y. nuestra alma mater y toda su plana docente, que con su capacidad y buena voluntad. RM. Dejamos a vuestro criterio, señores miembros del jurado dictaminador, la calificación. Trujillo, mayo del 2015. BI BL IO. TE CA. DE. FA. del presente trabajo científico.. __________________________. __________________________. YRMA NOEMÍ VASQUEZ. SANDI MARISOL ZAVALA. MERCEDES. OBANDO. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE. Dedicatoria…………………………………………………………………….ii Agradecimiento………………………………………………………….........vi. M IC. A. Resumen…………………………………………………………….………...vii. BI. O. Q. UI. Abstract……………………………………………………………………......iii. INTRODUCCIÓN………………………………………………….……..1. II.. MATERIAL Y MÉTODOS…………………………………………….…8. III.. RESULTADOS……………………………………………………….......15. IV.. DISCUSIÓN………………………………………………………….......19. V.. CONCLUSIONES……………………………………….…………….....25. VI.. DEDICATORIA………………………………………………………….26. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS……………………………………27. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. Y. I.. Anexos………………………………………………………….…………..…33. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN Se realizó el presente trabajo de investigación, con el objetivo de evaluar el efecto del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia en Rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida con aloxano. Se trabajó con 30 especímenes, los cuales fueron sometidos a un. M IC. A. periodo de aclimatación de 10 días, posteriormente a los especímenes se les administró por vía intraperitoneal solución de aloxano al 5% p/v en dosis de 100 mg/kg disuelto en buffer. Q. UI. citrato a pH 4.5 en dosis única durante tres días. Posterior a las 24 las horas de la primera,. O. segunda y tercera administración del aloxano se midió la glicemia de la cola terminal, luego. BI. fueron distribuidos en grupos de 6 especímenes; blanco, control, patrón (Glibenclamida. A. Y. 5ml/kg), problema 1 (extracto Morinda citrifolia 2g/kg) y problema 2 (extracto de Morinda. AC I. citrifolia 4g/kg), administrándoles respectivamente por vía oral durante 30 días, el grupo. RM. control no recibió tratamiento. Pasado las 24 horas del último día de la administración de los tratamientos, se midió la glicemia de los grupos estudiados. Se observó una diferencia. FA. estadística muy altamente significativa (p = 0.000) del efecto del extracto crudo del fruto de. DE. Morinda citrifolia a dosis de 2g/Kg p.c. En conclusión la reducción de la glicemia observada. TE CA. en el extracto del fruto de Morinda citrifolia 2g/Kg p.c. se explicaría por la presencia de. BI BL IO. compuestos fenólicos y flavonoides en dicho extracto.. Palabras claves: Hiperglicemia, aloxano, Morinda citrifolia. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT The present research was conducted in order to evaluate the effect of the crude extract of the fruit of Morinda citrifolia in Rattus norvegicus strain holtzman with alloxan-induced hyperglycemia. We worked with 30 specimens, which were subjected to an acclimation period of 10 days, then the specimens were administered intraperitoneally solution alloxan. A. 5% w/v in doses of 100 mg/kg dissolved in citrate buffer to pH 4.5 as a single dose for three. M IC. days. After 24 hours of the first, second and third administration of alloxan glycemia terminal. UI. tail was measured, then were distributed in groups of 6 specimens; white, control, pattern. Q. (Glibenclamida 5ml/kg), Problem 1 (Morinda citrifolia extract 2g/kg) and Problem 2. BI. O. (Morinda citrifolia extract 4g/kg) respectively administering orally for 30 days, the control. Y. group received no treatment. Past 24 hours of the last day of administration of treatments,. AC I. A. glycemia of the study groups was measured. Observed a highly significant statistical difference (p = 0.000) effect of the crude extract of the fruit of Morinda citrifolia a dose of. RM. 2g / kg bw. In conclusion, the reduction of glycemia observed in the extract of the fruit of. FA. Morinda citrifolia 2g/kg bw is explained by the presence of phenolic compounds and. BI BL IO. TE CA. DE. flavonoids in the extract.. Keywords: Hyperglycemia, alloxan, Morinda citrifolia.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCIÓN. La diabetes mellitus (DM) es una de las enfermedades metabólicas crónicas y discapacitantes más prevalentes en el mundo, y constituye un problema de salud pública creciente, se caracteriza por hiperglucemia resultante de defectos en la secreción de insulina, acción de la insulina, o ambos. La hiperglucemia crónica de la DM se asocia con daño a largo plazo, disfunción e insuficiencia de varios órganos, especialmente los. A. ojos, riñones, nervios, corazón y vasos sanguíneos1, 2.. M IC. En el año 2012, la Federación Internacional de Diabetes (IFD, por sus siglas en inglés),. UI. estimó que más de 371 millones de personas vivían con dicha enfermedad y que 4.8. Q. millones de personas fallecen a causa de la misma, donde casi el 80% de ellos ocurren en. BI. O. países de bajos y medianos ingresos. Asimismo se estima que para el año 2030, el número. Y. de personas con DM, se incrementará a 439 millones, lo que representa el 7.7% de la. AC I. A. población adulta (de 20 a 79 años de edad) del mundo3, 4.. RM. En el Perú, esta enfermedad afecta a casi dos millones de personas y menos de la mitad han sido diagnosticados. Desde el inicio de la Vigilancia Epidemiológica de Diabetes al. FA. I semestre de 2013 se han registrado 5001 casos de diabetes en 16 hospitales (seis de ellos. DE. en Lima) y en una clínica privada de Lima. Entre enero y junio de 2013, se han registrado. TE CA. 928 casos, esto representa el 18,6 % de los casos registrados desde el inicio del piloto y el 24,2 % de los casos registrados el año 2012. Asimismo, para el año 2025 se estima que. BI BL IO. la mortalidad por diabetes se incrementaría a un 7.5%5. La clasificación de la DM, se basa fundamentalmente en su etiología y características fisiopatológicas, pero adicionalmente incluye la posibilidad de describir la etapa de su historia natural en la cual se encuentra la persona6. En la DM tipo 1, las células β se destruyen, lo que conduce a la deficiencia absoluta de insulina. Sus primeras manifestaciones clínicas suelen ocurrir alrededor de la pubertad. Sin embargo, existe una forma de presentación de lenta progresión que inicialmente puede no requerir insulina y tiende a manifestarse en etapas tempranas de la vida adulta. A este grupo pertenecen aquellos casos denominados por algunos como diabetes autoinmune latente del adulto (LADA)6. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La DM tipo 2, se presenta en personas con grados variables de resistencia a la insulina pero se requiere también que exista una deficiencia en la producción de insulina que puede o no ser predominante. El exceso de peso sugiere la presencia de resistencia a la insulina mientras que la pérdida de peso sugiere una reducción progresiva en la producción de la hormona. Aunque este tipo de diabetes se presenta principalmente en el adulto, su frecuencia está aumentada en niños y adolescentes obesos6.. A. La Diabetes Mellitus Gestacional (DMG), es una alteración del metabolismo de los. M IC. hidratos de carbono, de severidad variable, que se inicia o se reconoce por primera vez durante el embarazo. La alteración persiste después del embarazo y no excluye la. Q. UI. posibilidad de que la alteración metabólica haya estado presente antes de la gestación 6.. BI. O. Diversos estudios epidemiológicos han establecido una serie de factores de riesgo que se. Y. asocian de manera clara a la aparición de DM tipo 2 dentro de los cuales tenemos; edad. A. mayor de 45 años, sobrepeso, hiperlipidemias, tensión arterial elevada, diabetes. RM. AC I. gestacional, hijo de más de 4 kg al nacer , familias diabéticas7. Dentro de las causas de mortalidad de la DM tipo 2 tenemos a enfermedades. FA. cardiovasculares (58%), enfermedad cerebrovascular (12%), infecciones (11%), cáncer,. DE. nefropatía diabética, coma diabético7.. TE CA. La DM, está ligada al desarrollo de múltiples complicaciones micro y macrovasculares. A pesar de que existe suficiente evidencia que soporta la relación entre el menor riesgo. BI BL IO. de aparición y/o progresión de las complicaciones microvasculares con el buen control glucémico, no ocurre lo mismo con las complicaciones macrovasculares8. La DM, provoca un deterioro del sistema vascular que termina siendo la principal causa de morbilidad y mortalidad de los pacientes que la presentan. Este deterioro vascular engloba la alteración de los lechos capilares, causante de las complicaciones microvasculares, y la aceleración del proceso aterotrombótico, que ocasiona las complicaciones macrovasculares9. La neuropatía diabética es una de las complicaciones microvasculares más importantes. Puede presentarse como neuropatía somática, en la que se incluye el pie diabético, y cuya 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. patología más común es la polineuropatía distal simétrica. También puede presentarse como neuropatía autonómica, cuyas formas más frecuentes son la neuropatía digestiva (gastroparesia, diarrea), la cardiovascular (hipotensión ortostática) y la impotencia7. Las complicaciones macrovasculares manifestadas clínicamente como cardiopatía isquémica, insuficiencia cardíaca, la enfermedad vascular cerebral y la insuficiencia arterial periférica son la principal causa de muerte en el paciente con diabetes8. Por fortuna, tales complicaciones crónicas pueden mitigarse en muchos pacientes mediante. M IC. A. el control sostenido de la glucemia7, 10.. UI. Existe una amplia variedad de opciones terapéuticas para la hiperglucemia. Para el. O. Entre estos últimos se encuentran seis. BI. presentaciones y de antidiabéticos orales.. Q. tratamiento farmacológico de la DM, se dispone de insulina en sus distintas. Y. categorías para tratar a individuos con DM tipo 2 como: sulfonilureas, meglitinidas,. A. derivados de D-fenilalanina, biguanidas, tiazolidinedionas, inhibidores de la α-. RM. AC I. glucosidasa, inhibidores de dipeptidil peptidasa IV, incretinas y amilina) 11.. FA. Desde hace mucho se ha contado con la sulfonilureas y las biguanidas, y es el tratamiento acostumbrado y más indicado contra la DM tipo 2. Las meglitinidas y los derivados de. DE. D-fenilalanina, clases nuevas de secretagogos de insulina de acción rápida, pueden. TE CA. sustituir a las sulfonilureas de acción breve. Los secretagogos mencionados incrementan la acción de insulina de las células β. Las biguanidas disminuyen la producción de. BI BL IO. glucosa por el hígado, en tanto que las tiazolidinedionas mejoran la sensibilidad a la insulina11,12.. Asimismo las terapias basadas en incretinas controlan las oscilaciones de la glucemia posprandial al incrementar la insulina y disminuir la de glucagon. El análogo amilina también disminuye las concentraciones posprandiales de glucosa y reduce el apetito, y los inhibidores de glucosidasa α lentifican la digestión y absorción de almidones y disacáridos12.. 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Sin embargo, muchos de los fármacos utilizados para tratar la diabetes, como la insulina y las sulfonilureas, tienen otros efectos adversos, no mejoran el pronóstico cardiovascular a pesar de la mejora de la hiperglicemia13. Desde la antigüedad, las plantas han sido una fuente ejemplar de la medicina. Muchas plantas están siendo usadas como complemento en el tratamiento de la diabetes sobre todo en aquellas poblaciones en donde la adquisición de medicamentos representa un. M IC. A. problema económico. Se han reportado muchas especies con actividad antidiabética14.. UI. En un estudio realizado por Sezika et al., sobre la administración oral de hierbas con. Q. flores de la planta Gentiana olivieri en modelos in vivo en condiciones normales de. O. glucosa o de hiperglucemia y ratas con diabetes inducida por estreptozocina, se observó. Y. BI. un efecto hipoglicemiante14.. AC I. A. Asimismo, Baroni et al, investigó el efecto del extracto crudo de hojas de Smallanthus sonchifolius “yacón”, sobre la glucemia en ayuno de ratas diabéticas (inducido por. RM. estreptozocina) y no diabéticas. Se utilizaron dos tipos de extracto crudo,. FA. acuosa/extracción en calor e hidro-etanólico. En este estudio se observó que el extracto. DE. hidro-etanólico administrado por vía oral a la dosis de 400 mg/Kg de peso corporal durante 14 días, redujo significativamente los niveles de glucosa en sangre de las ratas. TE CA. diabéticas (59%) y las ratas no diabéticas (28%) 15.. BI BL IO. Palomino, investigó el efecto del extracto etanólico de hojas de Annona muricata L “guanábana” sobre la hiperglicemia inducida con aloxano en ratas machos, cepa Holtzman administrado por vía oral durante 5 días, siendo la dosis de 200 mg/Kg la más eficaz como hipoglicemiante16. Morinda citrifolia, comúnmente llamado noni, tiene una larga historia medicinal y su uso como suplemento dietético botánico ha ido creciendo en los últimos años. Es originario de la región comprendida desde el sureste asiático hasta Australia y se cultiva en Polinesia, India, el Caribe, México, América Central y la parte sur de América del Sur17.. 4. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Es un arbusto de alrededor de 6 metros de altura, de la familia Rubiáceas, que por lo general, se desarrolla en climas húmedos y templados. Sus hojas son opuestas, de estrecha a ampliamente elípticas, de 15 a 25 cm de longitud, agudas o acuminadas, de color verde brillante, con estipulas grandes, ápice agudo y redondeadas en la base. Las flores son aromáticas, blancas, tienen el cáliz truncado, y su fruto puede medir hasta 12 cm, tiene una apariencia grumosa con una cáscara cerosa y traslucida cuyo color puede variar desde. A. verde hasta casi negro; tiene forma poligonal, y contiene varias semillas18.. M IC. Las investigaciones fitoquímicas de Morinda citrifolia han dado como resultado el aislamiento de aproximadamente 200 compuestos, de los cuales los principales son. Q. UI. compuestos fenólicos, ácidos orgánicos y alcaloides. Entre los compuestos fenólicos más. O. importantes están las antraquinonas,flavonoides, acubina, ácido asperulósido y. AC I. A. principal alcaloide reportado es la xeronina17, 29.. Y. BI. escopiletina; los principales ácidos orgánicos son el caproico y caprílico mientras que el. Sin embargo, la composición química varía grandemente dependiendo de la parte de la. RM. planta que se analice. La fruta contiene 90% de agua y los componentes mayoritarios de. FA. la materia seca son sólidos solubles, fibra dietética y proteínas. El contenido proteínico. DE. de la fruta es de 11.3% de la materia seca del jugo y los principales aminoácidos son el. TE CA. ácido aspártico, el ácido glutámico y la isoleucina17. La actividad biológica de Morinda citrifolia ha quedado de manifiesto a través de sus. BI BL IO. efectos antimicrobianos, anticancerígenos, antioxidantes, antiinflamatorios y en la actividad cardiovascular. Existen evidencias de que el noni inhibe el crecimiento de ciertas bacterias como Staphylococus aureus, Bacillus subtilus, Escherichia coli, Salmonella y Shigella. Se estima que el efecto antimicrobiano puede ser debido a ciertos compuestos fenólicos17, 20. Al jugo de noni también se le atribuyen propiedades inmunomodulatorias, es decir, capacidad para mejorar el sistema inmune. También, polisacáridos del jugo de noni, compuestos de ácido glucurónico, galactosa, arabinosa, y ramnosa han demostrado contar con efectos inmumodulatorios y antitumorales17.. 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Las propiedades antioxidantes o de capacidad de captación de radicales libres del jugo, han quedado demostradas al ejercer una fuerte inhibición de la oxidación de lípidos comparable al mismo peso de α-tocoferol y butilhidroxitolueno puros17. Según el estudio realizado por Su et al., se demostró que el jugo de noni presenta un efecto en la inhibición de enzimas selectiva de enzimas ciclo-oxigenasa implicadas en procesos inflamatorios logrando resultados equivalentes a los de las drogas tradicionales. A. no esteroideas como la aspirina e indometacina17.. M IC. También se le atribuyen propiedades analgésicas y sedativas del jugo de noni, las cuales. Q. UI. se comprobaron en experimentos con ratas17.. O. Debido a la alta prevalencia a nivel mundial de la DM, el cual viene acompañado del uso. BI. de medicamentos antidiabéticos que en gran parte de los pacientes no llega a cumplir los. A. Y. objetivos de control de la glicemia, se pretende investigar el efecto de Morinda citrifolia. AC I. sobre la glicemia en especímenes inducidos con hiperglucemia experimental y de esta. RM. manera darle sustento científico en la sociedad que presenta esta enfermedad, como un complemento que mejore el control de la enfermedad. Asímismo enriquecer a la. FA. comunidad farmacéutica con el uso apropiado de las plantas medicinales para evitar. DE. efectos nocivos.. TE CA. Según lo expuesto anteriormente, nos planteamos el siguiente problema: ¿Cuál es el efecto del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia en Rattus novergicus. BI BL IO. cepa holtzman con hiperglucemia inducida? Para lo cual, postulamos que: El extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia disminuye la glicemia en Rattus novergicus cepa holtzman, con hiperglicemia inducida.. 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Los objetivos que se persiguen en el presente trabajo de investigación son: Objetivo General.  Evaluar el efecto del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia en Rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida. Objetivos Específicos.. A.  Identificar los metabolitos secundarios del extracto crudo de Morinda citrifolia,. M IC. según prueba de la gota.. UI.  Determinar el efecto del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia a. Q. diferentes dosis (2 y 4 g/Kg p.c.) y glibenclamida sobre la glicemia en Rattus. BI. O. novergicus cepa holtzman.. Y.  Determinar el porcentaje de efecto hipoglicemiante de los tratamientos en Rattus. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida.. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.. MATERIAL Y MÉTODO. A. MATERIAL 1. Material Biológico 1.1. Animales de experimentación: 30 Rattus novergicus cepa holtzman aparentemente sanos, machos de 2 meses 1/2 de edad, con peso corporal entre. A. 190-300 g, procedentes del Instituto Nacional de salud de Chorrillos- Lima.. M IC. 1.2. Extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia: obtenidas del centro de. Q. BI. O. fecha de vencimiento: diciembre del 2015.. UI. ventas Bionaturista del distrito de Trujillo, con número de lote: 111623, y. Y. 2. Materiales y equipos de laboratorio. A. 2.1. Equipos. Balanza común de triple brazo OHAUS GA 200. . Balanza analítica: OHAUS, sensibilidad 10 mg. . Glucómetro digital, Accu-Chek® Active, laboratorio ROCHE. . Estufa Memmert Toledo. . Desecador. DE. FA. RM. AC I. . TE CA. 2.2. Material de Vidrio: . El de uso común de laboratorio.. BI BL IO. 2.3. Fármacos . Glibenclamida tabletas 5 mg, lote: 11068983; fecha de vencimiento: octubre 2016. FARMAINDUSTRIA S.A.. 2.4.Material químico: . Diclorometano. . Ácido clorhídrico 1%. . Cloruro férrico. . Solución de gelatina. . Magnesio metálico. . Anhídrido acético 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. . Ácido acético. . Ácido sulfúrico. . Tolueno. . Hidróxido de sodio 5%. 2.5.Otros: . Pizeta. M IC. A. B. MÉTODO. UI. 1. Tipo de Diseño. Q. Experimental, con estímulo creciente 21.. E2´. BI. O. E2. Y. Sin tratamiento. Grupo 1. AC I. A. Grupo 1. RM. SSF 0.9%. FA. Grupo 2. BI BL IO. Grupo 4. Grupo 5. Glibenclamida 5mg/kg p.c. DE. TE CA. Grupo 3. Grupo 2. Morinda citrifolia (2g/Kg p.c.). Morinda citrifolia (4g/Kg p.c.). Grupo 3. Grupo 4. Grupo 5. Leyenda: E2: Grupo 2-5 fueron inducidos a hiperglicemia experimental mediante la administración de aloxano 5% p/v. E2´: Grupo 1-5 post administración de los tratamientos. 2. Método de Inducción de la Hiperglicemia. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Hiperglicemia inducida con aloxano en ratas según Kameswara Rao et al, 199923. Este método consistió en administrar aloxano 5% p/v, a los especímenes, a una dosis de 100mg/Kg disuelto en una solución buffer citrato a pH 4.5 por vía intraperitoneal22.. M IC. A. 3. Etapas de Estudio. UI. 3.1. Procedimiento Farmacognostico. O. Q. A. Obtención de la muestra. BI. La muestra del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia, se obtuvo. Y. del centro de ventas Bionaturista del distrito de Trujillo, departamento La. AC I. A. Libertad, con número de lote: 111623, y fecha de vencimiento: diciembre. RM. del 2015.. FA. B. Identificación preliminar de metabolitos secundarios. DE. Se realizó la identificación preliminar de metabolitos secundarios basado. TE CA. en el modelo propuesto por Olga Lock: Prueba de la gota (ver tabla N°1)23.. C. Cuantificación de sólidos totales del extracto crudo del fruto de. BI BL IO. Morinda citrifolia Se colocó 5mL del extracto en tres cápsulas previamente taradas y a 105°C se llevó a evaporación sobre baño de agua hasta que el residuo estuvo aparentemente seco. Luego se colocó estas capsulas en una estufa y se dejó hasta peso constante (aproximadamente 3 h). Luego se retiraron las cápsulas de la estufa y se las colocó en una desecadora hasta que alcanzaron la temperatura ambiente24. Para obtener la masa constante entre una pesada y otra se mantuvo un tiempo de secado de 60 minutos24. 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La cantidad de sólidos totales, expresado en %, se calculó por la siguiente formula:. % 𝑆ó𝑙𝑖𝑑𝑜𝑠 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠 =. Pr − P 𝑥100 V. Dónde:. M IC. A. Pr = Masa de la cápsula más el residuo en gramos. Q. UI. P = Masa de la capsula vacía en gramos. BI. O. V = Volumen de la porción de ensayo. AC I. A. Y. 100 = factor matemático para el cálculo. RM. 3.2. Procedimiento Farmacodinámico.. FA. Para el desarrollo del presente trabajo, a las Rattus novergicus cepa. DE. holtzman se les aclimató por 10 días en jaulas metálicas; en condiciones. TE CA. estándares, iluminación y temperatura ambiente, con alimento y agua a libertad.. BI BL IO. Todos los animales fueron tratados de acuerdo a las normas éticas en concordancia con la Guía en el uso y cuidado de animales para propósitos científicos por la National Advisory Committe for Laboratory Animal Research (NACLAR 2004)25.. A. Evaluación de la Glicemia Basal 11. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Pasado los 10 días de aclimatación, todos los animales de experimentación fueron sometidos a un ayuno de 10 a 12 horas; se les pesó y se les midió la glicemia basal, para lo cual las muestras de sangre fueron colectadas del ápice de la cola del animal (vena caudal), no sin antes haber limpiado la cola con alcohol medicinal 70°; entonces haciendo una piquete con una lanceta, se desechó la primera gota y se recibió la siguiente sobre una tira reactiva. Los niveles de glucosa fueron determinados usando un. M IC. A. glucómetro digital22.. UI. B. Inducción de la Hiperglicemia. Q. A 24 animales de experimentación seleccionados al azar, previamente. BI. O. pesados y sometidos al ayuno a 12 horas, se les administró por vía. Y. intraperitoneal la solución de aloxano al 5% p/v en dosis de 100 mg/kg. AC I. A. disuelto en buffer citrato a pH 4.5 en dosis única durante tres días.. RM. Pasado las 24 horas de la primera, segunda y tercera administración del aloxano se medió la glicemia22.. FA. C. División de los Especímenes. DE. Los 6 animales a los cuales no se les administró aloxano pasaron a formar. TE CA. parte del grupo blanco, mientras que los 24 animales de experimentación con hiperglicemia inducida se distribuyeron al azar en cuatro grupos de 6. BI BL IO. especímenes:.  GRUPO I (blanco): Conformado por 6 especímenes de Rattus novergicus cepa holtzman, este grupo no recibió ninguna inducción ni tratamiento.  GRUPO II (control): Conformado por 6 especímenes de Rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida y tratados con solución salina fisiológica (SSF) al 0.9%, a una dosis de 2mL/Kg/p.c por vía oral durante treinta días, en el horario de 7:30 – 8.30 a.m.22 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación.  GRUPO III (patrón): Conformado por 6 especímenes Rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida y tratados con el fármaco glibenclamida a la dosis de 5mg/Kg/p.c. al 10% disuelto en agua destilada por vía oral durante treinta días, en el horario de 7:30 – 8.30 a.m.  GRUPO IV (problema 1): Conformado por 6 especímenes Rattus. A. novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida y tratados con. M IC. el extracto crudo del fruto Morinda citrifolia a la dosis de 2g/Kg p.c.. Q. UI. por vía oral durante treinta días, en el horario de 7:30 – 8.30 a.m.. O.  GRUPO V (problema 2): Conformado por 6 especímenes Rattus. BI. novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida y tratados con. A. Y. el extracto crudo del fruto Morinda citrifolia a la dosis de 4g/Kg p.c.. RM. AC I. por vía oral durante treinta días, en el horario de 7:30 – 8.30 a.m.. FA. D. Determinación de la Glicemia. DE. Después de las 24 horas del último día de la administración de los. TE CA. tratamientos, se medió la glicemia, siguiendo la misma metodología anteriormente descrita. Los valores obtenidos fueron expresados en mg/dL. Se obtuvo el porcentaje. BI BL IO. de efecto hipoglicemiante a través de la siguiente fórmula22.. % 𝑑𝑒 𝑒𝑓𝑒𝑐𝑡𝑜 =. 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 − 𝑡𝑟𝑎𝑡𝑎𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜 𝑥100 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙. 4. Análisis Estadístico Se aplicó el ANOVA (Análisis de varianza), al existir significancia estadística con 13 p<0.05, se aplicó el test Tukey, asi como T student21.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 5. Ética en Investigación Los investigadores que trabajen y experimenten con animales están moralmente obligados a manifestarles tres tipos de actitudes: respeto (tratárseles con todas las consideraciones que el caso merece), afecto (considerándolos partícipes con nosotros) y gratitud (reconocimiento por la importante ayuda) 27.. A. Así mismo, la investigación biomédica en animales es éticamente aceptable, si se. M IC. sigue el principio de las tres R de la experimentación humanizada para con los. UI. animales: Reducir (al máximo el número de ellos y, por ende, el total de animales. Q. utilizados en investigación), Reemplazar (siempre que sea posible el animal de. BI. O. experimentación por otro modelo experimental, cuando no resulte imprescindible el. AC I. A. al animal el menor sufrimiento posible) 25.. Y. uso de animales.) y Refinar (los métodos y técnicas utilizados de modo que produzcan. FA. Definición Operacional. Dimensión. Tipo. Criterio Los valores. TE CA. DE. Definición Conceptual. normales La cantidad de deben Es la cantidad de glucosa en Analizada en un azúcar sangre en ayunas, fluctuar entre: base a analizada Cuantitativa 99.67mg/dlGlicemia llamado glucosa concentració en una muestra mediante n mg/dL. 102.63mg/dl± de sangre. glucómetro 5. digital.. BI BL IO. EFECTO HIPOGLICEMIANTE. Variable s. RM. 6. Definiciones Operacionale. III.. RESULTADOS 14. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA N° 1. Identificación preliminar de los metabolitos secundarios del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia, según la Olga Lock (Prueba de la Gota). Ensayos. Metabolitos secundarios. Extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia. LiebermannBurchard. Esteroides. +. Diclorometánico. Triterpenoides. ++. Quinonas Esteroides. ++. M IC. Bortranger LiebermannBurchard. A. Extracto. UI. Triterpenoides. Acuoso /Acido. Leucoantocianidinas Saponinas Taninos. ++ -. -. O. BI. Y. BI BL IO. TE CA. Rosenheim Espuma Gelatina. Leyenda. +. A. DE. Acuoso. Alcaloides Flavonoides. AC I. FA. Mayer Shinoda. ++ +. RM. Dragendorff. Flavonoides Taninos Alcaloides Alcaloides Compuestos fenólicos Alcaloides. Q. Shinoda Gelatina Dragendorff Mayer Cloruro férrico. Etanólico. +. (+++) = Abundante cantidad. (++) = Regular cantidad. (+) = Poca cantidad. (-) = Ausencia de metabolitos. 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Glicemia mg/dL. *p= 0.000. 500. 470.83. 450 400 355.5 350. M IC. A. 300. UI. 250. O. Q. 200. 106.83. Y. 92.1667. A. 100. 149. BI. 150. AC I. 50. RM. 0. Aloxano Aloxano +sinSSF 0.9% tratamiento. Aloxano + Glibenclamida. Aloxano+ +Morinda Morinda Aloxano citrifolia 2g/Kg p.c citrifolia 2g/Kg p.c. Aloxano Aloxano+ +Morinda Morinda citrifolia 4g/Kg p.c citrifolia 4g/Kg p.c. DE. FA. Blanco. BI BL IO. TE CA. FIGURA No 1: Efecto del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia en Rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida. * Según ANOVA. Fuente. Investigadoras. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA N°2. Test Tukey del efecto del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia en Rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida.. Subconjunto para alfa = 0.05 Tratamiento. N. 1. 2. 6. 92,1667. Aloxano + Glibenclamida. 6. 106,8333. Aloxano + Morinda citrifolia 2g/Kg p.c.. 6. 149,0000. Aloxano + SSF 0.9%. 6. Aloxano + Morinda citrifolia 4g/Kg p.c.. 6. Q. UI. M IC. A. Blanco. BI. O. 355,5000. AC I. A. Y. 470,8333 ,802. ,197. RM. Sig.. BI BL IO. TE CA. DE. FA. Fuente. Investigadoras. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 68.55% 70.00%. 62.20%. 60.00%. 50.00%. M IC. A. 40.00%. 16.30%. O. Q. UI. 30.00%. BI. 20.00%. Y. 7.50%. AC I. A. 10.00%. FA. Aloxano + Glibenclamida 5mg/Kg p.c. Aloxano + Morinda + Morinda Aloxano + Morinda Aloxano Aloxano + Morinda citrifolia 2g/Kg p.c citrifolia 4g/Kg p.c citrifolia 2g/Kg p.c citrifolia 4g/Kg p.c. DE. Aloxano Aloxanosin + tratamiento SSF 0.9% 2mL/Kg p.c.. RM. 0.00%. TE CA. FIGURA N° 2. Porcentaje de efecto hipoglicemiante de los tratamientos en Rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida.. BI BL IO. Fuente. Investigadoras. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. En la presente investigación se ha determinado la actividad hipoglicemiante empleando el extracto crudo de Morinda citrifolia (noni) en Rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida con aloxano. En la tabla N° 1, sobre la identificación preliminar de los metabolitos secundarios del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia, según Olga Lock (Prueba de la Gota),. A. se observa la presencia de esteroides y triterpenoides, compuestos fenólicos y. M IC. flavonoides, así como de leucoantocianidinas. Los esteroides son considerados como. UI. derivados de los triterpenoides, compuestos con un esqueleto carbonado basado en. Q. seis unidades de isopreno que derivan biogenéticamente del escualeno (hidrocarburo. BI. O. acíclico de 30 carbonos). Asimismo, los flavonoides son pigmentos y son uno de los. Y. grupos más numerosos y ampliamente distribuidos en el reino vegetal y que pueden. AC I. A. estar presentes en todas las partes de las plantas23.. Tanto para el grupo control, patrón, y problema 1 y 2, la diabetes experimental fue. RM. inducida utilizando el método de Kameswara Rao et al, 1999, realizado mediante. FA. inyección intraperitoneal de aloxano al 5% p/v en dosis de 100 mg/kg. El aloxano. DE. (2,4,5,6-tetraoxipirimidina) produce toxicidad selectiva de las células β pancreáticas, y al dañarlas desempeñan un papel relevante en la etiología y la patogénesis de la. TE CA. diabetes mellitus tanto experimental y humana. Este compuesto establece un ciclo redox con la formación de especies reactivas de oxígeno (ROS), produciendo el ácido. BI BL IO. dialúrico (AH2). La auto-oxidación de AH2 genera radicales superóxido (O-2), estos radicales experimentan una dismutación a peróxido de hidrógeno (H2O2) y radical hidroxilo (OH). La acción de especies reactivas de oxígeno junto a un aumento masivo y simultáneo en la concentración citosólica de calcio causa la destrucción rápida de las células β del páncreas 26,27. En el figura N° 1, se observa una diferencia estadística muy altamente significativa (p = 0.000) del efecto del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia a dosis de 2g/Kg p.c, evidenciándose una reducción de la glicemia. La cual se explicaría por la presencia de compuestos fenólicos y flavonoides en dicho extracto (ver tabla N° 1), pues se ha demostrado que los flavonoides participan en las etapas iniciales de acción. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. 19 Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. de la insulina en el hígado y músculos de ratas in vivo, y uno de sus mecanismos de acción es ligarse y estimular al receptor de membrana insulínico, potencializando la actividad de la enzima tirosina quinasa de dichos receptores, esta enzima se fosforila con la ayuda de adenosina trifosfato (ATP) y sufre un cambio conformacional que a su vez, fosforila a otras muchas, entre ellas a un grupo llamado sustratos del receptor de insulina (IRS, insulin-receptor substrates) que se expresan en los distintos tejidos. El efecto neto es la activación de algunas de estas enzimas y la inactivación de otras.. A. Por este mecanismo, dirige la maquinaria metabólica intracelular para disminuir la. M IC. glicemia 28,29.. Q. UI. Los flavonoides son una clase de compuestos fenólicos de origen vegetal que consta. O. de 15C. Su estructura básica es una benzopirona (dos anillos aromáticos unidos por. BI. un puente de 3C, es decir, C6C3C6). Dependiendo de la estructura y la oxidación en el. A. Y. nivel del anillo C, los flavonoides se dividen en varias subclases. Los principales. AC I. grupos de flavonoides son antocianidinas, flavonoles, flavonas, flavanonas,. RM. isoflavonas, y flavanoles. Asimismo los flavonoides que se han identificado en el fruto de noni son la quercetina, rutina, narcisósido y nicotiflorósido, además de la. DE. FA. presencia de leucoantocianidinas 30-32.. Los flavonoides son apreciados por su amplia actividad farmacológica, pueden unirse. TE CA. a polímeros biológicos como: enzimas, transportadores de hormonas y ADN; quelar iones metálicos transitorios, tales como hierro, cobre y zinc, y catalizar el transporte. BI BL IO. de electrones. Se sabe que al inducir la hiperglicemia a los especímenes con aloxano se incrementa la producción de radicales libres como O-2, H2O2 y OH, provocando un estado de estrés oxidativo, es aquí donde los flavonoides ejercen un papel esencial en la protección frente a los fenómenos de daño oxidativo, donde sus propiedades antioxidantes se dirigen fundamentalmente hacia los radicales ya mencionados 28. Existen estudios sobre un tipo de flavonoide (flavona), que demostró actividad hipoglicemiante debido a que estaría ligado a los receptores proliferadores de peroxisomas o antagonistas de receptores de glucagón, así como estaría favoreciendo la presencia del inhibidor dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV), el cual es una enzima que degrada a la hormona incretina (hormona intestinal esencial que contribuye a la 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. tolerancia a la glucosa). El principal y predominante tipo de incretina es el péptido similar al glucagón (GLP-1, glucagón-like peptide 1), que estimula la secreción de insulina, suprime la liberación de glucagón, enlentece el vaciamiento gástrico, mejora la sensibilidad a la insulina, y reduce el consumo de alimentos 17,28. En un estudio realizado por Eid et al., investigaron los efectos del extracto de Vaccinium vitis idaea (baya) rico en quercetina y principales componentes activos en. A. la captación de glucosa en mioblastos C2C12, demostrándose que éste activaba la. M IC. vía AMPK (proteína cinasa dependiente de adenosina monofosfato-AMP), siendo mecanismo análogo a la de la metformina, ya que esta proteína al ser activada, mejora. Q. UI. la captación de glucosa, estimula la oxidación de ácidos grasos y el metabolismo no. BI. O. oxidativo y reduce la lipogénesis y la gluconeogénesis 11, 33.. Y. Asimismo en un estudio realizado por Bardy et al se demostró que que la quercetina. AC I. A. posee actividad inhibitoria de la α-glucosidasa in vitro. Los inhibidores de la αglucosidasa actuan como inhibidores competitivos de las enzimas necesarias para. RM. digerir hidratos de carbono. La inhibición de esta enzima reduce la tasa de digestión. FA. de los hidratos de carbono.La quercetina también induce la secreción de insulina por. TE CA. pancreáticas34.. DE. la activación directa de los canales de calcio de tipo L en las células beta. El efecto antidiabético de la quercetina también fue investigado en ratones diabéticos. BI BL IO. inducidos con estreptozocina (STZ), en el cual la suplementación dietética con quercetina redujo la glicemia y mejoró las concentraciones de insulina en el suero de dichos ratones. Asimismo, otro estudio confirmó que la quercetina tiene un efecto protector contra el daño de los islotes pancreáticos de ratas diabéticas inducidas con STZ 34. En la tabla N° 2, Test de Tukey para determinar las diferencias significativas entre grupos, se observa que no hay diferencia en la reducción de la glicemia entre los tratamientos con glibenclamida y Morinda citrifolia a 2g/Kg p.c, es decir que este último tiene un efecto hipoglicemiante semejante al de glibenclamida. Asimismo se observa que no hay diferencia entre los tratamientos del grupo control (aloxano + SSF 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 0.9%) y Morinda citrifolia 4g/Kg p.c. evidenciándose que dosis elevadas del extracto aumentan los niveles de glucosa en sangre, infiriéndose que este efecto es independiente de la dosis. Los mecanismos que explicarían este efecto podría ser por un estado de desensibilización de receptores o también denominado down regulation (regulación en descenso), el cual modula la respuesta ante una sobre estimulación y sobresaturación de receptores 11.. A. La desensibilización de receptores, es la pérdida de respuesta de una célula a la acción. M IC. de un ligando, como resultado de la acción de este ligando sobre la célula. La desensibilización homóloga se da cuando la presencia del ligando afecta únicamente. Q. UI. la capacidad de respuesta del receptor ocupado por dicho ligando, produciendo una. O. disminución en la afinidad, como consecuencia de modificaciones conformacionales. BI. del receptor y una reducción en el número de receptores, ya sea por inactivación,. A. Y. secuestro hacia el interior de la célula, degradación metabólica o reducción en la. AC I. síntesis de nuevas moléculas receptoras. En la desensibilización heteróloga se. RM. produce una pérdida de respuesta no sólo a la acción del ligando, sino también a la de agonistas de otros receptores. Por lo tanto, la reducción de la respuesta se debe a. FA. cambios tanto en el receptor como en los elementos posreceptoriales comunes a. DE. diversos tipos de agonistas, esto podría explicar que ante el tratamiento de Morinda. TE CA. citrifolia 4g/Kg p.c, no se observe una disminución de la glicemia35. En un estudio realizado por Guija H et al. Propiedades prooxidantes del camu camu,. BI BL IO. se llegó a la conclusión que el camu camu en presencia de Fe-III en tampón fosfato a pH 7,4 incrementó notablemente la generación de radicales libres a través de una cinética de saturación, efecto que fue dependiente de la concentración del metal 36. Gilberto P, realizo un estudio titulado “los flavonoides: antioxidantes y prooxidantes”, en el cual se proporcionaron evidencias sobre el doble papel que desempeñan los flavonoides como antioxidantes y prooxidantes 37. Los metabolitos secundarios, entre ellos principalmente los flavonoides pueden actuar como agentes prooxidantes, rasgo probablemente responsable de los efectos 22. mutagénicos y genotóxicos. La actividad prooxidante es proporcional al número total. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. de grupos hidroxilo en una molécula de flavonoide, los mono y dihidroxi flavonoides no muestran ninguna actividad prooxidante detectable, mientras que varios grupos hidroxilo, especialmente en el anillo B, aumenta significativamente la producción de radicales hidroxilo en la reacción de Fenton. Algunos de los mecanismos a través de los cuales ejercen sus acciones prooxidantes incluyen la reducción temporal de Cu (II) a Cu (I), la generación de especies reactivas del oxígeno (ERO), así como la afectación de las funciones de los componentes del sistema de defensa antioxidante. M IC. A. nuclear: glutatión y glutatión-S transferasa 37.. En un estudio realizado por Yen et al. Las propiedades prooxidantes de los cuatro. Q. UI. flavonoides parecen ser concentración-dependiente; Se realizó un monitoreo de las. O. propiedades prooxidantes de quercetina, naringenina, hesperidina y morin en. BI. linfocitos humanos. Considerando que la concentración de peróxido de hidrogeno no. A. Y. pudo ser detectado cuando flavonoides naringenina y hesperin se añadieron en el. AC I. intervalo de concentración de 0-200 mM , flavonoides, quercetina y morin incrementó. FA. 200 M, respectivativamente 38.. RM. la concentración de H2O2 en la intervalo de concentraciones de 25 a 200 mM y 125-. DE. Como se ha podido ver hasta ahora, el efecto hipoglicemiante de Morinda citrifolia es favorable al utilizar dosis bajas, que dosis elevadas del mismo. En realidad, existen. TE CA. estudios que demuestran que a dosis bajas de determinado tratamiento si hay un efecto favorable que a dosis elevadas. En un estudio de metaanálisis realizado por Berger J. BI BL IO. et al sobre bajas dosis de aspirina en pacientes con enfermedad cardiovascular estable, la terapia con aspirina en dosis bajas (50-100 mg/día) reduce la incidencia de eventos cardiovasculares adversos y la mortalidad por cualquier causa, y aumenta el riesgo de hemorragia grave; no se observó beneficio adicional con una dosis más alta (300 mg vs 50-100 mg / d) 39,40. Se muestra un efecto significativo de la reducción de glucosa en sangre ante el tratamiento con glibenclamida 5mg/kg p.c (perteneciente al grupo de las sulfonilureas), que estimulan la liberación de insulina al unirse a un sitio específico de los conductos de K+ sensibles a ATP (conductos KATP) en la célula β (receptor de 23 sulfonilureas, SUR 1) e inhibe su actividad. La inhibición del conducto de KATP causa. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. despolarización de la membrana celular y una serie de eventos que conducen a la secreción de insulina. La glibenclamida presenta un efecto insulinotrópico en presencia de hiperglicemia, sin embargo también es efectiva estimulando la insulina a nivel basal, así pues estimula la secreción endógena, sin embargo la síntesis de una hormona no se modifica con las sulfonilureas este mecanismo requiere funcionalidad de las células ß pancreáticas 9, 41.. A. En el figura N° 2, se observa un elevado porcentaje de efecto de un 68.55% en el. M IC. grupo patrón (glibenclamida 5mg/Kg p.c), y de un 62.20% en el tratamiento Morinda citrifolia 2g/kg p.c. Como ya se ha visto, aquel efecto hipoglicemiante de Morinda. Q. UI. citrifolia 2g/Kg p.c. podría atribuirse a la acción de los compuestos fenólicos y. O. flavonoides como la quercetina presentes en el fruto de dicha planta, los cuales tienen. BI. una actividad antioxidante y estarían actuando en la reducción de la concentración de. Y. glucosa en sangre mediante una mayor liberación de insulina a través de la. AC I. A. estimulación de las células β pancreáticas, el aumento en la captación de glucosa por. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. los tejidos y órganos, y la reducción de la absorción intestinal de glucosa 26,40.. V.. CONCLUSIONES 24. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En la presente investigación intitulada “Efecto del extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia en Rattus novergicus cepa holtzman con hiperglicemia inducida”, se concluye:. 1. Los metabolitos secundarios identificados en el extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia. (noni). son,. triterpenoides,. compuestos. fenólicos,. flavonoides. y. A. leucoantocianidinas.. M IC. 2. El extracto crudo del fruto de Morinda citrifolia a la dosis de 2 g/Kg p.c., efecto. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. hipoglicemiante similar a glibenclamida en Rattus novergicus cepa holtzman.. VI.. RECOMENDACIONES 25. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1. Se recomienda que a partir de este estudio se realicen investigaciones que validen las actividades farmacológicas de Morinda citrifolia sobre la hiperglicemia inducida en Rattus novergicus cepa holtzman.. 2. Se recomienda realizar el estudio del efecto hipoglicemiante del fruto de Morinda citrifolia y compararla con los resultados obtenidos en esta investigación.. A. 3. Es necesario contar con estudios donde se compare el efecto del fruto de Morinda. M IC. citrifolia a diferentes concentraciones sobre la hiperglicemia inducida que avalen los. Q. UI. resultados obtenidos en esta investigación.. BI. O. 4. Es recomendable que los investigadores que trabajen y experimenten con animales. Y. están moralmente obligados a manifestarles tres tipos de actitudes: respeto (tratárseles. A. con todas las consideraciones que el caso merece), afecto (considerándolos partícipes. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. con nosotros) y gratitud (reconocimiento por la importante ayuda).. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 26. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

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