Efecto antimicótico in vitro del aceite esencial de Origanum vulgare frente a cepas de Trichophyton rubrum

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. A. Y. TESIS I. BI. O. Q. UI. M. IC A. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. M. AC I. Efecto antimicótico in vitro del aceite esencial de Origanum. BL. IO TE. AUTORES:. CA. DE. FA R. vulgare frente a cepas de Trichophyton rubrum.. Dra. AYALA JARA, Carmen Isolina. BI. ASESOR:. LACHOS MIGUEL, Estrella Vanessa LAURENTE PACHAMANGO, Katherine Guiliana. TRUJILLO – PERÚ 2018. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA. BI. BL. IO TE. CA. M UI Q. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Por haberme dado sabiduría, fortaleza, salud, coraje, y no dejarme solo en los momentos difíciles, y haberme permitido llegar a una de nuestras metas en este largo camino para culminar la carrera profesional de Farmacia y Bioquímica.. IC A. A Dios. A mis maestros De la facultad de Farmacia y Bioquímica que con este andar por la vida influyeron con sus lecciones y experiencias en formarme como persona de bien y prepararnos para los retos que pone la vida.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A Nuestros Padres. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Por su paciencia, por su perseverancia y su amor. Gracias por el apoyo brindado para hacer posible este trabajo.. FA R. M. A Nuestros Hermanos(as). BI. BL. IO TE. CA. DE. Por apoyarnos en los momentos de difíciles, en los cuales estuve a punto de desvanecer.. A Mi Hija A mi Ariana, por ser la razón de mi vida, y mi fortaleza para seguir adelante.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IC A. AGRADECIMIENTO. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. A nuestra asesora, Dra. Carmen I. Ayala Jara, por su dedicación y apoyo, por sus sabias orientaciones y por dirigir esta tesis con gran dedicación.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. Agradecemos sinceramente a la Dra. Anabel González Siccha y al Dr. Francisco Abanto Zamora por impulsar nuestro desarrollo con sus conocimientos, experiencias y valores.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO Dando cumplimiento a lo establecido por el reglamento de la Facultad de. IC A. Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, someto a vuestra. UI. M. honorable consideración y elevado criterio el presente Informe de tesis I, titulado:. Q. Efecto antimicótico in vitro del aceite esencial de Origanum vulgare frente a. Y. BI. O. cepas de Trichophyton rubrum.. AC I. A. Es propicia la oportunidad para evidenciar el más sincero reconocimiento a. M. nuestra Alma Mater y toda su plana docente que con su capacidad, buena voluntad. FA R. y enseñanzas que se imparten día a día contribuyen positivamente a nuestra. DE. formación profesional.. IO TE. CA. Señores miembros del Jurado dejamos a vuestra consideración la calificación del. BI. BL. presente trabajo.. Lachos Miguel Estrella Vanessa. Laurente Pachamango Katherine Guiliana. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. JURADO DICTAMINADOR. IC A. Dra. GONZÁLEZ SICCHA, Anabel………….....PRESIDENTE. UI. M. Dr. ABANTO ZAMORA, Francisco….………......MIEMBRO. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. Dra. AYALA JARA, Carmen………….………….MIEMBRO. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. El objetivo del trabajo de investigación fue determinar el efecto antimicótico in vitro del aceite esencial de Orégano (Origanum vulgare) frente a cepas de Trichophyton. IC A. rubrum. El aceite esencial se obtuvo mediante el método de destilación por arrastre. UI. M. de vapor, al cual se le determinó características organolépticas (color, olor, sabor y. O. Q. textura) y determinaciones físico-químicas (densidad, índice de refracción y pH). Las. BI. cepas obtenidas fueron donadas por la Facultad de Medicina de la Universidad. A. Y. Nacional de Trujillo. Utilizando el método de dilución en medio líquido se determinó. AC I. la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) y por el método de difusión en agar la. FA R. M. Concentración Mínima Fungicida (CMF) del aceite esencial. La Concentración. DE. Mínima Inhibitoria fue de 0.25% y la Concentración Mínima Fungicida de 0.125%,. CA. se le atribuye el efecto antimicótico al timol y carvacrol. Se concluyó que el aceite. BI. BL. rubrum.. IO TE. esencial de Origanum vulgare presenta actividad antimicótica frente a Trichophyton. Palabras claves: Origanum vulgare, aceite esencial, Trichophyton rubrum, Concentración Mínima Inhibitoria, Concentración Mínima Fungicida.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT The aim of the research work was to determine the in vitro antifungal effect of the essential oil of Oregano (Origanum vulgare) against strains of Trichophyton rubrum. The essential oil was obtained by the steam distillation method, to which the. IC A. organoleptic characteristics (color, odor, taste and texture) and physical-chemical. UI. M. determinations (density, refractive index and pH) were determined. The strains were. O. Q. donated by the Faculty of Medicine of the National University of Trujillo. Using the. Y. BI. method of dilution in liquid medium, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and. AC I. A. agar diffusion method were determined, the Minimum Fungicide Concentration (CMF). M. of the essential oil. The Minimum Inhibitory Concentration was 0.25% and the. FA R. Minimum Fungicidal Concentration of 0.125%, the antimycotic effect is attributed to. DE. thymol and carvacrol. It was concluded that the essential oil of Origanum vulgare has. BI. BL. IO TE. CA. an antifungal activity against Trichophyton rubrum.. Key words: Origanum vulgare, essential oil, Trichophyton rubrum, Minimum Inhibitory Concentration, Minimum Fungicide Concentration.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IC A. INDICE. INTRODUCCIÓN…......................................................................... 1. II.. MATERIAL Y MÉTODO… ............................................................. 7. III.. RESULTADOS… ............................................................................. 17. IV.. DISCUSIÓN… ................................................................................. 20. V.. CONCLUSIONES… ........................................................................ 23. VI.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS… ........................................... 24. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. I.. BI. BL. ANEXOS………………………………………………………..........29. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I. INTRODUCCIÓN. Las plantas medicinales han sido utilizadas desde épocas primitivas en el tratamiento de enfermedades. La mayoría de éstas presentan efectos fisiológicos múltiples, debido a la presencia de más de un principio activo. Estos últimos corresponden a compuestos químicos propios de la planta, que están sometidos a. IC A. variables físicas, tales como humedad del suelo, condiciones de luz, temperatura y. UI. M. otros.1. O. Q. La familia de Origanum vulgare crece en Europa y fue introducida en el siglo XVI,. Y. BI. procedente de Oriente Medio. En la lengua helénica se deriva de óros, que significa. AC I. A. montaña.2,3. FA R. M. Dentro de sus características botánicas, se encuentran los tallos que son muy ramificados, por lo cual ésta planta parece un pequeño arbusto. Los tallos a. DE. menudo presentan un color rojizo, estos alcanzan alturas del orden de los 40cm;. CA. sus hojas del orégano se disponen de manera opuesta, presentan forma oval y son. IO TE. muy pequeñas, habitualmente miden entre 5 y 15mm. Las hojas de esta planta. BL. presentan vellosidades por el envés; presentan pequeñas flores, habitualmente de. BI. color blanco, aunque en algunas ocasiones son de color rosado o lila. Estas flores están agrupadas en una inflorescencia (conjunto de flores) apical (en la punta del tallo). Sus flores tienen un néctar muy dulce. 3 Se cultiva en todo el mundo en las latitudes cálidas y templadas, tradicionalmente es cultivada en la zona sur del Perú. Se adapta muy bien a los valles interandinos sobre los 2600 m.s.n.m; y por debajo de esa altitud, la concentración de aceites. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. esenciales (timol y carvacrol) disminuye. Es bien conocido que estos metabolitos secundarios constituyente el potente efecto antifúgico de la planta. 4,5 Origanum vulgare ha demostrado que tiene usos medicinales, culinarios y cosméticos,. además. de. poseer. actividad. analgésica,. antiinflamatoria,. antihipertensiva, antimicrobiano, repelente, antimalaria, antiespasmódico, sirve. IC A. como tratamiento de desórdenes menstruales, enfermedades respiratorias, de sífilis. M. y gonorrea, así también para la diabetes y de uso abortivo. Debido a la capacidad. Q. UI. antioxidante de los extractos acuosos del orégano, se sugiere que éstos pueden ser. Y. BI. O. empleados como sustituto de los antioxidantes sintéticos. 6. AC I. A. Además de sus propiedades medicinales hay que destacar el importante papel que. M. desempeña en nuestra cocina tradicional y está dentro de las hierbas aromáticas y. FA R. medicinales de gran interés en cuanto a su aprovechamiento en la industria. DE. farmacéutica, cosmética, perfumería y alimentaria, y son una alternativa a los. IO TE. mundial. 4,6. CA. cultivos tradicionales, con especies de gran demanda en el mercado actual a nivel. BL. Se conoce como antifúngico o antimicótico a cualquier sustancia capaz de producir. BI. una alteración en las estructuras de una célula fúngica que consiga inhibir su desarrollo, alterando su viabilidad o capacidad de supervivencia, directa o indirectamente, lo que facilita el funcionamiento de los sistemas de defensa del huésped. 7 Las dermatofitosis se conocen con el nombre de tiñas y pertenecen al grupo de las micosis superficiales; afectan los tejidos de la capa cutánea, los pelos y las uñas.. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Estas micosis se clasifican en función de su localización topográfica, y de esta forma reciben los nombres de tinea capitis o tiña de las uñas, tinea cruris o tiña de la región inguinocrural, tinea pedis o tiña de los pies, tinea corporis o tiña del cuerpo, tinea barbae o tiña de la barba y tinea manum o tiña de las manos. Además, se clasifican de acuerdo a su huésped, pueden ser: antropofílicos. IC A. (parásitos de la especie humana), zoofílico (de los animales) o geofílicos (de la. M. tierra).8,9. Q. UI. Todas las tiñas son causadas por hongos que reciben el nombre de dermatofitos,. BI. O. los cuales tienen en común el ser queratinofilicos, esto es, requieren de queratina,. A. Y. por lo que parasitan los tejidos del huésped humano que contienen queratina,. AC I. ocasionando patologías crónicas. Los dermatofitos se integran por tres géneros. FA R. M. micóticos: Trichophyton, Microsporum y Epidermophyton. 8. DE. Trichophyton rubrum es un hongo de crecimiento lento que produce colonias. CA. aplanadas o sobre elevadas, por lo general de color blanco a rojizo, con una. IO TE. superficie algodonosa, aterciopelada o granular lo cual depende de la cepa, el. BL. medio de cultivo que se emplea y la magnitud de la esporulación. El color rojo. BI. cereza característico se observa mejor en el reverso de la colonia; sin embargo, éste se produce recién después de 3 a 4 semanas de incubación. Es posible que algunas cepas carezcan de la pigmentación rojo oscura en el aislamiento primario. Trichophyton rubrum no tiene requerimientos especiales de cultivo.10,11 El crecimiento en el agar dextrosa de Sabouraud es relativamente lento y requiere 4 a 7 días hasta la madurez. Al comienzo, la superficie de la colonia es blanca y vistos con el microscopio, los microconidios de Trichophyton rubrum tienden a. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. presentar formas de lágrimas y suelen distribuirse a cada lado de las hebras de las hifas, lo que origina un aspecto de “pájaros en un cerco”. Raras veces se observan macroconidios multicelulares; cuando están presenten son largos y con forma de lápiz, con paredes lisas, delgadas. Trichophyton rubrum es la causa más frecuente de enfermedades de la piel como el pie de atleta, prurito del jockey y tiña.11. IC A. El pie de atleta es una infección por hongos que aparece entre los dedos de los pies. M. y, algunas veces, en otras partes del pie. Hongos mohosos denominados. Q. UI. dermatofitos ocasionan pie de atleta. Estos hongos viven en la capa exterior de la. Y. BI. O. piel.7,8. AC I. A. El pie de atleta generalmente ocasiona comezón, escozor y ardor con zonas rojas,. M. en especial entre los dedos. Algunas veces la planta y los laterales del pie se. FA R. afectan y tienen el aspecto de una textura gruesa y correosa. 7,8. DE. García, Orozco y Molina en el 2012, en México; realizaron un estudio sobre el. CA. “Efecto antibacteriano del aceite esencial de orégano (Lippia berlandieri) en. IO TE. bacterias patógenas de camarón Litopenaeus vannamei”. En este estudio se. BL. realizaron extractos de aceites vegetales con actividad antimicrobiana no. BI. específica, donde se evaluó la concentración mínima inhibitoria (CMI), así como la capacidad de inhibición en placa del aceite esencial de orégano Lippia verlandieri, con fracción alta en timol (FT) y fracción alta en carvacrol (FC), comparados con antibióticos comerciales, para las bacterias Aeromonas hydrophila, A. salmonicida, Pseudomonas putida, P. fluorescens, Vibrio mimicus, V. alginolyticus, V. fluvialis y V. vulnificus, aisladas de camarón blanco Litopenaeus vannamei. Además, se determinó la supervivencia de camarones infectados con V. alginolyticus tratados. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. con las fracciones FT, FC y Enrofloxacina12. En el Perú, en mayo del año 2001, Albado, Saez y Ataucusi, realizaron un trabajo respecto a la “Composición química y actividad antibacteriana del aceite esencial del Origanum Vulgare (Orégano)”. Determinándose la actividad antimicrobiana del aceite esencial (Carvacrol y Timol) del Origanum vulgare contra todas las. IC A. bacterias evaluadas.13. UI. M. En el Perú, en el año 2012, Maraví evaluó el “Efecto antibacteriano y antifúngico. O. Q. del aceite esencial de Menta Piperita (Menta), Origanum Vulgare (Orégano) Y. Y. BI. Cymbopogon Citratus (Hierba Luisa) sobre Streptococcus Mutans ATCC 25175,. AC I. A. Lactobacillus Acidophilus ATCC 10746 y Cándida Albicans ATCC 90028”. Se. M. determinó el efecto antibacteriano y antifúngico in vitro del aceite esencial de. FA R. Menta piperita (Menta), Origanum vulgare (Orégano) y Cymbopogon citratus. DE. (Hierba Luisa) mediante el método de difusión en agar con disco, sobre. CA. Streptococcus mutans ATCC 25175, Lactobacillus acidophilus ATCC 10746 y. IO TE. Cándida albicans ATCC 90028. Los aceites esenciales se obtuvieron por el. BL. método de arrastre por vapor de agua.14. BI. Villavicencio, Moromi y Salcedo, en el Perú, en el año 2016, realizaron un trabajo titulado “Efecto antimicótico in vitro de Origanum vulgare sobre cepas de Candida albicans”. En este estudio seleccionaron cuatro diferentes geotipos de orégano, de los cuales obtuvieron los aceites esenciales mediante el método de destilación por arrastre con vapor de agua. Obteniendo resultados que mostraron alta actividad antimicótica de todos los aceites a partir de las concentración de 12,5 %. 15. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PROBLEMA. ¿Tiene efecto antimicótico in vitro el aceite esencial de Origanum vulgare frente a cepas de Trichophyton rubrum?. IC A. HIPÓTESIS. UI. M. El aceite esencial de Origanum vulgare presenta efecto antimicótico in vitro frente. Y. BI. O. Q. a cepas de Trichophyton rubrum.. FA R.  OBJETIVO GENERAL. M. AC I. A. OBJETIVOS. DE. Evaluar el efecto antimicótico in vitro del aceite esencial Origanum vulgare. IO TE. CA. frente a cepas de Trichophyton rubrum.. BI. BL.  OBJETIVOS ESPECIFÍCOS. o Obtener el aceite esencial de Origanum vulgare por método de destilación por arraste de vapor. o Determinar la concentración mínima inhibitoria del aceite esencial de Origanum vulgare frente a cepas de Trichophyton rubrum. o Determinar la concentración mínima fungicida del aceite esencial de Origanum vulgare frente a cepas de Trichophyton rubrum.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II. MATERIAL Y MÉTODO. 2.1. Materiales 2.1.1 Material Botánico Se recolectó 7 kg de planta de Origanum vulgare (Orégano) de San Ignacio, Distrito de Sinsicap, Provincia de Otuzco, Región La Libertad-. UI. M. IC A. Perú. (ANEXO 1). Q. 2.1.2 Material Biológico. BI. O. Cepa estandarizada de Trichophyton rubrum ATCC 4438, donada por la. AC I. A. Y. Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.. . Probetas. . CA. DE. a) De vidrio:. FA R. M. 2.1.3 Materiales de Laboratorio. . Tubos de ensayo. BI. BL. IO TE. Pipetas. b) Equipos e instrumentos: . Balanza analítica OHAUS GA-200. . Equipo de montaje por arrastre de vapor. . Incubadora .Precision Scientific CO.Model 6.. . Micropipetas. . Estufa. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. . . Lápices. . Etiquetas. . Plumones. . Fólderes. . Borrador. . Resaltador. . Corrector. . Cuaderno. . Marcador. M. Lapiceros. UI. . Q. Papel bond. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. . IC A. Material de escritorio. DE. c). Autoclave. Agua destilada. BI. BL. IO TE. . CA. d) Material Químico:. e). . Caldo infusión cerebro-corazón (BHI). . Agar Sabouraud. . Dimetilsulfóxido 10% (DMSO). Productos de limpieza . Detergente. . Escobilla. . Franela. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. . . Guardapolvo. . Guantes quirúrgicos. . Mascarilla. . Gorro quirúrgico. . Gafas de seguridad. IC A. Material de protección. UI. M. f). Jabón desinfectante. BI. O. Q. 2.2 Método. Y. 2.2.2 Origanum vulgare (Orégano). AC I. A. 2.2.1.1 Recolección de la muestra:. FA R. M. Se recolectó 7 kg de la planta de Origanum vulgare (Orégano) de San Ignacio, Distrito de Sinsicap, Provincia de Otuzco, Región La Libertad-. CA. DE. Perú. (ANEXO 1). IO TE. 2.2.1.2 Identificación y determinación taxonómica de la especie:. BI. BL. Un ejemplar completo de la planta Origanum vulgare (Orégano) se llevó al Herbarium Truxillense de la Universidad Nacional de Trujillo para su identificación y verificación taxonómica según el sistema filogenético de la especie. (ANEXO 1). 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.1.3 Preparación de la muestra: 16,17 a) Selección de la muestra: El material recolectado. fue. transportado al laboratorio de Tecnología Cosmética de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, donde se eliminó las sustancias extrañas. IC A. presentes en el material vegetal. Asimismo se seleccionó las. M. hojas en buen estado, las cuales fueron utilizadas para. O. Q. UI. obtener el aceite esencial.. AC I. A. eliminar impurezas.. Y. BI. b) Lavado: Se realizó el lavado del material vegetal para. M. c) Pesado: Con ayuda de una balanza se pesó el contenido. FA R. adecuado de hojas para la obtención de 50 ml de aceite. CA. DE. esencial.. IO TE. 2.2.1.4 Obtención del aceite esencial: 16,17. BI. BL. a) Destilación: En un balón se añadió 300 ml de agua el cual se expuso al fuego, éste hirvió y calentó el interior de otro balón que tenía 6000 g de materia prima (hojas) de la que se extrajo el aceite esencial.. El vapor de agua atraviesa las hojas y enriquecido por ella permite subir, siendo obligado a seguir el recorrido de los conductos. En el vapor de agua van mezcladas partículas del aceite esencial.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Para lograr condensar el vapor, se le sometió a un proceso de disminución brusca de temperatura gracias a un refrigerante de agua fría conectado a un grifo externo. Poco a poco el. BI. O. Q. UI. M. IC A. vapor condensó y se obtuvo en un matraz el aceite esencial.. M. Decantación: El destilado obtenido se añadió a una pera de. FA R. b). AC I. A. Y. FIG (1).Equipo de destilación por arrastre de vapor.. decantación, se dejó reposar hasta observar la separación del. DE. agua y del aceite. Como el aceite es menos denso que el. IO TE. CA. agua, éste se encontró encima.. esencial no tenga residuos de agua.. BI. BL. Básicamente, se eliminó el agua. Se procuró que el aceite. c) Conservación: El volumen de aceite esencial obtenido se guarda independientemente en un frasco de vidrio de color ámbar.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.1.5 Determinación del rendimiento de aceite esencial de Origanum. vulgare (Orégano):18. El aceite esencial fue extraído a partir de Origanum vulgare (Orégano) por el método de destilación por arrastre de vapor, se obtuvo un determinado volumen que fue medido mediante el. IC A. método gravimetría-volumétrico, se determinó el porcentaje de. M. rendimiento del aceite esencial (%RAE) aplicando la siguiente. O. Q. UI. fórmula: Vol.AE (mL). M. FA R. Donde:. AC I. A. Y. BI. %RAE = Pmuestra (g) 𝑥100. CA. DE. % RAE: Porcentaje del rendimiento del aceite esencial. mililitros.. Pmuestra: Peso de la muestra a destilar en gramos.. BI. BL. IO TE. Vol. AE: Volumen del aceite esencial obtenido en. 2.2.1.6 Determinaciones Físico-químicas:19,20,21. a) Características organolépticas: Los caracteres organolépticos incluyen color, olor, sabor y textura.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación.  Color: Se añadió aceite esencial hasta las tres cuartas partes de un tubo de ensayo, luego se observó el color, la transparencia, la presencia de partículas y la separación en capas.  Olor: Se tomó una tira de papel secante de aproximadamente 1 cm de ancho por 10cm de largo y se introdujo en la muestra. Luego se percibió el olor y se determinó si corresponde con la. IC A. característica del producto.. UI. M.  Sabor: Se tomó una pequeña alícuota y se probó.. O. Q.  Textura: Se tomó una alícuota y se experimentó mediante el. Y. BI. tacto.. AC I. A. b) Determinación de la densidad:. 𝜌=[. 𝑚2 − 𝑚0 ]𝜌 𝑚1 − 𝑚0 𝑤. CA. DE. FA R. M. Se determinará la densidad por el método del picnómetro.. BI. BL. IO TE. Donde: 𝑚0 = masa del picnómetro vacio 𝑚1 = masa del picnómetro con agua 𝑚2 = masa del picnómetro con el líquido a investigar 𝜌𝑤 = densidad del agua a la temperatura experimental. c) Determinación del índice de refracción: Se determinó con ayuda del Refractómetro de Abbe. Se colocó sobre el prisma de medición una gota de aceite esencial de Origanum vulgare, utilizando para ello una varilla de vidrio que. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. no tenga cantos agudos, se cerró el termo prisma y se ajustó el equipo moviendo el compensador cromático colocando la intersección del retículo entre la línea límite de los campos claro y oscuro. d) Determinación del pH:. IC A. Se determinó el pH de la muestra mediante tira reactiva de pH. Se. M. Introdujo en una muestra de aceite colocada previamente en un. BI. Y. 2.2.2 Cepas de Trichophyton rubrum. O. Q. UI. tubo de ensayo.. AC I. A. 2.2.2.1 Recolección. M. Se utilizó un microorganismo de importancia clínica: cepa. FA R. estandarizada de Trichophyton rubrum ATCC 4438.. DE. 2.2.2.2 Determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI). IO TE. CA. 22,23. BI. BL. Fundamento:. Se define como la menor concentración de antimicrobiano que inhibe el crecimiento micótico luego de 18 a 48 horas de incubación.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. a) Preparación del inóculo micótico de Trichophyton rubrum ATCC 4438:. | Con un asa bacteriológica se tomó esporas de Trichophyton rubrum ATCC 4438 y se resuspendió en un tubo de 5ml de solución salina al 0,85% de NaCl. Se agitó bien y, con ayuda. IC A. de un espectrofotómetro (longitud de onda: 530 nm), se ajustó. M. a una densidad óptica 0,5 McFarland, añadiendo la cantidad. Q. UI. necesaria de solución salina. Esta solución tiene una. BI. O. concentración aproximada de 1x106 - 5x106 UFC/ml.. Y. Posteriormente se realizó una dilución 1:1000 con medio BHI. AC I. A. (concentración de 1x103 - 5x103). Esta última dilución es la. FA R. M. que se utilizó para inocular a los tubos para el CMI.. DE. b) Preparación del volumen de la Concentración mínima. CA. inhibitoria (CMI) para Trichophyton rubrum ATCC 4438. IO TE. Para la determinación de la concentración mínima inhibitoria. BI. BL. se realizó de acuerdo al método M27-A3 estandarizado por el CLSI para el estudio de la sensibilidad, adaptado de acuerdo al proyecto de investigación. Para las diluciones del aceite se preparó inicialmente a una concentración del 25% del aceite con caldo BHI mas DMS 2%, posteriormente se diluyó. (ANEXO 2) Al finalizar, se diluyó al tercio en tubos de 13 x 100 de 0,6 ml de. caldo. BHI. estéril,. teniendo. como. resultado. las. concentraciones del aceite, se incubó a 37ºC por 48 horas.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La lectura del CMI se hizo visualmente a las 48 h de incubación comparando la turbidez de los tubos con la del control. (ANEXO 3). 2.2.2.3 Determinación de la Concentración mínima fungicida (CMF) 22,23. IC A. Fundamento:. UI. M. Se define como la menor concentración de antimicrobiano capaz. Y. BI. O. Q. de reducir en un 99.9% la densidad de población micótica.. AC I. A. Se seleccionó los tubos que no presenta turbidez, se resembró 100. M. µl de solución por diseminación en placas de Agar Sabouraud. FA R. 2%. Las placas fueron incubadas a 37 °C por 24 horas,. DE. transcurrido este tiempo se contó el número de unidades. CA. formadoras de colonias (UFC). (ANEXO 4). BI. BL. IO TE. Las pruebas se realizó por triplicado.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III. RESULTADOS. Tabla 1. Determinación del rendimiento del aceite esencial de Origanum vulgare (Orégano). Peso de muestra. 6000 g.. Volumen de aceite esencial.. IC A. Porcentaje de Rendimiento del aceite esencial (%RAE). UI. M. 50 mL 0.8%. AC I. A. Y. BI. O. Q. % RAE. FA R. M. Tabla 2. Características organolépticas del aceite esencial de. CA. DE. Origanum vulgare (Orégano). IO TE. Características organolépticas Amarillento. BI. BL. Color Olor. Aromático. Sabor. Amargo. Textura. Aceitoso. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 3. Determinación de las características Físico- químicas del aceite esencial de Origanum vulgare (Orégano). Características Físico químicas del aceite esencial de Origanum vulgare (Orégano). 0.92. pH. 5. UI. M. IC A. Densidad. Q. 1.47. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Índice de Refracción. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 4. Determinación de la Concentración Mínima Inhibitoria y Concentración Mínima Fungicida del aceite esencial de Origanum vulgare (Orégano) Concentraciones finales del aceite.. Resultado final. 1. 1. 2. UI. 0.25. M. 0.5. Q. 3. CMI. O. 4. 0.125. BI. CMF. IC A. Tubo Nº. 0.0625. AC I. A. Y. 5. 0.03125 0.015625. 8. 0.0078125. 9. 0.0039063. 10. 0.0019531. BL. IO TE. CA. DE. FA R. 7. M. 6. BI. CMI - CMF. N° Tubo. Porcentaje. CMI (concentración mínima inhibitoria). 3. 0.25%. CMF (concentración mínima fungicida). 4. 0.125%. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. El uso de plantas medicinales son una nueva alternativa en tratamientos farmacológicos, ya que contiene sustancias que van a potenciarse entre sí para obtener el efecto deseado. Estudios realizados sobre diversas plantas medicinales buscan explicar y dar a conocer sus propiedades antibacterianas y antifúngicas frente a diversos microorganismos. IC A. patológicos.. M. Desde antes, se desconocía los efectos beneficios del orégano en la salud, pero en los. BI. O. Q. UI. últimos años existe numerosas investigaciones entorno al orégano y sus propiedades. ,23. A. Y. En la tabla N° 1, se muestra el rendimiento del aceite esencial de Origanum vulgare. AC I. (orégano) el cual fue de 0.8%, este porcentaje es atribuido a un conjunto de factores. FA R. M. climáticos, la altitud del lugar de cultivo, tipo de suelo, por la época de recolección y el método de extracción. Además indica que el porcentaje puede variar por el tiempo. DE. transcurrido entre la recolección y el proceso de extracción del aceite esencial. Según. IO TE BL. la planta. 24. CA. fichas técnicas, las estaciones de primavera y verano, son ideales para la recolección de. BI. En la tabla N° 2, según las determinaciones organolépticas obtenidas del aceite esencial de Origanum vulgare (orégano), muestra un color característico amarillento. Un olor aromático; algunos autores lo describen como un olor fuerte picante. Además tiene un sabor amargo y textura aceitosa característico de un aceite esencial.. 15. En la tabla N° 3, según lo obtenido de las características físico-químicas del aceite esencial de Origanum vulgare (orégano), éste tiene una densidad de 0.92 g/ml, un índice. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. de refracción de 1.47 y un pH 5. De acuerdo a investigaciones anteriores, el valor del índice de refracción y densidad está relacionado con la presencia y cantidad de compuestos oxigenados aromáticos (fenoles) que presente la planta. Con respecto a la determinación del pH, los aceites esenciales de alta calidad presentan pH cercanos a 5 (máximo 5.8), los cuales se les caracteriza como. IC A. aceites esenciales ácidos. 13. UI. M. En la tabla N° 4, se demuestra que el aceite esencial de Origanum vulgare (orégano). O. Q. tiene efecto inhibitorio y fungicida frente a Trichophyton rubrum. El tubo N° 3. Y. BI. presentó turbidez con una Concentración Mínima Inhibitoria de 0.5%. Asimismo el. AC I. A. sembrado del tubo N° 4 presentó 4 x102 UFC/ ml con una Concentración Mínima. M. fungicida de 0.125%, al cual se le atribuye a metabolitos secundarios Timol y Carvacrol. DE. FA R. de Origanum vulgare. 14,15. CA. En un estudio, el orégano del género Origanum presenta dentro de sus compuestos. IO TE. químicos: grupos fenólicos; los cuales; han sido estudiados y evaluados frente a patógenos Gram positivos y Gram negativos, demostrando un alto poder antibacteriano. BI. BL. y antifúngico debido a la presencia del timol y carvacrol. 14. En otro estudio, se evaluó la actividad antimicótica del género Origanum. En los aceites esenciales Origanum x intercedens, Origanum x majoricum (Arequipa) y Origanum vulgare L (Tacna, Jauja), donde se identificó por Cromatografía de GasesEspectrometría de Masas (CG/EM), más de treinta componentes químicos, el más importante fue timol en concentraciones de 5,86 % a 14,71 % y carvacrol entre 0,53 % a 0,88%, los cuales son los componentes con altos niveles de actividad antifúngica. 15. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En este contexto, se puede afirmar que la actividad antimicótica observada en este trabajo podría ser atribuida a una interacción o efecto sinérgico de los principios activos. 14,15. El aceite esencial del Orégano constituye una alternativa terapéutica buena; sin. IC A. embargo, referimos que los experimentos in vitro tienen sus limitaciones en cuanto a la. UI. M. posible eficacia in vivo, los resultados de este estudio merecen atención respecto al. O. Q. efecto citotóxico de dicho aceite esencial. Por lo tanto, se propone realizar futuras. Y. BI. investigaciones para evaluar posibles efecto citotóxico del aceite esencial de Origanum. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. vulgare (Orégano). 26. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.. CONCLUSIONES. 1. Se obtuvo el aceite esencial de Origanum vulgare de calidad óptima. 2. La concentración mínima inhibitoria del aceite esencial de Origanum vulgare frente a cepas de Trichophyton rubrum fue de 0.25%. 3. La concentración mínima fungicida del aceite esencial de Origanum vulgare. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. frente a cepas de Trichophyton rubrum fue de 0.125%.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 1. Ismael, I. Fitofármacos- intervención. [Revista en Internet]. 2007 [Fecha de acceso:. 18. de. enero. 2018];. 5(10).. Disponible. en:. http://files.sld.cu/mednat/files/2012/01/fitofarmacos-intervencion-educativa.pdf. 2. Muñoz, L. Plantas medicinales españolas: origanum vulgare l. (Lamiaceae) 1˚ed.. Madrid:. McGraw-Hill Interamericana; 2002. p. 273-. IC A. (Orégano).. M. 279.. Q. UI. 3. Aguilar, X; Valle, G; González, G; Murillo, B. Guía de cultivo de orégano. 1 ˚ed.. BI. O. Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C. Instituto Politécnico. AC I. Sur. México; 2013. p.17-20.. A. Y. Nacional No. 195 Col. Playa Palo de Santa Rita Sur. La Paz, Baja California. Elsevier;. FA R. M. 4. Silva, A. El orégano, aroma de salud. [Monografía del Internet]. 2014. Madrid: [Consulta. 17. de. enero. 2018].. Disponible. en:. DE. http://www.saludvida.sld.cu/articulo/2014/09/08/el-oregano-aroma-de-salud.. CA. 5. Tellez, L. Determinación de timol y carvacrol en hojas de orégano por HPLC. IO TE. FL. Revista de la Sociedad Química del Perú. [Revista en Internet] 2014 17. de. enero. 2017];. 80(4).. Disponible. en:. BL. [Consultado. BI. http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1810634X201400 0400007&lng=es&nrm=iso. 6. Arcila, C; Loarca, G; Lecona, S; González, E. El orégano: propiedades, composición y actividad biológica de sus componentes. 2˚ed. University of Illinois, Urbana-Champaign.EE.UU; 2004. p.123-141. 7. Gregorí, B. Estructura y actividad de los antifúngicos. Revista cubana farmacológica. [Revista en Internet] 2014 [Consultado 17 de octubre. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2016];39(2).Disponibleen:http://www.bvs.sld.cu/revistas/far/vol39_2_05/far122 05.htm. 8. Romero, R. Microbiología y parasitología humana. 3º ed. Médica Panamericana .Argentina; 2007. p. 1119. 9. Burstein, Z. La dermatología de hoy. [Revista en Internet] 2014 [Consultado 17 de. octubre. 2017];. 48(1).. Disponible. en:. http://www. fihu −. IC A. diagnostico. org. pe/revista/numeros/2004/may − jun04/117 − 121. html.. UI. M. 10. Bailey, C; Scott, A. Diagnostico microbiológico. 12º ed. Médica Panamericana.. O. Q. Argentina; 2009. p. 663.. C. Diagnostico microbiológico. 6º ed.. Médica Panamericana.. Y. BI. 11. Koneman,. AC I. A. Argentina; 2008. p.1141.. M. 12. García, M; Orozco, C; Molina, C. Efecto antibacteriano del aceite esencial de. FA R. orégano (Lippia berlandieri) en bacterias patógenas de camarón Litopenaeus. DE. vannamei. Revista Tecnológica del Valle del Yaqui, Sonora. México. [Revista. CA. en Internet] 2014 [Consultado 16 de octubre 2017]; 10(4).Disponible en:. IO TE. http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0188-. BL. 88972012000300002.. BI. 13. Albado, P., Saez, E., Flores, G. Composición química y actividad antibacteriana del aceite esencial del Origanum vulgare (orégano). Rev Med Hered [Revista en Internet] 2001 [Consultado 13 de febrero 2018]; 12( 1 ): 16-19. Disponible en: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1018130X2001000100004&lng=es. 14. Maraví G. Efecto antibacteriano y antifúngico del aceite esencial de: Menta Piperita (Menta), Origanum Vulgare (Orégano) y Cymbopogon Citratus (Hierba Luisa) sobre Streptococcus Mutans Atcc 25175, Lactobacillus Acidophilus Atcc. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 10746 y cándida Albicans Atcc 90028. [Revista en Internet] 2012 [Consultado 18. de. octubre. 2016];. 1(1).. Disponible. en:. http://www.cop.org.pe/bib/tesis/GISELLA%20GIOVANNA%20MARAVI%20I NGA.pdf. 15. Villavicencio, G.; Astelu, J. Efecto Antimicótico in vitro de Origanum vulgare sobre cepas de Candida albicans. Odontología Sanmarquina. [Revista en. IC A. Internet]. 2016 [Consultado 12 de febrero 2018]; 19(2): 5-8. Disponible en:. UI. M. http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/odont/article/view/12907.. O. Q. 16. Armijo C. Modelamiento y simulación del proceso de extracción de aceites. Y. BI. esenciales mediante la destilación por arrastre con vapor. Revista Peruana de. 2017];. 15(2).. Disponible. en:. M. octubre. AC I. A. Química e Ingeniería Química. [Revista en Internet] 2016 [Consultado 17 de. FA R. http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/quim/article/view/4967/40. DE. 35.. CA. 17. Cerutti, M; Neumayer, F. Introducción a la obtención de aceite esencial de. IO TE. limón. [Revista en Internet] 2004 [Consultado 10 de enero 2018]; 7(12).. BL. Disponible en: http://www.redalyc.org/pdf/877/87701214.pdf. BI. 18. Bertha Bocún de Linares, Gilmer Zari Gil, Segundo Guillermo Ruiz, Marilú Soto Vásquez, Edmundo Vengas Casanova, Armando Cuéllar, Lorenzo Medina Zumarán. Guía de Prácticas Asignatura de Farmacognosia. Universidad Nacional de Trujillo. 2017. 19. Marca M. Actividad antimicótica “in vitro” del aceite esencial Cinnamomun zeylanicum Breyn “canela” frente a cándida albicans ATCC 6538. [Revista en Internet] 2012 [Consultado 10 de enero 2018]; 1(1). Disponible en:. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. http://200.37.105.196:8080/bitstream/handle/unjbg/202/87_2013_Marca_Cuello _MR_FACS_Farmacia_y_Bioquimica_2013.pdf?sequence=1. 20. Huamani G. Laboratorio de Fisicoquímica I. [Revista en Internet] 2012 [Consultado. 22. de. enero. 2018];. 1(1).. Disponible. en:. http://www.geocities.ws/todolostrabajossallo/fico4.pdf. 21. Paz M. Uso Industrial de plantas aromáticas y medicinales: análisis químico de. de. febrero. 2018];. 1(1).. M. 13. Disponible. en:. UI. [Consultado. IC A. plantas aromáticas y medicinales. módulo iii. España. [Revista en Internet] 2009. O. Q. http://ocw.upm.es/ingenieria-agroforestal/uso-industrial-de-plantas-aromaticas-. Y. BI. ymedicinales/contenidos/material-de-clase/tema12.pdf.. AC I. A. 22. Cano C. Actividad antimicótica in vitro y elucidación estructural del aceite. M. esencial de las hojas de Minthostachys mollis “muña”. Revista Peruana de. 2017];. 15(2).. Disponible. en:. DE. octubre. FA R. Química e Ingeniería Química. [Revista en Internet] 2007 [Consultado 17 de. CA. http://cybertesis.unmsm.edu.pe/bitstream/cybertesis/2573/1/Cano_pc.pdf. IO TE. 23. Alzamora Libertad. Medicina Tradicional en el Perú: Actividad Antimicrobiana. BL. in vitro de los Aceites Esenciales Extraídos de Algunas Plantas Aromáticas.. BI. Anales de la Facultad de Medicina Universidad Nacional Mayor de San Marcos. 2001; 62 (2): 156-61. 24. ACEVEDO, D., NAVARRO, M., MONROY, L. Composición Química del Aceite Esencial de Hojas de Orégano (Origanum vulgare). Inf. tecnol. [Revista en Internet] 2013 [Consultado 13 de febrero 2018]; 24(4): 43-48. Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718076420130004 00005&lng=es&nrm=iso. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 25. Namuche, J.; Valdiviezo, J. Características fisicoquímicas y porcentaje relativo de los componentes hidrocarbonados y oxigenados del aceite esencial de las hojas de Lanta cámara L. “Santa María”. . [Tesis]. Disponible en:. http://dspace.unitru.edu.pe/bitstream/handle/UNITRU/5851/Namuche%20Mach co%20Juan%20Carlos%202017.pdf?sequence=1 26. Ayala L, Silvana N, Zocarrato I, Gómez S. Utilización del orégano vulgar. IC A. (Origanum vulgare) como fitobiótico en conejos de ceba. (Spanish). Rev Cuba. UI. M. Cienc Agric. [Revista en Internet]. 2011. [Consultado 2 de febrero 2018];. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. 45(2):159-61. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Q. UI. M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. ANEXOS. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO Nº1. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Identificación y verificación taxonómica de la planta Origarum Vulgare (Orégano). 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO Nº2 Preparación de las soluciones stock del aceite.. 0,5. 0,5. 5. Nº3. 2. 10. 0,5. 1,5. 2,5. Nº4. 4. 2,5. 0,5. 0,5. 1,25. Nº5. 4. 2,5. 0,25. 0,625. Nº6. 4. 2,5. 0,25. 1,75. 0,3125. Nº7. 7. 0,3125. 0,5. 0,5. 0,15625. Nº8. 7. 0,3125. 0,75. 0,078125. Nº9. 7. 0,3125. 0,25. 1,75. 0,0390625. Nº10. 10. 0,0390625. 1. 1. 0,01953125. Nº11. UI. 10. M. 0,75. FA R. DE CA. 0,25. BI. BL. IO TE. AC I. A. Y. BI. O. Q. 2. M. IC A. Tubo Concentración Transferir A un tubo con Concentración Tubo N° (ml) caldo BHI mas resultante DMS2 2% 1 20 1 1 10 Nº2. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO N°3 Preparación de la concentración del inóculo de acuerdo a la escala de Mac farland. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. por nefelometría.. CMI: 0.25% TUBO 3. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO N°4. Concentración mínima fungicida con un crecimiento de 4 x10 2 UFC/ ml del tubo N° 4 como la concentración más baja que reduce el crecimiento ≥ 99% con. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. respecto al inóculo inicial.. CMF: 0.125% TUBO 4. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

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