“Efecto relajante del decocto de semillas de Mirabilis jalapa en intestino de Cavia porcellus”

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ESCUELA DE POSGRADO. NACI ONAL D E. I LLO UJ. DO. -U. NT. UNIV. I. D DA. TR. ER S. UNIDAD DE POSGRADO EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA. RA. “Efecto relajante del decocto de semillas de Mirabilis jalapa en intestino. PO SG. de Cavia porcellus”. DE. TESIS. PARA OPTAR EL GRADO ACADÉMICO DE. BL IO. Autor. TE CA. DOCTOR EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA. : Dr. Arbayza Fructuoso, Juan Delfín. BI. Asesor. : Ms. Alva Borjas, Marco Antonio. TRUJILLO –PERÚ 2019 N° de Registro: __________. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PO SG. RA. DO. -U. Dr. Roberto Osmundo Ybañez Julca Presidente. NT. JURADO DE TESIS. BI. BL IO. TE CA. DE. Dr. Segundo Guillermo Ruiz Reyes Secretario. Dr. Juan Delfín Arbayza Fructuoso Asesor. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Dedicatoria A mi padre Santiago Alva Rodríguez que desde el cielo me ilumina para seguir en este camino, a mi madre Domínica Borjas Herrera que con su fuerza y dedicación nos supo dejar esa gran lección, a mis hermanos por esa alegría que nos caracteriza, la unión y el respecto que nos enseñaron nuestros. BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. RA. DO. -U. NT. padres.. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Agradecimiento. Mi profundo agradecimiento a los Doctores Roberto Osmundo Ybañez Julca, Segundo Guillermo Ruiz Reyes, Juan Delfín Arbayza Fructuoso, mi asesor, e Iván Quispe Díaz docentes de la Universidad Nacional de Trujillo por su gran apoyo en la realización de este trabajo de. BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. RA. DO. -U. NT. investigación.. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN Señores miembros del jurado:. En cumplimiento con las normas expuestas en el reglamento de grados de la Escuela de Post grado de la Universidad Nacional de Trujillo someto a su consideración la tesis doctoral intitulada: EFECTO. NT. RELAJANTE DEL DECOCTO DE SEMILLAS DE Mirabilis jalapa EN INTESTINO DE Cavia porcellus, con el propósito de optar el grado de Doctor en Farmacia y Bioquímica.. -U. Agradezco a todos los docentes que han forjado sus enseñanzas y experiencias en mi formación. BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. RA. DO. profesional.. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE. RESUMEN……………………………………………………….……………………………..…..………. vii ABSTRACT……………………………………………………………………..………………………..… viii I.. INTRODUCCIÓN………………………………………………..….…………………………….…. 1. II.. MATERIAL Y MÉTODOS……………………………………………………………………………. 13. NT. III. RESULTADOS……………………………………………………………………………………….. 20. CONCLUSIONES…………………………………………………………………………………….. 46. DO. V.. -U. IV. DISCUSIÓN…………………………………………………………………………………………... 41. RA. VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS……………………….………………………………….…… 47. BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. VII. ANEXOS………………………………………………………………………………………………. 52. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la fitodinamia y el efecto relajante de las semillas de Mirabilis jalapa en intestino de Cavia porcellus. Material y método: se determinó la dosis efectiva 50 mediante el método de Trevan en una porción aislada del íleon de 18 especímenes de Cavia porcellus, se indujo la contracción con reactivos químicos y relajación con fármacos antagonistas a. NT. acetilcolina y musculotrópico, para enfrentarlos con el decocto de las semillas de Mirabilis jalapa al. -U. 5%, usando el equipo Power Labs, para determinar su efecto relajante. Se comparó el tono in vitro. DO. del íleon de Cavia porcellus con atropina, clorfenamina, papaverina frente al decocto de semillas de. RA. Mirabilis jalapa 5%, así como, la fuerza en Newton producida por los contracturantes: acetilcolina, histamina, cloruro de bario, cloruro de potasio frente a la fuerza de relajación del decocto de semillas. PO SG. de Mirabilis jalapa 5%. Adicionalmente se determinó la capacidad antioxidante del decocto mediante el DPPH● así como el efecto sobre estrés oxidativo inducido por H 2O2 en intestino de Rattus. DE. norvegicus Holtzman. Resultado: Se observó que el decocto de las semillas de Mirabilis jalapa al. TE CA. 5% relajó el músculo liso intestinal de Cavia porcellus. Conclusiones: Se demostró que el decocto de las semillas de Mirabilis jalapa 5% tiene efecto relajante sobre el musculo liso de intestinal de. BL IO. Cavia porcellus que involucra probablemente a receptores muscarínicos M2 y M3.. BI. Palabras clave: Mirabilis jalapa, “buenas tardes”, peróxido de hidrógeno, receptores M2, M3, radicales libres.. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. The objective of this investigation is to evaluate phytodynamics and the relaxing effect of Mirabilis jalapa seed in the intestine of the Cavia porcellus. Materials and methods: the dose was determined to be 50% effective by way of the Trevan method on an isolated portion of the ileon of 18 specimens of Cavia porcellus, contraction was induced with chemical reagents, relaxation was achieved with. NT. acetylcholine antagonists and musculotropics in response to the decoction of Mirabilis jalapa at 5%.. -U. These results where obtained using Power Labs to determine its relaxing effect.. DO. A comparison was undertaken between the in vitro tones of the Cavia porcellus ileum with atropine,. RA. chlorphenamine and papaverine against 5% decoction of Mirabilis jalapa seeds. Another comparison was realized comparing force, measured in Newton units, produced by the contractionary agents:. PO SG. acetylcholine, histamine, barium chloride and potassium chloride and the Mirabilis jalapa seeds at 5% decoction. Additionally, the antioxidant capacity of the decoction was determined via the DPPH ●, as. DE. well as the effects over oxidative stress induced by H2O2 in the intestine of Rattus norvegicus Holzman.. TE CA. Results: One can see that Mirabilis jalapa seeds decoction at 5% caused a relaxing effect on the Cavia porcellus intestinal smooth muscle. Conclusions: It was demonstrated that Mirabilis jalapa. BL IO. seed decoction at 5% have a relaxing effect on the Cavia porcellus intestinal smooth muscle and its effect probably involves muscarinic receptor: M2 and M3.. BI. Keyword: Mirabilis jalapa, “good afternoon”, hydrogen peroxide, M2 and M3 receptors, free radicals.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.- INTRODUCCIÓN:. “El uso de la medicina tradicional en el tratamiento de enfermedades es una capacitación que se ha llevado a cabo desde épocas antiguas y ha demostrado que es una opción destacada entre otras opciones que beneficia a individuos y grupos que supervisan y vigilan la utilización de plantas restauradoras. El rango rústico donde se utiliza este activo, manteniendo su estima y uso social; la. NT. medicina tradicional es un recurso fundamental para la salud humana. Las plantas y los árboles. -U. empleados son la base para el desarrollo de la medicina moderna, y en algunas zonas rurales e. DO. indígenas, son el único recurso del que disponen a falta de instituciones médicas y recursos. RA. monetarios para la adquisición de medicina moderna” (1,2).. PO SG. “Las plantas medicinales tienen importantes contribuciones en el sistema de salud para el bienestar de los pobladores como el principal recurso de solución para la mayoría de la población del país. Las plantas tienen una estima saludable, así como, de acuerdo con la población local, tienen propiedades. DE. medicinales y personalizadas o mágicas” (1).. TE CA. “Según la Organización Mundial de la Salud (OMS), más de 3.500 millones de personas en el mundo en desarrollo dependen de las plantas medicinales como componentes de su atención médica. La. BL IO. gran mayoría de las personas (70-80%) en África consulta a médicos tradicionales para su atención médica. La medicina tradicional ha sido enfocada para alcanzar los objetivos de una cobertura más. BI. amplia de la atención primaria de salud, no solo en África sino también en todos los países del mundo. Es el tratamiento médico de primera elección para al menos el 80% de los africanos que sufren de fiebre alta y otras dolencias comunes” (2). Asimismo, “el 80% de la población mundial utiliza las plantas como principal remedio medicinal, según nos señala la (OMS). Esta práctica está asociada al empirismo en muchos casos, y a la falta de estudios químicos, clínicos y epidemiológicos que confirmen de forma fehaciente los efectos fisiológicos de las plantas y los principios activos responsables, teniendo en cuenta que el 25% de los 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. fármacos existentes se obtienen de extractos vegetales, o bien se han sintetizado a partir de sustancias halladas en la investigación fitoquímica” (3). Si bien se sabe en la actualidad que existen medicamentos para combatir el cólico intestinal, hay plantas medicinales que se usan para el mismo fin, con la investigación científica se han comprobado muchos tratamientos que estaban como conocimientos populares en conocimiento científico (4,5). Por lo tanto, las plantas medicinales son ampliamente utilizadas en el tratamiento de numerosas. NT. enfermedades humanas y del ganado en diferentes partes del mundo (2).. -U. “La contracción de los músculos lisos está desencadenada por el aumento brusco de la concentración. DO. de Ca2+ en el citoplasma de las células musculares. Sin embargo, el retículo sarcoplásmico de las. RA. células musculares lisas está menos desarrollado que el de las células musculares esqueléticas, y el Ca2+ liberado por este orgánulo puede dar lugar únicamente a la fase inicial de la contracción del. PO SG. músculo liso. La difusión de Ca2+ extracelular hacia la célula muscular lisa a través de su membrana plasmática es la responsable de las contracciones sostenidas. Este Ca2+ entra principalmente a través. DE. de canales para el Ca2+ sensibles al voltaje y localizados en la membrana plasmática. La apertura de. TE CA. estos canales está graduada por la intensidad de la despolarización; cuando mayor es la despolarización, más cantidad de Ca2+ entrará en la célula y más intensa será la contracción del. BL IO. músculo liso. Los acontecimientos que tiene lugar tras la entrada de Ca 2+ en el citoplasma son ligeramente diferentes en el músculo liso que en el músculo estriado. En este último, el Ca 2+ se. BI. combina con la troponina. Sin embargo, en las células musculares lisas no existe troponina. En el músculo liso, el Ca2+ se combina con una proteína citoplasmática denominada calmodulina, que es estructuralmente similar a la troponina. La calmodulina ha sido expuesta previamente en relación con la función del Ca2+ como segundo mensajero en la acción hormonal. Así el complejo Ca2+-calmodulina formado se combina con la quinasa de la cadena ligera de la miosina (MLCK) y la activa; esta enzima cataliza la fosforilación (adición de grupos fosfatos) de las cadenas ligeras de la miosina, que forman parte de los puentes cruzados de miosina. A diferencia de lo que ocurre en las células estriadas, que. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. dan lugar a potenciales de acción de tipo todo o nada, las células musculares lisas pueden presentar despolarizaciones y contracciones graduales sin producir potenciales de acción. En efecto, en muchos tipos de músculos lisos sólo se trasmiten de célula a célula estas despolarizaciones graduales. Cuanto más intensa es la despolarización de una célula muscular lisa, más Ca 2+ entra en su interior y mayor es la cantidad de enzimas MLCK que se activan. Cuanto mayor es la cantidad de enzimas MLCK activadas, más elevado es el número de puentes cruzados que se fosforilan y se pueden unir a la. NT. actina. De esta manera, la despolarización más intensa del músculo liso da lugar a una contracción. -U. también más intensa. La relajación del músculo liso se debe al cierre de los canales del Ca 2+ con. DO. disminución de la concentración citoplasmática de Ca2+” (9)(6)(7)(8).. RA. Existen varios receptores que activan la entrada de calcio extracelular al interior de la célula o liberan calcio desde el retículo sarcoplásmico ocasionando la contracción muscular (7, 8, 10).. PO SG. “Se define fármaco o principio activo como una sustancia pura, químicamente definida, extraída de fuentes naturales o sintetizadas en el laboratorio, que posee acción biológica y que se puede. DE. aprovechar o no, por sus efectos terapéuticos” (9).. TE CA. “La mayoría de los receptores identificados han sido descritos con base en su capacidad para unirse a ligandos específicos. La respuesta celular a una molécula mensajera, designada como ligando. BL IO. (hormona, citosina, factor trófico o neurotransmisor), depende de su enlace o interacción con un receptor específico para el ligando. Generalmente el receptor es una proteína que puede estar. BI. localizada en la superficie de la célula blanco, el citosol o el núcleo. Las interacciones o uniones ligando-receptor son de alta afinidad, no covalentes, y ocasionan un cambio conformacional en el receptor, el cual inicia una serie de reacciones que conducen a un cambio en la función celular” (10). “Los receptores colinérgicos fueron clasificados por Dale en 1914, en dos categorías, muscarínicos y nicotínicos, basándose en la similitud entre los efectos observados por los alcaloides muscarina y nicotina; los receptores muscarínicos median los efectos del neurotransmisor colinérgico en los órganos inervados por el sistema nervioso parasimpático, por lo que están involucrados en muchos. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. procesos fisiológicos, como la contracción del músculo liso. En 1980 Hammer constató que la pirencepina distinguía entre los receptores muscarínicos del cerebro (M1) y los del corazón (M2 cardiaco) y las glándulas (M2 glandulares). La clasificación farmacológica, así como la localización de estos receptores, ha sido posible gracias a la existencia de fármacos agonistas y, fundamentalmente, antagonistas, con selectividad para cada subtipo” (11). “Las células musculares lisas no presentan las estriaciones características de los músculos. NT. esqueléticos y cardiacos. El músculo liso se encuentra en el sistema digestivo, los vasos sanguíneos,. -U. los bronquiolos y los conductos de los sistemas urinario y reproductor. La disposición circular del. DO. músculo liso en estos órganos da lugar a la constricción de la cavidad cuando se contraen las células. RA. musculares. El sistema digestivo también contiene capas de fibras musculares lisas dispuestas de manera longitudinal. Las series de contracciones ondulantes de las capas musculares lisas circular y. PO SG. longitudinal, denominadas peristalsis, empujan el alimento en el sistema digestivo desde uno de sus extremos al otro” (12).. DE. “Muchos de los fármacos de mayor utilidad en la medicina actúan simulando o bloqueando las. TE CA. acciones de los ligandos endógenos que regulan el flujo de iones a través de conductos de la membrana plasmática. Los ligandos naturales incluyen acetilcolina, ácido gamaaminobutírico (GABA). BL IO. y aminoácidos excitatorios (glicina, glutamato, etc.). Cada uno de estos receptores trasmite su señal a través de la membrana plasmática incrementando la conductancia transmembrana del ion pertinente. BI. y modificando así el potencial eléctrico a través de la misma. Por ejemplo, la acetilcolina ocasiona la apertura del conducto iónico en el receptor de acetilcolina nicotínico, lo cual permite que el Na + fluya en el sentido normal de su gradiente de concentración al interior de la célula, y se produzca un potencial posináptico excitativo localizado (despolariza la membrana). Este receptor es un pentámero constituido por cinco subunidades polipetídicas que atraviesan la bicapa lipídica conformando un cilindro. Cuando dos moléculas de acetilcolina se unen a sitios específicos, se producen cambios. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. conformacionales que dan como resultado la apertura del conducto acuoso central, por el que penetran en la célula iones sodio procedente del líquido extracelular” (13).. “Los fármacos antiespasmódicos se agrupan según lo indicado por su mecanismo de acción: a) relajantes inmediatos del músculo liso (mebeverina, los operadores obtienen de papaverina), b) anticolinérgicos (butilhioscina, hioscina, hiosciamina, levocina, dicicloverina, butilescopolamina,. -U. bromuro de otilonio, alverina, fenoverina, rociverina y pirenzepina)”(14).. NT. trimebutina y bromuro de cimetropio), y c) bloqueadores del canales de calcio (bromuro de pinaverio,. DO. Los Antiespasmódicos anticolinérgicos actúan antagonizando a la acetilcolina en los receptores. RA. muscarínicos, se suelen clasificar en anticolinérgicos con estructura de amina terciaria como la atropina, escopolamina y anticolinérgicos con estructura de amonio cuaternario como. PO SG. butilescopolamina, homatropina, metilescopolamina, otilonio, pinaverio. De la misma manera los antiespasmódicos musculotropos tienen acción directa sobre el músculo por mecanismo. DE. desconocido, aunque se considera relacionado con la interferencia en el transporte de ion calcio a. TE CA. través de la membrana del músculo liso, dentro de ellas tenemos mebeverina, papaverina. La utilidad clínica de este grupo de fármacos ha sido puesta en duda. Probablemente deben ser reservados a. BL IO. casos donde los anticolinérgicos estén contraindicados (4,11, 12). “El cólico del lactante es un síndrome caracterizado por llanto excesivo y repentino, de predominio. BI. vespertino, aunque esto es variable, sin causa identificable, entre las dos semanas y los 4 meses de edad, que ocurre en un lactante por lo demás sano, independientemente del tipo de lactancia” (15) “Los antagonistas de los receptores muscarínicos impiden los efectos de la acetilcolina, al bloquear su fijación a los receptores colinérgicos muscarínicos al nivel de los sitios neuroefectores en músculo liso, músculo cardiaco y células glandulares, lo mismo que en ganglios periféricos y sistema nervioso central” (16).. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. “La histamina fue aislada por vez primera en 1907 por Windaus y Vogt. En 1910 Daley y Laidlow estudiaron su efecto biológico y descubrieron que estimulaban a diversos músculos lisos. El advenimiento de nuevas técnicas de investigación hizo posible el descubrimiento de que la histamina mediaba sus efectos a través de cuatro receptores que progresivamente se fueron descubriendo: el receptor H1 en 1966, el receptor H2 en 1972, el receptor H3 en 1983 y el receptor H4 en 2000. En el músculo liso intestinal se hallan receptores H1. El receptor de histamina fue descubierta en 1966, es. NT. una proteína de 56 kDa con 487 aminoácidos que contiene siete cadenas transmembranales. -U. acopladas a la proteína G” (17).. DO. El cloruro de bario es una sal que se usa para contraer el músculo liso intestinal, Ingianna A. Josefina. RA. en su trabajo denominado “Mecanismo de la acción antiespasmódica intestinal de las flores de Matricaria chamomilla L.” lo demuestra. El cloruro de bario es la sustancia de mayor utilización en. PO SG. farmacología experimental como estimulante musculotrópico de la contracción del músculo liso intestinal ya que favorece el desplazamiento del ion calcio en el proceso de acoplamiento contracción. DE. relajación (14).. TE CA. El cloruro de potasio hipermolar entrar al interior de la célula por difusión simple. “La presión realmente significa la suma de todas las fuerzas de las diferentes moléculas que chocan contra una unidad de. BL IO. superficie en un momento dado. Por tanto, cuando la presión es mayor en un lado de la membrana que en el otro, esto significa que la suma de todas las fuerzas de la molécula que chocan con los. BI. canales de ese lado de la membrana es mayor que en el otro lado”. “El inicio y la ejecución de la contracción muscular se producen en las siguientes etapas secuenciales: 1) Un potencial de acción viaja a lo largo de una fibra motora hasta sus terminales sobre las fibras musculares. 2) En cada terminal, el nervio secreta una pequeña cantidad de la sustancia neurotransmisora acetilcolina. 3) La acetilcolina actúa en una zona local de la membrana de la fibra muscular para abrir múltiples canales de cationes activados por acetilcolina a través de moléculas proteicas que flotan en la membrana. 4) La apertura de los canales activados por acetilcolina permite que grandes cantidades de iones sodio. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. difundan hacia el interior de la membrana de la fibra muscular. Esto provoca una despolarización local que, a su vez, conduce a la apertura de los canales de sodio activados por voltaje. Esto inicia un potencial de acción en la membrana. 5) El potencial de acción viaja a lo largo de la membrana de la fibra muscular de la misma manera que los potenciales de acción viajan a lo largo de las membranas de las fibras nerviosas. 6) El potencial de acción despolariza la membrana muscular, el retículo sarcoplásmico libera grandes cantidades de iones calcio. 7) Los iones calcio inician fuerza de. NT. contracción. 8) Los iones calcio son bombeados de nuevo hacia el retículo sarcoplásmico” (18).. -U. Por otro lado, se debe tomar en cuenta que las plantas medicinales en nuestra época están siendo. DO. usadas cada vez más en mayor aumento, porque se encuentran disponibles y que son baratos,. RA. haciendo que los pobladores puedan acceder a ella; incluso en el Perú Es Salud, a nivel nacional tiene dependencias como medicina complementaria que tiene como fin el tratamiento de. PO SG. enfermedades usando plantas medicinales; entonces, es importante el manejo sostenible (19) Existen muchas sustancias químicas que tienen efecto anticolinérgico, que hacen relajar el músculo. DE. liso intestinal, estas sustancias se aplican en casos de cólicos intestinales. Son pocas las plantas. TE CA. medicinales que tienen acción relajante del músculo liso, dentro de los principios activos que tienen esta acción farmacológica tenemos los flavonoides (quercetina, apigenina, kaempferol y rutina, y. BL IO. aceites fundamentales (mirceno, pineno y metileno) (20,21). Mirabilis jalapa en su composición química contiene el siguiente principio activo: Trigonelina, ya que. BI. tiene propiedades antidiarreicas y antipiréticas. El extracto también se sabe que es eficaz en el rejuvenecimiento de pelo y el fortalecimiento de las uñas. Dado que en los pueblos indígenas de México utilizan Mirabilis jalapa para curar muchas enfermedades, incluyendo la disentería, diarrea, dolor muscular y cólico abdominal. Se han hecho estudios con esta planta medicinal, en especial las flores, teniendo acción antiespasmódica (4).. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Mirabilis jalapa es una “planta muy corriente en terrenos yermos cerca de los bosques y en patios y jardines. Nativa de la América del sur, hoy en día se encuentra distribuida por los trópicos y subtrópicos. Es una hierba perenne con grandes raíces tuberosas, muy ramosas, que crece de 3 a 7 dm. de alto. Sus hojas son opuestas, algo carnosas, aovadas, acuminadas, a veces esparcidamente ciliadas. Sus flores se presentan en cimas, involucros campanulados, de 7 a 8 mm. De alto y pubescentes. Su fruto es de 8 a 10 mm. de largo, color negro, arrugado, con pequeñas semillas. NT. rellenando su pericarpio. Las hojas contienen un grupo de compuestos orgánicos análogos, mientras. -U. que la raíz contiene el alcaloide Trigonelina y un compuesto resinoso, al cual debe la raíz su acción. DO. purgativa. En las semillas se encuentran rafidios de oxalato de calcio y un grupo de aminoácidos”(22).. RA. Mirabilis jalapa también se le conoce con los siguientes nombres comunes en todo el mundo: “Buenas tardes”, “Don diego de noche”, “Don pedros”, “Periquitos”, “Maravilla” o “Clavelina” (2).. PO SG. Clásicamente se ha considerado de gran interés en esta fase la determinación de los parámetros DE50 (dosis eficaz en el 50% en los animales), ya que permitirán elegir la dosis que inicialmente se. DE. administraría al hombre. En general se reconoce que la evaluación en el animal es un método. TE CA. aceptable para determinar, que el decocto de semillas de Mirabilis jalapa tiene efecto relajante del músculo liso intestinal, o sea que se aplicaría en casos de cólicos intestinales en seres humanos (23).. BL IO. Existe bibliografía que hace mención al uso que tienen las plantas con efectos antiespasmódicos o relajantes, así, el 2008, Aoki K. et al. en la ciudad de México en el año 2008 realizó un trabajo sobre. BI. el “Estudio farmacológico de la actividad antiespasmódica de flores Mirabilis jalapa Linn”, donde caracterizó algunas propiedades farmacológicas del extracto de flores de Mirabilis jalapa; el estudio concluyó que extracto de Mirabilis jalapa pueden implicar un mecanismo serotoninérgico que, a su vez, interactúa con otros sistemas adrenérgicos (4). En el año 2011 Silva C et al. en la ciudad de Trujillo en el año 2011, realizó un estudio sobre la actividad antiespasmódica de Tessaria integrifolia R. et P. y Artemisa absinthium L. en íleon aislado. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. de cavia porcellus, concluyendo que los infusos al 2% de la Tessaria integrifolia R presenta actividad antiespasmódica (24). En el año 2007 Gutiérrez Y., en la ciudad de Ecuador en el año 2007 realizó un estudio sobre Determinación del efecto analgésico y antiespasmódico de las hojas de albahaca (Ocimun basilicum L.), el fundamento de la “investigación fue buscar dichos efectos a través de técnicas in vivo: Test de Ácido Acético (algesia) y el Test del Aceite de Ricino (espasmódico); empleando tintura de albahaca. NT. al 10% en diferentes dosis; evaluando las reacciones de los animales de experimentación luego de la. -U. administración intraperitoneal y oral de las diferentes sustancias (número de retorcimientos y/o. DO. estiramientos, el tiempo de excreción de las primeras heces diarreicas, el número total de heces y el. RA. número total de heces diarreicas). El análisis fitoquímico de la droga dio como resultado respuestas positivas a los siguientes metabolitos: aceites esenciales, aminoácidos, alcaloides, leucoantocianinas,. PO SG. flavonoides, compuestos fenólicos, triterpenos y/o esteroides, saponinas, taninos; posibles responsables de la actividad analgésica y antiespasmódica” (25).. DE. En el 2005 Serrano L., en la ciudad de México realizó un estudio sobre la “Actividad antiespasmódica. TE CA. de extractos de plantas medicinales en segmentos de íleon de cobayo” y evaluó en vitro la actividad antiespasmódica (relajación) y toxica de los extractos metanólicos y acuosos de las partes aéreas de. BL IO. seis plantas utilizadas en medicina tradicional para el tratamiento de los desórdenes gastrointestinales tipo cólico. Para evaluar la actividad antiespasmódica de los extractos (0.1 – 10 μg/ml) utilizaron. BI. segmentos de íleon aislados de cobayo sumergidos en un baño de órganos en condiciones fisiológicas, midió la amplitud de la contracción inducida con acetilcolina con y sin extracto con un transductor de tensión acoplado a un polígrafo Grass. Concluyó que la actividad antiespasmódica de Matricaria recutita y Ruta graveolens son parcialmente consistentes con su uso en medicina popular para los desórdenes gastrointestinales. Ruta graveolens mostró actividad antiespasmódica y tóxica por lo que se recomienda limitar su uso en medicina popular hasta tener más datos de efectividad y toxicidad de sus fracciones y constituyentes (26).. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Por otro lado, Rosero C, Camacho R, Polanco M, Gómez S en la ciudad de Colombia realizaron un estudio sobre el “Efecto relajante de las hojas de Ocimun Basilicum y Foeniculum vulgare colombianas en íleon aislado de rata”, donde el hinojo y la albahaca han sido usadas por largo tiempo en la medicina popular como antiespasmódicos para mejorar las dolencias gastrointestinales y el cólico intestinal. Evaluaron el efecto in vitro de la infusión al 10% de hojas secas de Ocimum Basilicum (albahaca) y Foeniculum vulgare (hinojo) cundiboyacenses y la mezcla 1:1 de ambas infusiones, en. NT. el tono de íleon pre contraído de rata. Observaron una disminución del tono al comparar con el agua. -U. destilada en cantidades iguales, la cual fue dependiente de la dosis, con una diferencia. DO. estadísticamente significativa, para cada una de las plantas y la mezcla. Concluyeron que no se. RA. encontró un efecto aditivo con la mezcla de ambas plantas. El estudio demostró el efecto relajante de las infusiones de albahaca e hinojo al 10%, en el tono del íleon pre contraído de rata (27).. PO SG. “Las células de los mamíferos producen energía mediante la reducción del oxígeno molecular a agua, por la respiración aeróbica. Durante este proceso se forman especies reactivas de oxígeno: anión. DE. superóxido, radicales hidroxilo y peróxido de hidrógeno. En situaciones de homeostasis, estas. TE CA. moléculas intervienen en la regulación de la función celular, pero la función de antioxidantes es esencial para mantener el estado de equilibrio. Debido a que las especies reactivas de oxígeno son. BL IO. biológicamente reactivas, tienen la posibilidad de interactuar con proteínas, lípidos y ADN. Cuando se producen en exceso parecen estar involucradas en diversos estados patológicos como daño por. BI. reperfusión, demencia y arteriosclerosis” (28). “Los radicales libres son moléculas o fragmentos de moléculas caracterizadas por tener uno o más electrones desapareados en su orbital externo, condición que los toma altamente reactivos. En el ser humano se generan radicales libres en la cadena respiratoria mitocondrial, cuando reacciona el peróxido de hidrógeno con el ion ferroso, por acción catalítica de la ciclooxigenasa, la reacción de vitamina C con el ion ferroso, por acción de la NADPH reductasa, etc. En los seres vivientes existen sistemas de defensa antioxidante que tienen la propiedad de impedir la acción nociva de los radicales. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. libres, habiéndose identificado compuestos con propiedades antioxidantes de naturaleza enzimática como la catalasa, superóxido dismutasa, glutatión peroxidasa, etc., así como sustancias no enzimáticas: ascorbato, ferritina, ceruloplasmina, polifenoles, antocianinas. Considerando especialmente que los resultados experimentales se expresan como el valor IC50, es decir, la concentración de la muestra que produce una inhibición del 50% del radical libre DPPH●. El valor IC50 es dependiente de la concentración del DPPH●, así también como, de la naturaleza del. NT. compuesto antioxidante” (26).. -U. “El Trolox es un análogo hidrófílico de la vitamina E y un agente que secuestra radicales libres. El. DO. Trolox redujo los efectos del etanol sobre las contracciones inducidas a la acetilcolina. Se concluye. RA. que el Trolox podría prevenir el estrés oxidativo inducido por el etanol en el duodeno” (30). Es por ello que el siguiente trabajo justifica evaluar la fitodinamia del efecto relajante que tiene el. PO SG. decocto de semillas de Mirabilis jalapa al 5% in vitro sobre el intestino de Cavia porcellus que relacione:. DE. ¿Tiene efecto relajante el decocto de semillas de Mirabilis jalapa en intestino de Cavia porcellus?. -. TE CA. Objetivo general:. Evaluar la fitodinamia del efecto relajante del decocto de semillas de Mirabilis jalapa en. BL IO. intestino de Cavia porcellus. Objetivos específicos:. Determinar el efecto relajante que tiene el decocto de semillas de Mirabilis jalapa al 5% in. BI. -. vitro sobre el intestino de Cavia porcellus. -. Determinar el efecto del decocto de las semillas de Mirabilis jalapa como relajante in vitro en íleon de Cavia porcellus en relación al tono, amplitud y fuerza con atropina sulfato, clorfenamina maleato y papaverina clorhidrato.. -. Determinar la actividad antioxidante del decocto de semillas de Mirabilis jalapa mediante DPPH●.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. -. Determinar el efecto del decocto de semillas de Mirabilis jalapa sobre el estrés oxidativo. BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. RA. DO. -U. NT. inducido por H2O2 en íleon de Rattus norvegicus Holtzman. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.- MATERIAL Y MÉTODO. 2.1 OBJETO DE ESTUDIO:. 2.1.1.- MATERIAL BOTÁNICO:. La planta de Mirabilis jalapa se adquirió en el centro poblado San Carlos a 6 m.s.n.m., en. NT. -. -U. el Km. 444 de la Carretera Panamericana Norte , en las coordenadas Latitud Sur 08°59'04". DO. y Longitud Oeste 78°37'14", del distrito de Santa, provincia Del Santa, Departamento de. RA. Ancash, fue llevado al Herbario Truxillensis UNT, para su identificación taxonómica, se. Plantae. División:. Magnoliophyta. Clase:. Magnoliopsida. Orden:. Caryophyllales Nictaginaceae Mirabilis. BL IO. Género:. TE CA. Familia:. DE. Reino:. PO SG. identificó con el número de registro HUT 58452.. Mirabilis jalapa L. (2). BI. Especie:. 2.1.2.- MATERIAL ANIMAL: -. Cavia porcellus se adquirió en una agropecuaria del distrito del Porvenir, Trujillo distrito El Porvenir, provincia de Trujillo, departamento La Libertad, de raza Perú, entre hembras y machos, adultos, con un promedio de 400 g. de peso, se emplearon 18 animales. Estuvieron 24 horas de ayuno antes de su sacrificio.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. -. Rattus norvegicus Holtzman, 07 ejemplares, macho, adquiridos en la facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo.. 2.2 INSTRUMENTACIÓN 2.2.1 Fármacos:. - Atropina sulfato 2% ampolla. NT. - Papaverina clorhidrato Sigma. DO. -U. - Clorfenamina maleato ampolla. RA. 2.2.2 Equipos: Equipo de órgano aislado. -. Transductor isométrico. -. Power Labs. -. Cubeta con agua destilada con termostato Safety Termostat Panlab.. -. Dispositivo para oxigenación HP100. -. Espectrofotómetro Diode Array 8452A Hewlett Packard Marca HP. -. Balanza analítica marca Ohaus GA200. BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. -. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.3 MÉTODO Y TÉCNICAS PREPARACIÓN DEL DECOCTO DE SEMILLA DE SEMILLA DE Mirabilis jalapa AL 5% Se molieron las semillas de Mirabilis jalapa en el mortero, se pesó 5 gramos de este molido y se colocaron en un vaso de precipitación de 250 ml de capacidad, enseguida se agregó 100 mL. de agua destilada y finalmente se hizo hervir a 100 grados centígrados por un tiempo de un minuto, las pruebas. NT. se hicieron a 37° C.. -U. Método: Determinación de la Dosis Efectiva 50 del decocto de semillas de Mirabilis jalapa, por el. DO. método de Trevan.. RA. Para sacrificar a los animales se usó la técnica del dislocamiento cervical, método aprobado por la Academia Americana de Veterinaria (AVMA), la porción íleon que se cortó fueron aproximadamente. BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. de 3 cm y se conservaron en una placa Petri que contenía la solución de Tyrode a 37°C.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Primera serie Grupo A1. Efecto relajante de la atropina sulfato en íleon de Cavia porcellus, previamente estimulado con Acetilcolina clorhidrato.. Grupo A2. Efecto relajante del decocto de las semillas de Mirabilis. con Acetilcolina clorhidrato.. Efecto relajante de la Clorfenamina maleato en íleon de Cavia. DO. Grupo B1. -U. Segunda serie. NT. jalapa en íleon de Cavia porcellus, previamente estimulado. RA. porcellus, previamente estimulado con Histamina Efecto relajante del decocto de semilla de Mirabilis jalapa. PO SG. Grupo B2. en íleon de Cavia porcellus previamente estimulado con histamina.. DE. Tercera serie. Efecto relajante de la papaverina clorhidrato en íleon de Cavia. TE CA. Grupo C1. porcellus, previamente estimulado con Bario cloruro.. BI. BL IO. Grupo C2. Grupo D. Efecto relajante del decocto de las semillas de Mirabilis jalapa en íleon de Cavia porcellus, previamente estimulado con Cloruro de bario. Cuarta serie Efecto relajante del decocto de las semillas de Mirabilis jalapa en íleon de Cavia porcellus, previamente estimulado con Cloruro de potasio hipermolar. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Determinación de la Actividad Antioxidante del decocto de semilla de Mirabilis jalapa La actividad antioxidante se determinó con el DPPH● cuya lectura se hizo espectrofotométricamente. Definición de amplitud: Según G. Ardizzi, es la máxima separación de la onda o vibración desde su punto de equilibrio (31). Definición de fuerza de contracción: Cualidad física que nos permite, mediante esfuerzos musculares, vencer una resistencia u oponernos a ella o al menos intentarlo (32).. NT. Definición de tono: ligera tensión en la que se encuentra todo músculo esquelético normal no. -U. comprometido en una acción específica, tensión ligera a la que se encuentra sometido normalmente. DO. todo músculo esquelético en estado de reposo y que desaparece tras el corte del nervio motor, sitúan. RA. esta actividad únicamente en los campos de la neurología y la fisiología (33). Estudio de la relación entre el efecto sobre el estrés oxidativo del decocto de semilla de. PO SG. Mirabilis jalapa y su efecto sobre la musculatura lisa de íleon de rata Cada rata Holtzman.macho (n = 7) se sacrificó por dislocación cervical. Se retiró una porción de íleon. DE. (2 cm) y se colocó en una placa petri con solución de Tyrode a 37°C, la cual contenía (10 -3 M): NaCl. TE CA. 136,9; KCl 2,68; CaCl2 1,8; MgCl2 1,05; NaHCO3 11,9; NaH2PO4 0,42 y glucosa 5,55. Se conectó el tejido al soporte, y un hilo de seda (6-0) en el otro extremo conectó el tejido a un transductor de fuerza). BL IO. (MLT0210/A, ADInstruments Pty Ltd). Los datos experimentales se registraron a través de un sistema PowerLab 26T (AD Instruments) con el programa Chart v5.5 para Windows. Los tejidos se. BI. mantendrán en una solución de Tyrode aireada y a una temperatura de 37 ± 0,5°C en un baño de órganos de 25 mL (Single Channel Modular Organ Bath, modelo LE 11.100, Panlab s.l, ADInstruments Pty Ltd).(34). 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Efecto del decocto de semilla de Mirabilis jalapa sobre el tono basal de íleon de rata Se estabilizará el órgano durante 45-60 min, luego se evaluará el efecto relajante sobre el tono basal de íleon mediante curvas de concentración-respuesta acumulativa de Jalapa a varias concentraciones (1, 10, 100, 500 y 1000 µg/mL) incubadas durante 5 minutos cada una y comparándolas con el tono basal el cual fue considerado como el 100%.(34) Efecto del decocto de semilla de Mirabilis jalapa en íleon de rata precontraido. NT. El efecto de acetilcolina (1 × 10-5 M) se estudiará utilizando un régimen de dosis única con un tiempo. -U. de preincubación de 10 minutos o hasta que se logre la generación de una meseta contráctil estable.. DO. Luego, cada concentración del Jalapa (1, 10, 100, 500 y 1000 µg/mL) estará 5 minutos en contacto. RA. con el tejido.(7) Curvas de concentración respuesta. PO SG. En una serie de experimentos con presencia y ausencia de Jalapa se realizará una contracción con Acetilcolina en dosis crecientes (10-8 a 10-4 M). Y luego se lavará y estabilizará, se realizará la. DE. preincubación con Jalapa (500 µg/mL) durante 20 min, y contracción posterior con Acetilcolina en. TE CA. dosis crecientes (10-8 a 10-4 M) (35). Determinación del efecto antioxidante del decocto de semilla de Mirabilis jalapa. sobre la. BL IO. musculatura lisa de íleon de rata. El protocolo se iniciará generando una meseta contráctil con Acetilcolina 1 × 10 -5 M, luego de ello se. BI. incubará en baño de órganos, Jalapa (500 µg/mL) durante 20 min, posteriormente se adicionará en cantidades acumulativas H2O2. En paralelo se estudiará en una porción nueva de íleon el efecto de H2O2 (0.3125 mM., 0.625 mM., 1.25 mM., 2.5 mM. y 5 mM) en ausencia de Jalapa, que servirá como control. Al final se realizan varios lavados a los tejidos y se generará una nueva contracción con Acetilcolina 1 × 10-5 M (36)(37). 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Análisis estadístico El análisis de los resultados se aplicará mediante la prueba de Análisis de varianza (ANOVA) con un nivel de significancia de p < 0,05 para determinar si hay diferencia significativa entre los grupos de estudio expuestos a diferentes estímulos y concentraciones. Luego se realizará el test de Bonferroni para la prueba de comparaciones múltiples (38) Niveles de significancia. NT. * p<0.05. -U. ** p<0.01. DO. *** p<0.001. BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. RA. **** p <0.0001. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III.- RESULTADOS. Del estudio experimental en la determinación de la curva dosis-respuesta in vitro en íleon de Cavia porcellus, se obtuvieron resultados referentes a las variaciones del tono muscular expresados en centímetros como datos basales, por contracción con acetilcolina y por relajación creciente de decocto de semillas de Mirabilis jalapa al 5%, para hallar la dosis efectiva 50 (DE50). Estos datos se. NT. presentaron desde un punto de vista estadístico como valores centrales (media) y valores dispersivos. -U. (error estándar). Siendo la DE50 de 0,3 ml del decocto de las semillas molidas de M. jalapa.. DO. Del estudio experimental del efecto relajante del decocto de semillas de M. jalapa in vitro en íleon de. RA. Cavia porcellus se obtuvieron resultados referentes a las variaciones del tono muscular expresados en centímetros como datos basales y la respuesta producida por la acetilcolina clorhidrato, atropina. PO SG. sulfato, cloruro de bario, papaverina, histamina, clorfenamina, cloruro de potasio hipermolar. Encontrándose que el decocto de M. jalapa 5% disminuye el efecto contracturante producido por. DE. acetilcolina, cloruro de bario, histamina y cloruro de potasio hipermolar, además se comparó el efecto. TE CA. relajante del decocto de Mirabilis jalapa con atropina, clorfenamina, papaverina encontrándose que la relajación es más notoria cuando se emplea acetilcolina como contracturante. También se midió la. BL IO. fuerza de contracción en Newton que producen estos fármacos contracturantes con el decocto de Mirabilis jalapa como relajante, siendo mejor su acción relajante cuando se emplea acetilcolina. En. BI. cuanto a la actividad antioxidante que tiene el decocto de Mirabilis jalapa, según el método del DPPH●, se observó que si tiene esta actividad.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 70 60 50 40 30 20 10. 0,3 0,5. 1. 1,5. 2. 2,5. 3. 3,5. -U. 0. NT. 0. Leyenda:. PO SG. RA. DO. Figura 1: Dosis Efectiva (DE50) del decocto de semillas de Mirabilis Jalapa en íleon de Cavia porcellus por el método de Trevan.. : dosis mL. decocto. Eje de la Ordenada. : porcentaje de relajación. BI. BL IO. TE CA. DE. Eje de la Abscisa. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 1. Variación porcentual del efecto de Acetilcolina Clorhidrato y Atropina sulfato in vitro en íleon de Cavia porcellus. Amplitud del tono de la musculatura lisa (mm). N°. Basal. Acetilcolina. Atropina. Tono reducción. Clorhidrato 0.006. sulfato. porcentual Atropina. mg./mL.. 0.002 mg./mL.. sulfato 0.002 mg./mL.. NT. experiencia. 39. 95. 92. 2. 46. 112. 3. 34. 116. 4. 29. 5. 28. 6. 31. 112. 96.6. 45. 44. 97.8. 60. 58. 96.7. 80. 75. 93.8. 34.5. 84.7. 82. 96.8. 2.8. 11.6. 11.4. 0.7. DE. PO SG. RA. 111. BI. BL IO. ES. Leyenda:. 99.1. TE CA. X. 96.8. DO. 1. -U. Grupo A1. X. : Promedio. ES. : Error estándar. mm. : milímetros. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) BL IO. TE CA. DE. PO SG. RA. DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. Figura 2. Efecto in vitro de acetilcolina clorhidrato y Atropina sulfato en íleon de Cavia porcellus.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 2: Variación porcentual del efecto de acetilcolina clorhidrato y decocto de Mirabilis jalapa 5% en íleon de Cavia porcellus Grupo A2. Amplitud del tono de la musculatura lisa (mm). experiencia. Decocto Mirabilis. Tono reducción. Basal. clorhidrato. jalapa. porcentual decocto. mm. 0.006 mg./ mL.. 5%. Mirabilis jalapa 5%. 1. 42. 81. 79. 2. 31. 69. 66. 3. 21. 73. 4. 18. 67. 5. 25. 6. -U. DO RA. 70. 97.5 95.6 95.9 97. 70. 67. 95.7. 33. 75. 70. 93.3. X. 28. 69.5. 95.8. ES. 3.6. 2.0. 0.6. TE CA. 72.5 2.0. BL IO. Leyenda:. PO SG. 65. DE. N°. NT. Acetilcolina. : Promedio. ES. : Error estándar. mm. : milímetros. BI. X. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) PO SG. RA. DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Figura 3: Efecto de acetilcolina clorhidrato 0.006 mg. / mL. y decocto de Mirabilis jalapa 5% en. BI. BL IO. TE CA. DE. íleon de Cavia porcellus. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 3: Variación porcentual del efecto de histamina y clorfenamina en íleon de Cavia porcellus Grupo B1. Amplitud del tono de la musculatura lisa (mm.). experiencia. Basal. Histamina. Clorfenamina. Tono reducción. N°. mm.. 0.001 mg./mL.. 0.004 mg./mL.. porcentual clorfenamina 0.004. 31. 10. 2. 6. 25. 20. 3. 5. 16. 4. 3. 16. 5. 5. 6. 5. X. 5. Leyenda:. RA. 80 75 68.8. 19. 15. 79. 28. 25. 89. 22.5. 15.5. 70.7. 2.6. 2.4. 8.0. PO SG. 11. DE. TE CA 0.4. 12. 32.2. BL IO. ES. -U. 6. DO. 1. NT. mg./ ml. : Promedio. E.S.. : Error estándar. mm. : milímetros. BI. X. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) RA. DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PO SG. Figura 4: Efecto de histamina 0.001 mg. /mL. y clorfenamina 0.004 mg. /mL. en íleon de cavia. BI. BL IO. TE CA. DE. porcellus. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 4: Variación porcentual del efecto de histamina 0.001 mg. /mL. y decocto de Mirabilis jalapa 5% en íleon de cavia porcellus Grupo B2. Amplitud del tono de la musculatura lisa (mm.). Experiencia N°. Basal. Histamina. Decocto. Tono reducción. 0.001 mg. / mL.. Mirabilis jalapa. porcentual decocto. 5%. de. mm. 35. 83. 65. 2. 31. 49. 3. 28. 45. 4. 31. 5. 15. 6. 19. X. 26.5. Leyenda:. 35. 77.7. 82. 40. 48.8. 19. 10. 52.6. 24. 20. 83.3. 50. 33.3. 67. 11.2. 7.7. 6. RA. PO SG DE. TE CA 3.1. 61. 30. BL IO. ES. 78. DO. 1. -U. NT. Mirabilis jalapa 5%. : Promedio. ES. : Error estándar. mm. : milímetros. BI. X. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) DE. PO SG. RA. DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Figura 5: Efecto in vitro de histamina 0.001 mg. /mL. y decocto de Mirabilis jalapa 5% en íleon de. BI. BL IO. TE CA. Cavia porcellus. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 5: Variación porcentual del efecto de cloruro de bario y papaverina in vitro en íleon de Cavia porcellus Grupo C1. Amplitud del tono de la musculatura lisa (mm.). experiencia. Basal. N°. mm.. Cloruro de bario. Papaverina. Tono reducción porcentual. 2. 35. 85. 3. 33. 95. 4. 25. 5. 20. 6. 26. PO SG. X. 28.2. TE CA. 94,4. 70. 82,4. 70. 73,7. 82. 72. 87,8. 96. 88. 91,7. 89. 77. 86,5. 89.5. 77. 86,0. 2,2. 3,2. 3,0. BL IO. 2,3. 85. DO. 90. RA. 30. DE. 1. ES. Leyenda:. -U. NT. papaverina. : Promedio. ES. : Error estándar. mm. : milímetros. BI. X. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) PO SG. RA. DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. BL IO. TE CA. DE. Figura 6: Efecto in vitro de cloruro de bario y papaverina en íleon de Cavia porcellus. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 6: Variación porcentual del efecto de cloruro de bario con Mirabilis jalapa 5% en íleon de Cavia porcellus Grupo C2. Amplitud del tono de la musculatura lisa (mm.). Experiencia. Basal. N°. mm.. Cloruro de bario. Decocto de. Tono. Mirabilis jalapa. reducción. 5%. porcentual. de Mirabilis jalapa 5%. 20. 96. 2. 26. 3. 30. 4. 22. PO SG. 5. 26. 42. 90. 45. 50. 89. 50. 56. 92. 48. 52. 88. 43. 49. 33. 96. 50. 52. 26,16. 91,8. 46. 50. 1,4. 1,7. 1,9. TE CA 2,0. BI. BL IO. X ES. 40. DE. 1. 6. Leyenda:. RA. DO. -U. NT. de semillas. X. : Promedio. ES. : Error estándar. mm. : milímetros. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) RA. DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PO SG. Figura 7: Efecto in vitro de cloruro de bario y decocto de Mirabilis jalapa 5% en íleon de Cavia. BI. BL IO. TE CA. DE. porcellus. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) PO SG. RA. DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DE. Figura 8: Efecto in vitro de cloruro de potasio hipermolar y decocto de semillas de. BI. BL IO. TE CA. Mirabilis jalapa 5% en íleon de Cavia porcellus. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 7: Amplitud de la contracción in vitro en íleon de Cavia porcellus con atropina, Clorfenamina, papaverina frente al decocto de semillas de Mirabilis jalapa. Grupo. Sustancias. Tono reducción % X±ES. A1. Acetilcolina vs.. 96,8 ±0,7. 95,8± 0,6. RA. Decocto semillas. -U. Acetilcolina vs.. DO. A2. NT. Atropina sulfato. B1. PO SG. Mirabilis jalapa Histamina vs.. 70,7± 8,0. Clorfenamina. Histamina vs.. 67,0± 6,0. TE CA. B2. DE. maleato. Decocto semillas. BL IO. Mirabilis jalapa. BI. C1. Cloruro de bario vs.. 86,0±3,0. Papaverina clorhidrato. C2. Cloruro de bario vs.. 50,0±1,9. Decocto semillas Mirabilis jalapa. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 8: Fuerzas de contracción del íleon de Cavia porcellus en Newton (N) Fuerza de contracción del íleon de Cavia Fármacos. porcellus en Newton (N). Acetilcolina. 0.059. Decocto de semillas de Mirabilis jalapa 5% 0.003 Histamina. 0.010. NT. Decocto de semillas de Mirabilis jalapa 5%. -U. 0.008 0.040. DO. Cloruro de bario. RA. Decocto de semillas de Mirabilis jalapa 5%. PO SG. Cloruro de potasio. 0.005 0.020. Decocto de semillas de Mirabilis jalapa 5%. BI. BL IO. TE CA. DE. 0.005. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) RA. DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. Figura 9: Efecto de M. jalapa sobre el tono basal de íleon de rata. Figura 10: Curva del efecto de M. jalapa sobre el tono basal de íleon de rata. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) PO SG. RA. DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. BL IO. TE CA. DE. Figura 11: Efecto de M. Jalapa en íleon de rata precontraido con acetilcolina. Figura 12: Curva: efecto de M. Jalapa en íleon de rata precontraido con acetilcolina. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. Figura 13: Curvas de concentración respuesta. RA. DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 39 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) DO. -U. NT. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RA. Figura 14: Estudio de la relación entre el efecto antioxidante de Mirabilis Jalapa y su efecto sobre la. BI. BL IO. TE CA. DE. PO SG. musculatura lisa de íleon de rata. Figura 15: Comparación de la contracción del músculo liso en rata cuando se usa M. jalapa, H2O2 y M. jalapa y H2O2 juntos.. 40 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV. DISCUSIÓN. Para hallar la DE 50 según el método de Trevan en la que se utiliza dosis creciente del decocto de Mirabilis jalapa 5% sobre íleon de Cavia porcellus, en el eje de las abscisas se tiene dosis mililitros decocto y en el eje de las ordenadas el porcentaje de relajación, tal como se puede observar en la. NT. figura 1, la dosis efectiva 50 fue 0.3 ml, esta dosis se usó en todas las pruebas realizadas. Se determinó la DE50 para evidencia de la dosis exacta a usar como punto de partida durante los. -U. ensayos in vitro.. DO. En la tabla 1, se observa la variación porcentual del efecto de acetilcolina como contracturante y. RA. atropina como relajante del músculo liso intestinal de Cavia porcellus, siendo 96,8 % el promedio del. PO SG. efecto relajante de la atropina; este efecto relajante se debe a que la atropina inhibe competitivamente los receptores muscarínicos (39).. DE. “Los receptores muscarínicos están ampliamente distribuidos, y la mayoría de los tejidos tienen más de un subtipo, aunque algunos subtipos suelen predominar en lugares específicos. Los receptores M 1. TE CA. y M3 se encuentran preferentemente en el tejido glandular, M2 en el corazón, M2 y M3 en el músculo liso y M4 en el pulmón.”(11).. BL IO. En cuanto a la atropina en el sistema digestivo se observa reducción del tono, la frecuencia y la amplitud de las ondas peristálticas, la atropina es un fármaco del tipo antagonista muscarínico, es un. BI. antagonista que compite con la acetilcolina por su receptor M2 y M3 (6). En la figura 2, se puede observar el efecto relajante de la atropina y Acetilcolina como contracturante del músculo liso intestinal en Cavia porcellus. Cuando se agrega la acetilcolina se observa en la figura que la curva se eleva, esto es la contracción muscular, en su punto máximo se agrega la atropina, en cuestión de segundos se observa la caída de la curva, o sea la relajación del músculo liso intestinal es inmediato, llevándolo casi hasta el basal.. 41 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(50) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En la tabla 2, podemos observar la variación en milímetros del efecto de acetilcolina como contracturante del músculo liso y decocto de semillas de Mirabilis jalapa 5% como relajante del músculo liso intestinal de Cavia porcellus, se hicieron seis ensayos, siendo 72,5 mm. el promedio del efecto contracturante de la acetilcolina y 69,5 mm. el promedio de efecto de relajación del decocto de semillas de Mirabilis jalapa 5%. En esta tabla podemos dilucidar que el mecanismo de acción del decocto de semillas de Mirabilis jalapa es ocupando los receptores muscarínicos por lo que la acción. NT. inmediata es la relajación del músculo liso intestinal de Cavia porcellus, la variación porcentual del. -U. efecto relajante del decocto de semillas de Mirabilis jalapa 5% frente a la acetilcolina clorhidrato. DO. como contracturante del músculo liso intestinal en Cavia porcellus, siendo 95.8% en promedio el. RA. efecto relajante; aquí podemos observar que el efecto relajante es casi idéntico a atropina. En la figura 3, se puede observar el efecto relajante que tiene el decocto de semilla de Mirabilis. PO SG. jalapa cuando se le enfrenta a acetilcolina como contracturante del músculo liso intestinal en Cavia porcellus in vitro. Si comparamos esta figura con la figura N° 2, podemos ver que casi son idénticos,. TE CA. receptores muscarínicos M2 y M3.. DE. por lo que el decocto de semillas de Mirabilis jalapa por su acción relajante están involucrados los. En la tabla 3, podemos observar la variación en milímetros del efecto de la histamina como. BL IO. contracturante del músculo liso y clorfenamina como relajante del músculo liso intestinal de Cavia porcellus in vitro, siendo 22,5 mm. el promedio del efecto contracturante de la histamina y 15,5 mm.. BI. el promedio del efecto relajante de la clorfenamina. Se puede comprobar que en íleon de Cavia porcellus si existen receptores H1-histaminérgicos (13), la variación porcentual del efecto relajante de la clorfenamina frente a la histamina como contracturante del músculo liso intestinal en Cavia porcellus, siendo 70,7% en promedio el efecto relajante de la clorfenamina. En la tabla 4, se puede observar el efecto relajante del decocto de semillas de Mirabilis jalapa 5% e histamina como contracturante del músculo liso intestinal en Cavia porcellus in vitro. En esta tabla podemos dilucidar que la Histamina no ejerce tanto poder contracturante como la acetilcolina y que. 42 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.