INDUCIDA POR HORMONAS E S T E R O I D E S EN EL MUSCULO U T E R I N O D E L A RATA I

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Texto completo

(1)

U N I V E R S I D A D AUTONDMA Y ’ T R 3 P u L I T A N A

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’ C B S

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BroCoGZA

INFORME D E S E R V I C I O S O C I 4 L

JMODIFICACION DE LA ACTIVIDAD INTRACELULAR DEL CALCIO I N D U C I D A P O R HORMONAS E S T E R O I D E S

E N EL MUSCULO U T E R I N O D E L A RATA

I

--. “CnRLOS HOYO V S D I L L O

Matricula: 78215635

(2)

I NT R 331J C C I ON

Los esteroides gonadales juegan un papel importante

en la regulación de la fisiología uterina. Entre otras

acciones, modifican el tono y la actividad contráctil

d e l m i o m e t r i o . A ~ t u a l m e n t e s e conoce poco de l o s

mecanismos d e a c c i ó n d e e s t a s h o r m o n a s s o b r e l a

actividad miometrial.

Control Hormonal: -

El movimiento del Útero desarrolla varias funciones,

tanto durante el ciclo estral con el transporte de l o s

Óvulos, como en el parto; sin embargo, su actividad

debe reducirse durante l a gestación (Reynolds,l939).

Las hormonas ováricas se clasifican en estrógenos,

andrógenos y progestinas. Los estrógenos aumentan la

contractilidad uterina (Frank y cols.,1929), mientras

q u e l a Progesterona l a disminuye (Allen y .Corner,

1929), a s í como las p r o g e s t i n a s y los a n d r ó g e n o s

(Kubli-Garfias y cols.,

1979;

1980).

Contracción muscular:

Szent-Cyorgyi

(1951)

d e m o s t r ó q u e e? m e c a n i s m o

fundamental de la contracción es l a interac'ción entre

actina y miosina, en presencia de adenosfn trifosfato.

(3)

Se s a b e , que l o mismo o c u r r e en e l m ú s c u l o l i s 0 ( C s a p o , 1 9 7 1 ; D i n i e l y Lodge, 1 9 7 3 ; C a r s t e n , 1971; Hurwitz y S u r i a , 1971; Somiyo y Somlyo,1968).

E l m e c a n i s m o por e l c u a l e l p o t e n c i a l de a c c i ó n desencadena una respuesta m e c á n i c a , r e c i b e e l nombre de a c o p l a m i e n t o electromecánico. Aunque todavía no se comprende bien como el e l p o t e n c i a l de a c c i ó n d i s p a r a l a l i b e r a c i ó n de l o s iones de c a l c i o desde e l r e t í c u l o sarcoplásmico, ( F i n n y P o r t e r , 1975).

- ~i i ó n c a l c i o e s e s e n c i a l p a r a i a c o n t r a c c i ó n , ya

que h a c e p o s i b l e l a i n t e r a c c i ó n e n t r e a c t i n a y

miosina. La tropomiosina es una p r o t e í n a que cubre l o s s i t i o s de i n t e r a c c i ó n d e l a a c t i n a con l a m i o s i n a . En p r e s e n c i a de c a l c i o l a tropomiosina es s u s t i t u i d a por troponina, l a cual hace p o s i b l e l a i n t e r a c c i ó n e n t r e a c t i n a y m i o s i n a , además de aumentar l a a c t i v i d a d

ATPásica de l a miosina (Finn y P o r t e r , 1975).

P o r o t r a p a r t e , l a r e l a j a c i ó n d e l m Ú s c u l o e s q u e l é t i c o s e debe a que e l r e t í c u l o s a r c o p l á s m i c o r e t i r a a l c a l c i o d e l c i t o s o l . En ausencia de c a l c i o , l a tropomiosina obstruye de nuevo l o s s i t i o s de u n i ó n e n t r e a c t i n a y miosina impidiendo l a contracción ( F i n n

y P o r t e r , 1975).

-

En e l músculo l i s o e l a c o p l a n i e n t o e l e c t r o m e c á n i c o no e s t a b i e n d i l u c i d a d o . S i n embargo, se sabe que e l

I

!

(4)

m i o m e t r i o , d e p e n 3 e d e l c a l c i o e x t e r n o p a r a s u

c o n t r a c c i ó n ( F i l o y c o l s . , 1 9 5 0 ) . Además, l a s

c a r a c t e r í s t i c a s i n t r í n s e c a s d e l m i o m e t r i o , g r a n espacio i n t e r c e i u l a r , tamaño c e l u l a r pequeño, r e t í c u l o s a r c o p l á s m i c o r e d u c i d o y p r e s e n c i a de n u m e r o s a s

v e s i c u l a s p i n o c í t i c a s en l a membrana p l a m g t i c a favorecen e l f á c i l i n t e r c a m b i o c e l u l a r con e l medio externo.

Por l o a n t e r i o r , s e podrá c o n s i d e r a r a l a membrana

p i a s m á t i c a como u n s i t i o i m p o - r t a n t e p a r a una i n t e r a c c i ó n e s t e r o i d e - c a l c i o .

ANTECEDENTES.

En 1 9 7 1 , Anderson, F i d e l y S n y d e r m o s t r a r o n l a

e x i s t e n c i a d e una c o r r i e n t e de c a l c i o acompañada por una de sodio para generar e l p o t e n c i a l de acción en e l miometrio. E s t e t r a b a j o fue completado p o r Mironneau

(19761, quien r e l a c i o n ó e s t a s c o r r i e n t e s de s o d i o y

c a l c i o con l a contracción de

l a s

f i b r a s miometriales. E l c a l c i o puede e n t r a r a l a c é l u l a m i o m e t r i a l , fundamentalmente por dos t i p o s de c a n a l e s , los canales

s e n s i b l e s a l v o l t a j e y l o s c a n a l e s o p e r a d o s p o r un

r e c e p t o r , ( B o l t o n , 1979).

-

!

(5)

L o s canales sensibles a 1 v o l t a j e permiten e l paso de c a l c i o cusndo s e abate e l p o t e n c i a l de membrana ( e s

d e c i r e l p o t e n c i a l d e r e p o s o ) , como o c u r r e en l a s

s o l u c i o n r s que t i e n e n elevada l a concsntración de

p o t i s i o . Estas v í a s , pueden s e r bloqueadas por l o s

antagonistas de c a l c i o , (Bolton, 1979).

Los canales operados por u n r e c e p t o r , responden a l o s estímulantes, como 13 a d r r n a l i n a , son e s p e c í f i c o s

para c a d a trasmisor y por l o tanto producen d i f e r e n t e s

caabios en 1 3 permeabilidad a l c a l c i o . Estos canales

pueden a c t i v a r s e aunque e l p o t e n c i a l de membrana sea

b a j o y d i f í c i l m e n t e pueden s e r bloqueados por l o s

antagonistas de c a l c i o , (Bolton, 1979).

L a r e l a j a c i ó n d e l músculo l i s o es producida por l a

disminución d e l c a l c i o i n t r a c e l u l a r l i b r e ; t a n t o por

f i j a c i ó n i n t r a c e l u l a r del c a l c i o (Janis y c o l s . 1977),

como por su expulsión de l a c é l u l a , ( H u r w i t z y cols.,

1973).

?fa y Bose ( 1 9 7 7 ) trabajando con l a t a e n i a c o l i de

cobayo y e l útero de r a t a , han mostrado que l a s a l i d a

de c a l c i o (acoplada a una entrada de s o d i o ) e s más

i m p o r t a n t e p a r a p r o d u c i r l a r e l a j a c i ó n , que l a

f i j a c i ó n d e l c a l c i o en s i t i o s i n t r a c e l u l a r e s . Estos

autores, comprobaron (en l a taenia c o l i d e cobayo y en

e l miometrio de r a t a ) , q u e l a ausencia de s o d i o e s

-

I

I

i

(6)

capaz de producir una c ~ n t r a i c i ó n adicional a la q-20

produce la despolarización con potasio alto (mM).

Con respecto a las hormonas esteroides, s e ha visto

que los metabolitos de la Progesterona pueden ser más

i m p o r t a n t e s e n s u s a c c i o n e s s o b r e l a a c t i v i d a d

mecánica del Útero que ella misaa. Los metabolitos más

a c t i v o s h a n s i d o sus d e r i v a d o s r e d u c i d o s e n l a

p o s i c i ó n

5 ,

e s decir l o s estereoisómeros 56, (ver

figura l), (Kubli-Garfias y cols., 1979).

S e s a b e q u e t a n t o l a P r o g e s t e r o n a c o m o l a

Pregnandiona, la Epipresnanolona y la Pregnanolona

son

a n t a g o n i s t a s d e l c a l c i o ( K u b l i - Y a r f i a s y cols.,

enviado a publicación).

En b a s e a l o a n t e r i o r , s e decidió utilizar d o s

modelos, para estudiar la acción de estos esteroides.

En un m o d e l o , s e activan los canales sensibles al

voltaje y se observa el efecto relajante que tienen

estas hormonas; en e l otro modelo además de activar

los canales sensibles al voltaje, se activa el influjo

de c a l c i o por el intercambiador sodio-calcio. Con

estos modelos, s e esperaba discriminar l a acción d e

l a s h o r m o n a s estudiadas en ambos sistemas. Si las

relajaciones que s e obtuvieran fueran parecidas, s e

esperaría que la acción de las hormonas tambion sería

parecida.

.

c

(7)

~ L O P R E G N A N O L O H A

CH3 I HO H

c=o

5ix-PREGNkNDIONA

O

3 a - H I D R O X I

n

PREGNAN-20

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I

crv'

- 5 h - -0NA

y 3

c- o

CH3 I O

P R O G E S T E R O N A

O

~

EPIPREGNANOLON

.

Y

Figura 1 . Metabalitos 5 e y 5 B reducidos de 12 Progesterona.

(8)

OSJETIVO:

1) Demostrar que e l e f e c t o Ú t e r o r e l a j a n t e d o l a s p r o g e s t i n a s 5 e y 5 5 r e d u c i d a s s o b r e e l ú t e r o

contraído por s o l u c i o n e s despolarizante ( p o t a s i o a l t o )

-

y sodio c e r o e s d i f e r e n t e .

MATERIAL

Y

METODOS:

Los e x p e r i m e n t o s se r e a l i z a r o n en r a t a s hembras v í r g e n e s d e l a c e p a Sprague Dowley ( 1 5 0 - 2 0 0 g ) , en

fase de d i e s t r o , determinado por un exaaen h i s t o l ó g i c o

de un f r o t i s v a g i n a l . Los animales se s a c r i f i c a r o n p o r

d e c a p i t a c i ó n , e x t i r p á n d o s e l e s rápidamente e l ú t e r o , para d i s e c a r l o en medio de una s o l u c i j n Hepos normal ( v e r t a b l a 11, a t e m p s r a t u r a a a b i e n t e . Cada c u e r n o u t e r i n o s e d i v i d i ó en dos p a r t e s i g u a l e s , l a s c u a l e s s e colocaron en un s i s t e m a c o n v e n c i o n a l de r e g i s t r o i s o m é t r i c o , para t e j i d o s a i s l a d o s , en un baa0 de 5 m l , a una temperatura de 37OC y con un burbujeo c o n s t a n t e

de c a r b ó g e n o ( 9 8 % d e o x í g e n o y 2 % d e d i ó x i d o de

carbono). La a c t i v i d a d c o n t r á c t i l d e l músculo u t e r i n o

.

!

I

(9)

TABLA 1

COMPOSICION D E L A S SOLUCIONES (my):

HEPES NORYAL DESPOLARIZANTE

Hepes 10 10

Glucosa 1 1 1 1

Sacarosa

-

-

NaCl 135 9 9 . 6

KC1 4 . 6 40

MgC12 1.2 1 . 2

CaC12 2 . 2 2 . 2

O s m o l a r i d a d 3 2 0 . 4 m O s 320.4mOs

Fuerza iónica - 1 5 9 8 . I 5 9 8

HIPOSODICA

10

1 1

1 9 9 . 2

0 . 0

4 0 1.2 2 . 2

3 2 0 . 4 m O s

.O648

TABLA 2

DOSIS DE L A S H O R M O N A S UTILIZADAS: lis efectivas 8 4 :

HORgONA w / m l mM Relación

PROGESTERONA 32

EPIPREGNANOLONA 15

PREGNANDIONA 13

PRECNANOLONA

a

molar a la

Progesterona

101.7 1 .o0

4 7 . 1 . 4 6

4 1 . 1 . 4 0

2 5 . 1

.

. 2 5

c

(10)

se registró, aodiantr? - I u s 3 2 9 u7 t r i q s s u i t o r á e

tensión F T 0 3 en un polígrafo Grass rn3delo 7 B en serie con una microcomputadora Sol de Processor Technology,

q u e c o n v i e r t e l a s e n a 1 anaiógica en numeros para

grabarlos en un disco magnético.

La tensión a la que se somstió el tejido fué de un

gramo.

Las preparaciones, que generalmente desarrollaron

una actividad espontsnea regular casi inmediatamente a

que se ajustaba la tensión, se dejaron estabilizar por

lo menos 30 minutos antes de hacer ningún cambio. Una

vez estabilizada la actividad contráctil del músculo,

se hizo el cambio de solución. En cada experimento se

probó solo una solución y una hormona. La solución

contracturante, despolarizante o sodio cero (ver tabla

l), se dejó estabilizar cinco minutos, de modo que l a

contracción alcanzara un valor constante, antes d e

añadir la hormona.

En la solución despolarizante (potasio alto), s e

m a n t u v o l a o s m o l a r i d a d f i s i o l ó g i c a b a j a n d o l a

concentración de sodio l o necesario, mientras que en

l a s o l u c i ó n s o d i o c e r o s e e m p l e ó s a c a r o s a p a r a

s u s t i t i u r al s o d i o y c o n s e r v a r l a o s m o l a r i d a d

fisiológica.

,

-

A posar d e que la f u e r z a i ó n i c a e s b a j a en l a

(11)

solución sodio cero ( v e r tabla l ) , , s e 9 3 visto q u e

esto n o produce u n a aumento e n la contracción (Ma y

Bose,

1977).

Las hormonas utiliz,adas fueron l a s s i g u i e n t e s :

Progesterona (4-pregnan-3,20-diona), Epipregnanolona

( 3 a - h i d r o x i - 5 ~ p r e g n a n - 2 0 - o n a ) , P r e g n a n d i o n a

( 5 a - p r e g n a n - 3 B t 2 0 8 - d i o l ) , y P r e g n a n o i o n a

(3

E-hidroxi-5 B-pregnan-20-ona).

Las hormonas se inyectaron a l interior del ballo en

un volumen de 0.05 ml d e Propilen glicol. Para las

dosis, ver la tabla 2 (Yubli-Sarfias y cols.

1979).

La relajación s e midió comparando las áreas bajo

l a s c u r v a s , en porcentajes con respecto a un área

control; la cual s e calculaba como una extrapolación

del valor ya estabilizado de la contracción inducida

con ia solución respectiva. L a s áreas s e calcularon

por medio de l a microcomputsdora con un programa en

BASIC. Este programa tuvo que s e r adaptado a nuestras

c o n d i c i o n e s d e r e g i s t r o , y u t i l i z ó los v a l o r e s

digitalizados de l a actividad contráctil d e l músculo

que la microcomputadora ya había capturado.

-

La relajación también s e midió utilizando otros

parámetros. Por medio de otro programa en BASIC, la

microcornputadora buscó l o s tiempos (en minutos) en que

(12)

!

Figura 2. Sistema de registro y procesamiento de los datos.

A. Ball0 con el tejido uterino. B.Poligrafo. C. 0sciloscopio.D.

Microcomputsdora. E. Impresor.

--.

(13)

s e a l c a n z a b a un 5 3 % d i 1 v a l o r de l a c o n t r a c c i ó n a i

poner l a hormona (tiempos medios de r e l a j a c i j n ) .

Un t e r c e r parametro l o constituyeron los valores de

una s e r i e de muestreos cada minuto (hechos también por l a microcomputadora), d e l v a l o r de l a contracción.

Todos e s t o s p a r a m e t r o s s e compararon, para una misna hormona, e n l o s dos t i p o s de s o l u c i o n e s , por medio de pruebas de t de Student.

RESULTADOS.

La r e l a j a c i ó n u t e r i n a p r o d u c i d a p o r l a s d o s i s e f e c t i v a s 8 4 d e l o s e s t e r o i d e s p r o b a d o s , f u e

s i g n i f i c a t i v a m e n t e ( p < . 0 5 ) d i f e r e n t e , cuando s e

compararon l o s p o r c e n t a j e s de i n h i b i c i ó n en l a s

s o l u c i o n e s c o n t r a c t u r a n t e s por p o t a s i o a l t o y p o r

s o d i o c e r o . Lo mismo o c u r r i ó a l comparar los tiempos

msdios de r e l a j a c i ó n , e x c e p t o para l a pregnandiona, donde l a p fue de .O71 ( n 3 s i g n i f i c a t i v a ) .

Cuando s e conparó e l v a l o r de l a contracción en cada m i n u t o , s e o b s e r v a r o n d i f e r e n c i a s s i g n i f i c a t i v a s , e x c e p t o en dos c a s o s , e s t a s d i f e r e n c i a s s e f u e r o n nayores a l avanzar e l tiempo. Con l a Epipregnanolona l a d i f e r e n c i a no fue s i g n i f i c a t i v a a l primer minuto, pero s í a p a r t i r d e l segundo. Para l a Pregnanolona la

-_

(14)

significancia se presentó cies3e el sexto ninuto, por

lo tanto los tiempos medios de relajación para las dos

soluciones no fueron significavamente diferentes.

En l a s T a b l a s

3 ,

4 , 5, 6, 7 y 8, s e indican l o s

v a l o r e s d e l o s t r e s p a r á m e t r o s a s í c o m o s u s

desviaciones estándar (d.e.), los errores estándar

,

y

el número de experimentos (n). En las figuras

3

a 6,

se muestran las gráficas de los valores de contracción

con respecto al tienpo.

S e o b s 2 r v Ó q u e l a r e l a j a c i ó n e s m a y o r e n l a

contractura por potasio alto que la relajación en la

solución con sodio cero.

!

1

I

DISCüSION.

Soluciones empleadas.

La

solución despolarizante es

u n a s o l u c i ó n i s o t ó n i c a c o n u n a l t o contenido d e

potasio; lo cual, según la ecuación de Coldman, abate

el potencial de reposo. Las fuerzas iónicas de esta

solución y de la solución normal son iguales.

El efecto contracturante de la solución sodio cero,

fue observado por Katase y Tomita (19721, en la taenia

coli d e cobayo. Ma y Bose (1977) l o corroboraron (en

taenia coli d e c o b a y o ) y m o s t r a r o n q u e s e d e b í a

.

(15)

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(16)

i

L A S T A B L A S

5

A 9 Y L A S F I G E R A S 3 A 6 CORFlZSPONDEN R

MUESTREOS D E L VALOR DE L A C O N T R A C C I O N CADA M I N U T O .

E n p o r c e n t a j e s c o n r e s p e c t o a 1 v a l o r d e l a c o n t r a c c i ó n e n e l m i n u t o c e r o ; p e s l a s i g n i f i c a n c i a s e g ú n l a p r u e b a d e t , s e s s i s n i f i c a t i v o y n s no s i g n i f i c a t i v o .

T A B L A

5

PRCIGESTERCINA

C o n t r a c c i ó n p r o d u c i d a p o r :

S O L U C I O N S O D I O M i n . P o r c e n t a j e

1

81.1

2 -

64.8

~

3

54.0

4

46.8

5

41.8

6

37.5

7

34.7

8

31.9

CERCI E r r o r

1.4 2.0 2.8 3.2

3.6

3.7

3.9

4.2

4.1

4.2

S O L U C I O N D E S P O L A R I Z A N T E P o r c e n t a j e E r r o r P

73.5

2.9

.o33

s

55.1

2.8

.o15

s

43.5

2 - 3

.o14

s

36.4

2.2

.o19

s

30.7

1.9

. O 1 8

s

25.8

1.8

.o15

9

22.9

1.7

.O16

s

19.7

1.6

.O18 s

17.3

1.5

.o15

s

15.7

1.3

.O18

s

T A B L A

6

E P I P R E G N A N O L O N A .

S O L U C I O N S O D I O M i n . P o r c e n t a j e

1

87.2

2

74.6

3

65.7

4

59.4

5

55.6

6

51

.O

7

47.6

8

45.0

9

42.8

10

40.5

n 1 = 5 ,

n 2 = 8

- - - - _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

C E R O

Error

1.7

2.4

2.5

2.2

1.9

1.5

2.1

1.9

2.0

2.5

S O L U C I O N D E S P O L A R I Z l N T E P o r c e n t a j e E r r o r P

83.4 1.2

.lo5

n s

57.0

1.4

.O06

s

50.2

1.5

<.o01 s

43.8

1.7

39.0

35.4

1 . 5

68.0

1

..5

.O18

s

S

S S

11

-1.4

II

I,

S S

S

1.4 ll

n

31

- 9

28.8

1 :2

27.1

1 . 1 11

I

(17)

T A B L A 7

P R E G N A N D I O N A

C o n t r a c c i ó n p r o d u c i d a p o r :

S O L U C I O N S O D I O CERO S O L U C I O N D E S P O L I R I Z A N T E

M i n . P o r c e n t a j e E r r o r P o r c e n t a j e E i ' r o r P

1 8 8 . 3 2.1 7 9 . 3 3 . 0 . o 2 9

2 7 3 . 9 2 . 5 6 0 . 2 3.0 . o 0 5

3 6 3 . 6 3 . 2 4 6 . 5 2 . 6 . o 0 2

2 . 3 < . o 0 1

4 5 5 . 4 2 . 9 3 6 . 3

5 5 0 . 3 3 . 1 2 9 . 8 2 . 0

6 4 5 . 5 3 . 1 2 4 . 0 1 . 7

4 3 . 1 2 . 6 1 9 . 4 1 . 6

7

8 4 0 . 6 2 . 7 1 6 . 1 1 . 5

9 3 8 . 2 2 . 1 1 4 . 3 1 . 3

1 0 3 5 . 6 2 . 2 1 7 . 9 1 . 2

n l = 7 , n 2 = 7

11 n n n N N

_ _ _ _ _ _ _ _ - - -

S S S s s S S s S

S -

T A B L A 8

PREGNANOLONA

C o n t r a c c i ó n p r o d u c i d a p o r :

S O L U C I O N S O D I O C E R O S O L U C I O N D E S P O L A R I Z A N T E

M i . n . P o r c e n t a j e E r r o r P o r c e n t a j e E r r o r

1 9 0 . 5 1 . 9 9 0 . 9 1

. o

2 7 1 . O 2 . 9 7 4 . 7 1 . 3

3 5 7 . 5 3 . 3 5 4 . 4 1 . 7 '

4 6 0 . 1 3 . 6 - 5 3 . 6 2 . 1

5 5 5 . 3 3 . 5 4 5 . 3 2 . 4

6 5 1 . 5 3 . 5 4 0 . 8 2 . 5

7 4 8 . 0 3 . 2 3 6 . 1 2 . 7

9 4 5 . 8 j . 4 i 2 . 3 2 . 8

9 4 3 . 5 1 0 4 2 . 5

3.4

3 . 4 2 6 . 0 28.9 -2.9 2 . 8

P . 8 3 9 . 5 1 8 . 2 0 8 . 1 5 7

.o60

.O30 . o 1 3

.

O07

.o04

. o 0 2

(18)

V

JJ

O

0 m

m

i m W

O

(19)
(20)

O

3 N

,-I W

z 9

ul C

i m

O

m

VI

W

a

.

P z O

O

z

V

(21)

O

I-

N

w

4

vi

s,

4

W

W

E

m C A P -3 2 m o w o a

.

. .

..

. .

m

c1

2

P 2. O

r

O

z

V

c

(22)

precisamente a l a a u s e n c i a de s o d i o y no a l a b a j a

fuerza i ó n i c a , a u n a reducción en e l “estado a c t i v o ” d e l músculo ( “ c a t c h s t a t e “ ) , a u n i n c r e n e n t o en l a

p e r m e a b i l i d a d a l c a l c i o , n i a u n decremento en e l r e t i r o d e l c a l c i o d e l c i t o s o l , p o r s e c u e s t r a c i ó n i n t r a c e i u i a r , o por su extrusión t r a n s c e i u i a r .

(1) S e g ú n Ma y B o s e , l a b a j a f u e r z a i ó n i c a no e s r e s p o n s a b l e de l a c o n t r a c t u r a por sodio c e r o ; ya que a l s u s t i t u i r a l NaC1 p o r o t r a s s a l e s , q u r s u b e n l a

fuerza i ó n i c a i g u a l o mss que e l NaC1, no se observa u n a r e l a j a c i ó n s i g n i f i c a t i v a comparada c o n l a q u e

produce l a s mismas m i l i m o l a s d e NaC1. Estos autores concluyeron Q u e l a c o n t r a c t u r a que produce l a b a j a

f u e r z a i ó n i c a e s p o c o s i g n i f i c a t i v a , (Ma y B o s e ,

1977).

( 2 ) En e l músculo l i s o de los moluscos, s e p r e s e n t a

un fenómeno d e contracción sostenida producida por una

reducción d e l estado a c t i v o d e l músculo a l c u a l s e l e l l a m a “ c a t c h s t a t e ” , ( J e i e l l , 1 9 5 9 ) . Ma y B o s e

mostraron que e s t o no s e presentaba en l a c o n t r a c c i ó n

p o r sodio c e r o , (1977).

(3) Ma y Bose eliminaron l a posibilidad de un cambio

e n l a p e r m e a b i l i d a d a l c a l c i o , u t i l i z a n d o u n

-

a n t a g o n i s t a de c a l c i o ( e l D600), observando que e s

incapaz de r e v e r t i r l a c o n t r a c t u r a d e p o t a s i o a l t o

(23)

(70mM). cuando el sodio esta ausente del medio. Esto

significa que aunque el no pueda entrar a la

célula por los canales al voltaje, hay otro

mecanismo que la concentración del

calcio intracelular. En la mismas coldiciones, el

agente quelante

EGTA

produc una relajación mucho mrás

rápida en presencia de sodio quo en su ausencia.

(4)

Por

medio d e estudio con calcio radiactivo y

lantano, Ma y Bose concluyeron que la f r a c c i ó n d e

calcio intracelular eleva a durante la ausencia

I

de

I

sodio, e s la misma que se imina al r e s t i t u i r el

sodio al medio.(Ma y Bose,

-

-

Finalmente, el hecho de q ontractura por sodio

cero dependa poco de la t ura, indica que este

es un proceso ffsico indep e de

ATP; lo

cual,

junto con los hechos ante llevó a

Ma

y Bose a

p r o p o n e r l a e x i s t e n c i i n t e r c a m b i a d o r

s o d i o - c a l c i o en el mÚs semejante al que

existe en el axón del c a l y cols., 1969; Ma y Bose, 1977). Grover y 1981 han dado

más

evidencias para la exist pel relajante d e

este intercambiador

en

e e le rata; aunque

su existencia no ha sido

A c c i ó n d e l a s p r o

progestinas, para con

!

I

.

I

(24)

puede realizarse en varios sitios. Desd? luego qu9 una

a c c i ó n a n i v e l d e s í n t e s i s d e p r o t e í n a s esta

descartada, ya que estos e f e c t o s s o n i n m a d i a t o s .

Ahora, debe discriminarse una acción intracelular de

una extracelular.

Debido al tamaño pequeno de las células miometriaies

y a o t r a s c a r a c t e r í s t i c a y a m e n c i o n a d a s , e l

intercambio con el medio externo esta f a v o r e c i d o .

E s t o j u n t o con el trabajo de Ma y Bose, nos hacen

suponer que las progestinas, en su efecto relajante,

actuan sobre la superficie de la célula miometrial,.es

d e c i r s n l a e n t r a d a o en l a s a l i d a d e l c a l c i o

intracelular.

En cuanto a la entrada de calcio, l a s progestinas

p o d r í a n a f e c t a r a l o s c a n a l e s o p e r a d o s por un

receptor. En tal caso no se observaría una relajación

tan srande en las soluciones despolarizantes, puesto

que estos canales permanecen cerrados; además,se ha

visto que es difícil que los antagonistas al calcio

los afecten, (Bolton, 1979).

P a r a l a s a l i d a d e c a l c i o l a f u n c i ó n d e l

intercambiador sodio-calcio podría ser drsminuida por

las progestinas.

Nuestros resultados indican que la acción de las

progestinas probadas es más notoria en las soluciones

(25)

despolarizantes que en l a s soluziones sodio c 2 r o . Así, l a s progestinas modificarían principalmente l a entrada de c a l c i o por los canales s e n s i b l e s a i v o l t a j e .

En e l c a s o de l a pregnanolona, donde 1s d i f e r e n c i a

e n t r e ambas soluciones e s s i g n i f i c a t i v a s o l o a p a r t i r d e l minuto s e i s , podemos suponer que e s t o s e debe a un

e f e c t o mayor, posiblemente, a f e c t a n d o ambos t i p o s d e

i n f l u j o s de c a l c i o ; s i n embargo, c o n s i d e r a n d o e l

i n t e r v a l o de d i e z m i n u t o s , l a d i f e r e n c i a y a e s s i g n i f i c a t i v a .

CONCLUSIONES.

1 ) En e s t e t r a b a j o , s e ha demostrado q u e l a a c c i ó n

Ú t e r o r e l a j a n t e de l a s p r o g e s t i n a s p r o b a d a s e s

d i f e r e n t e en l a s s o l u c i o n e s d e s p o l a r i z a n t e ( p o r p o t a s i o a l t o ) y s o d i o c e r o . Lo s u a l i n d i c a ' q u e lis

p r o s e s t i n a s r e l a j a n a l m i o n e t r i o , p r i n c i p a l m e n t e g r a c i a s a u n b l o q u e o de l o s c a n a l e s s e n s i b l e s a l

v o l t a j e .

2 ) L o s s i s t e m a s de r e s i s t r o y de p r o c e s a a i e n t o

a u t o m a t i z a d o , empleados en e s t o s e x p e r i m e n t o s , han mostrado s u gran u t i l i d a d en e s t u d i o s f i s i o l ó g i c o s

como e s t e .

(26)

3 ) En o t r o orden de i d e a s . La r e a l i z a c i ó n de e s t e s e r v i c i o s o c i a l mo ha dado una gran e x p e r i e n c i a , pues me permitió darme cuenta de una i n f i n i d a d de d e t a l l e s

y peque5os obstáculos que es necesario tomar en cuenta para l l e v a r a f e l i z t é r m i n o u n e x p e r i m e n t o o u n p r o y e c t o c u a l q u i e r a que e s t e sea. La pianeación y l a visón constante de l o a o b j e t i v o s me p a r e c e n l a gran 1zcciÓn de e s t e s e r v i c i o s o c i a l .

F i n a l m e n t e q u i e r o a g r a d e c e r a m i t u t o r , e l Dr.

K u b l i y a l QFB H é c t o r P o n c e , s u g r a n i n t e r é s en e l d e s a r r o l l o de e s t e p r o y e c t o que me h a p e r m i t i d o

c u m p l i r con e s t e cómpromiso f r e n t e a l a sociedad.

RESUMEN :

S e p r o b a r o n c u a t r o h o r m o n a s e s t e r o i d e s ( P r o g e s t e r o n a , E p i p r e g n a n o l o n a , P r e g n a n d i o n a y P r e g n a n o l o n a ) , s o b r e e l miometrio de l a r a t a , p a r a d e m o s t r a r que e l e f e c t o Ú t e r o r e l a j a n t e de e s t a s hormonas s e r e a l i z a principalmente, por un b l o q u e o a l i n f l u j o de c a l c i o en sus canales s e n s i b l e s a l v o l t a j e .

E s t o s e l o g r ó r e a l i z a n d o p r u e b a s d e t a t r e s p a r á m e t r o s que miden l a r e l a j a c i ó n ( á r e a b a j o l a c u r v a , tiempo medio de r e l a j a c i ó n y m u e s t r e o s d e l

-

(27)

v a l o r de l a contracción a i n t s r v a l o s r e g u l a r e s durante

10 m i n u t o s ) , en dos t i p o s de cantracciones inducidas; una producida en una solución con p o t a s i o a l t o ( 4 O m M )

y o t r a producida por l a ausencia de sodio además d e l

p o t a s i o a l t o . Se u t i l i z ó u n s i s t e m a de r e g i s t r o

i s o m é t r i c o , y una microcomputadora p a r a c a p t u r a r y

a n a l i z a r l a s seflales.

LITERATURA CITADA:

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-19-

rr

3

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:

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Referencias

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