Validación del método analítico para la determinación de creatinina usado en el laboratorio Quintanilla S R L

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. Y. BI O. Q. UI. M. IC A. ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. AC IA. “VALIDACIÓN DEL MÉTODO ANALÍTICO PARA. M. LA DETERMINACIÓN DE CREATININA USADO. FA R. EN EL LABORATORIO QUINTANILLA S.R.L.”. DE. INFORME DE INTERNADO REALIZADO EN EL. QUINTANILLA S.R.L.. BL. IO. TE. CA. ÁREA DE: BIOQUÍMICA DEL LABORATORIO. BI. PARA OPTAR EL TÍTULO DE QUÍMICO FARMACÉUTICO. AUTOR. :. Br. PAREDES LOZANO, EDWIN FRANKLIN.. ASESOR. :. Dr. PIMINCHUMO CARRANZA, RAMÓN.. TRUJILLO – PERÚ 2007. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA A Dios, por darnos la vida, guiar nuestro camino. UI. M. A mis padres, por su ejemplo de lucha,. IC A. y estar en todo momento con nosotros.. BI O. Q. honestidad y amor incondicional.. AC IA. Y. A nuestros hermanos. FA R. M. por su apoyo y cariño de siempre.. A mi tutora de internado:. DE. Castro Guzmán, Judith. CA. y todo el personal que labora en el laboratorio. TE. Quintanilla por apoyarme incondicialmente. BI. BL. IO. para la realización de este trabajo de Investigación.. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTOS. M. de la Universidad Nacional de Trujillo. IC A. A la facultad de Farmacia y Bioquímica. Y. BI O. Q. UI. por la formación profesional recibida.. AC IA. A mis padres y hermanos quienes. M. me apoyaron en todo momento para el. A mi asesor:. TE. CA. DE. FA R. logro de mis objetivos propuestos.. IO. Dr. Ramón Piminchumo carranza. BI. BL. Por las enseñanzas recibidas y por la colaboración para la realización del presente trabajo.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A los señores miembros del jurado: Mg. César Gamarra Sánchez y. M. IC A. Mg. Francisco Saavedra Suarez.. Q. UI. A todos los profesores de la Facultad, quienes. BI O. nos impartieron conocimientos que son. M. AC IA. Y. el soporte de nuestro desarrollo profesional.. FA R. Al laboratorio de la Clínica. DE. Peruano Americana por brindarnos. CA. su apoyo desinteresado en la realización del. particularmente a :. Q.F. Judith Castro Guzmán. BI. BL. IO. TE. Informe de Investigación. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Q. UI. M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AC IA. Y. BI O. JURADO DICTAMINADOR. M. Mg. GAMARRA SÁNCHEZ, CÉSAR.. FA R. Mg. PIMINCHUMO CARRANZA, RAMÓN.. BI. BL. IO. TE. CA. DE. Mg. SAAVEDRA SUAREZ, FRANCISCO.. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN Señores miembros del jurado dictaminador: Dando cumplimiento a lo establecido por el reglamento de Grados y Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, someto a vuestra consideración y elevado criterio profesional el. IC A. presente trabajo de Informe de Investigación de internado titulado:. M. “Validación del Método Analítico para la Determinación de Creatinina propicia. esta. oportunidad. para. manifestarle. Q. Es. UI. Usado en el Laboratorio Quintanilla S.R.L.”.. el. más. sincero. BI O. reconocimiento a esta alma mater y a toda su plana docente, que con su. Y. capacidad y buena voluntad contribuyeron a nuestra formación profesional.. AC IA. Dejo a vuestro criterio señores miembros del jurado dictaminador la. FA R. M. calificación del presente trabajo de investigación científica.. CA. DE. Trujillo, 09 de Noviembre del 2007. BI. BL. IO. TE. PAREDES LOZANO, EDWIN FRANKLIN. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. IC A. Se realizó la validación del método analítico para la determinación de. M. creatinina en el laboratorio Quintanilla S.R.L. cede de la Clínica. UI. Peruano Americana. Antes de empezar la validación se hizo la. BI O. Q. calificación del Fotómetro BPC BioSed, que incluye: a) calificación de. performance. (PQ).. Los. parámetros validados. AC IA. la. Y. la instalación (IQ), b) calificación operacional (OQ) y c) calificación de fueron: Linealidad,. M. precisión, exactitud, sensibilidad y selectividad; parámetros que se tiene. FA R. que realizar para una validación tipo I,. según la USP XXII. De los. DE. parámetros evaluados estadísticamente, se comprobó que el método. CA. analítico para determinación de creatinina es lineal (r2>0.99), preciso. TE. (C.V.≤ 3,9 %), exacto (texp. < ttab.), sensible (según la pendiente, LOD y. BI. BL. IO. LOQ) y selectivo (respuesta no significativa).. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. IC A. The validation of the analytical method for the determination of. UI. M. creatinine was made in the Quintanilla laboratory S.R.L. yields of the the. validation,. the. BI O. Q. American Peruvian Clinic. Before beginning. photometer BPC BioSed qualification was made,. and. c). performance. were: Linearity,. (IQ),. b). Y. installation. qualification. precision,. includes:. a). operational qualification (PQ). The validated. exactitude,. sensitivity. and. FA R. parameters. the. AC IA. (OQ). of. M. qualification. it. selectivity; parameters that must be made for a validation type I,. DE. according to USP XXII. from the statistically parameters evaluated,. TE. CA. it was verified that the analytical method for creatinine determination. IO. is linear (r2 > 0, 99), precise (C.V. = 3,9 %), exact (texp.< ttab), sensible. BI. BL. (according to slope, LOD and LOQ) and selective (nonsignificant answer).. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE. Págs.. PÁGINAS PRELIMINARES. Dedicatória ................................................................................ i Agradecimiento ........................................................................ ii Jurado dictaminador................................................................ iv. IC A. Presentación ............................................................................ v. UI. M. Resumen ................................................................................. vi. AC IA. Y. BI O. Q. Abstract .................................................................................. vii. INTRODUCCIÓN ....................................................... 01. II.. MATERIAL Y MÉTODOS ............................................ 05. III.. RESULTADOS .......................................................... 19. IV.. DISCUSIÓN .............................................................. 21. V.. CONCLUSIONES....................................................... 24. VI.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................. 25. TE. BI. BL. IO. ANEXOS. CA. DE. FA R. M. I.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I. INTRODUCCIÓN: Hoy en día, los laboratorios deben demostrar que sus métodos analíticos proporcionan resultados fiables y adecuados para su finalidad o propósito perseguido, ya que muchas de las decisiones que se toman están basadas en la información. que. estos. resultados. proporcionan.. La. validación. de. las. metodologías, junto a otras actividades englobadas en el control del. IC A. aseguramiento de la calidad, permite demostrar a los laboratorios que sus. UI. M. métodos analíticos proporcionan resultados fiables.. BI O. Q. Un laboratorio de análisis clínico, está en la obligación de implementar el aseguramiento de la calidad en todas las etapas del trabajo llámense éstas: pre-. AC IA. Y. analítica, analítica y post-analítica. De los datos registrados el laboratorio puede detectar tendencias, principalmente si emplea técnicas estadísticas para analizar. FA R. M. resultados. Para lograr el aseguramiento de la calidad, el laboratorio debe disponer de procedimientos de control para comprobar la validez de sus. CA. DE. actividades, especialmente las de ensayo1, 2, 5.. cuya. recopilación. y. evaluación. constituye. una. de. las. IO. generan datos. TE. Todo lo que se puede medir, se puede controlar. Las mediciones. BI. BL. funciones más importantes de un sistema de calidad que pueden usarse efectivamente para el control de procesos. La. medición sistemática puede. tener los siguientes propósitos: a) Verificar la conformidad frente a los requisitos (eficacia), b) Determinar la eficiencia de un proceso (competencia), c) Suministrar datos con los que se hará un análisis de base (validación), d) Identificar variaciones en los procesos (número, frecuencia, fuentes, causas y clases) 3, 5.. -1Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La vigilancia de la salud tanto individual como de la población en general, el desarrollo de un número creciente de técnicas de laboratorio y la mejora continúa de los métodos diagnósticos; requieren la adopción de herramientas. de. gestión. para. una. óptima. implementación. en. los. sistemas y laboratorios de salud. Por estas razones, entre otras, el concepto universal de calidad y el estudio de sus procesos se han de. la. industria. de. la manufactura a las ciencias médicas.. IC A. extendido. y la. M. Abarcando muchos aspectos en los que se incluye el buen servicio. Q. UI. satisfacción del cliente o de los usuarios los que son objetivos primordiales. BI O. para los hospitales y laboratorios que tratan de establecer un sistema de. Y. gestión de la calidad 1.. AC IA. La creatinina es un producto residual de la digestión de proteínas y una. a. FA R. M. medida de la función del riñón. Niveles altos son normalmente debidos problemas nefríticos. Los médicos usan el nivel de creatinina como la señal. DE. directa de cómo los riñones desechan los productos residuales del cuerpo 12.. BI. BL. IO. TE. CA. Estructura de la creatinina:. La creatinina es el producto final del catabolismo de la creatina (o fosfocreatina). La cantidad producida diariamente esta relacionada con la masa muscular. La creatinina es filtrada libremente. por. el. glomérulo. -2Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. (pequeñas cantidades son reabsorbidas y también secretadas por los túbulos renales). El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio. A través de la validación establecemos una evidencia documentada que un procedimiento analítico conducirá, con un alto grado de seguridad a la. IC A. obtención de resultados precisos y exactos dentro de las especificaciones y los. un. proceso debe. establecer,. UI. de. mediante. Q. La validación. M. atributos de calidad previamente establecidos 4, 6.. reproducibilidad,. sensibilidad, especificidad,. límites. Y. parámetros como la. BI O. estudios sistemáticos de laboratorio, los rangos de esas variaciones con. o cuantificación, etc. Así mismo debe demostrar que las. AC IA. de detección. FA R. M. características de dicho proceso cumplen las especificaciones relativas al uso previsto de los resultados analíticos. La validación permite el conocimiento de. DE. las características de funcionamiento del proceso y proporciona un alto. CA. grado de confianza en el mismo y en los resultados obtenidos al aplicarlo. complejos y tienen. muchas. IO. TE. Los procesos en un laboratorio son. BL. posibilidades de sufrir variaciones que pueden afectar al producto final; es. BI. entonces necesario el control de procesos para mantener los niveles esperados de desempeño y para identificar y eliminar las causas de variación; por lo que la validación de los métodos analíticos es uno de los principales avales de que el resultado de un proceso es reproducible, cumple con el uso propuesto y está normalizado, de manera que los resultados que proporciona serán comparables a los de otro proceso en un lugar diferente y viceversa 5, 6.. -3Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La validación demuestra que, siguiendo las actividades de un proceso tal y cómo están descritas, se puede obtener un producto con los requisitos especificados, ya que cada una de las etapas del proceso es diseñada y controlada para tener la máxima seguridad que el producto cumple con las especificaciones. Es por ello. que. en. este. estudio. se. plantea. el. problema siguiente 3, 5.. IC A. ¿El método Analítico para la Determinación de Creatinina Usado. UI. M. en el Laboratorio Quintanilla S.R.L. Cumple con los Parámetros de. BI O. Q. Validación Requeridos?. que. se. planteado. para. este. trabajo. de. FA R. M. investigación son los siguientes:. ha. Y. objetivos. AC IA. Los. 1. Verificar la linealidad, exactitud, precisión, sensibilidad. CA. DE. y selectividad del método.. TE. 2. Establecer nuestros resultados de validación en base. BI. BL. IO. a una validación retrospectiva.. 3. Demostrar la aplicabilidad y adaptabilidad del método analítico para la determinación de creatinina en el laboratorio “Quintanilla S.R.L.”. -4Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II. MATERIALES Y MÉTODOS: 1. MATERIAL 1.1.- Muestra:. − Standard de creatinina (2mg/dL). 1.2.- Reactivos: :. Creatinina Cinética AA. − Fabricante. :. Wiener lab (Argentina).. − Lote. :. 609550. − Vencimiento :. 07/2008. M UI Q BI O. 1 x 250 mL. B. Reactivo. 1 x 250 mL. M. 1x 30 mL. FA R. S. Standard. Y. A. Reactivo. AC IA. − Contenido del kit de reactivos:. IC A. − Nombre. DE. − Composición:. CA. A: Reactivo. Acido pícrico 41.4 mmol/L. TE. B: Reactivo alcalino: Carbonato/NaOH pH 12,7.. IO. Úsense guantes adecuados y protección para los ojos/cara.. BI. BL. S: Standard de creatinina 20mg/L (177 umol/L).. − Conservación de los reactivos: Conservar de 15-30°C. Los Reactivos y el Patrón son estables hasta la fecha de Caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso.. -5Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1.3.- Equipo: − Fotómetro automático BPC BioSed.. 2. MÉTODO 2.1. Requisitos previos a la validación: Para garantizar la confiabilidad de los resultados se aseguró el. IC A. cumplimiento de los requisitos siguientes:. M. - Calificación del personal en el uso de los métodos a validar20, 21:. Q. UI. Es el primer aspecto a tener en cuenta en una secuencia lógica de. BI O. validación dado que es el personal el que efectúa las tareas (en. Y. especial en nuestros países poco automatizados), lo que sumado al. AC IA. costo en tiempo y en dinero que implica una validación, refuerza la. FA R. M. importancia de contar con un personal adecuadamente entrenado y capacitado. Se debe contar además con un Registro de evaluación. DE. que demuestre que el personal conoce los principios que rigen las. IO. TE. CA. BMP en relación a su trabajo.. BL. - Calificación Instrumental 6, 7, 8, 9, 10, 11:. BI. La calificación es una premisa necesaria para poder validar. Es la comprobación formal, sistemática y documentada de que el equipo es el más adecuado para los fines previstos. Para llevar a cabo la misma se procede a la calibración del equipo y a la comprobación de métodos y sistemas. La. validación. del. Fotómetro. BioSed. es. en. esencia. la. verificación del rendimiento del instrumento elegido para una. -6Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. técnica analítica en particular, así como el software y el hardware que lo controla, y comprende: Calificación de la Instalación (IQ): Es la verificación documentada de que todos los aspectos claves. de. la instalación están de. recomendaciones del. fabricante. acuerdos con. y corresponden. a. las las. IC A. especificaciones aprobadas en el diseño. Las cuales pueden. M. ser:. Q. UI. - Nombre del equipo.. Y. - Número de serie.. BI O. - Nombre del fabricante, modelo o tipo.. AC IA. - Fecha en la que fue recibido. FA R. M. - Condiciones en las que fue recibido (nuevo o usado) - Aspectos verificados para su aceptación de recepción.. DE. (Anexo II).. CA. Calificación Operacional (OQ):. IO. TE. Es la verificación de que los equipos funcionan en la forma. BL. esperada y son capaces de operar satisfactoriamente, sobre todo. BI. en el rango de los parámetros operacionales para los que han sido. diseñados. Es realizado por un técnico calificado (los. parámetros sobre los problemas y posibles soluciones (Anexo II).. Calificación de performace (PQ): Se realiza para demostrar la efectividad y reproducibilidad del proceso, bajo condiciones normales de operación, y bajo. -7Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. condiciones límites de operación.. Es. verificado. por. el. usuario, trabajando con estándares certificados (Anexo II).. - Observación de las medidas de seguridad13. Uso de guantes descartables. Uso de mandil.. clasificación. del. apropiados. de. acuerdo. y. el. método. analítico. con. tipo. de. realizar:. AC IA. Y. validación a. parámetros. UI. los. Q. la. de. BI O. 2.2. Selección. M. IC A. Uso de anteojos de protección.. Para validar la técnica analítica utilizada para la determinación de. FA R. M. creatinina, se escogieron los parámetros adecuados según los criterios. DE. de validación que aparecen reportados en la USP.. CA. Según la USP XXII los métodos analíticos se clasifican en varias. TE. categorías para su validación. Los métodos que son objeto de estudio. BL. IO. en el presente trabajo pertenecen a la categoría I y se clasifican como:. BI. "métodos cuantitativos para la determinación de un analito". Los parámetros de validación que se deben considerar varían según los requisitos legales exigidos por distintas organizaciones. Según la literatura. consultada,. evaluarse. la. para. linealidad,. este. precisión,. tipo. de. exactitud,. métodos. deben. sensibilidad. y. selectividad14.. -8Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.3. Método para la Determinación de Creatinina: Fundamento: La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de Jaffe) produciendo un cromógeno rojo. La velocidad de esta reacción, bajo condiciones controladas, es una medida de la concentración de creatinina de la muestra puesto que se comporta como una reacción primer. orden para. la creatinina. Por otra parte, se ha. IC A. cinética de. interfieren en la. M. demostrado que los cromógenos no-creatinina que. Q. UI. técnica y que reaccionan luego de los 30 segundos de iniciada la. Y. BI O. reacción.. AC IA. Procedimiento:. FA R. M. Para la determinación de creatinina se procede como sigue: i.. Medir exactamente en un tubo de ensayo 250 µl de reactivo. DE. A más 250 µl de reactivo B. Agregar 100 ul de muestra, agitar y mezclar bien.. iii.. Leer inmediatamente en el fotómetro.. IO. TE. CA. ii.. Registrar los resultados. BI. BL. iv.. 2.4. Métodos de los Parámetros a Estudiar12, 15, 16, 17,19: Dependiendo del uso del ensayo, durante la validación habrá que medir diferentes parámetros, en este caso se estudiaran los siguientes parámetros:. -9Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. - Linealidad: ¾ Objetivo: Medir el grado de proximidad de las observaciones a una línea recta. ¾ Definición: Se entiende como la capacidad de una prueba de generar. IC A. resultados directamente proporcionales a la concentración del. M. analito en la muestra. El valor de este parámetro determinará el. Q. UI. intervalo de la valoración analítica. Puede expresarse como. BI O. la pendiente de la línea de regresión y su. varianza. o. correlación (r).. FA R. M. ¾ Procedimiento:. AC IA. Y. como el coeficiente de determinación (r2) y el coeficiente de. Preparar soluciones de seis a ocho diluciones de la muestra. DE. dentro del intervalo considerado y que fueron verificados. CA. previamente al llevar a cabo la determinación de la linealidad del. IO. TE. sistema.. BL. Determinar el coeficiente de correlación (r) de las diluciones. BI. a lo largo del presunto intervalo de la valoración. Analice cada dilución por triplicado en tres tandas. Anote los valores previstos, los valores efectivos y los porcentajes de recuperación de cada tanda. Analice cada conjunto de diluciones como una curva lineal y calcule el r de cada valoración.. - 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ¾ Limites de Aceptación: Se confirma linealidad si se cumplen los siguientes criterios: Homocedasticidad (la varianza es constante. para. todas. las. concentraciones). El Análisis de varianza de la regresión lineal debe demostrar: - Paso del intercepto por cero, mediante un test de t de. IC A. student o mediante un intervalo de confianza de 0,05.. M. - El coeficiente de la correlación lineal debe encontrarse entre. AC IA. Y. ¾ Formulas:. y = bx + a. FA R. M. ∑ y − b∑ x n. DE. a=. ∑ xy − ∑x. 2. ∑ x∑ y. −. n (∑ x )2 n. IO. TE. CA. b=. BI O. debe ser mayor de 0,99.. Q. UI. 0,98 y 1,00; y el coeficiente de correlación al cuadrado,. BI. BL. Donde: x. :. Concentración. o. cantidad. de. analito. (variable. independiente). y. : Área (variable dependiente).. b. :. Ordenada. de. origen. (termino. independiente. o. intercepto). Prueba que la recta pasa por el origen y que cualquier desviación se debe a un error aleatorio.. - 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ∑ x∑ y ∑ xy − n r= ⎛ ⎞⎛ ⎜ x − (∑ x ) ⎟⎜ y − (∑ y ) ∑ ⎜∑ n ⎟⎜ n 2. 2. 2. 2. ⎝. ⎠⎝. ⎞ ⎟ ⎟ ⎠. El valor de: r = 1 indica una recta perfectamente lineal.. IC A. r = -1 indica una recta perfectamente lineal negativa.. M. r = 0 indica que no hay correlación entre x e y.. UI. - Precisión:. BI O. Q. ¾ Definición:. Y. Es el grado de concordancia entre los valores obtenidos. AC IA. en una valoración. Se expresa como el coeficiente de. M. variación (C.V.). El coeficiente de variación es el cociente. FA R. entre la desviación estándar de los valores del ensayo y la. DE. concentración del analito. Repetitividad. CA. i.. BI. BL. IO. TE. ¾ Objetivo: Determinar el grado de coincidencia existente entre los resultados (C.V.) de una muestra homogénea en diversos puntos de la curva de una sola prueba. ¾ Procedimiento: Se realiza un mínimo de la concentración. de 6 determinaciones al 100%. nominal. (1,00. mg/dL),. en. condiciones homogéneas. Calcular el coeficiente de variación de los resultados. - 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ii.. Precisión Intermedia: ¾ Objetivo: Determinar el grado de coincidencia (C.V.) existente entre los ensayos de una muestra homogénea en varios puntos de la curva entre distintas valoraciones. ¾ Procedimiento:. IC A. Se realiza el experimento anterior dos días, por dos. M. analistas, en el mismo equipo y se calcula el coeficiente de. Q. UI. variación Calcule el C.V. para cada punto sobre la curva. BI O. entre tandas de ensayos.. Y. ¾ Limites de aceptación:. AC IA. Los valores aceptación del C.V. de repetitividad se. FA R. M. observaran en función de los limites de aceptación y del n° de replicas del análisis.. DE. Existen diferentes criterios de aceptación, sin embargo se. CA. puede generalizar que en el caso de la repetitividad y. BI. BL. IO. TE. la precisión intermedia la desviación. estándar relativa,. para evaluar la precisión del sistema debe ser menor o igual a 5,5%. El CV de reproducibilidad debe ser inferior al doble del de repetitividad. Los valores que se acepta es de 3,9 % para la repetitividad y 5,5 % para precisión intermedia6, 7.. t regresión =. r. (n − 2). (1 − r ) 2. - 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Donde: r. :. Regresión. n. :. Número. de. pruebas.. - Exactitud: ¾ Objetivo: Determinar la capacidad del ensayo para medir el valor previsto.. IC A. ¾ Definición:. M. Es el grado de concordancia entre el valor real y el valor. Q. UI. medido. La exactitud se expresa como el desvío o el error. BI O. porcentual entre el valor observado y el valor verdadero. ¾ Procedimiento:. AC IA. Y. (valor experimental / valor real x 100%).. FA R. M. Use como mínimo tres concentraciones detectables conocidas. Someta a prueba las tres concentraciones por triplicado en una. DE. corrida. Compare el valor esperado vs. promedio de valores. CA. obtenidos. Calcule el porcentaje de recuperación.. IO. TE. ¾ Criterios de aceptación:. BI. BL. Test de t de student.. texp =. [100 − r ]. n. C.V .. Para p = 0,05. texp < ttabla Porcentaje de recuperación 98% - 102%.. - 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. - Sensibilidad: ¾ Objetivos: - Determinar la menor concentración a la que el analito puede detectarse. - Determinar la menor concentración en la que el analito puede. IC A. ser detectado con exactitud y precisión.. M. ¾ Definición:. la pendiente de la curva de calibrado a una. UI. Definida como. BI O. Q. concentración determinada de analito; esta acepción no se lugar. Y. emplea en los procedimientos de validación; en su. AC IA. se utilizan parámetros inversamente relacionados con ella,. -. Límite. FA R. M. como el límite de detección (LOD) y de cuantificación (LOQ). de. detección,. se. detectable. DE. mínima cantidad/concentración no. de. analito,. sea posible determinarla exactamente a ese. TE. CA. aunque. define como la. IO. nivel de concentración.. BI. BL. -. Límite. de. cuantificación. o. determinación,. es. la. cantidad mínima de analito que puede determinarse con un nivel aceptable de precisión y exactitud.. ¾ Procedimiento: Prepare 10 muestras blanco del reactivo. Lea las concentraciones. y. calcular la desviación estándar.. Calcule el LOD mediante la siguiente operación: (3 x desviación estándar del blanco) / pendiente de regresión.. - 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ¾ Fórmula:. LOD =. 3Sb b. Donde: LOD. : Límite de Detección. :. b. :. Desviación Estándar del Blanco. Pendiente de la curva de calibración.. IC A. Sb. M. Calcule el LOQ mediante la siguiente operación: (10 x desviación. AC IA. Y. Donde:. 10Sb b. BI O. LOQ =. Q. UI. estándar del blanco) / pendiente de regresión.. :. Límite de Cuantificación. Sb. :. Desviación Estándar del Blanco.. FA R. M. LOQ. :. b. Pendiente de la curva de calibración. DE. ¾ Criterios de Aceptación:. TE. CA. No hay un límite de detección mínimo ni de cuantificación.. BL. IO. - Selectividad (llamada también especificidad):. BI. ¾ Objetivo: Determinar si el método. es selectivo, de acuerdo. al error. porcentual relativo. ¾ Definición: Se define como la capacidad. de un método analítico para. medir exacta y específicamente el analito sin interferencias de impurezas, productos de. degradación. o. excipientes. que. - 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. pueden estar presentes en la muestra. La evaluación. de. este parámetro es especialmente importante en el caso de los métodos analíticos diseñados para la de un analito. consideran. cuantificación. Aunque la especificidad y la selectividad se términos. equivalentes,. diferencian,. considerando. capacidad. de detectar. la. algunos. selectividad o. IC A. simultánea. autores. los. como. la. separadamente misma. UI. M. sustancias químicas diferentes presentes en una. BI O. Q. muestra y a la especificidad como la capacidad de detectar el analito sin interferencias de otro compuesto. La selectividad. AC IA. Y. (especificidad), de manera análoga a la exactitud, se expresa. M. como el desvío o el error porcentual relativo entre el valor. FA R. medido y el valor conocido.. DE. ¾ Procedimiento:. CA. Prepare 3 soluciones de 80%, 100% y 120% de concentración,. TE. tomando como 100% la concentración de 1,6 mg/dL, ya que. IO. según el método es lineal solo hasta ese punto. Lea las. BI. BL. muestras por triplicado. Calcule el error Porcentual relativo.. ¾ Criterio de aceptación: El error Porcentual relativo debe ser menor de 2 %.. - 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III. RESULTADOS: Resultado 0,99783663. Mínimo 0,995. - Coeficiente de determinacion (r2). 0,992677941. Mínimo 0,99. - Test estadístico para el “r”. tregresión =. t.tabla = 2,306. 42,9298. t.regresion > t.tabla. 3,54 %. Máximo 5,0 %. p = 0,05; y n – 2 grados de libertad - Coeficiente de Variación - Prueba de Linealidad de la pendiente. texp = 42,9298. - Prueba de proporcionalidad del. texp = -. UI. Intercepto. M. IC A. p = 0,05; y n – 2 grados de libertad. 0,0161193. BI O. p = 0,05; y n – 2 grados de libertad. r = 0,99565248. AC IA. - Coeficiente de determinacion (r2). Y. - Coeficiente de correlación (r) - Test estadístico para el “r”. FA R. - Coeficiente de Variación. M. p = 0,05; y n – 2 grados de libertad. - Prueba de Linealidad de la pendiente. DE. p = 0,05; y n – 2 grados de libertad. CA. Intercepto. ttabla = 2,306 texp > ttabla ttabla = 2,306 texp < ttabla Mínimo 0,995. r2 = 0,9913286. Mínimo 0,99. tregresion =. t.tabla = 2,365. 28,2809. t.regresion > t.tabla. 1,6117 %. Máximo 5,0 %. texp = 28,2809. - Prueba de proporcionalidad del texp = 0,6730. TE. LINEALIDAD DEL MÉTODO. Especificaciones. - Coeficiente de correlación (r). Q. LINEALIDAD DEL SISTEMA. Parámetros Estudiados. texp > ttabla ttabla = 2,365 texp < ttabla. BL. 1,9140 %. Máximo 3,9 %. PRECISIÓN MÉTODO. BI. - Coeficiente de Variación. - Repetibilidad: Coeficiente de Variación. 2,1459 %. Máximo 3,9 %. 2,4152 %. Máximo 5,5 %. EXACTITUD. PRECISIÓN SISTEMA. IO. p = 0,05; y n – 2 grados de libertad. ttabla = 2,365. - Porcentaje de recuperación. 100,341 %. 98% - 102%. - Precisión Intermedia: Coef. de Variación. - Test de recuperación media y el 100% p = 0,05; y n – 1 = Grados de libertad. texp = 0,636. ttabla = 2,306 texp < ttabla. - 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Resultado. Especificaciones. - Límite de detección (LOD). 0,0214 mg/dL. No hay un límite de detección mínimo. - Límite de cuantificación (LOQ). 0,0715 mg/dL. No hay un límite de cuantificación mínimo. - Error relativo porcentual. 1,244 %. ≤ 2%. BI. BL. IO. TE. CA. DE. FA R. M. AC IA. Y. BI O. Q. UI. M. IC A. SEL. SEN. Parámetros Estudiados. - 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV. DISCUSIÓN: Linealidad del Sistema Se analizaron las siguientes concentraciones: 0,4; 0,8; 1,2; 1,6 y 2,0 mg/dL, las cuales al ser evaluadas estadísticamente, se observo que para el rango, se obtiene un coeficiente de correlación r = 0,9978; siendo el valor minino de 0,995 y un coeficiente de determinación r2 = 0,9927; siendo el valor mínimo. IC A. de 0,99 lo que demuestra que existe regresión (relación lineal) entre las. M. variables concentración y sus respuestas.. Q. UI. Para confirmar que dicha regresión es Lineal, se aplicó un test de. BI O. regresión (test de Student), donde debe cumplirse: el valor de tregresión (2,306), con una probabilidad de cometer. Y. (42,9298) debe se mayor al ttabla. FA R. M. linealidad del sistema instrumental.. AC IA. error de p = 0,05 y n – 2 grados de libertad. Este resultado corrobora la. Así mismo se determino el coeficiente de variación de los factores de. DE. respuesta “f” el cual debe ser máximo 5%, obteniéndose 3,5445 %, lo que. CA. demuestra que cumple la condición de proporcionalidad y el error sistema. BL. IO. TE. es despreciable (ANEXO I-A).. BI. Linealidad del Método: Se analizaron las siguientes concentraciones: 80%, 100%, y 120%, las cuales al ser evaluadas estadísticamente, se obtiene un coeficiente de correlación r = 0,99565; siendo el valor minino de 0,995. El coeficiente de determinación r2 = 0,99132, siendo el valor mínimo de 0,99 lo que demuestra que existe regresión (relación lineal) entre las variables: concentraciones y sus respuestas.. - 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Para confirmar que dicha regresión es Lineal, se aplicó un test de regresión (test de Student), donde debe cumplirse: el valor de tregresión (28,2809) es mayor al ttabla (2,365) con una probabilidad de cometer error de p = 0,05 y n – 2 grados de libertad. Este resultado corrobora la linealidad del método. Así mismo se determino el coeficiente de variación de los factores de. IC A. respuesta “f” el cual debe ser máximo 5 %, obteniéndose 1,6117 %, lo que debe. M. demuestra que cumple la condición de proporcionalidad y el error sistemático. BI O. Q. UI. del método es despreciable (ANEXO I-B).. Y. Precisión. AC IA. El estudio de precisión del sistema mostró una buena repetibilidad. FA R. M. de los resultados, obteniéndose una desviación estándar relativa (RSD) de 1,9140 %, siendo el valor máximo de 3,9 %.. DE. El estudio de precisión del método mostró una buena repetibilidad (2,1459. CA. %) y precisión intermedia (2.4152 %), siendo los valores máximos de 3,9 % y. BI. Exactitud. BL. IO. TE. 5,5%. respectivamente (ANEXO I-C).. Como se observa en la tabla, se obtuvieron valores de desviación estándar relativa (RSD) de 1,6089 % siendo el valor máximo 3,9% y porcentaje de recuperación fue de 100,341 %; que está dentro de los límites establecidos (98% a 102%). Para demostrar que no hay diferencia significativa entre la recuperación media y el 100 %, se aplicó un test estadístico (test de Student), donde debe. - 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. cumplirse: el valor de texperimental (0,636) debe se menor al ttabla (2,306), con una probabilidad de cometer error de p = 0,05 y n – 1 grados de libertad. Este resultado corrobora que el método es exacto (ANEXO I-D).. Sensibilidad: La sensibilidad, definida como la pendiente de la curva de calibrado a una concentración determinada de. analito,. no. emplea. lugar se. IC A. como tal en los procedimientos de validación. En su. se. utilizan. UI. M. parámetros inversamente relacionados con ella, como el límite de detección. BI O. Q. (LOD) y de cuantificación (LOQ) (16).. Y. Para el método de determinación de creatinina, se obtuvo un LOD. M. AC IA. de 0,0214 mg/dL. y un LOQ de 0,0715 mg/dL (ANEXO I-E).. FA R. Selectividad:. CA. hasta 2 % (ANEXO I-F).. DE. Se obtuvo un error porcentual relativo de 1,24 %, el cual es aceptable. TE. Todos los resultados obtenidos en la validación del método analítico. BL. IO. para la determinación de creatinina permiten asegurar que el método. BI. analítico es confiable. De esta manera se comprobó experimentalmente la utilidad del procedimiento establecido.. - 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V. CONCLUSIONES: 1. El. método. es. lineal. en. el. intervalo. de. las. concentraciones. de. concentraciones del 80 % hasta el 120 % de la muestra. 2. El método es preciso; porque se obtienen resultados repetitivos (C.V.: 2,1459%). y además. con una. buena. precisión intermedia (C.V.:. 2,4152%). M. entre la recuperación media (100,34%) y el 100 %.. IC A. 3. El método es exacto; debido a que no hay diferencia significativa. Q. UI. 4. El método es sensible siendo el LOD = 0,0214 mg/dL y el LOQ = 0,0715. BI O. mg/dL.. Y. 5. El método es selectivo; evaluado desde el punto de vista de error porcentual. AC IA. relativo.. FA R. M. 6. Queda demostrado la aplicabilidad y la adaptabilidad del método analítico para la determinación de creatinina; llevado a cabo en el. BI. BL. IO. TE. CA. DE. laboratorio Quintanilla S.R.L.. - 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: 1. OMS: “Curso de Gestión de Calidad para Laboratorios”, Modulo 1, EEUU, 2005, pp: 4-6. www.paho.org/Spanish/ad/ths/ev/labs-CGC.htm 2. TORRES, M Y COL: reporte “La validación, un camino inevitable”, 2005,pp:14,15.. IC A. www.uh.cu/infogral/areasuh/vri/archivos/Calidad/calidad03/Industria/valida. M. 3. CASTELLUCCI, F.: “Recomendaciones Armonizadas para la Validación. Q. UI. de Métodos de Análisis (informe técnico)”, Paris, 2005, pp: 5,6.. BI O. http//.news.reseau-concept.net/images/oiv_es/Client/Resolution_. AC IA. Y. 4. MAROTO, A.: “Incertidumbre en Métodos Analíticos de Rutina”, Tesis Doctoral, Tarragona, 2002, pp: 7,8.. FA R. M. www.tdx.cesca.es/TESIS_URV/AVAILABLE/TDX-0602103-1331 5. OMS: “Curso de Gestión de Calidad para Laboratorios”, Modulo 7,. DE. EEUU, 2005, pp: 12-15.. TE. CA. www.paho.org/Spanish/AD/THS/EV/labs-CGC-Guia.pdf. IO. 6. VILLAMIL, J.: “Manual de Mantenimiento para equipo de Laboratorio”,. BL. OMS, Washington D.C., 2005, pp: 110 – 120.. BI. www.paho.org/spanish/ad/ths/ev/LAB_manual-mantenimiento.pdf 7. CAMELO, D.: “Verificación Jurídica. Para El Proceso De Contratación. Directa”, Colombia, 2006 www.policia.gov.co/./$FILE/INFORME%20DE%20RESULTADOS%20Con 8. Programa de capacitación para el monitoreo de materialparticulado, Perú, 2006. http://www.swisscontact.org.pe/PRAL/Charla5_Equipos&servicios.pdf. - 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 9. OMS: “Curso de Gestión de Calidad para Servicios de Sangre: Equipos y Materiales”, Washington D.C., 2005. http://www.paho.org/Spanish/AD/THS/EV/blood_CGC.pdf 10. RODRIGUEZ, R.: “Validación de Procesos”, OMS, Guatemala, 2004. www.paho.org/Spanish/AD/THS/EV/bpm-validacion-procesos-fda 11. ANGELINI, N.: “Aseguramiento de la Calidad y Validación de Metodología para Análisis Químicos”, FAO, 2004.. “Validación. de. una. técnica. colorimétrica. UI. C.:. para. la. Q. 12. SOTO,. M. IC A. www.rlc.fao.org/prior/comagric/codex/rla3013/pdf/faovali.pps. BI O. determinación de carbohidratos”, Asociación Española de Farmacéuticos de la Industria, Cuba, 2002.. M.: Revista. Cubana. de. Farmacia,. “Validación. de. técnicas. M. 13. DÍAZ,. AC IA. Y. http://www.finlay.sld.cu/publicaciones/vaccimonitor/VM2002-3/vm2002- c3.pdf. FA R. analíticas utilizadas en el control de la calidad”, Editorial Ciencias Médicas, Cuba, 1999.. B.:. TE. 14. CASTILLO,. CA. DE. http://cielo.sld.cu/scielo.php?pid=S0034-75151998000200005&script=sc Revista. Cubana. de. Farmacia,. “Protocolo. de. IO. validación de métodos analíticos para la cuantificación de fármacos”,. BL. Editorial Ciencias Médicas, Cuba, 1996.. BI. http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S0034-75151996000100009&script= 15. CHALONER, G. Y COL: “Guía de la OMS sobre los requisitos de las práticas adecuadas de fabricación”, Ginebra 1998, pp: 74-78. www.who.int/vaccines-documents/DocsPDF/www9811. 16. REPORTE: Capitulo 2, “Métodos experimentales”. http://fondosdigitales.us.es/public_thesis/408/9401.pdf. - 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 17. ROMERO, M.: “Desarrollo de Nuevas Metodologías analíticas en el control de Calidad. de. la Industria. Farmacéutica”, Universidad. Autónoma. de. Barcelona, España, 2001, pp: 13 -18. www.tdx.cbuc.es/TESIS_UAB/AVAILABLE/TDX-0712102-102928 18. CAÑADA, simultánea. F.: Tesis de. Doctoral.. “Nuevos métodos de. determinación. principios activos coadministrados, en fármacos y fluidos. biológicos”, Universidad de Extremadura, España, 2002, pp: 13, 61-77. IC A. http://dialnet.unirioja.es/servlet/tesis?codigo=313. espectrofotometría. de. UI. por. absorción. atómica”,. Q. de hemodiálisis. M. 19. DE LA RUBIA, J.: “Determinación de aluminio en líquidos concentrados. BI O. Universidad Complutense de Madrid, España 2001, pp. 129-145. AC IA. Y. www.ucm.es/eprints/4374/. 20. BRITO, D.: “Simposio de Validación”, Asociación de Química y Farmacia,. M. Uruguay, 1998.. FA R. http://www.aqfu.org.uy/revistas_1998/agosto/simposio.htm. DE. 21. REPORTE DE LA: “Red Panamericana para la Armonización de la Regulación. CA. Farmacéutica”, Guía de Verificación de BPM adoptada por la Red PARF en la. TE. IV Conferencia, 2004. BI. BL. IO. http://www.paho.org/spanish/ad/ths/ev/bpm-arbol-guia.pdf. - 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) BI O. Q. UI. M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. BL. IO. TE. CA. DE. FA R. M. AC IA. Y. ANEXOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO I CÁLCULOS DE LOS PARÁMETROS VALIDADOS Se realizaron los cálculos de los cinco parámetros evaluados: Linealidad, precisión, exactitud, sensibilidad y selectividad del método.. ANEXO I-A. IC A. CÁLCULOS DE LINEALIDAD DEL SISTEMA a. Cálculo de la recta de regresión:. M. Determinar la curva de regresión, sobre los puntos individuales y sin promediar.. Y. y = bx + a. BI O. Q. UI. Para el caso de una recta la función toma la forma de la ecuación:. 5. M. DE. BI. Σ. CA. 4. TE. 3. IO. 2. BL. 1. Concentración Resultado en en mg/dL del concentración mg/dL “y” estándar “x” 0,40 0,43 0,40 0,41 0,80 0,78 0,80 0,78 1,20 1,23 1,20 1,17 1,60 1,65 1,60 1,56 2,00 2,07 2,00 1,96 12,00 12,04. FA R. Muestra. AC IA. Tabla Nº 1: Linealidad del sistema xy. 0,172 0,164 0,624 0,624 1,476 1,404 2,640 2,496 4,140 3,920 17,660. x2. y2. F(y/x). 0,16 0,1849 1,075 0,16 0,1681 1,025 0,64 0,6084 0,975 0,64 0,6084 0,975 1,44 1,5129 1,025 1,44 1,3689 0,975 2,56 2,7225 1,031 2,56 2,4336 0,975 4,00 4,2849 1,035 4,00 3,8416 0,980 17,6, 17,7342 10,071 1,007 PROMEDIO DESVIACIÓN 0,035697 ESTANDAR RSD % 3,54451134. Donde: x : Concentración o cantidad de analito (variable independiente). y : Área (variable dependiente). b : Ordenada de origen (termino independiente o intercepto). Prueba que la recta pasa por el origen y que cualquier desviación se debe a un error aleatorio.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. a=. ∑ y − b∑ x. b=. n. ∑ xy − ∑x. ∑ x∑ y. −. 2. n (∑ x )2 n. De los datos obtenidos de la tabla Nº 1 se obtienen los siguientes valores:. a = −0,0005 b = 1,00375. IC A. Ecuación de la recta:. UI. M. y = 1,00375 x + (−0,0005). BI O. Q. b. Cálculo del coeficiente de correlación (r) :. Se determina para evaluar el ajuste al modelo lineal propuesto:. y = bx + a. ,y. Y. refleja el grado de relación o ligazón entre las concentraciones (x) y su respuesta. AC IA. M. r=. ∑ x∑ y ∑ xy − n ⎛ ⎞⎛ ⎜ x − (∑ x ) ⎟⎜ y − (∑ y ) ∑ ⎜∑ n ⎟⎜ n 2. 2. 2. 2. ⎠⎝. ⎞ ⎟ ⎟ ⎠. DE. ⎝. FA R. (y).. CA. El valor de:. r = 1 indica una recta perfectamente lineal.. TE. r = -1 indica una recta perfectamente lineal negativa.. BL. IO. r = 0 indica que no hay correlación entre x e y.. BI. Criterio de aceptación mínima: 0,995 Según datos de la tabla 1:. r = 0,99783663 c. Cálculo del coeficiente de determinación “r2”: Determina el grado de ajuste de la ecuación. Criterio de aceptación mínima: 0,99. r 2 = 0,995677941. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Interpretación: El 99.56% de las variaciones se debe a la influencia de la variable “x” (concentración del estándar). Sin embargo el mejor indicativo del modelo lineal no es “r”, sino un test estadístico. d. Prueba t de student para el coeficiente de correlación “r”: Calcula el valor de tregresión (test de regresión) con n-2 grados de libertad y un intervalo de confianza de 95 % (α=0,05) y se compara con el valor de ttabla (test. M. = Probabilidad de cometer error (p). UI. α. IC A. tabulado) para el nivel de confianza requerido.. BI O. Q. 1- α = Grado de confianza.. (n − 2). (1 − r ) 2. AC IA. r. M. tregresión =. Y. Fórmula: para hallar tr. FA R. Donde:. CA. r = 0,99783663. DE. n = 10. TE. Resultado:. = 2,306 ; para 10-2 = 8 grados de libertad y p=0,05. BI. BL. tabla. IO. tregresión = 42,9298. Interpretación:. Como el valor de tregresión es mayor de ttabla, indica que existe una correlación lineal significativa entre x e y, por tanto r ~1. e. Intervalo de confianza (rango): ¾ Intervalo de confianza de la pendiente, “b”. Icb = b ± ttabla Sb. Sb =. S xy2. ( x) ∑ x − ∑n. 2. 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. S. 2 xy. ∑y =. 2. − a ∑ y − b∑ xy n−2. Resultado: Se obtiene los siguientes resultados según datos de la tabla 1: S xy2 = 0,001749375. S xy = 0,04182553. IC A. Sb2 = 0,00054668. (Desviación estándar de la pendiente “b”). BI O. Sb .100 b. AC IA. Sb relativa(%) = 2,32938304%. Y. Sb relativa(%) =. Q. UI. M. Sb = 0,023381182. M. Entonces intervalo de confianza de la pendiente “b” = 2,306 ; para 10-2 = 8 grados de libertad y p=0,05. b. = 1,00375. Icb. = 1,00375 ± 2,306(0,023381182). DE. FA R. ttabla. CA. Interpretación:. TE. El intervalo de confianza de la pendiente está entre los valores de:. BL. IO. 0.949832994 hasta 1,057667006.. BI. ¾ Prueba de linealidad de la pendiente (prueba t de Student):. texp =. b Sb. Donde: b. :. Pendiente (1,00375). Sb. :. Desviación estándar de b (0,02338). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Resultados: Texp. =. 42,9298. ttabla. =. 2,306 ; para 10-2 = 8 grados de libertad y p=0,05. Interpretación: Como texp es mayor que ttabla, existe una correlación lineal significativa; entonces la pendiente “b” es significativamente diferente de cero (b ≠ 0). ¾ Intervalo de confianza del intercepto" a ":. M UI. 2. Q. ∑x n. BI O. Sa = S. 2 b. IC A. Ica = a ± ttabla .Sa. Y. Donde: :. Intervalo de confianza del intercepto a.. a. :. Intercepto.. Sa. :. Desviación Estándar de a.. Sb2. :. Varianza de b.. n. :. Número de pruebas.. CA. Resultados:. DE. FA R. M. AC IA. Ica. TE. Se obtiene los siguientes resultados a partir de datos de la tabla 1:. IO. S a2 = 0.000962156. BI. BL. S a = 0.03101864 (Desviación estándar del intercepto a) S a relativa =. Sa .100 a. S a relativa (%) = −6203,7287%. ttabla. = 2,306 ; para 10-2 = 8 grados de libertad y p=0,05. a. =. Ica. = -0,0005 ± 2,306(0,03101864). -0,0005. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Interpretación: Entonces el intervalo de confianza del intercepto “a” está entre: 0,072028992 a 0,071028992. ¾ Prueba de linealidad del intercepto (prueba t de Student):. texp = Donde:. a. = -0,0005. Sa. =. a Sa. IC A. 0,03101864. M. Resultado:. UI. texp = -0,016119338. BI O. Q. ttabla = 2,306 ; para 10-2 = 8 grados de libertad y p=0,05. es menor que ttabla, Si existe una correlación lineal. AC IA. Como texp. Y. Interpretación:. FA R. M. significativa, y el valor de “a” es aceptable. f. Cálculo del coeficiente de variación (C.V.) de los factores de respuesta:. Donde:. DE. y x. CA. f =. TE. x : Concentración o cantidad de analito (variable independiente). BI. BL. IO. y : Área (variable dependiente). C.V . =. DesviaciónEstándar " f " .100 Promedio " f ". Promedio de “f” Desviación estándar “f”. : :. 1,007 0,03569766. :. 3,5445%. Resultado: Coeficiente de variación Interpretación: Como se permite un máximo de 5 % de Coeficiente de variación, el valor obtenido (3,54 %) es aceptable.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO I-B CÁLCULOS DE LINEALIDAD DEL MÉTODO a. Cálculo de la recta de regresión: Determinar la curva de regresión, sobre los puntos individuales y sin promediar. Para el caso de una recta la función toma la forma de la ecuación:. y = bx + a. 1,6384. 1,6641. 0,99224806. 1,6384. 1,6384. 1,6384. 1,0000. 1,6640. 1,6384. 1,6900. 0,98461539. 1,65. 2,6400. 2,5600. 2,7225. 0,96969697. 1,56. 2,4960. 2,5600. 2,4336. 1,02564103. 1,61. 2,5760. 2,5600. 2,5921. 0,99378882. 1,94. 3,7248. 3,6864. 3,7636. 0,98969072. 1,91. 3,6672. 3,6864. 3,6481. 1,0052356. 1,90. 3,6480. 3,6864. 3,6100. 1,01052632. 14,44. 23,705. 23,6544. 23,762. 8,9714429. PROMEDIO. 0,99682698. DESVIACIÓN ESTÁNDAR. 0,01606618. RSD %. 1,61173224. 1,28. 1,28. 80%. 1,30. 1,60. 100%. 1,60. 100%. 1,60. 100%. 1,92. 120%. 1,92. 120%. 1,92. 120%. M FA R. CA. UI. Q. 80%. BI O. 1,28. Y. 1,29. AC IA. 80%. 14,40. M. 1,6512. 1,28. TE. Σ. F(y/x). IO. 3. y2. BL. 2. x2. xy. Donde:. BI. 1. Concentració Resultado en n en mg/dL Concentración concentració Nominal (%) del estándar n mg/dL “y” “x”. DE. Muestra. IC A. Tabla Nº 2: Linealidad del Método. x : Concentración o cantidad de analito (variable independiente). y : Área (variable dependiente). b : Ordenada de origen (termino independiente o intercepto). Prueba que la recta pasa por el origen y que cualquier desviación se debe a un error aleatorio.. a=. ∑ y − b∑ x n. b=. ∑ xy − ∑x. 2. ∑ x∑ y. −. n (∑ x )2 n. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. De los datos obtenidos de la tabla Nº 2 se obtienen los siguientes valores:. a = 0,0377778 b = 0,9791667. Ecuación de la recta:. y = 0,97916667 x + 0,0377778 b. Cálculo del coeficiente de correlación (r) :. y = bx + a Se determina para evaluar el ajuste al modelo lineal propuesto:. IC A. el cual refleja el grado de relación o ligazón entre las concentraciones (x) y. M. su respuesta (y).. UI. Q. 2. 2. BI O. r=. ∑ x∑ y ∑ xy − n ⎛ ⎞⎛ ⎜ x − (∑ x ) ⎟⎜ y − (∑ y ) ∑ ⎜∑ n n ⎟⎜ 2. ⎠⎝. ⎞ ⎟ ⎟ ⎠. AC IA. Y. ⎝. 2. M. El valor de:. FA R. r = 1 indica una recta perfectamente lineal.. DE. r = -1 indica una recta perfectamente lineal negativa.. CA. r = 0 indica que no hay correlación entre “x”, “y”.. TE. Criterio de aceptación mínima: 0,995. r = 0,99565248. BL. IO. Según datos de la tabla 2:. BI. c. Cálculo del coeficiente de determinación “r2”: Determina el grado de ajuste de la ecuación. Criterio de aceptación mínima: 0,99. r 2 = 0,99132386 Interpretación: El 99.13% de las variaciones se debe a la influencia de la variable “x” (concentración del estándar). Sin embargo el mejor indicativo del modelo lineal no es “r”, sino un test estadístico.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. d. Prueba t de student para el coeficiente de correlación “r”: Calcula el valor de tregresión (test de regresión) con n-2 grados de libertad y un intervalo de confianza de 95 % (α=0,05) y se compara con el valor de ttabla (test tabulado) para el nivel de confianza requerido. α. = Probabilidad de cometer error (p). 1- α = Grado de confianza.. (n − 2). r. M. (1 − r ). UI. 2. Q. tregresión =. IC A. Fórmula: para hallar tregresión. BI O. Donde: n= 9. Resultado:. AC IA. Y. r = 0,99565248. =. 28,2809. ttabla. =. 2,365 ; para 9-2 = 7 grados de libertad y p=0,05. FA R. M. tregresión. DE. Interpretación:. CA. Como el valor de tregresión es mayor de ttabla, indica que existe una. TE. correlación lineal significativa entre x e y, por tanto (r ≠ 0).. BL. IO. e. Intervalo de confianza (rango):. BI. ¾ Intervalo de confianza de la pendiente, “b”. Icb = b ± ttabla Sb Sb =. S xy2. ( x) ∑ x − ∑n. 2. 2. S. 2 xy. ∑y =. 2. − a ∑ y − b∑ xy n−2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Resultado: Se obtiene los siguientes resultados según datos de la tabla Nº 2: S xy2 = 0,000736508. S xy = 0,02713868 Sb2 = 0,001198743 Sb = 0,034622874 Sb .100 b. IC A. Sb relativa (%) =. (Desviación estándar de la pendiente “b”). M. Sb relativa(%) = 3.5359%. Q. UI. Entonces intervalo de confianza de la pendiente “b”. = 2,365 ; para 9-2 = 7 grados de libertad y p=0,05. b. = 0,9791667. Icb. = 0,9791667 ± 2.365(0,034622874). AC IA. Y. BI O. ttabla. Interpretación:. M. El intervalo de confianza de la pendiente está entre los valores de:. FA R. 0,89728357 hasta 1,06104976.. b Sb. TE. CA. texp =. DE. ¾ Prueba de linealidad de la pendiente (prueba t de Student):. Donde:. IO. :. BL. b. :. 0,034622874. BI. Sb. 0,9791667. Resultados: texp =. 28.2809. ttabla = 2,365 ; para 9-2 = 7 grados de libertad y p=0,05 Interpretación: Como texp es mayor que ttabla, existe una correlación lineal significativa; entonces la pendiente “b” es significativamente diferente de cero (b ≠ 0).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ¾ Intervalo de confianza del intercepto " a " : Fórmulas:. Ica = a ± ttabla .Sa. Sa = S. 2 b. ∑x. 2. n. Donde: : Intercepto.. Sa. : Desviación Estándar de a.. Sb2. : Varianza de b.. n. : Número de pruebas.. BI O. Q. UI. M. a. IC A. Ica : Intervalo de confianza del intercepto a.. Y. Resultados:. AC IA. Se obtiene los siguientes resultados a partir de datos de la tabla 2:. DE. Sa .100 a. CA. S a relativa =. (Desviación estándar del intercepto a). FA R. S a = 0,05613036. M. S a2 = 0,00315062. BL. a. IO. ttabla. TE. S a relativa (%) = 148.58%. BI. Ica. = 2,365 ; para 9-2 = 7 grados de libertad y p=0,05. = 0,03778 = 0,9791667 ± 2,365(0,05613036). Interpretación: Entonces el intervalo de confianza del intercepto “a” está entre: -0,09497052 a 0,24265359. ¾ Prueba de linealidad del intercepto (prueba t de Student):. texp =. a Sa. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Donde:. a. = 0,03778. Sa. =. 0,0561. Resultado: = 0,6730. texp. ttabla = 2,365 ; para 9-2 = 7 grados de libertad y p=0,05 Interpretación:. IC A. Como texp es menor que ttabla, Si existe una correlación lineal significativa, y. UI. M. el valor de “a” es aceptable.. y x. AC IA. Y. f =. BI O. Q. f. Cálculo del coeficiente de variación (C.V.) de los factores de respuesta:. Donde:. M. x : Concentración o cantidad de analito (variable independiente). FA R. y : Área (variable dependiente). DesviaciónEstándar " f " .100 Promedio " f ". CA. DE. C.V . =. :. 0,996826989. Desviación estándar “f” :. 0,016066182. BL. IO. TE. Promedio de “f”. BI. Resultado:. Coeficiente de variación :. 1,6117%. Interpretación: Como el coeficiente de variación o RSD, se encuentra por debajo de 5 %, se puede decir que el resultado es aceptable.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO I-C CÁLCULOS DE PRECISIÓN a. Precisión del Sistema: La precisión se expresa matemáticamente, calculando la dispersión de los datos respecto a la media. Tabla 4: Precisión del sistema Concentración del estándar al 100%. 1. 104%. 2. 98%. 3. 100%. Q. UI. M. IC A. Ensayo Nº. 101%. BI O. 4. 102%. 6. AC IA. Y. 5. 100%. FA R. M. Análisis Estadístico Número de análisis (n). DE. Media (x). 6 100,5 % 0,0192. Coef. de Variación (C.V.). 1,9140 %. IO. TE. CA. Desviación Estándar (S). BL. ¾ Cálculo del límite de confianza individual:. BI. Fórmula:. L.C.I . = x ± ttabla .S. Donde: L.C.I. : Límite de confianza individual. ttabla. : 2,571; para 6-1 = 5 grados de libertad y p = 0,05. Resultado: Intervalo de Confianza: 100,50 % ± 2,571 x 0,0192 L.C.I. = 100,45 % hasta 100,55 %. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(50) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Interpretación: El intervalo de confianza de los resultados individuales indica que el 95% de los. valores están entre 100,45 % a 100,55% de la. concentración verdadera del estándar. ¾ Límite de confianza de la media (µ) Fòrmula:. ttabla .S n. IC A. μ=x±. x. :. BI O. Promedio de las muestras.. UI. : Intervalo de confianza de la media.. Q. µ. M. Donde:. Y. ttabla : es el valor en la tabla de la distribución de “t” student. AC IA. con las siguientes condiciones:. M. - n – 1 grados de libertad. FA R. - Probabilidad de cometer error (p) de 0,05, es decir. DE. un grado de confianza del 95 % Resultado:. CA. ttabla = 2,571; para 6-1 = 5 grados de libertad y p = 0,05. IO. TE. Intervalo de confianza:. 2,571(0, 0192) 6. BI. BL. μ = 100,50 ±. µ = 99,68 % a 101,32 %. Interpretación: Existe un 95 % de probabilidad de que el valor de la media se ubique dentro de 99,68% a 101,32%.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(51) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. b. Precisión del Método: Datos de repetitividad y precisión intermedia Tabla 5: Precisión del método Ensayo Nº. Concentració n mg/dL. 1. 1,00. 1,04. 2. 1,00. 3. Analista 2 11/02/07. Porcentaje de recuperación. 104,00%. 1,05. 105,00%. 0,98. 98,00%. 1,03. 103,00%. 1,00. 1,00. 100,00%. 0,98. 98,00%. 4. 1,00. 1,02. 102,00%. 1,00. 100,00%. 5. 1,00. 1,01. 101,00%. 0,99. 99,00%. 6. 1,00. 0,99. 99,00%. BI O. Q. UI. M. IC A. Analista 1 Porcentaje de 10/02/07 recuperación. Repetitividad. AC IA. Y. Análisis Estadístico Número de análisis (n). Desviación Estándar (S). DE. Coeficiente de Variación (C.V.). FA R. M. Media (x). 0,98. 98,00%. Precisión Intermedia. 6. 12. 1,0067. 1,0058. 0,0216. 0,0243. 2,1459 %. 2,4152 %. DesviaciónEstándar ( S ) .100 Media( x ). CA. TE. C.V . =. IO. Resultado:. BL. Repetitividad C.V.. = 2,1459 %. BI. Precisión intermedia C.V. = 2,4152 %. Interpretación: El. máximo. permitido. de. C.V.. es. de. 3,9 % y 5,5 % para. repetitividad y precisión intermedia respectivamente, por lo que el método está dentro de un rango aceptable.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.