Efecto del aceite esencial de Syzygium aromaticum sobre la supervivencia de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Y PARASITOLOGÍA. IN FO. Efecto del aceite esencial de Syzygium aromaticum sobre la. DE. supervivencia de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A. SI ST. EM. AS. y Bacillus cereus. TESIS. DE BIÓLOGO - MICROBIÓLOGO. DI. RE. CC. IO. N. DE. PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL. AUTOR. : Br. JESSENIA MILAGROS GAMBOA ANTICONA. ASESOR:. Ms. C. MARIA NELLY VASQUEZ VALLES. TRUJILLO – PERÚ. 2014. i. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE. UN IC. AC IÓ. N. TRUJILLO. CO. M. Dr. Orlando Velásquez Benites. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. EM. Dra. Vilma Julia Méndez Gil. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. VICERECTORA ACADÉMICA. Dr. Santiago Uceda Duclos. SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. UN IC. Dr. José Mostacero León. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Dr. William Zelada Estraver. Dra. Bertha Soriano Bernilla. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. DI. RE. DIRECTORA DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA.. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AC IÓ. N. Señores Miembros del Jurado:. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados. UN IC. y Títulos de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y Parasitología. M. de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo,. A. Y. CO. pongo a vuestra consideración y criterio el presente trabajo de tesis titulado:. ÁT. IC. “Efecto del aceite esencial de Syzygium aromaticum sobre la supervivencia de. RM. Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus”, con el cual. AS. DE. IN FO. pretendo obtener el Título Profesional de Biólogo Microbiólogo.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. Trujillo, Junio del 2014. Br. Jessenia Milagros Gamboa Anticona. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MIEMBROS DEL JURADO. Los suscritos, miembros del jurado, declaran que la presente tesis ha sido ejecutada en. AC IÓ. N. concordancia con las normas de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y. CO. M. UN IC. Parasitología de la Universidad Nacional de Trujillo.. A. Y. _________________________________. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. Ms. C. Pedro Alvarado Salinas PRESIDENTE. Dra. Icela Rodriguez Haro SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. _________________________________. _________________________________ Ms. C. María Nelly Vásquez Valles VOCAL. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben, miembros del Jurado Examinador, declaran que el. AC IÓ. N. presente Informe de Tesis titulado: Efecto del aceite esencial de Syzygium aromaticum. sobre la supervivencia de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus. UN IC. cereus”, ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo APROBADO. A. Y. CO. M. por UNANIMIDAD.. ÁT. IC. _________________________________. DE. IN FO. RM. Ms. C. Pedro Alvarado Salinas PRESIDENTE. Dra. Icela Rodriguez Haro SECRETARIA. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. _________________________________. _________________________________ Ms. C. Nelly Vásquez Valles VOCAL. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE LA ASESORA. N. La que suscribe, Ms. C. María Nelly Vásquez Valles, asesora de la tesis. AC IÓ. titulada: “Efecto del aceite esencial de Syzygium aromaticum sobre la supervivencia. CO. M. UN IC. de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus”.. Y. CERTIFICA:. IC. A. Que la presente investigación ha sido desarrollada de acuerdo al reglamento. RM. ÁT. establecido por la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de. IN FO. Trujillo, estando en conformidad con su correspondiente proyecto y que el informe ha. AS. DE. sido redactado acogiendo las observaciones y sugerencias alcanzadas.. EM. Por lo tanto autorizo a la Br. JESSENIA MILAGROS GAMBOA ANTICONA. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. continuar con el trámite del reglamento correspondiente.. DI. Ms. C. María Nelly Vásquez Valles ASESORA. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. A Dios, porque sé que siempre me protege. AC IÓ. N. y acompaña en todo momento, por iluminar mi mente y mi corazón y brindarme. CO. M. UN IC. la fuerza espiritual para seguir adelante.. A. Y. Con todo mi amor, a mis padres Juan y Nelly,. ÁT. IC. ejemplos de abnegación y sacrificio, siempre me. RM. demostraron su amor incondicional, porque son. IN FO. quienes depositaron su confianza en mí, expresado en apoyo para lograr mis objetivos, por su. DE. paciencia, por sus sabios consejos, por motivarme. terminaba, a ustedes por siempre mi corazón y mi agradecimiento.. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. y darme la mano cuando sentía que el camino se. CC. A mis hermanos Karla, Karen y Danny,. RE. porque en este largo trayecto, supieron. DI. compartir sus conocimientos, ayudarme a superar los obstáculos de la vida y porque día a día comparten mis logros y triunfos.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A mis sobrinos, Lucerito, Juan Carlos; Mia y Lucianito, que día a. me regalan una sonrisa,. AC IÓ. N. día me alegran con su presencia, y. UN IC. Gracias a todos ustedes por ser. M. parte de esta obra, vivirán en mi. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. corazón eternamente.. Ángela Luciana que están en el cielo. A. Claudia. y. Glenda,. gracias. por. compartirme y demostrarme su verdadera amistad expresado en apoyo incondicional en todo momento. Dios, las bendiga. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. en cada momento de mi vida.. DE. y que siempre estuvieron presentes. IN FO. A dos angelitos, Donnie Patrick y. siempre.. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTO. N. Mi sincero y profundo agradecimiento a la Ms. C. María Nelly Vásquez Valles,. AC IÓ. Profesora del Departamento de Microbiología y Tecnología de Alimentos de la Facultad. UN IC. de Ciencias Biológicas, que en este andar por la vida, influyó con sus lecciones y experiencias en formarme como una persona preparada para los retos que la vida me. CO. M. pone en frente, por su amable disposición en la asesoría de la presente tesis, y por ser un. IC. A. Y. gran soporte en la realización de esta investigación.. RM. ÁT. Al Ing. Wilson Reyes por su apoyo y amable colaboración en la extracción del aceite. IN FO. esencial de Syzygium aromaticum.. DE. A los miembros del jurado, el Ms. C. Pedro Alvarado Salinas y la Dra. Icela Rodríguez. AS. Haro, quienes con su amplia experiencia profesional me ayudaron a encaminar esta. EM. investigación; a todos y cada uno de ellos les dedico cada una de estas páginas de mi. DE. SI ST. tesis.. IO. N. Al Personal de la Sección Técnica del Departamento Académico de Microbiología y. CC. Parasitología por facilitarme los equipos para culminar la parte experimental en la. DI. RE. ejecución de la presente tesis.. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. En la presente investigación se evaluó el efecto del aceite esencial de Syzygium. AC IÓ. N. aromaticum “clavo de olor” en la supervivencia de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus. La extracción del aceite esencial (AE) se realizó a. UN IC. partir de brotes de clavo de olor usando el método de destilación por arrastre con. M. vapor de agua. Así mismo, se prepararon concentraciones del aceite al 10%,. CO. 20%, 30% y 40% más Tween 80 como solvente emulsificante. Se emplearon. A. Y. cada uno de los cultivos de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus. ÁT. IC. cereus y se estandarizaron a una turbidez equivalente a 1.5x108 células/mL del. RM. nefelómetro de MacFarland, los cuales constituyeron los inóculos. El efecto del. IN FO. AE sobre los microorganismos se determinó por el método de difusión en agar utilizándose concentraciones de 10%, 20%, 30% y 40% de aceite; utilizando. DE. cloranfenicol (30ug/disco) como control positivo y Tween 80 como control. AS. negativo. Se determinó que la concentración al 40% del aceite en estudio, posee. SI ST. EM. un mayor efecto inhibitorio sobre la supervivencia de Salmonella typhi, Sallmonella paratyphi A y Bacillus cereus; y la menor concentración (10%). DE. ejerce un menor efecto inhibitorio sobre los microorganismos en estudio. El. IO. N. presente trabajo permite concluir que el AE evaluado presenta un notable efecto. CC. inhibitorio en la supervivencia de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y. DI. RE. Bacillus cereus. Palabras clave: Supervivencia, aceite esencial, Syzygium aromaticum, Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A and Bacillus cereus.. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT. N. In this research the effect of essential oil of Syzygium aromaticum "clove" in the. AC IÓ. survival of Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A and Bacillus cereus was. UN IC. evaluated. The extraction of essential oil (AE) was performed from clove buds using the Distillation with steam method. Likewise, oil concentrations were prepared at 10%,. CO. M. 20%, 30% and 40% plus Tween 80 as an emulsifier solvent. Cultures of Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A and Bacillus cereus were used and were standardized to a. IC. A. Y. turbidity equivalent to 1.5x108 cells / mL, which constituted the inoculum. The. ÁT. sensitivity of these microorganisms was determined by the agar diffusion method used. RM. in concentrations of 10%, 20%, 30% and 40% oil; using chloramphenicol (30ug/disco). IN FO. as positive control and Tween 80 as negative control. It was determined that 40% of the. DE. oil in test compared with chloramphenicol has a greater inhibitory effect on the survival. AS. of Bacillus cereus. Likewise, it was demonstrated that the concentration of 40% of the. EM. oil in the study, it exerts an antibacterial power Salmonella typhi, Salmonella paratyphi. SI ST. A and Bacillus cereus survival compared to the other concentrations employed; Furthermore, the concentration (10%) is less effective over the bacterias. This work. DE. supports the conclusion that the assessed AE presents a remarkable inhibitory effect on. CC. IO. N. the survival of Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A and Bacillus cereus.. DI. RE. Keywords: Survival, essential oil, agar diffusion, Syzygium aromaticum, Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A and Bacillus cereus.. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ii. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. iii. AC IÓ. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. PRESENTACIÓN. iv. UN IC. MIEMBROS DEL JURADO. M. APROBACIÓN. CO. DE LA ASESORA. A. Y. DEDICATORIA. ÁT. IC. AGRADECIMIENTO. RM. RESUMEN. IN FO. ABSTRACT CONTENIDO. OBJETIVOS. vi vii viii x xi xii xiii 1 11. SI ST. 18 21. DE. DISCUSIÓN. v. 12. EM. MATERIAL Y MÉTODO. AS. DE. INTRODUCCIÓN. RESULTADOS. N. CONTENIDO. 30. IO. N. CONCLUSIONES. 31. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 32. RE. CC. RECOMENDACIONES. 38. DI. ANEXOS. xiii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 1 Equipo de destilación de arrastre por vapor de agua para la obtención del aceite esencial de Syzygium aromaticum "clavo de olor".. AC IÓ. N. ANEXO 2-4. UN IC. Diámetros de los halos de inhibición (mm) formados por S. typhi, S. paratyphi A y Bacillus cereus y por el promedio de ellos, obtenidos frente a las. CO. M. concentraciones de 10, 20, 30 y 40% del aceite de Syzygium aromaticum, con. Y. los halos de inhibición obtenidos frente a Cloranfenicol (Control Positivo) y. IC. A. Tween 80 (Control Negativo). Por Triplicado. RM. ÁT. ANEXO 5-7. IN FO. Halos de inhibición del crecimiento de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus a las concentraciones del 10, 20, 30 y 40% del aceite esencial. AS. DE. de Syzygium aromaticum, por la técnica de Difusión en Agar.. EM. ANEXO 8. N. DE. ANEXO 9. SI ST. Composición del medio de cultivo Agar Salmonella Shigella. CC. IO. Composición del medio de cultivo Agar Selectivo para Cereus, seg MOSSEL. DI. RE. (base) ANEXO 10 Composición del medio de cultivo Agar Müller Hinton. xiv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 11 Prueba de Kolmogorov Smirnov para determinar la normalidad de los halos. N. formados por Salmonella typhi.. AC IÓ. ANEXO 12. UN IC. Análisis estadístico realizados a los halos de sensibilidad de Salmonella. M. paratyphi A a diferentes concentraciones (10, 20, 30 y 40%) del aceite esencial. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. de Syzygium aromaticum “clavo de olor” y frente al control Cloranfenicol.. xv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. I.. INTRODUCCIÓN. El consumo de alimentos contaminados con microorganismos patógenos. AC IÓ. N. representa un gran riesgo para la salud humana y por tanto para cualquier tipo de comunidad. En países industrializados cerca del 30% de la población sufre de. UN IC. enfermedades transmitidas a través de los alimentos y miles de personas mueren. CO. M. anualmente por esta causa [1].. A. Y. Los patógenos microbianos en alimentos han sido confirmados como la causa. [2]. . Las intoxicaciones alimentarias, se produce como consecuencia. RM. y el Caribe. ÁT. IC. principal de las enfermedades transmitidas por estos productos en Latinoamérica. IN FO. de la ingestión de alimentos que contienen toxinas preformadas. La contaminación de los alimentos, en la mayoría de los casos, suele ocurrir. DE. después de ser cocidos y no ser conservados adecuadamente, lo que favorece la. SI ST. EM. AS. multiplicación de los microorganismos [3].. Microorganismos como Escherichia coli, Salmonella spp. Staphylococcus. DE. aureus, Pseudomonas aeruginosa y Bacillus cereus; son reconocidos como. IO. N. patógenos causantes de enfermedades y graves intoxicaciones alimentarias,. CC. generando un gran impacto sobre la salud pública [2, 4]. Este grupo de bacterias,. DI. RE. debido a su ubicuidad e incidencia, se ha constituido en el blanco de acción de muchos de los sistemas de aseguramiento de la calidad en industrias alimentarias [3]. .. Para el control adecuado de microorganismos patógenos se requiere del uso de múltiples técnicas de conservación en la fabricación y almacenamiento de 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. productos alimenticios. [4].. Una amplia gama de conservantes se utilizan para. extender la vida útil de un producto y para inhibir el crecimiento microbiano; [5]. evitándose así la aparición de ETA. . Dentro de los procedimientos de control. AC IÓ. N. más utilizados están los tratamientos térmicos de pasteurización y esterilización; la irradiación UV, almacenamiento a bajas temperaturas como congelación y. M. UN IC. refrigeración, así mismo el uso de conservantes químicos [6].. CO. El inconveniente que se presenta con estos métodos de tratamiento es que no. Y. todos son 100% eficientes contra todos los microorganismos ni se pueden . Los tratamientos térmicos por ejemplo son. A. [7]. IC. utilizar sobre todos los productos. RM. ÁT. los más utilizados y tienen buena eficiencia, pero causan cambios en las. IN FO. características organolépticas de los alimentos comparados con el producto. DE. natural [8].. AS. Como alternativa a los conservantes sintéticos, los aceites esenciales prometen. EM. competir con el amplio mercado de los agentes sintéticos que actualmente. SI ST. ofrecen productos económicos, de aplicación sencilla y amplio espectro, pero. DE. que están destinados a desaparecer porque se ha demostrado que algunos de. N. estos son altamente tóxicos para el hombre y los animales, así mismo son. CC. IO. bioacumulables, y después de un largo tiempo de aplicación son inactivos para. DI. RE. muchos microorganismos patógenos [9, 10].. Las propiedades antimicrobianas de hierbas y especias han sido reconocidas y usadas desde tiempos antiguos en la preservación de los alimentos y en la medicina, pero científicamente confirmado hace pocos años. [11]. . Los aceites. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. esenciales poseen actividad antimicrobiana por lo cual los convierte en una opción atractiva para la sustitución de conservantes sintéticos, los que al ser añadidos van a cambiar o mejorar el sabor de los alimentos. [12]. . Sin embargo, la. AC IÓ. N. aplicación de aceites esenciales como conservantes de alimentos requiere un conocimiento detallado de sus propiedades, es decir, su modo de acción y el. M. UN IC. efecto de los componentes en la matriz de los alimentos [13,14].. CO. La asociación Americana del Comercio de Especias (American Spice Trade. Y. Association) define a las mismas como “cualquier producto de plantas seco y. IC. A. utilizado como condimento”, se incluyen raíces, cortezas, capullos, semillas,. RM. ÁT. frutos, flores y vegetales deshidratados, las cuales son utilizadas para. IN FO. condimentar a los alimentos [15]. Aproximadamente más de 1,340 plantas son un recurso potencial de compuestos antimicrobianos. [16, 17]. . Dichos compuestos. DE. incluyen sustancias de bajo peso molecular como las fitoalexinas, entre las. AS. cuales los compuestos fenolitos son los más predominantes (p.e. ácido cafeico,. EM. cinámico, ferúlico, timol y eugenol) [15, 18]. Así mismo, se menciona que cerca de. SI ST. 80 productos de origen vegetal contiene altos niveles de antimicrobianos con uso. DE. potencial en alimentos, por ejemplo: canela, orégano, romero, clavo de olor,. CC. IO. N. entre otros [19].. RE. Los aceites esenciales son compuestos volátiles, aromáticos; que son obtenidos. DI. de los materiales vegetales (flores, brotes, semillas, hojas, corteza, hierbas, madera, frutas y raíces). Se conocen aproximadamente 3000 aceites esenciales, de los cuales 300 son comercialmente importantes en el mercado de las fragancias [15, 16]. Por otro lado, los componentes activos de los aceites esenciales. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. pueden variar en su composición, ya que éstos pueden verse afectados por ciertas variables como el genotipo de la planta, las diferentes metodologías de extracción, localización geográfica, así como las condiciones ambientales y. AC IÓ. N. agronómicas [17, 20].. UN IC. Syzygium aromaticum (“clavo de olor”), es un árbol perteneciente a la familia. M. Myrtaceae, el cual se cultiva en abundancia en Indonesia, Sri Lanka,. CO. Madagascar, Tanzania y Brasil. Sus flores secas son aromáticas y se usan en. Y. cantidades limitadas en productos alimenticios como un agente que proporciona. . Desde hace siglos, el aceite de clavo se ha. ÁT. [14, 18]. RM. antibacteriano y antifúngico. IC. A. fragancia y sabor, al mismo tiempo que es antiséptico, carminativo,. IN FO. empleado entre otras aplicaciones como analgésico y anestésico local por dentistas y como aditivo alimentario [19, 21]. Es un producto natural obtenido por. DE. destilación de tallos, flores y hojas trituradas de la planta del clavo, cuyo. AS. principal ingrediente activo es el eugenol (85-95 % del total/ 4-alil-2-vaselina);. EM. está compuesto además por. acetileugeno, α y β cariofilenos y pequeñas. DE. SI ST. cantidades de ésteres, cetonas y alcoholes [22].. N. La actividad antimicrobiana, hay dos tipos de efectos: actividad letal o [9, 18]. . En. CC. IO. bactericida y la inhibición del crecimiento o la actividad bacteriostática. RE. la mayoría de los casos la acción de los aceites esenciales es similar a un efecto. DI. bacteriostático. Sin embargo, algunos de sus componentes químicos parecen. tener propiedades bactericidas. [19]. . Varios estudios, tales como los encontrados. por Demo, Oliva, Lopez, Zunino y Zygadlo (2005) han demostrado la presencia de fugas de los iones de potasio en las células microbianas (Escherichia coli y. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Staphylococcus aureus) en contacto con el aceite esencial de árbol de té (tea tree) [30]. Esta pérdida de potasio es la primera evidencia de la existencia de un. AC IÓ. N. daño irreversible en la membrana de la bacteria [21, 23].. El modo de acción de los agentes antimicrobianos depende del tipo de. [18, 22]. . Las bacterias Gram-. M. pared celular y el arregle de la membrana externa. UN IC. microorganismo afectado y se relaciona principalmente con la estructura de su. CO. negativas poseen una resistencia intrínseca a una amplia variedad de aceites. Y. esenciales, la cual se asocia con la superficie hidrofílica de su membrana. IC. A. externa, rica en lipopolisacáridos, la cual crea una barrera contra agentes tóxicos;. RM. ÁT. por lo que macromoléculas hidrofóbicas tales como ciertos constituyentes de los [19]. . Por otro. IN FO. aceites esenciales son incapaces de penetrar al microorganismo. lado, el mecanismo de acción de los aceites esenciales contra bacterias Gram-. DE. positivas resulta en que estos destruyen la pared celular y la membrana. EM. AS. citoplasmática, lo cual resulta en el escape del citoplasma y su coagulación [20].. SI ST. Las bacterias Gram negativas son generalmente menos susceptibles a los aceites. DE. esenciales que las bacterias Gram positivas. La membrana externa de las. N. bacterias Gram negativas contienen lipopolisacáridos hidrófilos, que crean una. CC. IO. barrera hacia macromoléculas y compuestos hidrófobos, proporcionándoles una. encuentran en los aceites esenciales [23]. Las altas concentraciones de los aceites. DI. RE. mayor tolerancia hacia compuestos antimicrobianos hidrófobos como los que se. esenciales puede afectar las propiedades organolépticas de los alimentos, las bajas concentraciones puede ser suficiente para la seguridad alimentaria en las. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. situaciones donde la carga bacteriana es baja, además del agradable sabor que es impartida a la comida [24].. AC IÓ. N. Dentro de las bacterias Gram negativas que ha cobrado interés en la contaminación de alimentos es Salmonella spp. Es un bacilo anaerobio. UN IC. facultativo perteneciente a la familia Enterobacteriaceae. Las especies de este patógeno son quimioorganótrofas, con habilidad para metabolizar nutrientes por. CO. M. las vías fermentativa y respiratoria [25]. Las bacterias crecen óptimamente a 37°C. Y. y pueden catabolizar la D-glucosa y otros carbohidratos con producción de ácido. IC. A. y gas. Estos microorganismos son oxidasa negativos y catalasa negativos, crecen. RM. ÁT. en citrato como única fuente de carbono, generalmente producen ácido. IN FO. sulfhídrico, descarboxilan la lisina y ornitina, y no hidrolizan la urea. La mayoría de estas características se utilizan para la identificación bioquímica de. AS. DE. cultivos aislados de Salmonella [26].. EM. La amplia distribución de Salmonella spp. en el medio ambiente, aunada a las. SI ST. prácticas agrícolas utilizadas en la industria cárnica, pesquera, de moluscos,. DE. láctea y el reciclaje de la materia prima como alimento para ganado, ha. N. favorecido la continua permanencia de este patógeno humano en la cadena. CC. IO. alimenticia [27]. El sector avícola se sitúa como la principal fuente de Salmonella. puerco, de res, de cordero, leche y sus derivados [28].. DI. RE. spp. y enmascara la importancia como vehículos de infección de las carnes de. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Las frutas y verduras han ganado notoriedad en años recientes como fuentes de salmonelosis humana. Esto se presenta como una consecuencia de diversos factores como: la fertilización de sembríos con lodos sin tratamiento o efluentes. AC IÓ. N. de drenajes potencialmente contaminados con Salmonella spp. resistente a antibióticos, la irrigación de los campos y el lavado de frutas y verduras con. UN IC. aguas contaminadas, la manipulación excesiva por los trabajadores, la exposición a la contaminación ambiental de especies y condimentos durante el. Y. CO. M. secado y la resistencia del microorganismo a valores de pH bajos [31].. IC. A. Por otro lado, Bacillus cereus es una bacteria Gram positiva, ubiquitaria, de. RM. ÁT. metabolismo aeróbico facultativo y capaz de formar esporas. En función de la. IN FO. cepa contaminante, la enfermedad que causa puede presentar dos cuadros: una intoxicación emética por ingestión de toxinas presentes en el alimento o una. DE. infección diarreica debida a una ingestión de bacterias o esporas que crecen en. AS. los intestinos produciendo toxinas. [19, 27]. . Este patógeno, está ampliamente. EM. distribuido en la naturaleza y se aísla frecuentemente del suelo, el polvo y la. SI ST. vegetación. Se pueden encontrar concentraciones bajas de esporas o células en. DE. casi todos los alimentos (hortalizas, fruta, especias, leche, carne, etc.). En. N. general, estos niveles son muy bajos como para causar una enfermedad, pero la. CC. IO. habilidad de formar esporas le asegura una supervivencia a través de toda la. 20ºC y la máxima es entre 40ºC a 45ºC con un óptimo de 37ºC [18, 28].. DI. RE. cadena alimentaria; las temperaturas de crecimiento: mínima están entre 15ºC a. Gaisinsky et al. (2005) estudiaron el efecto inhibitorio del carvacrol y el eugenol, contra cuatro cepas de Escherichia coli O157:H7 y Listeria. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. monocytogenes. Sus resultados demostraron que el eugenol fue más efectivo para inhibir ambos tipos de patógenos. Además demostraron que para la inhibición del crecimiento de L. monocytogenes se requiere una mayor. N. concentración del aceite esencial de clavo de olor que para la inhibición de E.. UN IC. AC IÓ. coli O157:H7 [21].. M. Decker y otros en el 2005, reportaron un amplio espectro de actividad. CO. bacteriostática del clavo de olor contra E. coli y L. monocytogenes, resultando [22]. . Sin embargo, la. Y. efectiva las dosis empleadas 20 y 40 % respectivamente. IC. A. aplicación de aceites esenciales como conservantes de alimentos requiere un. RM. ÁT. conocimiento detallado de sus propiedades, es decir, la concentración mínima. IN FO. inhibitoria (CMI), el modo de acción y el efecto de los componentes en la matriz de los alimentos; dentro de las diferentes plantas con propiedades. AS. DE. antimicrobianas encontramos a ciertas especias [18,23].. EM. En el 2012, Yossa y colaboradores evaluaron el efecto in vitro del clavo a un. SI ST. 10% sobre cepas de E. coli O157:H7 y Salmonella spp. El efecto de este aceite [5]. . Así. DE. esencial fue observado por medio de microscopia electrónica de barrido. N. mismo, Sánchez en el 2009, demostró concretamente que derivados fenólicos. CC. IO. tales como carvacrol y eugenol, provenientes del clavo y tomillo, a. typhimurium, demostrándose así que las bacterias gram negativas son menos. DI. RE. concentraciones 20 uL, causan la desintegración de la membrana de E. coli y S.. susceptibles que las gram positivas. Así también, se conoce que el eugenol, posee una buena actividad antibacterial [11].. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A pesar que sea escasa la información de trabajos publicados del uso del aceite del clavo contra Bacillus cereus en 1998, Hao et al. encontraron que el clavo de olor a 10 % fue muy efectivo contra Listeria monocytogenes y Aeromonas. N. hydrophilla en carne cocida refrigerada; sin embargo su poder inhibidor fue. UN IC. AC IÓ. menor al de la canela a 10 % [14, 15].. M. Por lo anterior, son pocas las investigaciones en las que se ha determinado el. CO. efecto del aceite esencial de Syzygium aromaticum contra Salmonella typhi,. Y. Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus, En tal sentido, lograr que la. IC. A. población disponga de alimentos rigurosamente libre de patógenos o. RM. ÁT. contaminantes, es un propósito de muchos investigadores, además hace un bien a. IN FO. la Salud Pública, de allí el interés científico por investigar y descubrir nuevas alternativas viables para la síntesis y producción de antimicrobianos de origen. DE. natural, como el aceite esencial de Syzygium aromaticum, que es un alternativa. AS. viable debido a su alto rendimiento, fácil extracción porque no requiere. EM. tecnología sofisticada, permite la explotación de recursos naturales, abundantes. SI ST. y renovables, no contamina el ambiente, buen antioxidante, no genera resistencia. DE. bacteriana, y no requiere elevadas concentraciones. En tal sentido, este estudio. N. se considera como una alternativa para disminuir la carga microbiana que puede. CC. IO. estar en un alimento, y teniendo en cuenta puede servir como conservante. RE. natural sustituyendo los conservantes químicos y prolongando la vida útil de los. DI. alimentos, y así mismo, obtener alimentos seguros e inocuos para garantizar la salud, beneficiar al sector comercializador y la economía de los consumidores, poniendo a disposición de la industria alimentaria un aditivo natural frente a la demanda de los consumidores de alimentos más frescos, menos procesados, de. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. calidad e inocuidad; y aumentando significativamente la calidad de vida del hombre, por lo anterior, es que se realizó la presente investigación con el propósito de determinar el efecto del aceite esencial de Syzygium aromaticum. AC IÓ. N. sobre la supervivencia de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. cereus.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. OBJETIVOS. Determinar el efecto del aceite esencial de Syzygium aromaticum. UN IC. -. AC IÓ. N. 1. General. sobre la supervivencia de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y. IC. A. Y. CO. M. Bacillus cereus.. -. IN FO. RM. ÁT. 2. Específico. Determinar los halos de inhibición de crecimiento (mm) de. DE. Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus frente al. -. SI ST. EM. AS. aceite esencial de Syzygium aromaticum.. Determinar que concentración del aceite esencial de Syzygium. DE. aromaticum es significativamente más eficaz en relación al. Bacillus cereus.. DI. RE. CC. IO. N. Cloranfenicol, contra Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II.. MATERIAL Y MÉTODO. 2.1. Material Biológico. N. 2.1.1 Material vegetal. UN IC. AC IÓ. - 1 Kg. Syzygium aromaticum “clavo de olor”. 2.1.2 Cultivos bacterianos. M. Se trabajaron con cultivos de Salmonella typhi, Salmonella. CO. paratyphi A y Bacillus cereus, proporcionados por el Laboratorio. Y. Microbiología y Tecnología de Alimentos, de la Escuela. A. de. ÁT. IC. Profesional de Microbiología y Parasitología, facultad de Ciencias. IN FO. RM. Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo.. 2.2. Obtención de Syzygium aromaticum. DE. Los brotes de Syzygium aromaticum fueron adquiridos del. AS. Mercado Zonal Palermo (Ex Mercado Mayorista) distrito de. SI ST. EM. Trujillo provincia de Trujillo, departamento La Libertad-Perú.. Los brotes se llevaron al Laboratorio de Investigación N° 04 de la Facultad de Ingeniería Química, posteriormente, se envolvió en papel de molde hasta el momento de la extracción del aceite.. DI. RE. CC. IO. N. DE. 2.3. Transporte y conservación de Syzygium aromaticum. 2.4. Pesado de Syzygium aromaticum Se pesaron 500 g de brotes de Syzygium aromaticum en una balanza mecánica. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.5. Extracción del aceite esencial de Syzygium aromaticum. [28,29]. -. Método: Destilación por Arrastre de Vapor. UN IC. balón de fondo redondo de 1000 mL de capacidad.. AC IÓ. N.  Se depositaron 500 g de brotes de Syzygium aromaticum en un. M.  Se procedió a llenar con agua el balón destilador, previa. CO. instalación del conducto refrigerante, cabe resaltar que el extremo. A. Y. superior de este balón fue conectado a un condensador,. Luego, se llevó a calentamiento hasta ebullición, el balón conteniendo. IN FO. . RM. ÁT. IC. haciéndose circular el agua a través del mismo.. agua. por. un. tiempo. de. tres. horas. hasta. DE. desprendimiento de un líquido inmiscible conteniendo vapor de. AS. agua condensada y el aceite vegetal, que fueron recolectados en. SI ST. EM. embudos de decantación.. decantación.. 2.6. Conservación del aceite esencial de Syzygium aromaticum. DI. RE. CC. IO. N. DE.  Posteriormente, se eliminó el agua contenido en el embudo de.  El aceite esencial obtenido se colectó en viales de color ámbar y se conservó a temperatura de refrigeración a 10 ºC [20].. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.7. Reactivación, purificación y siembra. - Cada uno de los cultivos bacterianos se sembraron en 4 ml de caldo. AC IÓ. N. Infusión Cerebro Corazón (BHI) respectivamente y se incubaron a 37°C durante 12 horas.. UN IC. - Después del período de incubación se sembró una alícuota del cultivo. M. de Bacillus cereus en Agar Selectivo para Bacillus cereus y los cultivos. CO. de S. typhi y S. paratyphi A se sembraron en Agar Salmonella Shigella.. A. Y. Posteriormente cada uno de los cultivos se llevó a incubar a 37° C. ÁT. IC. durante 24 horas.. RM. - Se seleccionaron colonias que presentaron características culturales. IN FO. propias a cada microorganismo en estudio. A partir de cada una de las. DE. colonias, se tomó una azada y se realizó la coloración Gram,. AS. observándose a 100x.. EM. - Una vez comprobada la pureza del cultivo, de la parte restante de la. DE. SI ST. colonia aislada se sembró en agar nutritivo semisólido inclinado.. [30,31]. DI. RE. CC. IO. N. 2.8. Preparación del inóculo.  Cada uno de los cultivos bacterianos se sembraron en placas conteniendo Plate Count Agar (PCA) y se incubaron a 37°C durante 18 horas.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.9 Estandarización de los inóculos bacterianos  Se realizó una suspensión en 5 mL de Agua Destilada Estéril (ADE). A. M. Preparación de las concentraciones del aceite esencial de. CO. 2.10. UN IC. AC IÓ. (1.5 x 108 UFC/ mL). A esta suspensión se le denominó inóculo.. N. una turbidez equivalente al tubo Nº 0.5 del Nefelómetro de Mac Farland. Y. Syzygium aromaticum. IC. A. A partir del aceite esencial de Syzygium aromaticum y usando Tween 80. RM. ÁT. como agente emulsificante, se prepararon concentraciones de 10%, 20%,. DE. IN FO. 30% y 40%.. AS. 2.11 Determinación de la supervivencia de Salmonella typhi, Salmonella. EM. paratyphi A. SI ST. 2.11.1 Método de Difusión en Agar Kirby- Bauer [32]. sembró 100uL del inóculo de Salmonella typhi sobre la superficie. DI. RE. CC. IO. N. DE. - En tres placas Petri con 20 mL de Agar Müller Hinton, se. del medio de cultivo. - Las placas se llevaron a secar en la estufa por 10 minutos. - A cada placa se le realizó 5 orificios de 5 mm de diámetro cada uno utilizando un sacabocado estéril, a una distancia de 3 cm con respecto al otro. A 4 orificios se le añadió 100 uL de cada una de las concentraciones de aceite esencial, al 5 orificio siguiente, se le 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. adicionó 100 uL de Tween 80 como control negativo; así mismo, en la misma placa se utilizó un disco de cloranfenicol (30ug) como control positivo.. AC IÓ. N. - En la otra placa se colocó 100uL de Tween 80 como control negativo; y cloranfenicol (30ug/disco) siendo este el control. UN IC. positivo.. CO. M. - Las placas sembradas se dejaron una hora, con la finalidad de. A. Y. permitir una mejor difusión del aceite en el agar.. ÁT. IC. - Posteriormente, las placas fueron incubadas a 37°C durante 24. DE. 2.11.2 Lectura. IN FO. RM. horas.. AS. - La lectura de los resultados se realizó en base a la presencia de. EM. halos de inhibición del crecimiento (en milímetros), formados. SI ST. alrededor de cada pocillo por efecto de la actividad antibacteriana. luego se les restó los 5 mm. del pozo.. DI. RE. CC. IO. N. DE. del aceite esencial a concentraciones de 10% ,20%, 30% y 40% y. - Las mediciones se realizaron en 4 direcciones y se sacó el promedio. - Se continuó con el mismo procedimiento y por triplicado para el cultivo de Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. - Las placas presentaron actividad antibacteriana significativa (definida como una zona clara perfecta con un diámetro ≥18 mm para el cloranfenicol, Intermedia si es 13-17 y Resistente ≤12). UN IC. AC IÓ. N. [33,34].. 2.12 Determinación de la supervivencia de Bacillus cereus. A. Y. CO. M. - Se realizó de acuerdo al ítem 2.11. ÁT. IC. 2.13 Análisis Estadístico. RM. El procesamiento y análisis de los resultados obtenidos para la. IN FO. actividad antibacteriana del aceite esencial de Syzygium. DE. aromaticum que se presenta para Salmonella typhi, Salmonella. AS. paratyphi A y Bacillus cereus se efectuó mediante el programa. EM. SPSS versión 18.0. Para realizar los análisis se tuvo en cuenta los. SI ST. valores promedio de inhibición de cada concentración del aceite. DI. RE. CC. IO. N. DE. esencial evaluado; ya que se realizaron tres repeticiones por tratamiento. Posteriormente, se realizó el análisis de varianza,. específicamente una prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis Test; así mismo, a los datos obtenidos para determinar las diferencias significativas en la actividad antibacteriana entre los tres grupos de bacterias así como con el antibiótico utilizado (control positivo). La significancia se reportó con un nivel de confianza del 95%.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. III.. RESULTADOS. Los resultados del efecto del aceite esencial de Syzygium aromaticum sobre. N. la supervivencia de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus. AC IÓ. cereus se muestran a continuación.. UN IC. En la Figura 1. se presenta la comparación de promedios de los halos de. M. sensibilidad (mm) entre Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus. CO. cereus a concentraciones (10%, 20%, 30% y 40%) del aceite esencial de. A. Y. Syzygium aromaticum y del grupo control “Cloranfenicol, observándose el. ÁT. IC. promedio de la medición de los halos de inhibición del crecimiento (mm) de. Syzygium aromaticum. y del. grupo control. IN FO. aceite esencial de. RM. S. typhi por acción de diferentes concentraciones 10%, 20%, 30% y 40% del. “Cloranfenicol”, se evidencia la existencia de diferencia significativa entre. DE. estos grupos, siendo la concentración del 40% de aceite esencial de Syzygium. EM. AS. aromaticum la de mayor efecto en relación al Cloranfenicol (p < 0.05).. SI ST. Así mismo, se muestra los halos de inhibición de crecimiento (mm) de S.. DE. paratyphi A por acción de diferentes concentraciones (10%, 20%, 30% y 40%) del aceite esencial de Syzygium aromaticum y del grupo control. CC. IO. N. “Cloranfenicol”, se observa la existencia de diferencia significativa entre. aromaticum la de mayor efecto en relación al Cloranfenicol (p < 0.05).. DI. RE. estos grupos, siendo la concentración del 40% de aceite esencial de Syzygium. También, se muestra los halos de inhibición de crecimiento (mm) de B. cereus por acción de diferentes concentraciones (10%, 20%, 30% y 40%) del aceite esencial de Syzygium aromaticum y del grupo control “Cloranfenicol”, 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. se observa la existencia de diferencia significativa entre estos grupos, siendo la concentración del 40% de aceite esencial de Syzygium aromaticum la de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. mayor efecto en relación al Cloranfenicol (p < 0.05).. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M UN IC AC IÓ. 20. 16. CO. 14. A. Y. 12. IC. 10. Salmonella paratyphi A. RM ÁT. 8. Bacillus cereus. IN FO. 6. Salmonella typhi. 4. DE. Halos de Inhibición de crecimiento (mm). 18. AS. 2 0 20%. 30%. 40%. EM. 10%. Cloranfenicol. DE. SI. ST. Concentración del aceite esencial de Syzygium aromaticum "clavo de olor". N. Figura 1. Comparación de promedios de los halos de inhibición de crecimiento (mm) de. CC I. O. Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus a concentraciones de 10, 20, 30, y. DI. RE. 40% de aceite esencial de Syzygium aromaticum y del grupo de control "Cloranfenicol".. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IV.. DISCUSIÓN. Muchos estudios en el mundo se han realizado con los aceites esenciales. AC IÓ. N. obtenidos de diferentes plantas clasificadas como medicinales o como especias; la intención de estos estudios ha sido diferente en el sentido de buscar. UN IC. compuestos que inhiban el crecimiento ya sea de bacterias, hongos, virus y. M. parásitos en alimentos, en aguas residuales o también para ser utilizados como. Y. CO. medicamentos.. IC. A. Hoy en día existe una demanda significativa de los consumidores por los. ÁT. alimentos que son mínimamente procesados y libres de conservantes químicos. RM. de síntesis con la percepción de ser “natural”; como resultado, la industria. IN FO. alimentaria se enfrenta a grandes desafíos para producir alimentos naturales, es. AS. conservantes naturales.. DE. por ello, han surgido investigaciones que utilizan los aceites esenciales como. EM. En la Figura N°1, se observa que para S. typhi, el halo de inhibición formado. SI ST. por la concentraciones de 10, 20 y 30% del aceite de Syzygium aromaticum,. DE. fueron de 11.8mm, 15.0mm, y 15.6 mm (Ver anexo 2), respecto al halo de. N. sensibilidad formado por Cloranfenicol que fue de 16.6 mm; esto denota que su. CC. IO. actividad antibacteriana es menos eficaz comparado con el patrón cloranfenicol. DI. RE. (P > 0.05). La mayor zona de inhibición de S. typhi. se obtuvo con la concentración de 40%, cuyo halo de inhibición fue de 18.3 mm (Ver anexo 02) siendo mucho mayor con respecto a su control (16 mm). Este resultado permite asegurar que S. typhi es significativamente más sensible a la concentración de 40% del aceite 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. esencial de Syzygium aromaticum, que al antibiótico Cloranfenicol; por lo que resultó con p < 0.05, lo cual indica la existencia de diferencia significativa entre el halo de inhibición formado por el aceite al 40% y el formado por. AC IÓ. N. Cloranfenicol. Siendo esta concentración eficazmente sensible para S. typhi. El efecto del aceite esencial de Syzygium aromaticum sobre la supervivencia de. UN IC. Salmonella paratyphi A es menor a las concentraciones de 10, 20 y 30%, con. M. halos formados 12.6, 13.4 y 13.7 mm respectivamente; así mismo, presentan. CO. mayor diámetro, en comparación con el halo de inhibición de crecimiento. A. Y. formado por el antibiótico Cloranfenicol (control) que fue de 8.4 mm, aunque. ÁT. IC. producen efecto inhibitorio en la bacteria, no son concentraciones eficaces en. RM. relación al antibiótico (P > 0.05), esto se interpreta que el halo de sensibilidad. IN FO. formado a dichas concentraciones no es significativamente eficaz para Salmonella paratyphi A. Sin embargo la concentración de 40%, formó diámetro. DE. de 15.8mm (Ver anexo 03), mucho mayor con respecto a su control (8.4mm),. EM. AS. por lo que resultó con p < 0.05, lo cual indica la existencia de diferencia. SI ST. significativa entre el halo de inhibición formado el aceite al 40% y el formado por el control positivo. Siendo esta concentración eficazmente sensible para. N. DE. Salmonella paratyphi A.. CC. IO. Se observa que B.cereus es sensible frente a las concentraciones de 10,20 y 30%. RE. del aceite de Syzygium aromaticum, pues se observa la formación de halos de. DI. inhibición de 14.8, 17.0 y 17.2mm respectivamente; pero el diámetro de estos. halos, es mayor en comparación con el halo de sensibilidad formado por el antibiótico Cloranfenicol (control) que fue de 12.8 mm (Ver anexo 4), aunque producen sensibilidad en la bacteria, no son concentraciones eficaces. Así mismo, la concentración de 40%, formó diámetro de 18.6 mm (Ver anexo 4), 22. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. mucho mayor con respecto a su control, por lo que resultó con p < 0.05, lo cual indica la existencia de diferencia significativa entre el halo de inhibición formado el aceite al 40% y el formado por el control positivo. Siendo esta. AC IÓ. N. concentración eficazmente sensible para B. cereus. Así mismo, en la Figura N° 01. los promedios de los halos de inhibición de. UN IC. crecimiento de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus. M. frente a cada concentración (10, 20, 30 y 40%) del aceite esencial de Syzygium. CO. aromaticum, existiendo diferencia significativa entre ambas bacterias, es decir. A. Y. una de las bacterias presenta menor supervivencia frente al aceite esencial,. ÁT. IC. resultando que B. cereus es más sensible al aceite de Syzygium aromaticum a las. RM. concentraciones de 10, 20, 30 y 40% en comparación con la supervivencia de. IN FO. Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A que presentan menor inhibición de crecimiento frente a las mismas concentraciones. Los resultados obtenidos son. DE. coherentes y se relacionan con los hallados por Friedman y col. quienes. EM. AS. analizando aceite de clavo, sobre Salmonella enterica, encontraron que clavo de. SI ST. olor fue uno de los más efectivos a concentración del 50%. Adicionalmente, este. DE. aceite evidenció inhibición frente a B. cereus, E. coli y Ps. Aeruginosa [25, 26].. N. También se evidenció que Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus. CC. IO. cereus no son sensibles al control negativo, Tween 80, ya que no se observó la. RE. formación de halos, mostrando la resistencia de estos microorganismos al. DI. emulsificante. Investigadores señalan que existe una relación entre las estructuras químicas de los más abundantes en el aceite esencial y la actividad antimicrobiana. Considerando la gran variedad de compuestos químicos presentes en lo aceites 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. esenciales, es muy probable que su actividad antibacteriana, no sea atribuible a un mecanismo específico, sino a la acción combinada de varios de ellos, en el caso de Syzygium aromaticum la actividad antibacteriana se debe a que el. AC IÓ. N. eugenol, actúa inhibiendo la producción de enzimas intracelulares, tales como, amilasas y proteasas, lo que provoca el deterioro de la pared y un alto grado de [19, 28]. . El presente trabajo, concuerda con lo encontrado por. UN IC. lisis celular. M. Gutierrez 2006 y Huerta 2007, en el cual concentraciones de 30 % de aceite. CO. esencial de clavo poseen mayor actividad antibacteriana frente a S. typhimurium.. A. Y. Aunque no se conoce con exactitud el mecanismo de acción de los componentes. ÁT. IC. del aceite, se sabe que los sitios de acción en la célula bacteriana incluyen la. RM. membrana celular, pared celular, enzimas metabólicas, síntesis de proteínas y el. IN FO. sistema genético, todos ellos estratégicos para la supervivencia de los microorganismos y cualquier acción sobre ellos puede inactivar a la célula. AS. DE. bacteriana [30, 33].. EM. El resultado de la comparación de los halos de inhibición entre Salmonella typhi,. SI ST. Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus difieren en varios aspectos de otros. DE. con respecto a la estructura de sus paredes celulares, principalmente a la. N. presencia de lipoproteínas y lipopolisacáridos en bacterias Gram negativas que. CC. IO. forman una barrera para los compuestos hidrófobos [29, 36]. Los aceites esenciales. RE. se introducen a través de los lípidos de la membrana celular y mitocondrial,. DI. alterando su estructura y haciéndolas más permeables. Como consecuencia tiene lugar una fuga de iones y de otros contenidos celulares, de forma más o menos intensa, que puede llevar a la muerte celular. [34,35].. En su mayoría las gram-. negativas son más resistentes a los aceites esenciales que las bacterias Grampositivas [36]. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El eugenol es el principal componente del aceite del clavo. [11].. Huertas (2008),. encontró que a concentraciones subletales de eugenol inhibe la producción de amilasa y proteasas de B. cereus, deteriorando la pared celular, lo que origina la. AC IÓ. N. lisis celular [34]. Los aceites esenciales compuestos principalmente por sustancias fenólicas, como el aceite del clavo de olor, expresan una actividad inhibitoria. UN IC. mayor y un espectro de acción más amplio, en comparación con aceites. M. compuestos principalmente por grupos alcohólicos. Lo anterior explica el hecho. CO. de que el clavo de olor (que contiene eugenol) posee una actividad [26, 34]. . En la. Y. antibacteriana mayor a diferencia de compuestos no fenólicos. IC. A. presente investigación, este compuesto fenólico mostró distintos niveles de. RM. ÁT. inhibición del crecimiento cuando se utilizaron por separado frente a Salmonella. IN FO. typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus.. DE. El hecho de que las bacterias gram (-) sean menos susceptibles a la acción de los. AS. AE quizás sea debido a que la membrana externa que poseen y que rodea la. EM. pared celular el cual restringe la difusión de compuestos hidrofóbicos a través de. SI ST. la membrana; así mismo, la compleja composición de los AE puede variar en función de las condiciones de crecimiento de cultivo de la planta, del modo de. DE. extracción del mismo, y de otros factores que hacen que éstos tengan diferente. CC. IO. N. grado de actividad antibacteriana [32].. RE. En aquellos aceites esenciales que han presentado mayor capacidad inhibitoria. DI. se han encontrado como mayores componentes del mismo, compuestos tales como el timol, el carvacrol, el linalool, el aldehído cinámico, la alicina y el eugenol. [25, 36]. ; dichos aceites en las bacterias, por su acción lipofílica tienen la. capacidad de pasar las membranas celulares, romper polisacáridos, ácidos grasos y lípidos, permeabilizando la membrana celular; esta permeabilización, conduce 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. a la pérdida de iones, al colapso de la bomba de protones y a la disminución del ATP lo cual inevitablemente conduce a la muerte celular; también se ha encontrado que a nivel citoplasmático puede actuar sobre lípidos y proteínas [4, 32]. . Otros estudios han concluido además, que. AC IÓ. N. coagulando dichas moléculas. son más sensibles las bacterias Gram positivas que las Gram negativas, y este. UN IC. efecto está asociado con aceites esenciales que contengan carvacrol y timol los. M. cuales tienen mayor rendimiento antibacterial [24, 25].. CO. Salmonella typhi y Salmonella paratyphi A presentaron menor inhibición al. A. Y. aceite esencial de Syzygium aromaticum, que Bacillus cereus, ésta diferencia se. ÁT. IC. debería a la estructura de sus membranas ; ya que, las Gram negativas (S. typhi. RM. y S. paratyphi A), poseen una pared celular más compleja compuesta por dos. IN FO. capas situadas por fuera de la membrana citoplasmática, la primera y más cercana a la membrana es similar (más delgada) a la de las bacterias Gram. DE. positivas, está constituida por péptidoglicanos, la segunda denominada. EM. AS. membrana externa está constituida por fosfolípidos con ácidos grasos saturados. SI ST. y entre las dos capas se halla un espacio periplasmico rico en enzimas, esta estructura les confiere un mayor grado de resistencia a los agentes. DE. antimicrobianos [31, 33], además poseen mecanismos de defensa como: presencia. IO. N. de b-lactamasas, modificación enzimática del agente antimicrobiano, cambios en. CC. la permeabilidad de la membrana externa debida a la presencia de bombas de. DI. RE. expulsión, etc, que generan dificultades para encontrar sustancias que sean efectivas contra ellas [31, 35]. Así mismo, Burt y Reinders (2003) propusieron que el aceite esencial de clavo ejerce su efecto antimicrobiano sobre los fosfolípidos en la capa externa de la membrana celular de las bacterias, provocando la formación de poros y afectando la permeabilidad de la membrana [36]. 26. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Se observa que el efecto inhibidor del aceite esencial de Syzygium aromaticum para Bacillus cereus es mayor al compararlos con los demás microorganismos evaluados, posiblemente esto pude deberse a la estructura de su pared celular ya. AC IÓ. N. que como es un microorganismo Gram positivo es menos complejo, pues está compuesto por una membrana citoplasmática y una capa gruesa de. UN IC. peptidoglucano en comparación con las bacterias Gram negativas que tienen una pared más compleja, posee una membrana citoplasmática, una delgada capa de. CO. M. peptidoglucano, lipopolisacáridos y proteínas [32, 36].. A. Y. En relación a B. cereus, son escasos los estudios publicados para esta bacteria;. ÁT. IC. sin embargo, la actividad biológica demostrada en este estudio coincide con los. a una concentración de 0.4% y a una temperatura de 21 °C. IN FO. Escherichia coli. RM. resultados obtenidos por Nuñez y Aquino (2012); quienes determinaron que. DE. reducen la población microbiana en un logaritmo 5 el cual es más sensible. AS. comparado con Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa así como los. EM. hallazgos de Sartoratto et al. (2004) quienes determinaron que las bacterias. SI ST. Gram negativas: Escherichia coli, Pseudomona aeruginosa, Salmonella tiphymurium, Salmonella cholerae suis y Vibrio cholerae y las bacterias Gram. DE. positivas: Staphylococcus aureus y Bacillus cereus, mostraron diferentes grados. IO. N. de sensibilidad, concluyendo en que el aceite de Syzygium aromaticum posee un. CC. amplio espectro contra todas las bacterias Gram positivas evaluadas que contra. DI. RE. las Gram negativas [34, 36].. Pocos trabajos describen el uso de este aceite como alternativa, sin embargo en este estudio se puede observar que la actividad antimicrobiana de este aceite esencial es de amplio espectro inhibiendo el crecimiento de B. cereus (Gram positiva); así mismo para Salmonella typhi y Salmonella paratyphi A (Gram 27. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. negativas) encontrándose relación con lo informado por Longaray et al (2007), quienes encontraron actividad de los aceites esenciales de las plantas sobre bacterias Gram positivas y Gram negativas [26,31, 32].. AC IÓ. N. En general, los aceites esenciales poseen fuertes propiedades antibacterianas. debido a que contienen un alto porcentaje de compuestos fenólicos como el. UN IC. eugenol [12, 13, 14]. Lo anterior sugiere que su mecanismo de acción, sea similar al. CO. M. de otros compuestos fenólicos, por alteración de la membrana citoplasmática, interrumpiendo la fuerza motriz de protones (PMF), el flujo de electrones, el. IC. A. Y. transporte activo y la coagulación del contenido celular [15].. RM. ÁT. La eficacia de los aceites esenciales contra patógenos transmitidos por. IN FO. alimentos depende de la molécula activa, también se debe mencionar que la composición química de los aceites esenciales puede variar en gran medida para. DE. una especie de planta en particular [36]. Esto puede ser una posible explicación de. AS. la variabilidad de los resultados obtenidos de un experimento a otro. Por otra. EM. parte, todo el aceite esencial puede tener una mayor actividad antimicrobiana. SI ST. que su mayor componente aislado. Existe la posibilidad de que un patógeno de. DE. transmisión alimentaria desarrolle resistencia a los aceites esenciales. Sin. N. embargo, el riesgo de desarrollo de resistencia contra aceites esenciales sigue. CC. IO. siendo muy poco frecuente [33].. DI. RE. La evaluación de la combinación de agentes antimicrobianos es necesaria debido a que un microorganismo puede ser resistente a la inhibición y/o eliminación por dosis convencionales de un solo antimicrobiano, pero al ser expuesto a una combinación de agentes se puede vencer su resistencia.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Por lo que se puede afirmar que el aceite esencial de Syzygium aromaticum, presenta efectos inhibitorios en la sobrevivencia de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A y Bacillus cereus lo que podrían ser una alternativa como. AC IÓ. N. preservadores de alimentos. Estos resultados contribuyen en dar respuestas a las necesidades de los gobiernos, agencias regulatorias, fabricantes de alimentos y. UN IC. consumidores; frente al uso de agentes conservantes de alimentos de origen. M. natural, que aseguren la inocuidad y la calidad de anaquel de los alimentos. CO. procesados, en un ámbito de salud pública que se caracteriza en la actualidad por. Y. incremento de la resistencia a antibióticos de los microorganismos, mayor toma. IC. A. de conciencia de los consumidores frente a lo que consumen y la globalización. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. de las ETA por causa de la globalización de los mercados alimentarios [14, 29].. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..