El Midazolam, administrado crónicamente,
no tiene efectos neurodegenerativos
J. MonGn,
Rb
Montelo# L. M. GonzaloDepartamento de Anatomía. Fecuitad de Medicina. Universidad de Navarra
RESUMEN: Para conocer la posible neurotoxicidad
del midazolam sobre los núcleos hipotalámicos dorso
y ventromedial, se ha administrado este fármaco, por
intubación gástrica durante 120 días, a ratas Wistar
jóvenes (2 meses) y viejas (24 meses). Ambos gru-
pos estuvieron formados por 50 animales; se admi-
nistró midazolam a 20 ratas a razón de 1 mglkg,
yotras 20 recibieron
3mglkg Como controles se utili-
zaron ratas de la misma cepa y edad (10 por cada
grupo), que recibieron el mismo volumen de suero fi-
siológico. El recuento total de neuronas y la determi-
nación del tamaño de sus núcleos, en ambos grupos
hipotalámicos, no evidenció cambios estadisticamente
significativos con respecto a los animales control.
Solamente en el grupo de ratas viejas se pudo obser-
var un ligero aumento de las neuronas oscuras, al
mismo tiempo que una disminución del índice
cariometrico.
SUMMARE The effects of midazolam on the dorso-
and ventromedial nuclei of the hypothalamus,
administered during 120 days via gastric intubation,
was studied in two groups of Wistar rats. The rats (50)
of one of the groups were
2months old, and those of
the other (50) 24 months. 20 rats of both groups
received 1 mglkg of midazolam, and the other 20,
3mgkg As controls 20 rats of the same strain and age
(10 for each group) received only saline.
Neurona1 count and karyometry did not revealed
significant differences between controls and experi-
mental rats. Only the group of old rats showed
aslight
increase in the number of dark neurons, with a
decrease in the karyometric index.
Palabras clave
Midazolam; núcleo hipotalámico dorsomedial; nú- cleo hipotalámico ventromedial; benzodiacepinas; neurotoxicidad.
K e y words
Midazolam; n. hypothalamicus dorsomedialis; n. hypothalamicus ventromedialis; benzodiazepines: neurotoxicity.
Introducción
El midazolam
(MDZ),
sintetizado por Fryer y Walter en 1976, es una benzodiacepina(BDZ)
de amplio uso en anestesia, pero que cada vez se va utilizando mas en tratamientos de larga duración. Así, se emplea como inductor del sueño(1-4).
como anslolítico(5,
6), como coadyuvante en la analgesia (7-ll), y en los terrores nocturnosy
crisis de pánico en niños(12).
Esto se debe a las propiedades favorables de este fármaco: rápida absorción digestiva (13), brevedad con que alcanza una concentración máxima (aproximadamente en 20 mi- nutos), disponibilidad del 90%, así como a su amplia distribución en el sistema nervioso central(14,
15) y rápida metabolización y eliminación por orina(16). A
todo esto se añade que, al menosen
la administración aguda, apenas presenta efectos colaterales (17-19). En- tre estos efectos se han descrito la amnesia anterógrada (efecto favorable cuando se administra como preme- dicación en anestesia -20-22-), depresibn del centro respiratorio (23). y picor y lagrimeo cuando se admi-nistra
por vía intranasal(18).
En cuanto a los efectos no deseados en la utilización delMDZ
durante largo tiempo se ha consignado perdida no intensa de me- moria anterógrada y síndrome de abstinencia cuando se Interrumpe bruscamente la administración (24-26).ma @pa,
que viva
en
el
mfsmDh&bitat,
con
la
mi-
allmentaci&n,w n
la
rnismei dosisde fáianaco Y
admi-
e%perfmenbd
m
rata6que
expanemas
a
mntfnuaelbn.
Las
.mtras quenos
hemos projxesto investigar son
Resultados
1. Mortalidad
La mortalidad en los grupos de ratas jóvenes (trata-
das con MDS y controles) fue nula. No
asíen las ratas
viejas, en las que hubo un
36% en Ios controles, un
30%
en las que recibieron 1 mg/kg de
MnZ,
y un 43%
con 3 mg/kg.
2. Evolucibn del -=so
La
evolución del peso, mostró en
lasratas jóvenes,
como era de esperar, un aumento bastante
regular
a lo
largo de los 120 dfas: mayor en
las
controles y menor
en
lasratas tratadas con MDZ, especialmente
en
las
que recibieron dosis más alta. Sin embargo,
lasdife-
rencias no fueron significativas. En las ratas viejas, los
controles experimentaron un llgero crecimiento (779 a
825 g de media), y
en cambio en las tratadas con
MDZ
disminuya (de 799 a
766
gpara las de 1 mg/kg, y de
825 a 734 g para
las
de 3 mglkg).
3, Recuento neuronal
C6lulas normales
Lo primero que destaca, Independientemente del
tratamiento,
es
la notable pérdida neuronal en las ratas
viejas con respecto
alas
j&venes, tanto en el
nDM como
en e1 nVM. Dentro del grupo
deratas jbvenes, en e1
nDM se aprecia un mayor número de.neuronas en las
ratas tratadas
q u e en los controles,
yen las tratadas no
hay
diferencia entre las que recibieron 1
ó 3 mg/kg deMDZ.
En el nVM hay también más neuronas en las
ratastratadas, especialmente en las que recibieron
1
mdkg
de
MDZ, donde la diferencia fue altamente sig-
nificativa con respecto
alos controles (grdfico 1).
En el grupo de ratas viejas más bien ha sucedido
10contrario que en las jbvenes: en el grupo control hay
más neuronas que en las tratadas, tanto en el nDM
como en el nVM, si bien
lasdiferencias no son signffi-
cativas (grtífico
1).
C6luias oscuras
El
recuento de las células oscutas ha sido bastante
variable, tanto entre individuos como entre grupos. La
tendenda es
ap~esentar
un
menor número de neuranas
oscuras los grupos tratados con MDZ
(1
mgíKg) con
respecto a los controles y tratados con 3
mg/kg
Las
diferencias no han sido estadbticamente sighlncativas.
Praporcionalrnente al número total de neurona, las
ratas viejas han presentada un mayor ntímero de
neuronas oscuras
(gráfico
S).
Recuento
neuronal total paraG,,
G, y f3, en nDM y nVM. Se aprecia una direncia estadisficamente significativa entreel O, del nDM en ratas jóvenes y el grupo control
(p=0.000312). se observa una notable disminu-
ción neuronal ea animales vieps.
Recuento de células oscuras: hay una tendencia al aumento
en ei númem de cblulas oscuras eir
d
nVM en mhr9 viefaséan ambas tratamienior En los o t m fres casos se ebserva
una disminución en las ratas tratadas
con
1 mg/kg/día, mientras que mn la dos% máxima 1 3 mg se aprecia un4.
Cariametria
Los resultados
no
han
sido
iguales
en los
dos
n ~ d e o s
hipotalamicos
estudiados:
en
elnDM
ha
diimniuido el
tamaño
en
las
ratas
que
recibieron
3
mghrg
de
MDZ,
mientras que
en
elnVM
esto ha
sucedido
en
las
patastratadas
con
1mg/kg
Con todo, las diferencias
han sido
escasas,
como
se puede
observar
en
el
gráfico
3.
5.
Cltometrfa
El
estudio citométrico ha revelado una
considerable
reduccián
del
tamaño
celular,
puec.
aun
habihdose
medido
el área
de
toda
la
célula,
ésta
ha
resultado
muy
inferior
a
la
de
los
núcleos.
Se
observa
una
correspon-
dencia
con
la cariometría;
así,en
el nDM
la
mayor
dis-
minución
de tamaño
se
aprecia en las
ratas
tratadas
con
3
mg/kg
En
cambio,
en el
nVM
la
mayor
reduc-
ción
corresponde a
las
ratas
que redbi&
1mg/kg
de MDZ.
6.
Parvalb~mina
El
marcaje
de
las
neuronas
parvalbiimina
positivas
ha sido
más
intenso
en
los
casos
tratados
con
MDZ.
En
cuanto
al
número
de
neuronas
marcadas
no
se
han
observado
diferencias
entrelos
diversos grupos de
ra-
tas.
Normales Oscuras
Carlometria del @M. El
área
de las neuronas nomalas disminuye si Iris ratas son tratadas con3
mg WZ, Ea elgrupo
que recibib 1 mg son las neuronas oscuras lar que aumentan w área nuclear.DlscusiOn
La
utilización
cada
vez m&
frecuente
del
MDZ
en
tratamientos
de
larga
duración
iíeva
a
plantearse
la
posibilidad
de un
efecto neurotBxim. Este
estudio es
dificil
llevarlo
a
cabo en
humanos por
varias razones.
En
primer lugar,
porque los pacientes no
mueren por
causa del
MDZ,
por
lo
que los
posibles
efectos no
de-
seados
de
este
fármaco
no
son
fácilmente
distinguibles
de los
de
la enfermedad
que
ha
llevado
a
la
muerte.
En
segundo
lugar,
es
prácticamente
imposible
tener
un
seguimiento
controlado
de
la
administración
de
MDZ;
unas
veces,
porque
hahabido
interrupciones,
otras
porque se
ha
variado
la
dosis y,
sobre
todo,
porque
junto
alMDZ
casi siempre
se
han tomado
otros medi-
camentos.
En
tercer lugar,
hay que
mencionar
la varia-
bilidad
individual
en
su
respuesta
al
MDZ
motivada
por
la
diferente
constituciOn gen&ca
y
por
los distin-
tos
hábitos
dietéticos
y
regimen
de
vida. Estas razones
llevan a
la
concluslon
de
que
un
estudio fiable
de
la
posible acción neurotóxica del
MDZ
exige
un
estudio
experimental.
En
efecto,
en ratas -animal
por
nosotros
elegido- la
investigación
permite
eliminar
prckticamente
todas los
factores que pueden
sumarse a
la
acción
del
MDZ:
se
consigue
la
misma
base
genética,
la
misma
alimentación,
el
mismo hábitat
y una
uniformidad
de
tratamiento,
así
como
el
empleo
de
dosis
superiores
a
lasque se
utilizan
en
clinica.
En
nuestro
estudfohemos
utiiizado
dos
lotes de ratas
de
edad
muy
diferente:
uno
de
animales adultos
jóvenes
(2
meses)
y
orr0 de
ratas viejas
(24
meses). La razdn
de
trabajar
con
estasdos
áisolntaspoblaciones
de
ratas
se
basa
en
que
posiblemente
elcomportamiento
ante
el
MDZ
es
diferente
en
animales
jóvenes
y
viejos.
Desde luego,
bajo un
punto
de
vista cüriica
el
mayor inter6s
se
centra
en
los
individuos de
edad,
ya
que
con
losque
habitual-
mente
consumen MDZ
de
forma crónica.
Entre
los
diferentes aspectos
que,
para
juzgar
la ac-
ción neurotóxica
de
un
fármaco,
se
pueden
conside
rar,
nos
han
parecido
los
más
indicados el recuento
neuronal y
h
cariometria
y
citometrla.
E1
recuento
neumnai
permite
ver
si
con
respecto
a
los
animales
control
ha
habido
una mayor
perdida
neuronal,
y la
cariometria,
que
es
un índice
indirecto
de
la
capacidad
funcional
de
la
célula
(32
-
34),
si
éstase ha
afectado
por
la
accián
del
MDZ.
Ambos pparámeh-os
son perfee-
tamente objetivables,
si 1wcorrespondientes
m6todos
utilizados
son
adecuados.
Nosotros
hemos
empleado
Normales Osairas
Cadomda nVM. Sblo lar ratas tratadas con 1 mg
preseatan disminueioncsí
significativas,
tanio enlas
poblaciones narmoles romo en las oscuras.
son da pequeiío volumen, como sucede en nuestro caso.
Para
formaciones de una dimensión amplia se hace necesario e1 m&odo estereológico(35- 37).
En
el
estudio morforn~trico hemos utilizado la cariometriapara
las neuronas normalesy-
la citometría para las htperer~máticas enlas
que no se podían apre-ciar los contornos de su mícleo. El método semiau- tornático que hemos seguido permite desechar las
neuranas no seccionadas ecuatortalmente
y
distinguir las neuronas de disünkas poblaciones existentes en el mismo núcleo(38
,
39).
En
los resultados que hemos obtenido, tanto en elrecuento neuronal como en la morfometría, destaca la mínima accidn neurotóxica del MDZ sobre los núdeos
estudiados,
aun
en el grupo con una dosis de3
mg/ kg/dia, durante 4 meses. Este tiempo, dadoque
la vida media en las ratas W1star es de unos30
meses, viene a equivaler a unos8
años de nuestra especie. Esta escasa acción delMDZ
no sblo la hemos encontrado enberatas
jóvenes, sino también enlas
vfejas. Resultados similaresse
han obtenido en hipocampo(40)
yen
amig- dala.Analizando más porrnenoiizadamente los resultados obtenidos
en
el recuento neuronal, llama la atención que en e1 lote de ratas jbvenes, en los grupos tratadas conMDZ,
la
pérdida neuronal ha sido menor queen
los animales del grupo control. Esto es especialmentemarcado en
el nVM para
el grupo que recibió 1 mg/Qde MDZ, donde la diferencia es altamente
significativa.
En el lote de ratas viejas, aunque las diferencias no han negado a ser estadisticamente significatívas, la pérdidaha sido ligeramente mayor en los grupos tratados C Q ~
MDZ.
Buscando una interpretación a estos resuItados,cabe pensar que el MDZ se ha comportado como
neuroprotector en las ratas jóvenes ante la pérdida neurona1 inherente al envejecimiento. Esta perdida
debida a la edad queda bien patente comparando el niimero de neuronas de las ratas jóvenes y las viejas
(gr&fico 1). En el ca3o de las ratas viejas, quizá por la menor vitalidad de ias neumnas, las dosis utilizadas de MDZ ya han resultada débilmente tóxicas.
Pasando a analizar los resultados morfom6tricos rea- lizados en el lote de ratas viejas, lo primero que cabe
destacar es la retracción que han experimentado las neuronas oscuras, pues a pesar de haber medido en ellas el &ea celuiar, ésta es menor que el &ea nuclear de las neuronas normal- (&r6flcos
3
y4).
En los aní- maks que recibieronMDZ
se ha observado una pe- que* disminud6n devaim
cariométrico, especfaImente para elG,
en el nDMy
en
elG,
del nVM,y
algo pare- cido ha ocurrido en la citometría. Estos resultados pa- recen comborar los obtenidosen
el recuento: la ligera disminución de n e u r m s Con respecto a los controles se carresponde con una pequeña disminucibn del ta- rnafio celular. Todo ello parece hablar a favor de una1. Kripke DF, Hauri P, Ancoli-Israel S, Roth T: Sleep evaluation in chronic insomniacs during 14 day use of flurazepam and midazolam. J Clin Psycopharmacol1990; lO(4): 325-42s.
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