DE TRABAJO DE LABORATORIO

92332124

8;

JLICENC~ATURA

INGFNtERi.4

BI~CJIMICA

INDiJSTKL4L

mmAD

ZTAPALAJ'A

<

1

JDMSION. CIENCIAS BIOLOGICAS

Y

DE LA SALUD

%

TELEFONO :

TRIMESTRE

LECTIVO

97-1

(755) 4 44 05

i

I

I

4

TIEMPODEDICRDOAL

SERVICIO

POR

SEMANA. 4 0

HORAS

t/

0

TlTuLo

: APOYO

AL ANALISIS

DE PLANTAS

DE TRATAMIENTO

DE

AGUAS RESIDUGLES

Y

CONTROL

DE

CALIDAD

DE

AGUA

POTABLE,

ASOCIADOS CON

LOS

P R W W S

DE

TRABAJO

DE LABORATORIO DE

CONTROL

DE

CALIDAD

DE

LA COMTSION

DE

AGUA

POTABLE Y

ALLCANTARILLADO

(C.kP.kZ) DEL

MUNICIPIO

TTE.

JOSE

AZUETA ZIHUATANEJQ, GRO.

4

4

NOMBRE

DEL ASESOR EXTERNO : I.B.A. ALFA VALDOVINOS

REYES

RESPONSABLE

DE

LABORATORIO

DE

CONTROL

DE

CALIDAD

(C.A.P.A.Z.)

U

en C. FLORINA

RAMIREZ

VNES

i

PUESTO ;

/

4

4

NOMBRE

DEL

ASESOR INTERNO :

PUESTO

PROFESORA

TITULAR

4

LUGAR

DE

REALIZACION. LAB. CONTROL DE CALIDAD C.A.P.A.2

4

0

DIRECCION. Av. HEROICO COLEGIO

MILITAR

S/N

CENTRO

c

.P.

40880 ZIHUATANEJO, GRO.

F A X

(755) 4 4 9 20

15 DE JlE10

DE

1997

15 DE

mTRO

E"

IYVü

4

1

z:LIoN

J

4

=-

4

L..,

UNNERSIDAD

AUTONOMA

MFTROPOUTANA

c

_México

_,

_{U.F., a 23 de Enem de 1998.}

4

1)R JOSE

LUIS

ARREDONDO

FZGUEWOA

DIRECTOR

DE

LA

DCBSI

PRESENTE

Por medio

de

la presente le

informo

a

ud.

que

fui

Asesor interno

de

el alumno Cregorio Télin Gmez, con

matricula

92332124,

de la

camm de

iqenicría

Bioquixnica Industrial.

El

Sr.

Gmgorio T b U a

reaW

BU Servicio Social

en

el Laboratorio

de Control

de Calidad de la

Comisi6n de

Agua

Potable y

_Aicantadado

de Zihuatanejo (C.A.P.A.Z. ), durante el

periodo

del

15 de Julii de 1997 al IS de

E

m

de

1998.

El

asesor exiemo fue la IBA. Alfa Valdovinos

Reyes.

Asi mismo le

informo

que el

Sr.

T6Ua temllno satisfactoriamente su Servicio Social, y , que

revise

y estay de acuerdo

con

el cootenido

de

~IU

informe

final.

El titulo del

trabajo

de Servicio Social

fw:

"

Apoyo al &is de Plantas de Tratamiento

de

Aguas

Residuales y Control de Calidad de Agua Potable, asociados con los trabajos del Laboratoxio de Control de Calidad de la Comision de Agua Potable y Aicaniariilado ( C.A.P.A.2 ) del Municipio

4

4

a

1

_-

Tte. Jose Azueta Zihuatanejo Gro."

Sin

m6s por el m e n t o , aprovecho para enviarle un

coráial

saiuáo.

a

A T E T A M E N

T

E

Casa Abierh al Tiempo

a

UllDADlZTAPllUPA

COMlSlON

DE

AGUA POTABLE Y

ALCANTARILLADO DE ZIHUATANEJO

1

n

111

H. AYUNTAMIENTO CONSTITUCIONAL

MUNICIPIO DE JOSE MUETA

ZIHUAIANEJO GRO

u

Zihuatmejo Guerrero a

19 d e merc de

19%

DR.

JOSE

1,UIS AHREDONDO FlGUEROA

DIRECTOR

UE

CIENCIAS BlOlDGiCAS

Y

DE

IA

SALID

UNIVERSIDAD AUTONOMA , ~ O P O L ~ T I ~ N A

4

UNIDAD

I2T:IPALWA

PRESENTE

Por medio de la presen!?

!r!ii.p

permita informarle que el

C.

Gregario Téllez Cómez. matficula

92332124. de la carrera de Ingeniería Bioqulmica Industrial, quien concluyó

su

Servicio Social

en

el

laboratorio de Control

de

Calidad de

C.A.F.A.Z.

cumpliendo

un

iota1 de

620

horas en

un

periodo de

seis

meses,

de el

15

de julio de 1997 al

15

de

enero de

1998,

siendo

$1

jefe inmediata la

C.

IBA

Alfa

Valdovinos Heyes.

(i11

El titulo del trabajo asignado al alumno es

:

I'

Apoyo

al

Analisis

de Plantas de Tratamiento de Aguas

Residuales y Control de Calidad de Agua Potable. Asociados con

IOY

Programas de Trabajo de

Laboratorio de

la

Comisión

de Agua Potable

y Alcantarillado

(

C.A.P.A.Z.) del Municipio

Tte.

José

4

Azueia Zihuritanejo. Guerrero.

,

U

O

OBJEXiVOS

1

0

MEI‘ODOLOGIA

4

-DEMANDA QUIMICA DE -DEMANDA BIOQUI?/rrcA

OXIGENO

DE OXICILT’JO .-DETJZRhlDJACION

DE

SOLIDOS

4

.-COLFORMES TOTALES

Y

FECALES

.-GRiiSAS

Y

ACEITES

ACTTVTDADES

_REiALlZADAS

u

ORJETJVOS

Y

METAS

ALCANZADOS

IESULTADOS

_Y

COXCLUSIONES

CI

.

-coNcLusIoNEs

fi

0

I~FFJCO;\.IFxDACIONES

íWXIOGRAFIA

Pagina

1

2

3

. 3

8

12

18

24

27

27

28

36

36

37

"

APOYO

AI,

ANALISIS

DE

PLANTAS

DE

TRATAMIENTOS

DE

AGUAS

ASOCIADOS

COX

I,oS

PROGRAMAS DE

TR4BAJO

DEL

AGUA POTABLE

Y

ALCANTARILLADO

(

C.A.P.A.Z. )

DEL MUNIClPlO

T'IX.

JOSE

A2,UETA ZIHUATANEJO,GRO.

"

RESIDUALES

Y

COSTKOL

DE CALIDAD DE AGUA POTABLE,

m

II

_LABORATORIO

_DE

_CowrHOL,

_DE

_CALIDAD

_DE

_LA

_COMISION

_DE

II

U

INTXODUCCION

El

desamollo de

las

procesos para el tratuniento de aguas residuales surge como una respuesta a las

demaadas

sociala

en

cuanto

a

salud publica y los problemas

de

contaminaCi6n ambiental.

0

En

general los contaminantes del agua pueden ser removidos por operaciones Asia., químicas o biológicas,

las

plantas de tratamienlo hacen combinación de las tres operaciones antenores para que

los

efluentes cumplan

con

las

normas

.

En el municipio

Tte.

José Azueia, C.A.P.A.Z. es responeable

de

cinco piantas de tratamiento de aguas midualw que se procesan por iodos activados, de las cuales estiin

en

operaci6n, la planta

uarina

11 en ias Salinas, planta el Ileportivo y planta

La

Ropa, Iris otras dos pianim DepOrtivoII y

Marina

I 110 estan en operaci6n

En los pcesos de Iodos activados los microorganiSmos se encuentran maclados

con

la materia orgenica que digerirsn para c my sobrevivir. Cuando loa m i u o o r g a u i ~ s mecen y

son

mezclados con la agitación del aire, estos

iienden

a agruparse para

formar

una masa activa

de

microorganismos denominada

lodo

activado y a la mezcla de este lodo con el agua residual se le

llama

licor

mezclado.

El licor mezclado fluye del tanque de aerencih a un clarificador secundario donde el

lodo

nctivado

sedimentti. Una porción del lodo sedimentado debe ser r e t d o al tanque de aereacion para mantener

una

apropiada reiación sustrato-microorganismo y permitir asi una

adecuada

degradacih

U

riph de la materia orgánica.

B U

Debido a que en e l tanque de aaeacion se produce un lodo activado por la reprduccibn de Ics

rnicroorganisrnos, UM cierta wntidid debe ser

desechada

del cisterna con el objeto de mautener

constante su concentracih en el tanque de aireaci6n; esto es lo que se conoce como

lodo

de purga.

Por

o b parte,

un

requerimiento bhsico del sistem? de Idos activados es su adeciwii aireaciiin, que

puede ser re;d.uaClLi Iuediante difusores o aireadores mecunicos.

El

desafio qiie efrece la implaiitacion <!e plantis de tratamiento dc aguas residi!ale~ cr? _!a

coniiiriiddes tie la Repiiblica kle>uani se ceritrn en In creiicibii de sistemas (pie ieiiii

aiikmtiicientes. Una piaiiti de t.r:itaiuenm, xiemíis dc depurar los etluentes para que puei1:w ser

reutikados (¡&e generar siibpritiiiiclos útiles

o

reaperx niaicrins primas o pr0duc:os succpi ihles tie

peric:-ir 2:ii:ancias qiie In hagan wi!:ibIe y no sea u m c n r y p x n

c!

gohicmc.

h i C ~ I C ~11:;iicipio 111 riwesidati ilei trnia;iiieiito de las ;I~ILZS rcsi~lualcs, C L X ~ ma b ~ i e i ~ i ali<Lid es de gal iii~portiiiicia y81 que el ilestino

tiid

de Lis aguas es para riego y descarga a rios o iaguuas que

dcrenitxxan ni niar. La principal actividad económica del Municipio es el tUrisnio tanto nacional

coino inteni:icioiuil, es por ello, que i3 cumta opcracióri de stis pl;mtii5 de ira~vniento de aguas

reduiiles as1 CC>LIW In dcleniiitiaci6n de los panlmetros fisicquirnieos

y

dcrobiol6~cos se reflejan en la preservación de tlorn y la fauna nativa de In Bahi de Zihimatnuejo.

OBJETIVO GENERAL

Apoyar a traves de la realización de la detenniuación

de

los par6metros fishquhicos

y

&mb¡ol6gim

de

las aguas miduales trakdas

por

lodos activados del M&Cípio Tte. José Azueia

Zihuatan~o. Gro.

OBJETIVOS ESPEff

FICOS

1, AmJim la eficiencia con la cual

operan

las

Plantas de Tratamiento

de

Aguas Residuaiea, medite la determianción de los panimctros

fisicoquimicos

y microbiológicos.

2.

Proponer

altanativas para

Residuales ( P.T.A.R.) y aumentar la remoción de contaminantes durante el p-o.

3,Conocer y aplicar las N o m Oficiales que rigen a las

Plantas de

Tratamiento

de

Aguas

Residuales (NOM

O0

1 -ECOL- 1

W).

mejor operación de las Plantas de Tratamiento de Aguas

DETERMINACION EN LAfXORATORIO 1>K LOS f'RiNCWALES PAIM&IETROS

KEAL1'hWOS EN ImA PIAh'lA DE

TRATAMIENTO

DE:

LODOS ACTIVADOS.

TECVICAS

PARA DETERMINAR LOS PKLVCWALES PARAMETROS.

A continuación se presentan las tbcnicns par;i redvar 10s principales parhetros, consideramos conveniente tomar estos procedimicritou de las Normas Tc.cn¡cas Mc~icanos, con el fui de

estandnrizar estos procedunientos.

DETFSMINACION DE

LA

DEMANDA

BIOQUIMICA DE OXIGENO

OaTETIvO

Establecer lo d c t A c i 6 n de

h

denmdn bioqulmica de oxlgeiio en agua

p r

el ni6todo

de

incubación b t ecinco &s.

Este método se basa en

h

cantidad de oxigeno requerido por los microoganiSmos para efectuar

la

oxidacibn de In nmteria orgánica presente en el agua y se detemina por

h

diferrncia entre el oxigeno

disdto inicial y el oxigeno disuelto al cabo de cíuco

dias

de incucutwción a 20

T.

DEFINICIONES

Demanda Bioquímica de Oxígeno (

DBOs

).

Es

UM

estimation

de la antidad de oxigeno quc

requiere una pobiacion micrubinni heterogénea para oxidar la materia orgánica

de

una

muesira

de

a m .

Sello hidriiulico. Capa de agua situada entre el tapbn y el borde de ia tmteiia de

DBO,

que sirve

para

impedir el flujo de gaseoso cualquier otn substancia extraña al interior de la botella quc pudiera

alterar la miiesh.

Incubación.- Comiste en dejar reposar durante 5 días

ia

muestra a UUB temperatura constante de 20

I~EAC.TlVOS

b s rcactivw que a w d n i m c i h t1ct.m ser reactivos de -do malitico, a menos que se indiqiie otra

I

cosa. Cuando sc iwble de aguzi se tiebe entcriíler agua desiilada.

~ Solucib anortimadon de foshto

.,

: Disolver 8 . 5 ~ de fosfato monobásico (le potisio

n<rLPCh),

33.1 g de fosfato dibbsico de suiio heptabidntado ( ÑaiI-LPO~WzO), 21 1.75 g de fosfato d k i c o de sodio (KrHpot) y _1.7 g de clomro de anionio ( "ICI ) en 500 mL de agua y aforar a un

litro,

el pH de esta soliriún amortiguadon

debe

ser de 7.2 sin ajunte alguno.

-

Solución dc siilfato de' magnesio : Disolver 22.5 g de sulfato de magnesio hcptahdratado

( M g S O t n r O ) en agua y

diluir

a

un litro.

-

Solucibn

de

cloruro

de

calcio : Disolver 27.5 g

de

cloruro

de

Calcio anhidm ( CaCh)

en

agua

y

diluir a un litro.

0

.%liicibn de cloruro

f6mw:

Disolver 0.23 g de cloNro fkmco hexahidmiado (

FeCbGkLO)

en agua y diluir a un

litro.

-

%iiición

de.

ácido sulfrrrico 0.1 N : Diluir 4.9 g ( apmkmadamente 3 mL) de ácida sulfkko

@ S a ) concentrado

de

densidad 1.84 1

s/mC

en agua y abrar

a un

litro.

-Soliic¡on de hidr6xido de swlio 0.1

N

: Disolver 4.0 g de hidróxido de sodio (NaOH) ni agua y

4

1

aforar a un

litro.

1

APARATOS

-

incubadora

capaz

de tnantencr una temperatura de 20 +/- 1

T

-

Equipo de aereación compresor trampa para grasas y difusor

-

Material

de

uso común

en

ei laboratorio

u

1

o

MUESTRE0

Las porciones para anaiisis se t o m a de las muestra obtenida de acuerdo

a

las normas de rnuestm.

Convervación de las Inueshac

-

J,is muestras deben preservarse bajo refrigexxion a 4 C y

analizarse antes de

24

horns

Método directo

Este melodo se emplea en muestras cuya DBO ni 5 dhs no e x d l a 7 niglniL por c~m.qiguinite no

es necesario diluir.

Llevar

la

muestra a 20

T

apmximadamenie

y

amar d m t e 30 minuios p medios nieunicos o con

un compresor con irampa adecuadn

para

grams, para aumentar el contenido de oxígeno disuelto

hasta

el punto de sobresahinción.

Neutralizar

las

mueskas a un

p H

de 7.0

con

Qcido sulfiirico 0.1 N o hidróxido de sodio O. IN, llenar

dos

o

msS

botellas

para

DBO con

una

rnucsira, dejando que se demune. Analiza una botella de oxigmo disuelto irunediatamente pata determinar el "Oxigeno disuelto inicial" y las otras botellas se

tncuban por 5 diaa a 20

T,

manteniedo siempm

un

sello

hi&uiico.

0

Después de 5 días detemiinar el contenido de oxígeno disuelto

en

las muestrns Ulcu-. EspnsiCn de los; resultados

La

DBOi se &termha segh la siguiente fónnula :

DBOi

(m&)

= OD1

-

ODF

donde:

OD1 : oxigen~

disuelto

inicial en

mg&

ODF = oxigen~

disuelto

en las muestras incubadas despues de 5 dias

en

m a .

Método de dilución

Calcular la cantidad de agua de diluci6n dependiendo del ninnero de muestras, efectuar dos

diluciones

difemíes am10 minim0

para

cada muestra.

En

un

garrafón previamente lavado con agua, n,gregar

un

mL de sulfato de magncsio, clonim de

calcio, cloruro f&mw y ácido

~ulfiinco

por _cada húo

de

agua,

airear

h t a 1;i completa saturacion.

0

Las

diluciones

rec.omeudables

para

las muestrns

son

:

U L ~ I C Limciauiiciirc cit I I C ' ~ boicllus dc 300 inL tipo DBO volumeu apropiados rlc I;I rilucsm p o r cada

diluc~oii, usando

uu

pipeta ~ l u m & n c ~ dc punta alnrgnda y Ilauir

las

botclias con el _ayw de

dilucibii justarncntc para que el tapón pueda colocarse sffl dejar burbuja de aire

Pura

Li

deieriiiuucioii dc la DBOi se efectúan los siguientes pasos

Detemiinación del oxigcno disuelto hichi, en una de

las

boielhs

de

DBO.

DetennuutciSri de oxigeno a los 15 minutos.

En

otra botella d e t m n a r el oxigcno a los 15 m u i m de hnber mezclado la muestra con el agua de

dilucdii.

U

Determhcibn del ulrgeno disuelto a

los

5 días.

0

el

iérmino

de

este

tiempo y detern-

ia

cantidad

de

oxigeno disuelio en

la

muestra.

La

ú l t m Mella se mete a una uicubadona a 20 OC d m t e 5

dias

manteniendo el sello hidráulico

en

La

DBOJ se calcula scgún la siguiente firmula :

I

< -

I n i u b a ~ i ú n C O I ~ innciilu

(:nicular IRS diiiiciones del desecho particular del agua como se ilustran en la tabla I, se disminiiye la

coiicentraciou del desecho los suficiente pnra tomar en cuenta la iitiliíación del oxigeno por el

Uiociilo. Medir la riintidad de desecho que sc requiera, al igual que en la tabla _1. Agrcyar a la rriucstn aprrixlmadxnente la mitad de la cantidad de agua de dilucion que se requiem. Esto es

necesario para asegumr que el desecho concentrado no a causa de toxicidad a los organismos del inoculo. realizar el niétodo directo, la determinación de oxígeno disuelto a

los

15 minutos y la de los 5 dias.

...

DBO, m@mL = ODir

-

ODF /

(a)

% de diluci6n _(A) donde:

Carreccih par demanda de uu>cula

El

valor

de la

correction

Dor demanda de

inoculo

se obtiene determioan

.

do la

DBO

del mimo. Ihterminar el abatimiento- de oxígeno del inoculo estableciendo una serie

separada

de este y w+Amando aquella que consuma del 40

al

70

%de

oxigeno

al

5" día, uno de estos abaiimientos se

u.sa luego para calcular la corrección debida a la pequeña cantidad de inoculo al agua de diluci6n.

1

...

DBO inoculo, mg/L =

(91

-

Bi)

/ ( %de

dilucih)

0

% refcrido ai inoculo.

3

I- (ionde:

DI = oxlgeno disuelto del agua de dilucih inoculado después & la incuhci611, en mg/L.

Bz

= oxígeno disuelto del agua de dilución inmiado después de la incubaci6n

en

ms/r,.

rnph

La

cumcción por inoculo de la

DBO

a1 5" dia iiiiliando inoculo queda expresado por :

DBO:mg&= A

-

B

donde :

<\ -. iiwhcibn con inoculo

,\I'EhDICE:

la denimda iiiincdiatn

de

oxigeno. Las siisla~icias oxid;iblca por el oxigerio rnolsidar, tnlcs

corno

hicrro ferroso, sulfito y sulfur0 lo riiisnio que el aldehudo provocan una dkniinucii>ii el oxigeno iiisuclto que debe ser determinado.

De

esta ~ t ~ r a l e z ñ bien se

ha

usarido el OD inicial calculado

o

aplicado la

suma

de la (lermida inmediata de oxígeno ( DIOD) y la

DBO

al So dia debe entendeme que la DIOD moleciilnr, sino (pie

puede repsentar unn oxidación por yodo liberado, en el paso de la acidulacibn del m6tcdo

I -.

Para

determinar

la

DIOD se prepanin

dos

botellas

con

una dilucih apropiada de

la

muestra con agua

de dilucibu. Sc

detemuna

.

el OD

de

una de las botellas y a los IS minutos (se a seleccionado

arbitrariamente el abatimiento

del

OD

en

una

dilwibn nomial

d

la

muesha al cabo de los 15 minutos,

como

la DIOD), se determina el valor del OD de la otra botella.

La

DIOD se calcula mediante la siguiente fórmula

DIOD.mg/l,=ODl

-

ODir

DETERMMACION

DE

I A

DEMAiiA QUIMICA

DE

OXIGENO

OBJETIVO

Y

CAMPO

DE

AF'LICACION

L?

demanda quimica de 0~ígmi0 es la

cantidad

de'oxigeno reqtierido

para

oxidar, bajo condiciones especificas, la materia

orginica

y la inoqánica oxidable contenida en el agua. Se expresa en rngL de oxígeno y proporciona

una

riledidn de la cantidad de sustnncias susceptibles de ser

oxidadas.

I : u " T O

7 -

i;I inctorio se basa en U M oxiJ:ici<h eiiérpjca de la nuiteria orgiriica y de la inorgíkica oxidnblc quc

.:c criciicntrn en el agw, en un cierlio fiiertcmentc Acid(>, con iim soliición valorada de sulhto fcrroso

vmriiacnl m pscncia de iin conpliin icrroso de orinfennntmliiw como indicador interno

KEA<T1'IVOS

LOS reactivos tpc a continincibn _se mencionan son p d o ttactivo nnalitico y el agw (lebe scr

desiil:i(la

-

Dicmmntode potaslo ( L C h 01 )

-

Sulfato f m o _nmoniaml (Fe (N&k(SG )L

(HI

O )

-

Acido sulfiinco cmcenido ( HI sol)

-indicadorde i,lOfenantrolina( CIIHINI H10)

-

Sulfalo de plata ( A& SO 4)

-

Sulfato f m o heptahidratado (FeS.06 7H I O)

-Sulfato

meretinco

( HgSo1).

La

preparau6n

de

los

rcactivos se realua de

la siGente manera

:

1.- Soluci6n de dimmato de potiisio 0.25

N

: disolver 12.2588 g de dicromato de potrisio

@ieVinnrente

secado

a 105 "c, dur;ink,,dos

horas)

aforar

con

agua a lo00

mL

en

un

matraz

v o l d t n w y

homogeneuar.

2.- Soluci6n

de

dicromato de potasio 0.025 N: transferir con pipcia 100 mL de la soiuci6ii anterior a un maúaz

wldtrico,

aforar con agua a lo00 inid y homogeneizar.

3.- Solución

de

sulfato

ferroso

.amonbcal 0.25 N : Disolver 98 g

de

sulfato

fenoso

amonbad

en

aP- te 800 mL de agua, agregar cuidadosamm(c 20 mL de &cid0

sulWco

corrantrado,

enfriar,

afomr

a 1000

3.1

-

Nomralizncibn de la solucibn de sulfato f m s o amoniacalO.25

N

: Tomar 25 mL de 18 solucibn de dicromato de potasio 0.25 N, diluir con agua

hasta

275 mL, agregar cuidadosamente 50 rnL de

kid0 sulfiuico concentrado lioniogeneiza,

enfriar

y tit&

con

la solución de sulfato ferroso

Hmouiacnl 0.25

N,

utilizanrlo 8 _gotas de 1,lO fenantroiina

como

indicador hasta e l cambio de coloración del azul verdoso a cafe rojizo.

4.-

Solucion de sulfato f m s o amoniacalO.025 N : Delcnniuar la niasa con apxhacióri til 0.0001g

de

O S

g de sulfato f m s o a o i i i r i d y continuar como se indica

en

3.

4.1 Normalkci6n de la solución de sulfato f m s o iimonia~d 0.025 N

:Tonxu

25 mi,de la solucibn de dicron~ato de potasio 0.025

N

y p r d e r como se indica eu :.l y titular con sulfato ferroso

anioiiincalO.025 N.

I , Estufa electrica capv. de mariteiicr í. 105 .+/- I *c )

2.

Balawa amiliiici con serisibiliihd 3c

O.ooO1

8

3.

Aparato para rcflujo tipo Frim!nchs; coiistiiuido por :

-

un m e w , Erlcnrncycr de %Xi

mi

con

bow

esnicnlnd;i

24/50

-

mi corideniador tipo Fritdrictis entrada

21/40

4.

Pardla dc calentamiento capaz de mantener una temperatura que asegurc una ebullici6n del

conlenido del mtnz

(le

rcfliijo.

5.

Equipo

usual de l a h t o n o .

PREPARACION

Y

CONSERVACION

DE

LA

MJESTRA

La

f m de exiraer la muestra pasar realizar esta determinación se

establece

en las Normas Oficiales

Mcxicana~ NOM-AA-3 y NOM-&\- ₁ cn vigor.

La

muestra

debe

ser analizado hncdiatammte, despues de su toma en caso conirario debe

cmservarie

en

reii-igerncion a 4

T.

Nola : Se ha recome&do acidiiicar la muestra

con

Bcido sulfllrico a UD p H menor a 2 y en

este caso puede almaccnarsc por 7 dias.

PROCiEDIMiENTO

1. Pnni niveles nmyorefi de 60 m@ dc _demanda

quimiea

de oxigeno

1.1 Transferir al matraz Erlenmeyer de 500 .mL,

una

muestra

de

SO

mL.

Agregar unti cantidad

adecuada

dc

sulfato mercúrico y algunas palas de vidrio. f i d u 25 mi.

de

la

solución de d i m m t o

de

potasio 0.25

N

y mezclar ineúiaute un

niovimicnto

CKCulnr ( ver apéndice)

1.2 Conectar el matraz Erlenmeyer al condensador y hacer circular el agun de enfriamiento. 1.3 Por

el

extremo supenor del coidensador

sulfíuico-sulfato de plata y agitar

con

tnoviUiiento circuiar para homogencizar.

1.4, Caleut'ar el inalrm que contietie In niezcla y inantener a reflujo diiran!e dos horns a partir del

niomento en que empiem la ebuliicihii. &jar entnar y lavar el coiidciislidor con 25

niL

de

agua.

1.5 haadir agua por el exminio superior del condensador hist3 completar un

volumen

:i~roxirii:id:uiieiite de 5 0 0 inL . r e h r el riu;itnz.del coiidensadur y r7lrh.r :I teiiiperntura nuibimiie.

i i g r c g ~ 6 sotas i,10 fciiautroii1u LOIIIU iiidiudor y iiiuliu WI.I las s~.~Iu~ioiics viduriidm de s u l t ~ i u

f~i.nosti niiibi~¡co

G.25

Y lüistu cl czutibio de calor de :zul- vcirloso Ii wifL:-r<:+zo.

1.6 IJewr sitiii~l~aiieiiii~e:li-- 1111 iciiip) pi'e~>tu;i<lo CI'II .5i) mi. d!: agua y iodos _¡os reactivos uii!r/;iiios

CII e1 p r w d i n u m i o .

2

Para

iiivclcs illenores dc 50 ni@ de dcruandn quirnica

de

o u i y m )

2 i Se procede corno se indica de 1 1 ;I 1 7,

pmo

tiaciendo uso de la% ~oiiicioiies de dicmm~to de

potasio y sulfato fernso an16nico 0.025 N CA1,CULOS

La

demanda química de oxigeno expresada en

m a ,

se calcula con la siguiente ecuacion:

1

1

4

encionb:

1

mL.

*

DQO=(((Vi

--V2)

* N * S ) / V 3 ) * 1M

DQO

= demanda química de oxigeno, en mgL.

V1

= volumen de

la

soluciones

de

sulfato fenmo amóxtico requerido piam

la

titulación del testigo, en

V2 = Volimen de

las

soluciones

de

sulfato f m o arnónico requerido para la titulación de la muestra,

-

en mL.

i

I

0

V3 = volumen de

h

muestra,

en mL.

N

= normalidrid

de

l a solución de sulfato ferroso amónico, utilizadi? en la determineci6n

8 =equivalente

del

oxigeno.

IUiPETIBILiDAD

La diferencia

entre

las

dctennirmciooes efectuadas

por

duplicado no d e k exceder del 5%

de

dananda quimiu de oxigcno, w uso

contrario

se debe repetir la detemiinacih.

APENDICE

1

.-

Este

método se recomienda como tin

complemento

de

la

demanda bioquirniu de oxígeno, pero no es

un

sustituto de esta.

2.- Genemimente

is

determinación

de

la

demanda química

de

oxigeno se utiliza en el tratamiento y control de las aguns de

desecho

industrial

y solo en ocasiones particulnres puede rclaciorme con la

II

a

1

I

1

U

111

I

0

demanda

bioquimicri de oxigeno.

3.-

El

indicador 1,iO fenantrolina tambien se IC conoce como ferroin u ortogerianatrolim.

4.- El sulfato de plata requiem un tienip aproxírmdo de dos dias p:m su coniplcta disolucibn.

l

a

solucibn formada debe mantenerse ell la obsciiridad para evitar sli <lescomposicióii.

5.- El siil.fii:o Liicrc<rico se agrega para elirninx la intcrfcrciicia qiic represcritati los c l i w r o s , obteniendo cl ccmpiejo de cionm rnercurico soliible qiie inliik ):I rcactivi<lnd del i6n cii>nim Si I:I

! i i i ! c s h conticnc ~ $ 0 g de cloruros o menos: se agrega

0.J

g de ~ ~ i i i a i o iiicrciinco, CII C ~ I S ~ , qiic in

umceiitraci¿)n de cloniros sea rcnvnr, :se tiebe agregar sulfnto nierciinco ci1 iiiu cmtidad i:ii qiie $2

ier:::l una relacibn siilfato mclrciiricc- cloniro de 10: 1 (nig de :ii ! \ i irirrci>rii.o / i l q [le cliii-i

1

.

..

. .

S.- E1 sulthio (It plain nctún en In rencciori coiiio cintaiimdor, inrrcnientari<lo la osigeincióu de

algunos compuestos orgiuiiws mfracLirios.

9.-

La

mczcla dcbe agitarse perieciarncritc antes de llevarla n cileniamimto.

Ue

no sm asi ocurren sotnrxaleniamieniw locales que pyecknu In mezcla fuera del condensador.

10.- Pam algunas aguas residuales de periodo de reflujo.de dos hons d t a excesiva o insuficiente, para reducirlo o numentarlo cs nece.Sano experimentar

con

un mismo tipo de miiestra ea difemites

tiempos de digestión

11.-

El

volumen

de

In

muestra quc se ulilice _para t~veles _ínfenorcs de 50

mg

debe

ser tal, que In

cantidad

de d i e m t o de wtasio reducido dumiite la diaesii6n no exceda del 50

Ya

ai caso couhar¡o

(I

@

4

.. . . . ..

1

.,

debe repctu la determinación

cou

un

volumen

meim

de

muestrn

DETERMINACION

DE

SOLIDOS

ODJETIVO Y

CAMPO

D E AI'1,ICACION

Métodos

de determhaci6n del contenido de s6iidos totales, s6lidos totales

volátiles,

s6iidos suspendidos totales, s6lidos su9pndido.i vol+tlleq, s6lidos disueltos toiala y didos diqueltos volatiles, ni aguas naturales y residualea.

4

REFERENCIAS

NOM-AA-3

"

Aguas residudes

-

inucstrco"

NOM-Z-I "Sistema genmi de uiudxiez de iiieciih

-

Sistema (SI) de urudades"

0

NOM-M-14 "Cuerpos receptorcs

-

niue4rm"

DEFINICIOhíES

Los niétwlou se

t

m

en

la

cvapomci6n y cnlchci6n de la muestra, en donde los residuo

dc

unn

y otra opncion s m e n

de

basc para el c;ilculo

del

contenido de s6lidos.

MUESTIZEO

1.a muesira se exime se@n sea el CASO, como se india en la Norma 06ckl Mexi- * Aguaas

residuals.- rnueslreo NOM-AA3 en Vigor, o bien de acucnlo a la

Norma

Oficial Mexicana

"

Cuerpos receptores

.-

Muestreo" NOM-M- 14 eii Vigor.

APARATOS Y EQUIPO

43alan7~ mall ti^^

con

sensibilidad de O.ooO1 8.

-

Ckpsiila de

porcclana,

de 200 cm3 de capacidad.

-

Mufla eléctrica cawde mantener

unn

teriiperatuni

da

550"

C

(+/- 25

T

).

-

Estufa

c01l w n h l de temperatura capaz

de

mantener

une

tempratura de 103 a 105

Oc.

-

Equipo para evapontci6n

previa

(ya sea placa de

colalamiento,

baa0

marla, baño

de

arena, pamlla

de calcntamicnto cuaiquier otro rnedio

de

calentamiento adecuado).

-

Desecador con deshidratante adecuado.

-

D i m s filtro de

fibra

de

vidrio.

-

Crisoles de

Gooch

adecuados al lmmíío.de

la

muesúa.

-

Ebmba de vacío o eyector.

EXPRESION DE IWSULTADOS

El contenido de solidos totales se determ¡na de la siguiente forrnuia.

ST=((GI-G)/V)* IO00

En donde :

ST = s6lidos totalcs en m g / L

G1

=Masa

de la capsula

con

el residuo, antes de la evaporacih, en mg.

G = Masa de la capsula con el residuo,

después

de evapornrse, en

mg

I L

V

=volumen

de

la mwstra, en

n L

PREPARACION

DE

LA

MUESTRA

-

Cdocst el crisol

con

el disco en el aparato

de

filtración y nplicar vacio.

-

Humadecer

el disco con agua.

-

Medir con _una

probeta

pipetn volum&ica segiin

proceda,

un

volumen

adecuado

de la cantidad

seleccionada

de

muestra prevkmente hornogeneizada

la

cual depende de la concentración espenda

-

Filirar

la

muestra a iravés del disco y a h salpicado vacío,

lavar

el disco tres veces con 10

mL

de

agua dejando que el agua

drene

totaimtmte

en

cada lavndo.

-Suspender el vacio y secar

el

crisol

en

la

estufa

a

una temperatura de 103 C O a 105

T

durante una

hora

. Sacar el crisol dejar

enfriar

cn

un

desecador

a

temperaturas ambientales y det&t su mis?

de

didos

suspendidos.

( G4

1.

EXPRESION

DE

RESULTADOS

El

contenido de sólidos suspendidos totales, se calcula con la siguiente fórmula :

S S T = ( ( G 4 - G 3 ) / V ) * l 0 0 0

en donde :

S

T

= shlidos siispeiididoa totiles cn

mg&.

G4

= msadel crisol con el residuo, en

mg.

G3 =masa del crisol con el disco

en

m&

ssv

= SOhdOS SUSpCIldidOS VOhtdW

,

N&

G5 = iiufsa del &o1 con el

residuo,

después de In calcioaci6n, en nip

V

== volumen de

la

muestra en

mL.

PROCKDIMIEX'i'O C

PARA

GOLIDOS DISUELTOS TOTALES Y SOLIDOS DISUELTOS VOLAT ILES.

De(erminar la9 s6lidos disueltos totales

de

a n d o

a

lo indicado

en

la

NOM

"

Sólidos disueltos

totales

"

NíXM-AA-20, o

bien

por diferencia entre los sólidos meilos los sblidos

suspendidos

totnles.

ISWRESION

D E

RESULTADOS

E l coiiteuido de sólidos disueltos totiles se cnlcula

dc

acuerdo a

la

siguientc f6mh :

srx

=

ST

-

SST

en donde :

SDT = sblidos disueltos totales en, mg/L

ST

= s6lidos tables, tup,&

SST = s6lidm suspmdidos totnlw, mi riigli.

Pan la dettxmhaci6n de s6lidos disueltos vol,ltilec se

emplea

la siguiente ecuncihn.

SDV =

S N

-

SSV

ell do11dc :

9 ) V = solidox disueltos volátiles, eii in@

STV

= s6lidos totiles voltitiles,

en

iugL

SSV = sólidos suspendidas totnles, en

ma

01UET.WO

Establecer los inctcd0s de prueba volwii~uiw, y pvinictrico, para cletenriirLar los sólidos

sedinientarse en agua.

Nota :

Is

delcmbc¡6n pvimbtrica no es cquivdente a

la

d e t d & 6 n

volun~trka ai ningúu _caso por la variabilidad

de

densidades de desechos de cualquier tipo, poi lo hito partr fuics del Ileglarncnto para la Prevención y Control de

Ir

Contaminacion de Aguas, se n f o d los rcsultíidos en mwL.

1

u

CAMPO

DE

APLICAa0.Y

Estos mhdos son aplicables

en

agua9 res¡duala y naturales (supeficdes y marhas

Los

mbtodos se basan nila propiedud que tieiien los mataides sblidos, de asenlane

en

niveles

progresivos de acuerdo

r

sus diferentes dm==idndcs.

DEFiNICIONES

1

.

SeciLncntación : es la opcraci6n por mcdio de

la

cual

las

particulas s6lidm suspendidas en un

liquido, se asientan debido a

la

fuem

de

gravahd, dependiendo de su densidad.

-

sólidos sedimentobles : son

ha

partlculns s6lidas que se depsitan

en

el

fondo

de

un recipiente

debido a

La

opaci6n de sedimentaci6n.

Agua residual :es el liquido de composicion m a & provenientes de uso municip4 industrial,

comercial, agrícola, pecuaria o de cualquier otra índole, ya sea pública o privada y que

por

tal motivo

1)ETERVlIXAC'ION VOf,lJM IiTItICA

I-Mnchr cuidadosamente la muestro origlml a

iin

de asegurar UM disiribucicju iioiiiogknea de

s6lidos suspendidos a h v é s de todo el ciierpo del líquido.

L-Llenar inmdiutaniente el cono dc sdmmiiacibn

hasta

el aforo de un litro y dejar reposar duraritc

45 nhutos pani quc se asienten

las

particda, una vez iranscUnido csc ticinpo, agitar suavcmnte los lados del cono con tin agihdor o

por

rotación

p m

que se sdiruaiten

los

s6lidos adwidos a his

parecles y _dejar reposar

ia

muestra otros 15 minutos. I,cer ditameiite cn el cono I m h o . DETERM"ACI0N GRAVIiMETRICA

1.hediahmente después del payo 2 eliminar por

decantation

el agita

del

COJ~O y vnier el material scdimcniados

cn

un

vaso de precipitados, recupem totalmente Ia.9 particulas scdimenbdris

agregando un

poco

de agua destilada al cono.

2. Fiitnir el mierial muperador a traves

de

un papel filtro previamente pesado, emplerindo un equipo de vacio.

3.Pasar

el

material retenido jiinto coli cl papel fíitro n

una

capsula prcviamcnte pesada y s a i r en una

estufa a 100-1 10 "c (60 minutos aproximadame nte) inmdiaiamente introducirla al desecador hasta

~ ) ~ ' I ' I ~ I ~ ~ ~ I ~ ~ ~ ( : : ~ ~

DIC

~ ~ L I F ~ I M E S

-mr.\r.::s

Y FE(X.ES.

L;r presencia de colifonnes fffiiles en el agin

,

indica contrirninlcibn imr escre~m fxalrq de orgarisnos de sangre wlieriie

,

coino lo es el hombre. L i s ficccs coriíicncii urLi variedad de

inicroorganismas

y

fomis

resistentes

dc

los

mismos, invoiucrando _{~CrOOrg2niSIiios} p?t6gcnos, los cuiles son un riesgo para In salud publica al estar en contacto con el ser humano.

OIiJETIVO

Y

CAMPO

DE

MLICACION

Esta Nomia eskiblecc In determinxiúii

del

nllinero nus probable de colifomies totales y f d w

(NMP) uiédiite

la'téciiiU

de

tubos múltiples de fnuieutaciún, asi colw el niueutiw especifiu, y

preservaci6n de pruebas p a c s h prucba.

REFERENCU

NOM-2-1

"

Sistema general de unithdcs

de

modi&

.-

Sistema ( SI ) de unidades"

DEFINICIONES

1,- Número más probable

0.-

VdornprO?amndo de la cantidad de bacterias coliformes

en

un

volmm

de

mucstm dciemiin?ido.

2,- nscterias c0lifomes.- Bacilos cortos ambios

,

anaerobios

,

facuitrttivos Gram neyalívos, no esponilados que p d u c e n ócido y gay bnjo

las

condiciones espcciricadas en el procedimiento.

3,-Femi~taci6n.- Conjunto de reacciones enzditicas por niedio de Ins cuales, se dcgrahi los

compuestos orgdnicos unnplcjos a compuestos mis sencillos libcrnndo energía.

4.- Bacterias aer0bias.-

Son

aquellas que q u i i r e n de oxigeno molecular para su subsistencia.

5.- B a c t b anaer0bus.- Son aquellas que subsisten en ausencia de oxigeno molccular.

6.- Bncícriaa facuitativas.- Orgnmsmos que subsisten

en

condiciones aembias o annembias.

IJrnCIPIO

El m6tcdo se basa en l a propiedad que tiene el grupo coliformes de fermentar in inctosa con formrci6n de gas, en condicionw especifícas de tiempo y temperahin.

,WzWTOS

Y

EQLXPO

-

hicubadom

_cnpaz

de nmntener una teniperníura de 35 "C + / 4 5 "C y 44.5

-+I-

0.5 Oc.

-

Estufa capz dc iimntericr

u

tcinperatura de IS0 a ZOO "C.

.. .*.utoclavc u oll:i :!e prcsioii con ninn<jinetro.

-

Poteiicinii?et-o.

- Hal;iirm :iiuiIitic:i. con seEqih!id;iti dc !).O001 graiiios.

-

!3lh\13;< ser<>lo~iicii>.

-

I'ipterlis d e aiuiiiiiúo

o

:teem i~~osidable, se pueileii p r p p d ;iiuinuiio o p:q:ci

h i t .

-

T~.iF*x

de ensaye dc crist;~! retiric.!nrio i!e 15 nuu s 150 n u n

-

[b!:a-cc>s i i i ~ i c ~ ! ~ , ~ ~ ! i ~ ~ ~ ~ e ~ ~ (le v i h o irsiireiites c\ cri.:tn! ~ ! r , c ! : a : j l > ,¡e 125 n!L. ;:r.?i in;^:^^ il:' c;-i<f:il <:,.iiic 1::iJU. . <

i ¿ ~ " ~ ~ ' ' l I ~ ' O S

;,os reactivor que a coritimucion se rneiicioiiai~ iletxii ser pado íumlitiw, a riiriios que se uidiqw

o m

cosa.

Cuando

'se espciiique el ILW

ík

agua .,e

d c k

cnicricier a y ~ i destilada, pira

la

prepmci6n

<IC. los reaciivos, las cuiiílicioiics ílc cstcriI~~:iciciii íiickii ser 121 "C y 1 ky I an2 de presiori

IiinnoiIictriG~ diirniiíc I5 rniiriitw

CALDO LACTOSNX)

tin

litro

de ngun se le ngrcpnn:

4

-

EXkdCtO de CalílC

3.0

p

-

Peptona 5.0 1:

-

Lactona 5.0 g

Esta sducihn se ajwh a un

pH

de 6.8 a 7.0 de preferencia u 6.9, preparar a bafto marlli, distnbuiiia imta las

2/3

partes del

tubo

de fxmenhcih que contenga un tubo Durham invertido y esterilizar.

CALDO

LAW-11IIPTOSA

A

un litro

de

agua se le agregori:

-

'rnpiosa 20.00 g

-

Posfato diixisico de potasio

(KzHP04)

2.75 y

-

FosfatoxmnobAsico de polacio

mwo4)

-

Lauril sulfato de sodio

Todos los reactivos una vez disueltos se distribuyen

Lista

apmxima(lamenic

2/3

partes

de

cada tubo

d~ fennenlaci6n qne cordeng~ m tubo hrlinm invertido y esicnlhr.

u

- hCt0.9il

5.00 g

u

-

Clomo de sodio 5.00 g

2.75 g

O. I O g

1

CALDO

LACTOSADO

VERDE

RIIIIJ,AN'IE

DE

BILIS DESHIDRATADA

DE

BUEY

Soliicion A:

-

En

5(#J _ml, de agua diso!ver

SOI.iiCIOS DE OXUATO DE A'\ilOXNIO-CKISTAi, VIOLETA.

Pesar 3.11 de cristal violeta al 90 %, disolver en 20 nil- de alcohol etilico al 95 Yo; disolver 0.29 g de

omhio dc itiiioíiio iiionohidniado eii 20 niL de ngua iiwzxlar las dos soluciones por parks iguales y (lc,jnr rclxwu d~uiuilc 24 horas miles (IC I I S . ~ ~ .

En

ocasioiies

esta p r u ~ m i 6 u es inuy conceiitndn, ya

qiic tifie dciiiasiado ZI los orgaiiistnos, dificultando su observnci6n, pm evitar esto la solucicíri de

crishd violria se pude diluir hnsia IO wccs mezclarido con un volimen igunl de la soluci6n de

oxnkito de :unonio.

m

SOLUCION

D E

LIJGOL, MODIFICACION DE

GRAM.

En

un niorieru huinogenizar un gramo de cristal de yodo y 2 g

de

y o d m

de

potasio y disolver

en

300

mL de agua.

b

SOLUCION

D E

S f W R . A " A

4

Disolver 2.5 g

de

safranitia ( coloraole ) en 100

mL

de alcohoi dilico a i 95%, diluir 10 nü,

de

esta

solución

en

100 mL

de

a g ~ .

SOLUCION

DECOLORkNTE

1

Mezclar 50

mi.

de alcohol etilico al 95 %en 50 mL

de

acetom. SOLIJCION DE TIOSULFATO

DE

SODIO

AL

1 %a Disolver 1 g de tiosuitato de sodio

cn

99

mi,

de agua.

I

-

SOLUCION DE ACID0 BORIC0

A

u11 Iiiro de agua agregar:

El prwri!iiiiicrito para

la

recoiwciiui ilc Lis i1iiicsir3i de agua pxia el a d i s i s hcienolOgico~ (Icpciide

del tipo de n ~ u í i que se desee iiiiicsirc:ir.

,wuestreo en merpos receptores.- !.as iiiucstras para el adisis bacieriologico se d c k i i tonw en

tiascos niuestreadores qiie se hnyaii Invado con extremo ciiidado y csterilií.lulo. eii su interior colocar,

previo a la csttxiheibn 0.1 nil, de soiiiciihi dc tiosuifato de salio ni i Yo cou el propbsito de Uhibir

la acción del cloro que pudiera coxiicrier 1;i rnucstr-4 cubriendo a<lcinhs el tapón con pnpl alllmniuio.

Siempre que sea posible llenar el fisco w 2 /; part- de su capacidad, UM mitidud niciior sera insuficieuic, si

hem

iiiayor disiiiiiiiiirin el iiirc disponible, necesario pani homogeneizar

Li iiiucstm;

las

muostros deben ser rcpresenlitivas del agua ~m estudio y, as1 mismo que no se containinen de f o m nlguoa.

El frasco

donde se colccia la iiiiiestnt, no se debe desbpar sino hasta el rnomailo cn qiie se lleve a

cabo el rnuestreo, al muesircar , se d c k evitar que el cuello del fiasco se p o n ~ o en amheto con los

dedos o cualquier otro malerinl coiit:iniirituitc diirante

la obiencion

de la muesh.

El

examen de

la

nimira

_colectnda,

d e h r d z . lo mas pronto _posible,

para

evitar la prolihción

o muerte de las bacterias.

Cuando el examen se practica dos horas después de tomar la muestra, Iw resultados empinan a ser

inciertos.

El voluruen de muestra para efwtuar el exanicn bacteriol6gico, de prefcrciicia debc scr

apximndnmeute 100

mL.

Es

importante que todas Ins muestras estén acompañadas de datos

completos y exactos de identificación y descripción

El

meeauisnio de niuestreo supirficinl es el siguiente:

-

Quikv el papel alumiiio del _cuello del frasco, iutroducir el h s c o aproxinnadmnentc 30 crn bajo la

superficie del agua.

-

Destapar el frasco denim del ngm; la boca del envase debe quedar en sentido eontmrio si flujo de In comente.

-

Cumdo ~3 parte de la muesirn vculje el volunien correspondiente del

fiasco

(

2/3

taph sin sacusc

del aguaj. Si no existe corrieiite corno eii ciiibalscs, crearla eiiipujautln le fnsco !iorizoiit;i!rtierite, eii

dicrccióii opuesta al !iioviinieiiio tie In n~iiio.

Si

no es posible la nxmlwcii>n de iiiuestras eu las coudicioues mites eiiuncialkis fijar un lastre

al fiasco, al que se

hace

descetidcr eii el agua.

P.m tomar muestras eri I n ~ o s o embalses, usar npr aio s cipeciaies que pei-riiir;iii t;ipir y

;

d

c:¿!t,üar csic inucs'uco, SE dctc cvitu que cl a g u cccimi tiicra dcl frasco así niisino sc deben flnmcnr los bordes del hsco y t?@n con un mechero durante cl tiernp? qiic < f u n c! irii~estrco, esto se lLice con el objero de innriterim el irutxuno dc condiciortes de eslcd¡(hd.

si

110 sc ciicn:a coil equipo dc bointxo, tonuir In rnucstrn dircctmicnte del

p i m ,

p r nieilio de un h s c o estcnl con lastre; en este caso se debe evitar la contam¡nación de la iniiestrn por Lxs natas

superficiales.

Si se trata de toxnar

una

iuueuh

de

u11 grifo del sistcnia de servicio, ifauitiir cl grifo, r;l>rirlo complctuiicritc, dcjaudo que cl ;igu fluya 2 o 3 minutos o un tiempo suficiente para permitir la

purga de

la

heí.

Pam

el mortiento del tiiucstreo, restringir el flujo

de

la

linve pwi que se pueda llenar el frasco

sin

salpicdums.

Laa condiciones de esterilidad dchen ser

las

mismas que las enunciadas en el punto

N"

3.

PRESERVACION

Y ALMACEXAiWENTO

El

adisis bacteriolb~ico

de

la riiuestni debe practicame hedtaiamente despues

de

su mzoleccion:

Es

por ello que se mtnienda que no deb

de

efectuarse

asi

el d l i s i s , se inicie dentro dc las dos

horas prbximas a la mleccibn de la muestra y

en

ningUn

caso, ese lapso

debe

exceder seis hons

pra que sen v;iiido el rerniltndo del anAlisis.

Durante

el periodo que transairre del miiestrco ai

adisis, se deben conservar las inriestm a 4 T, hasta tin limite IIULXINO de 30

horas,

con el objeto

dc

inhiti¡ Iri actividad bactcriana pan no obicricr resultados falsos

o

dudosos.

el :im (le iii~xhiiilncion cn &do lactodo verde hnllanie dc bilis e incubar a 3.5 +/- 0.5 "c.

J$aninnr c d i hibo s las 24+/-2 horas los tubos que prcsenlcn formación de gas sc considcm pmiiivo'i.

iiicutxu los ~tibos que no presenten gas otras 21

+/-2

horas.

-. i,n íonnacion cie

confirriuitiva Jc la presencia de colifomea totales.

IA ausencia de gas dentro de

48

+/-3

honts

do

incubacibn total constituyen una prueba

de la

ausencia

di c o l i f m s totales.

denim de 48 +/-

3

h m s de incuhicin total, constituyen una prueba

4

~e los tubos que

resdien

positivos de

fermentación con caldo ácido Mnco o medio E.C.

e

incubar a 43

+/-

0.5

respectivamente

en

Mío d a

durnntc 48 +/- 3 horas.

La f¿nmacibii de gas dentro de 48

-I-/-3

horas

de incubacióii total constituye una

prueba

wníirmaiivn

prueba presuntiva,

_inocuiar

tres

asadas

en

tubos de

C y 44.5 +/-OS

C

de

la

preencia de colifomies fecaies.

La

ausench de

gas

dentro de 48+/-3

horas

de

hcubación total constituye una wbanegativa para

ia

presenciad coiifomes fecales..

a

'

TINCTON

DE

GRAM

1

I

0

-

~ e ~ i r con is soiucicjn omiato de nmoniocristal violeta ciiicinte un minuto.

-

iiacer

un

fiotis

de

ia

muestra secandoia

ai

aire.

-

Fijarlo pasaido el h l i s por

la

ílainu.

- I .airar con ngia,.

-

Agregar ii~gol, dejando en reposo duranle

un

ininiito.

- Lavar con agua y secar con papel Fdiro.

- »ec»lom con alcohol-acctona y cccar con papel fiitro.

-

Ciibnr con solución de sriíianina, lavar con agua y SCOZT con airc.

-

Obsewar :I¡ microscopio la hnctcrias y scgiiri sdqiiiernn o pienhn 1:: co!ornci<in inicinl (cnst.al

i.io!c.ia;. K ckdicnn ex gram pmiiiva o sun ncgntivn reqxctivnnxitc.

.

U

1

4