Efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial de Eucalyptus globulus “Eucalipto” sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa

49  15 

Texto completo

(1)Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. át ica. yC. om un. ica ció. n. ESCUELA DE MEDICINA. m. TÍTULO:. fo r. Efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial de Eucalyptus globulus. as. de. In. “Eucalipto” sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa. em. PARA OPTAR EL GRADO DE:. Di re cc. ió. n. de. Si st. BACHILLER EN MEDICINA. AUTOR:. MELÉNDEZ POLO, JHÓNATAN WILLIAM. ASESORA: DRA. MEJÍA DELGADO, ELVA MANUELA Trujillo – Perú 2017 1. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA. ica ció. n. A Dios, por guiar mi andar día a día en esta maravillosa carrera, haberme dado salud y. om un. sabiduría para lograr mis objetivos, además. m. fo r. A mi querida familia, por su amor. át ica. yC. de su infinito amor y bondad.. In. incondicional en cada momento de mi vida,. de. por su confianza en mí y por darme la. em. as. motivación necesaria para seguir mi sueño. A Andrea Rafael, mi compañera de vida, mi. Di re cc. ió. n. de. Si st. desde el inicio.. apoyo incondicional y mi otro pilar de fortaleza en mi vida. Agradecido con Dios por haberla puesto en mi camino.. 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. n. AGRADECIMIENTOS. ica ció. A mi querida asesora y madrina, Dra. Elva. om un. Mejía Delgado, por su apoyo incondicional, amor, cariño y guía en la realización de este. át ica. yC. trabajo de investigación. fo r. largo camino en la carrera sea más ameno en. m. A mis amigos, por hacer el trayecto de este. In. el día a día. En especial a mis amigos más. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. cercanos.. A mi querida Facultad y sus maestros, gracias por todos los conocimientos y experiencias compartidas en estos largos 6 años de carrera.. 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ica ció. n. ÍNDICE. om un. RESUMEN………………………………………..………………………………. 5. yC. ABSTRACT…………………………………………………………………….….6. át ica. I. INTRODUCCIÓN………………………………………………………...…….…7. fo r. m. II. MATERIAL Y MÉTODO………………………………………………….…… 10. In. III.RESULTADOS…………………………………………………………………... 17. as. de. IV. DISCUSIÓN…………………………………………………………………...… 26. Si st. em. V. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES……………………………..… 30. ANEXOS…………………………………………………………………….. 35. Di re cc. ió. n. VII.. de. VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………………... 31. 4. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial de Eucalyptus globulus “Eucalipto” sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa. ica ció. n. _________________________________________________________________________. om un. RESUMEN. OBJETIVO: Evaluar el efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial de Eucalyptus. yC. globulus “Eucalipto” sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa.. át ica. MATERIAL Y MÉTODOS: Se llevó a cabo un estudio experimental que evaluó el efecto antibacteriano in vitro de 3 concentraciones (100%, 75% y 50%) del aceite esencial. fo r. m. de Eucalyptus globulus sobre el crecimiento de Streptococcus pyogenes y Pseudomonas. In. aeruginosa. Se realizaron 10 repeticiones para cada concentración y posteriormente se. de. evaluó la sensibilidad mediante el recuento de bacterias viables en placa.. as. RESULTADOS: Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa son altamente. em. sensibles al efecto antibacterianno del aceite esencial de Eucalyptus globulus al 100%, 75%. Si st. y 50% sin encontrarse una diferencia significativa en el uso de cada una. Se obtuvo los. de. mejores resultados usando aceite esencial de Eucalyptus globulus al 100%, 75% y 50%. ió. n. sobre Streptococcus pyogenes.. Di re cc. CONCLUSIÓN: El aceite esencial de Eucalyptus globulus si tiene efecto antibacteriano in vitro a todas las concentraciones probadas sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa.. PALABRAS CLAVE: Eucalyptus globulus, Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa. 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. In vitro antibacterial effect of Eucalyptus globulus essential oil "Eucalyptus" on Streptococcus pyogenes and Pseudomonas aeruginosa. ica ció. n. _________________________________________________________________________. om un. ABSTRACT. OBJECTIVE: To evaluate the in vitro antibacterial effect from Eucalyptus globulus. yC. “Eucalyptus” essential oil on Streptococcus pyogenes and Pseudomonas aeruginosa.. át ica. MATERIAL AND METHODS: An experimental study was carried out to evaluate the in vitro antibacterial effect of 3 concentrations (100%, 75% and 50%) of the essential oil from. m. Eucalyptus globulus on Streptococcus pyogenes and Pseudomonas aeruginosa. Ten. In. fo r. repetitions were performed for each concentration and sensitivity was subsequently. de. assessed by counting viable plaque bacteria.. as. RESULTS: Streptococcus pyogenes and Pseudomonas aeruginosa are highly sensitive to. em. the antibacterial effect of the essential oil from Eucalyptus globulus at 100%, 75% and 50%. Si st. without finding a significant difference in the use of each one. The best results were. n. pyogenes. de. obtained by using 100%, 75% and 50% Eucalyptus globulus essential oil on Streptococcus. Di re cc. ió. CONCLUSION: The essential oil of Eucalyptus globulus has an antibacterial effect in vitro at all concentrations tested on Streptococcus pyogenes and Pseudomonas aeruginosa.. KEY WORDS: Eucalyptus globulus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa.. 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCIÓN El uso indiscriminado de antibióticos ha generado un problema de resistencia en las bacterias a estos. El reconocimiento de este problema trae la necesidad de analizar. ica ció. n. las propiedades antimicrobianas de nuevas sustancias razón por la cual es interesante y necesario examinar los productos de origen vegetal, como principios. om un. activos de posibles agentes germicidas.Los aceites esenciales constituyen el 0.1 al 1% del peso seco de las plantas. Se pueden obtener por diversos métodos pero el. yC. más frecuente es por destilación. Y se les suele usar como productos cosméticos, en. át ica. aromaterapia y sobretodo como alternativas terapéuticas.1. El eucalipto es una planta originaria del sudeste de Australia, son reconocidas. fo r. m. cuatro subespecies de las cuales el Eucalyptus globulus es la más difundida. Se. In. estima que aproximadamente en el siglo XVIII se introdujo en América (Perú). de. gracias a sus características favorables, tales como la capacidad de adaptación,. as. facilidad de cultivo y rápido crecimiento.2, 3Como opción terapéutica, las hojas del. em. eucalipto utilizadas en infusión son utilizadas como analgésico, antinflamatorio y. Si st. antipirético para los síntomas de las infecciones respiratorias, como el resfriado y la. de. congestión nasal.4 El principal compuesto volátil encontrado en todas las partes. ió. n. aéreas de los diferentes tipos de eucaliptos recogidos es 1,8-cineol, que alcanza una. Di re cc. concentración de 85,32%. 5,6 Diversos estudios se han realizado para averiguar el efecto antibacteriano que pudiera tener el eucalipto, dentro de éstos se encuentra el estudio realizado por Mendes y col. en el cual se utilizó eucalipto que fue recolectado durante las 4 estaciones del año, a partir de éste se elaboró el aceite esencial para comprobar el 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. posible efecto antibacteriano que tiene, se le probó contra Gram positivos (S. aureus y S. pyogenes), Gram negativos (E. coli y P. aeruginosa) y hongos (C. albicans) encontrando un efecto antimicrobiano contra todos éstos y siendo el mayor contra S.. ica ció. n. pyogenes.6. De manera similar, en el estudio realizado por Elaissi y col., se resalta el poder. om un. antibacteriano contra S. pyogenes y en el caso de P. aeruginosa se observó un efecto menor.7 También Siqueira y col. buscaron evaluar la actividad antimicrobiana in. yC. vitro del aceite esencial de Eucalyptus globulus, xilitol y papaína, encontraron. át ica. actividad antimicrobiana similar del eucalipto a la clorhexidina, pero era más alta que la clorhexidina en las pruebas con microorganismos Gram-positivos. fo r. m. tradicionalmente asociados con las infecciones relacionadas con la salud. Sin. In. embargo, la actividad antimicrobiana fue nula contra Pseudomonas aeruginosa.8. de. En otro estudio realizado por Cermelli y col. en el cuál se investigó la actividad. as. antibacteriana y antiviral de aceite esencial de Eucalyptus globulus contra los. em. patógenos de pacientes con infección de las vías respiratorias. No se encontró efecto. Si st. antibacteriano contra S. pyogenes en contraste con los estudios anteriormente. de. mencionados.9 Bugarin y col. estudiaron el efecto antibacteriano que poseía el aceite. ió. n. esencial del eucalipto, encontraron que las bacterias Gram negativas como P.. Di re cc. aeuroginosa y Gram-positivas fueron en su mayoría resistentes.10 Resultados similares se encontraron en los estudios de Mulyaningsih y col., Luís y col. y AitOuazzou y col. 11,12,13. 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La importancia del presente estudio reside en conocer el efecto antibacteriano del aceite esencial de Eucalyptus globulus ya que actualmente se ha incrementado la resistencia bacteriana. Debido a ello, se propone al aceite esencial de Eucalyptus. ica ció. n. globulus como una alternativa natural en la terapia antimicrobiana. Además, se observa un incremento en el interés por investigar las propiedades medicinales que. om un. existen en las plantas, es por eso que las grandes industrias farmacéuticas se basan en conocimientos antiguos y modernos para la generación de nuevas alternativas. yC. farmacéuticas. También es sabido que, diversos productos farmacéuticos. át ica. disponibles hoy en el mercado fueron formulados a partir de productos activos de la flora disponible en la naturaleza.. fo r. m. Por todo lo expuesto, este trabajo de investigación tiene por objetivo evaluar el. In. efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial de Eucalyptus globulus“Eucalipto”. PROBLEMA, HIPÓTESIS Y OBJETIVOS. Si st. 1. Enunciado. em. II.. as. de. sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa.. ¿Existe un efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial de Eucalyptus. de. globulus “Eucalipto” sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas. Di re cc. ió. n. aeruginosa?. 2. Hipótesis El aceite esencial de Eucalyptus globulus “Eucalipto” si tiene un efecto antibacteriano in vitro sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa 3. Objetivos i. Objetivo General 9. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Evaluar el efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial de Eucalyptus globulus “Eucalipto” sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa. Determinar el efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial de. Eucalyptus. globulus. “Eucalipto”. 50%. sobre. Determinar el efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial Eucalyptus. globulus. Streptococcus pyogenes. “Eucalipto”. al. 75%. sobre. yC. de. Determinar el efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial de. Eucalyptus. át ica. -. al. om un. Streptococcus pyogenes -. ica ció. -. n. ii. Objetivos específicos. globulus. “Eucalipto”. al. 100%. sobre. de. fo r. Determinar el efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial Eucalyptus. globulus. In. -. m. Streptococcus pyogenes. “Eucalipto”. al. 50%. sobre. Determinar el efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial. as. -. de. Pseudomonas aeruginosa. Eucalyptus. globulus. “Eucalipto”. al. 75%. sobre. em. de. Pseudomonas aeruginosa Determinar el efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial. Si st. -. Di re cc. ió. n. de. de. III.. -. Eucalyptus. globulus. “Eucalipto”. al. 100%. sobre. Pseudomonas aeruginosa Comparar el efecto antibacteriano in vitro de las 3 concentraciones de aceite esencial de Eucalyptus globulus “Eucalipto” sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa. MATERIAL Y MÉTODO. 1. Material de Estudio 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. i. Definición de la población muestral El universo muestral estuvo constituido por cepas de Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa conservadas en el laboratorio de la. ica ció. n. Sección de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo. om un. ii. Diseño estadístico del muestreo Unidad de análisis. yC. La unidad de análisis lo constituyó cada repetición realizada en las. át ica. placas Petri con las cepas de Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa que fueron expuestas al aceite esencial de Eucalyptus. fo r. m. globulus.. In. Unidad de muestreo. de. La unidad de muestreo estuvo compuesta por el número de colonias en. as. cada placa Petri del efecto antibacteriano del aceite esencial de. em. Eucaliptus globulus sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas. Si st. aeruginosa.. Para el cálculo del tamaño se empleó la fórmula estadística. Di re cc. ió. n. de. Tamaño muestral. para hallar el número de repeticiones necesarias que validen el diseño. experimental.. Se. aplicó. la. siguiente. fórmula. estadística:14. Dónde: 11. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. n= número de repeticiones para cada concentración (50%, 75%, 100%) Zα/2= 1.96 para α = 0.05. ica ció. n. Zβ = 0.842 para β = 0.20. S: Desviación estándar de la susceptibilidad bacteriana.. om un. X1 – X2: Diferencia a detectar en la susceptibilidad bacteriana entre 2 concentraciones de aceite esencial de Eucalyptus. yC. globulus. át ica. Se asumió: S= 0.8 (X1 – X2), por no haber estudios similares. Reemplazando se tiene:. fo r. m. n= 2 x (1.96 + 0.842)2 x 0.82. In. n= 10 repeticiones /grupo. de. Por lo tanto, se realizó 10 repeticiones por cada concentración. as. de aceite esencial de Eucalyptus globulus cada bacteria. Si st. 2. Método. em. estudiada.. de. i. Instrumento de recolección de datos. ió. n. Los datos fueron recolectados en una Ficha en la cual se indicó el número de. Di re cc. colonias que crecieron en cada uno de los cultivos de Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa ii. Material biológico y químico 1. Material Botánico:. 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Las hojas de Eucalyptus globulus fueron recolectadas del departamento de la Libertad- Provincia de Sánchez Carrión 2. Cepas Bacteriana:. ica ció. n. Las cepas de Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa fueron obtenidas del cepario del laboratorio de la sección de Microbiología de la. om un. Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo 3. Diseño. yC. i. Elaboración del aceite esencial de Eucalipto. át ica. Una vez recolectadas las hojas de eucalipto, se procesaron en el Laboratorio de Farmacognosia – Farmacobotánica de la Facultad de. fo r. m. Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo. In. El aceite se obtuvo por medio del proceso de destilación por arrastre de. de. vapor de agua, para lo cual se necesitó dos balones de 1000 mL, el. as. primero como generador de vapor de agua y el segundo como. em. contenedor del eucalipto, un refrigerante y un matraz Erlenmeyer donde. Si st. se recibió el destilado (Hidrolato). El hidrolato se saturó con NaCl a una. de. concentración de 10g por cada 10 ml de hidrolato, luego se separó la fase. Di re cc. ió. n. orgánica (aceite volátil) utilizando peras de decantación. Posteriormente se adicionó 50 mL de éter etílico a la pera de decantación para separar el aceite volátil de las impurezas que pudieran existir en la fase orgánica, luego se decantó la cepa etérea y se eliminó los residuos de agua que pudieran quedar por la adición de sulfato de sodio anhidro.. 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Luego se procedió a preparar 3 concentraciones del aceite esencial: 25%, 50% y 100%. ii. Preparación de las cepas:. ica ció. n. Una vez obtenidas las cepas, se cultivaron en tubos de ensayo, los cuales contenían agar TSA para Pseudomonas aeruginosa y Agar sangre para. om un. Streptococcus pyogenes, se incubaron a 37°C para obtener colonias jóvenes. Luego de 24 horas, se tomaron una muestra de cada cultivo con. yC. el asa bacteriológica y se preparó una suspensión con caldo Mueller. át ica. Hinton estéril a partir de colonias jóvenes hasta alcanzar una turbidez semejante al estándar 0.5 de Mac Farland (1.5 x 108 UFC/ml), esta. fo r. m. comparación se llevó a cabo visualmente utilizando fondo blanco con. In. líneas negras contrastantes y fuente de luz adecuada. Los tubos. de. conteniendo las bacterias, fueron girados entre las manos durante 30. as. segundos, antes de proceder al sembrado. Se utilizó esta suspensión para. em. inocular las placas que contendrán 15 mL de Agar Mueller Hinton para. Si st. Pseudomonas aeruginosa y Agar sangre para Streptococcus pyogenes.. de. iii. Determinación del efecto antimicrobiano. Di re cc. ió. n. Se utilizóel método de recuento de bacterias viables en placa. Este método nos permitirá cuantificar solo a las bacterias viables presentes en las muestras en términos de unidades formadoras de colonias (UFC), las cuales se evaluaron con la técnica siembra en profundidad, en la cual un volumen no mayor de 1 ml de las 3 concentraciones se mezcló con el. 14. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. medio de cultivo fundido respectivo, recién sembradas se colocaron dentro de una estufa a 37°C de temperatura durante 24 horas.15 Luego de lo cual, se procedió a contar colonias siempre y cuando el. ica ció. n. número de UFC no supere las 300 UFC, en caso de exceder se procedió a contar 4 espacios (cuadros) comprendidos entre rejillas que midan. om un. 1cm2, se sumaron los 4 espacios y se promediaron, luego se multiplicaron por la superficie de la placa 64cm2 para poder estimar el. yC. número de colonias por placa. En caso que el número de UFC sea mayor. át ica. 300 se expresó como valor estimado como 103de acuerdo a la placa en. fo r. tendrá efecto bactericida.. m. que se dispuso a contar. Si se obtuviera cero UFC, la concentración. In. iv. Variables y escala de medición Tipo de variable. Naturaleza. Escala de medición. Cualitativa. Nominal. Dependiente. Cualitativa. De razón. Dependiente. Cualitativa. De razón. de. Variable. as. Aceite esencial de Eucalyptus globulus. Si st. Efecto antibacteriano. em. Independiente. de. sobre Pseudomonas. n. aeruginosa. Di re cc. ió. Efecto antibacteriano sobre Streptococcus pyogenes. v. Análisis e interpretación de los datos. 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Una vez obtenidos los datos se utilizaron tablas estadísticas de resumen así como gráficos estadísticos para presentar los resultados de la investigación.. ica ció. n. La comparación de los resultados obtenidos en la investigación se realizó mediante la prueba de análisis de varianza (ANOVA), considerando un. om un. nivel de significancia de 0.005. Posteriormente se utilizó la prueba de Duncan para determinar pares de grupos en los que la diferencia es. yC. significativa, considerando significativo si p<0.05.. át ica. El almacenamiento de la información recolectada se realizó en el programa Microsoft Excel 2010 y el análisis estadístico utilizando el. as. de. 4. Consideraciones éticas. In. fo r. m. Software Estadístico Minitab 15 español.. em. Para la realización del presente estudio se contó con la autorización del comité. Si st. de Ética de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo, en concordancia con las recomendaciones establecidas en la declaración de. de. Helsinki, adoptada por la 18° Asamblea Médica Mundial de Helsinki, Finlandia,. ió. n. Junio 1964 y modificada por la Asamblea Médico Mundial de Tokio, enero. Di re cc. 2004.16. 16. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. RESULTADOS. Las medidas del número de colonias de la cepa Streptococcus pyogenes de los grupos experimental y control se muestran en la Tabla 1 y gráfico 1, en el cual se. ica ció. n. observa que el número de colonias en el grupo control muestra una media y una desviación estándar elevada lo que genera una gran variación de los resultados al. om un. realizar el análisis de varianza (Tabla 2). Por lo que se procedió a realizar un nuevo análisis de varianza sin el grupo control para determinar si los diferentes. yC. tratamientos muestran diferencias significativas; sin embargo, se observó que no. át ica. existe diferencias estadísticamente significativas entre estos lo que indica que indistintamente de la concentración que se use el efecto será el mismo. (Tablas 3 y. fo r. m. 4).. In. De igual manera, el número de colonias de la cepa Pseudomonas aeruginosa de los. de. grupos experimental y control se muestran en la Tabla 5 y gráfico 3, en el cual se. as. observa que el número de colonias en el grupo control muestra una media y una. em. desviación estándar elevada lo que genera una gran variación de los resultados al. Si st. realizar el análisis de varianza (Tabla 6). Por lo que se procedió a realizar un nuevo. de. análisis de varianza sin el grupo control para determinar si los diferentes. ió. n. tratamientos muestran diferencias significativas; sin embargo, se observó que no. Di re cc. existe diferencias estadísticamente significativas entre estos lo que indica que indistintamente de la concentración que se use el efecto será el mismo. (Tablas 7 y 8). Cabe resaltar que en esta cepa la concentración 50% mostró un aparente mejor efecto que la 75%, algo contradictorio; sin embargo, esta diferencia no es significativa como se explicó anteriormente. 17. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla N°1 UFC de Streptococcus pyogenes según concentraciones de Aceite Esencial de Eucalipto, Penicilina y Control . FM UNT – 2017. 10. 5. 75%. 10. 0.6. 100%. 10. 0.1. Control. 10. 6660. Penicilina. 10. 0. 13.04 1.58 0.32. 1380.18 0. m. át ica. FUENTE: Datos obtenidos por el investigador. n. 50%. Desv. Estándar. ica ció. Media. om un. n. yC. Grupos de tratamiento. fo r. Tabla N°2. SC. CM. F. p. 354693140.7. 4. 88673285.180. 232.731. 0.0000. 17145553.3. 45. 381012.296. 371838694.0. 49. em. Entre grupos Dentro de grupos. GL. Si st. F de V. as. de. In. Análisis de varianza de las UFC (Streptococcus pyogenes) según grupo de tratamiento.. de. Total. ió. n. FUENTE: Datos obtenidos por el investigador. Di re cc. FV: Fuentes de variación SC: Suma de cuadrados GL: Grados de libertad CM: Cuadrados medios F: Razón F. 18. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La suma de cuadrados (SC) fue calculada a través de la fórmula de sumatoria de Entre los grupos y Dentro de grupos (o error). Para el cálculo de los grados de libertad (GL), entre los grupos se usó la fórmula k-1 siendo k el número de tratamientos (grupos); dentro de los grupos, a través de n-k,. ica ció. n. siendo n el número de repeticiones totales de los 5 grupos. Los valores de los cuadrados medios (CM) se obtuvieron de la división de SC entre GL; así mismo, para el cálculo de Razón F (F) se. yC. om un. dividió CM de entre los grupos entre CM dentro de los grupos.. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. m. át ica. Gráfico 1: UFC de Streptococcus pyogenes según concentración de aceite esencial de eucalipto, control y penicilina. FUENTE: Datos obtenidos por el investigador. 19. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla N°3. GL. CM. F. Entre grupos. 172.5. 3. 57.492. 1.332. Dentro de grupos. 1553.3. 36. 43.147. Total. 1725.8. 39. 0.2790. át ica. FUENTE: Datos obtenidos por el investigador. p. om un. SC. yC. F de V. ica ció. n. Análisis de varianza de las UFC (Streptococcus pyogenes) según grupo de tratamiento(sin el control). FV: Fuentes de variación. m. SC: Suma de cuadrados. fo r. GL: Grados de libertad. In. CM: Cuadrados medios. de. F: Razón F. as. La suma de cuadrados (SC) fue calculada a través de la fórmula de sumatoria de Entre los grupos y. em. Dentro de grupos (o error). Para el cálculo de los grados de libertad (GL), entre los grupos se usó la. Si st. fórmula k-1 siendo k el número de tratamientos (grupos); dentro de los grupos, a través de n-k,. de. siendo n el número de repeticiones totales de los 4 grupos. Los valores de los cuadrados medios. n. (CM) se obtuvieron de la división de SC entre GL; así mismo, para el cálculo de Razon F (F) se. Di re cc. ió. dividió CM de entre los grupos entre CM dentro de los grupos.. 20. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla N°4. 1. Penicilina. 10. 0. 100%. 10. 75%. 10. 50%. 10. om un. N. ica ció. Subconjunto para α = 0.05. Grupos de Tratamiento. n. Comparación de las UFC de Streptococcus pyogenes según grupos de tratamiento (sin el control). 0.1. 5. át ica. yC. 0.6. m. FUENTE: Datos obtenidos por el investigador. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. Gráfico 2: UFC de Streptococcus pyogenes según concentración de aceite esencial de eucalipto y penicilina (sin Control). FUENTE: Datos obtenidos por el investigador 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla N°5. ica ció. n. UFC de Pseudomonas aeruginosa según concentraciones de Aceite Esencial de Eucalipto, Ceftazidima y Control. FM UNT - 2017 Grupos de tratamiento. N. Media. Desv. Estándar. 50%. 10. 3.4. 8.69. 75%. 10. 8.5. 100%. 10. 0.1. Control. 10. 63300. Ceftazidima. 10. 0. om un. 25.83 0.32. 0. át ica. yC. 47393.86. FUENTE: Datos obtenidos por el investigador. fo r. m. Tabla N°6. SC. CM. F. P. Entre grupos 32052082150.2. 4. 8013020537.6. 17.837. 0.0000. 449235704.2. em. GL. Si st. F de V. as. de. In. Análisis de varianza de las UFC (Pseudomonas aeruginosa) según grupo de tratamiento. 20215606687.8. 45. Total. 52267688838.0. 49. n. de. Dentro de grupos. Di re cc. ió. FUENTE: Datos obtenidos por el investigador FV: Fuentes de variación SC: Suma de cuadrados GL: Grados de libertad CM: Cuadrados medios F: Razón F. 22. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La suma de cuadrados (SC) fue calculada a través de la fórmula de sumatoria de Entre los grupos y Dentro de grupos (o error). Para el cálculo de los grados de libertad (GL), entre los grupos se usó la fórmula k-1 siendo k el número de tratamientos (grupos); dentro de los grupos, a través de n-k,. ica ció. n. siendo n el número de repeticiones totales de los 5 grupos. Los valores de los cuadrados medios (CM) se obtuvieron de la división de SC entre GL; así mismo, para el cálculo de Razon F (F) se. om un. dividió CM de entre los grupos entre CM dentro de los grupos.. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. m. át ica. yC. Gráfico 3: UFC de Pseudomonas aeruginosa según concentración de aceite esencial de eucalipto, control y Ceftazidima. 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla N°7. GL. CM. Entre grupos. 478.2. 3. 159.40. Dentro de grupos. 6687.8. 36. 185.77. 7166. 39. 0.8580. P. 0.4717. át ica. Total. F. om un. SC. yC. F de V. ica ció. n. Análisis de varianza de las UFC (Pseudomonas aeruginosa) según grupo de tratamiento(sin el control). m. FUENTE: Datos obtenidos por el investigador. fo r. FV: Fuentes de variación. In. SC: Suma de cuadrados. de. GL: Grados de libertad CM: Cuadrados medios. as. F: Razón F. em. La suma de cuadrados (SC) fue calculada a través de la fórmula de sumatoria de Entre los grupos y. Si st. Dentro de grupos (o error). Para el cálculo de los grados de libertad (GL), entre los grupos se usó la. de. fórmula k-1 siendo k el número de tratamientos (grupos); dentro de los grupos, a través de n-k,. n. siendo n el número de repeticiones totales de los 4 grupos. Los valores de los cuadrados medios. Di re cc. ió. (CM) se obtuvieron de la división de SC entre GL; así mismo, para el cálculo de Razon F (F) se dividió CM de entre los grupos entre CM dentro de los grupos.. 24. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla N°8. 1. Ceftazidima. 10. 0. 100%. 10. 50%. 10. 75%. 10. om un. n. ica ció. Subconjunto para α = 0.05. Grupos de Tratamiento. n. Comparación de las UFC de Pseudomonas aeruginosa según grupos de tratamiento (sin el control). 0.1. yC. 3.4. át ica. 8.5. FUENTE: Datos obtenidos por el investigador. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. m. Gráfico 4: UFC de Pseudomonas aeruginosa según concentración de aceite esencial de eucalipto y Ceftazidima (sin Control). FUENTE: Datos obtenidos por el investigador 25. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.. DISCUSIÓN Las infecciones bacterianas son enfermedades altamente comunes en países en vías de desarrollo. Aunque existen varios fármacos para el tratamiento de enfermedades. ica ció. n. infecciosas, los microorganismos desarrollan resistencia para la mayoría de las terapias farmacológicas convencionales. Por ello, buscar y sumar una alternativa de. om un. prevención ante esta problemática y generar nuevos conocimientos acerca de la terapia antibacteriana a través de medicamentos naturales, como el aceite esencial. yC. de Eucalyptus globulus, permitirán contrarrestar este problema. Eucalyptus globulus. át ica. es una planta que crece a nivel mundial y nuestro país no es ajeno, se distribuye en muchas regiones y se utiliza con fines terapéuticos es por eso que es necesario. fo r. m. conocer sus propiedades para el cual es utilizado, entre ellas la de antibacteriano.. In. Los resultados mostrados en las Tablas 4 y 8 referida al efecto del aceite esencial. de. de Eucalyptus globulus sobre Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa,. as. nos indica que, efectivamente, se produce inhibición del crecimiento sobre ambos. em. microrganismos. Estos resultados concuerdan con el estudio publicado por Luís A.. Si st. y col., quienes utilizaron el Agar de Infusión de Corazón de Cerebro (BHI) para el. de. crecimiento de especies bacterianas y observaron que las bacterias Gram-positivas. ió. n. (S. pyogenes), incluyendo aislados clínicos de cepas de S. aureus y MRSA, eran. Di re cc. más susceptibles a la acción del aceite esencial de eucalipto, presentando las mayores zonas de inhibición, contrariamente a lo que se observó para cepas Gram-. negativas, a saber E. coli y P. aeruginosa. Se destaca que en este estudio se. encontró actividad antimicrobiana contra levaduras y bacterias Gram-negativas, que a menudo son más resistentes a la acción de extractos de origen natural.12Cabe 26. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. mencionar que la medición de la actividad antibacteriana en la presente investigación fue cuantificada determinando el número de bacterias viables. De manera similar Salem M. y col encontraron un diámetro de halo de inhibición. ica ció. n. contra el crecimiento de Pseudomona saeruginosa (19 ± 1,9 mm) en el caso del aceite esencial obtenido de Eucalyptus globulus con valores de MIC de 250/ml.17. om un. En el estudio realizado por Dogan G. y col. demostraron también que el aceite. contra Streptococcus pyogenes (22 ± 2,5).18. yC. esencial de hoja de Eucalyptus globulus mostró una fuerte actividad antibacteriana. át ica. Al igual que los anteriores, Vratnica y col. investigaron los efectos antimicrobianos del aceite esencial de E. globulus contra 17 microorganismos, en resultados. fo r. m. observaron que los valores de diámetro de la zona de inhibición más altos. In. correspondieron a S. pyogenes (25-51 mm). Además, los valores más altos de MIC. de. fueron encontrados para P. aeruginosa y Salmonella infantis (3,13 mg / mL) y los. as. más bajos para S. aureus, E. coli y S. pyogenes (0,09 mg / mL). Sin embargo en este. em. estudio, no se proporcionó información sobre los compuestos posiblemente. Si st. responsables de la actividad biológica.19. de. Así también, Dhakad A. y col. encontraron que el aceite esencial de hojas de E.. ió. n. globulus mostró una actividad antibacteriana significativa como se observó para S.. Di re cc. pyogenes y P. aeruginosa con zonas de inhibición de 16 y 28, respectivamente. Igualmente, en la investigación realizada por Mekonnen A. y col. los resultados del presente estudio indican que el aceite esencial de Eucalyptus globulus extraído por. hidrodestilación aplicado a una misma concentración tiene un efecto antibacteriano. 27. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. variable contra S. pyogenes mostrando un halo de inhibición de 16 ± 0.9 y para P. aeruginosa de 28 ± 1.1.20 Bacheti R. encontró que la actividad antibacteriana máxima se muestra contra otras. ica ció. n. bacterias Gram positivas, mientras que la actividad antibacteriana mínima se muestra contra Pseudomonas aeruginosa (23 ± 0,03).21. difusión de disco demostraron que el aceite esencial. om un. Resultados opuestos encontraron Bugarin D. y col. quienes a través de la prueba de de. eucalipto. mostró. yC. actividad antimicrobiana sólo en dos bacterias Gram-positivas S. epidermidis y B.. át ica. subtilis en concentraciones superiores a 1,66 μL / mL. Las otras bacterias Gramnegativas, entre ellas Pseudomonas aeruginosa, fueron en su mayoría resistentes y. fo r. m. mostraron sólo una baja sensibilidad que se manifestó por la presencia de una zona. de. concentración aplicada.10. In. muy pequeña de inhibición alrededor de los discos, incluso a la máxima. as. Se refiere a un efecto antibacteriano a aquél que a menor concentración tiene efecto. Si st. (lisis bacteriana).. em. bacteriostático (inhibición de crecimiento), y a mayor concentración tiene efecto bactericida. de. Se han identificado diversos compuestos de eucalipto los cuales estarían implicados. n. en sus propiedades que posee, sobretodo antibacteriana. En las muestras de aceite,. Di re cc. ió. los dominantes fueron monoterpenos oxigenados, que representaron el 77,41%. Los principales compuestos fueron el 1,8-cineol (67,8%) y el α-pineno (14,12%), respectivamente. Y se ha propuesto como principal mediador del efecto antibacteriano al 1,8-cineol, el cual debe estar en un porcentaje mínimo de 65% para ejercer dicho efecto. 10,11,18 28. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. No se sabe exactamente por qué las bacterias Gram-negativas deben ser menos susceptibles, pero pueden estar relacionadas con la membrana externa de bacterias Gram-negativas que da a la superficie bacteriana una fuerte hidrofilicidad y actúa. ica ció. n. como una fuerte barrera de permeabilidad.12. Las diferencias morfológicas entre las bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. om un. podrían justificar la diferente sensibilidad, a saber, porque las bacterias Gramnegativas tienen una membrana fosfolipídica externa portadora de los componentes. yC. estructurales lipopolisacáridos, que no se pueden encontrar en las bacterias Gram-. át ica. positivas. Esto hace que la pared celular sea impermeable a los solutos lipófilos incluyendo los aceites esenciales, mientras que las porinas constituyen una barrera. fo r. m. selectiva a los solutos hidrófilos con un límite de exclusión de aproximadamente. In. 600 Da. Otra explicación puede ser la inhibición de la síntesis de peptidoglicano en. de. las bacterias Gram positiva, por los compuestos presentes en los extractos. 12, 11. as. Además, Tegos y col. informaron que la baja actividad de los compuestos de plantas. em. lipófilas podría deberse al flujo de salida de MDR (multidrogo resistencia) a través. Si st. del transportador ABC. Los transportadores ABC (del inglés ATP binding cassette). de. son proteínas en su mayoría especializadas en el transporte activo de sustancias a. ió. n. través de la membrana celular, la resistencia a fármacos es un fenómeno asociado. Di re cc. con una disminución en la acumulación intracelular de fármacos, hecho atribuido a la expresión de transportadores, principalmente del tipo ABC en la membrana celular.22,23 Además, se informó que Pseudomonas aeruginosa tenía una bomba de eflujo MexAB-OprM, la cual contribuiría a la tolerancia de este organismo al efecto 29. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. antibacteriano del aceite de eucalipto. Estas son proteínas transportadoras de membrana, organizadas en superfamilias y distribuidas ubicuamente entre organismos procariotas y eucariotas. Los genes que codifican para las bombas de. ica ció. n. eflujo pueden estar localizados en el cromosoma bacteriano o bien en elementos genéticos transmisibles como los plásmidos.22 CONCLUSIONES -. om un. VI.. El aceite esencial de Eucalyptus globulus a las concentraciones 50%, 75%,. El aceite esencial de Eucalyptus globulus al 50%, 75%, 100% tienen efecto. át ica. -. yC. 100% tienen efecto antibacteriano in vitro sobre Streptococcus pyogenes.. antibacteriano in vitro sobre Pseudomonas aeruginosa.. m. Comparativamente el aceite esencial de Eucalyptus globulus tuvo efecto. fo r. -. In. antibacteriano in vitro en todas las concentraciones probadas, sobre. No hubo diferencia significativa en el efecto antibacteriano del aceite. as. -. de. Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa.. RECOMENDACIONES. Realizar estudios similares utilizando concentraciones menores del aceite. n. -. de. VII.. Si st. em. esencial de Eucalyptus globulus en las 3 concentraciones usadas.. Di re cc. ió. esencial de las hojas de Eucalyptus globulus a fin de determinar la. concentración mínima inhibitoria (MIC) para cada uno de los gérmenes.. -. Realizar estudios más sofisticados para determinar la composición química de las hojas de Eucalyptus globulus.. 30. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. -. Realizar trabajos en animales para valorar la efectividad y la toxicidad que puedan producir los componentes activos del aceite esencial de las hojas de. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. ica ció. VIII.. n. Eucalyptus globulus.. 1. López M. Los aceites esenciales. Fitoterapia. 2004; 23(7): 88-91. om un. 2. Obregón C, Restrepo N. El eucalipto: Una opción de alta rentabilidad. Rev. yC. MM.. 3. Ben Hassine D, Abderrabba M, Yvon Y, Lebrihi A, Mathieu F, Couderc F,. át ica. et al. Chemical composition and in vitro evaluation of the antioxidant and. m. antimicrobial activities of Eucalyptus gillii essential Oil and extracts.. fo r. Molecules. 2012;17(8):9540–58.. de. In. 4. Silva J, Abebe W, Sousa SM, Duarte VG, Machado MIL, Matos FJA.. as. Analgesic and anti-inflammatory effects of essential oils of Eucalyptus. J. em. Ethnopharmacol. 2003;89:277–83.. Si st. 5. Sebei K, Sakouhi F, Herchi W, Larbi M, Boukhchina S. Chemical composition and antibacterial activities of seven Eucalyptus species essential. de. oils leaves. Biological Research.2015; 48:7. ió. n. 6. Mendes S, Yae S, Seigi F, Frensch G, Marques F, Nakashima T. Essential. Di re cc. Oils from Different Plant Parts of Eucalyptus cinereaF. Muell. exBenth. (Myrtaceae) as a Source of 1,8 Cineole and Their Bioactivities.. Pharmaceuticals. 2011;4: 1535-1550. 7. Elaissi A, Rouis Z, Ben N, Mabrouk S, Ben Y, Haj K et al. Chemical composition of 8eucalyptus species’ essential oils and the evaluation of their 31. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. antibacterial, antifungal and antiviral activities. BMC Complementary and Alternative Medicine. 2012; 12:81 8. Siqueira. V,. Turrini. R,. De. Brito. V.. Antimicrobial. activity. of. ica ció. n. Eucaliptusglobulusoil, xilitoland papain: a pilot study. Rev Esc Enferm USP. 2015; 49(2):215-219. om un. 9. Cermelli C, Fabio A, Fabio G, Quaglio P. Effect of Eucalyptus Essential oil on Respiratory Bacteria and Viruses. CurrMicrobiol. 2008; 56:89–92. yC. 10. Bugarin D, Grbovic S, Orcic D, Mitic D, Knezevic J, Mimica N. Essential. át ica. oil of EucaliptusGunni. As a novel source of Antioxidant, antimutagenic, and antibacterial agents. Molecules. 2014; 19: 19007-19020. fo r. m. 11. Mulyaningsih S, Sporer F, Reichling J, Wink M. Antibacterial activity of. In. essential oils from Eucalyptus and of selected components against. as. 49(9): 893–899. de. multidrug-resistant bacterial pathogens. Pharmaceutical Biology, 2011;. em. 12. Luís A, Neiva D, Pereira H, Gominho J, Domingues F, Duarte A. Stumps of. Si st. Eucalyptus glubulus as a source of antioxidant and antimicrobial. de. polyphenols. Molecules. 2014; 19: 16428-16446. ió. n. 13. Ait-Ouazzou A, Loran S, Bakkali M, Laglaoui A, Rota C, Herrera A et al.. Di re cc. Chemical composition and antimicrobial activity of essential oils of Thymus algeriensis, Eucalyptus globulus and Rosmarinusofficinalis from Morocco. J SciFoodAgric. 2011; 91: 2643–2651. 14. Fernandez P. Determinación del tamaño muestral. Cad Aten Primaria. 2001; 3: 138-14 32. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 15. National Committee for clinical laboratory standars (NCCLS). Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests. 2000 16. Mazzanti M. Declaración de Helsinki. Revista colombiana de bioética.. ica ció. n. 2001;6:1. 17. Salem M, Ashmawy N, Elansary O, El-Settawy A. Chemotyping of diverse. om un. Eucalyptus species grown in Egypt and antioxidant and antibacterial activities of its respective essential oils. Natural ProductResearch. 2014. yC. 18. Dogan G, Kara N, Bagci E, Gur S. Chemical composition and biological. át ica. activities of leaf and fruit essential oils from Eucalytuscamaldulensis. Z. Naturforsch. 2017, aop. fo r. m. 19. Almeida L, Andrade C, Teixeira R. Chemical Variability and Biological. In. Activities of Eucalyptus spp. Essentialoils. Molecules. 2016; 21:1671. de. 20. Mekonnen A, Yitayew B, Tesema A, Taddese S. In vitro Antimicrobial. as. Activity of Essential oil of Thymus schimperi, Matricariachamomilla,. em. Eucalyptus globulus, and Rosmarinusofficinalis. InternationaJournal of. Si st. Microbiology. 2016, 16: 1-8. de. 21. Bacheti R. Chemical composition and antibacterial activity of the essential. ió. n. oil from the leaves of Eucalyptus globuluscollected from Haramaya. Di re cc. University, Ethiopia. Der PharmaChemica. 2015, 7(2): 209-214. 22. Alvarez A, Pulido M. Transportadores de tipo ABC: consecuencias de su interacción con flavonoides. España. 2008. 23. Papadopoulus C, Carson C, Chang B, Riley T. Role of the MexAB-OprM Efflux Pump of Pseudomonas aeruginosa in Tolerance to Tea Tree 33. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. (Melaleucaalternifolia) Oil and Its Monoterpene Components Terpinen-4-ol, 1,8-Cineole, and α-Terpineol. Appl Environ Microbiol. 2008; 74(6): 1932-. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. m. át ica. yC. om un. ica ció. n. 1935. 34. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(35) át ica. yC. om un. ica ció. n. Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. m. ANEXOS. 35. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. m. át ica. yC. om un. ica ció. n. EXTRACCIÓN DEL ACEITE ESENCIAL DE Eucalyptus globulus. 36. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. át ica. yC. om un. ica ció. n. OBTENCIÓN DE LAS CEPAS DE Streptococcus pyogenes y Pseudomonas aeruginosa. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. m. Streptococcus pyogenes. Pseudomonas aeruginosa 37. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ica ció. n. SEMBRADO DE CEPAS EN LAS PLACAS. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. m. át ica. yC. om un. Streptococcus Pyogenes. 38. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. m. át ica. yC. om un. ica ció. n. Pseudomonas aeruginosa. 39. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. m. át ica. yC. om un. ica ció. n. CONTEO DE LAS UFC EN LAS PLACAS PETRI DE AMBAS BACTERIAS. 40. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. CUADRO DE RECOLECCIÓN DE DATOS GRUPO EXPERIMENTAL - CONCENTRACIÓN 50%. S. pyogenes. PLACA # 04. S. pyogenes. PLACA # 05. S. pyogenes. PLACA # 06. S. pyogenes. PLACA # 07. S. pyogenes. át ica. PLACA # 03. m. S. pyogenes. N° Total de Colonias. fo r. PLACA # 02. 4° Sector. In. S. pyogenes. 3° Sector. Si st. em. as. de. PLACA # 01. 2° Sector. yC. 1° Sector. om un. ELEMENTOS MICROORGANISMO MUESTRALES. ica ció. n. CONTEO MEDIANTE EL MÉTODO DE LAS UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC). ió. n. PLACA # 09. S. pyogenes. de. PLACA # 08. Di re cc. PLACA # 10. S. pyogenes S. pyogenes. 41. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. GRUPO EXPERIMENTAL - CONCENTRACIÓN 75%. S. pyogenes. PLACA # 04. S. pyogenes. PLACA # 05. S. pyogenes. PLACA # 06. S. pyogenes. PLACA # 07. S. pyogenes. át ica. PLACA # 03. m. S. pyogenes. N° Total de Colonias. fo r. PLACA # 02. 4° Sector. In. S. pyogenes. 3° Sector. Si st. em. as. de. PLACA # 01. 2° Sector. yC. 1° Sector. om un. ELEMENTOS MICROORGANISMO MUESTRALES. ica ció. n. CONTEO MEDIANTE EL MÉTODO DE LAS UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC). ió. n. PLACA # 09. S. pyogenes. de. PLACA # 08. Di re cc. PLACA # 10. S. pyogenes S. pyogenes. 42. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. GRUPO EXPERIMENTAL - CONCENTRACIÓN 100%. S. pyogenes. PLACA # 04. S. pyogenes. PLACA # 05. S. pyogenes. PLACA # 06. S. pyogenes. PLACA # 07. S. pyogenes. át ica. PLACA # 03. m. S. pyogenes. N° Total de Colonias. fo r. PLACA # 02. 4° Sector. In. S. pyogenes. 3° Sector. Si st. em. as. de. PLACA # 01. 2° Sector. yC. 1° Sector. om un. ELEMENTOS MICROORGANISMO MUESTRALES. ica ció. n. CONTEO MEDIANTE EL MÉTODO DE LAS UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC). ió. n. PLACA # 09. S. pyogenes. de. PLACA # 08. Di re cc. PLACA # 10. S. pyogenes S. pyogenes. 43. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. GRUPO EXPERIMENTAL - CONCENTRACIÓN 50%. P. aeruginosa. PLACA # 04. P. aeruginosa. PLACA # 05. P. aeruginosa. PLACA # 06. P. aeruginosa. PLACA # 07. P. aeruginosa. át ica. PLACA # 03. m. P. aeruginosa. N° Total de Colonias. fo r. PLACA # 02. 4° Sector. In. P. aeruginosa. 3° Sector. Si st. em. as. de. PLACA # 01. 2° Sector. yC. 1° Sector. om un. ELEMENTOS MICROORGANISMO MUESTRALES. ica ció. n. CONTEO MEDIANTE EL MÉTODO DE LAS UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC). ió. n. PLACA # 09. P. aeruginosa. de. PLACA # 08. Di re cc. PLACA # 10. P. aeruginosa P. aeruginosa. 44. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. GRUPO EXPERIMENTAL - CONCENTRACIÓN 75%. ELEMENTOS MICROORGANISMO MUESTRALES. PLACA # 03. P. aeruginosa. PLACA # 04. P. aeruginosa. PLACA # 05. P. aeruginosa. PLACA # 06. P. aeruginosa. PLACA # 07. P. aeruginosa. át ica. P. aeruginosa. N° Total de Colonias. m. PLACA # 02. 4° Sector. fo r. P. aeruginosa. 3° Sector. as. em. Si st. Di re cc. ió. PLACA # 09 PLACA # 10. P. aeruginosa. de. n. PLACA # 08. de. In. PLACA # 01. 2° Sector. yC. 1° Sector. om un. ica ció. n. CONTEO MEDIANTE EL MÉTODO DE LAS UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC). P. aeruginosa P. aeruginosa. 45. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. GRUPO EXPERIMENTAL - CONCENTRACIÓN 100%. P. aeruginosa. PLACA # 04. P. aeruginosa. PLACA # 05. P. aeruginosa. PLACA # 06. P. aeruginosa. PLACA # 07. P. aeruginosa. as. em. Si st. P. aeruginosa. de. PLACA # 08. P. aeruginosa. ió. n. PLACA # 09. át ica. PLACA # 03. m. P. aeruginosa. N° Total de Colonias. fo r. PLACA # 02. 4° Sector. In. P. aeruginosa. 3° Sector. de. PLACA # 01. 2° Sector. yC. 1° Sector. om un. ELEMENTOS MICROORGANISMO MUESTRALES. ica ció. n. CONTEO MEDIANTE EL MÉTODO DE LAS UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC). Di re cc. PLACA # 10. P. aeruginosa. 46. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEFINICIONES OPERACIONALES. El término se refiere a una sustancia cuyas propiedades son. ica ció. Efecto antibacteriano. n. Definición operacional. capaces de eliminar agentes bacterianos o la inhibición de su. om un. crecimiento o proliferación sin incurrir en el daño del. yC. objeto, ambiente u organismo que las porta.. In vitro (latín: dentro del vidrio) se refiere a una técnica para. át ica. In vitro. realizar un determinado experimento en un tubo de ensayo, o. fo r. m. generalmente en un ambiente controlado fuera de un organismo. Mezclas de componentes volátiles, productos del metabolismo. de. Aceite esencial. In. vivo.. as. secundario de las plantas. Los aceites esenciales están. em. contenidos en semillas, glándulas, pelos glandulares, sacos, o. Si st. venas de diversas piezas de la planta.. Di re cc. ió. n. de. Cepas. Cepa es, en microbiología, población de células de una sola especie descendientes de una única célula, usualmente propagada clonalmente, debido al interés en la conservación de sus cualidades definitorias. De una manera más básica puede definirse como un conjunto de especies bacterianas que comparten, al menos, una característica.. 47. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Caldo Mueller Hinton. Medio nutritivo adecuado para facilitar el crecimiento de numerosos microorganismos. En microbiología, los estándares de turbidez de McFarland se. n. Escala de Mc Farland. ica ció. usan como referencia en suspensiones bacteriológicas para saber que el número de bacterias por mililitro, o más bien. En microbiología,. la unidad. formadora. de. colonias. yC. Unidad formadora de. om un. en UFC según una escala que va de 0.5 a 10.. (abreviadamente, UFC) es una unidad de medida empleada en. át ica. colonia (ufc). la cuantificación de microorganismos, es decir, el número. m. de bacterias o células fúngicas (levaduras) viables en una. En estadística,. de. Prueba de análisis de. In. fo r. muestra líquida o sólida.. el análisis. de. la. varianza (ANOVA, ANalysis Of VAriance, según terminología. as. varianza. em. inglesa) es una colección de modelos estadísticos y sus. Si st. procedimientos. asociados,. en. el. cual. la varianza está. variables explicativas.. ió. n. de. particionada en ciertos componentes debidos a diferentes. Di re cc. Prueba de Duncan. El Test de Duncan es un test de comparaciones múltiples. Permite comparar las medias de los t niveles de un factor después de haber rechazado la Hipótesis nula de igualdad de medias mediante la técnica ANOVA. 48. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital – Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En microbiología, se denominan bacterias gram positivas, o. Gram (+). bacterias Gram-positivas, aquellas bacterias que se tiñen. se. negativas aquellas. denominan bacterias. que no se. tiñen. ica ció. En microbiología,. Gram (–). n. de azul oscuro o violeta por la tinción de Gram gram. de azul oscuro. o. om un. de violeta por la tinción de Gram, y lo hacen de un. yC. color rosado tenue. En ciencia, in vivo se refiere a experimentación hecha dentro o. át ica. In vivo. en el tejido vivo de un organismo vivo, por oposición a uno. m. parcial o muerto. Pruebas con animales y los ensayos. Di re cc. ió. n. de. Si st. em. as. de. In. fo r. clínicos son formas de investigación in vivo.. 49. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento No Comercial. Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia visite: http://creativecommons.org/licenses/by.nc.sa/2.5/pe/.

(50)

Figure

Actualización...

Referencias

Actualización...