EFECTO in vitro DEL EXTRACTO CRUDO LIOFILIZADO DE Allium sativum “ajo” AL 0 5, 1, 5, 10, 25% DE CONCENTRACIÓN SOBRE Staphylococcus aureus

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS. AS. BI. O. LO. G. IC. AS. ESCUELA ACADÉMICA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. CI. EFECTO in vitro DEL EXTRACTO CRUDO LIOFILIZADO DE Allium sativum. DE. CI EN. “ajo” AL 0.5, 1, 5, 10, 25% DE CONCENTRACIÓN SOBRE Staphylococcus aureus. TESIS. CA. PARA OPTAR EL TÍTULO DE. IO. TE. BIÓLOGO – MICROBIÓLOGO. BI. BL. AUTOR: JULCA LEÓN GINA ELIZABETH. ASESOR: Dr. PEDRO MERCADO MARTÍNEZ CO-ASESOR: Dr. GUILLERMO SEGUNDO RUIZ REYES. Trujillo – Perú 2018. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AS. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. BI. O. LO. G. Rector de la Universidad Nacional de Trujillo.. IC. Dr. ORLANDO MOISÉS GONZALES NIEVES. AS. Dr. RUBÉN CÉSAR VERA VELIZ. DE. CI EN. CI. Vice – rector Académico de la Universidad Nacional de Trujillo.. Dr. WEYDER PORTOCARRERO CÁRDENAS. BI. BL. IO. TE. CA. Vice – rector de Investigación de la Universidad Nacional de Trujillo.. Dr. STEBAN ILICH ZERPA Secretario General de la Universidad Nacional de Trujillo.. ii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS DE LA. G. IC. AS. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. LO. Dr. FREDDY MEJIA COICO. AS. BI. O. Decano de la Facultad de Ciencias Biológicas.. CI. DR. WILMER ZELADA ESTRAVER. DE. CI EN. Secretario de la Facultad de Ciencias Biológicas.. Dra. BERTHA SORIANO BERNILLA. Ms. C. IVÁN ANGULO CASTRO. BI. BL. IO. TE. CA. Director de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y Parasitología.. Rector de Departamento Académico Profesional de Microbiología y Parasitología.. iii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR: En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados y Títulos. AS. de la Universidad Nacional de Trujillo, presento a vuestra consideración y claro. IC. discernimiento la tesis titulada:. G. EFECTO in vitro DEL EXTRACTO CRUDO LIOFILIZADO DE Allium sativum. O. LO. “ajo” AL 0.5, 1, 5, 10, 25% DE CONCENTRACIÓN SOBRE Staphylococcus aureus.. BI. Esperando que vuestro criterio sea de comprensión por errores u omisiones cometidos en. Trujillo, marzo del 2018.. DE. CI EN. CI. AS. la elaboración del informe de tesis, nos sometemos a vuestro dictamen.. BI. BL. IO. TE. CA. Br. Gina Elizabeth Julca León. iv. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR. El que suscribe Dr. Pedro Mercado Martínez, asesor de la tesis titulada: EFECTO in vitro. AS. DEL EXTRACTO CRUDO LIOFILIZADO DE Allium sativum “ajo” AL 0.5, 1, 5,. G. IC. 10, 25% DE CONCENTRACIÓN SOBRE Staphylococcus aureus.. LO. CERTIFICA. Que la investigación ha sido desarrollada de conformidad con su correspondiente. O. proyecto y las orientaciones pertinentes.. BI. En cuanto al informe ha sido redactado bajo mi asesoramiento, acogiendo las. AS. observaciones y sugerencias alcanzadas, por lo que autorizo al bachiller: Gina Elizabeth. DE. CI EN. CI. Julca León continúen con los procedimientos según los fines.. CA. Dr. Pedro Mercado Martínez.. BI. BL. IO. TE. ASESOR. v. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G. IC. AS. MIEMBROS DEL JURADO. LO. Dra. Manuela Luján Velásquez. CI EN. CI. AS. BI. O. PRESIDENTE. Dr. Pedro Mercado Martínez. BI. BL. IO. TE. CA. DE. VOCAL. Ms.C. David Zavaleta Verde SECRETARIO. vi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que la presente tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo aprobada. BI. O. LO. G. IC. AS. por UNANIMIDAD.. Dra. Manuela Luján Velásquez. DE. CI EN. CI. AS. PRESIDENTE. Dr. Pedro Mercado Martínez. BI. BL. IO. TE. CA. VOCAL. Ms.C. David Verde Zavaleta SECRETARIO. vii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTOS. Concluye una etapa importante, llena de valiosas experiencias manifiesto mi agradecimiento a los Docentes de La Facultad de Ciencias Biológicas por brindarme. AS. sus enseñanzas, experiencias y orientaciones que contribuyeron a mi formación. G. IC. profesional.. LO. Agradezco a mi asesor Dr. Pedro Mercado Martínez, catedrático de la Escuela de Microbiología y Parasitología, por su colaboración brindada durante esta etapa y. CI. AS. BI. O. elaboración de la presente tesis.. Agradezco a mi co-asesor Dr. Guillermo Segundo Ruiz Reyes, catedrático de la. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. facultad de Farmacia y bioquímica, por su atención y apoyo.. viii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. AS. A mis padres Nancy León Cheffer y Felipe Julca Acevedo Por manifestarme toda la. IC. fuerza para seguir adelante, cariño, preocupación y a la responsabilidad que siempre. LO. G. han demostrado siendo esto fundamental en mi formación profesional. O. A mi hermano Luis Felipe Julca León Por ser el pilar para lograr este objetivo, por. CI. AS. depositada en mí.. BI. ser el motivo de superación profesional todos los días con tú ejemplo y por la confianza. A mi hermana Isabel Margot Julca León y Fernandito por ser mi motor de. CI EN. superación, mis confidentes, mis compañeros de vida, agradezco infinitamente por estar. DE. en esta gran faceta de mi vida.. A mi mamá Blanca Cheffer Rojas por ser mi motivo de inspiración, porque siempre. TE. CA. me alentaste a lograr este objetivo, porque creíste en mí.. BI. BL. IO. Gina Elizabeth Julca León. ix. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. El presente trabajo evaluó la sensibilidad de Staphylococcus aureus frente a la. AS. acción antibacterial del extracto crudo liofilizado de Allium sativum äjo¨ al 0.5, 1, 5, 10,. IC. 25% de concentración. Los bubos de “ajo” fueron recolectados de San Ignacio de la. G. Oyola-Distrito de Sinsicap – Otuzco-Perú estos fueron triturados por un extractor. LO. eléctrico para luego ser liofilizados, se realizó la identificación de metabolitos secundario. O. haciendo uso de reactivos de coloración y precipitación para la evaluación de la. BI. sensibilidad se utilizó el método Kirby Bauer, en Agar Mueller-Hinton, utilizando discos. AS. de papel filtro embebido por cada concentración del extracto, independientemente se. CI. realizó un control positivo utilizando discos de Cefalexina 30µg, estas fueron incubadas. CI EN. a 37°C durante 24 h. Los resultados obtenidos muestran que se observa diferencia significativa entre la acción de la Cefalexina 30µg. y las concentraciones de 10 y 25 %. DE. del extracto crudo liofilizado de Allium sativum, respecto a la identificación de metabolitos se identificó flavonoides, alcaloide, taninos, aminoácidos y compuestos. BI. BL. IO. TE. CA. sulfurados.. x. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE. ii. Autoridades de la Facultad de Ciencias Biológicas. iii. AS. Autoridades de la Universidad Nacional de Trujillo. iv. G. IC. Presentación. LO. Del asesor. vi. BI. O. Miembros del jurado. v. AS. Aprobación. CI. Agradecimiento. CI EN. Dedicatoria Resumen. DE. Índice Introducción. vii viii ix x xi 01 07. Resultados. 15 18 22. IO. Discusión. BL. TE. CA. Material y Método. BI. Conclusiones Recomendación. 23. Referencias Bibliográficas. 24. Anexos. 31 xi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN Las infecciones agresivas y con farmacorresistencia múltiple constituyen un problema. IC AS. de salud creciente en todo el mundo. Las bacterias están desarrollando farmacorresistencia a un ritmo alarmante, de modo que hay una gran demanda de nuevos medicamentos que puedan. G. combatir esta amenaza. El aumento de bacterias farmacorresistentes a los agentes. LO. antibacterianos es el principal problema al que se enfrenta la ciencia médica en el tratamiento. BI O. de las enfermedades infecciosas¨(Kümmerer,2004, pág.311); su efecto es mayor en los países en vías de desarrollo, en donde por cada habitante se gasta menos de S/23.00 en salud, cifra. AS. insignificante frente a los S/ 4 875.00 a S/13 000.00 que puede costar el tratamiento de una persona que presente alguna enfermedad ocasionada por un agente patógeno resistente (OMS,. EN CI. 2004).. Staphylococcus aureus es considerado por la Sociedad Americana de Enfermedades. CI. Infecciosas como uno de los 6 microorganismos de mayor importancia en la práctica médica. DE. diaria, esta bacteria es causa frecuente de infecciones en la comunidad y de un número importante de infecciones relacionadas con los cuidados médicos (Talbot, 2006; Gordon, 2008).. CA. Forma parte de la familia Microccocaceae, género Staphylococcus, el cual contiene más de 30. TE. especies diferentes y muchas de éstas son habitantes naturales de la piel y las membranas. IO. mucosas del hombre. Es un coco Gram-positivo, no móvil. No forma esporas, puede encontrarse. BL. solo, en pares, en cadenas cortas o en racimos. Es un anaerobio facultativo, pero crece mejor en. BI. condiciones aerobias (Gould, 2008). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Ogston introdujo el nombre de Staphylococcus, del griego staphyle que significa racimo. IC AS. de uvas, para describir a los cocos responsables de inflamación y supuración (Moore, 2001). El microorganismo produce catalasa, coagulasa y crece rápidamente en agar sangre. Sus colonias. G. miden de 1 a 3 mm, producen un típico pigmento amarillo debido a la presencia de carotenoides. LO. y muchas cepas producen hemólisis a las 24-36 horas (Moore, 2001). Staphylococcus aureus es. BI O. un microorganismo que posee características particulares de virulencia y resistencia a los antibióticos. En los humanos causa una amplia variedad de enfermedades infecciosas. El. AS. principal impacto de este microorganismo se debe a las cepas de S. aureus resistentes a la meticilina (MRSA) (Jaime, 2006, pág 287). En la actualidad las cepas de S. aureus tienen un. EN CI. amplio rango de resistencia a los antibióticos y se pueden encontrar cepas resistentes y multirresistentes.. CI. La adquisición de esta resistencia se debe principalmente al intercambio de manera. DE. horizontal de genes que son transportados por elementos genéticos móviles como plásmidos, transposones (Tn) y secuencias de inserción (IS) (Jaime, 2006, pág 287). Esta bacteria ha ido. CA. desarrollando resistencia a muchos de los antibióticos a un ritmo alarmante, de modo que hay. TE. gran demanda de nuevos medicamentos que puedan combatir, convirtiéndose a si los. IO. fitofármacos como una alternativa terapéutica. Se puede afirmar que el uso de plantas. BL. medicinales nació con el hombre desde los tiempos prehistóricos hasta los comienzos del siglo. BI. XIX se utilizaron por ensayo error, aquellos extractos que brindaban cura a enfermedades.. 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En las últimas décadas ha ido tomando cada día mayor importancia su estudio de. IC AS. técnicas analíticas que permitan la determinación e identificación de las sustancias o principios activos contenidos en especies vegetales (López, 2002). Muchos de los principios activos son sumamente complejos, otros han sido aislados y purificados e incluso sintetizados (William,. LO. G. 1981).Una de las plantas que ha suscitado especial interés es el género Allium sativum “ajo” que. BI O. es originario de Asia Central; se encuentra en la familia Liliaceae (Afsharypuor, 2010, pág 173) Esta planta posee un bulbo sólido, formado por bulbillos limitados por dos caras planas y una. AS. convexa, puntiagudos en ambos extremos (Magaña, 2010, pág 657) Crece en casi todo el. por la formación de bulbos aromáticos.. EN CI. mundo, sobre todo en climas templados y cálidos. Es una planta anual perenne, caracterizada. Su nombre científico es Allium sativum. El término Allium procede de la palabra. CI. celtaall, que significa ardiente o caliente y sativum significa cultivado. Esta planta posee hojas. DE. largas, estrechas y planas en su mitad inferior, sus flores son de color blanco-verdoso en forma de sombrilla ubicadas en el nacimiento de las hojas superiores, los bulbos crecen. CA. subterráneamente en la base del tallo (Cardona, 2010). El género Allium contiene más de 300. TE. especies de plantas; entre ellas se encuentra el Allium sativum, que es un bulbo perteneciente a. IO. la familia Liliaceae y subfamilia Allioideae. Se conoce desde mucho tiempo atrás, habiéndose. BL. utilizado por la mayoría de las culturas, desde los egipcios, romanos, griegos, hasta en la misma. BI. India u Oriente. Su origen se ubica en Asia central, donde se extendió ampliamente y se encuentra naturalizado en muchas partes del Mundo (Udaire, 2006). El ajo aumenta la actividad de las células defensivas del organismo como antibiótico natural (Fulder, 1997) 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Actualmente se está utilizando como calmante, para tratar afecciones bronquiales y de. IC AS. estómago, como antirreumática, para el tratamiento de arteriosclerosis y artrosis, como antihelmíntica, antihipertensivo, antiteratogénico, antitrombótico, antimicrobiano contra las. G. picaduras de avispas y mosquitos, para desinfectar heridas y frente al dolor (Vallejo, 2008). Tan. LO. amplio espectro terapéutico descrito se puede justificar bioquímicamente. Esta especie presenta. BI O. abundantes fructosanas (hasta un 75%), aceite esencial (0,2-0,3%): garlicina, aliina o sulfóxido de alilcisteína (1%), cuando el diente es macerado se libera la enzima fosfopiridoxal aliinas,. AS. esta hidroliza la aliina produciendo alicina siendo éste último componente la sustancia. (Vallejo, 2008; Florencia, 2011).. EN CI. antibacterial del ajo, que actúa inhibiendo las enzimas respiratorias afectando sus grupos SH. El äjo¨ contiene por lo menos 33 compuestos azufrados, varias enzimas, 17 aminoácidos. CI. y algunos minerales que contribuyen a su actividad antimicrobiana. Los principales compuestos. DE. azufrados son la aliína, alicina, ajoeno, trisulfuro de dialilo, salilcisteína, vinilditiínas, disulfuro de alilpropilo, S-alil-mercapto cisteína, entre otros. Entre las enzimas importantes en la. CA. actividad antimicrobiana se encuentran la alinasa, peroxidasa y mirosinasa. Los aminoácidos y. TE. sus glucósidos, en especial la arginina, también influyen de manera importante en la actividad. BL. 2012).. IO. antimicrobiana, al igual que el selenio, germanio, telurio y trazas de otros minerales (Bhandari,. BI. La alicina, de fórmula molecular C6H10OS2 y peso molecular de 162.27 g/mol, es un. líquido amarillo de densidad 1.112 g/ml su pH está cerca de 6.5, tiene solubilidad en agua a 10°C de alrededor de 2.5% m/m, también es soluble en alcohol, éter y benceno. Presenta 4. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. inestabilidad en álcali caliente, pero es estable a ácidos. En general tiene estabilidad limitada en. IC AS. solución (Cardona, 2010). La Alicia puede ser transformada en otros compuestos, debido a su inestabilidad, dentro de éstos se encuentra el Ajoeno [(E, Z)-4.5,9-tritiadodeca-l,6, l 1 -trieno-. G. 9- óxido], el cual posee una baja actividad antibacteriana y una excelente actividad antifúngica. LO. al afectar la integridad de su pared celular. Naganawa, sugirió que la actividad antimicrobiana. BI O. del ajoeno estriba en la presencia de enlaces disulfito junto con los grupos sulfimilicos presentes en su estructura (Florencia, 2011).. AS. Para el caso del ajo deshidratado, a pesar de que la aliína y la enzima aliinasa sufren el. EN CI. proceso de secado aún se conserva el potencial de formación de alicina cuando entran en contacto con el agua (Bhagyalakshmi, 2005). Enseguida, la alicina experimenta degradación en forma rápida, permitiendo la formación de nuevos compuestos sulfurados tales como sulfuro de. CI. dialílico, disulfuro de dialilo y trisulfuro de dialilo La reacción anterior ocurre extremadamente. DE. rápido, en ella más del 80% de aliína se metaboliza en los primeros 2 minutos (Kyung, 2001, pág 183). Asimismo, en presencia del calor, la alicina puede transformarse en ajoeno y. CA. viniloditiínas. La alicina inhibe a más de 300 bacterias, tanto Gram-positivas como Gram-. TE. negativas, tales como Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Bacillus sphaericus, Bacillus. BI. BL. IO. polymyxya, Staphylococcus aureus, Escherichia coli (Kumar, 2010, pág 229).. 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Se considera que la alicina tiene actividad antimicrobiana porque modifica la biosíntesis. IC AS. de los lípidos y síntesis del RNA de los microorganismos y disminuye el perfil de lípidos de los mismos. Este compuesto activo reacciona rápidamente con grupos tiol libres, por ello se cree. G. que el principal mecanismo antimicrobiano se produce a través de la interacción de alicina con. LO. enzimas que contienen grupos tiol, como proteasas y alcohol dehidrogenasas (Rahman, 2007).. BI O. Arilda y Col mencionan que dichos componentes por a su acción lipofílica tienen la capacidad de atravesar la membrana celular, romper polisacáridos, ácidos grasos y lípidos, provocando la. AS. permeabilización de la bacteria, la cual produce pérdida de iones, colapso de la bomba de protones y disminución del ATP, conduciendo a la muerte celular; también se ha encontrado. EN CI. que a nivel citoplasmático pueden actuar sobre lípidos y proteínas coagulando dichas moléculas (Gemmell, 2006, pág 589). CI. En los últimos años los logros de la industria farmacéutica han sido notorios en la. DE. producción de antimicrobianos, aunque los costos son muy elevados (Gonzales, 1998). Es por ello que se escoge al género Allium sativum “ajo” porque se tendría un producto vegetal con. CA. propiedades medicinales, cultivable en todo el Perú y de muy bajo costo. Convirtiéndose en un. TE. antibiótico alternativo. Como base a lo anterior en el presente trabajo de investigación se planteó. IO. evaluar el efecto in vitro del extracto crudo liofilizado de Allium sativum “ajo” sobre. BI. BL. Staphylococcus aureus a concentración de 0.5, 1,5, 10, 25%.. 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.. MATERIAL. 1.1. MATERIAL BIOLÓGICO. IC AS. MATERIAL Y MÉTODO. G. -Cepa de Staphylococcus aureus (ATTC 12600). LO. -Bulbos de Allium sativum “ajo” procedentes del caserío San Ignacio de la Oyola –. PROCEDIMIENTO Identificación taxonómica del “ajo”. EN CI. 1.2.1. AS. 1.2. BI O. Distrito de Sinsicap - Provincia de Otuzco – Perú, latitud 2284 m.s.n.m.. La identificación taxonómica se realizó en el Herbarium Truxillense (HUT) de la. DE. CI. Universidad Nacional de Trujillo. (ANEXO 02). 1.2.2 Recolección y muestreo del “ajo”. CA. Se recolectó 10 Kg de bulbos de Allium sativum “ajo” al azar, se esparció sobre una. TE. superficie plana y se escogió muestras de aproximadamente 1Kg de toda la superficie. BI. BL. IO. esparcida.. 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 5.2.3 Obtención del extracto crudo liofilizado de Allium sativum.. IC AS. A los bulbos de Allium sativum “ajo” se le retiró la capa superficial, posteriormente se lavó con agua destilada e Hipoclorito de Sodio a 200 ppm durante 5 minutos.. G. Seguidamente se realizó el enjuague de los bulbos en suficiente agua destilada estéril. LO. para retirar el Hipoclorito residual. Posteriormente se procedió a realizar el triturado de. BI O. los bulbos con extractor eléctrico. Obtenido el extracto, éste fue filtrado en dos etapas: una a través de gasa plegada varias veces, para retirar los residuos más groseros y la. AS. siguiente empleando papel filtro (Papel Whatman®) realizando la filtración tres veces.. EN CI. Finalmente, el extracto filtrado, fue sometido a procesos de liofilización.. 5.2.4 Identificación cualitativa de metabolitos secundarios. CI. Se realizó la identificación de los metabolitos secundarios haciendo uso de reactivos de. DE. coloración y precipitación de acuerdo con el método de MIRANDA MARTINEZ M. y. Identificación de Esteroides – Ensayo de Lieberman – Burchart. TE. 5.2.4.1. CA. CUELLAR CUELLAR A. 2000. IO. 1. En un tubo de ensayo se colocó 1 mL del extracto.. BI. BL. 2. Se añadió 1 mL de Anhidrido acético. 3. Luego se añadió dos gotas de Ácido sulfúrico concentrado. La reacción es positiva si hay presencia de color verde. 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1. En un tubo de ensayo se colocó 2 mL del extracto.. G. 2. Se llevó a evaporación hasta obtener un extracto más blando. IC AS. 5.2.4.2 Identificación de Alcaloides Totales – Ensayo de Dragendorff. LO. 3. Se redisolvió con 1 mL de HCl 1%. BI O. 4. Se añadió el reactivo de Dragendorff. La reacción es positiva si hay presencia de. AS. turbidez o precipitado.. Identificación de Fenoles – Ensayo de Cloruro Férrico. EN CI. 5.2.4.3. 1. En un tubo de ensayo se colocó 2 mL del extracto. CI. 2. Se añadió dos gotas de solución de Tricloruro férrico al 5%. La reacción es. DE. positiva si hay presencia de color rojo, verde o azul. Identificación de Aminoácidos – Ensayo de Ninhidrina. CA. 5.2.4.4. TE. 1. En un tubo de ensayo se colocó 1 mL del extracto.. IO. 2. Se añadió 1 mL de solución de Ninhidrina al 2%.. BL. 3. Se llevó a Baño María por 10 minutos. La reacción es positiva si hay presencia. BI. de un color ligeramente azul violáceo.. 9. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 5.2.4.5 Identificación de Alcaloides Totales – Ensayo de Dragendorff. IC AS. 1. En un tubo de ensayo se colocó 2 mL del extracto.. G. 2. Se añadió una gota de HCl.. LO. 3. Se calentó y se dejó enfriar.. BI O. 4. Se añadió tres gotas de reactivo de Dragendorff. La reacción es positiva si hay. AS. presencia de turbidez o precipitado.. Identificación de Taninos – Ensayo de Cloruro Férrico. EN CI. 5.2.4.6. 1. En un tubo de ensayo se colocó 2 mL del extracto.. CI. 2. Se añadió dos gotas de solución de Tricloruro férrico al 5%. La reacción es. DE. positiva si hay presencia de color rojo, verde o azul. Identificación de Flavonoides – Ensayo de Shinoda. CA. 5.2.4.7. TE. 1. En un tubo de ensayo se colocó 2 mL del extracto. IO. 2. Se añadió 1 mL de HCl concentrado. BI. BL. 3. Se añadió Magnesio metálico y se esperó por 5 minutos 4. Luego se agregó 1 mL de Alcohol amílico, se mezcló y se dejó reposar. La reacción es positiva si hay presencia de color amarillo, naranja o rojo. 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 5.2.4.8. Determinación de compuestos azufrados- Prueba de Lassaigne. IC AS. (fusión de compuestos orgánicos con metales) La identificación de estos elementos en la muestra se basa en su conversión en. G. compuestos iónicos solubles en agua y en la aplicación de pruebas específicas para. Se colocó dentro de un tubo de ensayo (de 8 x 50 mm), un trozo de sodio. BI O. 1.. LO. llevar a cabo su detección. (ANEXO 04).. AS. metálico, de aproximadamente 3 mm de tamaño. El tubo se calentó hasta fundir el metal.. 3.. Se retiró el tubo del calor y se adicionó 5 mg de la muestra mezclado en 5 mg de. EN CI. 2.. Se calentó nuevamente el tubo y se repitió la adición de la muestra con sacarosa. DE. 4.. CI. sacarosa.. minutos.. Al término se dejó enfriar el tubo y se adicionó 1 mL de etanol para eliminar el. TE. 5.. CA. por segunda vez. Entonces, se calentó el fondo del tubo al rojo vivo, por unos 5. IO. exceso de sodio que no ha reaccionado. Se calentó nuevamente el tubo y rápidamente se traspasó a un vaso de. BL. 6.. BI. precipitados de 100 mL conteniendo 20 mL de agua destilada.. 11. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 7.. Se rompió el tubo con una varilla de vidrio, se calentó la solución hasta ebullición. 8.. IC AS. y se filtró. Se obtuvo un filtrado incoloro que se usó para la siguiente prueba. Presencia de Azufre en la muestra original – Método de Identificación por. 9.. LO. G. Coloración. Se colocó en un tubo de ensayos 5 mL de la solución incolora obtenida en la. Se agregó 2 mL de Ácido acético diluido (pH 4-5) y luego 2 mL de Acetato de. AS. 10.. BI O. reacción anterior.. EN CI. plomo al 5% y observarse la formación de un anillo color negro lo que confirmaría la presencia se azufre. CI. 5.2.5 Preparación y estandarización del inóculo. DE. En 5ml de SSFe en un tubo de ensayo se procederá a preparar el inóculo para el. CA. desarrollo de la parte experimental.. TE. A partir del cultivo joven de Staphylococcus aureus (ATTC 12600) con asa de siembra se retirará suficientes colonias que serán colocadas en el tubo de ensayo, hasta que la. BI. BL. IO. turbidez sea igual a la escala 1 de Mc Farland (3x108 UFC/ml).. 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 5.2.6 Prueba de sensibilidad antimicrobiana. IC AS. Para esta evaluación se empleó la técnica de Kirby Bauer.. Se preparó placas Petri con 20 ml de Agar Muller-Hinton se dejó solidificar y se agregó. LO. G. 0,1 ml del inoculo, se distribuyó por toda la placa con asa de Drigalsky. Se marcó 6 segmentos iguales debajo de las placas Petri y fueron colocados 5 discos de papel filtro. BI O. (uno por cada segmento) con un diámetro de 5mm, previamente sumergidos en el extracto a la concentración correspondiente, en el sexto segmento se colocó el disco de. AS. Cefalexina 30µg utilizando pinza estéril. Una vez colocados los discos, las placas fueron. EN CI. etiquetadas, selladas y se incubaron a 37°C por 24horas hasta la medición de los halos de inhibición en mm los cuales fueron comparados con los halos obtenidos con el disco. CI. de Cefalexina 30 µg y reportar el promedio de las mediciones hechas. Se realizó 15. BI. BL. IO. TE. CA. DE. repeticiones.. 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 5.2.7 Análisis estadístico. IC AS. Los datos obtenidos fueron analizados mediante el método de ANOVA, la comparación múltiple de medias se realizó mediante la prueba de Tukey HSD, usando el software. G. estadístico R. Además se reportan la media y desviación estándar, con un nivel de. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. significancia de 5%. (Boqué, Marote ,2011). 14. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS. IC AS. En el Tabla N° 1 se observa que los halos formados por las diferentes concentraciones del extracto de Allium sativum difieren significativamente del halo formado por Cefalexina 30µg,. LO. G. existiendo p˂5% de acuerdo a las pruebas estadísticas ANOVA.. BI O. En la Tabla Nº1 las concentraciones 0.5, 1, 5, % no se observa inhibición del crecimiento de. EN CI. AS. Staphylococcus aureus en cambio sí hay inhibición en las concentraciones de 10 y 25%.. Estadísticamente se observa diferencia significativa al comparar la acción de la Cefalexina 30µg. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. con las concentraciones de 10 y 25%, existiendo p>0.05.. 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla N°1.. Medida promedio de los halos de inhibición en mm de las. IC AS. concentraciones 0.5, 1, 5, 10, 25 % del extracto crudo liofilizado de Allium sativum “ajo”. G. y control sobre la cepa Staphylococcus aureus (ATTC 12600).. Diámetro promedio del halo formado por. LO. PROBLEMA. BI O. Staphylococcus aureus (ATTC 12600). 5mm. Concentración 0.5% de Allium. AS. sativum.. sativum.. sativum.. 5mm. 5mm. CI. Concentración 5% de Allium. EN CI. Concentración 1 % de Allium. 6.73mm. DE. Concentración 10% de Allium. CA. sativum.. 15.17mm. Concentración 25% de Allium. TE. sativum. 25.53mm. BL. IO. Cefalexina 30 µg (CONTROL). BI. Fuente: Base de datos del estudiante Existiendo p˂5%.. 16. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla N°2.. Reporte de metabolitos secundarios del extracto crudo liofilizado de. RESULTADO. FLAVONOIDES. G. METABOLITO. LO. IC AS. Allium sativum äjo¨. BI O. +. COMPUESTOS AZUFRADOS. AS. +. ALCALOIDES. DE. TANINOS. CI. ESTEROIDES. EN CI. FENOLES. AMINOÁCIDOS. + +. CA. +. TE. Fuente: Base de datos del estudiante (-) Ausencia. BI. BL. IO. Leyenda: (+) Presencia. 17. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. DISCUSIÓN. Constantemente se está realizando investigaciones dirigidas a buscar plantas con compuestos antibacterial. Allium sativun äjo¨ es una planta que presenta mayor estudio prueba. LO. G. de ello es que es ampliamente utilizado desde tiempos antiguos por su capacidad antibacterial y antifúngica (DRAGO, LÓPEZ Y SAÍNZ, 2006). El ajo contiene por lo menos 33 compuestos. BI O. azufrados, varias enzimas, 17 aminoácidos y algunos minerales que contribuyen a su actividad antimicrobiana. Los principales compuestos azufrados son la aliína, alicina, ajoeno, trisulfuro. AS. de dialilo, salilcisteína, vinilditiínas, disulfuro de alilpropilo, S-alil-mercapto cisteína, entre. EN CI. otros. Entre las enzimas importantes en la actividad antimicrobiana se encuentran la alinasa,. CI. peroxidasa y mirosinas (BHANDAR, 2012).. DE. Estudios como el de PAVA 2016 obtuvo como resultados de la marcha fitoquimica de. CA. Allium sativum y Zingiber officinale evidenciaron la presencia de metabolitos secundarios como flavonoides, quinonas, cumarinas, terpenos y esteroides. Concordando así con los resultados. TE. obtenidos en la presente investigación como se puede apreciar en la tabla N° 1 el extracto crudo. IO. liofilizado de Allium sativum presenta Flavonoides, compuesto sulfurados, taninos y. BI. BL. aminoácidos concordando así con la referencia.. 18. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Compuestos como el timol, carvacrol, linalool, aldehído cinámico, alicina y eugenol. IC AS. tienen acción lipofílica pasan las membranas celulares, romper polisacáridos, ácidos grasos y lípidos, permeabilizando la membrana celular; esta permeabilización, conduce a la pérdida de. G. iones, al colapso de la bomba de protones y a la disminución del ATP lo cual inevitablemente. LO. conduce a la muerte celular; también se ha encontrado que a nivel citoplasmático puede actuar. BI O. sobre lípidos y proteínas coagulando dichas moléculas ( ROJAS, 2009). El diente de “ajo” cuando se encuentra intacto posee un compuesto llamado aliina (NAGANAWA, 1996). Cuando. AS. el diente de ajo es cortado y entra en contacto con el oxígeno se libera la enzima fosfopiridoxal alinasa, enzima que hidroliza a la aliina produciendo alicina, siendo este componente el que. CI. EN CI. actúa inhibiendo las enzimas respiratorias afectando sus grupos SH (YOSHIDA, 1999).. En la investigación encontramos que el extracto crudo liofilizado de Allium sativun a. DE. las concentraciones de 10 y 25% si ejerce poder antibacterial concordando con la biografía. CA. debido a su composición revelada. En la evaluación de la acción antibacterial del äjo¨ se encontraron que existe diferencia significativa, existiendo p˂5%, en las medias del diámetro de. TE. los halos de inhibición de las concentraciones de 25 % seguido del 10 % del extracto crudo. IO. liofilizado de Allium sativun, lo cual indica que a mayor concentración del extracto mayor será. BL. el efecto antibacterial concordando así con la investigación de SALAZAR 2014 que evaluó los. BI. extractos acuoso, etanólico y metanólico Allium sativun, obteniendo como resultado mayor acción antibacterial las concentraciones de 100, 75 y 50% sobre Staphylococcus aureus, MERCADO Y ARÉVALO 2013 evaluaron la sensibilidad de los cultivos de Staphylococcus 19. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. aureus, Staphylococcus epidermidis y Pseudomona aeruginosa frente a la acción antibacteriana. IC AS. del extracto de Allium sativum “ajo” y obtuvieron como resultado mayor acción antibacterial la concentración 100% del extracto de Allium sativum, sobre Staphylococcus aureus,. G. Staphylococcus epidermidis y Pseudomona aeruginosa. PAVA 2016 evaluó actividad. LO. antimicrobiana de extractos de Allium sativum y Zingiber officinale sobre microorganismos de. BI O. importancia en patologías infecciosas de cavidad oral y obtuvo como resultado que el extracto acuoso de Allium sativum a una concentración de 280 mg/ ejerce inhibición sobre. EN CI. AS. Porphyromona gingivalis y sobre Staphylococcus aureus una concentración de 150 mg/ml.. GARCÍA 2007, evaluó la inhibición del extracto de Allium sativum, Allium fistulosum y. CI. Allium cepa sobre cinco cepas bacterianas entre ellas Staphylococcus aureus, utilizando el extracto acuoso, presentando Allium sativum el mayor potencial inhibitorio contra. DE. Staphylococcus aureus, que fue el más susceptible a la acción del ajo generándose halos de. CA. alrededor de 12mm de diámetro, mientras que en E.coli y B. cereus el efecto antibacterial fue bajo. En la presente investigación se utilizó el extracto crudo liofilizado de Allium sativum a. TE. las concentraciones de 0.5, 1, 5, 10, 25 % y como control positivo Cefalexina 30 µg utilizando. IO. la técnica de Kirby Bauer. Obteniendo como resultado que a las concentraciones de 10 % dio. BL. un promedio de halo de inhibición de 6.73 mm, 25 % 15.16mm siendo estos resultados. BI. diferentes a los obtenidos por GARCÍA 2007 que obtuvo diámetro de 12mm a la concentración del 100% mientras que RIBOTTY 2018 realizó el estudio del efecto in-vitro del extracto acuoso de Allium sativum (ajo) sobre cepas de Stahylococcus aureus resistente a la meticilina 20. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. obteniendo como resultado, el promedio del diámetro del halo de inhibición del extracto acuosos. IC AS. de Allium sativum en cepas de S. aureus resistente a meticilina (SARM) fue de 9,9 mm al 25%, 15,2 mm al 50%, 19,5 mm al 100% por el método de pozos resultados muy similares a los. G. obtenidos en la presente investigación. En la investigación se determinó según los resultado que. LO. existe diferencia significativa entre las medias de las concentraciones ensayadas del extracto crudo liofilizado de A. sativum, con respecto a la Cefalexina 30µg (control) sobre. BI O. Staphylococcus aureus, existiendo p˂5%, concordando con los resultados obtenidos por. AS. MERCADO Y ARÉVALO 2013, que determinaron que existe diferencia significativa entre los halos formados por los discos controles (Cefalexina y Vancomicina respectivamente) y las. EN CI. concentraciones del 25 %, 50 % y 100 % de extracto de A. sativum, sobre S. aureus y S.. CI. epidermidis,. DE. Por lo tanto, se presume que la cepa de Staphylococcus aureus (ATTC 12600) es más sensible frente al compuesto sulfurados, flavonoides, Alcaloides, Taninos, Aminoácidos. CA. presentes en la muestra según lo reportado por el servicio de análisis y asesoría DELTAS s.r.l.. BI. BL. IO. TE. pero a mayor concentración.. 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. . IC AS. CONCLUSIONES. Se identificaron como metabolitos secundarios presentes en el extracto crudo. G. liofilizado de Allium sativum äjo¨ a flavonoides, alcaloides, taninos,. Se observa diferencia significativa entre la acción de la Cefalexina. BI O. . LO. aminoácidos y compuestos sulfurados.. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. 30µg(control), con las concentraciones de 10 y 25%.. 22. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. RECOMENDACIONES. Estudiar el efecto antibacterial del extracto crudo liofilizado de Allium sativum äjo a. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. concentraciones mayores.. 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Naganawa, R., Iwata, N., Ishikawa, K., Fukuda, H., Fujino, T., Suzuki. A.( 1996). IC AS. Inhibition of microbial growth by ajoene, a sulfur-containing com pound derived from garlic Appl Envinron Microbiol; 62:90-110.. G. Navarre A. (2016) Reunión internacional e investigación en productos naturales.. LO. Latinoamericana de química. Ed 12: 283.. and. their. diallyl. constituents. BI O. O’Gara E. A., Hill D. J. y Maslin D. J. (2000). Activities of garlic oil, garlic powder, against.. Helicobacter. pylori.. Applied. EN CI. AS. Environmental Microbiology. 66:2269–2273.. OMS. (2004)Informe sobre las enfermedades infecciosas. Organización Mundial (16):25.. CI. Rahman, M. S. (2007). Allicin and other functional active components in garlic: Health. DE. benefits and bioavailability. International Journal of Food Properties. 10:245– 268.. CA. RIBOTTY S.V. (2018). Efecto in-vitro del extracto acuoso de Allium sativum (ajo) sobre. TE. cepas de Stahylococcus aureus resistente a la meticilina. Disponible en. IO. http://www.repositorioacademico.usmp.edu.pe/bitstream/usmp/3212/3/ribotty_. BI. BL. sv.pdf.. 29. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Rojas CP, Villca V R. (2009) Determinación de la actividad antibacteriana In vitro del. IC AS. ajo (Allium sativum) contra Streptococcus pyogenes mediante el método por dilución.SCIELO,Disponible:http://www.revistasbolivianas.org.bo/pdf/ucs/n4/. G. n4_a03.pdf. BI O. World Health Organization. 2002. Ed. 80: 126.. LO. Smith, R. Coast, J. (2002) Antimicrobial resistance: A global response. Bulletin of the. Talbot GH, Bradley J, Edwards JE, Gilbert D, Scheld M, Bartlett JG.(2006) Bad bugs. AS. needs drugs: an update on the development pipeline from the antimicrobial. EN CI. availability task force. Clin Inf Dis. Ed 42: 657.. Vallejo J, Peral D, Carrasco M (2008). Las especies del género Allium con interés. CI. medicinal en Extremadura. Vol.2.. DE. William A, Thompson D.( 1981) Guía práctica ilustrada de las plantas medicinales.. BI. BL. IO. TE. CA. Barcelona: Blume;. 30. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) BI O. LO. G. IC AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. ANEXOS. 31. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 01. Clasificación sistemática de la especie vegetal. IC AS. Especie botánica: Allium sativum. G. Nombre vulgar: äjo¨. LO. Procedencia: San Ignacio de la Oyola – Distrito de Sinsicap - Provincia. BI O. de Otuzco – Perú,. Clasificación taxonómica de la especie botánica. EN CI. ANEXO 02. AS. Altura: 2284 m.s.n. CI. Clase: Equisetopsida. DE. Subclase: Magnoliidae Superorden: Lilianae. TE. CA. Orden: Asparagales. Género: Allium Especie: A. sativum L. BI. BL. IO. Familia: Amaryllidaceae. 32. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 13.5. 26. 5. 5. 7. 20. 25. REP 3. 5. 5. 5. 8. 14. 27. REP 4. 5. 5. 5. 6. 16. 25. REP 5. 5. 5. 5. 6. 15. 24. 5. 5. 5. 5. 14. 26. 5. 5. 5. 7. 15. 24. 5. 5. 5. 10. 16. 27. 5. 5. 5. 9. 17. 26. IO. BL. REP 7. BI. REP 8 REP 9. EN CI. 5. 5. CI. REP 2. REP 6. 7. DE. 5. CA. 5. Diámetr o del halo de inhibició n (mm) de la Cefalexi na 30 µg. TE. REP 1. AS. BI O. N. G. TICIÓ. Diámetro Diámetro Diámetro Diámetro Diámetro del halo de del halo de del halo de del halo de del halo inhibición inhibición inhibición inhibición de (mm) de la (mm) de la (mm) de la (mm) de la inhibición concentrac concentrac concentrac concentrac (mm) de ión 0.5% ión 1 % de ión 5% de ión 10% la de Allium Allium Allium de Allium concentra sativum sativum sativum sativum ción 25% de Allium sativum. LO. REPE. IC AS. ANEXO 03. Medidas de los halo de inhibición en mm de las concentraciones 0.5, 1, 5, 10, 25 % del Extracto crudo liofilizado de Allium sativum “ajo” y Cefalexina 30µg (control) sobre la cepa de Staphylococcus aureus (ATTC 12600). 33. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 5. 5. 5. 6. 14. 27. REP 11. 5. 5. 5. 7. 15. 26. REP 12. 5. 5. 5. 5. 14. 25. REP 13. 5. 5. 5. 6. 15. 24. REP 14. 5. 5. 5. 5. REP 15. 5. 5. 5. Prome. 5. 5. 5. G LO. BI O AS. 7. 6.73. 15. 26. 14. 25. 15.17. 25.53. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. dio. IC AS. REP 10. 34. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 04. Muestra el tamaño promedio de los halos de inhibición formados por el. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. IC AS. extracto de äjo¨ a las concentraciones de 0.5, 5, 10, 25% y la Cefalexina 30µg.. DE. Reacción de la Identificación de “azufre”. CA. ANEXO 05. 1) AcOH (pH 4-5). Na2S + NaX + NaCN. 2) Pb(OAc)4. Ppdo Negro: PbS. BI. BL. IO. TE. Sol. Incolora contiene:. 35. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Bulbos pelados de Allium sativum äjo¨,. ANEXO 07. Diluciones del 0.5, 1, 5, 10, 25 % del extracto crudo liofilizado de Allium. CI. CA. DE. sativum “ajo”. EN CI. AS. BI O. LO. G. IC AS. ANEXO 06. BI. BL. IO. TE. 25%. 36. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(48) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Halos de inhibición formado por la concentración de 10, 25 % del extracto crudo liofilizado de Allium sativum äjo¨ y control. LO. G. Control. IC AS. ANEXO 08. Halos de inhibición formado por la concentración de 10, 25 % del extracto. DE. ANEXO 09. CI. EN CI. 10%. AS. BI O. 25%. IO. TE. CA. crudo liofilizado de Allium sativum äjo¨ y control. BI. BL. Control. 10% 25%. 37. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(49) Halos de inhibición formado por la concentración de 10, 25 % del extracto. AS. ANEXO 10. BI O. LO. G. IC AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. EN CI. crudo liofilizado de Allium sativum äjo¨ y control. DE. CI. 25%. TE. CA. 10%. BI. BL. IO. Control. 38. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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