Efecto de la radiación de microondas sobre la supervivencia de Salmonella enteritidis inoculada en carne de res

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. RM. ÁT. Efecto de la radiación de microondas sobre la supervivencia de Salmonella enteritidis. DE. IN FO. inoculada en carne de res.. TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO DE BIÓLOGO-MICROBIÓLOGO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. Br. GUZMÁN MAUTINO CRISTEL YANET. TRUJILLO – PERÚ 2012. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO QUE OTORGAN EL TÍTULO PROFESIONAL DE BIÓLOGO – MICROBIÓLOGO. AC IÓ. N. Dr. Orlando Velásquez Benites. UN IC. RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. CO. M. Dra. Vilma Julia Méndez Gil. IC. A. Y. VICERECTORA ACADÉMICA. ÁT. Dr. Pedro Lavalle Dios. IN FO. RM. SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. DE. Dr. Hermes Escalante Añorga. SI ST. EM. AS. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Dr. César Augusto Jara Campos. DI. RE. CC. IO. N. DE. SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Ms. C. Pedro Alvarado Salinas. DIRECTOR DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. N. Señores miembros del jurado:. AC IÓ. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados y. UN IC. Títulos de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, pongo. CO. M. a vuestra consideración y elevado criterio el presente trabajo de tesis titulado:. A. Y. “Efecto de la radiación de microondas sobre la supervivencia de Salmonella. ÁT. IC. enteritidis inoculada en carne de res”, con el cual pretendo obtener el Título. IN FO. RM. Profesional de Biólogo Microbiólogo.. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. Trujillo, Julio del 2012. DI. RE. CC. IO. Br. Guzmán Mautino Cristel Yanet. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MIEMBROS DEL JURADO. Los suscritos, miembros del jurado, declaran que la presente tesis ha sido ejecutada en. N. concordancia con las normas de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. Parasitología de la Universidad Nacional de Trujillo.. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. PRESIDENTE. IC. A. Ms. C. Pedro Alvarado Salinas. SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. Ms. C. Aníbal Quintana Díaz. Ms.C. María Nelly Vásquez Valles VOCAL. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben, miembros del Jurado Examinador, declaran que el presente. N. Informe de Tesis titulado: “Efecto de la radiación de microondas sobre la supervivencia. AC IÓ. de Salmonella enteritidis”, ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales,. IC. A. Y. CO. M. UN IC. siendo APROBADO por UNANIMIDAD.. ÁT. Ms. C. Pedro Alvarado Salinas. Ms. C. Aníbal Quintana Díaz SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. PRESIDENTE. Ms.C. María Nelly Vásquez Valles VOCAL. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR. El que suscribe, profesor asesor de la tesis titulada: “Efecto de la radiación de. AC IÓ. N. microondas sobre la supervivencia de Salmonella enteritidis inoculada en carne de res”. CERTIFICA:. UN IC. Que ésta ha sido desarrollada, de acuerdo al reglamento establecido por la. M. Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, estando en. CO. conformidad con su correspondiente proyecto, y que el informe ha sido redactado. IC. A. Y. acogiendo las observaciones y sugerencias alcanzadas.. ÁT. Por lo tanto, autorizo a Cristel Yanet Guzmán Mautino, continuar con el trámite. IN FO. RM. del reglamento correspondiente.. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. Trujillo, Julio del 2012. CC. Ms. C. María Nelly Vásquez Valles. DI. RE. ASESORA. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. A Dios por acompañarme en todo momento de mi vida, por brindarme la fuerza. N. necesaria en los momentos de tropiezo y por la fuerza para seguir levantando el rostro. AC IÓ. ante el mundo.. UN IC. A los mejores padres del mundo, Américo y Cristina, a quienes quiero con toda mi alma. M. y son mi mayor bendición. Mil gracias por su amor y comprensión, por todo su esfuerzo. CO. y dedicación, por su paciencia y sabios consejos, pero sobretodo por apoyarme y creer. IC. A. Y. en mí. Que Dios los bendiga hoy y siempre. Los AMO.. ÁT. A mis hermanos, Yaqueline, Guiselli y Ricky, por todo el cariño y apoyo que me han. IN FO. RM. brindado siempre. Gracias por estar compartiendo conmigo este triunfo. A alguien muy especial, por su paciencia, amor y comprensión, por sus consejos y apoyo. DE. incondicional. Mil gracias por creer en mi sueño y ayudarme a realizarlo.. EM. AS. A Edith, Karen y Melissa, grandes amigas y compañeras, gracias por su amistad. SI ST. sincera, por todos los momentos compartidos, sus palabras de ánimo y su apoyo. DE. constante.. DI. RE. CC. IO. N. A todas las personas, familia y amigos, por su confianza y apoyo.. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTO. A mi asesora de tesis Ms. C. María Nelly. AC IÓ. N. Vásquez Valles, por su amistad sincera, sabios consejos, apoyo incondicional y su valiosa. asesoría. profesional. en. la. UN IC. realización del presente trabajo de tesis. Para usted mi mayor admiración por su. M. gran fortaleza y gran corazón. Que Dios la. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. bendiga.. A mi jurado de tesis Pedro Alvarado Salinas y Aníbal Quintana Díaz, muchas. DE. gracias por brindarme todo su apoyo y profesional. durante. la. elaboración de mi tesis.. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. experiencia. DI. RE. A. Corporación. Ensayos Industriales. de. Laboratorios. de. Clínicos,. Biológicos. e. S.A.C.”,. por. “COLECBI. brindarme los ambientes y equipos durante la ejecución de mi. proyecto de tesis.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONTENIDO. ii. PRESENTACIÓN. iii. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. MIEMBROS DEL JURADO. UN IC. APROBACIÓN. v vi. CO. M. DEL ASESOR. iv. Y. DEDICATORIA. IC. A. AGRADECIMIENTO. RM. ÁT. CONTENIDO. IN FO. RESUMEN INTRODUCCIÓN. ix xi 1 7. EM. 7. 1.2. Material Biológico. 7. DE. SI ST. 1.1. Muestra. viii. 7. AS. 1. Material. DE. MATERIAL Y MÉTODOS. vii. 7. N. 2. Método. 7. 2.2. Reactivación y Activación del inóculo de Salmonella enteritidis. 7. 2.3. Pasteurización de la carne de res. 8. 2.4. Inoculación de Salmonella enteritidis en carne de res. 8. 2.5. Irradiación de microondas a la carne de res. 8. 2.6. Evaluación de la supervivencia de Salmonella enteritidis en carne de res. 9. DI. RE. CC. IO. 2.1. Obtención y transporte de las muestras. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.7. Análisis de los resultados. 9 10. DISCUSIÓN. 13. CONCLUSIONES. 17. AC IÓ. N. RESULTADOS. UN IC. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ANEXOS. 22. CO. M. Anexo 01. Caldo infusión cerebro corazón (BHI). 18. Y. Anexo 02. Agar soya tripticasa (TSA). IC. A. Anexo 03. Agar Müler- Hinton.. RM. ÁT. Anexo 04. Tabla N° 01. IN FO. Anexo 05. Tabla N° 02. Anexo 06. Pasteurización de la carne de res. AS. DE. Anexo 07. Radiación de microondas a la carne de res. EM. Anexo 08. Control (-) y Control (+). DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. Anexo 09. Análisis estadístico según ANOVA. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. En la actualidad, las enfermedades transmitidas por alimentos (ETA) constituyen uno de. N. los problemas más importantes de salud pública, por ello se están realizando estudios con. AC IÓ. el uso de las microondas para producir alimentos inocuos con un mínimo de tiempo y. UN IC. esfuerzo. El propósito de este estudio fue evaluar el efecto de la radiación de microondas sobre la supervivencia de Salmonella enteritidis inoculada en carne de res. Las rodajas de posteriormente. CO. M. carne fueron inoculadas con una población de 56 x 105 ufc/ml y. Y. sometidas a radiación de microondas a 10, 30, 50 ,70 y 90 segundos; luego de la. IC. A. exposición al microondas las rodajas de carne se analizaron mediante el método del y se sembraron las dos últimas diluciones en Agar Müller-Hinton y se. ÁT. enjuague. RM. incubaron durante 24 horas a 37°C. Los resultados obtenidos y. analizados. IN FO. estadísticamente mostraron que a 30, 50, 70 y 90 segundos no existe diferencia. DE. significativa (p<0.05), pero si hay diferencia significativa con las muestra de 10 segundos. AS. de exposición (p > 0.05). El número de microorganismos disminuyó progresivamente con. EM. el tiempo de exposición. Se tuvo que a partir de los 50 segundos no se evidenció. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. crecimiento de Salmonella enteritidis.. DI. Palabras claves: Salmonella enteritidis, microondas, carne de res, supervivencia.. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN. Las enfermedades transmitidas por alimentos (ETA) constituyen uno de los problemas. N. más importantes de salud pública, debido a que son la mayor causa de morbilidad y. AC IÓ. mortalidad tanto en países industrializados como en vías de desarrollo; además, afectan. UN IC. negativamente a la productividad económica 1, 2,3. También la manipulación de alimentos por parte de individuos infectados se asocia con el 24% de los brotes de enfermedades en. CO. M. países desarrollados 4,2.. Y. Se han descrito más de 250 ETA, la mayoría son infecciones ocasionadas por distintas. IC. A. bacterias, virus y parásitos 2,3. Dentro de las bacterias causantes de ETAs cabe destacar a. RM. ÁT. Staphylococcus aureus y Clostridium botulinum como agentes causantes de intoxicación,. IN FO. Bacillus cereus y Clostridium perfringens como agentes causantes de toxoinfección, y diversos géneros causantes de infección, como la Listeria monocytogenes, Salmonella sp.. DE. y Escherichia coli 0157H7, bacterias descritas por la OMS como "una nueva y. AS. significativa amenaza a la salud pública” 2,3,5. Para el año 2005 se estimó que 1,5 millones. EM. de personas murieron a causa de enfermedades diarreicas a nivel mundial y el 70% de. SI ST. ellas fueron atribuidas a las ETA 6.. DE. Entre los agentes de ETA, el género Salmonella es uno de los problemas más comunes 7,8,9. .. IO. N. en todo el mundo, teniendo una tasa de mortalidad aproximadamente un 33%. CC. Especies de Salmonella como S. bongori y S. enterica y, distintas subespecies se han. DI. RE. considerado como uno de los patógenos de alimentos más importantes de transmisión 10.. En el Perú, el numero de aislamientos de Salmonella enteritidis, referidas a fuentes humanas representa un 54% y Salmonella typhi representa un 36%, siendo ambas las especies de mayor prevalencia en nuestro país; la mayor parte de estos aislamientos. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. provienen de pacientes con ETA. 11,12. . En 1998, se reportaron brotes de ETAs en. diferentes zonas de Lima, presentando el distrito de Comas el mayor número de casos de aislamientos de Salmonella en puestos de venta ambulatoria de alimentos, asociado al 13. . En el año 2010, a través de la vigilancia. AC IÓ. N. consumo de mayonesa y salsa de rocoto. bacteriológica con la Red Nacional de Laboratorios en el Perú, se detectó un aumento de. UN IC. casos de Salmonella en aislamientos de origen humano, en su mayoría pediátricos de. M. diversos hospitales de Lima y aislamientos de alimentos. El INS identificó 33. CO. aislamientos como Salmonella enterica serovar Infantis, 24 de casos clínicos y nueve de. IC. A. Y. alimentos 14.. ÁT. Salmonella es un género bacteriano que pertenece a la familia Enterobacteriaceae,. RM. formado por bacilos gram negativos, anaerobios facultativos, con flagelos perítricos y que. IN FO. no desarrollan cápsula (excepto la especie S. typhi) ni esporas. Son bacterias móviles que. DE. producen sulfuro de hidrógeno, fermentan glucosa, pero no lactosa y no producen ureasa;. AS. su temperatura optima de crecimiento es de 35 - 37 ºC pero el crecimiento se enlentece. EM. por debajo de 10 ºC o en 45-47°C. En cuanto al pH muestra un crecimiento óptimo entre. SI ST. 6,5 - 7,5, viéndose éste detenido cuando el pH se sitúa por debajo de 4,5 o supera el valor de 9,0; ello explica que Salmonella se multiplique fácilmente en los alimentos de origen. DE. animal como carne de res, carne de ave, huevo y la leche siendo las principales fuentes. CC. IO. N. para la transmisión.9,15,16,17.. RE. De todos los alimentos, la carne es el más perecedero, debido a que constituye un medio. DI. ideal para el desarrollo de las bacterias; ya que proporciona un alto contenido nutricional, alto valor de actividad de agua y pH apropiado. Los microorganismos que alteran la carne, pueden llegar a ella por infección del animal vivo, contaminación endógena o por invasión post mortem -contaminación exógena .Aunque ambas son de gran importancia,. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. la alteración de la carne a consecuencia de la contaminación exógena es la más frecuente, así, el hombre puede sufrir graves infecciones o intoxicaciones por el consumo de carne procedente de animales sanos 12, 18, 19.. AC IÓ. N. Entre los principales agentes patógenos presentes en la carne y productos cárnicos se encuentran Salmonella, Pseudomonas, Achromobacter, Micrococcus, Streptococcus,. UN IC. Sarcina, Leuconostoc, Lactobacillus, Proteus, Flavobacterium, Microbacterium,. CO. M. Bacillus, Clostridium, Escherichia, y Streptomyces 12,18,19.. Y. Estudios realizados por Parrilla Cerrillo y col. (1993)20 dan a conocer que el 15% de. IC. A. brotes de ETA son causados por carne y derivados cárnicos, encontrando que el principal. ÁT. microorganismo de ETAs es causado por Staphylococcus aureus, provocando el 48% de. IN FO. RM. los brotes, y Salmonella en segundo lugar con 34%.. Perez, Guerrero y Ponce (2008)18 detectaron la presencia de microorganismos patógenos. AS. DE. como Salmonella en carne de bovino procedente de supermercados.. EM. Actualmente, la posibilidad de la producción industrial, de conservación y transporte de. SI ST. los alimentos a nivel mundial han favorecido el desarrollo de técnicas que permiten o garantizan la inocuidad del alimento empleando medios como enfriamiento, congelación,. DE. irradiación, pasteurización y desecación con el objetivo de disminuir o eliminar la. CC. IO. N. contaminación bacteriana 21.. RE. En 1940 se creó un nuevo método culinario que ahorra tiempo y es considerado efectivo,. DI. popular, rápido y económico además de que hay pocas perdidas de nutrientes 21,22,23. Este. método se conoce como microondas, y es un proceso alternativo a los procedimientos tradicionales. Esto es debido fundamentalmente, a las ventajas que presenta frente a los tratamientos convencionales en cuanto a velocidad, limpieza, calentamiento selectivo del alimento, reducción de costes, mejora de la calidad y ahorro de energía 21,24,25. 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El microondas, es una forma de energía electromagnética y no calorífica, la cual se caracteriza por ser una onda corta que viaja a la velocidad de la luz y tiene la propiedad de hacer vibrar las moléculas de los cuerpos que atraviesa, calentándolos. Son parte del. AC IÓ. N. espectro electromagnético, entre las zonas del infrarrojo y las ondas de radio y corresponden a longitudes de onda comprendidas entre 1 m y 1 mm (300 MHz-3000Hz. UN IC. de frecuencia, respectivamente)24,26.. los centros de carga positiva y. CO. eléctrica en un campo electromagnético, y cambia. M. Las microondas se generan en el magnetrón, dispositivo que transforma la energía. A. Y. negativa varios billones de veces por segundo. Cuando las microondas se aplican a. ÁT. IC. materiales dieléctricos, tales como los alimentos, las moléculas dipolares se orientan con. 24,27. . Otro mecanismo que contribuye al. IN FO. causan un aumento de la temperatura. RM. el campo y al ser éste alternante, da lugar a una fricción entre las moléculas polares que. calentamiento es debido a la frecuencia de la colisión entre los iones de las moléculas. DE. ionizables que también se desplazan con la orientación del campo. Una vez que se genera. EM. AS. el calor se transmite por mecanismos de conducción y convección térmica 24.. SI ST. En relación a los efectos de las microondas sobre los microorganismos, algunos estudios. DE. apuntan la posibilidad de que existan efectos no térmicos causantes de la letalidad. Sin. N. embargo, se ha demostrado que la inactivación microbiana se debe exclusivamente al. CC. IO. calor originado en el interior del alimento 24,27,28.. RE. El proceso con microondas genera calor del interior del alimento al exterior a través de. DI. las vibraciones moleculares, en cambio con el calentamiento convencional, el calor se aplica desde el exterior hacia el interior, generando un aumento de temperatura en el alimento. 28. . Este incremento está determinado por la potencia del equipo, así como por. las propiedades físicas y térmicas de la muestra. Un alimento que posea un bajo valor de. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. conductividad térmica puede calentarse rápidamente utilizando microondas, lo cual no ocurre en los métodos tradicionales. Cuando el alimento es sometido a irradiación por microondas, el calor es producido dentro del alimento debido a la vibración de las. AC IÓ. N. moléculas de agua originada por la absorción de energía 28,29. Las moléculas actúan como barras magnéticas tratando de orientarse o polarizarse entre. UN IC. ellas mismas bajo la acción del campo electromagnético; este movimiento entre las. M. moléculas causa una fricción interna, la cual a su vez da lugar a unas condiciones. CO. hipertérmicas que afectan a las moléculas ionizables y polares (sales minerales y agua,. A. Y. principalmente) e interfieren en las membranas celulares disminuyendo su actividad. ÁT. IC. fisiológica y supervivencia 28,29,30.. RM. Pese al gran número de ventajas que ofrece el tratamiento con microondas, existen una. IN FO. serie de inconvenientes tales como la limitada aplicación en alimentos de gran volumen,. DE. el elevado coste de las instalaciones y la falta de uniformidad en la distribución de la. AS. temperatura en el interior del alimento. Este último aspecto es bastante importante ya que. EM. repercute en la calidad final del producto tratado 24.. SI ST. Diversos trabajos citan la reducción en el número de microorganismos al ser tratados con. DE. microondas, incluyendo pavo, carne, leche de soya, pollo, papa y alimentos congelados,. IO. N. pero no su destrucción total, además se ha observado que la destrucción de. CC. microorganismos por efecto del microondas depende no solo del agente patógeno sino. DI. RE. del tipo de alimento 21,24,31. Dado que la carne mal cocida o cruda ha sido descrita como uno de los principales vehículos de transmisión de Salmonella enteritidis, ocasionando casos clínicos en la salud pública y considerando que el uso del horno de microondas dentro de establecimientos de comida rápida, instituciones públicas y hogares ha ganado popularidad al permitir 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. cocinar, descongelar y recalentar en cortos periodos de calentamiento y menos tiempo de exposición al calor que el tratamiento convencional, se realizó la presente tesis que tuvo por finalidad evaluar el efecto de la radiación de microondas sobre la supervivencia de. AC IÓ. N. Salmonella enteritidis inoculada en rodajas de carne de res.. UN IC. OBJETIVOS. 1. Evaluar el efecto de la radiación de microondas a los tiempos de 10'', 30'', 50'', 70'', y. M. 90'' sobre la supervivencia de Salmonella enteritidis inoculada en rodajas de carne de. CO. res.. A. Y. 2. Determinar el porcentaje de supervivencia de Salmonella enteritidis en cada rodaja de. ÁT. IC. carne de res inoculada, a los tiempos de 10'', 30'', 50'', 70'', 90''.. RM. 3. Determinar en qué tiempo de exposición al microondas no se observa desarrollo de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. Salmonella enteritidis, en las rodajas de carne de res inoculadas con la bacteria.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y MÉTODO. 1. MATERIAL. Carne de res (1000 gr), proveniente del Supermercado Plaza Vea – Chimbote,. AC IÓ. . N. 1.1. Muestra:. UN IC. Departamento Ancash inoculada con el cultivo de Salmonella enteritidis. proporcionado por el Área de Microbiología, COLECBI S.A.C. Distrito. CO. M. Chimbote, Departamento Ancash.. Y. 2. MÉTODO. IC. A. 2.1. OBTENCIÓN Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS. RM. ÁT. La muestra de carne de res fue comprada en el Supermercado Plaza vea de. IN FO. Chimbote y etiquetada en bolsas de polietileno, conservada en cadena de frío y trasladada en un cooler al Laboratorio de Microbiología de los Alimentos –. DE. Corporación de Laboratorios de Ensayos Clínicos, Biológicos e Industriales-. AS. COLECBI SAC, acreditado por INDECOPI de acuerdo a la NTP/ISO. 32. . Luego la carne de res fue cortada asépticamente en siete. SI ST. procesamiento. EM. 17025:2006, donde se mantuvo a temperatura de refrigeración de 4 °C hasta su. DE. rodajas de 25 gr cada uno y de 4 cm de ancho, 4 cm de largo y 1 cm de. CC. IO. N. espesor30.. DI. RE. 2.2. REACTIVACIÓN DEL CULTIVO DE Salmonella enteritidis. Para la reactivación de Salmonella enteritidis se sembró en. medio de. enriquecimiento Caldo Infusión Cerebro Corazón (BHI) y se incubó por 24 horas a 36°C. Luego se sembró en Agar Soya Tripticasa (TSA) y se incubó por 24 horas a 36°C 31,32.. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.3. OBTENCIÓN DEL INÓCULO DE Salmonella enteritidis. Para la obtención del inóculo se utilizó el cultivo puro de S. enteritidis. Se preparó una suspensión en solución Salina Fisiológica Estéril (SSFE) a una. AC IÓ. N. turbidez semejante al tubo Nº 1 del nefelómetro de Mac Farland (3 x 108 UFC/mL). Se midió la absorbancia en un Espectrofotómetro de luz visible. M. UN IC. (Wiener lab) con una longitud de onda de 600 nm 31.. Y. CO. 2.4. PASTEURIZACIÓN DE LA DE CARNE DE RES. IC. A. Antes de cualquier procedimiento experimental, las rodajas de carne, fueron. ÁT. pasteurizadas en baño maría (Memmert) a 60ºC por 60 minutos para eliminar. RM. cualquier tipo de contaminación pre-existente.. IN FO. Para el control de esterilidad de la carne pasteurizada, se colocó una rodaja de. DE. carne en un frasco de vidrio estéril y se adicionó 75 mL de Agua peptonada al. AS. 0.1%, se homogenizó durante 5 minutos y se sembró 1 mL de la alícuota por. EM. incorporación mediante la técnica de recuento en placa en Agar Müller-Hinton. SI ST. y se incubó a 36°C durante 24 horas al término del cual se realizó la lectura. DE. respectiva considerándose a este primer ensayo como el control negativo.. CC. IO. N. 2.5. INOCULACIÓN DE Salmonella enteritidis EN CARNE DE RES. DI. RE. Cada una de las 6 rodajas de carne de res se colocaron en frascos de vidrio estériles, luego se agregó el inóculo de S. enteritidis (3 x 108 UFC/mL) en la superficie de cada rodaja y se extendió. Una vez extendido el inóculo se dejó secar 5 minutos.. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.6. IRRADIACIÓN DE MICROONDAS A LA CARNE DE RES.. Cada uno de los cinco frascos inoculados con S. enteritidis se expusieron de forma individual en el horno de microondas (Whirlpool modelo WM1111DP,. AC IÓ. N. frecuencia 60 MHz, potencia 1400W) durante 10, 30, 50, 70 y 90 segundos,. UN IC. respectivamente 17, 31,32.. M. 2.7. EVALUACIÓN DE LA SUPERVIVENCIA DE Salmonella enteritidis EN. Y. CO. CARNE DE RES. IC. A. Se realizó el método del enjuague a cada una de las cinco rodajas de carne. ÁT. contendidas en frascos de vidrio que han sido expuestas a la irradiación por. RM. microondas y a la rodaja del control positivo, para determinar el número de. IN FO. supervivientes de S. enteritidis. Se agregó 75 mL. de Agua peptonada 0.1% a. DE. cada uno de los frascos respectivamente, luego se realizó diluciones de acuerdo. AS. al tiempo de exposición (1/4, ¼ x10-1, ¼ x10-2 , ¼ x10-3, ¼ x 10-4, ¼ x10-5, ¼. EM. x10-6) y de las dos últimas diluciones, se sembró 1mL por incorporación en Agar. SI ST. Müller-Hinton, y se incubó a 36°C por 24 horas. Después del periodo de. DI. RE. CC. IO. N. DE. incubación se realizó el recuento de las colonias expresado en UFC/g 31,32.. El ensayo se realizó por triplicado.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.8. ANÁLISIS DE RESULTADOS La supervivencia de Salmonella enteritidis se determinó mediante el recuento estándar de colonias expresado en UFC/g con respecto al tiempo de exposición. AC IÓ. N. al microondas. Estos valores sé analizaron mediante ANOVA y “t” de Student para comparar los promedios de los recuentos. Así se determinó el tiempo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. mínimo de irradiación de microondas al alimento.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS. En la figura N° 01 y N° 02 se observa que la supervivencia de Salmonella enteritidis en. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. teniendo como control en el tiempo cero (0) a una rodaja de carne sin irradiar.. N. carne de res disminuye por efecto de la irradiacion de microondas en diferentes tiempos,. Fig N° 01. Supervivencia de Salmonella enteritidis inoculado en carne de res y sometido. (a) p< 0.05 : R.R.. (b) p> 0.05 : R.A.. DI. RE. CC. IO. N. DE. a diferentes tiempos de irradiación con microondas.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. SI ST. Fig. N° 02. Porcentaje de supervivencia de Salmonella enteritidis inoculado en carne de. (a) p< 0.05 : R.R.. (b) p> 0.05 : R.A.. DI. RE. CC. IO. N. DE. res a diferentes tiempos de irradiacion con microondas.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN. Los alimentos pueden jugar un papel importante en la transmisión de enfermedades. N. de origen alimentarlo y constituyen un problema de salud pública importante 1. Se. AC IÓ. considera a la carne y sus productos derivados como un ambiente propicio para la. UN IC. proliferación de microorganismos ya que provee una matriz rica en nutrientes, por lo tanto, las tecnologías de conservación adecuada deben ser aplicadas con el fin de. CO. M. preservar su seguridad y calidad 12,18,19. Esto ha conllevado que en la actualidad, tanto en. Y. el hogar, instituciones y algunos restaurantes, se estén haciendo intentos para producir. IC. A. alimentos de alta calidad con un mínimo de tiempo y esfuerzo utilizando el horno de. RM. ÁT. microondas 2,21.. IN FO. Investigaciones realizadas, muestran que la radiación de microondas se puede. DE. utilizar para controlar (para reducir o, a veces para eliminar por completo). AS. microorganismos patógenos potenciales en los alimentos en un tiempo limitado de. EM. radiación 17, 33. A pesar de que el recalentamiento de microondas se ha demostrado que es. SI ST. un método generalmente fiable de reducir los agentes patógenos microbiológicos, poca investigación se ha realizado en su eficacia para promover la seguridad microbiológica de. IO. N. DE. cocinar los alimentos crudos 17,33.. CC. Según los resultados obtenidos, (Figura N° 01 y 02) la supervivencia de Salmonella. DI. RE. enteritidis inoculada en carne de res va disminuyendo con respecto al tiempo de radiación de microondas (Whirlpool modelo WM1111DP, frecuencia 60 MHz, potencia 1400W), observándose que a partir de 50" la supervivencia del microorganismo es 0% a comparación del grupo control.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Estudios similares demuestran que se da una reducción importante en el número de microorganismos presentes al cocinar con microondas, lo cual permite extender el tiempo de preservación del alimento. Algunos autores como Quesada, Arias y Chaves33. N. determinaron la eliminación de Escherichia coli O157: H7 en tortas de carne de res. AC IÓ. después de 60 segundos de exposición a las microondas, otros como Jamshidi17 y Seifi31. UN IC. citan que la eliminación de Escherichia coli O157: H7 y Salmonella tiphy en porciones de pechuga de pollo respectivamente fue después de 35 segundos. Así también Castro y. CO. M. col.32 demostraron que la radiación con microondas no constituye un método adecuado. Y. para eliminar por completo cargas altas de S. enteritidis y Clostridium perfringens a partir. IC. A. de empanadas de carne, torta de huevo con papa y picadillo de vainica con carne molida. IN FO. RM. ÁT. con un tiempo de exposición de 16 min y con un porcentaje de supervivencia mínima.. Al aplicar el tratamiento estadístico, según el análisis de varianza ANAVA, se. DE. encontró que las muestras con 30, 50, 70 y 90 segundos de exposición a las microondas. AS. no tienen diferencias significativas entre sí (p<0.05) en cuanto a la supervivencia de. EM. Salmonella enteritidis, pero si existe diferencia significativa (p > 0.05) con la muestra de. SI ST. 10 segundos de exposición (Figura N° 01 y 02); por lo tanto el número de. CC. IO. N. exposición.. DE. microorganismos disminuyó progresivamente a medida que aumentaba el tiempo de. RE. Esta disminución en la supervivencia se debe exclusivamente al calor originado en. DI. el interior del alimento por efecto de las microondas. 24. , generado por la vibración de las. moléculas de agua originada por la absorción de energía. 28,29. . Las moléculas de agua. actúan como barras magnéticas tratando de orientarse o polarizarse ellas mismas bajo la acción del campo electromagnético. Este movimiento entre las moléculas causa una fricción interna, la cual a su vez da lugar a unas condiciones hipertérmicas que afectan a 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. las moléculas ionizables y polares (sales minerales y agua, principalmente) e interfieren en las membranas celulares disminuyendo su actividad fisiológica y supervivencia de los. N. microorganismos 28, 29,30.. AC IÓ. El tratamiento térmico también causa la desnaturalización y agregación de proteínas. UN IC. en el citoplasma que conduce a la destrucción de la actividad enzimática y el. M. metabolismo en los microorganismos; además hay inducción de la síntesis de las. CO. denominadas "proteínas de choque térmico" que actúan como chaperones moleculares o. IC. A. Y. proteasas que afectan el plegamiento, la reparación y la degradación de las proteínas 30, 34.. ÁT. Siendo así, un factor determinante el alto valor de actividad de agua que posee la. IN FO. RM. carne de res 12, 17, 18,19 para la eliminación de Salmonella enteritidis; ya que las moléculas de agua al ser dipolares van a producir vibraciones que dan lugar a una fricción entre. DE. ellas causando un aumento de la temperatura que generará más calor en menor tiempo. EM. AS. de radiación y consiguientemente la muerte del microorganismo 28, 29, 30, 35.. SI ST. También debe tenerse en cuenta que otros parámetros tales como los relacionados. DE. con el equipo (tipo de horno, frecuencia, potencia) como las características inherentes al. N. alimento (contenido de agua, propiedades físicas, tamaño, forma) pueden influir en el. CC. IO. tiempo de la eliminación de bacterias inoculadas 17, 21, 28,29, 33; ya que cuando no existe un. RE. adecuado control de la uniformidad del calentamiento pueden aparecer «puntos fríos» en. DI. los que la inactivación microbiana es incompleta y los «puntos calientes», donde pueden tener lugar degradaciones térmicas excesivas con el consiguiente detrimento en las. propiedades sensoriales y en el valor nutritivo del alimento 17, 28, 29,33.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Por lo tanto es importante el uso del horno microondas siempre y cuando se ponga énfasis en la relación tiempo y volúmen porque solo así se lograría la eliminación de S. enteritidis, dadas las características de patogenicidad de esta bacteria, su simple presencia 11,16. . Aún cuando los. AC IÓ. N. (1 UFC/g) en alimentos procesados es totalmente inaceptable. niveles de inoculación utilizados en este estudio son poco probables de ocurrir, se puede. UN IC. concluir que la carne contaminada con Salmonella enteritidis representa un riesgo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. potencial para la salud pública.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIONES. 1. Se determinó que el porcentaje de supervivencia de Salmonella enteritidis inoculada. N. en carne de res disminuyó según aumentaba el tiempo de irradiación por microondas,. AC IÓ. registrando que ha 10'' fue de 5%, a 30'' el 0.02% y a 50'', 70'' y 90'' fue menor a. UN IC. 0.02% de sobrevivientes respectivamente.. CO. M. 2. Se determinó que a partir de los 50'' de irradiación por microondas, no se evidenció. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. crecimiento de Salmonella enteritidis inoculada en la de carne de res.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1.. Narvaez CG. Organización Panamericana de la Salud (O.P.S.).Prevención y. N. Diagnóstico de enfermedades. Informe Anual del Director. O.P.S. Washington D.C.. Arias ML y Antillón F. Contaminación microbiológica de los alimentos en Costa. UN IC. 2.. AC IÓ. 1998: 65-79.. rica. Rev Biomed 2000; 11:113-122.. M. Gonzales T y Rojas R. Enfermedades transmitidas por alimentos y PCR: prevención. CO. 3.. Bryan F. Hazard Analysis Critical Control Point (HACCP) Systems for retail food. IC. A. 4.. Y. y diagnostico. Salud pública de México 2005; 47(5): 388-390.. ÁT. and restaurant operations. J Food Prot 1978; 41: 816-827. FAO. Food inspection. Food and Nutrition Paper 1984; 14: 107-122.. 6.. Jeng D, Kaczmarek K, Woodworth A and Balasky G. Mechanism of Microwave. IN FO. RM. 5.. Almeida CR. Contaminación microbiana de los alimentos vendidos en la vía pública. AS. 7.. DE. Sterilization in the Dry State. Appl. Environ Microbiol. 1987; 53 (9): 2133-2137.. EM. en ciudades de América latina y características socio-económicas de sus vendedores. SI ST. y consumidores. Organización Panamericana de la Salud. Instituto Panamericano de. Brennan J, Butters JR, Cowell ND y Lilly AEV. Las operaciones de la ingeniería de. N. 8.. DE. Protección de Alimentos y Zoonosis 2000: 1-151.. CC. Chávez de la Peña E. Brote por Samonella enteritidis en trabajadores de un hospital.. RE. 9.. IO. los alimentos. Zaragoza: Ed. Acribia. 1980.. DI. Salud Pública de México 2001; 43(3): 211-216.. 10. Hernández PE. Bacterias patógenas emergentes transmisibles por los alimentos. Departamento de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos. Facultad de Veterinaria. Universidad Complutense de Madrid 2010; 6: 147-179.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 11. Grados O. Presencia de Salmonella enteritidis, serotipo agona, en el Perú. BOLETIN DE LA OFICINA SANITARIA PANAMERICANA 1974; 8(3): 228-231. 12. Gay FR, Flores RI.. Agentes patógenos (bacterias) en carne de bovino: un reto en la. AC IÓ. N. inocuidad de alimentaria. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANA – UNIDAD XOCHIMILCO, MEXICO. 2004.. UN IC. 13. Quispe J, Víctor P. Evaluación microbiológica y sanitaria de puestos de venta. M. ambulatoria de alimentos del distrito de Comas, Lima - Perú. Rev Med Exp 2005; 18. CO. (1): 27-32.. Y. 14. Zamudio ML, Meza A, Bailón H, Martinez J y Campos J. Experiencias en la. IC. A. vigilancia epidemiológica de agentes patógenos transmitidos por alimentos a través. RM. ÁT. de electroforesis en campo pulsado (PFGE) en el Perú. Rev Peru Med Exp Salud. IN FO. Pública 2011; 28(1): 128-35.. 15. Baldiwn R, Cloninger M, Fields M. Growth and destruction of Salmonella. DE. typhimuriun in egg white foam products cooked by microwaves. Applied. AS. Microbiology 1998; 16(12): 1929-1934.. EM. 16. Coma J. Control de Salmonella en carne de porcino: efecto de la alimentación. SI ST. animal. XVII Curso de Especialización FEDNA 2003: 1-26.. DE. 17. Jamshidi A, Ghasemi A, Mohammadi A. The effect of short-time microwave. N. exposures on Salmonella typhimurium inoculated on to chicken drumettes. Iranian. CC. IO. Journal of Veterinary Research, Shiraz University 2007; 10(4): 378-389. M, Guerrero. I, y Ponce E. Detección de microorganismos patógenos e. RE. 18. Pérez. DI. indicadores en carne de bovino que se expende en supermercados de la Ciudad de México. NACAMEH 2008; 2(2): 188-194.. 19. Bello LA, Ortiz DM, Perez E y Castro V. Salmonella en carnes: Un estudio en localidades del estado de Guerrero. Salud Pública Mex. 1990; 32:74-79.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 20. Parrilla MC, Vázquez JL, Saldate EO y Nava LM. Brotes de toxiinfecciones alimentarias de origen microbiano y parasitario. Salud Pública de México 1993; 35(5): 456-463.. AC IÓ. N. 21. Montilla M, Scorza J y Rojas E. Reducción de flora contaminante en alimentos mediante tratamiento con microondas. Revista del Instituto Nacional de Higiene. UN IC. “Rafael Rangel” 2010; 41 (2): 46-51 .. M. 22. Pucciarelli AB, Benassi DE. La inactivación de Salmonella Enteritidis de las aves de. CO. corral crudas utilizando calentamiento por microondas. Braz. Arco. Biol. La. Y. tecnología 2005; 48: 939-945.. IC. A. 23. Ohlsson T. Microwave processing in the food industry. European Food and Drink. RM. ÁT. Review Summer 1991; 7(7).. IN FO. 24. Villamiel DM. Calentamiento de leche con microondas. Estudio de los principales indicadores de tratamiento térmico. Instituto de fermentaciones industriales. Tesis. DE. para el grado de Doctor. Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, 1995.. AS. 25. Park DK, Bitton G, Melker R. Microbial inactivation by microwave radiation in the. EM. nome environment. J Environ Health 2006; 69(5):17-24.. SI ST. 26. Decareau RV. Microwaves in the Food Processing Industry. 8a ed. New York: Ed.. DE. Schweigert. Academic Press; 1985.. N. 27. Gallmann PU y Eberhard P. Alternative methods for heating milk and milk products.. CC. IO. F-Doc 215. Brussels: International Dairy Federation; 1992.. RE. 28. Velasquez AM y Sanchez RL. Utilización de microondas en el tratamiento de jugo. DI. de mango. Revista Lasallista de investigación 2008; 5(2): 13-19.. 29. Sánchez E, Ortiz A, Mora R. Análisis de Superficie de Respuesta de Tres Variables por Efecto del Tratamiento Térmico con Microondas en un Producto de Panificación. México: Universidad Autónoma de Nuevo León 2005.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 30. Capozzi V, Fiocco D, Amodio M, Gallone A, Spano G. Bacterial Stressors in Minimally Processed Food. Int. J. Mol. Sci 2009; 10, 3076-3105. 31. Jamshidi A, Seifi H, Kooshan M. The effect of short-time microwave exposures on. AC IÓ. N. Escherichia coli O157:H7 inoculated onto beef slices. African Journal of Microbiology Research 2010; 4(22): 2371-2374.. UN IC. 32. Castro V, Arias M, Antillón F y Jimenéz M. Efectos de las microondas sobre la. M. sobreviviencia de algunas bacterias patógenas en comidas populares costarricenses.. CO. Rev. costarric. cienc. Méd. 1997; 18(2):23-58.. Y. 33. Quesada O, Arias M, Chaves L. Efecto del horno de microondas sobre el crecimiento. IC. A. y sobrevivencia de Escherichia coli O175:H7 inoculada en tortas de carne de res.. RM. ÁT. Archivos Latinoamericanos de Nutrición 2003; 53(1): 65-69.. IN FO. 34. Woo IS, Rhee IK, Park HD. Differential Damage in Bacterial Cells by Microwave Radiation on the Basis of Cell Wall Structure. APPLIED AND ENVIRONMENTAL. DE. MICROBIOLOGY 2000; 66(5): 2243 – 2247.. AS. 35. Risco G, Koga Y, Fernández D, Tinoco R, Alvarado R y Villacorta K. El horno. SI ST. DI. RE. CC. IO. N. DE. 2000. 12(3).. EM. microondas en la esterilización de material de fibra de algodón. Bioservice SRL.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. ANEXOS. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 1 Caldo infusión cerebro corazón (BHI). N. Fundamento:. AC IÓ. Es un medio muy rico en nutrientes, que proporciona un adecuado desarrollo microbiano. La. UN IC. infusión de cerebro de ternera, la infusión de corazón vacuno y la peptona, son la fuente de carbono, nitrógeno, y vitaminas. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable que actúa. CO. M. como fuente de energia, el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el fosfato disódico. Y. otorga capacidad buffer. Los nutrientes de este caldo son muy apropiados para los. IC. A. hemocultivos, ya que en esta infusión desarrollan todas las especies de estreptococos excepto. ÁT. los tiol y piridoxal dependientes. Los estafilococos que crecen en esta infusión suelen dar. RM. mejores reacciones en la prueba de la coagulasa. Con el agregado de 20 Ul de Penicilina y 100. IN FO. µg/ml de amicacina, se inhibe la flora bacteriana cuando se utiliza este medio para el cultivo de. DE. hongos patógenos.. Peptona. DE. Cloruro de sodio. SI ST. Infusión de corazón. EM. Infusión de cerebro. AS. Fórmula (en g/L):. N. Glucosa. 5,0 g 10,0 g 5,0 g 2,0 g 2,5 g. CC. IO. Fosfato disódico. 12,5 g. RE. Instrucciones:. DI. Suspender 37 g del polvo en un litro de agua destilada. Calentar a ebullición hasta disolver completamente. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Los tubos que no se usen inmediatamente deberán calentarse en un baño hirviendo para la eliminación del oxígeno retenido. Enfriar rápidamente sin agitar. El pH es de 7,4 +/- 0,2.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 2 Agar Soya Tripticasa (TSA) Fundamento:. AC IÓ. N. La es un medio de uso general que permite el crecimiento tanto de microorganismos exigentes como no exigentes, que incluyen bacterias aerobias y anaerobias. La aportación de caseína y. UN IC. peptonas de soja al Agar de Tripticasa-soja hace el medio muy nutritivo por el suministro de. M. nitrógeno orgánico, particularmente aminoácidos y péptidos de cadena más larga. La presencia. CO. de estas peptonas en el medio permite el cultivo de una gran variedad de gérmenes aerobios y. A. Y. anaerobios que crecen rápidamente, así como los del género Candida. También permite el. ÁT. IC. crecimiento de algunos gérmenes exigentes como estreptococos, pneumococos, Brucella,. IN FO. RM. corinebacterias, Erysipelothrix y Pasteurella. Fórmula (en g/L): Triptosa. DE. Peptona. EM. Glucosa. AS. Extracto de levadura. SI ST. Cloruro sódico. 5,0 g 3,0 g 5,0 g 5,0 g 15,0 g. DE. Agar. 15,0 g. N. Procedimiento:. CC. IO. Se disuelven todos los componentes excepto el agar en una parte de agua por calentamiento. RE. hasta que la solución sea transparente. Añadir a continuación el agar y el agua restante. DI. agitando hasta ebullición. Ajustar el pH a 7 y esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121 ºC.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 3 Agar Müller - Hinton Fundamento:. AC IÓ. N. Es un medio utilizado para realizar las pruebas de susceptibilidad antimicrobiana en microorganismos aeróbicos. Este medio es el seleccionado para realizar las pruebas de. UN IC. susceptibilidad, por su alta reproducibilidad, su bajo contenido de substancias inhibidoras y el. M. crecimiento satisfactorio que presentan la mayoría de los patógenos no fastidiosos. Con este. CO. medio se han llevado a cabo una gran cantidad de estudios sobre susceptibilidad. A. Y. antimicrobiana.. ÁT. IC. En este medio la infusión de carne y la peptona de caseína proveen la fuente de nitrógeno,. RM. vitaminas, carbón y aminoácidos. El almidón es agregado para absorber cualquier metabolito. IN FO. tóxico y el agar es adicionado como agente solidificante.. DE. Fórmula (en g/L): Infusión de carne. Agar - agar. 17,5 g 1,5 g 12,5 g. DE. Procedimiento:. SI ST. EM. Almidón. AS. Caseína hidrolizada. 5,0 g. IO. N. Suspender 36,5 g del medio deshidratado en un litro de agua destilada. Dejar embeber de 10 a. CC. 15 minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir durante 1 minuto. Esterilizar a 121°C. RE. durante 15 minutos. Enfriar a 45°-50°C y distribuir a cajas de Petri (o agregar los suplementos. DI. que se desee) hasta un nivel de 4 mm sobre una superficie horizontal (25-30 ml en placas de 9 cm de diámetro). El pH es de 7,4 +/- 0,2.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 4. TABLA N° 01. Supervivencia de Salmonella enteritidis (UFC/g) inoculada en rodajas de carne de res en diferentes tiempos de radiación de microondas, durante 24 horas de. UN IC. AC IÓ. N. incubación en medio Müller-Hinton a 37°C.. M. Supervivencia de Salmonella enteritidis (UFC/g) Tiempo de radiación. CO. Ensayo. (segundos). 2°. * 0 (control -). 0. 0. ** 0 (control +). 35 x 106. 35 x 106. 35 x 106. 10. 288 x 103. 30 x 104. 324 x 103. 30. 900. 760. 1020. 50. 0. 0. 0. 70. 0. 0. 0. 90. 0. 0. 0. A. IC. ÁT RM. IN FO. 3° 0. SI ST. EM. AS. DE. Y. 1°. *Control (-). Verificación de la eliminación de la microflora en la carne de res en la. DE. pasteurización.. N. **Control (+). UFC inicial de Salmonella enteritidis inoculada en rodajas de carne de. DI. RE. CC. IO. res sin irradiar al microondas.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 5. TABLA N° 02. Supervivencia de Salmonella enteritidis inoculada en rodajas de carne de. AC IÓ. N. res en diferentes tiempos de radiación de microondas analizado según el programa SPSS. M. UN IC. v. 15 Tukey B.. CO. Subconjunto para alfa = 0.05. Tiempo de radiación N (segundos). 2. 90,00. 3. IC. 3. ÁT. 70,00. 0,0000 0,0000. RM. 3. IN FO. 50,00. A. Y. 1. 30,00. 3. 10,00. 0,0000. 893,3333 304000,0000. AS. DE. 3. EM. Se muestran las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. a. Usa el tamaño muestral de la media armónica = 3.000.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. ANEXO 6. DI. RE. CC. IO. N. Fig. 1. Equipo de baño maría a 60 °C aprox. para el pasteurizado de la carne de res.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. ANEXO 7. DI. RE. CC. IO. N. Fig. 2. Horno microondas utilizado para la irradiación de la carne de res inoculada con Salmonella enteritidis .. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. ANEXO 8. Control (+). IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. Control (-). B. DE. SI ST. EM. AS. DE. A. DI. RE. CC. IO. N. Fig. 3. A. Control (-) ausencia de crecimiento de Salmonella enteritidis B. Control (+) crecimiento de colonias de Salmonella enteritidis.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M UN IC AC IÓ. N. ANEXO 9. CO. Descriptives. Y. Supervivencia. 3. 304000,0000. 18330,30278. 30,00. 3. 893,3333. 130,12814. 50,00. 3. ,0000. ,00000. 70,00. 3. ,0000. ,00000. 90,00. 3. ,0000. Total. 15. 10583,00524. ST. SI DE. ,00000. Lower Bound. Upper Bound. Minimum. Maximum. 349534,9964. 288000,00. 324000,00. 75,12952. 570,0771. 1216,5896. 760,00. 1020,00. ,00000. ,0000. ,0000. ,00. ,00. ,00000. ,0000. ,0000. ,00. ,00. ,00000. ,0000. ,0000. ,00. ,00. 32524,45682. -8779,3553. 130736,6887. ,00. 324000,00. DI. RE. CC I. O. N. 60978,6667 125966,67960. Mean. 258465,0036. EM. 10,00. Std. Error. IN FO. Std. Deviation. DE. Mean. AS. N. RM ÁT. IC. A. 95% Confidence Interval for. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) M UN IC AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Y. CO. ANOVA. IC. A. Supervivencia. Between Groups. df. 2,215E11 6,720E8. DE. Within Groups. 2,221E11. 4. 5,537E10. F 823,896. 10 67203386,667 14. DI. RE. CC I. O. N. DE. SI. ST. EM. AS. Total. Mean Square. IN FO. Squares. RM ÁT. Sum of. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis.. Sig. ,000.

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M UN IC AC IÓ. N. Post Hoc Tests. Multiple Comparisons Dependent Variable:Supervivencia. Std. Error. Lower Bound. Upper Bound. RM ÁT. IC. J). 95% Confidence Interval. Sig.. Y. Difference (I-. A. (I) Tiempo (J) Tiempo. CO. Mean. 303106,66667* 6693,44887. ,000. 281077,9766. 325135,3567. 50,00. 304000,00000* 6693,44887. ,000. 281971,3100. 326028,6900. 70,00. 304000,00000* 6693,44887. ,000. 281971,3100. 326028,6900. 90,00. 304000,00000* 6693,44887. ,000. 281971,3100. 326028,6900. 6693,44887. ,000. -325135,3567. -281077,9766. 893,33333. 6693,44887. 1,000. -21135,3567. 22922,0234. 893,33333. 6693,44887. 1,000. -21135,3567. 22922,0234. IN FO. 30,00. EM. AS. DE. 10,00. 10,00. ST. Tukey HSD. *. SI. 303106,66667. DE. 30,00. O. N. 50,00. DI. RE. CC I. 70,00. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 6693,44887. 1,000. 10,00. 22922,0234. 6693,44887. ,000. -326028,6900. -281971,3100. 1,000. -22922,0234. 21135,3567. 1,000. -22028,6900. 22028,6900. *. 304000,00000 -893,33333. 6693,44887. 70,00. ,00000. 6693,44887. 90,00. ,00000. 6693,44887. 1,000. -22028,6900. 22028,6900. 6693,44887. ,000. -326028,6900. -281971,3100. Y. CO. 30,00. RM ÁT. IC. A. 50,00. -21135,3567. N. 893,33333. M UN IC AC IÓ. 90,00. -. IN FO. 10,00. -893,33333. 6693,44887. 1,000. -22922,0234. 21135,3567. 50,00. ,00000. AS. 6693,44887. 1,000. -22028,6900. 22028,6900. ,00000. 6693,44887. 1,000. -22028,6900. 22028,6900. 6693,44887. ,000. -326028,6900. -281971,3100. 6693,44887. 1,000. -22922,0234. 21135,3567. DE. SI. 90,00. EM. 30,00. ST. 70,00. DE. 304000,00000*. -. 10,00. 304000,00000*. CC I. O. N. 90,00. -893,33333. DI. RE. 30,00. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) ,00000. 6693,44887. 1,000. -22028,6900. 70,00. ,00000. 6693,44887. 1,000. -22028,6900. 22028,6900. 30,00. 303106,66667* 6693,44887. ,000. 288192,7332. 318020,6001. 50,00. 304000,00000* 6693,44887. ,000. 289086,0665. 318913,9335. 70,00. 304000,00000* 6693,44887. ,000. 289086,0665. 318913,9335. 90,00. 304000,00000* 6693,44887. ,000. 289086,0665. 318913,9335. 6693,44887. ,000. -318020,6001. -288192,7332. M UN IC AC IÓ. N. 50,00. CO. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RM ÁT. IC. A. Y. 10,00. 22028,6900. -. IN FO. 10,00. *. 303106,66667 893,33333. 6693,44887. ,896. -14020,6001. 15807,2668. 70,00. 893,33333. AS. 6693,44887. ,896. -14020,6001. 15807,2668. 893,33333. 6693,44887. ,896. -14020,6001. 15807,2668. 6693,44887. ,000. -318913,9335. -289086,0665. 6693,44887. ,896. -15807,2668. 14020,6001. DE. SI. 90,00. EM. 50,00. ST. 30,00. DE. LSD. -. 10,00. CC I. O. N. 50,00. 304000,00000* -893,33333. DI. RE. 30,00. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) ,00000. 6693,44887. 1,000. -14913,9335. 14913,9335. 90,00. ,00000. 6693,44887. 1,000. -14913,9335. 14913,9335. 10,00. -. 6693,44887. ,000. -318913,9335. -289086,0665. ,896. -15807,2668. 14020,6001. M UN IC AC IÓ. 70,00. 70,00. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CO. 304000,00000* -893,33333. 6693,44887. 50,00. ,00000. 6693,44887. 1,000. -14913,9335. 14913,9335. 90,00. ,00000. 6693,44887. 1,000. -14913,9335. 14913,9335. 6693,44887. ,000. -318913,9335. -289086,0665. 6693,44887. ,896. -15807,2668. 14020,6001. ,00000. 6693,44887. 1,000. -14913,9335. 14913,9335. ,00000. 6693,44887. 1,000. -14913,9335. 14913,9335. RM ÁT. IN FO. 90,00. IC. A. Y. 30,00. 10,00. -. AS. DE. 304000,00000*. ST. N. DE. 70,00. SI. 50,00. -893,33333. EM. 30,00. DI. RE. CC I. O. *. The mean difference is significant at the 0.05 level.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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