Evaluación In Vitro De La Eficacia Antibacteriana Del Hipoclorito De Sodio Al 1%, 2 5% Y 5 25% A Diferentes Temperaturas Frente A Cepas De Enterococcus Faecalis (Atcc 29212)
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(2) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. DEDICATORIAS. FO R. MA TI. CA. A Dios, por el cuidado y protección en cada acto de mi vida y la oportunidad de conocer la verdad.. SI S. TE. MA S. E. IN. A Fabiola y Miguel, mis Padres por su amor, confianza, y sacrificio depositados en mí y ejemplos a seguir en la vida.. OF. IC. IN. A. DE. A Liz y José Miguel, mis hermanos, por todo el apoyo y cariño mostrado siempre en mi vida.. A mi familia, por la oportunidad de tenerlos cerca en todo momento y disfrutar gratos momentos de diversión y felicidad.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(3) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. MA TI. CA. AGRADECIMIENTOS. FO R. De especial manera brindo mi más sincero agradecimiento:. Al Dr. César Augusto Jiménez Prado, asesor de esta tesis por su ayuda y. E. IN. paciencia para el termino de este trabajo.. MA S. A la Dra. Elva Mejía Delgado, coasesora de esta tesis por su apoyo y. TE. tiempo para la ejecución de este trabajo.. SI S. Al personal de Laboratorio de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo, quienes me dieron todas las. DE. facilidades en la ejecución de este trabajo.. IN. A. Y a mis amigos Paúl, Víctor, Karol, Robert, Martha, Amelia y Deysi, que. OF. IC. me brindaron su apoyo en la realización del presente trabajo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(4) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. RESUMEN. MA TI. El presente estudio de tipo experimental, tuvo como objetivo evaluar in Vitro la eficacia antibacteriana del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% a diferentes temperaturas frente a cepas de Enterococcus faecalis. FO R. (ATCC 29212), en una muestra conformada por 91 tubos de ensayo en. IN. medio de tioglicolato. Se realizó el recuento de unidades formadoras de colonias a las 24 horas después de su incubación a 37ºC para evaluar el. E. crecimiento bacteriano. Los resultados mostraron una alta eficacia. MA S. antibacteriana del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% a 20ºC, 37ºC y 45ºC, pero no se evidenció una diferencia estadística significativa entre concentraciones. y. las. temperaturas.. TE. las. Se. concluye. que. las. SI S. concentraciones de 1%, 2.5% y 5.25% a las temperaturas de 20ºC, 37ºC. DE. y 45ºC producen, in Vitro, una eficacia antibacteriana similar del. IN. 29212).. A. Hipoclorito de Sodio frente a cepas de Enterococcus faecalis (ATCC. OF. IC. Palabras Clave: Hipoclorito de Sodio, Concentración, Temperatura.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(5) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. ABSTRACT. MA TI. The present study of experimental type, it had as aim evaluate in Vitro the antibacterial efficiency of the Sodium Hypochlorite to 1%, 2.5% and 5.25% to different temperatures opposite to strains of Enterococcus faecalis. FO R. (ATCC 29212), in a sample shaped by 91 test tube in the thioglycolate. IN. medium. There was realized the count of forming units of colonies at 24 hours after her incubation to 37ºC to evaluate the bacterial growth. The. E. results showed a high antibacterial efficiency of the Sodium Hypochlorite. a. statistical. concentrations. and. the. significant. temperatures.. TE. demonstrated. MA S. to 1%, 2.5% and 5.25% to 20ºC, 37ºC and 45ºC, but there was not difference One. between. concludes. that. the the. SI S. concentrations of 1%, 2.5% and 5.25% to the temperatures of 20ºC, 37ºC. DE. and 45ºC produce, in Vitro, an antibacterial similar efficiency of the. IN. 29212).. A. Sodium Hypochlorite opposite to strains of Enterococcus faecalis (ATCC. OF. IC. Key words: Sodium Hypochlorite, Concentration, Temperature.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(6) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. ÍNDICE. MA TI. DEDICATORIAS. FO R. AGRADECIMIENTOS. IN. RESUMEN. MA S. E. ABSTRACT. INTRODUCCIÓN ............................................................................1. II.. MATERIAL Y MÉTODOS..……………………………………….......15. III.. RESULTADOS ………………………………………………………...22. IV.. DISCUSIÓN………………………………………………………….....28. V.. CONCLUSIONES………………………………………….…………..32. VI.. RECOMENDACIONES………………………………………..………33. A. DE. SI S. TE. I.. OF. IC. IN. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS …………………………..……34. ANEXOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(7) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. I.. INTRODUCCIÓN. Dentro de los procedimientos de preservación de los órganos dentarios en. CA. función, se encuentra la terapia de conductos1. En la cual para aumentar. MA TI. las probabilidades de éxito son esenciales la limpieza biomecánica y la conformación del sistema de conductos junto con la medicación intraconducto, para la eliminación de la microflora endodóncica presente. FO R. en sistemas de conductos radiculares contaminados2, puesto que la. IN. certeza de tener conductos libres de bacterias nos asegurará el éxito del. E. tratamiento endodóntico3.. MA S. La eliminación de las bacterias durante el tratamiento de conductos es un factor fundamental para lograr el éxito de la endodoncia, debido a que se. a la presencia de microorganismos dentro del sistema de. SI S. debidas. TE. ha demostrado que muchas alteraciones pulpares y periapicales son. DE. conductos radiculares4, 5, 6.. A. Así mismo tenemos que la reparación del tejido periapical se logra con la. IN. eliminación de los irritantes presentes en el sistema de conductos. OF. IC. radiculares y su posterior obturación total7.. Se sabe que la instrumentación mecánica de los conductos por sí sola no es capaz de eliminar adecuadamente las bacterias y los residuos tisulares de la cámara pulpar, debido a la compleja anatomía del sistema de. 1. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(8) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. conductos. en. donde. es. posible. encontrar. conductos. laterales,. recurrentes, secundarios accesorios, colaterales y deltas apicales4, 6, 8.. CA. La irrigación, acompañada de aspiración, es un auxiliar muy importante. MA TI. durante la instrumentación del conducto radicular cuyo objetivo es la remoción de los detritos, la remoción del número de bacterias existentes en el interior de los conductos radiculares, tanto por la acción mecánica. FO R. como por la acción antimicrobiana de la solución utilizada, además de. IN. facilitar la instrumentación al mantener las paredes dentinarias hidratadas, ejerciendo acción lubricante. En los dientes con vitalidad pulpar la. E. ausencia de contaminación bacteriana incipiente excluye el uso de. MA S. productos antisépticos y en su lugar se recomienda la aplicación de sustancias biocompatibles, que respeten el remanente pulpar y los tejidos. TE. periapicales, para favorecer la reparación. En los dientes sin vitalidad, la. SI S. irrigación ayuda a la desinfección del conducto radicular y a la. DE. neutralización de las toxinas presentes en el contenido necrótico. La preferencia es, entonces, por productos con acción antiséptica, poder de. A. disolución de material orgánico y capacidad de neutralizar las toxinas sin. OF. IC. IN. agredir los tejidos periapicales5, 8, 9.. El Hipoclorito de Sodio (NaOCl) ha sido y es aún el irrigante más utilizado en la endodoncia moderna. El NaOCl ha sido definido por la Asociación Americana de Endodoncistas como un líquido claro, pálido, verdeamarillento, extremadamente alcalino y con fuerte olor clorino, que. 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(9) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. presenta una acción disolvente sobre el tejido necrótico y restos orgánicos y además es un potente agente antimicrobiano10; es una sal formada de la unión de dos componentes químicos, el ácido hipocloroso y el hidróxido. CA. de sodio, que presentan como características principales sus propiedades. MA TI. oxidantes. Además es hipertónico (2800 mol/Kg) y muy alcalino (pH 11.5 a 11.7)4, 11.. FO R. El NaOCl fue primero recomendado como una solución antiséptica por. IN. Henry Dakin para la irrigación de heridas de los soldados en la primera guerra mundial. Posteriormente en 1920, se descubrió la solución de. MA S. E. Dakin, 0.5% NaOCl en la terapia endodóntica6.. Los beneficios que proporciona el NaOCl como irrigante durante la terapia. TE. endodóntica son: efectivo para eliminar el tejido vital y no vital, un amplio. SI S. efecto antibacteriano, destruyendo bacterias, hongos, esporas y virus; a la. DE. vez, es excelente lubricante y blanqueador, favoreciendo la acción de los instrumentos. Posee una tensión superficial baja, vida media de. A. almacenamiento prolongada, y es poco costoso12; pero por otro lado,. OF. IC. IN. tiene la desventaja de poseer una alta citotoxicidad4.. La actividad solvente, y las propiedades antimicrobianas son debidas a: a) La habilidad del NaOCl de oxidar e hidrolizar las proteínas celulares, b) La liberación de cloro, para formar ácido hipocloroso, y c) a largo plazo, su habilidad osmótica de extraer líquidos fuera de las células. Su amplia. 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(10) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. utilización en endodoncia se debe a su capacidad para disolver tejidos y a su acción antibacteriana13.. CA. Según Ohara et al., en 199313, manifestó que el ácido hipocloroso ejerce. enzimáticos. de. las. bacterias,. MA TI. su efecto por la oxidación de los grupos sulfihidrilos de los sistemas produciendo. desorganización. de. importantes reacciones metabólicas, resultando en la muerte de la. FO R. bacteria.. IN. Por otro lado, el pH alcalino (11.8) del NaOCl neutraliza la acidez del. E. medio y por lo tanto crea un ambiente inadecuado para el desarrollo. MA S. bacteriano; sin embargo, ciertos autores consideran que esta propiedad añade un componente tóxico a la solución haciendo el NaOCl más. SI S. TE. cáustico14.. La acción bactericida y de disolución de tejidos se da por tres factores:. DE. concentración, temperatura y pH de la solución. Se ha estudiado la. A. efectividad de diferentes concentraciones de NaOCl con respecto a su. IN. acción solvente y bactericida. Varios investigadores están de acuerdo en. IC. que las soluciones con una concentración más alta de NaOCl son más. OF. efectivas que las soluciones con concentraciones más bajas4.. Algunos clínicos diluyen el NaOCl al 5.25% para reducir el olor o reducir el potencial de toxicidad a los tejidos periradiculares. La dilución del NaOCl. 4. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(11) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. al 5.25% disminuye significativamente la propiedad antimicrobiana, la propiedad de disolución del tejido y la propiedad de desbridamiento del sistema de conductos14. La influencia de la concentración es bastante. CA. evidente; a mayor concentración de Hipoclorito Sódico tendremos una. MA TI. mayor acción antibacteriana. Esto es debido al hecho que una solución más concentrada proporciona más ácido hipocloroso no disociado15.. FO R. Estudios han demostrado que la capacidad antibacteriana y disolvente de. IN. una solución de NaOCl al 5.25% disminuye cuando la misma es diluida. Un irrigante ideal sería aquel que tenga efectos bactericidas máximos y. E. toxicidad mínima, algunos autores mencionan que el NaOCl no reúne. MA S. estas condiciones; así una solución al 5% es fuertemente bactericida, pero altamente tóxica y una solución al 0.5% aunque menos irritante, su. TE. efecto antibacteriano está disminuido8, 9; por el contrario, Fournier y Ercan. SI S. manifestaron que el NaOCl al 5.25% no produce mayor daño que al 2.5%. DE. y que es efectivo en la reducción de microorganismos en dientes con. A. necrosis pulpar y patología periapical16,17.. en. IN. Leonardo,. 199918,. mencionó. que. su. aplicación. en. altas. OF. IC. concentraciones ha quedado reservado al tratamiento endodóntico de lesiones perirradiculares crónicas, como abscesos dentoalveolares y granulomas periapicales, en las cuales su beneficio compensa sus efectos tóxicos. A las concentraciones de 0.5% y 1% se destina al. 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(12) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. tratamiento de necrosis, gangrenas pulpares y lesiones perirradiculares agudas o aún no evidenciables radiográficamente.. CA. El NaOCl a concentración inferior a 2.5% elimina la infección, pero a no. MA TI. ser que se utilice durante un tiempo prolongado durante el tratamiento, no es bastante consistente para disolver los restos pulpares15.. FO R. Durante los últimos años se han realizado numerosos estudios sobre la. IN. eficacia del NaOCl a diferentes concentraciones y su acción antibacterial sobre el Enterococcus faecalis1-4. Se ha estudiado la efectividad de. E. diferentes concentraciones de NaOCl con respecto a su acción solvente y. MA S. bactericida. Varios investigadores están de acuerdo en que las soluciones con una concentración más alta de NaOCl son más efectivas que las. SI S. TE. soluciones con concentraciones más bajas3.. DE. Siqueira y col., en el 200019, analizaron el efecto antibacteriano in Vitro producido por el empleo de soluciones de NaOCl a 1%, 2.5% y 5.25%. A. después de la preparación biomecánica de canales radiculares sobre el E.. IN. faecalis. Los resultados mostraron que todas las soluciones estudiadas. OF. IC. reducían significativamente el número de células bacterianas en el canal radicular, a través de la constatación microscópica de la presentación de grandes zonas de inhibición contra Enterococcus faecalis.. 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(13) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Souza y col., en 199220, evaluaron la efectividad antibacteriana de diferentes concentraciones de NaOCl (1%, 0.5%, 0.25% y 0.12%) en diferentes intervalos de tiempo: 15, 30, 45, 60 y 75 segundos, conos de. CA. papel absorbente esterilizados fueron contaminados con suspensiones de. MA TI. Cándida albicans y Enterococcus faecalis durante 4 minutos. Los resultados mostraron que en el periodo de 15 segundos fue posible eliminar la especie Enterococcus faecalis con las soluciones de NaOCl en. IN. FO R. las concentraciones de 0.5% y 1%.. Clegg y col., en el 200621, afirman que la única concentración capaz de. E. remover físicamente la capa de biofilm y volver no viables las bacterias es. MA S. NaOCl al 6%.. TE. Carson y col., en el 200422, estudiaron, in Vitro, las zonas de inhibición. SI S. bacteriana de varias soluciones y llegaron a la conclusión de que la. DE. solución de NaOCl al 6% es más efectiva que al 3%.. A. Spano y col., en el 200123, encontraron que la solución al 5% disuelve los. IN. tejidos pulpares necróticos más rápido que la solución al 2,5%. Sin. OF. IC. embargo, tanto Siqueira y Col.19, así como Baumgartner y Cuenin24, encontraron que la concentración de la solución de NaOCl no es tan importante como el cambio constante de la solución y su uso en cantidades significativas.. 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(14) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Otro de los factores que influye en la eficacia antibacteriana del NaOCl y es reportado por muchos autores, es acerca de la temperatura1, 4, 6-8,14.. CA. La Temperatura es un factor importante, ya que si ésta aumenta, la acción. MA TI. del NaOCl se incrementa de manera significativa. Algunos autores han reportado que el calentamiento de la solución de NaOCl produce una. FO R. disolución de los tejidos más rápidamente7, 8, 14.. moléculas,. las. cuales. contactarán. IN. Al aplicar calor a una solución se aumenta la energía cinética de las más. rápido. y. producirán. la. MA S. E. desintegración de las superficies que contacten en un tiempo menor14.. El aumento de la temperatura tiene un efecto positivo sobre la acción. TE. disolvente del NaOCl. Temperaturas de 35,5ºC aumentan el poder. SI S. solvente sobre tejidos necróticos y en tejidos frescos se obtiene el mayor. DE. efecto a 60ºC14. Para calentarlo se pueden utilizar los calentadores de café, que mantienen una temperatura de 37ºC, se coloca agua y. IN. A. posteriormente las jeringas con el NaOCl6.. OF. IC. El calentamiento de la solución aumenta su efecto bactericida, pero se debe tener precaución al calentarlo a 37ºC, ya que se mantiene estable por no más de 4 horas antes de degradarse, por lo que no se recomienda recalentar la solución6, 14.. 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(15) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Sirtes y col., en el 200525, encontraron que el calentamiento del NaOCl aumenta bastante la capacidad antibacteriana y de disolución de tejidos, concluyeron que la solución de NaOCl al 1% a 45ºC es tan efectiva como. MA TI. CA. la solución al 5,25% a 20ºC.. Cunninghan y col., en 198226, demostraron que el NaOCl al 5,25% y 2,6% eran igual de eficaces a una temperatura de 37ºC. Sin embargo, a. IN. FO R. temperatura ambiente (21ºC), la solución al 2,6% resultaba menos eficaz.. Gambarini en 199827, refiere que se ha comprobado que al aumentar la. E. temperatura se mejora el desbridamiento, las propiedades bactericidas y. MA S. disolutorias y que este aumento no afecta la estabilidad química de la solución, aunque recomienda cierta precaución ya que no se sabe que. SI S. TE. daño puede causar a los tejidos periapicales.. DE. Harrison y col., en 199028, evaluaron el efecto antimicrobiano del NaOCl a 2.5% y 5,25% sobre las especies Enterococcus faecalis y Candida. A. albicans, en periodos variando de 15 a 120 segundos. Después de 45. IN. segundos de exposición al NaOCl a 2.5% no hubo crecimiento de. OF. IC. Enterococcus faecalis. La especie Candida albicans fue eliminada después de un período de 15 segundos de contacto con las soluciones.. Diversos estudios han revelado que la microbiota de los dientes con fallas en el tratamiento endodóntico difiere de la microbiota encontrada. 9. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(16) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. normalmente en los conductos de dientes no tratados. La microbiota que se encuentra en los dientes con fracaso en el tratamiento endodóntico es predominantemente anaerobia facultativa y Gram positiva, siendo el. MA TI. CA. Enterococcus faecalis la especie que se aísla con mayor frecuencia29.. El Enterococcus faecalis es una bacteria en forma de coco dispuesta en cadenas o pares, Gram positiva, anaerobia facultativa, inmóvil y no. FO R. esporulada que en años recientes, ha atraído la atención de diversos. IN. investigadores porque ha sido identificada como una causa frecuente de infección del sistema de conductos radiculares en dientes con fracaso en. E. el tratamiento endodóntico30. Una característica notable de esta especie la. MA S. constituye su capacidad para sobrevivir y crecer en microambientes que pudieran ser tóxicos para otras bacterias, entre estos en presencia de. preparaciones. SI S. utilizando. TE. Hidróxido de Calcio29. Su erradicación del conducto radicular es difícil químicomecánicas. e. irrigantes. como. DE. desinfectantes, así como pastas antibacterianas30.. A. La temperatura óptima de crecimiento in vitro de este microorganismo es. IN. de 35ºC, no obstante, se ha observado crecimiento entre 10ºC y 45ºC.. OF. IC. Una característica notable de Enterococcus faecalis la constituye su capacidad para sobrevivir y crecer en microambientes que pudieran ser tóxicos. para. muchas. bacterias,. en. particular. zonas. con. altas. concentraciones de sales (6,5% de Cloruro de Sodio), temperaturas extremas (15-60ºC) y puede resistir además a la acción de colorantes. 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(17) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. como Azul de Metileno al 0,1%. Esta capacidad de resistencia por parte del Enterococcus faecalis en microambientes tóxicos está relacionada con su capacidad de supervivencia en los conductos radiculares de dientes. CA. que han sido sometidos a tratamiento endodóntico y en los cuales los. MA TI. nutrientes son limitados, añadiéndose a esta situación el hecho de que algunos agentes antimicrobianos pudieran influir en que esta especie. FO R. permanezca en los conductos de los dientes afectados29.. IN. Cabe destacar el trabajo de Baumgartner y cols.199224, quienes estudiaron las bacterias que se aislaban en los 5mm apicales de dientes. E. con lesión periapical. Encontraron más de 50 especies de bacterias de las. MA S. cuales 34, el 68%, eran anaerobias estrictas. Las especies aisladas más frecuentemente fueron: Actinomyces spp., Lactobacillus spp., Bacteriodes. TE. no pigmentados, Veillonella spp., Enterococcus faecalis, Fusobacterium. DE. SI S. nucleatum y Streptococcus mutans.. Una variedad de agentes antimicrobianos han sido evaluados por su. A. habilidad para eliminar el Enterococcus faecalis del sistema del conducto. IN. radicular. Esto incluye preparaciones entre citas, tales como Hidróxido de. OF. IC. calcio, Paramonoclorofenol, Fenol Alcanforado y combinaciones de antibióticos-esteroides,. así. como. irrigantes. tales. como. NaOCl,. Digluconato de Clorhexidina, Acetato de Clorhexidina y componentes iodino31.. 11. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(18) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. El presente estudio servirá como guía para orientar al profesional estomatólogo a optar por medios que sean eficientes y además con un bajo efecto citotóxico en la irrigación de conductos radiculares durante la. CA. terapia pulpar puesto que, por la bibliografía revisada, aún existe mucha. utilizada. en. este. tipo. de. tratamiento. y. MA TI. controversia acerca de la concentración y temperatura adecuada a ser mayor. aún. frente. a. microorganismos resistentes como el Enterococcus faecalis. Por lo cual el. FO R. propósito de esta investigación es la evaluación in Vitro de la eficacia. IN. antibacteriana del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% a diferentes. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. Temperaturas frente a cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212)”.. 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(19) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 1.. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ¿Cuál es la eficacia antibacteriana in Vitro del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% a diferentes Temperaturas frente a cepas de. MA TI. 2.. CA. Enterococcus faecalis (ATCC 29212)?. HIPÓTESIS. El Hipoclorito de Sodio al 1% y 2.5% a 45ºC produce, in Vitro una. FO R. eficacia antibacteriana similar al Hipoclorito de Sodio al 5.25% a. E. IN. 20ºC y 37º C frente a cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212).. OBJETIVOS. Objetivo General. TE. 3.1.. MA S. 3.. SI S. Evaluar in Vitro la eficacia antibacteriana del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% a 20ºC, 37ºC y 45ºC frente a. Objetivos Específicos. OF. IC. IN. 3.2.. A. DE. cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212).. 1. Determinar. mediante. pruebas. in. Vitro. la. eficacia. antibacteriana del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% frente a. cepas de Enterococcus faecalis (ATCC. 29212) a una temperatura de 20ºC.. 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(20) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2. Determinar. mediante. pruebas. in. Vitro. la. eficacia. antibacteriana del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% frente a. cepas de Enterococcus faecalis (ATCC. mediante. pruebas. MA TI. 3. Determinar. CA. 29212) a una temperatura de 37ºC.. in. Vitro. la. eficacia. antibacteriana del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y cepas de Enterococcus faecalis (ATCC. FO R. 5.25% frente a. IN. 29212) a una temperatura de 45ºC.. E. 4. Comparar la eficacia antibacteriana, in Vitro, del Hipoclorito. MA S. de Sodio según Concentración y Temperatura, frente a. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212).. 14. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(21) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. II.. 2.1.. MATERIAL Y MÉTODOS. TIPO Y ÁREA DE ESTUDIO. CA. El presente diseño de estudio fue del tipo experimental in Vitro y. MA TI. se desarrolló en el Laboratorio de Microbiología de la Facultad de. 2.2.. FO R. Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.. POBLACIÓN Y MUESTRA. IN. Conformada por un microorganismo de ensayo seleccionado el cual fue la especie representativa de bacterias Gram positivas:. E. Enterococcus faecalis (ATCC 29212) procedente de una muestra. MA S. proporcionada por el Laboratorio de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo sembradas en. SI S. TE. medio de tioglicolato en tubos de ensayo.. DE. 2.2.1. CRITERIOS DE SELECCIÓN -. Cepa preparada de Enterococcus faecalis (ATCC 29212). A. sembradas en medio de tioglicolato en tubos de ensayo. Que hayan tenido como máximo 4 pasadas. (De. preferencia certificadas).. OF. IC. IN. -. 2.3.. CONSIDERACIONES ÉTICAS. Se tuvo en cuenta la manipulación y desecho de las muestras sobretodo de las cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212) de. 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(22) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. acuerdo. al. manual. de. Bioseguridad. en. Laboratorios. de. Microbiología y Biomedicina durante la ejecución del trabajo,. DISEÑO ESTADÍSTICO DEL MUESTREO. MA TI. 2.4.. CA. previas autorizaciones.. 2.4.1. UNIDAD DE ANÁLISIS. FO R. La unidad de análisis fue constituida por cada placa petri. IN. con el Enterococcus faecalis (ATCC 29212) sembrado en medio agar-sangre a 37ºC por 24 horas correspondiente a. MA S. E. cada combinación de tratamiento (ANEXO 1).. 2.4.2. TAMAÑO DE MUESTRA. TE. El tamaño de muestra estuvo formado por 96 observaciones. SI S. [tubos de ensayo con medio tioglicolato sembrados con. DE. Enterococcus faecalis (ATCC 29212)] para un diseño bifactorial completamente al azar, 4x3, con 8 observaciones. A. experimentales (ANEXO 2) por cada combinación de. OF. IC. IN. tratamiento. Considerando un nivel de confianza del 95% y una potencia de prueba del 80%.. 16. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(23) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.5.. METODO Y TÉCNICAS. 2.5.1. OBTENCIÓN DE LA CEPA. CA. El Enterococcus faecalis (ATCC 29212) fue obtenido del. MA TI. cepario del Banco Bacteriológico del Laboratorio de la Sección de Microbiología de la Facultad de Medicina de la. FO R. Universidad Nacional de Trujillo.. IN. 2.5.2. PREPARACIÓN DE LA CEPA. Una vez obtenida la cepa, ésta fue cultivada en tubos de. E. ensayo con tapa rosca conteniendo el medio Agar sangre -. MA S. Soya tripticasa, incubándose bajo condiciones anaerobias a 37ºC con el fin de obtener colonias jóvenes. Luego de 24. TE. horas de cultivadas se las sembró en solución salina estéril,. SI S. hasta obtener una turbidez semejante al tubo número 1 de. DE. la escala de Mac Farland.. A. Los tubos que contenían la bacteria estudiada, fueron. OF. IC. IN. girados entre las manos durante 30 segundos, antes de proceder al sembrado, para distribuir los microorganismos adecuadamente.. 17. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(24) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.5.3. SEMBRADO Las. cepas. fueron. sembradas. en. tubos. de. ensayo. 2.5.4. PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD. MA TI. de Hipoclorito de Sodio utilizada32-34.. CA. conteniendo medio tioglicolato con cantidad de acuerdo a la. FO R. Previamente las soluciones fueron divididas en grupos: Grupo I: solución de Hipoclorito de Sodio al 1%.. . Grupo II: solución de Hipoclorito de Sodio al 2.5%.. . Grupo III: solución de Hipoclorito de Sodio al 5.25%.. . Grupo IV: solución salina fisiológica (grupo control).. -. Para la prueba de susceptibilidad, se preparó las. TE. MA S. E. IN. . SI S. soluciones, obteniendo así, un total de 4 soluciones. DE. pertenecientes a los grupos de estudio. -. 1ml de cada grupo de estudio fue colocado en 3 tubos de. OF. IC. IN. A. ensayo conteniendo caldo de tioglicolato con la cepa de. -. Enterococcus faecalis sembrada. Seguidamente cada tubo de ensayo por grupo fue colocado a 20ºC, 37ºC y 45ºC. por un tiempo de 3 min.. -. Posteriormente de cada tubo de ensayo, se tomó una décima de ml para inocularla en placas conteniendo agar-sangre a 37ºC, dispersando la gota con la espátula. 18. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(25) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. de Driglasky de manera homogénea, para hacer el recuento de las Unidades Formadoras de Colonias luego de 24 horas, mediante la inspección visual de cada. Si algún tubo presentó demasiada turbidez a la. MA TI. -. CA. placa.. inspección visual fue diluido 102 para facilitar el recuento de colonias.. El procedimiento se realizó 8 veces para cada grupo. FO R. -. IN. (ANEXO 3).. E. VARIABLES DE ESTUDIO Y ESCALA DE MEDICIÓN. MA S. 2.6.. Eficacia. Dependiente. SI S. antibacteriana. Concentración. DE. TIPO. ESCALA. Unidad Formadora. Cuantitativa. De. de Colonias (UFC). continua. Razón. Cualitativa. Nominal. Temperatura. Cualitativa. Nominal. Hipoclorito de Sodio. al 1%, 2.5% y 5.25% 20ºC, 37ºC, 45ºC. IC. IN. A. Independiente. INDICADOR. TE. VARIABLES. DEFINICIÓN DE VARIABLES. OF. 2.7.. A) Eficacia antibacteriana Definición conceptual: Es la capacidad de lograr el efecto antibacteriano proporcionado por agentes químicos, es decir que pueden inhibir el crecimiento bacteriano pero no matar a las. 19. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(26) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. bacterias, o producir la muerte de las mismas. La capacidad de un agente antibacteriano para inhibir o producir la muerte de las bacterias depende de su concentración y temperatura35.. CA. Definición operacional: En el presente estudio la eficacia. Unidades. Formadoras. MA TI. antibacteriana se midió con el registro del número promedio de de. Colonias. del. crecimiento. del. Enterococcus faecalis. Se consideró de más efectividad a la. FO R. concentración y temperatura que logre la menor formación del. IN. número de colonias. Considerándose solución no efectiva cuando a la inspección visual se registre formación de colonias,. E. y efectiva cuando no se observe formación de colonias del. TE. MA S. crecimiento del Enterococcus faecalis (ATCC 29212).. B) Concentración. SI S. Definición conceptual: Relación que existe entre la cantidad. DE. de una sustancia disuelta y la del disolvente en una disolución36.. A. Definición operacional: Solución de Hipoclorito de Sodio. IN. usada en concentración de 1%, 2.5% y 5.25%; que servirán. OF. IC. para evaluar la eficacia antibacteriana sobre una bacteria. anaerobia facultativa Enterococcus faecalis (ATCC 29212).. 20. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(27) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. C) Temperatura: Definición conceptual: La temperatura es una medida del calor o energía térmica de las partículas en una sustancia37.. CA. Definición operacional: Solución de Hipoclorito de Sodio. MA TI. usada a temperaturas de 20ºC, 37ºC y 45ºC que sirvieron para evaluar la eficacia antibacteriana sobre una bacteria anaerobia. ANÁLISIS ESTADÍSTICO. IN. 2.8.. FO R. facultativa Enterococcus faecalis (ATCC 29212).. Para la presente investigación se utilizó tablas de resumen con los. E. indicadores media, desviación estándar y coeficiente de variación.. información.. MA S. Así mismo, se utilizó gráficos para presentar los resultados de la. TE. Para determinar si existe diferencia de la eficacia antibacteriana del. SI S. Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% a diferentes. DE. Temperaturas frente a cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212) se utilizó el Análisis de Varianza para un diseño bifactorial. A. 4x3, correspondiente a un diseño completamente al azar (ANEXO. IN. 3), considerando un nivel de significancia de 0.05. Para determinar. OF. IC. si existe diferencia entre las combinaciones de los niveles de cada factor se utilizó la Prueba de Duncan, considerando un nivel de significancia de 0.05. Para el procesamiento de datos se utilizó el apoyo de una hoja de cálculo y el programa estadístico SPSS (Stadistical Package for Social Science) versión 15.0.. 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(28) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. III. RESULTADOS. En el presente estudio fueron analizadas 91 placas petri sembradas en. (ATCC. 29212),. previamente. expuestas. a. 3. diferentes. MA TI. faecalis. CA. medio agar-sangre, en las cuales se colocó las cepas de Enterococcus. concentraciones de Hipoclorito de Sodio y con 3 diferentes temperaturas. Después de 24 horas de incubación a 37ºC se obtuvo los siguientes. FO R. resultados tabulados en tablas de una y doble entrada de acuerdo a los. IN. objetivos planteados.. E. La tabla Nº 1 muestra la distribución de cultivos en placas petri. MA S. procesados en número promedio de unidades formadoras de colonias según concentración de Hipoclorito de Sodio. Determinándose que el. TE. promedio de unidades formadoras de colonias encontradas con el uso de. SI S. Hipoclorito de Sodio al 1% fue de 0.913 ± 0.949, al 2.5% fue de 0.652 ±. DE. 1.112 y al 5.25% fue de 0.591 ± 0.796. Lo cual evidenció una similar. IN. Sodio.. A. eficacia antibacteriana con todas las concentraciones de Hipoclorito de. OF. IC. La tabla Nº 2 muestra la distribución de cultivos en placas petri procesados en número promedio de unidades formadoras de colonias. según. concentración. de. Hipoclorito. de. Sodio. y. Temperatura.. Determinándose que el promedio de unidades formadoras de colonias. 22. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(29) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. encontradas con el uso de Hipoclorito de Sodio al 1%, al 2.5% y al 5.25% con las temperaturas de 20ºC, 37ºC y 45ºC fue similar.. CA. La tabla Nº 3 muestra el Análisis de Varianza para las unidades. MA TI. formadoras de colonias según Concentración de Hipoclorito de Sodio y Temperatura. Determinándose que no existe diferencia estadística significativa entre la eficacia antibacteriana del Hipoclorito de Sodio al 1%,. IN. FO R. 2.5% y 5.25% con relación a las temperaturas de 20ºC, 37ºC y 45ºC.. La tabla Nº 4 compara la eficacia antibacteriana de las concentraciones. E. de Hipoclorito de Sodio entre sí frente a cepas de Enterococcus faecalis. MA S. (ATCC 29212) mediante la Prueba de Duncan. Determinándose que no existe diferencia estadística significativa entre la eficacia antibacteriana. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25%.. 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(30) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA Nº 1. DISTRIBUCIÓN DE CULTIVOS EN PLACAS PETRI PROCESADAS EN. CA. NÚMERO PROMEDIO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS SEGÚN. Promedio. 1%. 0.913. 2.5%. 0.652. 5.25%. 0.591. DE. 0.949 1.112 0.796. E. IN. FO R. Hipoclorito de Sodio. MA TI. CONCENTRACIÓN DE HIPOCLORITO DE SODIO. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. Fuente: Información obtenida de las pruebas. 24. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(31) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA Nº 2. CA. DISTRIBUCIÓN DE CULTIVOS EN PLACAS PETRI PROCESADAS EN. MA TI. NÚMERO PROMEDIO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS SEGÚN CONCENTRACIÓN DE HIPOCLORITO DE SODIO Y TEMPERATURA. Temperatura. 20º C 37º C. IN. 1%. Promedio de Unidades formadoras de colonias. FO R. Hipoclorito de Sodio. 1 0. 20º C. 1. MA S. E. 45º C 37º C. 1. 45º C. 0. 20º C. 1. 37º C. 1. 45º C. 0. DE. SI S. 5.25%. TE. 2.5%. 2. OF. IC. IN. A. Fuente: Información obtenida de las pruebas. 25. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(32) CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. MA TI. TABLA Nº 3. ANÁLISIS DE VARIANZA PARA LAS UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS SEGÚN CONCENTRACIÓN DE. IN. GRADOS DE LIBERTAD. CUADRADO MEDIO. F. P. 4066220877840810000.0. 122.699. 0.000. 2. 6791412592100270.0. 0.205. 0.815. 6. 7138557033328870.0. 0.215. 0.971. 33139692585895100.0. 12198662633522400000. 3. Temperatura. 13582825184200500. Hipoclorito de Sodio * Temperatura. 42831342199973200. Error. 2618035714285720000. 79. Total. 14904175803283500000. 90. DE. SI S. TE. MA S. Hipoclorito de sodio. E. FUENTE VARIACIÓN SUMA DE CUADRADOS. FO R. HIPOCLORITO DE SODIO Y TEMPERATURA. OF. IC. IN. A. Fuente: Información obtenida de las pruebas. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/. 26.
(33) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA Nº 4 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA ANTIBACTERIANA DEL HIPOCLORITO DE SODIO A DIFERENTES CONCENTRACIONES. PRUEBA DE DUNCAN N. Sodio. Nivel de significancia 0.05. 22. 0.59. 2.5%. 23. 0.65. 1%. 23. Control. 23. 2. IN. 5.25%. E. 1. FO R. Hipoclorito de. MA TI. CA. FRENTE A CEPAS DE Enterococcus Faecalis (ATCC 29212). MA S. 0.91. 843478260.87. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. Fuente: Información obtenida de las pruebas. 27. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(34) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IV. DISCUSIÓN. La eliminación de las bacterias durante el tratamiento de conductos es un. CA. factor fundamental para lograr el éxito de la endodoncia, debido a que se. debidas. MA TI. ha demostrado que muchas alteraciones pulpares y periapicales son a la presencia de microorganismos dentro del sistema de. FO R. conductos radiculares4, 5, 6.. IN. La irrigación, acompañada de aspiración, es un auxiliar muy importante durante la instrumentación del conducto radicular cuyo objetivo es la. E. remoción de los detritos, la remoción del número de bacterias existentes. MA S. en el interior de los conductos radiculares, tanto por la acción mecánica. TE. como por la acción antimicrobiana de la solución utilizada5, 8, 9.. SI S. El Hipoclorito de Sodio (NaOCl) ha sido y es aún el irrigante más utilizado. DE. en la endodoncia moderna, pues presenta una acción disolvente sobre el tejido necrótico y restos orgánicos y además es un potente agente. A. antimicrobiano10; sin embargo también posee desventajas, la principal es. OF. IC. IN. su toxicidad14.. En el presente estudio se utilizó Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% a las temperaturas de 20ºC, 37ºC y 45ºC. Los resultados indican que el uso de Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% presenta una eficacia antibacteriana similar a las temperaturas de 20ºC, 37ºC y 45ºC; A pesar. 28. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(35) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. que el promedio de unidades formadoras de colonias a 45ºC fue menor que a las temperaturas de 20ºC y 37ºC.. CA. Siqueira y col., en el 200019, analizaron el efecto antibacteriano in Vitro. MA TI. producido por el empleo de soluciones de NaOCl a 1%, 2.5% y 5.25% después de la preparación biomecánica de canales radiculares sobre el E. faecalis. Los resultados mostraron que todas las soluciones estudiadas. FO R. reducían significativamente el número de células bacterianas en el canal. IN. radicular, a través de la constatación microscópica de la presentación de grandes zonas de inhibición contra Enterococcus faecalis, lo cual fue. eficacia antibacteriana.. MA S. E. similar a lo encontrado en el presente trabajo realizado, en relación a la. TE. En este trabajo de estudio realizado se pudo encontrar resultados. SI S. semejantes a lo demostrado por Fournier y Ercan, quienes manifestaron. DE. que el NaOCl al 5.25% y al 2.5% son tan efectivos en la reducción de microorganismos. en. dientes. con. necrosis. pulpar. y. patología. A. periapical16,17, con la diferencia que nuestro estudio fue in Vitro y además. OF. IC. IN. estuvo presente la variable Temperatura.. Siqueira y Col.19, así como Baumgartner y Cuenin24, encontraron que la concentración de la solución de NaOCl no es tan importante como el cambio constante de la solución y su uso en cantidades significativas, lo. 29. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(36) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. cual se pudo apreciar en el trabajo realizado al no encontrar diferencias significativas entre las diferentes concentraciones estudiadas.. CA. En el presente trabajo se encontraron resultados similares a los descritos. MA TI. por Sirtes y col., en el 200525, quienes encontraron que el calentamiento del NaOCl aumenta bastante la capacidad antibacteriana y de disolución de tejidos, los cuales concluyeron que la solución de NaOCl al 1% a 45ºC. FO R. es tan efectiva como la solución al 5,25% a 20ºC; lo cual fue similar en. IN. relación a la eficacia antibacteriana, pero no se encontró a la temperatura. E. como un factor relevante.. MA S. La eficacia antibacteriana encontrada en relación al Hipoclorito de Sodio se pudo corroborar con lo demostrado por Cunninghan y col., en 198226,. TE. quién encontró que el NaOCl al 5,25% y 2,6% eran igual de eficaces a. SI S. una temperatura de 37ºC, resultados también obtenidos en este trabajo,. DE. pero además encontrando resultados similares con las temperaturas de. A. 20ºC y 45ºC.. IN. Finalmente en el presente estudio de investigación se encontró que el uso. OF. IC. del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% presenta una eficacia antibacteriana similar frente a cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212), independientemente de las temperaturas 20º C, 37º C y 45º C; con lo cual podemos afirmar que tanto las diferentes concentraciones y. 30. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(37) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. temperaturas no tuvieron un factor determinante en relación a la eficacia. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. antibacteriana.. 31. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(38) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. V. CONCLUSIONES. CA. 1. El uso in Vitro del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% frente a. MA TI. cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212) a una temperatura de 20ºC, tiene una eficacia antibacteriana altamente significativa. 2. El uso in Vitro del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% frente a. FO R. cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212) a una temperatura de. IN. 37ºC, tiene una eficacia antibacteriana altamente significativa. 3. El uso in Vitro del Hipoclorito de Sodio al 1%, 2.5% y 5.25% frente a. E. cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212) a una temperatura de. MA S. 45ºC, tiene una eficacia antibacteriana altamente significativa. 4. No existe diferencia significativa entre la eficacia antibacteriana del. TE. Hipoclorito de sodio según concentración y temperatura frente a cepas. SI S. de Enterococcus faecalis (ATCC 29212).. DE. 5. El Hipoclorito de Sodio al 1% y 2.5% a 45ºC produce, in Vitro una eficacia antibacteriana similar al Hipoclorito de Sodio al 5.25% a 20ºC. OF. IC. IN. A. y 37ºC frente a cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212).. 32. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(39) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VI. RECOMENDACIONES Se sugiere:. CA. 1. Para determinar la eficacia antibacteriana del Hipoclorito de Sodio. MA TI. según concentración y temperatura frente a cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212), realizar posteriores estudios in Vivo.. FO R. 2. Evaluar en estudios posteriores la eficacia antibacteriana del Hipoclorito de Sodio según concentración y temperatura en otras. IN. cepas resistentes en el tratamiento de conductos.. E. 3. Evaluar en estudios posteriores la eficacia antibacteriana de otros. MA S. irritantes según concentración y temperatura frente a cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212).. TE. 4. Evaluar en estudios posteriores la eficacia antibacteriana del. SI S. Hipoclorito de Sodio según concentración y tiempo de exposición. OF. IC. IN. A. DE. frente a cepas de Enterococcus faecalis (ATCC 29212).. 33. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(40) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1.. Álvarez A, Sánchez C, Moreno W, Orozco L. Terapia de conductos. CA. en una cita: Un estudio clínico. Revista de la Asociación Dental. 2.. MA TI. Mexicana 2003; 60 (6): 207-211.. Calderón V, Ximénez L, Chávez E. Estudio comparativo in vitro de la capacidad antibacteriana de la clorhexidina, hidróxido de calcio y. FO R. yoduro de potasio yodado contra Fusobacterium nucleatum. Revista. 3.. IN. Odontológica Mexicana 2007; 11 (1): 30 – 37.. Herrera DR, Tay LY, Kose-Jr C, Andrade TM, Rezende EC,. E. Kozlowski Jr VA, Santos EB. Efecto antibacteriano del hidróxido de. MA S. calcio y iodoformo sobre Enterococcus faecalis y Pseudomonas aeruginosa. Rev Estomatol Herediana. 2008; 18(1):5-8. Balandrano P. Soluciones para irrigación en endodoncia: Hipoclorito. TE. 4.. SI S. de sodio y gluconato de clorhexidina. Revista Científica Odontológica. 5.. DE. CCDCR 2007; 3 (1): 11 – 14. Pappen F, Bolzani L, Rodríguez S, Amaral MR, Tanumaru F. Efecto. A. antimicrobiano de soluciones irrigadoras utilizadas en endodoncia.. IC. Cohen S, Burns RC. Vías de la pulpa. Novena edición. Editorial. OF. 6.. IN. Rev Estomatol Herediana 2003; 13 (1 – 2): 9 – 11.. Mosby. España. 2008: 493 – 510.. 7.. Ingle JL, Bakland LK. Endodoncia. Quinta edición. Editorial Mc Graw – Hill Interamericana. México. 2004: 4 – 67.. 34. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(41) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 8.. Leonardo MR, Leal JM. Endodoncia, Tratamiento de los Conductos Radiculares. Segunda edición. Editorial Médica Panamericana. Argentina. 1994. 112-146. Soares IL Goldberg F. Endodoncia: Técnica y Fundamentos. Primera. CA. 9.. MA TI. edición. Editorial Médica Panamericana. Argentina 2002: 127 – 129. 10. Glossary: American Association of Endodontics. Contemporary terminology for Endodontics. 6th ed. Chicago, 1998.. FO R. 11. Rodríguez I, Rodríguez M, Rodríguez E. Uso de sustancias. IN. irrigadoras complementarias en endodoncia para la eliminación de la capa de barro dentinario propuesta de un protocolo de irrigación.. E. Revista de la Facultad de Odontología de Carabobo. [en línea]. 2003.. MA S. vol.5, no.1 [citado 10 Mayo 2009], p.1-6 URL disponible en: http://servicio.cid.uc.edu.ve/odontologia/revista/v5n1/5-1-6.pdf.. TE. 12. Azuero M, Herrera C. Irrigantes de uso endodóntico. Pontificia. SI S. Universidad Javeriana [en línea]. Enero 2006.[citado 17 Abril 2009], 1-15. URL. Disponible. en:. DE. p.. tml.. A. http://www.javeriana.edu.co/academiapgendodoncia/i_a_revision31.h. IN. 13. Ohara PK, Torabinejad M. Antibacterial effects of various endodontic. OF. IC. irrigants on selected anaerobic bacteria. Endod Dent Traumatol. 1993; 9: 95-100.. 14. Jaquez E. y Marcano M. Una visión actualizada del uso del hipoclorito de sodio en endodoncia. Rev. Venezolana El Odontólogo Invitado. [en línea] Nov. 2001, [citado 18 Abril 2009], p. 1-12 URL. 35. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
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(46) IN. FO R. MA TI. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. ANEXOS. 40. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(47) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 1. CA. NÚMERO DE PLACAS PARA CADA COMBINACIÓN DE. MA TI. TRATAMIENTO. TEMPERATURAS (° C). SOLUCIONES POR. FO R. CONCENTRACIÓN. 37º C. 20º C. IN. Hipoclorito de Sodio al. 45º C. E. 1%. 2.5%. TE. Hipoclorito de Sodio al. OF. IC. IN. A. DE. Fisiológica. SI S. 5.25% Solución salina. MA S. Hipoclorito de Sodio al. 41. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(48) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 2. CA. Fórmula para determinar el número de observaciones por cada. MA TI. combinación de tratamiento: 2. (Zα/2 + Zβ) Τd2 n = --------------------------. FO R. = d. ; Considerando que: Τd. 2. IN. (d). E. Entonces: n = (1.96 + 0.84)2 n. =. MA S. n = 7.84. 8. Número. de. observaciones. por. cada. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. combinación de tratamiento.. 42. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(49) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 3 ESQUEMA DE LA PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD Primero 1ml de cada solución será colocada en tres tubos de ensayo. CA. en medio tioglicolato con la cepa Enterococcus faecalis sembrada.. min. 2. 3. 4. 1. 2. 3. 4. 1. 2. 3. 4. MA S. E. IN. FO R. 1. MA TI. Luego cada grupo será expuesto a diferentes temperaturas por 3. 20º C. 37º C. 45º C. TE. 1. Grupo I: solución de Hipoclorito de Sodio al 1%. 2. Grupo II: solución de Hipoclorito de Sodio al 2.5%.. SI S. 3. Grupo III: solución de Hipoclorito de Sodio al 5.25%.. . DE. 4. Grupo IV: solución salina fisiológica (grupo control). Seguidamente se tomará una décima de mililitro de cada tubo. IN. A. para inocularla en placas conteniendo agar sangre a 37ºC por. 1. 2. 3. 4. OF. IC. 24 horas para su incubación.. . A las 24 horas se realizará el recuento de las Unidades Formadoras de Colonias (UFC) en cada placa.. 43. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(50) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 4 FICHA DE RECOLECCION DE DATOS. RECUENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS PARA. ( en º C). HIPOCLORITO DE SODIO AL 1% - GRUPO I (UFC/ml). CA. Temperatura. Placa Placa Placa Placa Placa Placa Placa Placa 2. 3. 4. 5. 20º C. 7. 8. Promedio. FO R. 37º C. 6. MA TI. 1. E. IN. 45º C. RECUENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS PARA. ( en º C). HIPOCLORITO DE SODIO AL 2.5% - GRUPO II (UFC/ml). MA S. Temperatura. Placa Placa Placa Placa Placa Placa Placa Placa 2. 20º C. 4. 5. 6. 7. 8. Promedio. SI S. 37º C. 3. TE. 1. OF. IC. ( en º C). RECUENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS PARA. IN. Temperatura. A. DE. 45º C. HIPOCLORITO DE SODIO AL 5.25% - GRUPO III (UFC/ml). Placa Placa Placa Placa Placa Placa Placa Placa 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Promedio. 20º C 37º C 45º C. 44. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(51) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 5. FICHA DE RECOLECCION DE DATOS. ( en º C). RECUENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS PARA. CA. Temperatura. SOLUCIÓN SALINA FISIOLÓGICA - GRUPO CONTROL - GRUPO IV. MA TI. (UFC/ml). Placa Placa Placa Placa Placa Placa Placa Placa 1. 2. 3. 4. 5. 7. 8. Promedio. FO R. 20º C. 6. 37º C. MA S. E. IN. 45º C. DIFERENTES. SI S. CONCENTRACIÓN. TE. UNIDAD FORMADORA DE COLONIAS (UFC/ml) A. SOLUCIONES POR. 20º C. TEMPERATURAS (°C) 37º C. 45º C. DE. Hipoclorito de Sodio al 1% (Grupo I). A. Hipoclorito de Sodio al. IN. 2.5% (Grupo II). IC. Hipoclorito de Sodio al. OF. 5.25% (Grupo III) Solución salina. Fisiológica (Grupo IV). 45. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(52) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 6 Fig 1. Muestra placas petri con medio agar sangre (A) y tubos de ensayo con caldo tioglicolato (B). B. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. A. Fig 2. Tubo de ensayo sembrado con la cepa Enterococcus faecalis en. TE. medio agar soya tripticasa (A). Tubos de ensayo 3 minutos después de faecalis a 37ºC.. SI S. colocado el Hipoclorito de Sodio, previo sembrado con el Enterococcus. B. OF. IC. IN. A. DE. A. 46. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(53) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 7 Fig 3. Sembrado en placa petri con medio agar sangre después de 3. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. minutos de colocado el Hipoclorito de Sodio a 5.25% a 37ºC.. SI S. Fig 3. Unidades formadoras de colonias con el grupo control a 37ºC (A) y Unidades formadoras de colonias con Hipoclorito de Sodio a 2.5% a 37ºC B. OF. IC. IN. A. DE. A. 47. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
(54) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 8 EVALUACIÓN DE LA TESIS. El Jurado deberá: Consignar las observaciones y objeciones pertinentes relacionados a los. CA. a.. Anotar el calificativo final.. c.. Firmar los tres miembros del jurado.. FO R. b.. MA TI. siguientes ítems.. TESIS:....................................................................................................................... ..................................................................................................................................... 1.. E. IN. ..................................................................................................................................... DE LAS GENERALIDADES:. MA S. El Título:....................................................................................................... ......................................................................................................................... 2.. TE. Tipo de Investigación:................................................................................. DEL PLAN DE INVESTIGACIÓN:. SI S. Antecedentes:................................................................................................ Justificación:.................................................................................................. DE. Problema:...................................................................................................... ......................................................................................................................... A. Objetivos:....................................................................................................... IN. Hipótesis:........................................................................................................ IC. Diseño de Contrastación:............................................................................. OF. Tamaño Muestral:....................................................................................... Análisis Estadístico:..................................................................................... 48. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.
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