Evaluación de la patogenicidad de los hongos entomopatógenos beauveria bassiana (Bassi) y metarhizium anisopliae (metchnikoff) en el control de la garrapata del ganado rhipicephalus (boophilus) microplus (canestrini) (acari: ixodidae) en su fase parasític

Texto completo

(1)

i

EVALUACIÓN DE LA PATOGENICIDAD DE LOS HONGOS

ENTOMOPATÓGENOS Beauveria bassiana (Bassi) Y Metarhizium

anisopliae (Metchnikoff) EN EL CONTROL DE LA GARRAPATA DEL

GANADO Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini) (Acari:

Ixodidae) EN SU FASE PARASÍTICA EN LOS ESTADOS LARVAL Y

NINFAL

DIANA CAROLINA VALBUENA MORENO

CRISTIÁN JAVIER ALZATE MARÍN

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS

MICROBIOLOGÍA AGRÍCOLA Y VETERINARIA

(2)

Artículo 23 de la Resolución Nº 13 de Julio de 1946

(3)

iii

EVALUACIÓN DE LA PATOGENICIDAD DE LOS HONGOS

ENTOMOPATÓGENOS Beauveria bassiana (Bassi) Y Metarhizium

anisopliae (Metchnikoff) EN EL CONTROL DE LA GARRAPATA DEL

GANADO Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini) (Acari:

Ixodidae) EN SU FASE PARASÍTICA EN LOS ESTADOS LARVAL Y

NINFAL

DIANA CAROLINA VALBUENA MORENO

CRISTIÁN JAVIER ALZATE MARÍN

Trabajo de grado presentado como requisito parcial

para optar por el titulo de Microbiología Agrícola y Veterinaria

DIRECTOR

EDISON VALENCIA

Ph. D Entomología

CO-DIRECTOR

FERNANDO CRUZ

Biólogo

Laboratorio LST

ASESOR

VICTOR ORTEGA

Medico Veterinario

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS

MICROBIOLOGÍA AGRÍCOLA Y VETERINARIA

(4)

EVALUACIÓN DE LA PATOGENICIDAD DE LOS HONGOS

ENTOMOPATÓGENOS Beauveria bassiana (Bassi) Y Metarhizium

anisopliae (Metchnikoff) EN EL CONTROL DE LA GARRAPATA DEL

GANADO Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini) (Acari:

Ixodidae) EN SU FASE PARASÍTICA EN LOS ESTADOS LARVAL Y

NINFAL

AUTORES:

DIANA CAROLINA VALBUENA MORENO

CRISTIÁN JAVIER ALZATE MARÍN

APROBADO

____________________ ____________________

Edison Valencia Fernando Cruz Ph. D Entomología Biólogo- Laboratorio LST DIRECTOR DE TESIS CO- DIRECTOR

____________________ ____________________

Amanda Varela Jesús Cortés

Bióloga- Microbióloga Ph. D. Medico Veterinario, M.Sc

(5)

v

EVALUACIÓN DE LA PATOGENICIDAD DE LOS HONGOS

ENTOMOPATÓGENOS Beauveria bassiana (Bassi) Y Metarhizium

anisopliae (Metchnikoff) EN EL CONTROL DE LA GARRAPATA DEL

GANADO Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini) (Acari:

Ixodidae) EN SU FASE PARASÍTICA EN LOS ESTADOS LARVAL Y

NINFAL

AUTORES:

DIANA CAROLINA VALBUENA MORENO

CRISTIÁN JAVIER ALZATE MARÍN

APROBADO

(6)

“Los seres humanos somos perezosos, nos olvidamos de todo, no

queremos razonar, no queremos pensar. Muchas veces nos olvidamos del

esfuerzo mental, esfuerzo que utilizamos para crear ideas y su valor es

mucho mayor; hay seres humanos que se olvidan del orgullo, necesito

estar solo porque al platicar conmigo mismo, me encuentro, me ubico,

razono y veo todo con mayor claridad. Ofrezco mi alma a los que la

necesitan, me siento feliz por lo que pienso y por lo que hago, y vivo por

cumplir mis sueños.

(7)

vii

AGRADECIMIENTOS

Al doctor Edison Valencia Pizo,

Por ser un gran maestro y director de tesis, por su

apoyo y orientación en la realización de este trabajo de investigación, al igual que por

su amistad, dedicación y respaldo en todo momento.

Al médico veterinario Jesús Cortés.

Director del Laboratorio de Parasitología de la

Universidad Nacional de Colombia, por su incondicional apoyo, orientación y respaldo

durante el tiempo de realización de este trabajo.

A los

doctores Esperanza Morales y Fernando Cruz

de la empresa

LST (Live

Systems Technology) S.A

. Por su colaboración y acertada orientación técnica en el

manejo de los insumos microbiales.

Al señor Eliécer Vivas,

por su oportuna e invaluable colaboración y apoyo para la

realización de este trabajo de investigación

.

Al médico veterinario Víctor Ortega,

propietario de la finca la Pradera, por su

incondicional apoyo, amistad y orientación, principalmente en el manejo de los

animales utilizados para esta investigación.

Al señor Juan Hernández y Familia,

gracias por su colaboración durante los

montajes de los ensayos en campo, por su hospitalidad y amabilidad.

Al doctor Bernardo Chávez

de la Universidad Nacional

,

por su orientación y

colaboración en el manejo de la parte estadística de la tesis.

Al biólogo Alfredo Fajardo

, por su oportuna colaboración en el desarrollo de la

estadística de nuestro proyecto de investigación.

A la doctora María Mercedes Martínez,

gracias por su incondicional apoyo y por

creer en éste proyecto.

A nuestros compañeros del CIAA,

Luz Stella Fuentes, Luís Alejandro Arias, Ligia

Espinosa y Nancy Niño por su oportuno apoyo en la realización de este trabajo a

demás de su amistad.

(8)

TABLA DE CONTENIDO

Página

1.

RESUMEN

1

ABSTRACT

2

2.

INTRODUCCIÓN

3

3.

OBJETIVOS

5

4.

FORMULACIÓN DEL PROBLEMA

6

5.

JUSTIFICACIÓN

7

6.

HIPÓTESIS DE TRABAJO

9

7.

REVISIÓN DE LITERATURA

10

7.1.

HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

10

7.2.

CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS

12

7.3.

PROCESO DE INFECCIÓN

13

7.3.1.

ADHESIÓN

14

7.3.2.

GERMINACIÓN

16

7.3.3.

PENETRACIÓN

17

7.3.4.

CRECIMIENTO

19

7.3.5.

DISPERSIÓN

19

7.4.

SISTEMA INMUNE DE INSECTOS CONTRA LOS HONGOS

ENTOMOPATÓGENOS.

22

7.5.

FACTORES QUE INFLUYEN EN EL ESTABLECIMIENTO Y

ACCIÓN DE LOS HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

24

7.5.1.

HÚMEDAD RELATIVA (HR)

24

7.5.2.

TEMPERATURA AMBIENTAL

25

7.5.3.

MICROAMBIENTE

25

7.5.4.

RADIACIÓN SOLAR

26

7.6.

LOS AGROQUÍMICOS Y SU INTERACCIÓN CON HONGOS

(9)

ix

7.7.

GENERALIDADES DE LOS HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

Beauveria bassiana

Y

Metarhizium anisopliae.

27

7.7.1.

Beauveria bassiana

(Bassi, 1837)

28

7.7.2.

Metarhizium anisopliae

(Metschnikoff, 1879)

29

7.8.

TAXONOMÍA DE

Beauveria bassiana

(Bassi, 1837) Y Me

tarhizium

anisopliae

(Metschnikoff, 1879)

30

7.9.

ANTECEDENTES DE LA UTILIZACIÓN DE

Beauveria bassiana

Y

Metarhizium anisopliae

EN EL CONTROL BIOLÓGICO DE LA

GARRAPATA DEL GANADO

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

31

7.10.

FORMULACIÓN DE LOS HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

32

7.11.

INSECTICIDAS BIORRACIONALES

33

8.

GARRAPATA

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

35

8.1.

GENERALIDADES

35

8.2.

TAXONOMÍA DE LA GARRAPATA

Rhipicephalus (Boophilus)

microplus

37

8.3.

DISTRIBUCIÓN

38

8.4.

MORFOLOGÍA

41

8.5.

MECANISMOS DE SUPRESIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE

POR PARTE DE

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

44

8.6.

CICLO DE VIDA DE LOS IXÓDIDOS

46

8.7.

HABITOS Y ECOLOGÍA

49

8.8.

HUÉSPEDES

50

8.9.

IMPORTANCIA SANITARIA

51

8.10.

CONTROL INTEGRADO DE GARRAPATAS

53

8.10.1.

CONTROL QUÍMICO

54

8.10.1.1

Placas en orejas

55

8.10.1.2

Acaricidas sistémicos

56

8.10.1.3.

Feromonas

56

8.10.1.4.

Baños de inmersión

56

8.10.1.5.

Baños de aspersión

57

8.10.2.

CONTROL CULTURAL

57

(10)

8.10.2.2

Quema dirigida de potreros

58

8.10.2.3

Inundación de Potreros

58

8.10.2.4.

Labores de preparación y/o conservación de potreros.

59

8.10.2.5.

Pastos antigarrapata

59

8.10.3.

CONTROL BIOLÓGICO

60

8.10.3.1.

Hongos entomopatógenos para el control de garrapatas

61

8.10.3.2.

Control biológico mediante el uso de depredadores

61

8.11.

RESISTENCIA DE LAS GARRAPATAS A LOS ACARICIDAS

61

8.11.1.

MECANISMOS DE RESISTENCIA

62

8.11.2.

MANEJO DE LA RESISTENCIA DE

Rhipicephalus (Boophilus)

microplus.

63

8.11.2.1.

MANEJO POR MODERACIÒN

63

8.11.2.2.

MANEJO POR SATURACIÒN

64

8.11.2.3.

MANEJO POR ATAQUE MÚLTIPLE

64

8.12.

VACUNAS

65

8.13.

OTRAS ALTERNATIVAS DE CONTROL

66

8.13.1.

Extractos vegetales

66

8.13.2.

Aceites

67

8.13.3.

Resistencia del hospedero

68

9.

MATERIALES Y MÉTODOS

69

9.1.

LOCALIZACIÓN

69

9.2.

FASE DE CAMPO (ESTABLO)

69

9.2.1.

ANIMALES

69

9.2.2.

RECOLECCIÓN DE TELEOGINAS DE LA GARRAPATA

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

70

9.2.3.

EVALUACIÓN DE LA PATOGENICIDAD Y VIRULENCIA EN

CAMPO DE LOS HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

Beauveria

bassiana

Y

Metarhizium anisopliae

SOBRE NINFAS

Rhipicephalus

(

Boophilus) microplus

70

9.2.4.

OBSERVACIÓN

DEL

EFECTO

DE

LOS

HONGOS

ENTOMOPATÓGENOS

Beauveria bassiana

(Bassi) Y

Metarhizium

anisopliae

(Metchnikoff) EN SU PERÍODO DE PROTECCIÓN

74

(11)

xi

9.3.1

CONFIRMACIÓN DE ESPECIE DE LA GARRAPATA

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

75

9.3.2

CRÍA DE

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

(Canestrini)

(Acari:

Ixodidae)

75

9.3.3.

EVALUACIÓN DE CEPAS FORMULADAS Y DESNUDAS DE LOS

HONGOS ENTOMOPATOGENOS

B.bassiana

y

M.anisopliae

SOBRE LARVAS DE

R. microplus

EN CÁMARA HÚMEDA.

76

9.3.4.

EVALUACIÓN DE CEPAS FORMULADAS Y DESNUDAS DE LOS

HONGOS ENTOMOPATOGENOS

B. bassiana

y

M. anisopliae

SOBRE LARVAS DE

R.microplus

EN CÁMARA SECA

78

9.3.5.

EVALUACIÓN DE DIFERENTES CONCENTRACIONES DE LOS

HONGOS

ENTOMOPATÓGENOS

Beauveria

bassiana

y

Metarhizium anisopliae

SOBRE LARVAS DE

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

78

9.3.6.

EVALUACIÓN DE LA VIRULENCIA DE LAS CEPAS

REACTIVADAS DE LOS HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

B.

bassiana

Y

M. anisopliae.

81

9.4.

ANÁLISIS DE RESULTADOS

82

10.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

83

10.1.

EVALUACIÓN DE LA PATÓGENICIDAD Y VIRULENCIA EN

CAMPO DE LOS HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

Beauveria

bassiana

Y

Metarhizium anisopliae

SOBRE NINFAS DE

R. microplus

83

10.2.

EFECTO DE LOS HONGOS ENTOMOPATÒGENOS

Beauveria

bassiana

(Bassi) Y

Metarhizium anisopliae

(Metchnikoff) EN

TÉRMINOS DE SU PERÍODO DE PROTECCIÓN EN CAMPO

SOBRE EL GANADO

90

10.3.

CONFIRMACIÓN DE ESPECIE DE LA GARRAPATA

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus.

92

10.4.

EVALUACIÓN DE CEPAS FORMULADAS Y NO FORMULADAS DE

LOS HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

Beauveria bassiana

y

Metarhizium anisopliae

SOBRE LARVAS DE

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

EN CÁMARA HUMEDA

93

10.5.

EVALUACIÓN DE CEPAS FORMULADAS Y NO FORMULADAS DE

LOS HONGOS

B. bassiana

y

M. anisopliae

SOBRE LARVAS DE

R.

microplus

EN CAMARA SECA

100

10.6.

EVALUACIÓN DE DIFERENTES CONCENTRACIONES DE LOS

HONGOS

ENTOMOPATÓGENOS

Beauveria

bassiana

y

Metarhizium anisopliae

SOBRE LARVAS DE

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

(12)

10.6.1.

CONCENTRACIÓN LETAL CINCUENTA Y NOVENTA (CL

50

y CL

90

)

113

10.6.2.

TIEMPO LETAL CINCUENTA Y NOVENTA (TL

50

y TL

90

)

115

10.7.

EVALUACIÓN DE LA VIRULENCIA DE LAS CEPAS

REACTIVADAS DE LOS HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

B.

bassiana

Y

M. anisopliae

.

119

11.

CONCLUSIONES

124

12.

RECOMENDACIONES

126

13.

GLOSARIO

129

14.

REVISIÓN DE LITERATURA

132

15.

ANEXOS

144

(13)

xiii

LISTA DE FIGURAS

Página

Figura 1.

Microscopía electrónica de

B. bassiana

creciendo con alcanos

como fuente de carbono. (a) Proyecciones en forma de dedos

en la membrana, (b) Estructuras membranosas, lameladas, (c)

Inclusiones del hidrocarburo.

13

Figura 2.

Ciclo infectivo de los hongos entomopatógenos tipo

M.

anisopliae

para control de insectos

14

Figura 3.

Crecimiento de

B. bassiana

en medio PDA, observación

macroscópica y microscópica.

29

Figura 4.

Microscopia electrónica de las conidios de

B. bassiana

en el

proceso de infección de

Amblyomma americanum

29

Figura 5.

Características macroscópicas y microscópicas de una cepa

madura de

M. anisopliae

.

30

Figura 6.

Distribución mundial de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

en

el cinturón tropical del mundo.

38

Figura 7.

Partes bucales de las garrapatas.

43

Figura 8.

Vista dorsal de macho y hembra de

Boophilus microplus

respectivamente.

43

Figura 9.

Ciclo de vida de las garrapatas duras.

47

Figura 10.

Infestaciones de bovinos con

Rhipicephalus (Boophilus)

microplus

.

51

Figura 11.

Cuadrante de medición para el conteo de la garrapata sobre el

ganado

71

Figura 12.

Corral donde se almacenaron los animales del ensayo.

72

Figura 13.

Puesta de huevos durante la cría de teleoginas de la garrapata

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

.

76

Figura 14.

Porcentaje de mortalidad promedio de ninfas de la garrapata

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

en cada tratamiento,

después de la aplicación de los dos hongos entomopatógenos a

una concentración de 1x10

8

conidios/ml.

84

Figura 15.

Porcentaje de mortalidad corregida de ninfas de la garrapata

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

hallada mediante la formula

de Henderson y Tilton a una concentración de 1x10

8

conidios/ml,

bajo condiciones de campo.

86

Figura 16.

Mortalidad de ninfas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

por la aplicación de los tratamientos

1:

Control ,

2

: Control,

3

:

Cepa formulada de

M .anisopliae

,

4

: Cepa no formulada de

M

.anisopliae

,

5

: Cepa formulada de

B. bassiana

y

6

: Cepa no

formulada de

B. bassiana

. Los tratamientos con la misma letra

(14)

no son significativamente diferentes de acuerdo con la prueba

de contraste de Fisher con un nivel de significancía 0.05.

Figura 17.

Box plot de respuesta de mortalidad de larvas de R. microplus

en la comparación entre las cepas formuladas y desnudas de

los hongos

B, bassiana

y

M. anisopliae

(a)

Tratamiento 1:

control, 2: cepa formula de

M. anisopliae

y 3: cepa formula de

B.

bassiana

(b)

1: control, 2: cepa no formulada de

M. anisopliae

y

3: cepa no formulada de

B. bassiana.

88

Figura 18.

Efecto de las cepas formuladas y desnudas de los hongos

entomopatógenos

B. bassiana

y

M. anisopliae

después de 30

días de aplicación

sobre la población de ninfas de

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus.

91

Figura 19.

Macho de la garrapata bovina,

Rhipicephalus (Boophilus)

microplus.

93

Figura 20.

Hembra de la garrapata bovina,

Rhipicephalus (Boophilus)

microplus

93

Figura 21.

Porcentaje de mortalidad promedio de larvas por la aplicación de

los hongos entomopatógenos

B.bassiana

y

M.anisopliae

con

respecto al tiempo a una concentración de 1 x 10

8

conidias/ml,

bajo condiciones de laboratorio en cámara húmeda.

94

Figura 22.

Larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

infectadas por el

hongo

Beauveria bassiana

en

cámara húmeda, presencia de

micelio aéreo a los 12 días.

95

Figura 23.

Larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

infectadas por el

hongo

Metarhizium anisopliae

en cámara húmeda, presencia de

micelio aéreo a los 12 días.

95

Figura 24.

Respuesta de la mortalidad de ninfas de

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

por la aplicación de los tratamientos

1

:

Control

2

: Cepa formulada de

M .anisopliae

,

3

: Cepa no

formulada de

M .anisopliae

,

4

: Cepa formulada de

B. bassiana

y

5

: Cepa no formulada de

B. bassiana

. Los tratamientos con la

misma letra no son significativamente diferentes de acuerdo con

la prueba de contraste de Fisher con un nivel de significancía

0.05.

97

Figura 25.

Porcentaje de mortalidad corregida (Abbott) de larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

por la aplicación de los

hongos entomopatógenos

B.bassiana

y

M.anisopliae

en una

concentración de 1x10

8

conidios/ml, bajo condiciones de

laboratorio en cámara húmeda.

98

Figura 26.

Porcentaje de mortalidad de larvas por la aplicación de los

hongos entomopatógenos

B. bassiana

y

M. anisopliae

con

respecto al tiempo a una concentración de 1 x 10

8

conidios/ml,

bajo condiciones de laboratorio en cámara seca.

(15)

xv

Figura 27.

Respuesta de la mortalidad de ninfas de

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

por la aplicación en cámara seca de los

tratamientos 1: Control 2: Cepa formulada de

M .anisopliae

,3:

Cepa no formulada de

M .anisopliae

,4: Cepa formulada de

B.

bassiana

y 5: Cepa no formulada de

B. bassiana

. Los

tratamientos con la misma letra no son significativamente

diferentes de acuerdo con la prueba de contraste de Fisher con

un nivel de significancía 0.05.

101

Figura 28.

Porcentaje de mortalidad corregida (Abbott) de larvas por la

aplicación de los hongos entomopatogenos

B. bassiana

y

M.

anisopliae

con respecto al tiempo a una concentración de 1 x 10

8

conidios/ml, bajo condiciones de laboratorio en cámara seca.

103

Figura 29.

Larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

infectadas por el

hongo

Beauveria bassiana

en

cámara seca, presencia de

micelio aéreo a los 12 días.

105

Figura 30.

Larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

infectadas por el

hongo

Metarhizium anisopliae

en cámara húmeda, presencia de

micelio aéreo a los 12 días.

105

Figura 31.

Desviación estándar y prueba de contraste de Fisher para los

tratamientos:

(1)

control absoluto

(2)

control comparativo

(3)M.

anisopliae

1x10

6

conidios/ml,

(4)

M. anisopliae

1x10

7

conidios/ml,

(5)

M.

anisopliae

1x10

8

conidios/ml,

(6)

M.

anisopliae

5x10

8

conidios/ml,

(7)

M. anisopliae

1x10

9

conidios/ml,

(8)

B.

bassiana

1x10

6

conidios/ml, (9)

B. bassiana

1x10

7

conidios/ml

(10)

B.

bassiana

1x10

8

conidios/ml

(11)

B.

bassiana

5x10

8

conidios/ml

(12)

B. bassiana

1x10

9

conidios/ml. Barras con

la misma letra no difieren significativamente.

107

Figura 32.

Porcentaje de mortalidad promedio de larvas de

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

en el tiempo, por la aplicación de

Beauveria bassiana

a concentraciones de 1x10

6

,1x10

7

,1x10

8

,

5x10

8

y 1x10

9

conidios/ml.

108

Figura 33.

Porcentaje de mortalidad absoluta de larvas de

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

en el tiempo, por la aplicación de

Metarhizium

anisopliae concentraciones de 1x10

6

,1x10

7

,1x10

8

,

5x10

8

y 1x10

9

conidios/ml.

110

Figura 34.

Tiempo letal 50 para las concentraciones probadas del hongo

M.

anisopliae

sobre larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus.

116

Figura 35.

Tiempo letal 90 para las concentraciones probadas del hongo

M.

anisopliae

sobre larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

.

116

Figura 36.

Tiempo letal 50 para las concentraciones probadas del hongo

B.

bassiana

sobre larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus.

117

Figura 37.

Tiempo letal 90 para las concentraciones probadas del hongo

B.

bassiana

sobre larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus.

(16)

Figura 38.

Aislamientos realizados y purificados de los hongos

entomopatógenos

B. bassiana

y

M. anisopliae

a partir de larvas

infectadas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

.

119

Figura 39.

Porcentaje de mortalidad de larvas de

Rhipicephalus (Boophilus)

microplus

a partir de inóculos realizados de

B. bassiana

y

M.

anisopliae

, reaislados de larvas tratadas en el laboratorio, a una

concentración de 1x10

8

conidios/ml.

120

Figura 40.

Porcentaje de mortalidad corregida (Abbott) de larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

a partir de inóculos

realizados de

B. bassiana

y

M. anisopliae

, reaislados de larvas

tratadas en el laboratorio, a una concentración de 1x10

8

conidios/ml.

122

Figura 41.

Larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

infectadas por el

hongo

B. bassiana.

126

Figura 42.

Larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

infectadas por el

hongo

M. anisopliae.

126

Figura 43.

Larvas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

en el tratamiento

(17)

xvii

LISTA DE TABLAS

Página

Tabla 1.

Principales hongos entomopatógenos utilizados comercialmente

para el control de insectos plaga.

11

Tabla 2.

Especies de la familia Ixodidae encontradas en Colombia.

39

Tabla 3.

Número de especies de garrapatas encontradas en Colombia, en

Latinoamérica y en todo el mundo

40

Tabla 4.

Interacción respuesta hospedero-garrapata

45

Tabla 5.

Duración de la fase en el ciclo de vida parasitaria de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus

.

46

Tabla 6.

Tratamientos evaluados por la aplicación de cepas formuladas del

laboratorio LST y desnudas de los hongos entomopatógenos

Beauveria bassiana

y

Metarhizium anisopliae

sobre los animales

para el control de ninfas de

Rhipicephalus (Boophilus) microplus.

73

Tabla 7.

Tratamientos realizados para la comparación de cepas formuladas

y cepas desnudas sobre larvas de la garrapata

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

en cámara húmeda

.

77

Tabla 8.

Tratamientos probados para evaluar diferentes concentraciones

de

B. bassiana

y

M. anisopliae

bajo condiciones de campo.

79

Tabla 9.

Tratamientos para la aplicación de las cepas reactivas de los

hongos

B. bassiana

y

M. anisopliae

sobre larvas de

Rhipicephalus

(Boophilus) microplus

82

Tabla 10.

Análisis del Probit para el hongo entomopatógeno

Metarhizium

anisopliae

en el día final de evaluación

.

114

Tabla 11.

Análisis del Probit para el hongo entomopatógeno

Beauveria

bassiana

en el día final de evaluación

(18)

LISTA DE ANEXOS

Página

Anexo 1.

FICHAS TECNICAS DE LOS PRODUCTOS FORMULADOS

144

Anexo 2.

MODELO ESTADISTICO

146

Anexo 3.

ESTADÍSTICA

CAMPO:

COMPARACIÒN

ENTRE

CONTROLES Y CEPAS FORMULADAS Y DESNUDAS DE

LOS HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

Beauveria bassiana

y

Metarhizium anisopliae

147

Anexo 4.

EFECTO DE LOS HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

ATRAVEZ DEL TIEMPO (PERIODO DE PROTECCIÓN).

154

Anexo 5.

COMPARACIÓN DE LAS CEPAS DE LOS HONGOS

B.

bassiana

Y

M. anisopliae

EN CÁMARA HÚMEDA

156

Anexo 6.

PORCENTAJE DE MORTALIDAD DE LARVAS DE

Rhipicephalus (Boophilus)microplus

EN CÁMARA HÚMEDA

157

Anexo 7.

COMPARACIÓN DE LAS CEPAS DE LOS HONGOS

B.

bassiana

Y

M. anisopliae

EN CÁMARA SECA

158

Anexo 8.

ESTADÍSTICA DE LABORATORIO: COMPARACIÓN DE

LAS CINCO CONCENTRACIONES EVALUADAS DE LOS

HONGOS ENTOMOPATÓGENOS B

. bassiana

Y. M

anisopliae

160

Anexo 9.

ANALISIS PROBIT- PORCENTAJES DE MORTALIDAD

CORREGIDA

EN

LA

EVALUACIÓN

DE

LAS

CONCENTRACIONES PARA LOS HONGOS

B. bassiana

Y

M. anisopliae

165

Anexo 10.

TIEMPO LETAL CINCUENTA Y NOVENTA (CL

50

y CL

90

)

170

Anexo 11.

TIEMPO LETAL 50 Y 90, MORTALIDAD ACUMULADO

METODO DE REED AND MUENCH

171

Anexo 12.

FÓRMULA DE ABBOTT (1925) PARA MORTALIDAD

CORREGIDA EN MUESTRAS CON IGUAL NÚMERO DE

POBLACIÓN.

176

Anexo 13.

FÓRMULA DE HENDERSON Y TILTON PARA MUESTRAS

(19)

Figure

TABLA DE CONTENIDO

TABLA DE

CONTENIDO p.8
Figura 1.

Figura 1.

p.13

Referencias

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