Efecto antibacteriano del extracto hidroalcohólico de aloe vera sobre listeria monocytogenes y pseudomonas aeruginosa

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. ÁT. IC. PROYECTO DE TESIS. RM. EFECTO ANTIBACTERIANO DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO DE. IN FO. Aloe vera SOBRE Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa.. DE. TESIS. EM. AS. PARA OPTAR EL TÍTULO DE:. N. DE. SI ST. BIÓLOGO - MICROBIÓLOGO. Br. JÉSSICA ANGÉLICA VÁSQUEZ REÁTEGUI. ASESOR: Dr. PEDRO MERCADO MARTÍNEZ. DI. RE. CC. IO. AUTORA:. TRUJILLO – PERÚ 2014. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. N. Dr. Orlando Velásquez Benites. AC IÓ. RECTOR. UN IC. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. CO. VICERRECTORA ACADÉMICA. M. Dra. Vilma Méndez Gil. IC. Dr. Pedro Lavalle Dios. A. Y. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. ÁT. SECRETARIO GENERAL. IN FO. RM. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. Dr. José Mostacero León. DE. DECANO. EM. AS. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. SI ST. Dr. Willian Zelada Estraver SECRETARIO. CC. IO. N. DE. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Dra. Bertha Soriano Bernilla DIRECTOR. DI. RE. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AC IÓ. N. Señores miembros del jurado dictaminador:. UN IC. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados y. M. Títulos de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, es. CO. honroso presentar y someter a vuestra consideración y elevado criterio el presente. A. Y. informe titulado: “Efecto antibacteriano del Extracto Hidroalcohólico de Aloe vera. ÁT. IC. sobre Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa”, con el cual pretendo. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. obtener el Título Profesional de Biólogo – Microbiólogo.. DI. RE. Br. Jéssica Angélica Vásquez Reátegui. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MIEMBROS DEL JURADO. N. Los suscritos, miembros del jurado, declaran que la presente tesis ha sido ejecutada en. AC IÓ. concordancia con las normas de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y. A. Y. CO. M. UN IC. Parasitología de la Universidad Nacional de Trujillo.. ÁT. IC. Ms. C. Pedro Alvarado Salinas. AS. DE. IN FO. RM. PRESIDENTE. SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. Dr. Pedro Mercado Martínez. Ms. C. Nelly Vásquez Valles VOCAL. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. N. Los profesores que suscriben, miembros del jurado examinador, declaran que el. AC IÓ. presente informe de Tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales,. IC. A. Y. CO. M. UN IC. siendo APROBADO por UNANIMIDAD.. ÁT. Ms. C. Pedro Alvarado Salinas. EM. AS. DE. IN FO. RM. PRESIDENTE. SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. Dr. Pedro Mercado Martínez. Ms. C. Nelly Vásquez Valles VOCAL. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR. N. El que suscribe, en calidad de profesor asesor de la presente tesis titulada: “Efecto. AC IÓ. antibacteriano del Extracto Hidroalcohólico de Aloe vera sobre Listeria. UN IC. monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa”, CERTIFICA:. M. Que ésta ha sido ejecutada de acuerdo al reglamento establecido por la Facultad de. CO. Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, estando en conformidad. Y. con su correspondiente proyecto y con las orientaciones brindadas a la tesista. En cuanto. RM. ÁT. IC. A. al informe, este ha sido revisado acogiendo las observaciones y sugerencias alcanzadas.. IN FO. Por lo tanto, autorizo a la Bachiller JÉSSICA ANGÉLICA VÁSQUEZ REÁTEGUI,. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. continuar con el trámite del reglamento correspondiente.. DI. Dr. Pedro Mercado Martínez ASESOR. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. AC IÓ. N. A DIOS, le doy gracias por amarme a pesar de mis debilidades, por ser mi luz y guía de. UN IC. mi camino, por darme la fortaleza y perseverancia para seguir adelante y. todos. los. obstáculos. que. se. M. vencer. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. presentan en pasar de mis días.. por su apoyo y porque creyeron en mí dándome ejemplos dignos de superación y entrega, por todas sus enseñanzas, su dedicación, su sacrificio, su confianza y por el amor que siempre me demuestran, son los que me impulsan a seguir adelante.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. A mis padres Libertad Reátegui y Luis Vásquez,. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A mi hermana Jheny Soledad, por estar. N. siempre apoyándome en los buenos y malos. AC IÓ. momentos, por sus consejos, sus valores, por la motivación para seguir adelante, por. UN IC. su comprensión, confianza y sobre todo por. A mis abuelitos Cidlia y Anderson, por ser mi felicidad, por haber fomentado en mí el deseo de superación y el anhelo de triunfo en la vida.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. su incondicional amistad.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTO. N. A mi asesor, Dr. Pedro Mercado Martínez,. el. desarrollo. satisfactoria. del. y. presente. culminación trabajo. de. UN IC. permitió. AC IÓ. por su orientación, apoyo, confianza, lo cual. investigación. Además por brindarme su. CO. M. amistad y conocimientos académicos durante. RM. ÁT. IC. A. Y. mi formación profesional.. IN FO. A mis Profesores de la Escuela de. dedicación conocimientos. y. por. brindarme. académicos. durante. sus mi. formación profesional.. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. Microbiología y Parasitología por su. DI. RE. A los miembros del jurado, por sus observaciones y sugerencias en la mejora de esta investigación.. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Gabriel. Cueva,. por. su. amistada,. AC IÓ. A. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. colaboración y por apoyarme en la. RM. Finalmente, agradezco a todas aquellas. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. elaboración de este proyecto. IN FO. personas con las que compartí risas,. conocimientos y anécdotas durante el. DE. tiempo que duro mi formación como. A mis Amigos por su gran amistad, colaboración y apoyo en las buenas y las malas.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. profesional.. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN El presente trabajo tuvo por objetivo determinar el efecto antibacteriano del extracto hidroalcohólico de Aloe vera sobre Listeria monocytogenes y Pseudomonas. AC IÓ. N. aeruginosa. Para la preparación del extracto hidroalcohólico, se pesó 200 g de mucilago. UN IC. fresco de Aloe vera, por 2 minutos se licuó con 200 ml de etanol de 96° GL. dejándolo macerar por 48 horas, posteriormente se llevó a ebullición por 10 minutos, se filtró y. CO. M. aforó con 100 ml de agua destilada y fue conservado a 4°C. A partir del extracto al 100% se prepararon concentraciones de 10, 20, 30 y 40%, las cuales fueron protegidas. A. Y. de la luz. La actividad antibacteriana del extracto hidroalcohólico de Aloe vera se. ÁT. IC. determinó utilizando la técnica de difusión en Agar en placas, conteniendo Agar Muller-. RM. Hinton temperado a 45°C inoculado con la suspensión de los cultivos de Listeria. IN FO. monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa. A cada placa se le realizó 4 orificios de 4. DE. mm de diámetro a los cuales se les adicionó 50 uL de cada una de las concentraciones. AS. de extracto hidroalcohólico, se utilizó a Sulfametoxazol Trimetropin como control para. EM. L. monocytogenes y Ciprofloxacina como control de P. aeruginosa. Se determinó que L.. SI ST. monocytogenes y P. aeruginosa presentaron mayor actividad antimicrobiana en las concentraciones de 30 y 40% del extracto hidroalcohólico de Aloe vera, también se. DE. determinó que existe diferencia significativa entre la sensibilidad de L. monocytogenes. CC. IO. N. y P. aeruginosa frente al extracto hidroalcohólico de Aloe vera.. RE. Palabras clave: Extracto hidroalcohólico, Aloe vera, Listeria monocytogenes,. DI. Pseudomonas aeruginosa.. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT This study aimed to determine the antibacterial effect of hydroalcoholic extract of Aloe vera on Listeria monocytogenes and Pseudomonas aeruginosa. For the. AC IÓ. N. preparation of the hydroalcoholic extract, 200 g of fresh Aloe vera mucilage was. UN IC. weighed for 2 minutes it was liquefied with 200 ml of ethanol 96 ° GL. letting it soak for 48 hours, then was boiled for 10 minutes, filtered and 100 ml mark with distilled. CO. M. water and was kept at 4 ° C. From the extract at 100% concentrations of 10, 20, 30 and 40%, which were protected from light were prepared. The antibacterial activity of. A. Y. hydroalcoholic extract of Aloe vera was determined using the agar diffusion method on. ÁT. IC. plates containing Muller-Hinton Agar tempered at 45 ° C inoculated with suspension. RM. cultures of Listeria monocytogenes and Pseudomonas aeruginosa. Each plate. IN FO. underwent four holes 4 mm in diameter to which were added 50 uL of each of the. DE. hydroalcoholic extract concentrations, was used as sulfamethoxazole trimethoprim. AS. control L. monocytogenes and P. aeruginosa. Ciprofloxacin as control It was. EM. determined that L. monocytogenes and P. aeruginosa showed higher antimicrobial. SI ST. activity at concentrations of 30 and 40% of hydroalcoholic extract of Aloe vera, also determined that there is significant difference between the sensitivity of L.. N. DE. monocytogenes and P. aeruginosa against the abstract Aloe vera hydroalcoholic.. CC. IO. Keywords: Hydroalcoholic extract, Aloe vera, Listeria monocytogenes, Pseudomonas. DI. RE. aeruginosa.. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INDICE Pag. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO…………. ii. AC IÓ. N. PRESENTACIÓN……………………………………………………………………. iii. UN IC. MIEMBROS DEL JURADO………………………………………………………… iv. M. APROBACIÓN……………………………………………………………………..... v. Y. CO. DEL ASESOR………………………………………………………………………... vi. IC. A. DEDICATORIA……………………………………………………………………… vii. RM. ÁT. AGRADECIMIENTO………………………………………………………………... ix. IN FO. RESUMEN…………………………………………………………………………… xi. DE. ABSTRACT………………………………………………………………………….. xii. AS. ÍNDICE………………………………………………………………………………. xiii. SI ST. EM. INTRODUCCIÓN…………………………………………………………………… 1 MATERIALES Y MÉTODOS………………………………………………………. 7. N. DE. RESULTADOS….…………………………………………………………………… 11. CC. IO. DISCUSIÓN………………………………………………………………………….. 16. DI. RE. CONCLUSIONES……………………………………………………………………. 20 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS……………………………………………….. 21 ANEXOS……………………………………………………………………………… 26. xiii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN Las plantas producen compuestos con propiedades antimicrobianas que pueden ser empleadas en el control de diferentes enfermedades del hombre así como también en. N. productos hortícolas. Una de estas especies potenciales es el Aloe vera, es una planta. AC IÓ. que goza de gran prestigio en muchos lugares por sus conocidas propiedades. UN IC. medicinales y estéticas (1, 2 ).. M. Las propiedades medicinales de los extractos obtenidos de las hojas de Aloe vera. CO. se han registrado, en documentos históricos y continúan vigentes en la tradición oral de. A. Y. los pueblos. En unos y otros se hace referencia a su aplicación para el tratamiento de (3,4). . Los datos históricos. ÁT. IC. diversas afecciones, especialmente para las de tipo dérmicas. RM. señalan concretamente la aplicación del gel de Aloe vera como agente terapéutico, con. IN FO. propósitos curativos y cosméticos, razones por las cuales, aún se continúa con los estudios sobre su actividad clínica, su composición bioquímica y sus mecanismos de. AS. DE. acción (5).. EM. Aloe vera, conocido como sábila, pertenece a la familia de las Liliáceas,. SI ST. originaria del norte de África e introducida en las Antillas y América tropical donde crece en forma natural y se cultiva comercialmente. (6) Se caracteriza por la presencia de. DE. constituyentes fenólicos que son generalmente clasificados en 2 principales grupos:. IO. N. Cromonas y antraquinonas. Las Cromonas son componentes bioactivos en fuentes. CC. naturales y se utilizan como antiinflamatorios y antibióticos. Dentro de las Cromonas se. DI. RE. encuentra al Aloesin, también denominado Aloeresin B (7) y Aloeresin A (8). Las antraquinonas son compuestos aromáticos polihidroxilados, que constituyen. el numeroso grupo de sustancias polifenólicas que conforman la base y la fuente de una raíz de diversos géneros y especies de las familias: Leguminosas, Rubiáceas, Liliáceas. Dentro de las antraquinonas se encuentran la Aloína llamada también Barbaloína. (9). ; la. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Isobarbaloina y la Aloemedína. (10). , así como la presencia de polisacáridos,. glicoproteínas y aminoácidos en el gel incoloro e insípido de las células parenquimales de las hojas de esta planta. Es una de las pocas especies que contiene vitamina B12,. AC IÓ. N. además de A, B1, B2, B6 y C. Aloe vera, posee hojas que contienen una pulpa o parénquima incoloro que. UN IC. forma el gel/cristal de Aloe. Este gel está conformado por carbohidratos que son. M. sintetizados en exceso de agua, minerales y ácido málico almacenado. Los polisacáridos. CO. mucilaginosos son los principios activos responsables de la actividad biológica del gel (11, 12). IC. A. Y. .. ÁT. La información acerca de las propiedades curativas de ciertos vegetales ha sido. RM. transmitida de generación en generación y se ha incrementado con el tiempo como. IN FO. resultado del continuo contacto, a veces casual, del hombre con las plantas. (13). . Las. DE. plantas contienen un gran número de sustancias con propiedades inhibitorias de las. AS. actividades metabólicas de bacterias, levaduras y mohos, reportándose más de 1340. EM. plantas como potenciales fuentes de antimicrobianos, encontrándose principalmente los. SI ST. compuestos antimicrobianos presentes en extractos y en aceites esenciales obtenidos a partir de hojas, flores, bulbos, rizomas y frutos. Estos compuestos pueden ser letales. DE. para las células microbianas o simplemente servir como inhibidores de la producción de. CC. IO. N. metabolitos (14, 15).. RE. Los extractos vegetales son líquidos aceitosos obtenidos a partir de diferentes. DI. partes de las plantas como flores, yemas, semillas, hojas, ramas, corteza, hierbas, madera, frutos y raíces. Son mezclas complejas de ésteres, aldehídos, cetonas y terpenos. Además son compuestos olorosos, muy solubles en alcohol y poco solubles en agua. Para la extracción de estos compuestos se pueden utilizar distintos solventes. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. (acetato, etanol y cloruro de etileno). Los aceites esenciales derivados de plantas son conocidos por su actividad antimicrobiana contra un amplio rango de bacterias y hongos (16). .. AC IÓ. N. La acción antimicrobiana depende del carácter lipofílico o hidrofílico del aceite esencial. Teniendo en cuenta la gran cantidad de los componentes químicos presentes en. UN IC. los aceites esenciales, lo más probable es que su actividad antimicrobiana no se puede. M. atribuir a un solo mecanismo, sino que se da a varios niveles en las células microbianas.. CO. Los aceites fenólicos (fenoles y ácidos fenólicos), se han encontrado como buenos. A. Y. inhibidores de bacterias. Características como un anillo aromático, un grupo hidroxilo u. ÁT. IC. otros 41 grupos como el terbutil o el isopropal, alteran la polaridad y la topografía de la. RM. molécula y por lo tanto pueden cambiar la afinidad de la misma con sitios de unión. IN FO. diferentes en la bacteria. La hidrofobicidad y descripciones esteáricas (tamaño molecular y forma), también tienen papeles importantes en la actividad antibacteriana.. DE. La pérdida de potasio es la primera indicación de daño en las membranas de los. AS. microorganismos. Esto confirma el hecho de que la disrupción de las membranas. SI ST. EM. contribuye al modo de acción de los grupos fenólicos como el eugenol y el timol (17). El género Listeria se encuentra ampliamente distribuida en la naturaleza, puede. DE. encontrarse en el suelo, los vegetales y formando parte de la flora fecal de muchos. IO. N. mamíferos; siendo capaz de sobrevivir a diversas condiciones ambientales. Asimismo,. CC. se ha aislado de vegetales crudos, leche, pescado, pavo y carne ya sea fresca o. DI. RE. procesada bien sea de pollo o res (18). Dentro de este género existen 7 especies donde las especies L. ivanovii y L. monocytogenes se consideran patógenas; sin embargo, la. primera se encuentra asociada únicamente con infección en animales, mientras que la segunda se relaciona tanto con infección en animales como en humanos(19).. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Listeria monocytogenes, es responsable de ETA y agente etiológico de la listeriosis, infección gastrointestinal invasiva cuyas manifestaciones clínicas dependen del estado de la persona infectada: pacientes inmunosuprimidos, mujeres embarazadas,. N. neonatos y personas de edad avanzada (20). El inóculo exacto y el periodo de incubación. AC IÓ. son desconocidos; se cree que se necesitan más de 103 microorganismos y entre 11 y 70. UN IC. días para que se produzca la infección invasiva (21).. M. Se ha evidenciado que los ácidos orgánicos como el ácido láctico y el ácido. CO. acético, generalmente usados en los alimentos para el control de microorganismos,. A. Y. provocan tolerancia en L. monocytogenes; de allí que esta bacteria sea de interés a. ÁT. IC. diferentes medios (22, 23).. RM. L. monocytogenes, posee rasgos fenotípicos que actúan como factores de. IN FO. virulencia. Emerge hoy en día, como uno de los microorganismos de mayor riesgo para. DE. las poblaciones susceptibles y responsables de brotes en diversas partes del mundo. En. AS. este sentido y con la intensión de aportar medios sencillos y eficaces que permitan. EM. reducir al mínimo la cantidad de L. monocytogenes en los alimentos, se propone la. SI ST. utilización de soluciones de extracto de Aloe vera como sustancia no tóxica y con un. DE. potencial bacteriostático y/o bactericida sobre L. monocytogenes (24).. N. Pseudomonas aeruginosa es naturalmente resistente a muchos de los. CC. IO. antimicrobianos de uso habitual en la práctica clínica, debido a la barrera de. RE. permeabilidad ofrecida por su membrana externa de lipopolisacaridos y a plásmidos de (25). . Las infecciones graves y. DI. resistencia antimicrobiana, entre otros factores. nosocomiales por P. aeruginosa requieren generalmente un tratamiento antimicrobiano asociado con el fin de lograr un mayor efecto bactericida y reducir la aparición de resistencia a ellos (26, 27). Los antimicrobianos con efecto anti Pseudomonas comprenden. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. aminoglucósidos (amikacina, gentamicina), cefalosporinas de 3ª (ceftazidima, cefoperazona) y 4ª generación (cefepime), monobactámicos (aztreonam), carbapenems (imipenem, meropenem), fluoroquinolonas (ciprofloxacina) y penicilinas de espectro (ticarcilina,. carbenicilina,. ticarcilina/ácido. clavulánico,. piperacilina,. AC IÓ. N. ampliado. piperacilina/tazobactam, mezlocilina). Los patrones locales de susceptibilidad deben. UN IC. considerarse en la elección inicial del antimicrobiano, mientras que el estudio de la susceptibilidad de la cepa aislada del enfermo orienta el tratamiento antimicrobiano. CO. M. definitivo (28, 29, 30).. no se han. A. Y. Considerando que en el Perú se siembra Aloe vera, y además. ÁT. IC. reportado estudios sobre el efecto del extracto extraído de esta planta sobre diferentes. RM. microorganismos patógenos, se pretende llevar a cabo la obtención del extracto. IN FO. hidroalcohólico a partir del cual se evaluará su actividad antimicrobiana debido a que Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa son responsables de enfermedades. AS. DE. transmitidas por alimentos y causantes de infecciones intrahospitalarias.. EM. A partir de esta investigación se podrían realizar posteriores investigaciones. SI ST. acerca de la actividad antibacteriana de este extracto hidroalcohólico de Aloe vera sobre otros microorganismos patógenos, ya que el Aloe vera no altera las propiedades. DE. organolépticas de los alimentos, porque se demostró que posee un efecto antibacteriano. IO. N. frente a Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa podría dar paso a su. RE. CC. utilización como biopreservante, proporcionando medios alternativos en mejorar la. DI. calidad de los alimentos. De igual forma serian excelentes alternativas naturales y económicas frente a los biopreservante químicos usados en la actualidad.. En este proyecto se plantearon los siguientes objetivos:. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. -. Determinar las concentraciones del extracto hidroalcohólico de Aloe vera que presente mayor actividad antibacteriana tanto para Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa. Demostrar si existe diferencia significativa entre la sensibilidad de Listeria. AC IÓ. N. -. monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa frente al extracto hidroalcohólico. Determinar que concentración del extracto hidroalcohólico de Aloe vera actúa. M. -. UN IC. de Aloe vera.. CO. mejor en relación a los antibióticos (Sulfametoxazol Trimetropin y. Y. Ciprofloxacina), contra Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa,. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. respectivamente.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIALES Y MÉTODOS 1.1.MATERIAL BIOLÓGICO . Cultivos de Listeria monocytogenes, proporcionados por el Laboratorio de. AC IÓ. Cultivos de Pseudomonas aeruginosa, proporcionados por el Laboratorio de. UN IC. . N. Fisiología y Genética Bacteriana.. Fisiología y Genética Bacteriana.. M. Hojas de Aloe vera.. Y. CO. . IC. A. 1.2.METODOLOGÍA. ÁT. 1.2.1. OBTENCIÓN DEL EXTRACTO HIDROALCOHOLICO DE Aloe vera. RM. A. OBTENCIÓN DE LA PLANTA DE Aloe vera.. IN FO. Se obtuvo la planta de Aloe vera de aproximadamente 2 años de edad en. DE. la Provincia de Viru del Departamento de la Libertad, la cual fue. AS. transportada en cajas al laboratorio.. SI ST. vera. EM. B. OBTENCIÓN DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO DE Aloe. Las hojas de Aloe vera, se limpiaron y se lavaron con agua destilada; se. DE. hicieron cortes muy cercanos a la base de la planta. Se pesó 200 g de. DI. RE. CC. IO. N. mucilago de Aloe y se añadió 200 ml de etanol de 96° GL. se procedió a. licuar por 2 minutos, se dejó macerar por 48 horas para luego ser llevados a ebullición por 10 minutos, se filtró y se aforó con 100 ml agua destilada hervida (31) . Preparación del Extracto Hidroalcohólico de Aloe vera a diferentes concentraciones:. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. . Para 10%, se agregó 1 ml del extracto obtenido en 9 ml de agua destilada estéril, se dejó en un frasco color ámbar.. . Para 20 %, se agregó 2 ml del extracto obtenido en 8 ml de agua. Para 30%, se agregó 3 ml del extracto obtenido en 7 ml de agua. UN IC. destilada estéril, se dejó en un frasco color ámbar.. Para 40%, se agregó 4 ml del extracto obtenido en 6 ml de agua. M. . AC IÓ. . N. destilada estéril, se dejó en un frasco color ámbar.. CO. destilada estéril, se dejó en un frasco color ámbar.. A. Y. C. CONSERVACIÓN DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO DE. ÁT. IC. Aloe vera.. RM. Los diferentes frascos con las diferentes concentraciones de Aloe vera se. IN FO. conservaron en refrigeración a 4°C para los análisis posteriores.. DE. 1.2.2. PREPARACIÓN DE INÓCULOS BACTERIANOS Y. AS. A. OBTENCIÓN. REACTIVACIÓN. DE. LOS. CULTIVOS. SI ST. . EM. BACTERIANOS. Los cultivos de Listeria monocytogenes y Pseudomonas. Fisiología y Genética Bacteriana de la Universidad Nacional de. DI. RE. CC. IO. N. DE. aeruginosa, fueron proporcionados por el Laboratorio de. Trujillo. . Los cultivos bacterianos de Listeria se reactivaron en Caldo Frasier. (32). por 18 horas a 37°C y posteriormente se sembró e. incubaron en Agar Oxford.. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. . Los cultivos bacterianos de Pseudomonas se reactivaron, en Caldo Cerebro Corazón (BHI). (33). por 18 horas a 37°C y se. AC IÓ. N. sembraron e incubaron en Agar BHI por 18 horas a 37°C.. B. ESTANDARIZACIÓN DE LOS INÓCULOS BACTERIANOS. UN IC. A partir de cada uno de los cultivos bacterianos se realizaron suspensiones en Solución Salina Fisiológica Estéril (SSFE) hasta alcanzar la turbidez. CO. M. equivalente al tubo N° 0.5 del Nefelómetro de Mac Farland (1.5 x 108. ÁT. RM. 1.2.3. ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA. IC. A. Y. ufc/mL).. IN FO. El extracto de Aloe vera se determinó utilizando los cultivos bacterianos, siguiendo la técnica de difusión en Agar en placas (34), por triplicado. Las placas. DE. contenían agar Mueller –Hinton temperado a 45°C inoculado con una. AS. suspensión de cultivo joven bacteriano a la concentración de 1.5 x 108 ufc/mL. EM. previamente estandarizado. A cada placa se le realizó 4 orificios de 4 mm de. SI ST. diámetro cada uno. A estos orificios se les añadió 50 uL de cada una de las. DE. concentraciones de 10, 20, 30 y 40% del extracto hidroalcohólico y se incubaron. N. a 37°C por 24 horas.. CC. IO. La actividad antibacteriana del extracto hidroalcohólico se determinó midiendo. orificio hasta donde termina el halo), el tamaño de esta zona de inhibición indicó. DI. RE. el halo de inhibición alrededor de cada orificio (la distancia desde el borde del. si las bacterias objeto de análisis tienen sensibilidad frente a las soluciones del extracto alcohólico. Se considera inhibitorio un valor de 2 mm. (35, 36). 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. También se realizó dos controles: Para Listeria monocytogenes se utilizó el antibiótico Sulfametoxazol Trimetropin y para Pseudomonas aeruginosa se utilizó el antibiótico. AC IÓ. N. Ciprofloxacina. 1.2.4. ANÁLISIS ESTADÍSTICO. UN IC. El procesamiento y análisis de los resultados obtenidos para la actividad. M. antibacteriana del extracto Hidroalcohólico de Aloe vera que presenta para. CO. Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa, se efectuó mediante el. Y. programa SPSS versión 18.0. Para realizar los análisis se tuvo en cuenta los extracto. IC. A. valores promedio de inhibición de cada concentración del. RM. ÁT. Hidroalcohólico evaluado; ya que se realizó tres repeticiones por tratamiento. Se. IN FO. realizó el análisis de varianza, específicamente un ANOVA de un diseño completo al azar (DCA), a los datos obtenidos para determinar si hay diferencias. DE. significativas en la actividad antibacteriana entre los dos grupos de bacterias así. AS. como con los antibióticos utilizados (controles). La significancia se reportó con. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. un nivel de confianza del 95%.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS Los resultados del presente trabajo de investigación Efecto antibacteriano del extracto Hidroalcohólico de Aloe vera sobre Listeria monocytogenes y Pseudomonas. AC IÓ. N. aeruginosa, se presenta a continuación:. UN IC. En la Fig. 1 se muestra el promedio de la medición de los halos de inhibición de los cultivos de Listeria monocytogenes tratadas con el extracto hidroalcohólico de Aloe. CO. M. vera a concentraciones de 10, 20, 30 y 40% y se observa que las concentraciones de. Y. 30% y 40% presenta mayor efecto bactericida y además se evidencia diferencia. IC. A. significativa (p<0.05).. RM. ÁT. En la Fig. 2 se muestra el promedio de la medición de los halos de inhibición de. IN FO. los cultivos de Pseudomonas aeruginosa tratadas con el extracto hidroalcohólico de Aloe vera a concentraciones de 10, 20, 30 y 40% y se observa que al 10% no hubo. DE. crecimiento de halos, al 20% la medición de los halos se encuentra entre 10 mm y 13. AS. mm aproximadamente, además las concentraciones de 30% y 40% presenta mayor. SI ST. EM. efecto bactericida y se evidencia diferencia significativa (p<0.05). En la Fig. 3 se muestra la comparación entre los diámetros de los halos de. DE. sensibilidad de Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa a diferentes. IO. N. concentraciones del extracto hidroalcohólico de Aloe vera, observándose que no existe. CC. diferencia significativa entre ambas especies.. DI. RE. En la Fig. 4 se muestra que Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa. son más sensible a la concentración de 40% del extracto hidroalcohólico de Aloe vera que a las otras concentraciones empleadas en relación al Sulfametoxazol Trimetropin y a la Ciprofloxacina, respectivamente.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Fig. 1: Variación del promedio de los halos de inhibición en el crecimiento (mm) de Listeria monocytogenes frente a diferentes concentraciones del extracto hidroalcohólico. AC IÓ. N. de Aloe vera.. UN IC CO. M. 25. ÁT. IC. A. Y. 20. IN FO. RM. 15. DE. 10. EM. AS. 5. SI ST. Promedios de Halos de Sensibilidad (mm) – Listeria monocytogenes. 30. 10%. 30%. 20%. 40%. Extracto Hidroalcohólico de Aloe vera. Presentan diferencia significativa entre grupos (p<0.05). DI. RE. CC. IO. N. DE. 0. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Fig. 2: Variación del promedio de los halos de inhibición en el crecimiento (mm) de Pseudomonas. aeruginosa. frente. a. diferentes. concentraciones. del. extracto. N. Promedios de Halos de Sensibilidad (mm) – Pseudomonas aeruginosa. hidroalcohólico de Aloe vera.. UN IC. AC IÓ. 40. A. Y. CO. M. 30. IN FO. RM. ÁT. IC. 20. AS. DE. 10. SI ST. EM. 0 10%. 30%. 20%. 40%. Presentan diferencia significativa entre grupos (p<0.05). DI. RE. CC. IO. N. DE. Extracto Hidroalcohólico de Aloe vera. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Fig. 3: Comparación de promedios de los halos de sensibilidad (mm) de Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa a diferentes concentraciones del extracto. AC IÓ. N. hidroalcohólico de Aloe vera (p>0.05). UN IC M. 2.5 25. CO. 2 20. IC. A. Y. 1.5 15. ÁT. 10 1. RM. 0.5 5. IN FO. Promedios de Halos de Sensibilidad (mm). 303. 0 10%. 20%. DE. Listeria monocytogenes. 30%. 40%. Pseudomonas aerugiona. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. No presenta diferencia significativa entre grupos. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Fig. 4: Comparación de los halos de sensibilidad (mm) de Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa a la concentración de 40% del extracto hidroalcohólico de Aloe vera y de los grupos control “Sulfametoxazol Trimetropin” y “Ciprofloxacina”,. UN IC. AC IÓ. N. respectivamente.. A IN FO. RM. ÁT. IC. 30. AS. DE. 20. SI ST. EM. 10. DE. Promedios de Halos de Sensibilidad (mm). Y. CO. M. 40. 40% concentración L. monocytogenes. Sulfametoxazol Trimetropin. 40% concentración P. aeruginosa. Ciprofloxacina. DI. RE. CC. IO. N. 0. No presenta diferencia significativa entre grupos. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN Actualmente se realizan numerosas investigaciones dirigidas a la búsqueda de. N. nuevos compuestos con actividades antimicrobianas a partir de fuentes naturales, dentro. AC IÓ. de ellos un considerable número de estudios han evaluado la actividad antimicrobiana. UN IC. de extractos y aceites esenciales de plantas medicinales y aromáticas. La extracción de los metabolitos esenciales de vegetales de importancia en salud pública, han originado. (37). . En el presente estudio se investigó el Efecto. Y. microorganismos patógenos. CO. M. un vertiginoso estudio de sus características en cuanto a la antibiosis de. IC. A. Antibacteriano del Extracto Hidroalcohólico de Aloe vera sobre Listeria monocytogenes. RM. ÁT. y Pseudomonas aeruginosa.. IN FO. Agary O, Olaleye M, Bello C (38); al estudiar el Aloe vera demostraron que el gel del Aloe vera posee efectos inhibitorios sobre Staphylococcus aureus y Trichophyton. DE. mentagrophytes, efecto que no lograron al aplicar extractos de la penca sobre los. AS. mismos cultivos, sugiriendo que existen constituyentes del gel de la penca que no están. EM. presentes en la corteza de la misma y que tienen un potencial antimicrobiano. SI ST. importante, no solo para cierto tipos de microorganismos, sino para diferentes bacterias. DE. e incluso hongos, se une lo logrado en la presente investigación, al demostrarse la. N. existencia de una acción antibacteriana sobre Listeria monocytogenes y Pseudomonas. CC. IO. aeruginosa.. RE. Existen trabajos que reportan efectos positivos de ciertos componentes de este. DI. gel, tal como es el caso del acemanano, uno de los principales componentes polisacáridos que están presentes en el gel de la planta y que según investigaciones, permite potenciar la actividad inmunomoduladora, al incrementar la sensibilidad de los macrófagos, aumentando la superficie de expresión molecular (39). Si bien el gel de Aloe. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. vera posee muchos otros componentes, no se debe dejar a un lado la posibilidad de que el acemanano sea responsable, entre otras cosas, del efecto antibacteriano sobre Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa, reflejado en el presente trabajo.. AC IÓ. N. Salazar N. y Palomino Y, demostraron que Aloe vera posee propiedades cicatrizantes, quienes realizaron un estudio experimental donde se comprobó el efecto. UN IC. cicatrizante del Aloe vera; citándose como sus principios activos a la aloína, barbaloína,. M. sabiendo que el proceso inflamatorio y la reparación se encuentran estrechamente. CO. relacionados, llegaron a la conclusión que los principios activos antiinflamatorios son. A. Y. los mismos. Las acciones fundaméntales del Aloe que lo hace aplicables en múltiples. ÁT. IC. enfermedades, su acción antiinflamatoria y cicatrizante tiene una función especial en el. RM. área de la salud. (40). IN FO. Tomando como referencia la posible eficacia antibacteriana de Aloe vera, a. DE. través del efecto de sus componentes fenólicos; en la Fig. 1 se expresan, mediante el uso. AS. de diagramas de cajas, que en cuanto a la medición de los halos de inhibición las. EM. concentraciones del 30 y 40% presenta variabilidad en cuanto a la dispersión de datos,. SI ST. además que la mediana muestra que las mediciones poseen valores superiores a 2.0 mm de diámetro, sin embargo para las demás concentraciones la medición es menor. La. DE. presencia de diagramas de cajas, tanto de las concentraciones problemas, como para los. IO. N. controles (antibióticos), demarca el nivel de datos en valores mínimos y máximos; lo. RE. CC. que infiere que, el efecto del extracto hidroalcohólico de Aloe vera es variable para los. DI. cultivos de Listeria monocytogenes. En cuanto a la diferencia significativa de cada concentración de Aloe vera, en el. ANEXO 4 se muestra la medición de los halos de inhibición de los cultivos de Listeria. monocytogenes tratadas con el extracto de Aloe vera, donde se observa que las concentraciones de 30 y 40% poseen el mismo efecto bactericida, se evidencia que 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. existe diferencia significativa entre las concentraciones y corroboran estudios que afirman que a mayor concentración de extracto hidroalcohólico, mayor es la antibiosis. AC IÓ. N. frente a las especies de Listeria.(41). En la Fig. 2, los halos de inhibición del crecimiento de los cultivos de. UN IC. Pseudomonas aeruginosa son relativamente variables, teniendo resultados que se alejan. M. del rango establecido por las barras. Así tenemos que para el tratamiento con las. CO. concentraciones de 10 y 20% del extracto de Aloe vera, las mediciones de la. Y. concentración de 10% muestra que no hubo formación de halos, en el 20% se encuentra. IC. A. que hubo crecimiento de halos entre 10 y 13mm aproximadamente. Se observa que las. RM. ÁT. concentraciones de 30 y 40% presentan un amplio rango de mediciones, para el caso de. IN FO. la medición de 40% que tiende a ubicarse entre los valores altos al límite del rango y se evidencia que existe diferencia significativa entre las concentraciones.. DE. En la Fig. 3 se presenta la comparación de los promedios de los halos de. AS. inhibición de cada concentración del extracto hidroalcohólico de Aloe vera en la Fig. 1 y. EM. Fig. 2, observándose que Listeria monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa no. SI ST. presentan una marcada diferencia en cuanto a la sensibilidad como especies, es decir;. DE. ambos al haber sido tratadas con las distintas concentraciones del extracto. N. hidroalcohólico son sensibles a su efecto, de manera diferente la sensibilidad varia para. CC. IO. cada cultivo utilizado.. RE. En la Fig. 4 se muestra que Listeria monocytogenes tiene una menor sensibilidad. DI. frente al extracto hidroalcohólico de Aloe vera, para la concentración de 40% por la formación de halos de 22 mm, en comparación con el halo de sensibilidad formado por el antibiótico Sulfametoxazol Trimetropin (Control) que fue de 26 mm, lo que significa que no existe diferencia significativa.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Así mismo, se muestra que para Pseudomonas aeruginosa, el mayor halo de sensibilidad fue de 28 mm a la concentración del 40% del extracto hidroalcohólico de Aloe vera; sin embargo, Pseudomonas aeruginosa presentó un halo de sensibilidad de. AC IÓ. N. 31 mm frente al antibiótico Ciprofloxacina (Control), el cual es mayor con respecto a la concentración del 40% del extracto, lo que indica que Pseudomonas aeruginosa es. UN IC. menos sensible al extracto hidroalcohólico de Aloe vera que al antibiótico.. M. De acuerdo a los resultados obtenidos, se puede afirmar que la concentración de. CO. 40% del extracto hidroalcohólico tanto para Listeria monocytogenes y Pseudomonas. Y. aeruginosa es eficaz ya que se podría utilizar a esta concentración como un bactericida. IC. A. empleado para superficies, ya que la presencia de antibióticos como Sulfametoxazol. RM. ÁT. Trimetropin y Ciprofloxacina, solo se consideran como patrón bactericida, debido a que. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. científicamente se conoce su capacidad para producir antibiosis.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIONES. N. 1. Las concentraciones del extracto hidroalcohólico de Aloe vera al 30 y 40%. AC IÓ. presentan mayor actividad antibacteriana frente al crecimiento tanto para. 2. No. existe. diferencia. significativa. entre. UN IC. Listeria monocytogenes como para Pseudomonas aeruginosa. la. sensibilidad. de. Listeria. CO. M. monocytogenes y Pseudomonas aeruginosa frente al extracto hidroalcohólico de. Y. Aloe vera.. IC. A. 3. La concentración de 40% del extracto hidroalcohólico de Aloe vera es. ÁT. significativamente más eficaz contra Listeria monocytogenes como para. eficaces. que. Sulfametoxazol. IN FO. menos. RM. Pseudomonas aeruginosa que la otras concentraciones empleadas, pero son y. Ciprofloxacina,. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. respectivamente.. Trimetropin. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICAS 1. Guevara M., Sánchez E., Gálvez M. Actividad antimicrobiana de Senna alata. Rev. Cubana plantas medicinales. 2004; 9(1): 24-31.. AC IÓ. N. 2. Guerra M., Vega R., Rivero R., Menéndez R., Gutiérrez A., Guerra J. Actividad. antimicrobiana y toxicidad de un extracto acuoso de Boerhaavia erecta L. Rev.. UN IC. Cubana Plantas Medicinales. 2004; 9(1): 148-9.. M. 3. Granados S., Castañeda A. Sábila planta agroindustrial del desierto U.A. de. CO. Chapingo, México. 1998. A. Y. 4. Horianski M., Bargadi S., Kramer F., Jorda G., Jerake G., Guida A., Salvatierra K.. RM. Universidad Nacional de las Misiones. 2006.. ÁT. IC. Extracto de plantas medicinales misioneras con efectos antimicrobianos.. IN FO. 5. Rodríguez H., Echeverría I. Efectos estimuladores del crecimiento de extractos. Medicinales. 2004. pág. 9.. DE. acuosos de plantas medicinales y gel de Aloe vera L. Burm. Rev. Cubana Plantas. AS. 6. Atherton P. First Aid Plant. Chemistry in Btitain 1998; 34: 33-36.. EM. 7. Dagne E., Bisrat D., Viljoen A., Van E. Chemistry of Aloe species. Environmen. SI ST. Experimental Botany. 2000; 4: 1055 – 1078.. DE. 8. Van B, Van R, Van M, Smith F. Geographical variation in the major compounds of. IO. N. Aloe ferox leaf exudate. 1995; 61:250-253.. CC. 9. Tschaplinsk T., González M., Gebre G., Paez A. Soluble carbohydrates, and aloin. RE. concentration of Aloe vera plants exponed to three irradiance levels. Environmen. DI. Experimental Botany 2000; 44: 133-139.. 10. Rivero R., Rodríguez E., Menéndez R., Fernández J., Del Barrio G., González M. Obtención y caracterización preliminar un extracto de Aloe vera L. con actividad antiviral.. Rev.. Cubana. Plantas. Medicinales.. 2002;. 7:. 32. -38.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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(39) IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. ANEXOS. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 1. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Placas control con crecimiento de los cultivos bacterianos en Agar Muller Hinton. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. A) Listeria monocytogenes. B) Pseudomonas aeruginosa. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 2 Fotografía de la técnica de Difusión en Agar, para la verificación de la capacidad antibiótica del extracto Hidroalcohólico de Aloe vera, con la presencia del disco. AC IÓ. N. antibiótico patrón (Sulfametoxazol Trimetropin). Se resalta la producción de los halos. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. de inhibición del crecimiento en las diferentes concentraciones, Listeria monocytogenes.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 3 Fotografía de la técnica de Difusión en Agar, para la verificación de la capacidad antibiótica del extracto Hidroalcohólico de Aloe vera, con la presencia del disco. AC IÓ. N. antibiótico patrón (Ciprofloxacina). Se resalta la producción de los halos de inhibición. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. del crecimiento en las diferentes concentraciones, Pseudomonas aeruginosa.. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 4 Medición de los Halos de Inhibición en el crecimiento de Listeria monocytogenes frente a las. Medición de Halos de Inhibición por Tratamientos Sulfametoxazol. 20%. 30%. 40%. 1. 1.1. 1.3. 2.0. 2.2. 2. 0. 1.2. 2.1. 2.4. 3. 0. 1.4. 2.0. 2.1. Total. 1.10. 3.90. 6.10. 6.70. 7.70. Promedio. 0.37. 1.30. 2.03. 2.57. UN IC. 10%. ÁT. Placas. AC IÓ. N. diferentes concentraciones.. Trimetropin. CO. M. 2.6. 2.5. IC. A. Y. 2.6. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. 2.23. 25.50. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 5 Medición de los Halos de Inhibición en el crecimiento de Pseudomonas aeruginosa frente a las. Medición de Halos de Inhibición por Tratamientos Placas 20%. 30%. 40%. Ciprofloxacina. 1. 0. 1.2. 2. 2.4. 2.7. 2. 0. 1.3. 2.1. 2.9. 3.1. 3. 0. 1.2. 1.9. 3.2. Total. 0.00. 3.70. 6.00. 8.50. Promedio. 0.00. 1.23. 2.00. 2.83. CO. M. UN IC. 10%. AC IÓ. N. diferentes concentraciones.. 9.20. 27.40. 3.07. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. 3.4. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 6 Análisis de varianza de un Diseño Completo al Azar (DCA) para Listeria monocytogenes. AC IÓ. N. HIPÓTESIS:. : Ti  0. Los promedios de los tratamientos son diferentes. CO. ANOVA. Suma de Cuadrados. Grados de Libertad. Media. M yy  43.35. 1. Tratamiento. Tyy  9.25. t 1  3. Error. E yy  0.89. t (n  1)  11. M yy . ( Yij ) 2 nt. ÁT. Myy  43.4 1. T . Tyy  3.08 t 1. E. Eyy =0.11 t (n  1). F . T =27.80 E. AS. DE. IN FO. RM. M . T yy. T . 2. i. ni.  M yy. E yy  Yij2  M yy  Tyy. DI. RE. CC. IO. N. DE. REGIONES:. Prueba F. ni t  12. =53.49. EM. 2 ij. SI ST. Y. Total. Cuadrado Medio. IC. Fuente de Variación. Y. ESTADÍSTICA DE PRUEBA:. M.   0.05. NIVEL DE SIGNIFICANCÍA:. A. Hipótesis Alternativa.- H i. UN IC. H o : Ti  0 Los promedios de los tratamientos son iguales. Hipótesis Nula.-. Ft  0.069. 1    0.95.  / 2  0.025.  / 2  0.025. Ft  4.63. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 7 Análisis de varianza de un Diseño Completo al Azar (DCA) para Pseudomonas aeruginosa. Los promedios de los tratamientos son diferentes. ESTADÍSTICA DE PRUEBA:. M.   0.05. NIVEL DE SIGNIFICANCÍA:. ANOVA. Variación. Cuadrados. Media. M yy  50.05. 1. Tratamiento. Tyy  18.81. t 1  3. Error. E yy  0.60. t (n  1)  11. ( Yij ) 2 nt. Cuadrado Medio. Prueba F. IC. Myy  50.05 1. ÁT. IN FO. RM. M . T . F . T =114.95 E. Eyy =0.0545 t (n  1). AS. DE. E. Tyy  6.27 t 1. EM. ni t  12. T yy. T . 2. i. ni.  M yy. E yy  Yij2  M yy  Tyy. DE. M yy . =69.46. SI ST. 2 ij. Grados de Libertad. Y. Suma de. A. Fuente de. Y. UN IC. : Ti  0. CO. Hipótesis Alternativa.- H i. AC IÓ. H o : Ti  0 Los promedios de los tratamientos son iguales. Hipótesis Nula.-. Total. N. HIPÓTESIS:. RE. CC. IO. N. REGIONES:. DI. 1    0.95.  / 2  0.025. Ft  0.069.  / 2  0.025. Ft  4.63. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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