Mecanismes de senyalització intracel·lular regulats per la proteïna p19 H-Ras
210
0
0
Texto completo
(2) DEPARTAMENT DE BIOQUÍMICA I BIOLOGIA MOLECULAR UNITAT DE CIÈNCIES. MECANISMES DE SENYALITZACIÓ INTRACEL·LULAR REGULATS PER LA PROTEÏNA p19 H-Ras.
(3) Consell Superior d’Investigacions Científiques. Institut d’Investigacions Biomèdiques de Barcelona. Universitat Autònoma de Barcelona Departament de Bioquímica i Biologia Molecular. MECANISMES DE SENYALITZACIÓ INTRACEL·LULAR REGULATS PER LA PROTEÏNA p19 H-Ras. Memòria presentada per optar al grau de Doctor en Ciències Biològiques, per la Universitat Autònoma de Barcelona, per Maria Camats Malet. Aquest treball s’ha realitzat a l’Institut d’Investigacions Biomèdiques de Barcelona (IibB), a les instal·lacions del Centre d’Investigació i Desenvolupament (CID-CSIC), sota la direcció de la Dra. Montserrat Bach-Elías i sota la tutoria del Dr. Francesc Xavier Avilés i Puigvert. Bellaterra, 2008. Dra. Montserrat Bach-Elías. Dr. Frances Xavier Avilés Puigvert.
(4) !. ". # $. $ " %. & (. *. ". -. %. ! $ $,,, )-. % +. $. '. %. )$ . ). /. ). , .. .. 0. ). " . 1 ,. ). 2. !.
(5) “. " 3. '. +. 4. 5. / (.
(6) (( ( (* ( ( " (. (. * ( +. ( 3. #$. # ' " 0( ( '. ' ( '. ! ". '. $. %. '. ,$ +. %. ' ). - . 4. " %. 5 &. !. '. "!. ' () #$ %. (. 3" 6) " "" " " " 3 4 7 78. # /. $ " ! %. &. -. '(. 2 2/ 1 "&! 1 (* 2 0 4 1( 2 '4 1 " 2 ( ! 1 1 ). . . . (/ / ( 1 ( (. '(. 1 #. " '. 1. ". *. ". & , !. +. %. ' 9. #. $ ". %. ) ( (. 0 2 #$. ". 1" 2 1 # 9 0 * - "+. 2. ..
(7) 3#3! 0 + * ,$ 0. *( * 9:. ( ). + +. %&. +. 9:. ,$. *-. *. )+. *'. *. )*. '. +. 3(; 3 3 3 3 1 3" 3"" 5 ). '. :. 0 (. *+. %. < > " / / : 7. '. %. -. ! %. 4 -. 3 3. 4. .. ". ( $ 4. " ! ! $ & 7. 5<:. 5 6 ). & , & = &>%. ) ? #. % ) ,. 5 6 ( 3 *. 6( )*. * 5 3" ". 8=< :. : 9 4:. %. (. : &. .. -. 0. ;. : ? ?. ( # (. ;. ) - "+ ) )-. 0. * *. ( %. )* -. 1/. < 3. ) ; (. +. ). +. $$ $ @ )$. ,. $. ' $. 4 +. '. ). $@. '. ). )/"&!. 1. '. $# " ,$. ). $!. $ 2 :. (. '' 0' 1. $. +. $. ,. =/ %.
(8) (. (. 4. ' 31 " ". () #. *. $3 3 ) 3 3 ). 1 , !-0. -. @. , +. ). 1. ). %. 0. 3. "( "(" / "*. + % ". #. 0 $. #. "*. 0. ). / 0" 1 2(. ! " :. #4. (. 3. 3. ". + +. $7. $ $ -. !. ' ". 1. 1. %. $. " " " " ". 1. ". 7. ( .. ,$. % ,. , A(. 1. "" "". ) @. -. 4 4 (&. +. @. . 1. ). '. ( #@ ". ). (. 4 1(" %. ( 3". #. #. ,$. %" ! 733 ,$ + ' ,$ ':. ?. '. @ D 5. % $. ). & $. %" #. '. AA. $ " "). ( $ $ $ $C ,$ @. $ %". + = =B ' "B 6. @ ' %.
(9) (. + 1 % ( C. ". '. 0$ 0 , 1. :. +. 0" ) ,. ,$. BC, > B D D D ( E E µ2. 6(. 2 F. G ). 3 3 7. ' !. E. +. 3. 2 $ $ . 1: 1< 1. * 3. F 3(" < . H. +. 9 7. ) A 1 1 * 3. / H / 2 A. +. ). ". ". 9 $ . +. > D +. < < 3 1 = @ @ @ E. 2. (.
(10) G ( ;.
(11)
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
(14) / / /. /. :. /. +. 44I. 7 $. 7 7 ' '. 44K. < <. 4!J 4!J. / / ,. / /. TR<. /. /. $7:. '. 7< 7:. 4!4. 7:. # $ 7 N:. 4!4. / /. 7:. #. 4!!. S ' :<. T7'. 4!. < <. R<. / / / /. /. 4!. :4 3:. J. 4!". : 0. 4 T:. < < :. '. Q. 4!. &. ,. /. 8. /. : 47. 4!B :. : : J' $ S. :. 4!:. <:. 4!:. '. T : L< $ 7 L< / /. 1. / /. 4!:. ' : <. / / /. K: '. # : J'. / / /. 747. / / /. : 4 T:. / / /. :. / / /. : J. 1. #'. / / /. /. 4!4. M4. / /. /. /. 4!J. / /. <: '. Q"("C 1 &. 4!I. : 7: Q4. '. 4!K. 5. 4 4. 7 7 # 7. 4 !. <. 4 !. : 7: # : J'. / / /. ! ! #U 7. : $<. / /. 8. / /. # : J' (. #'. R<. 4 !. : 7:. 4. : $ 7. J'V S ' :<. J'. :$ $. 4!: 4!:. ' $ 7 N:. 747. / / /. $ 7 N:. R<. / / /. :S. ' $. M' 7:. 7. '. 4 " 4 " 4 ". 7 $. $. 4 4.
(15) / / /. / /. 8$ $. "<# 7: 2 ' 4 2 / / /. 7: '. / / /. 747. / / /. < 4. / / /. $. / /. $. 4. ' 2. : 47. J'. ! %. !. / / /. 7: 2 ' 4 2. 4. '. J' (. J' (. 7:'. 7: 2 :. 4 B. K:. 4 B. 'V2 7. TR<. 7 $. 4 :. : 'V 6 !. 4 I. 5. 4 I. ' : ' (. $ 4. 4 K. $. 4 K. J'. 7. :. $. Q. -. 4"J. &. 4". .' (. / /. 7. 4":. .'. 7 7$ / / 3. <7. / /. #. :S. <:. : ,. 4"I. J. :. !/ /. $7$ 7 $. '. <8. 4 4. 4 " J' V. ,. @/ /. A< : 4. J' V. ,. 3. ; ". 7 ). 4 " 4 B 4 :. 4I. ;. 4I. 2 : ' : '. ; >. 7. 4. R<. A< : 4. /. 4"K. &. 4 !. J' V$7$ 7. @/ /. 7 #. Q. 4 J. :K S. 3 1. :4. 7 7$. 2 '. 2. : 2.. R<. (. /. 4"I. TR<. 7: :. '. !/ /. 2 '. <:7 7L<M. / /. @/. 4"I. 8 J. / /. 3. :$. : 2 'V2 7 :7' : <. / / /. / /. !/. 7' 4. J. / / /. /. : ' (. 7 8+. / /. 4. 7:. :. 4KJ 7.
(16) G ( ;( 3. (. & E L. %. ". +. 6. %. 6 #. &>%. % *&. 2< !. ,. 2< @. =. 2<. = &>%. 2< O. @. 2<. *. 2<. @. 2<. = &>%. 2<. 3. 2<. 3. 2<. 3 !. 2<. @. /@1. 2. 4I. 8. &. !4. '. !. 8. !:. 6. ( %. ,$. ) ,. ;4. 1@G. '. '. 0 ,$1 46. !K. 6. B. F#6. "J. 6 @. ∆$ : 6. :. "4 ". - N@= N @7,6. 2<. *. 0. 2<. ,. 2<. ,. ". !I. 6. '@ @16. O. 4K. C( A#M6. ,. 2<. 44. 4:. , 6. 6. *. /#16. 4!. 6. .. *&. 2<. K. , !4. '. 6. , 6. 2< 2<. &. 6. &>%. 2<. 2<. ". 3H. 2< 2<. 31. " "B. 6. "I. 6. "K. 6. ". 2<. *(. 2<. <. ,*@ ?. I. 6. '. ). 4K 2 ,. K. 6 <. 2< 2<. !. 4K 2 ,. F4B" 1; OAA. (. 4KN, ?. B4. ;46 6. B.
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
(18) 4. @, 16. 2<. ; " 2<. !. 2<. @. 4K 2 , < *. 2<. = 1;NR$;. ' (. 4K 2 ,. O. $. ,. "*G14 ( '. 2<. 4KJ. I3 1;6. ' ( ' (. ;46. 4KJ. *"G14 @0 :N". 4KJ. 4K 2 , 6 4K 2 ,. 6. 4K4.
(19) G ( ;( 3. (. ". 3H &>%. <. ". ,. ;4. '. ?. 6. I. " ' 0'. < ,. <. B!. 6 '. (. L. :". 6. <. ,$. &. ' (. 4K 2 , 6. ::. <. ,$. &. ' (. 4K. :I. 3. "3. < !. ,. < @. E. P. 6. ( " '. ?. 44". 6. 4!I. 6 F. <. 4 !. 6. < O. *&. 1 ,6. <. *&. 1 ,. 4 I @. ,. ?. <. & ?. <. 4"!. 6. 4"K. 6. 4 J. ,*@6. ; " <. 1. '. ,$. ' (. 4K6. <. 1. '. ,$. ' (. 4K. 4I 6. 4IB.
(20) 1 !9-. 3. 4. (. 3H.
(21) !.
(22) 1 !9 *. S. .. 0. ). '. ?. & +. @. &. %. + 0. +6. &. (. 6. &. (. S. L. + &. & +. 4K 2 ,. 6*. ' &. '. 0. ). %. 0. &. 6. (. &. L 6. /. F. *. 0. +. ' '. &. %. &. '. . T. &. &. &. L. P. ). 'L. &. &. 6 U. L. '+. %. (. ). % 6. (. 0. &. 8. #. 9. &>. S. +. 0. 0. &. &. 6. (. + L. S. (. L %&. % 6 =0. 6. &. &. &. ( L. 5. L.
(23) 1 !9 S. &. 0. &. (. 6 &. 0 61. 'L &. & &. &. .. 6. 1. '. &. %. L. %. &. 0. T (. ; ?. L. 2. 8!JJ". ( &. &. 0 2. 0. E. 0. 8!JJJ (. '. L. .. 0'. (. +. 46. Evasió de l’apoptosi. Insensibilitat als senyals inhibitoris de creixement. Manteniment de l’angiogènesi. Invasió tissular i metàstasi. Potencial replicatiu il·limitat. 'L< '. '. E. % 6*. %. Autosuficiència en senyals de creixement. $. '. %. %. 2 W. F 5. T (. ?. S:. 2. 0. 8!JJJ. ". . '. ?.
(24) 1 !9 *. E %&. ; ?. +. &. <$. 6 * '. 7 '. < 7. %. '. & 00 2 :. &. 1". L. T 7: 72T:. # K '7 6 <. 2 :. %. (. +. /. +. L. (. 6 &. 6*. /=@. (. % 6 *. %. '. /=@. %. L. L. 0' 1. ' (. &. 6. ' ?. %&. ' (. & 6A. &. /=@. '. 0. 6. *. &. '. &. %. &. '. &. ( &>%. '. 6#. &. +. !6 Components Adquisició de capacitats. Exemple mecanisme. Autosuficiència en senyals de creixement. Activació de l’oncogen H-Ras. Insensibilitat als senyals inhibidors de creixement. 2/ W & + < 7 72T: 2. $ 0. Pèrdua del supressor de retinoblastoma. Evasió de l’apoptosi. Producció de factors IGF de supervivència. Potencial replicatiu il·limitat. Activació de la telomerasa. Manteniment de l’angiogènesi. Producció inductor VEGF. Invasió tissular i metàstasi. Inactivació E-cadherina. R. ' < 7 72T: 8!JJJ 6. /. & (4. :. LXT:. 7:702 L<. '. $ 7Y '.
(25) 1 !9 *(. (. &. %. (. &>%. ' 5. .. %. 6U. %. & ' &. ' &. &. < '!JJ4V < ' &. L. 84K:" 6. '. 0. L '. S. +. +. 6 @. (. &. ( L %. 6< %&. L. '. &. '. '. #$ 6. ( 33,. $*, 6 <. 33,. + %. /. 0. ". I ". U. %. L. ' +. +. 1. &>%. 0 4KKB 6. " L. 6 <. &. ) 0. ' ' 6 *. &. %. ' 2. 4KB"V ;. (. . ;. 2 3=E ; 3=E 2. 84KB:. .. . IJ & %. 0. 6 <. +. &. &. & 0. T 0. %. W!4 -# V. 6 <. ) '. B. &.
(26) 1 !9 L '. *. (. &. % &. 6. (. T2. %. '. ". 84KKIV ,. 0. 8!JJJ 6 *. '. 0. (. ,$. C. ;. C. 84KI V 1. L '. )84KK: 6 *. C. ),$. 2. A#M *". G '. $. /. C G '. ). 3 /. $ O. P. "G. 'L. ?. 5. ,$ (. ;. 0. . 4KI:V 3. $. 8!JJ:V. ). 0. 84KIKV /. 8!JJ V. 8!JJ ' 6. =. '. ,. &>%. ( +. 6 <. &. 4JJX. L. (. !. '. "J. , 6 *. (. & &. I X. L. >. IJ. +. 0. 61. ,. S. 'L. '. 2E,. P. ( ) V. L. &. ). 4B. &. &. (. 0. M. IB , 6*. +. ). $. %. '. +. +. +. +. V M. L. ) &. (. ( ,. (. L. $ O *6. :.
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
(28) 1 !9 (. /*. %. %. &. (. 6. &. .. &. 0. J'. :. '4. !JJ4 6 @ !. ' &. & ,. :. / * L. 747 5. 0 4JJX 0 G = !JJ4 6. ). 0 &. &. &. 6*. ). ;7. L. '. '. 2. %. *. '. 8. 'L 0 &. ' ? 6. ). G. / 1. &. +. JX. &. ). 84KIK 6 = 0. .. 0. '. ,. '. +. V &. +. 0. %. '. V. '. 6*. ' ( %. %. G '. 'L 4KI: 6. 2 &. '. 84KK: 6. '. '. 0. %. LXT:. *. (. L. 3*; *,;N3 1; <. ,. ,. , 61. 8!JJ4 6 A +. ). 7: &. ' (. ,. 4 1A ; R. 2/ T. %. ?. ?. ,. (. 9. S. #. !JJBV / K. 8!JJB 6. L. L. 0.
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
(30) 1 !9 &. ?. .. E. ,. 8!JJBV @ - 0 0. <. /@1. 3. (. ' '&>. /#1. ) , &. :,. < <. '. :. =. 7T <. 27:. /#1 5 &. &. /#1. 6#. &. %. +. ). 00. ,. L /@1. /@1 6 U. ,. '. % N. C. ). 6* /@1. 8!JJ:. &. &. '. 1. , 5. L. 5 +. ) 6#. /#1Y1 6. 71(. 1. /#1. ). C. ). '. L. /#1. . ' &. ,. ' C5. &. 9&!. /@1. <: J' :< 0 ' 1. ). L. L. 84KKI 6. (. ' ( 6 <C. &. 1 0. 3. /@1 &. "6 1. &. ,. ?. 8!JJ 6. /@1. 2/ W. 84KK:V ,. C. '. 'L. /@1. &. /@1. &. L. & & & ). ). 'L 44. 0. ?. ) /@1. , (. 6.
(31) 1 !9. ,. /#1. /@1. /* /@1 /#1. ,. ,. / 1. /#1. ,. ,*=17=@. /@1. , 1. 2/ W. L<. '. /. 2< 7 ' $ 7'<. $ 7 N :. '. , 1. /. ). / 1. &. L. /@1. 3. 3. '. ,. 6<. ". ' (. T $. 1. / 1. +. /@1. ' ( ). ' 2 :. 1. 0. 1. $. ,. % 6 #. / 1. ,. &. 4! 4. B46 <. , ,. +. &. 0'. &. 1 &. ). 6 *. L. '. ; ? &. 5 P. 6 12. &. '. % Z. =2! =2. % (. / 1. 6. ) $. '. &. ). '. <. 0. , -. 84KKJ 6 Z. &. , %. 6 8!JJ" 6. / 1. % 6 =0 '. 4!. / 1. &.
(32) 1 !9 ' 0[ (. +. ( &>%. 5. 6. (. ' ,. (. '&. 8!JJ 6 < &. ' '. +. ' (. ). 6 *. ( ). N. &. (. R 0. 8. ) < -.. 8. !JJ 6. < ,. / 1. 3L. !Y. ,. !JJ4 6 U. '. & L. (. !Y. +. 8!JJJ 6. /. $ 7 N : *. 1. &. ,. L. 3 ). /@1. /* 0. L'. /@1. & ,. E 5-. "7. @. 0. ' L. '. 0. =. . '. ,. '. '. + &. -1. 1(". S. '. ) 6* -1. 4-. '. 8 4KKI 6. ? ,. . &. &. " 6. '. Z. L. %. ". &. !Y. &. /*. 6. 4. ( T" ".
(33) 1 !9 < L. "7 W!JJ. &. +. L. ?. (. /@16 1 =. (. =2. '. / '!. '. & .. , 6< 12. ). !. (= (. =. / '! (. #2 (. & ). 97 1 6. L. L. #2. = L ,. 12. 1A ;6. ,. ). ). P &. 0'. ( =. ,. ,. 5 P .. ?. 3 )6. < IJX. 0 .9. -1. ". 0. 0. %. (. T #2 12. !JJ 6. L. L. & /*. ( L. $. 0. ). 'L. '. (. '. 0 .9. ". *'. '. &. ( 1. &. +. 0. +. '. '. T1 , =. !. 84KKI 6 @ '. .. 0. AQ6. /*. S. ,. 8. 6< !Y. -1. 3. AQ. A Q. ( +. <. ). ?. / 8!JJ. 8!JJJ 6. 4". ,. & 1. ;. $.
(34) 1 !9. /. +. '. :.. K J. 3. &. '. ( .. ?. ). /@1. ,. P. ,. (. G. ? .. ?. =. '. 6 1. %. +. 5. %. <. ). .. B6. ,. ( 4C. & )C 6 +. 1(". ). /. 3 ). %. '. &. 5 )61 ,. ( ,. ?. 97. '. L. %. 0'. $ !6 *. $. 5. & &. %. /4 'L L. S. / / / &. '. ,. C 4C. L. 6. ). L. 6E % &. (. (. 0. 1. L. 8!JJ4 6 * ,. .. &. &. 8!JJ V. , 3. 84KK V E 5 .. 6 ,. ?. &. 4 L. (. 84KK 6 # & (. (. ,. .. N. 3 1;;; & ,. & (. '. 5&. 0'. (. .. &. ,. ' &. !JJ4 6 <. 3*; 3 1;; & *,;4N!. "". "! 3 1;. 4. &. +.
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
(36) 1 !9. / / /. ,. &. 5 )C". ). L 0. , N3*;N* -. 6*. (. '. &. '. UE ). %. @$ D A< 4. 0'. #. '. & =*;. R$; = 1; 6 R$;. @. :6 3 5 P. 84KK" 6 < 5 P. < 3*;;4. B. 5. 'L. (. < '. ,. '. &. : '< J'. , N,0 6 3;;". &. 0. 5 @ !. N* -46. 2/ !W. ). :. '. /. 4:.
(37) 1 !9. /!. $ 7 N: $ O *<. . 4KIK. 6 #6 <. & (. 'L 0. 0 ;. +. F. " (. ( J. ( "G. *6 * (. ,$. 2. L. 4K &. ). L. &. ). , &. ?L. &. '. & $!. 4K. /. '. /. '. ,$. 4K. :. '. <' 2 : *-. ) 8!JJ. ,$ 5 P. ,$. ). 9:. 8!JJ ' 6 < ( %. 0 T. I6. L. (. :2. A#M. 4K -#. ). 4K 2 ,. ) 9. ". (. '. =0 '. 2/ @W "$. #. !4 &. L. &. *". &. :6 *. M. 2. 6* ,$. A#M &. 4K 2 ,. &. '. ,$. %. ,$. &. (. 3(;. 84KIK. (. I!. ". ,$. ". U@, 6 <. (. (. 8!JJ4 6 *. 4 !. U@,. 2. !4. &>% '. &>%. A#M6. 6. 4I. 4K 2 , &. !4. ( (. &>%. & (.
(38) 1 !9 ? ,. 5 P. 4K 2 ,. ( %. / 1. ' 2 <. +. &. &. 7= 46. '. 4K 2 ,. ') +. L. %. 56 @. 'L. /@1 & ). /@1. !4 2 ,. /@1. ( *" 6 *. ' 0'. 4K 2 , '. !4 2. ?. ). %. '. +. .. !4 2 ,. 4K 2 ,. '. 4K 2 ,. 2,. Consensus. 2/ W " LXT: 3 3 .@ 6. ?. ' !4 2 , '. (. 'L. : ). .. Human Monkey Cow Pig Rabbit Hamster Rat Mouse1 Mouse2 Mouse3. 4. ). &. ). '%. ' 6. (. L. L. & '. P ?. ) 6. G S R S G S S S S S G T L W D P P G P M (20) V S R S G S G S S S G T L W D P P G P M (20) G S R S G S G S S S G T L W D P P G P P (20) G S R S G S G S G S G T L W D P P G P P (20) G S R S G S G S S S G T L W D P P G P M (20) G S R S G S G S S S G S L W D P P G P M (20) G S R S G S G S S S G T L W D P P G P M (20) G S R S G S _ S _ S G T L W D P P S P G T H V T Q R P S S W R G G C L L Y T S P (38) G S R S G S _ S _ G T L W DP P S P G T H V T Q R P S S W R G G C L L Y T S P G S R S G S _ S _ S G T L W G P P S P G T H V T Q R P S S W R G G CLLYTSP. * *RSGSGSSSGTLWDPPGPMTHVTQRPSSWRGGCLLYTSP * ** * * * * * * * * GS 1 20 40. :7 M' L<. 7' 4. '. $. V8J 3(;/ *. 4K. 4K. %. '.
(39) 1 !9. /. 3H ( <. &" (. ,$. 5. AA (. &. 5. ,$ &. L. L. (. (. =0. & ,$. &. ) 6 <. 0. & N (. &. ? '. (. (. 0. 6. *. (. ,$ (. ' S & &. 0 (. (. L. &>%. J6 *. &. 6 <. % &. KJX J. '. ,$. %. &>%. '. ( '. (. 6. 1 [' 4 : J ' ,$. L. ?. 8J\ G. L. (T. 4KK V , ''. L 84KKJ. '. &. 5 P. &. L. '. N (. ?. !J. ' ). (6. &>%. 0. & + 5. <. L. (. + '. 4KK" 6 *. &. ' ). 6*. T.
(40) 1 !9 •. ( 0. '. &>% •. LXT: .. 7: : < $1 6. (. 00. &>%. T. 7 '. &. 4. (. ' V &. L. L. ' V 'L. J. &>%. &>%. 1. .. 6. <. K6 * ! 72. P. %. (. 6 &. PL. ! ' &. (. P. (. 6<. P. (. 84KI" 6 #. P. L. 1. 84KI"V , -. '. ?. L. &. P. L. 4. %. P. (. :. (. L 72. 2/ OW. '. (. J/ <. , -. ,$. !4. ? %. 84KI 6. G. - !JJ. !.
(41) 1 !9. / /. !. +. 0. L. '. (. +. '. ). 3. L. ' =. .. (. ,$. 84KKI 6 <. 6 & ,$1. 4JJ. &. 'L. ( (. :. '. ,$ 0" U ,$. :. : &. '. 6. #. '. (. :. '. 6 *. : 5. ) V. T". '. (. B -#. '. &>% Q. (. &. -#. /&. '. (. 6. (. +. '. 0. +. %. ?. &>%. 4J 6 * +. &. • *. L2] *]. (2. ,$. ( ] G]. 5& '. ). U ,$1 (. • *. (*. &. 00. (. &. ' (. 0 6. : • *. 6. L. (. '. '. ,$ '. '. 5 P. (. 6. :. 6 • *. ( &. GN. 5. ( (. ?. 6 <. C C! : 5. (. !!. &.
(42) 1 !9 L. :. (6. '. ). &. ). !: S. (L. :. &. ?. &. 8 COMPLEX E. pGU. A. U1. SF1. (Py) n AGp. U2AF U2AF 35 65. COMPLEX A pGU. U1. U2AF U2AF 65 35. U2 A. (Py) n AGp. COMPLEX B pGU. U1 U2 A. U5 U4. U6. (Py) n AGp. REARRANJAMENTS CAP A COMPLEX C. 2/. W :. / /. # 2 '. 7. !. + 6E. 7:. 2. &. +. '. << '. L &. (. &. 0. ( '. 6. ,$1. & L. ). ?. '. '. <. L. (. ( 6@. T. '. ". / @. - !JJ. ! ! #. &. '. G. & !. . !JJJ 6.
(43) 1 !9 0 ). '. =, ,. ' &. (. ,= 6. L. 8!JJ 6 @. ,,3 0". (. $. ,$ ,$. ). ). L. =,. '. ,=. &% 4KKI 6 @. 84KK"V M. 0. &. '. '. &. 0. ). F. 8. =,. 0'. =, 6. *. ,,3. :). ,=. 'L. '. ; (. &. / & (. ! (. ?. (. 6 *. &>%. 'U!. S. ' ?. '. 0. ) 6. 9: +. ? ,$. ,$. ,$. ( (. 6#. (. ). &. &. ! J ,$. (. ,,3. &. ). '. # .. 8!JJ!V ;. 84KKK 6 <. 0 ,$1 &. 0 C. *. B. 6. U. ;2. ". ) 3. L. )6. @1. 9 5. S. &. ). IJ (. (. ,$ 6. !". !J. ( ?. ,$. 1. AA.
(44) 1 !9. / /. ! ! #'. $<. -. =0. &. (. &>%. & 6. L. @. &. & + &%. '. ). U ,$1 U4. U44 U4! ,$1 U"NUB. 6<U. <. ,$1. + 5. +. @ @. /U /. (. =0. U"NUB ,$1. U ,$. &. ,$. '. U!. '. (. ,$. @. L. 84KKB 6. 6. 8&. (8. <8. 6. / /. ' *. %. ! ! #. (. (. ,$. 6^. & '. 6@ 6 *. &>% 'L -8. &. &>%. 6 * +. &. '. & 0. 'L ,$. &. L. ). &. !JX. 0. ? @. &%. 84KK4. ( 84KKIV. ?. 84KKKV @ - 0. 8!JJJ. 0. '. ' .. !JJ4 6. !. 8.
(45) 1 !9. / /. :. ! ! #. <. *. (. ,$ L. &. &. (. 6. L. 5&. ( %. ,$. 6. . :J. P. &. '. (. ( ,$. / '. '. 4K:I 6 #. L0 0. 4KKK 6. +. 'L. $. 0. + '. &. +. '. 2 -. 8. #$. (. 3. & 6 *. &> L. %. *=@. W "J BJX. &. %. (. 0. -. &. 8!JJ! 6. L. '. + .. 0. ( 0. W JJJ. &. 5. ' '. 5. (. 0. T. 6 1. &. L. S. &. &. &. L 6 <. (. 0. &. (. %. %. '. '. &%. '. +. L. ' G. 8!JJ! 6. * 5. ,$. (. (. &. T. ,$. (. 44 6 #. '. ( (. ,$ S. ( 0. S. !B. (. & (. 6* ,$. &.
(46) 1 !9 + (. (. (. 6 *. &. < (. &. (. (. 6. ,$ 6#. (. (. 'L. ' & +. '. 6 A +. 0 6. ,$. S. '. ). G. - !JJ 6. Exclusió d’exó. Exons mútuament excloents. 5’ ss alternatiu. 3’ ss alternatiu. Inicis de trascripció alternatius Poly (A). Punts de poliadenilació alternatius Poly (A). Retenció d’intró. 2/. W. $< '. ! ! #. <. :. </. &>%. T. ). ). &>% ?. +. %. ?. &>%. 6*. & ) 6*. ( !:. %. '. (.
(47) 1 !9 (. 6 * =3 2. 8!JJ! 4:. '. -. @#14: , E. / / /. 2<. L. %. 84KKK 6. J'. :. ! ! #. <. L. ( 6. &. ? (. " 0'. 3" "". (. 3"" 4! 6 <. ( L. ). &. 0'. &. 0'. %&. 6< ( &. ' &. (. %. (. 0'. &. (. ,$. 8!JJJ 6. W " LXT:. &>% '. P. &. ). 2/. ). 2< '7. '. ! ! #. :. <3. !I. 8!JJ 6. 3. 8!JJ V =. 0.
(48) 1 !9 *. &. .. %. 4 X. JX. (. '. 5. 0. &>%. (. L. +. '. (. 6. <. 9:. *. &. 3. 0. ' L. & (. 6 0 ,$1. &%. (. 0. 4 1@G. (. (. &. 4. L. ,$. 0. ). '. ?. '. (. 4 T. P&. .. ,$ 6 !. ?. ? (. ?. & 6. 1). Zona silenciada. 2) Zona silenciada. 2/. W ). 7'. $. 1@G. 4. :. : ' <: 8J $ (. =. $. ' /. !K. 7 9: !JJ! 6. 6 *.
(49) 1 !9. / / / <. 7'7: '. :. J$. <. 5. &>%. &. ( ". < [. .. 8!JJ! (. 8!JJ 6 *. '. %. &. L (. ,$. '. )L $3#6 ^. 4KKK 6 <. ,$. %. +. '. 5 P. L. 0. 1@. 2. ,$. ?. 8. T. #$. $. 1@ S. ( (6 *. L 6 S. 5. *R. ,$. '. ' .6. '. &. 6 *. 0. L. =. '. 0. &. +. 5. & &. / / /. L. 7'7: '. P & '. $3#6 *. ' '. ' +. ' &>. *R. & 00 *R. 'L. '. ?. ,$ = 5. ( (. (. (. L =. 0 + '. &>. '. ( *R. W!J. (. *R. &. ( +. P. ' P. *R 6. *R. (. .. 7$ $. ,$ 6. <. ! ! #. =0. :. <. $ = &. &. J. (.
(50) 1 !9 (. &. 1@. &. &. (. ,$ 6. *. ,$. & &. &. 1@. ). &. ). 6 =0. 0. '. %. 5 & .. &. JX. &. %. 1@. $3#. ( ). 0 .. 84KKK 6. (. T. $ =. &. & 0 1@. 3 &. !JJ!V E. 4KKI 6 *. $ =. +. /. F. 3. 0' (. ,$ (. %. 3. %. L. L. 5 P. %. &. & ,$. 6<. ,$. '' &. <. $3#. 8!JJ! 6. P. *. &. 'L. . 4KKI '. !JJB. 6. .. 3. &. '. 84KKI 6 @. &. % G. ? 1. %. '. ,$. 0. 6U ,$. ?. +. &. &>%. ,$ 8. 9. & ) (. 4. ( 6. 0 % L +. ). ,$. &. . (. &. % ,$. 3. & 5. 6*. %. (. ,$. 0" ,$ &. %. $ '. (. 8!JJB 6 <. ,$.
(51) 1 !9. / /. :. 7 <. <. ,$. %. '. '. 5. ,$. '. ). ( 3". ?. ,$. (. AAA&. ,$. ,G#. !J ! +. =. 8!JJ 6 U. 0". +. '. '. &>%. & ( ,A=. &. L. (. /. .. 8!JJ 6 *. L. % 6 &. '. %. (. (,A= 6. ,$. (. '. ,$. (. &. ,$. 27: <. Q. L. #. L. 6 1. ,$. (. 'L. ,$ %. (. (. 6*. (,A=. &. ?. % 6. / /. $ 7 *. : ' ,$. (. ,$. ,$. &. %. ?. &. 4JJJ. W JX. W!4. ,$. 6 =0. 0. 6 < (. '. %. (. ( E. 0. 8!JJ: 6 *. S. ,$. 0. ,$ '. ,$ +. 0. 0. & *&. + ;. 0. 8!JJBV @. !. ?. 8!JJI 6.
(52) 1 !9 *. ,$ ?. '. ). ,$. '. AAA. '. # 1 04. 0. &. -8. P. (. ). *. ,$. ,$. 8$7 :. &. W. 7' '. 1 0. (. ,$. ( (. C :1. (. ,$ & ,$. # 72T:. ' &>%. (. 8!JJ" 6. '. =. 8!JJB. 6 6*. ). 7-. 2/. $ ,$. &. -8. #. ,$. 6. ,$. (. :J '. ,G#. 0' ( *. ,$. 6< ). ,$. ,$. 8!JJ! 6 *. #/ ,I. &. '. ( 79. %. $ -. 8!JJ V <. AAA 5. 4" 6 *. (. <. AAA ,$. ?.
(53) 1 !9. / /. $. 7:. <. :702 L<. ,$. 0 (. '. ( 6*. ,$. +. %. L U. ?. %. ? (. ' %. (. ,$ 6. &. +. (. & & 0. 6. '. %. &. %. (. '. (. (. &>. L. @. ?. ,$. +. %. 6*. & L. %. S. L '. 6 *. & ,. .. 8!JJBV = 0!JJB. ). \. + %. 8!JJBV ;. ,$. 0. ' 'LL. +. 8!JJ 6 0'. R %. <. %. 6. 'L 0. ,$. 5&. (. %. 8 !JJ! &. 2AE. 2. 8!JJB. G R. (. #. 8!JJB 6. < ,$. 'L 0 (. A?&. !JJ V 1. + % 8!JJB 6. ".
(54) 1 !9. /. I. ). <. .. 5 P. (. (. .. ?. ?. G. 'L. (. -. +. 8!JJJV 1 [. 84KK: 6. &. %. ) . ). T4. &. .. ) 6<. ). &. .. ?. ?. (. '. ?. !. (. (. '. &. . 6. (. '. ). L. ,. ; ,. ;4 L. .. '. &. ?. L. 84KK" 6 @L. B -#. L:. "J F#"J. % 0% (. 4 6. <. .. &. &. ' P. +. ' P. ) 6. &. ). .. ; 0. '. ) -. @. +. ?. ). 1; OAA ,. β. (. 6. 1; 6 *. +. '. ( 'L 8 !JJ4V ,. ?. ,. =2!. 8 4KKK 6 *. =2!. 0. ;4 84KKI. 12. 12. '. ). 6. <. ). ,. $ 7 N :. ;4. +. :. Q) &. 5 C. ,. 84KK". ' (. & ). # /. &. 0 &. 5 P. 8!JJ4V =-. 8!JJB 6 <. ) 0. &. (. ) =0 0. α βA βAA γ. ). ". '. &. 1;.
(55) 1 !9 # / 3 (. 84KKI 6 1 δ ε η θ. ( 1;. λ6. .. 1; ,. ;4. ,. &. &. 8!JJ!. W. 7' '. &. ). 3 5 P ). #. 4. 1;. 6*. 47 47 $. ;4. 8!JJ!. Q. !. ' T. γ&. 1; OAA. ,. 84KK. 1<. ?. %. &. , &. L. ;4 0 ?. &. # /6. L. B. # /&. 6 1. 9 'L. &. 5 &. _. 8 4!J /@1 / 1. F#"J. 5. (. 1. 0. :. ) 6<. 1; ! $. 0. +. % ?. ?. 1; 5. 7: >( 3. $. &. γ. 1;. ' 0' ',. ). 1; 6 <. 6. ) &. !. .. '. &. ζ. 1;. 0. $ 7 N :. 'L. # /. ' ). +. 2/. µ. L 'L. #. ;4. 1;. / =2!6 #. 84KK: 0.
(56) 1 !9 &. / 1. (. ,. ;4. ! & ;4. / [. L &. 6. L. : 6,. 12. ;4. /@1. 4 , 1; OAA. 1; OAA ;4. L. '. '. 7: - :. 46. &. ;4. 0. S. Q. 1@1` = (. 8!JJB 6 =2!. =. 84KKI 6. 7 : -47 4. &. ',. µ& 3 ;4. &. 8!JJ4 6. 0' (. (. 1@1` =. ,. ;4 L. 6. 31. ( &. (. , 6. ,. 8!JJ4V =-. '. ). (. (. ' 1; βAA = 0 0. ,. ?. 'L L. =2. 0. B. &. +. (. &. 4. ". 5. 6. ). ?. 8. 0' (. ( %. ) ':. ". &. / 1. 4KK ,. '. Z [. 84KKK. ;4 L. L. ;4. . ? 0. 1; βAA,. ;4. ' (. ;. 0-. 5 P %. 8!JJ4 6. :. &.
(57) 1 !9 :<. <#<:. ]'. 4KK! 6 ,. 0. : 2 :. ;4. 1;. '. L. L. , ?-. 8. 0 '. ?. 6. '. ?. .. ?. ? &. &. :J. ). 1; βAA. 4. ,. -. 84KK:V ,. #. 1@1µ. $. 1#*"*. #. W 7: LXT:. <. #. A. =. '. /@1. '. <: J'. T. ). 84KK". -. 84KK". ,. ?. 84KKK. -. 0. 0'. 7#. 84KKI. Z [. ,. M. 84KKK. '. :K. 'L. /. ? ? 8. .. 6. :K S. # 4. <. 7#. A. 1< γ #. >. ?. ?. 9 &. + (. ,. I. '. 84KKK 6. 6A.
(58) 1 !9. !/. I *. '. ). $@. : 5. 0. ' B. '. %. ; 0. '. 84KK: 6. ( +. '. 8. L. +. &>. &. 9. +. 0. 6 <. 0' ( 6#. 0. '. 0. '. :. ) &. .. 0. &. &. 5& &. +. &. +. .. A. #$. (. !JX. &. ). + JX. L. @ #. #G#. ? #G#. &. :. B. L. ) 6@. 9. &. 'L &. 0. & .. = 3. +. ). '. ). (. 3. L 5 P. ( ,. ;4. 3#3! R. G ( 3#3!. 'L 0 '. :O 5. 2#3!. @ 0. K. 8!JJ: 6. 0' (. 8!JJB 6 @ &. '. 0' (. ' :β. L 4K. 0' L. ). :α L. L :α. ( :β. 61. 6. L. !4. #$ &. 5&. :. '. 4B 6 < (. 6 * 0. 1. &>%. ( &. &>% 8. 7#. ' (. :. 0. 6. $@. 0. +. 8!JJ 6. &. :DL.
(59) 1 !9. 2/ !W. #. '. <. M ' $ / *(. 4. (. 0. :. 6. 4. ?. '. ). !. &. 6#. ?. L .. ' 6. (. :. (. &. $*=. &. .. ?. 5&. :. '&. ). L. '. : L ) A. @. $<=. $<= $*=. & '. L. 8!JJ!. B. 4: T. @. L. @. ∆$ L. P. @. 0'. 6. "J.
(60) 1 !9. @. :. N :. @ *! 4. *! 4 4. 2/ @W 7: 7 ' 4. :. '. !. $ 7 77 '. $@. ∆ $@ /. @. ' (. (. ' @. B N :. = 36 $. .. '. (. &. &. &%. 0. &. : Z. 3. 84KKKV Z. 84KKK. 6. : L. 8!JJJ. L. L. # <. 0. ∆$. &. (. '. B %. ' (. ?. 8!JJJ 6 @. @. 'L. #$. 6. <. : 0 4:. Q : 5&. (. .#6. (. 4K 2 , '. '. /. L. 0. :. A[. '. (. 8!JJJ 6. L :D. 8!JJ. L 5 P. ' :O R. "4. &. *!. 0. ' ' 8!JJB 6.
(61) 1 !9. @/. "" *. "3". ( C. '. ;Q" &. L. ". +. '. 0 %. 4JJX. ' ) 9 G0 -. :. 8!JJ: 6 *. . 4KK:. =. 4 6. &. ". @= 4 0. '. ). ?. . 4KK. @= !. *. 4B. 4B @ '. ?. 0. =. '. 4Ba 4KK 6 *. ;. &. 0. (. S %. (6. %. ;. <. 4K:4 6. L. &. %. (. /. ? 4KK4 6. & #. 0. ?. &. @= 4. @= !. ' (. 84KKIV ; ' . 0. &. @. @= 4. '. 6. ( 0. ?. &. 8!JJ4 6 #. @= !. %& (. 8!JJ4 6. 9 # &. '. ?. 0. 0. <# :. K&". 84KK:. aA 0. &. ". /@1. ,. @= !. !JJ. 6. ,0 ' L. L. @=. 5 P. @= L. !JJ:. L. 6. @= !. ) -. 5. / 1 A -. 8. G0 -. 8. &>. ,0 ' /@1 & &. 3. 8!JJ 6. +. @7, $@ "!). .;. 4I 6. "!. ,/.
(62) 1 !9. 2/. W. L<. '. ,. , +. 3. 6 C" C. C 0. !JJ:. &. '. ). L. L. /*. &. (. ' ,0 ' 2. 8!JJ: 6 <. +. @ @1. & @0. 8!JJJ 5 & ( %. %. 2/ OW. 4K 6. 2<. J ,. $. '. #. G. 8!JJ". ". '.
(63) 1 !9 #. &. (. T 4 <. +. ' (. @ @1. % (. 84KKK !. '. (. ;. @ @1. 0. / 0. -. 8!JJ. ' <. ' (. @ @1. 6 Z. !JJ! " *. @ @1. 'L. @ @1. +. < ' ( %. @ .. *. 8!JJ! 6. & '. ( (. @ @1. & '. 6@ ' L. ). @ @1 &. @ @1. & 8!JJ!. @ @1. &. ). ( \0. ". 0. @ @1. 8 !JJ!. @ .. /. 61. (. 'LL. $. (. '. 0' @ .. / /. L. %. (. @ @1. @ @1. 3. ' (. ' ?. 8!JJ! 6. R. 0 *. (. ). &. &>% '. (. (. ' G. -'. !JJ4 6 <. %. #$ #$ #$. (. 6 =. "". &.
(64) 1 !9 #$. % %. 6. *. 5. &>%. #$ 6 U. &>% (. %. (. L. 5 P. 6/ /. 4B (. &. &. '. &. %. #$. + L. %. & '. &>%. (. &. (. %. '. 4!. =. L. 84KKI 6. ). &. (. &. #$. 6. * 0. #$. @@ ///. +. ). &. 4 J. 0( % & !JJJ. 6#. L. P 4J %&. 'L. !JJ ' ?. &. &%. &>% &. &. .. (6 < '. &. ?. /. &>%. 4 J !JJ. % %. ( 6 =0. '. L. %. ). 6 0. & L %. &. +. L. (. &. L L '. '. &. (. 6U. 5. ) '. #$. <. '. !JJJ 6. < \0. ) 84KK!. %. 0. &. &. '. 0' 0. ) & &. (0. '. %. G /. ". 6 84KK:. L 0' (.
(65) 1 !9 &>% ). &. %. /6. ) DNO. ". 1 4. , 4 @ !. +. (. !J 6 <. 'L. '. %. < <. '. 0. :. ,. &. <. (. T. ?. 0'. L. ( % 6. 6 <. #$. ) 1 4. P@ G. ,$1. '. % 6. -'. !JJ4 6. &. ( 0. +. /. &. #$ 6 1. &. 6 <. %&. L. 6 <. $2*R. L. &>%. '. 70. ' @, 4. :/<. : 9<. +. / / < (. )< C@. 6. P. ? &>%. $2*R. 6 )< S. 5 P %. .8. ). &. W. 4. '. @, !. 2/. 0. >. - ). 84KKI 6. &>%. & (. =. ? %&. ?. &>% @@ /// 5 &. ,$. L. ,$ &. 6< @*,@ @*,T ( #$. ? ?. #$. & %. (. 'L L ,$. "B. & %. G. -'. !JJJ 6.
(66) 1 !9 =. (. %. ;. + 84KK" 6. &. (. P. %. &. + &. %. G. !JJ V. 8!JJ! 6. 6< (. %. 0. &. 4. 0'. 5. L. 9 %. L. (. (. ! '. +. ?. +. %. '. &. %. +. 8 '. '. +. 0. ?. +. 0@*,@. ). 4KKBV \. 3. 8!JJ: 6. / /. R< *. L. L. (. 5 P. ' $. &. &. %. (. !JJJ 6 *. L. '. 0. (. %. #$ 6<. ' ?. &. ( 6<. '. (. % &. %. &. ' +. 6. *. 4. &. #$ 6 3N=. 4. ". M:. &. 7. &. 1 =N3. 1. (. !4 6 *. L +. 6. L. L. '. & %. ":. 6.
(67) 1 !9 *. L. +. (. '. &. (. %. L. &. 6. * &. &. 6@. 'L. *. ( (. 5. $. '. ?. (. 6. & ' &>%. J. &. #$. 6* L. L. (. %. 0 ( 2. [ #$. %. 2/. '. >. 84KIK 6 & .. ' &. (. 5. 6. W. $. :. J'. R<. 2. !JJ. "I. ?. 7 2 :. L. &. &. ?. (. 6. (. 0. 6<. '. &. 3. 6. #$. '. =. &. ?. '. P. %(.
(68) 1 !9 <. ). : (. 6 5. () 0 <. '. ). &. 6. #;. 8. %. 9. L. 6 #. P. =. 3. #;. 2. &. 84KK. P. '. !4 6 <. #;. ' !. $. '. F 4. ' 0'. ;A. 4KKJ 6. <. ?. L 6@. '. 'L 0 '. ) &. % 6. +. &. 0 #$. = /!N36. &. %. L. /4N=. G. 4KKB. 2/. 8!JJ V \0. !! 6. W. 2<. J'. ,. 7. '< :. R<. "K. \0. 84KKB 6. 8.
(69) 1 !9 U. & +. (. L. &. & +. %. '5. 0 +. ' 6. ' +. %. &. 0 (. &. L. '. L. 6. J. +. 6 *.
(70) % 1. 5. 4. -. -. 3 ".
(71) !.
(72) &. '. (. '. -. !1. ). 4K 2. , 2. ( A#M G ' 0. 84KIKV /. 8!JJ ' 6 <. ?. '. &. 0. '. ). &. '. 4K. &. +. ( %. ( 6*. 'L. + +. '. 5 P ,. L. '. ( A#M. 8!JJ:V. 4K 2 ,. '. '. ;4 5 &. + /. ). &. 5 P 8!JJ. ( 6. ?. (. 5 ). (. '. &. 4K 2 ,. %(. 6. #=. •. <. $ M 4 W. ?. ?. '. 4K 2 ,. 6. •. *. 4KN,. '. •. ,. • ' (. •. * 2. 6. ?. ?. + &. 4K 2 ,. +. .. %. ?. (. ;4 L. ' 2 <. 0. &. (. ' (. %. 4K 2 , 6. L. 6. % ). ,$. 4K 2 ,. 4KN :. 2 <. 4K6. 5 P.
(73) ".
(74) -. ". !1. ".
(75) B.
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
(77) % 1. 2/. W. 8$. : ' 6*. % 1 , ;4 0 ,*@ 0. ' ?. 1. '. A. B. C. D. E. F. Q1 #8 1 , ;4 *Z 1 4K + # G * C' % Z 1 4K6 * L ,*@ 6< ( & > /. '. 'L. &. !" 6. %. 2 <. /. =146. (. ?. '. N, %. ,*@ C' % C' L 6* +. %. 8!JJ. +. '. (. &/. *. % %. + 3. ". %. , 5 2K 3. '. L. &. ?. +. I. 6. 4K ".
(78) % 1. NIS. fibroblast. H91. Hep-2. Molt-4. Raji 1. HeLa. 2/. W. 7 6< ). K J <# R< % A. ' '. $ 7 N: $ O *:'02 : : ' 4 : =14 4N!JJ 6* $A= % ?+ ' 4%?&4N JJJ6 G b !J ` 6. K. $<. R< '. ? % '.
(79) % 1 *. &. (. 5 P. &>% !JJJ 6 <. G '. 4KI:V 3. '. 84KKIV ,. 8. 5. T. C. C. /@1. /@1. C. /#1N/@16 <. +. &. O ! (. C. /@1 ). 6*. 4!. (. '. $. & %. /@16 <C. &. ' @. !6 U. O. 2 C. !. 'L. T '. &. 6U C. %. 0 0. ( &. 4B". '. /@16 1 I. 0% ( α. ,. C !. +. C. '. @. ,. 1.. ( ). ! 6. ). / 1. !. 0. (. 5 '. '. ). $. ,. C. !. < 6. (. !4 2 ,. 4K 2 , ,. (. '. '. ;4T 1 . ∧+ ∧. O. '. 1. ∧ ". 1 . C3. '. $ C". O. ∧3. 1 :! ∧. O. O. 6. C( A#M C S. ". @. ∧. :. @. <!. C 0. &. ). !4 2 ,. F# ). 5. ) 4 : 4BJ 5 &. 0. L. &. L. !. ∧. !. $!∧ +. &. ?. $ ! ∧1 . ! 6 E. !. + '. '. &>%. BJ. C + 4K. 'L ). 6<. C L C. &>%. L C. ". ) 6 @. ' +. 20.
(80) % 1 $A2 @. ?. %. Q. / - 0. =. #. !JJ 3. 6 <. %. ;. DDO. =. 6. QDO 2/ W < J > ! ' < 8 <: J $ OC ) / ' 0'. G12V G15A. 4K. S17N. ,. ;46. Q61L. 38/39GI. S160A W164A. D165G. -. +. E. ?. -. +. ?. ' 0'. ;4. ?. 4K 2 ,. 6*. /G;@: 4K Z4I:. '. 24JK L(. / #@: ,. <. '. <. '. @. ) 6U. @. ;4. ##7. 2. Q#7. &. & 5 Jc. '. 6# ',. ? ;4. ). !4 2 ,. ' 4B. 6*. &. &. ,. '. '. '. ! 6@. '. =0. T ##7 < N @ Q#7 < N@ N2 N 6 < ? 0 24JK ( / <" #$ G# /G;@: 4K ' Z4I: ( / <" # / #@: , ;46 * L 4K[ M , ;4 L !4 M , ;46. S39I. ,. ?. ' &. F#. '. 'L. 4B" ). ). ? !4 2 ,. %. C B4. /@1. 4K 2 ). 4K 2.
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
(82) % 1 !B ? 6. &. %. 0. &. & (. %. .. 4K 2 ,. ,. (. '. 'C!. .. ' (. p19. PKC II. MERGE. K:. 2 J$. :< ?. ( 3*,/*. / ? 5 P A ' e "II 'C! ?. 4K. F4B". ' (. L 4KF4B" P+. ) &. 4K. &. 2 < (. e 6. %. 4K '. ?. %. 4K. ' 6. 4K. ' 6. :D. 1; OAA. 4K. ' (. %. 6. MERGE. ' % !:. ?. PKC]33. ? 2 <. 1; OAA. p19. ) ]33 7R7 ) 6< 6* 1; OAA6 <. L. &. ). 2/ !W $ O *' (. ;4. ,*@. 1; +. "6. &. L. ' &. & &. ''. (. 6. (. &. 4K +. 1;. , 4K. B. ;4. 1; 6 1 d.
(83) % 1. 2/. unitats arbitràries d'activitat PKC. 25,00. @W. $ O *: : , ) / 1; % 2 < ' ( 4K 4K 6< 1; ' + & C' '+ *<A= ' ' ' ( 6* L 2!7! "K! ' 0 ( 0 ' 1; 6 = 0 ( b f <J6JJ4 6. <. *. 22,50 20,00 17,50 15,00 12,50 10,00 7,50 5,00 2,50 0,00. pRK5 p19 p19mut. '. ' .. 5 P. ' .. =0 [. 5&. # /. .. *,;. R$;6 <. (. , N3*;N*,;. ?. ( %. *,;4N!. 84KKI 6. B. ). *,;. &. ( %. ' (. (. ). 4K F. 6<. ' ( *,;. ' B. '. *,;4. ( 6. ?. 4K. (. I3 1;DNON_ P. '. !IG. 4K 2 ,. R$;. % %. 0. 3 1;6 1. 4K 2 ,. ?. 6. B". L &. &. %. 6<. !I. ) *,;!. R$;4N!N. 'L 4K. G ). *,;4. 4K 2 ,. ?. %. I3 1;DNON_ R$;4N!N. !I. . %. R$; A. 1; 3 1;T. '&. 84KKI. 4K 2 ,. =U1*, ,$. '.
(84) % 1. A. p19 mut. p19. pRK5. p-ERK1 p-ERK2 GAPDH p19 H-Ras recombinant. ERK 1/2. GAPDH. B. pSUPER. RNAi p19 p-ERK1 p-ERK2 p-SAPK/JNK. GAPDH. p19 H-Ras. 2/ W , J' ) C = :^ : *,;4 ( % 4K ,; 4K 6 * ( / 1#2 6 & F ( % 2 < %. /. $ O. :'< 8 !. ) 8!JJ. 0. R. '. (. ,; ? 4K ' 6. 2<. '. (. ). ). ) 4K 2 ,. :O. ' (. +. &. %. 6=. ' 4K. 6 E. ?. '. 0' ) &. 8!JJB 6 @. '. :D 0. 0. 3#3!. 5 P. ' 0'. *,;4N! 4K 2 ,. ,; 6 * R$;. 7. &. : 5 P. ' (. ,. 6A :β. G. 1 C". U /. J' $ O6 & F. 7# 8$ 2 < ' G ' 0. !4. (. B. ' :D. :O. 5 P.
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
(86) % 1. A DDO p73Z -. 2/ W 3: J' $ O *# $@ / & ' 0'. QDO. p19. 4K ( : DNO6. p21. p19 p73] -. !4. 0. ( : DNO / #@:6 * / #@: : D L ( 4""4 4K4! / #@: : O L 4""4 4" :6 * ( Q#7. 5’ 1441 TGCACTCCGCCACCCCCCTACCACGCCGACCCCAGCCTCGTCAGTTTTTTAA____CAGGA p73a 3’. IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII. I. I. 5’ 1441 TGCACTCCGCCACCCCCCTACCACGCCGACCCCAGCCTCGTCAGGACCTGGGGGCCCTGA p73b 3’. C T P P P P Y H A D P S L V. C. ) 6. DDO. QDO. : O6 0'. p53. & &>% :D '. &. :. p73. @. 4K. '. /G;@:. p21. B. p19 H-Ras. !4 2 ,. 4K 2 , 6. 'L. ?. %. ?. ). 2 <. '. 46. p19. p73Z. MERGE. p19. p73Z. MERGE. 2/ W $ O *$@ Z 7R7 ' ) 6 < 6 * 'C! :D 6<. :< / ? ? 5 P A ( e "II 3*,/*. K:. B:. 4K ' 'C! ?. :D. %. 2 < 4K. ' ( (. e 6.
(87) % 1 <. %. S. . 0. '. 6. (. 3. L. L '. %. (. :D L. :O 5. 2#3! (. :. 8 !JJ: 6 1 &. :. L. '. 0'. &. @ 0. %. 8!JJ 6 #. &. &. 2 <. ' ( : N 4K6 1. @, 1 &. 4K 0. 4K ?. 0. ' -. !. &. '. '. 1 , *<A= 6 @. '. !. ?. '. 4K 6. &. ). &. &. &. % : ?G. 0. ). ' ( L. &. ' (. 5 P. %. 6. & 2 <. +. 4K. : L. 1. 4K. 4K 2 ,. %. ,$. 0. &. .A 6 6<. %. ). %. :. ,$. 2 <. 0 =. ' ,$. :. L '. ,;. ,; 14K6 # (. L. 6*. 4K JX :. <. &. : 5&. (. ' 8!JJ V \0. 84KKB. & ' (. ?. %. ' (. ( 4K. L. %. / 1. #$ 6. '. ! X &. % L. BI. &. %. &. 4K. 0 %. 5 5 P. ' (. 4K6 1. &. &. ?. /4. &. !G 6. ?. G. ?. '. L. &. !" 0. 6#. 0.
(88) % 1. A pRK5. B. p19. p19mut. pRK5. siRNA p19 p73 siRNA p73. p19. p73 GAPDH. unitats arbitràries d'activitat telomerasa. 1,4. *. *. 1,2. **. 1. **. 0,8 0,6 0,4 0,2 0. pRK5. p19. p19mut. p19. pRK5. p19 siRNA p73. 2/ W $ O *: : , 7 = :^ : $@ / & % 2 < ' ( 4K 4K 6 < ' + & C' '+ *<A= ' ' ' ( ' ? " J 6* ' 0 ( J6 0 ' 6 =0 ( b f gJ6JJ4 ff gJ6JJ4 ( + F G ' : / 1#2 6 & % 2 < ' ( 4K 2 , % 0 ) : % ' 4K ,$ :6 < ' + & C' '+ *<A= ' ' ' ( ' ? " J 6* ' 0 ( J 0 ' 6 =0 ( b f gJ6JJ4V ff gJ J ' ' % ,$ ( + F G 63 5 & / 1#2 5 P 3 / E 6JT ,; b IV 4Kb BBV ,$ : b4 I V 4KN ,$ : b4 B6. &. /4 \0 'L. =. 84KKB. 0. /4N= E. 8!JJ:. ). '. & *,;. &. 6= & &. '. '. 5. 4K L. /4 6. 1. '. & (74. 2 <. ' (. ? !:-. 4. 5 P. 4K 2 ,. + 6*. BK. F '. G. %. =.
(89) % 1 ;2,. (7 !JJ". &. 1A ; 5 &. (. 6. L. 5 P 8!JJ! 6 @. L. &. N 'L 0. - N1;G G. & !:-. (. 4. '. 0'. 6@ ). 4K. ". - 4. !:. (7. &. (7. + %. '. ' (. 6. p19. control. -. G1. G1. G2 S. S. 100. % c è l·lu le s to ta ls. 90 80 70. G1. 60 50. S. 40. G2. 30 20 10 0. p19. 2/. W $ O *: : $ 5 P =% */ 1 4K6 < % / 1h 4K 6 * % P T 4Kb:! V. :. control -. 2 ' TR< - . %. :1 % '/ 1. bI I6. :J. ' 2 < L. : J1 C "/ + ' ( 4K ' & ' ( % % / 16 *.
(90) % 1. p19. pRK5. FoxO1. GAPDH. 2/ W $ O *$ 7,7 <: : (74 ( ,; 4K ,; 4K 6* ( / 1#2 63 5 / E 6JT ,; b! 4!V 4Kb" ! 6. : '. ' 2 < '. 78. R<. 6F. G. (. 6* / 1#2. (. 5 P. 5 0. 4K. '. .. ' A@. ,;. 4K. A1. ,; '. 6. :4. & 6 #. 5 P 2 <. ) ,; ? 3. '. &. ' ' (. :, %. %. 4KF4B" ( L. '. (. E.
(91) % 1. pRK5. p19. p19mut. 100 90 80. % c è l·lu le s. 70 60 50 40 30 20 10 0. pRK5. p19 p19mut ETO primerenca apoptosi normals necrosi. 2/ W ' ,: % <C(. 7#. C 0. 8$ ,; 6* ,I ? %. J ' $ O *:7 $ 7,7 $7$ 7 / ,; 4K ,; 4KF4B" % 2 < 0 ' % & ,K 6 =C 0 ? ' * M< [ . ' + C + 6. :!. % '* ( 4. & E A@ F. "II. & A 3 6. 2 < 4JJ `3 ,B & 1 A1 6 < U= 6.
(92) % 1. /. $ O. 2<. 2 :. 8. :. R<. 8$. J'. S 1. L. ?. (. 4K 2 ,. !!6JJJ '. 0. %. ' (. ) '. 0. 4KF4B" #$. '. %. '. ' (. % %. +. (. 2 <. ' (. 4K. (. '. ' 0. 6<. 0. &. '. i46 6 5,3 5,1. mitj.p19. p19mut. p19. mitj.p19mut. (. 4K. 4 $6 6b4 $. B6< &. $6 6. ,;. &. %. ?. %. 4K. 6*. 4K. 2 <. sobreexpressió. 4,9 4,7 4,5 4,3. #. #. #. #. #. #. #. #. KIR2DS1. #. #. #. #. #. #. #. #. SLIT3. #. #. #. #. #. #. #. #. PCSK6. #. #. #. #. #. #. #. #. TRIM66. 3,3. #. #. #. #. #. #. #. #. HSPA1L. 3,1. #. #. #. #. #. #. #. #. HES4. #. #. #. #. #. #. #. #. MARVELD2. #. #. #. #. #. #. #. #. GJA12. #. #. #. #. #. #. #. #. CTSZ IFI27. 4,1 3,9 3,7 3,5. 2,9 2,7 2,5 2,3 2,1 1,9 1,7 1,5. #. #. #. #. #. #. #. #. RPRM. -1,5. #. #. #. #. #. #. #. #. SRC. -1,7. #. #. #. #. #. #. #. #. RAB3GAP. #. #. #. #. #. #. #. #. ATF3. -2,3. #. #. #. #. #. #. #. #. HIST2H2AA. -2,5. #. #. #. #. #. #. #. #. TRIB3. #. #. #. #. #. #. #. #. JUN. #. #. #. #. #. #. #. #. IFIT2. #. #. #. #. #. #. #. #. HIST1H2AD. 2/ !W + 7 ' 8$ TR< * 7# 8$ $ O </ < ( ? S 5. 6. -1,9. 0 TNN[[[6 '6 ' S. -2,9 -3,1 -3,3 -3,5 -3,7 -3,9. #. #. #. #. #. #. #. #. HIST1H2AE. #. #. #. #. #. #. #. #. TXNIP. -4,3. #. #. #. #. #. #. #. #. HIST1H4H. -4,5. -4,1. -4,7 -4,9 -5,1 -5,3. :. 6< 6 (. <. . 0. -2,1. -2,7. J 2T: : : $ O 7. repressió. ' 6 06 N L 1". 5 O. N. N.
(93) % 1. Símbol. Número. Nom del gen. gens induïts per la sobreexpressió de p19 KIR2DS1 NM_014512 killer cell immunoglobulin-like receptor SLIT3 NM_003062 slit homolog 3 (Drosophila) PCSK6/PACE4 NM_002570 proprotein convertase subtilisin/kexin type 6 TRIM66/TIF1D AB002296 mRNA KIAA1298 protein HES4 NM_021170 hairy and endhancer of split 4 (Drosophila) gens induïts per la sobreexpressió de p19mut * MARVELD2/TRIC NM_144724 MARVEL domain containing 2. Símbol. Número. Nom del gen. gens reprimits per la sobreexpressió de p19 CTSZ/CTSX NM_001336 cathepsin Z IFI27 NM_005532 interferon, alpha-inducible protein 27 RPRM NM_019845 reprimo, TP53 dependant G2 arrest mediator candidate SRC NM_005417 v-src sarcoma (Schmidt-Rupin A-2) viral oncogene homolog (avian) RAB3GAP1 NM_012233 RAB3 GTPase-activating protein gens reprimits per la sobreexpressió de p19mut * ATF3 NM_004024 activating transcription factor 3 TRIB3/SINK NM_021158 tribbles homolog 3 (Drosophila) JUN NM_002228 v-jun sarcoma virus 17 oncogene homolog (avian) IFIT2 NM_001547 interferon-induced protein with tetratricopeptide repeats 2 TXNIP/VDUP1 NM_006472 thioredoxin interacting protein HIST2H2AA NM_003516 histone 2, H2aa HIST1H2AD NM_021065 histone 1, H2ad HIST1HDAE NM_021052 histone 1, H2ae HIST1H4H NM_003543 histone 1, H4h. <. W. < ' 2 : C( ,; 4K ,; 4K *=@ 6 ,@. '. &. N.C. p19mut. N.C. (p19p19mut). 2,63 2,29 2,05. 0,38 0,80 1,10. 6,2 4,9 4,1. 1,3 1,7 2,1. 4,8 2,8 (RT) 2,0. 1,6 0,98. 0,50 0,24. 3,0 2,0. 1,4 1,2. 2,2 1,7. 0,53. 1,2. 1,4. 2,3. 1,6. Log2 p19. Log2 p19mut. N.C. p19. N.C. p19mut. N.C. (p19p19mut). -1,23 -0,97 -0,71. 0,56 -0,43 0,15. -2,3 -2 -1,6. 1,5 -1,34 1,1. -3,5 -1,5 -1,8. -0,65. 0,09. -1,6. 1. -1,7 (WB). -0,64. 0,02. -1,5. 1,02. -1,6. 0,14 -0,47 0,49. -1,24 -1,1 -1. 1,1 -1,4 1,4. -2,4 -2,1 -2. -2,6 -1,5 -2,8 (WB). -0,01. -1. -1. -2. -2. 0,01 0,47 0,35 0,36 0,62. -0,82 -1,21 -0,9 -0,9 -0,73. 1 1,4 1,3 1 1,53. -1,8 -2,3 -1,9 -1,8 -1,7. -1,8 -3,2 -2,4 -2,3 -2,53. !. L '. !. ,; L ' C( ,; 4K C . 5 P F G 6. (. !6I. ". &. 5 P. '. .. &>%. '. (. ' ?+. 4K 6. ? !6J6. N.C. p19. 8$. %. *(. Log2 p19mut. J' 4 : Y 2: 4 </ < ,; 4K ' C . *=@ 6f< ! L ! ' ' ,; L ' 5 P 1 , @ , 6 FG # <:. *. 1. Log2 p19. K 0. &. 6. 0. '. / 1#2 6 * &. :". ' (. 4K. 1 ,.
(94) % 1 &. &. ). L. ' (. 6I. 6=. &. L. P. 84K::V 0 [. 0. 84K::V =0. 4KK". ). , N !JJ:. ' ?. G 0. 4K. "!. L. &. /@1N/#1 @. =. %. +. 8. 1. 8. 4KK: 6. U (. &. 4K 2 ,. 46:. .. 5 P. %. +. 4K6. F. G. %. ,. 3. ;4. '. 8!JJ" 6. ) L. L. &. =. 8!JJJ (&. =. =. ' @. !: &. '. ,. 'L. ;4. '. =. 2/ @W 7 $ 7, J ' < V . = :^ : > : 7/ & $ J' $ 7 N: " '< : 7 7# 8$ J' $ O */ + F G ) =. L. ' (. &. 4K 6*. ( L. ). L. 0' (. = :. &. &. 6 * ). 5&. : 6 <. . ? 0. L -". =. &. @. !:. &. L ' (6. '. A. pRK5. p19. p19 mut Src. (. 4K 3 5. % ,; ,; 6* ( (. 2 < ' ,;. 4K. GAPDH. ' p-Src (Tyr527). 6 &. / 1#2 5 P 3 / E 6J6 = T ,; b ! V 4Kb4 4BV 4K b 4 KV = T ,; b4 KV 4Kb! !!V 4K b! B & 3:'< J ' $ 7 N : 5<: 7 7# 8$ J ' $ O */ + F G ) R ( % 2 < ' ,; ,; 4K ,; 4K 6* ( ' ! ( 6 * ' ) / 1#2 6. GAPDH. B. pRK5. p19. p19 mut c-Jun GAPDH p19 H-Ras recombinant. :.
(95) % 1 *. +. 4K. 2. 4K. T4. ). ! (. ). 14. &. R. . @. @,AG. @M$A16 #. 0. 0'. & 4K. .. (. B !46. 6 *. ( 14. '. N. @ N ,*G Q. L. ). ' (. N. % 4K. 31. <. '. 84KKB 6. !6B. &. ' (. 'L. 1 ,. '. 4K. &. '. P. 6. U. '. L. !6I < ,. L. ' (. ?G. ;4. '. 0. 0' 4K. R. (, 5 P. F. 4K. ;4 R$; < G. '. R 0. ' R. ' (. 4K. ,. 2 <. %. R. '. &. 6#. 0. ). ' %. (. %. R. %. ' (. 0. & P. ' (. 8!JJ 6. R$;. &. 0. ?G. 4K :G 6 @. '. +. &. R. '. 6 1%. &. L. -5<:. 2 8!JJ 6. :B. -. 3 0. 8!JJ!. '.
(96) % 1. /. $ O <. 2<. 8$. J $ M 4. +. '. %. 4K. & 6<. 2 <. 4K. (. &. &. ,$. +. 0. &. ( &. E. '. ,$. P 8 6. ,$. ,. $. (. &. 0. 8!JJB 6. 9. % , 0 ;. ,$. '. &. 0. ' (. G !. + %. &. 8!JJI 6. 1. ?. '. (. ,$. /. < '. '. 8!JJ" 6 *. 3. (. . G - [[[6 '6 6 %. '. >. ,$. '. . 0. S. L * @ G3 "K"6 '. '. Nivell de Canvi. hsa-miR342 hsa-miR206. 4.98 (*2.40) 3.37 (*1.00). mmu-miR330. 2.07 (*1.00). mmu-miR138 hsa-miR99b. 2.61 (*1.60) 2.18 (*1.00). < W * @ ,/*@=. 4K. 0 1 )4 0 )/;4 0 11/4 0 1@. ". miRNA. 'L. 6<. 4K T. &. ' ( '. '. 0 AA. 6. Gens diana per aquest miRNA BCL2L1, BCL2L2, CSK, FOSB, IBRDC2, MAP3K7IP2, RAP2B, RASA1, RASSF1, SF4, SLA ARHGAP21,CDK6, CDK9, DDX5, FOSB, JUND, MAP3K3, MET, MTSS1, RASA1, SFRS1, SFRS10, SFRS3, SFRS3. SFRS7, SFRS9,SFS7 CDC42, CDK11, DICER1, E2F1, GAS7, MAP2K1, PIK3R1, PRKCA/PKC , PRKCB1/PKC 1, PRKCE/PKC , SFRS1, SFRS10, SFRS2, SFRS7, SFRS8, SFRS9, SLITRK4, SNRPD3 AIFM2, CCND3, CCNE1, DDX3X, MAP2K7, TCTP, MAPK4, MYBBP1A, TP53BP2, TP53INP1, TP53INP2, TP73L/p63 MYCBP2, RalGPS1A. 2< L< : 7# 8$ + 0 TNN $ 1A @ , E*,@6. 6. $ O */ f 6 6 -N &. ::. ' ?. 4K 6 3A, $#.
(97) % 1 @. (. &. (. 0. &. (. !4. ,$. ' (. 5&. &. 4KT. 4 0 1,,4 0 )A 4 0 1,1B4 0 1/)4 0 A; 4 0 @ 4 0 1 )4 0. ) 14 0. ,4 0 ) A4 0 1; 4 0. 1/ 4 0 11. "6IJ. 0. 0 )A 0 1,1B. 6BJ. MLLT6, PAK7. 6 J. ARHGEF10, ARHGEF18, ARHGEF5, ARID4B, BCL2L11, BMF, CCND2, CDK11, DDX3X, DHX40, FAIM, H3F3A, MAP3K11, MAPK13, MAPK9, MARK1, MARK4, MYST3, PIK3CA, PRKCB1, RAB11A, RAB22A, RAB6A, RAB7, RABGAP1, RASSF2, RBBP7, RGL1, SLITRK3, TP53INP1, TXNIP BCL2L11, E2F2, MAP3K14, MAP3K2, MARK4, PIK3CA, PRKCB1, RAB11A, RAB14, RAB22A, RAB6A, RABGAP1, RALGDS, RAPH1, RASSF2, SLITRK3, SUV39H1, TP53INP1, TXNIP. !6IJ. 0. !6 J. DICER1, GAS7, MAP4K3, NRAS, RAB2L, RAB39B, RASSF3. !6"J. ARHGEF1, ARHGEF4, ARHGEF6, BAK1, BMF, CASP14, CDC42, CTSK, DDX6, EPHB2, HDAC4, HDAC5, JUND, MADD, PPARA, RAB14, RAB15, RAB35, RAB37, RAB7, RHOA, RHOG, RHOQ, RHOT1, RSU1, SF1, SFRS3, TBRG4 FOSB, CDK6, FOXK2, E2F3, SRF, MAP3K1, MDM1, MYCBP, FOXP1, CDK6, MAP3K7IP3. !6"J. 1 ) 0 ) 1 0 , 0 ) A 0 1; A. 0 1). !6 J. SFRS1, TFAP2B. !6JJ. RAB6B, MAP3K7IP3. !6JJ. FOXJ3. !6JJ. BCLAF1, ERG, SP1, YWHAB. 46IJ. NOTCH1, DDX17, ARHGAP26, E2F3, CCNE2, RAB43, RRAS, FOXP1. 46IJ. BCL11A, RAB14, DDX3Y, BCL11B, BCL2L11, MAP2K4, MAP3K1. 46:J. PTEN, KRAS, MAP2K4, RABGAP1L, CDC42SE2, MDM1, MAP3K7, MAP4K3,PRKCQ, RAB1A, CAPRIN1, CDK6,PARP16, MAP3K7IP3. 46:J. FOXP4, MYB, MAPKAPK3, FOXP1. 46:J. RAPH1. 46:J. PRKACB, MAP3K7IP3, RASSF2, RAB15. 46BJ. KSR1, MAP2K7. 46BJ. MAP3K12, CCNG1, MAP3K2, DICER1. 0 1; 0 1@ 0 1@1 0 1/ 0 11 0 )). W. CDK6, MAP3K7IP3, BCL11B,RAB15, RAP2B, MDM1 ARHGAP21, , BCL2L1, , H3F3A, HRAS, MADD, MAP4K5, MARK3, PPARA, PRKCA, PRKCM, RAB1A, RABGAP1, RAP2A, RHOBTB2, SFRS1, TP73L. 0 1/) 0 A; 0 @. Gens diana per aquest miRNA. 6KJ 0 1,,. <. 6. Nivell de Canvi. miRNA. 0. 0 )). A4 0 1)4 0 ;4 0 1@4 0 1@14 0. 2<. L< : 7#. 8$. $ O </. *. (. &. #6 3. L0. 0. %. 0 )/; 5 &. '. 0' + &. +. +. :I. 0. 0' '.
(98) % 1 (. @. ?. %. 2 <. 8!JJI 6 '. ' ( %. ?. ( ). 2 <. ( ). 4K6 1. ?. 0. 5. '. ?. */ 1 4K. A. 0 )/;. =U1*,. 0 )/;6. B p19. anti206. G1. G1 S. S. C. G2. D control -. anti206 p19. G1. G1. S. G2. S. G2. E 100 90. 2/ W : : ' ! :9 # 8 $ ' : 1 $ 7,7 ' $ 7# 8$ J' $ O */ + 5 P = % - . % 2 < ' ( 4K ' */ 1 4K ,$ !JB =U1*, Y 0 )/; G 5 ' #6 * * % 6 * 0 T 4KbI JV , !JBb IV , !JBN 4Kb KV b !6. % cèl·lules. 80 70 60. G1. 50. S. 40. G2/M. 30 20 10 0. p19. antimiR-206. p19/ antimiR-206. -. :K.
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
(100) % 1 ,$. 0. ##M. 0' (. =. (. = ,=!. A#M. /. 4K. (. &. =, "J = ,=. 8!JJ ' 6 <. '. ). BI ,$. 0. ). ( +6(. 0". &. ,$ 6 *. 0. ,$. <. &. BI ,$. ' 6. ,$. . ,$. $. 1A @ , E*,@ '. =. JV = " L. 0. @ ,/*@=. 6 6 -N &. 6* ,. ' (. L. 3A, $#. 0 TNN. L. '. !JJ! 6. 3 5 P. 0. 0. L. ) 0. , !JB. 4. 4". =,. , "! ( 6. ) '. 2 1 ,. !4. BI ,$. '5. 4K (. U ,$1. @. ,. &. 2,. 6 1. @ &3. (. *". 0 *"G. 2. ,$ 2 ,. ( ,$. !4. ?. %. 2 <. * *". ' (. 4K. K6. E1. E2. E3. IDX. E4A. E3-IDX E1. E2. E3. E2. E4A. E3. p19 H-Ras endògena. E4A-E4B E4B. E4A-E4B. E3-E4A E1. E4B. p21 H-Ras endògena. IDX. p19 H-Ras sobreexpressada. E4A. p21 H-Ras sobreexpressada. E3-IDX E1. E2. E3 E3-E4A. 2/ OW. L< ' 7:' L : < K' ,$ 4K !4 C( ,$ 4K 2 , !4 2 , ? 5 ' ( 4K !4QB4<6. : V8$ : ' : $ ,$ 2 , 6 * A#M * *" * *"G ' 6< * *" *" * A#M *" *"G 5 ' (. I4. ( *"G.
(101) % 1 '. "J 2,. ' ( !4. &. &. :!. ' (. ( (. & ,$. * *" N*". (. L. !4. 2. &. (. %. "JG. 4JX. ' (. A. ' &. ,$ &. 4K. 6. (. *"G. ' (. " &. '. &. 4K. E1. 4K. E2. 6. E3. E4A. E4A-E4B. E3-E4A. 12. E4B. 11. Nivells de Canvi. 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 TRANSFECCIONS. pRK5. p19 p19mut. pRK5. p19 p19mut. p21 H-Ras. H-Ras total. B % p 21 H -R as. 0,5. **. 0,4. *. 0,3 0,2 0,1 0. TRANSFECCIONS. 2/ W $ O 2< <$ 7$ ! ! # : @ &3 *" *"G !4 @ &3 * *" ( 0 0 ( 46 & 1 *"G 6 & 0 ' (. pRK5 p19 p19mut. </ & Q % 2 <. I!. ,$ ) 2, 4K 4K 6 =0 ? + 6* ' !4N2 , @ &3 * *" N@ &3 *" 6 K 6 b f <J J:V ff <J JI 6 ' (.
(102) % 1 &. & 4KT !4. 2. %. ( A#M. 4K. % ( &. !4. L. ( L. ?. 5&. (. ,. +. &. ( 8 4KK 6. & %. '. !4 QB4<. /#1N/@1 < [.. *. 6. !4 2 ,. .. (. (. 'L 6 *. !4V. 2,. 4KT !4 5 & &. ,$. ?. 2 <. @ &3. A#M. /@1. (. ? ,;. !4 QB4<. * A#M ,$. 4K. *". *"G6. "4. 6. A. E1. E2. E3. IDX. E4A. E3-IDX. E4B. E4A-E4B. 3,5. Nivells de Canvi. 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 TRANSFECCIONS. pRK5 p21Q61L. H-Ras total. B. pRK5 p21Q61L. p19 H-Ras. 2/ W < : $ A! 4 ,7 8 : < J' 3(;/ & Q ,$ ) 2, @ &3 *" *"G 4K @ &3 * A#M % 2 < ' ( !4QB4<6 =0 ? ( 6 * ' 0 ( 46 & 1 4KN2 , @ &3 * A#MN@ &3 *" *"G 6 & 0 ' ( 6 "J. % p19 H-Ras. 0,5 0,4. ' 4 X. *. f <J6JK 6. 0,3 0,2 0,1. 0 TRANSFECCIONS. pRK5 p21Q61L. I. 0. (. 0 +. b.
(103) % 1 <. ' (. !4 QB4<. & '. 4K 6#. &. 4K. ( &. X 4KN2 ,. &. &. %. !4 QB4<. &. ( 2. 6 # &. '. :.. 4K. 4K. !4. !/. (. 2,. G. '. '. %. 2<. 6. J'. , +. K J ". 5 P. .. 0. ' ' 2. 6 1 %. 2 <. (. ' (. ) 5 P. %. ?. +. 4K 2 , 6 1 %. 0. '. 2 <. ,;. &. ' ( '. 4K6 E. ?. ,;. &>. ) &. &. %. -. &. !. + ". 4K 2 , T. "! "!G. :. 6. L. F. G. '. + ). .. 4K. @ @1 ). K. 4K. 2, 6#. L. &. '. ( 6. I". 0'. ?. L. &. +. !. -*. &> %. ( &. 0'. $ 74 :. !. ). '. %. ' ".
(104) % 1. A. B. pI. 23kDa. pI. 4.9. -. 5.8. -. PM 4.8 23kDa. 4.8. +. + 17kDa. PM 19kDa. :. 7: 7 : 2<: ' LX : / &/ ( % 2 < ' @ @1 A"6K 13 ! -# ( 4K -# & 5 P &> 6 &/ *( % 2 < ' ( 4K6 * 13 4:-# ( 4K ' ( 6@ &> 6 f< ) 4K 2/. W1. %. (. @ @1 L (. ' 6 * 4K ' ( %. 6. A"6I 13 : -* 6 ! 24 A 6I 5 P. GY6. ). L (. G. 8!JJ" 6 <. (. 0'. ( ?. @ @1 @ .. 6 1 0. 8 !JJ! 6 1. +. '. % ' (. %. (. 84KKK 6 *. / 0 0. & @ @1. /*. ,0 ' 2 /@1 .. @ @1. 0 ?. &. % &. (. (. / 1. @7, G0 -. 8!JJ: 6 #. L. & @. '. I. -. ) ,0 ' '. @7, L E*/ (. 8!JJ! 6. %. 0' (. ( L. ). 9&!. @= 6 U. & @= !N@= 4. 8!JJ:. &.
(105) % 1. A. p19. pRK5. TCTP GAPDH. B. p19. pRK5. p19mut p-mTOR (Ser 2448) p-Akt (Ser 473) GAPDH Akt total GAPDH. C. pRK5. p19. p19mut p-p70S6K GAPDH. D. pRK5. E. p19. pRK5. p19 p-Akt (Ser473). p-eIF2Z. p-Akt (Thr308) GAPDH. GAPDH. F. RNAi p19. pSUPER. TCTP. GAPDH. J' , ' :. K J / & F G ' @ @1 ' ( 2 < ' ' ,; ' ( 4K 4K ( 63 5 & / 1#2 5 P 3 / E 6JT ,; b K V 4KbK &F G ' @7, = !""I - = ": - ' ( % 2 < ' ' ,; ' ( 4K 4K ( 6 & F G :J=B; ' ( % 2 < ' ' ,; ' ( 4K 4K ( 63 5 & / 1#2 5 P 3 / E 6J6 :J=B;T ,; b " V 4Kb! BV 4K b (& F G ' A! ' ( % 2 < ' ' ,; ' ( 4K6 & F G ' - = ": - @0 JI ' ( % 2 < ' ' ,; ' ( 4K ( 63 5 & / 1#2 5 P 3 / E 6J6 - @0 JI T ,; b4 4 V 4KbJ "V - = ": T ,; b :V 4Kb!6 & F G ' @ @1 ' ( % 2 < % 0 4K 2 , ( 6 f* ( 0 ? / 1#2 + 6 2/. W. 2< %. IB.
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
(107) % 1 #. (. 4K 2 ,. %. +. , 0. '. 5 P. ! 24. P. ,$ ) 6 *. / 1#2. 4K. 4K6 1. ! 24. (. '. +. F 4K. 0 5 P. ' F. '. G. &. ! 24. ?. '. 4K. ,$. 4K 2 ,. 6. 2/ W : : ' $ O $ 7,7 <: ' , ' : :, R< ' : -* 6 & F G ! 24 ( % 2 < ' =U1*, (. 8!JJ:. ' ( ! 246 @. +. , ' -. ?. '. "". ! 24. !# ). G. +. pSUPER. RNAi p19 GAPDH. =U1*, 4K6 * ' ( ? 6. nm23-H1. p19 H-Ras. II. '.
(108) ! 1 !9- O -. (3". IK. ""3H.
(109) KJ.
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
(111) 2/. WE. . ?. 4K 2 ,. ! 1 !9. K!.
(112) ! 1 !9 ( 2,. 0. ,. ?. ' 0'. '. . + &. ,. -. 1;. ) 4K ,. 4K 2 ,. *. ). ;. ?. &>%. 0. ). F4B" L. ?. 6@. ;4 L. .. &. 6 #. +. &. &. 'L. 1; 6 5&. 1;. ' (. ). 4K. (. '. '. &. F4B". *. 4K 4K. &. &. &. 61. '. 'L '. &. d. 4K 2 ,. F4B". &. ;4. 1;. '. 4K. 4K &. ' ,. ;4. ). :. ). F4B". ( L. F4B". 2,. &. &. 0. (. P 61. L& '. 4K &. (. &. & (. S. ). %. &. &. 4K F4B" 6. L. &. L. 4K :. 'L. 4: 0'. ' :. 4K 2 , 6 <. !4. 2 $. &. 4KKK 6. ,. /*. &. ". &. ' (. ' & 5. & ,. =4: L. & 6*. + '. ). 0' ). !4 ,. =4:$. ;. 5. %. '. '. & 2. &>%. %. 6. K.
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
(114) ! 1 !9 +. /4. =. !4. #4 *. !:. ,. .. 8!JJ4V = ' 6#. /4 & '. ' (. 3. ' (. % 4K 2 ,. ' (. ,. #; 8!JJJ. '. '. 4K 2 ,. '. (. 0'. +. 3. '. ' (. L (. 8!JJ". &. 3. &. = 6. '. ;4 L. '. 0'. =. /46 3 &. ' ( &. 4K. 4K. ' L 0. 6. &. =. ' ( (. +. 5&. '. P. L. 4K 2 ,. L. 6. U. .. 4K6. ( 4K. 0. ;4. S. &. (. (. ,. '. L. B. L 0. ' ( *,;4. -. 6*. *,;. ?. 1; T 1;. ,. &. , N3*;N*,;V. , 0. 8 !JJ 6 *. ,. (. &. &. &. P. *,;. L %. P 1;. &. 0. 4K. ( , 4 / L. '' &. ,. 4K. &. (. *,;4 P. &. 8!JJ 6. & @=. /@1. .. L. -. L. 6. @. &. (. %. *,;. & ' *,; *,;4. E &. /4N= 8!JJ: *,;! K. L 0. ' 6 *.
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
(117) ! 1 !9 <. L. "B L. L. %. :. 0. 5 &. 0' (. L & 00. 5. %. 0@*,@ @ 0. 6E :D. 8!JJ V U. 84KKK. :O. & &. 0'. & L. :O. &. P. ' (. :DL. ' (. 2#3!6 1. ' 5&. 0' :. %' (. '. +. * $. 8!JJ4. J'. 5&. 7. 5. ' (. %. 2<. (. &>%. &. 7' '. 'L. 6. 0'. : ' 0. 2/ !W. '. 6*. 2#3!6 (. 0 (&. ) ( 2#3!. P. ,Y ' $. KI. : 0'. $@. @ 0. 8!JJ. 0@*,@ 6.
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
(120) ! 1 !9 $. 04. ' ( 0. & $. $. 4K 2 ,. 06. 04. 6. 2*=" &. &. '. 4K 2 ,. + L. +. .. ?. 2*=" (. 4K6. 3. ' S. *. &. , G / 14. 0'. /@1. (. '. 0. .. '. 4K 2 , 6. (. ' (. 4K. '. '. , T. ( % D. .. &. ). F ,G3E4. & 8!JJ 6 <. +. %. + + !JJ"V # [ [. G. !JJ V , 5. 0. 8!JJ:V E. '. (. U. F4B". &>%. '. 4K 2 ,. 4K 2 , 6. (. 4K '. &. 6* 3. &. 4K L. '. ? G 'j &. JJ. &. 4!E =. 0? 3. $A2 @ &. & % 4K. % &. ,. #. 8!JJ 6 '. +. JJN G1. &. '. 4K 4K. L. 0. 5. (. ' (. %. %. (. 0. 8!JJB 6. &. '. &. % ,. &. &. 0. G1N. !JJ4V. 8!JJ". L. P. =. %& (. . 0. & %. 0. 6. 4J4.
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
(123) ! 1 !9 )/; L. *,D. + 8!JJ:. %. + &. @. 0'. ?. 0 )/; L. 8!JJI 6 <. 5&. 4K. 0' %. '. 4K 2 ,. '. ' 4K 2 ,. R. 0. 0 )/; /46. '. ! 24. 0 )/;. ?. %. '. +. 63. ! 24 L. 4K &. (. ' 0. ' (. ! 24. (. +. 8!JJB 6 1. =<A@. 4K. +. %. 1 =;B6. '. (. 4K. &. d$. 4K. 0'. +. . ( 6. 0. + @. &. 'L. 4. &. '. (. L (0. &. ' N. +. 6. * 2, T. 'L0 0 0. '. '. '. !4 0. &. 4K. +. 0' 4K6. &. S. &. ( A#M. !:4K. L. (. ). @!"N*R. 6. &. 4J. $A2N @ &>% +. F#. ( A#M. L 0. 84KII 6 *. /. 8!JJ. ). F/. !4 2 ,. 4K 2 ,. 4B"N4B 6 1. 2,. 4J". !JJBV /. ' & '. 4! 4 #. '. 0 8!JJB 6. &.
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
(125) ! 1 !9 %. /4. %. +. (. & 6#. 4K 2 , +. '. 6. 4JB. & &. ' '.
(126) !. !. :. "3. 4J:. -. @-. ".
(127) ! 1 !9. 4JI.
(128) 1!. •. <. ). 4K. ). '. !4 2 ,. 5&. &. 4K. ?. (. '. •. / 1. !4. '. +. 5 P. 6. 4K. 1;. 5. L. ( ' 6. ,. %. (. ) 1;. 3 1; *,;6. + &. F. 4B". L. 4K ,. *. 1;. ). &. &>% ;4. 4K 2 ,. 4K. & R. 146<. '. (. 4K. 4K. P. @. @,AG. R ( 14. (. =. '. =. &. ;46 &. !JB. 0'. 0. 5. '. (7. (. ,. /4N=. %. (. &. %. '. 6. <. 6. @M$A16. 4K 2 , 0'. •. (. R. 4K. ,. 5&. :6. R$;. •. ;4 1;. '. *,;4. •. /*. ). 4K 2 ,. '. P. 0' :O. ). :D :D. 0@*,@6. 4JK. 0'. :O.
(129) 1!. •. *. .. 0'. :J=B;. '. *,;. •. ?. @=. & -. (. 0 )/; +. •. (. &. 'L. 4K 2 , 6. !4N2 , %. (. + 2. F4B" 5 & !46. '. 6 4K L !4. ' ( (. 1 =;B. ( (. (. 2. &. ' L. =<A@. +. 4K 2 ,. &. (. ! 24. P. !4 2 ,. &. @ @16. 3 5 P. %. 4K 2 ,. 6. '. 2. & ( 4KT !46. 44J. &.
(130) 1!. 3. 444. "3. P. ( ".
(131) ! 1 !9. 44!.
(132) !. !. :. ? C&. '. (. (. 6. / /. # 702. *. ?. C&. '. '. C 0. ?. '+. &. T. / /. T. =C 0. !. &. C. #2 α M<G. 8 8. / /. '. T ' '. #$ #$. , =. .. / / < <. R<. <. 2 < C(. '. /. 24JKNZ4I:. C ' (. ' U7 27:< 0 ' / /. 0. 7:. +. % ( ,G. < 7:. ' -$ 1 -$ % -$ ) W L -$1 3 -$1 3 $". ( @ ) @. - W % - C$ D 0. ? 0 - W ?. @W 23 ;*, =. @W 23 ;*, =. : 7%24$W. ? ?. 44. C. ?. ? ,*@ & 0 ' ( % 6 3E & 5 ' ( 56 ' 0' 06 ' 0' 06 ? ,$ 7 * 6.
(133) !. !. / /. :. 27:< 0 ' " A_P. $ 1 - -3(; - !AA#M A#MG 2A $ 1 - -$ O Q - & - !A 4K * 4K G 2A $ 1 - ) - !A, ;4 , ;4= $ D - -$ O - !A 4K 4KG 2A $ - ) - !A, ;4 , ;4 $ - -$@ α ; !A : α : α= A $ ) -$ A! * ,A !4 !4= A $ ) -$ O * ,A 4KF4B" 4KF4B" = A $ ) -$ O > ! * ,A 4KF4B" 4KF4B" = A $ ) -$@ α 2 AAA : α : α= A $ ) - ) β33 M' A1; βAA 1; βAA= A $1 ( @-$ 1 Q@ @ & = A 4!J/ 1:4" 4J": 4!J/ 1:4" 4J": $1 ( @-. ' Q @ - @@ :& * ,A. ! !:!4 "::J . ! M0 A $1 ( @-" " Q ! O & =7= B" 4J"K= A = A=7= B" 4J"K $1 ( @- 3 ) Q α& $ A1A ;44J 1A ;44J M0 A $" $ O kB"B62A$# kB"B62A$#k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
(134) !. / / 7: ?. :. < 7:. &. '. &. %. C 0 6. ?. (. ( C. .. L. L. / / /+. 2/ @. !. ' L< 7' 4 L< : $. 7 $. $ 7 N:. 4 <7. 2 ' 4 <7. : /. 44. T:. 6.
(135) !. !. :. / / /+. 7 $. 7#. '. 2/. $ '. ,. 7 $ ) /1. &. 8$. J : TR<. M4. L. 3E &. (. 56. 44B. 5. '.
(136) !. / / /+. 7 $. 2/ ````* #$ (. #$. 2/ O $ ' , 7 3 @ 23 ;*, =. /G;@: &. $ 0 #$. 2 ' '7# -9M# ' :. /G;@: / <". =7 ' #$ (. #$. '7# -9 # '/ * (. 44:. !. :. ,. ( &. / #@: / <"6. ?. #$ / <" / <" / #@: 6.
(137) !. !. :. / / /+. 2/. W. $ ' , 7 $ ? %. 7 $. / &. 2'. ). 6. 44I. / 1. (.
(138) !. / *. : &. '. !. :. 7 7 C 0. ?. >. T. " T 4K 2 , ' ? /=,=/=====/@<F# & 4 !J + 0 A#M L . " @T 4K 2 , ' & L ) ' 6 '' : -1 (* 'K"I ' : -$@ '" < 'E : - ) β 33 = ?G 0 '' : -5<: = '' : -$-5<: " ! = '' : -$-5<: " @ = '' : * : -$ 74 :- = ?G 0 : - <#< : = ?G 0 '' : -: Q ( )& ! 24 !J T " = ?G '' : -$- 3 α" G '' : , ' 7 9= '' : -$- ) C 9 C. $-$ C ) = : -$- ) C $ C ) = '' : -$" = '' : -$- 6 " @ = ?G 0 '' : -$- 6 9 = ?G 0 : - 6 = '' : -$-$@ "! 6 : 9 O = '' : - 78 = '' : -$ @) $ = '' : -$-$ ) 9 C. = '' : -$-" )C5 ) 9 C. = '' : -" = '' : -$-" . @ = : - ## 321U* - 7:=<2 ' = α- ## 321U* - :6 ' : #7'. = Z- 7< 321U* - 7:=<2 ' = ' 8 <7 'C! α '' A / 3 1 ' ' 8 <7 'C! α A/ 3 1 '. 44K. % &>% (. 0.
(139) !. !. :. / *. ' '. < <. &. L C %. 6 *. '. 6. / / '. Q<. :. 1. ' < &W. T. 4! C 1 JJ N ;. ' %. ' ". N J. 1. <G N. & 56. @ ! *( 2 :J 1 0. % T. J 4JJ. J! 43 ; 4 43 3 ! 4 43 3 =7" J! 43 $ 4JJ =7G Y KJJ µ /. ' ". / /. 4X @ 1 J X *( 4X $ *' 2: '$ 72. "JX. ,. ' D ( QD. $ 7: ( 8 7 &. J Z1# 2B. 0N 4!4 c 4. 1. :J Z1# 2B. 0N 4!4 c 4. 4!J.
Documento similar
Therefore, we conducted a global microarray gene expression pattern analysis using total RNA isolated from wild-type or PKCζ-deficient mice treated with PBS or
HIF-1, hypoxia inducible factor-1; IKKB, inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit beta; JNK1, c-Jun N-terminal kinase; LC3, microtubule-associated protein light chain 3;
(BIOS Scientific Publishers).. Allosteric Activation of PTEN Phosphatase by Phosphatidylinositol 4,5-Bisphosphate. The Phosphoinositide 3-Kinase Pathway. Structural plasticity
ΔCm, mitochondrial membrane potential; AMPK, AMP-activated protein kinase; ERK 1/2, extracellular signal-regulated kinase 1/2; IF1, ATPase inhibitory factor 1; IF1 KO , IF1
In situ hybridization in late third instar wing discs of genes which expression levels change comparing 756-Gal4/UAS-sal vs 756-Gal4/UAS-GFP (UAS) or wild type vs Df(2L) 32FP5
When we examined late (A10 and A27) viral protein expression in NYVAC-infected HeLa, HeLa-M-W12, or HeLa-M-M25 cells, we observed total or a nearly complete ab- sence of these
Transduction of hematopoietic Ba/F3 cells with retroviral vectors carrying BCR-JAK2 induced IL-3-independent cell growth, constitutive activation of the chimeric protein as well
GO:0019866 - organelle inner membrane; GO_process: GO:0006464 - protein modification process 1 11 fused sensory histidine kinase in two-component regulatory system with KdpE:
