Diagnóstico molecular de
enfermedades en cítricos
Lic. Bioq. M. Sc. Andrés Ávalos
Coordinador
Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario
Dirección de Sanidad Vegetal
Objetivo
•
Dar a conocer cómo el Ministerio de
Agricultura, Ganadería y Alimentación (MAGA)
puede apoyar a los citricultores del país
mediante el diagnóstico certero de varias
enfermedades que afectan a cítricos.
Estructura
•
Introducción
•
Diagnóstico fitosanitario y MIP
–
Interacción
•
Diagnóstico fitosanitario en MAGA
–
Cómo lo hace el MAGA
•
Diagnóstico molecular fitosanitario en MAGA
–
Cómo lo hace el MAGA
•
Diagnóstico de enfermedades que afectan a
cítricos
INTRODUCCIÓN
•
Laboratorio de
Diagnóstico Fitosanitario
– LDF –
(DSV-VISAR-MAGA)
•
Realiza el diagnóstico de
plagas y enfermedades de
importancia económica y
cuarentenaria
•
Brinda certeza técnica
para la aplicación de
medidas de manejo y
control fitosanitarias
•
Guatemala,
Diagnóstico fitosanitario y MIP
• La NIMF 27 requiere a la ONPF
hacerse responsable de “llevar a cabo” o bien de “autorizar” los servicios de identificación de plagas en apoyo al
programa nacional de
vigilancia y a las inspecciones.
• “El MIP permite a los
agricultores vigilar y controlar las plagas en sus campos,
reduciendo al mínimo absoluto la utilización de
plaguicidas químicos costosos y potencialmente dañinos y peligrosos.”
• Tomar decisiones informadas
• No desperdiciar recursos
• Proteger
– Salud humana
– Cultivos
Diagnóstico fitosanitario en el
Ministerio de Agricultura
• El LDF s un ente clave
para detectar
oportunamente plagas y
enfermedades
cuarentenarias, así como
las endémicas.
• Programas internos:
– Vigilancia epidemiológica y análisis de riesgo – Protección y sanidad vegetal – PIPAA – HLB – MOSCAFRUT Coordinación Recepción/ Custodio Entomología Fitopatología MolecularDiagnóstico fitosanitario en el
Ministerio de Agricultura
• Diagnostica organismos de importancia económica y cuarentenaria, utilizando técnicas modernas que permiten la certeza y
confiabilidad de los mismos.
• Brinda apoyo a los
componentes de Programas del MAGA con el objeto de prevenir y controlar plagas y enfermedades, a través de la ejecución de planes de
manejo, control y erradicación.
Diagnóstico fitosanitario en el
Ministerio de Agricultura
• Coordinar con laboratorios dentro y fuera del MAGA, redes de
laboratorios de diagnóstico
fitosanitario, para la armonización de protocolos de diagnóstico
fitosanitario.
• Participa con instituciones académicas y centros de
investigación, con el objeto de
mantener actualizada la información vinculada a metodologías,
protocolos y ensayos de laboratorio y resultados de estudios,
relacionados con el diagnóstico fitosanitario.
Diagnóstico molecular fitosanitario en
el Ministerio de Agricultura
• El área del LDF encargada de la puesta a punto de los protocolos de diagnóstico basados en las características genéticas de los patógenos. Surge por iniciativa del Ph.D. Ting-Hsuan Hung, con el apoyo del M.Sc. Kuo-Lin Huang en el marco del programa HLB-Taiwan ICDF liderado en
Guatemala por el Ing. M.A. Guillermo Ortiz y el Ing. M.A. Anibal Pérez.
Diagnóstico molecular fitosanitario en
el Ministerio de Agricultura
•
2015: HLB + Xf
•
2016: HLB + 8
enfermedades que
afectan a cítricos
•
2017: HLB + 42 ensayos
específicos utilizando
PCR convencional +
FOCR4T
Diagnóstico de enfermedades que
afectan a cítricos
•
Bacterias y hongos
–
Pseudomonas
syringae
–
Phytophtora
spp.
•
Ácaros
–
Brevipalpus
spp.
–
Eryophues sheldoni
–
Panonychus citri
–
Stenotarsonemus
latus
•
Insectos
–
Aleurothrixus
floccosus
–
Aonidiella aurantii
–
Aonidiella citrina
–
Icerya purchasi
–
Lepidosaphes beckii
Muestreo para el diagnóstico de
enfermedades comunes en cítricos
A cargo de personal
experimentado
–
Insectos y ácaros
•
Especímenes almacenados en
etanol
•
Trampas adhesivas
•
Hojas con daño o síntoma (ácaros)
–
Hongos y bacterias
•
Tejido sintomático (hojas) o planta
entera
Diagnóstico de
enfermedades comunes
•
CAMPO:
–
Observación de síntomas
•
LABORATORIO
–
Insectos y ácaros
• Observación al estereomicroscopio y microscopio
–
Hongos
• Cámara húmeda y observación al estereomicroscopio y microscopio
–
Bacterias
• Macerado, dilución, medio selectivo y observación al estereomicroscopio y microscopio
Procesamiento: diagnóstico molecular
= NO DETECTADO
Enfermedades que se
evaluarán para la certificación
Enfermedad Tipo de
patógeno
Nombre del
patógeno Acrónimo Cancrosis Bacteria Xanthomonas
axonopodis pv. citri CBC
Huanglongbing Bacteria
fastidiosa
Candidatus
liberibacter HLB
Clorosis Variegada Bacteria
fastidiosa Xylella fastidiosa CVC
Exocortis Viroide Citrus exocortis viroid CEVd
Cachexia (Xyloporosis) Viroide Citrus cachexia viroid CCaVd
Psorosis Virus Citrus psorosis virus CPsV
Leprosis Virus Citrus leprosis virus CiLV
Tristeza Virus Citrus tristeza virus CTV
Requerimientos de la muestra
Enfermedad Tipo de patógeno Acrónimo RAMA + HOJAS HOJAS +PECIOLO FRUTO CORTEZA VECTOR OTRO Cancrosis Bacteria CBC
10
Huanglongbing Bacteria
fastidiosa HLB
10
10Clorosis Variegada Bacteria
fastidiosa CVC
10
Exocortis Viroide CEVd 3 brotes
tiernos (1)(2) 10 tiernas
De patrón y
de injerto
10 yemasCachexia (Xyloporosis) Viroide CCaVd 3 brotes
tiernos (1)(2) 10 tiernas
10 yemasPsorosis Virus CPsV 3 brotes
tiernos (5)
Leprosis Virus CiLV 3 ramas
(4)
(20 cm) 10 2
3 manchas
circulares
Tristeza Virus CTV 3 brotes
tiernos (4) 10 tiernas
5 brotes
tiernos