INFORME
ESTUDIO DE RESIDUOS DE MEDICAMENTOS VETERINARIOS EN ALIMENTOS
Subsecretaria de Salud Pública- Ministerio de Salud
Instituto de Salud Pública de Chile
SEREMI de Salud Región Metropolitana
SEREMI de Salud O’Higgins
Informe preparado por:
Q. A Luis Roa Marín,
Laboratorios Residuos de
Medicamentos Veterinarios,
Instituto de Salud Pública de Chile
I.
ANTECEDENTES
Desde la ejecución del proyecto “fortalecimiento del programa de inocuidad de los
alimentos” en el año 2006 hasta la fecha se han estudiado y caracterizado la presencia de
residuos de medicamentos veterinarios en alimentos de origen animal destinados al
consumo humano, tal proyecto involucró al Instituto de Salud Pública de Chile, Ministerio
de Salud, JICA ( Japan International Cooperation Agency) y SEREMIs. El proyecto se
extendió por tres años, proporcionando equipamiento de punta y capacitaciones
específicas en algunas metodologías de análisis de residuos de medicamentos
veterinarios
Consecuente con esta línea de investigación aplicada, el Laboratorio de Residuos de
Medicamentos Veterinarios se acreditó el año 2009 en dos metodologías analíticas que
comprendieron cuatro analitos, y este año ampliará esta acreditación a 17 nuevos
analitos. Tal acreditación bajo la norma ISO 17025 permite emitir resultados con la debida
confiabilidad analítica y ser reconocidos validos a nivel mundial.
Actualmente el laboratorio de residuos de medicamentos veterinarios tiene
implementados cuarenta analitos que comprenden diversos grupos terapéuticos tales
como: antibióticos, beta-agonistas, antiparasitarios, hormonas, y colorantes triarilmetanos.
Los ensayos se realizan en tejido animal tales como músculo, corazón, riñón e hígado de
diversas especies que comprenden: porcino, bovino, pollo, pescado, camarón y conejo.
La detección de niveles residuales de medicamentos en alimentos cobra una vital
importancia en la salud publica, tal exposición crónica puede ejercer diversos efectos
nocivos en la salud humana, dichos efectos pueden generar alergias, efectos
teratogénicos, efectos mutagénicos y resistencia bacteriana.
El fenómeno de la resistencia bacteriana es reciente y está caracterizado por una
refractariedad total y parcial de los microorganismos al efecto antibiótico. Las causas de la
aparición de dicho fenómeno son variadas, dentro de ellas se encuentra el uso y duración
inadecuada de los tratamientos con antimicrobianos.
Desde este punto de vista se hace necesario estudiar la presencia de residuos de
medicamentos veterinarios en alimentos, la exposición crónica a niveles residuales puede
generar una serie de efectos en la salud pública de la población en especial de grupos
vulnerables como los niños y adultos mayores. A continuación se presentan los
resultados del programa de residuos de medicamentos veterinarios en alimentos
desarrollado en el año 2009, realizado en conjunto entre el MINSAL, SEREMI de la
Región Metropolitana , SEREMI de la Región de O´Higgins y el Instituto de Salud Pública
de Chile.
ESTUDIO DE RESIDUOS DE MEDICAMENTOS VETERINARIOS EN
ALIMENTOS MINSAL – INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE – SEREMI
RM – SEREMI O´HIGGINS
1. Generalidades
1.1. Muestreo
El estudio contempló el análisis de 120 muestras de cuatro especies animales
correspondientes a porcinos, bovinos, pollos y salmón. En la Tabla N° 1 se observa la
distribución de especies por cada uno de los SEREMIs involucrados. Las muestras de
porcinos, bovinos y pollos fueron tomadas en mataderos y faenadoras, en el caso de las
muestras de salmón fueron tomadas en faenadoras, expendios, terminal pesquero,
envasadoras y procesadoras, pertenecientes a la Región Metropolitana y Región de
O´Higgins por las SEREMIs de Salud respectivas, de acuerdo a las pautas y
recomendaciones establecidas en el Codex Alimentarius . Las muestras fueron tomadas
entre septiembre y diciembre del año 2009, la procedencia de las muestras queda
reflejada en la Tabla N° 2.
Tabla N° 1 Distribución de muestras por especie
SEREMI DE SALUD
Especie
RM
REGIÓN
LIB. B. O´HIGGINS
TOTAL
MUESTRAS
ANALIZADAS
Porcino
15
15
30
Bovino
15
13
28
Pollos
15
16
31
Salmón
16
15
31
TOTAL
MUESTRAS
61
59
120
Tabla N° 2 Distribución de muestras según origen de toma de muestras
Especie
Mataderos
Faenadoras
Expendio
Terminal
Pesquer
o
Envasadora
Procesadora
Total
Porcino
15
15
0
0
0
30
Bovino
15
13
0
0
0
28
Pollos
2
29
0
0
0
31
Salmón
0
15
7
6
3
31
TOTAL
32
72
7
6
3
120
Fuente: Laboratorio de Residuos de Medicamentos Veterinarios. Instituto de Salud Pública de Chile.
1.2. Métodos de Análisis
Para la realización de este estudio, se utilizaron los métodos validados por el Laboratorio
de Residuos de Medicamentos Veterinarios, cuyas referencias bibliográficas son las
siguientes:
• Determination of chloramphenicol residues in shirimps tissues by liquid
chromatography–mass spectrometry. P. Muñoz,, M. Ramos, A. Aranda, I.
Rodriguez, R. Diaz, J. Blanca. Journal of Chromatography B 791 (2003) 31-38.
• Simultaneous determination of residual hormonal chemicals in meat, kidney, live
tissues and milk by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. B. Shao, R.
Zhao, J. Meng, Y. Xue, G. Wu, J. Hu. X, Tu. Analityca Chimica Acta 548 (2003)
41-50.
• Multiresidues determination of triarylmethane and phenothiazine dyes in fish
tissues by LC-MS/MS. J Tarbin, D .Chan, G. Stubbings, M. Sharman, G. Analytica
Chimica Acta 625 (2008) 188-194
• .Validation of a liquid chromatography–tandem mass spectrometric method for the
quantification of eight quinolones in bovine muscle, milk and aquacultured
products. N. Van Hoof, K. De Wasch, L. Okerman, W. Reybroeck, S. Poelmans, H.
Noppe., H. De Brabander. Analytica Chimica Acta 529 (2005) 265-272.B 791
(2003) 31-38.
•
Efficient HPLC method for the determination of nicarbazin, as dinitrocarbanilide in
broler liver. E, Capurro, M. Danaher, A. Anastasio, ML, Cortesi, M, O´keeffe.
Journal of Chromatography B 822 (2005) 154-159.
Para la detección instrumental, se utilizó Cromatógrafo liquido Agilent 1200 acoplado un
detector selectivo de masas/masas (LC-MS/MS), marca Applied Biosystems, modelo 3200
QTrap. Equipado con bomba cuaternaria, Desgasificador por vacío, muestreador
automático con control de temperatura, termostatizador de columna y Detector DAD
Los resultados se expresan en
µg/Kg (microgramos de medicamento encontrado por
kilogramo de muestra), de acuerdo a la legislación vigente.
Para la cuantificación y confirmación de los residuos de medicamentos de uso veterinario
se utilizaron criterios establecidos en la Decisión de la Comisión (2002/657/CE).
“Funcionamiento de los métodos analíticos e interpretación de los resultados” de la
Comunidad Europea. Para cada analito fueron monitoreadas dos transiciones, una con
fines de cuantificación y otra con fines de confirmación, cumpliendo con los cuatro puntos
de identificación exigidos con este propósito. Los criterios de confirmación para las
metodologías analíticas realizadas por LC-MS-MS fueron:
1. Tiempo de retención analito: El tiempo de retención entre el analito y el control no
debió superar un ± 2.5 %
2. Tiempo de relativo: El cuociente entre el tiempo de retención del analito y el
estándar interno no debió superar un ± 2.5 %
3. Ratios: El cuociente entre la transición minoritaria y la mayoritaria debió estar
comprendido entre las tolerancias establecidas según su intensidad relativa
4. Señal:ruido : Igual o superior a tres en la transición minoritaria.
Luego, una muestra analizada resulta ser positiva si supera el límite de detección y
cumple con los cuatro criterios de confirmación en forma simultánea, los límites de
detección y método instrumental utilizado se observa en la Tabla N° 3
Tabla N° 3 Límites de detección y métodos instrumen tales
ANALITO
LIMITE DE DETECCIÓN
(
µ
g/Kg)
MÉTODO
Cloranfenicol
0.05
LC-MSMS
Enrofloxacino
2.5
LC-MSMS
Ciprofloxacino
2.5
LC-MSMS
Acido oxolinico
2.5
LC-MSMS
Flumequina
2.5
LC-MSMS
Difloxacino
2.5
LC-MSMS
Danofloxacino
2.5
LC-MSMS
Sarafloxacino
2.5
LC-MSMS
Acido Nalidixico
2.5
LC-MSMS
Norfloxacino
2.5
LC-MSMS
Marbofloxacino
2.5
LC-MSMS
Trembolona
0.05
LC-MSMS
α-Zeranol
0.2
LC-MSMS
β-Zeranol
0.2
LC-MSMS
Nicarbazina
20
LC-DAD
Cristal violeta
0.1
LC-MSMS
Verde malaquita
0.1
LC-MSMS
Verde leucomalaquita
0.1
LC-MSMS
2. Resultados
2.1 Muestras con Residuos de Medicamentos Veterinarios Detectados.
Con respecto al cumplimento del “Reglamento Sanitario de los Alimentos Decreto
Supremo Nº 977/96 Articulo 280” podemos mencionar que siete muestras resultaron no
conformes (5,8 %)
Tabla N°4
. Es importante destacar que en estas muestras se detectaron
residuos de medicamentos veterinarios que se encuentran prohibidos como cloranfenicol
(6 muestras) y verde malaquita (1 muestra). El cloranfenicol fue detectado en un intervalo
de concentraciones entre 0,14-0,29 ppb en muestras de cerdo y bovino, verde malaquita
fue detectado a una concentración de 0,27 ppb en una muestra de salmón.
Además se detectó en tres muestras de salmón la presencia de otro agente de uso
prohibido cristal violeta, el cual esta legislado internacionalmente en normativas como el
Codex Alimentarius.
De acuerdo a los resultados obtenidos, se detectaron 29 (24.2 %) muestras de tejido
animal de las 120 analizadas, con presencia de residuos de medicamentos de uso
veterinario. De éstas 16 provienen de Región Metropolitana y 27 de la Región de
O´Higgins. Tabla N°4 .
Tabla N° 4 Cantidad de muestras con niveles de resi duos de medicamentos
detectados
MUESTRAS
REGIÓN
METROPOLITANA
REGIÓN
LIB. B. O´HIGGINS
TOTAL
(%)
CONFORMES
-
-
113 (94.2)
NO CONFORMES
-
-
7 (5.8)
DETECTABLES
16
13
29 (24.2)
NO DETECTABLES
45
46
91 (75.8)
Se detectaron 11 tipos de residuos de medicamentos de uso veterinario,
los analitos detectados son: nicarbacina, flumequina, cristal violeta, acido oxolinico, acido
nalidixico, verde malaquita, cloranfenicol, norfloxacino, ciprofloxacino, enrofloxacino y
sarafloxacino. En nueve muestras se encontró más de un residuo, que corresponden a 7
muestras de bovino y 2 de salmón. El grupo terapeútico de las quinolonas fue detectado
en un 74,4 %, cloranfenicol en un 14 %, colorantes triarylmetanos en un 9,3 % y
nicarbazina en un 2,3 % de las muestras positivas. No se detectaron muestras con
presencia de hormonas tales como trembolona,
α-Zeranol y
β-Zeranol, ni con presencia
de verde leocomalaquita, difloxacino, danofloxacino y marbofloxaxino (Tabla N° 5)
Tabla N° 5 Analitos detectados según origen
ANALITO
REGIÓN
METROPOLITANA
REGIÓN
LIB. B. O´HIGGINS
TOTAL
Nicarbazina
0
1
1
Cristal violeta
3
0
3
Flumequina
1
0
1
Acido oxolinico
5
9
14
Acido nalidixico
3
0
3
Verde malaquita
1
0
1
Cloranfenicol
4
2
6
Norfloxacino
4
1
5
Ciprofloxacino
2
2
4
Enrofloxacino
1
2
3
Saraflocaxino
1
1
2
TOTAL
25
18
43
Fuente: Laboratorio de Residuos de Medicamentos. Instituto de Salud Pública de Chile.
El análisis del porcentaje de muestras detectadas con respecto a la especie reveló que las
muestras de bovino presentaron un 56 %, seguido muestras de cerdo con un 20 %,
salmón con un 18 y finalmente las muestras de pollo con un 6 %. En el
grafico Nº 1 se observa la distribución por especies de las muestras detectadas y no
detectadas respecto al total de muestras analizadas. Este resultado es atribuible al lugar
de toma de las muestras de las especies estudiadas. Los porcentajes mas altos de
detecciones corresponden a las muestras de bovino y cerdo, tales muestras fueron
tomadas en mataderos, donde el procesamiento y lavados son menores a los efectuados
en las faenadoras donde se realizan en forma mas exhaustiva, previos al envasado y
comercialización, en este ultimo lugar fueron tomadas las muestras de pollo y cerdo que
tuvieron los menores porcentajes de detecciones.
Figura N°1: Muestras detectadas según especie
cerdo pollo salmón bovino detectadas no detectadas Total 0 5 10 15 20 25 30 35
Distribución de muestras detectadas por especie
detectadas no detectadas Total
