ECOLOGIA MICROBIANA DEL APARATO ESPIRATORIO DE OONEJOS CRIADOS EN GRANJA (MICROORGANISMOS BACTERIANOS AEROBICOS); ESTUDIO CUALI-
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A.A. Rodriguez Moure, M.V. Latre, J. Ducha. C. Lara. J.F. González M. Ranis. C. Soláns y S. P e l l i c e r .
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Departamento de Patologia Animal (Microbiologia e Inmunologia).
Facultad de Veterinaria. Universidad de Zaragoza.
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da .... 1 n ~ . a s t i ~ . .nQ CA 10/85.
Seis granjas cunicolas dedicadas a l a c r i a y cebo de cone- jos. de d i s t i n t a s razas y lineas. clasificadas como: de Tipo Familiar (hasta un máximo de 150 conejos) ; de Tipo Semiindustrial (de 150 a 350 conejos) y de Tipo I n d u s t r i a l ( 6 s de 350 conejos) con muestreadas t r e s veces cada una a l o largo de 18 meses, tanando animales de tres edades diferentes (de 30 a 40 dlas.
de 41 a 55 días y de más de 55 dias). estudiándose los agentes bacterianos aerbbicos a p a r t i r del aparato r e s p i r a t o r i o de los animales muest reados, identificándose 29 especies bacterianas diferentes cuya s i g n i f i c a c i ó n ecológica y patogbnica es muy diversa; su d i s t r i b u c i b n por edades y t i p o de explotación es igualmente diferente.
MATERIAL Y METOOOS
Se estudian conejos en cebo. de t r e s edades diferentes pero todos e l l o s en l a misma nave de producción, de granjas ubicadas en l a provincia de Zaragoza.
Los animales muestreados. de l a s t r e s edades en cada granja y &oca de estudio. con sacrificados en nuestro laboratorio y se realiza l a selección de los puntos de toma de muestras para l a s siembras a p a r t i r de Fosas Nasales, Trhquea y Pulmón;
estudiándose en este Último, y de un animal de cada l o t e de edad, un recuento t o t a l de viables a 37% y a 25%.
Los medios de siembra u t i l i z a d o s son: Plate Count Agar (Difco) en los recuentos de t i p o pulmonar y Agar de Coja T r i p t i - caseina
+
5% de sangre de carnero (pronadisa),
incubados a 37%.en aerobiosis y durante un periodo máximo de 48 horas.
Tras una selección de colonias y estudio t i n t o r i a l y morfo- l o g i a de los microorganismos, se procede a su i d e n t i f i c a c i ó n por técnicas de t i p o f i s i o l ó g i c o y bioquimico de acuerdo con los procedimientos adecuados.
A f i n de conocer su patogenicidad potencial se ha estudia- do su poder patógeno con respecto a algunas cepas bacterianas aisladas, cobre raton blanco C M , de 20 a 25 grs. de p.v. u t i l i - zando l a v l a intraperitoneal e inocular de 0'2 a 0'25 m l . de c u l t i v o s de 24 horas en Brain Heart Infusion (Difco).
RESULTADOS
Hemos aislado 39 especies diferentes pertenecientes a los siguientes 16 g 6 n ~ r o s bacterianos: Acitenobacter (1). Aeroco- ccus ( 1 1, Aeranonas (2). Alcaligenes (31, B a c i l l u s (2). Borde-
-
t e l l a (11, Cardiobacterium ( l ) , Corynebacterium ( 1 ) . Chromobacte-
-
rium ( 1 ) . Escherichia (1). Flavobacterium (2). K l e b s i e l l a ( 1 ) .
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Micrococcus (2). Moraxella (2). Pasteurella (21, Pseudanonas (4) y Hafnia (1).E l número de U.F.C. por gramo de pulmón, ha oscilado entre cero (crecimiento negativo) a 37% en los primeros momentos de los c i c l o s de producción (próximos a l vacio s a n i t a r i o y desin- fección), especialmente en animales de primera edad. hasta 90.000 U.F.C./gr. de pulmón, en animales de tercera edad y des- pués de más de 18 meses de c i c l o s de producción s i n r e a l i z a r vacioc sanitarios.
A temperaturas de incubación de 25-30%. los resultados obtenidos oscilan entre l a ausencia. igualmente en animales de primera y segunda edad y próximos a l vacio s a n i t a r i o antes de comenzar e l ciclo, hasta 200.000 U.F.C./gr. de pulmón (próxi- mos teóricamente, a procesos patológicos de t i p o respiratorio).
S i e l a n a l i s i s de recuento l o aplicamos a l a evolución c u a n t i t a t i v a por edades de l o s animales y en correlación con e l m e n t o de muestreo. se obtienen los siguientes datos:
-
En animales de primera edad (30-40 dias) y en l a primera toma de muestras, en general l o s crecimientos fueron negativos a 37%. en casi todas las explotaciones ( f a m i l i a r e s e industria- les) pero en l a s de t i p o semiindustrial se observaron crecimiento en dichos recuentos que oscilaron entre 2 U.F.C./gr. a 1.360 U.F.C./gr. de pulmón.-
En animales de segunda edad (41-45 dlas) y en l a primera toma de muestras, se observa un aumento en l o s crecimientos positivos a 37% que varian desde cero (negativos) en empresas industriales a positivos, de 9.600 U.F.C./gr. a más de 30.000 U.F.C./gr. (especialmente en explotaciones de t i p o f a m i l i a r y seniindustrial.-
En animales de tercera edad (más de 55 dlas) prácticamen- t e todos los crecimientos con positivos. aunque l a s concentracio- nes de germenes por gramo de pulmón no son muy superiores a los de 2' edad (oscilan entre 400 U.F.C./gr. a más de 50.000 U.F.C./gr. de pulmón.Con respecto a l a segunda toma de muestras se observa un aumento de l o s recuentos en todas l a s edades. que podemos resumir, seiíalando l a s c i f r a s extremas en cada edad, como sigue:
1' edad (3.000 a más de 50.000 a 37%). siendo l a s &S contamina- das l a s empresas de t i p o familiar.
De
2. edad (desde 3.000 a más de 60.000 U.F.C./gr. de pulmón). estando más contaminadas l a s explotaciones de t i p o familiar. Las de 3. edad oscilan entre cero (crecimiento negativo) a más de 30.000 U.F.C./gr.de pulmón. siendo l a s menos contaminadas las empresas industria- les, despues l a s semiindustriales y las de mayor número de ger- nes, una empresa familiar.
La tercera toma de muestras realizada alrrededor de l o s 14 a 16 meses de l a primera toma. presenta siempre crecimientos positivos en animales de l a s t r e s edades estudiadas. con con-
centraciones desde 400 U.F.C/gr. de pulmón hasta 90.000 U.F.C./gr.
de pulmón; salvo excepciones de negatividad que coincidieron con desinfecciones en periodos no más lejanos de 72 horas d e l mcinento d e l muestreo, y en general, hay un aumento en todas las edades con respecto a los muestreos anteriores.
Desde e l punto de v i s t a d e l estudio de su poder patógeno.
cobre ratón C3H de 25 gr. y de acuerdo con e l apartado MATERIAL Y METOOOS, los resultados los resumimos en los siguientes:
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Acinetobacter calcoaceticus, Alcaligenes d e n i t r i f i c n a s , Flavobacterium mu l t ivorum. ~lavobacterium odoratum. K l e b s i e l l a pneumoniae, Micrococcus roseus. Pasteurella multocida, Staphylo- coccus saprophyticus y Staphylococcus aureus. no matan a l ratón a las 72 horas en e l 100% de las cepas estudiadas.-
Moraxella cuniculi, mata a l ratón en 36 horas; Moraxella u r e t h r a l i s , mata a l ratón en 24 horas.-
Staphylococcus epiderniidis, aproximadamente 2/5 de l a s cepas aisladas matan a l ratón en 36 horas y 3/5 no matán a l ratón en 72 horas.-
Escherichia c o l i . mata a l ratón en 4 8 horas; Pseudmonas putida. mata a l 50% de l o s animales inoculados, sobreviviendo e l 50% en l a s 72 horas.l - Corynebacterium pyogenes. mata a l ratón en 4 8 horas.
-
Bordetella bronchiseptica. en l a que e l 38'5% de l a s cepas aisladas matan a l ratón en 60 horas. e l 29% l o matan en 4 8 horas, e l 13'5% antes de 36 horas. de1 5'5% solo mueren en 72 e l 50% de l o s ratones inoculados y sobreviven un 50% y, por Último.d e l 13'5% sobreviven a las 72 horas e l 100% de los ratones inocula- dos.
E l resto de l a s especies bacterianas aisladas no fueron estudiadas con respecto a su poder patógeno.
DISCUSION Y CONCLUSIONES
En general, se observa en l a granja de t i p o f a m i l i a r una
mayor variedad de germenes y de presencia de microorganismos bac- terianos s a p r o f i t i c o s (Bacillus, Staphylococcus, Micrococcus.
Pseudmonas, Acinetobacter).
En l a s granjas de t i p o semiindustrial. en l a s cuales en realidad hay un aumento en l a densidad de animales en cebo, y que puede tener o no a i r e forzado y control de humedad, s i bien se a s i s t e a un c i e r t o grado en l a variedad de géneros, no es tan grande como en l a s de t i p o f a m i l i a r ( l o s géneros más frecuentes son: Bacillus, Acinetobacter, Alcaligenes. Pasteurella, Moraxella).
Las explotaciones de t i p o i n d u s t r i a l , en l a s cuales e l c o n t r o l ambiental y de humedad es continuo, s i bien a l p r i n c i p i o se observa una variedad de agentes microbianos, éstas tienden a e s t a b i l i z a r s e en cuanto a calidad, sustituyendose unas poblacio- nes por otras más estables.
Es de observar, que l a especie Bordetella bronchisept ica.
tiende a colonizar a todos los animales de l a explotación, haz t a hacerse mayoritaria y a veces única especie d e l ecosistema respiratorio, c a s i independientemente d e l t i p o de explotación.
En relación con e l poder patógeno, setialamos, l a patogeni- cidad experimental de cepas de Corynebacterium pyogenes. sobre e l ratón blanco, pero no en condiciones naturales sobre e l conejo en su localización respiratoria.
Moraxella u r e t r a l i s , que mata a l ratón en 24 horas. tampoco parece ser un problema a c t i v o como patógeno en conejos.
Moraxella cuniculi. mata a l ratón en 36 horas, pero no se ha logrado a i s l a r a p a r t i r de animales enfermos en las explota- ciones.
Bordetella brochiseptica, con diversas capacidades de poder patógeno a n i v e l de cepas es, a nuestro j u i c i o , l a especie bacteriana que presenta mayores problemas como potencial patógeno d e l aparato respiratorio.
Otras especies
corno
Pasteurella multocida y Pasteurella pneumot ropica, pueden considerarse como potenciales patógenos sobre e l aparato respiratorio.1.- Sneath R i A , Mair NS. Sharpe ME. H o l t JG. (Eds.). Bergeyls Manual o f Systematic Bacteriology. Vol 2. Baltimore: Williams 8 Wilkins. 1.986.
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4.
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