Niveles sanguíneos de ampicilina en pollos de engorde
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(2) REVISTA ICA, Vol. 25, Abril - Jun10 1990. ABSTRACT. Blood Levels Ampicillin in Broilers. Ampicillin has shown be usseful in the treatment of sicknees infections of respiratory tract of broilers. Dosage administration is based in terapeutical clinical efficacy, but there is know very little about the serum concentrations, and in another corporeal tissues. The aim of this work was blood concentrations specifity of the ampicillin in 90 broilers during 49 days when by oral means was given to the dosage of 10, 25 and 40 mg/kg of living weight. This chickens were weight homogenizazed and random entirely chosen with factorial arrangements of 4 x 5 with 5 repetitions and 1 chicken by each repetitions; 15 of this chickens were used as a control, and therefore none of this received antibiotical treatment. Blood samples were obtained after 1/2, 1, 2, 4 and 8 hours medicamental postadministration. Significatives differences were observed by dosage effect of ampicillin studied about the himself concentration in the blood (P 'K 0.01). The time has a significative meaning about the concentration of ampicillin activity in blood (P<0.05). Time ampicillin interactions was no significative difference. The in blood serum averages were of 0.471, 0.841 and 1.459 mcg/ml for dosages of 10, 25 and 40 mg/kg of living weight. Dosage of 40 mg/kg was found in concentrations of serum under 5 mcgfml at different times, which suggested to give a higher dosage than the normally used, to get in concordance with the minimal inhibitory concentration (MIC) and to obtain higher concentrations in vitro, determined for the main germs agains which ampicillin is active. Additional Index Words: Antibiotics, broilers, serum concentrations, tissues concentrations.. En medicina veterinaria el amplio uso de las drogas antimicrobianas, que cuantitativamente pueden representar el 70% del consumo nacional de medicamentos, hace necesaria Ia determinaciOn de sus parámetros biofarmacéuticos con elfin de racionalizar su empleo, siendo bsico dentro de ellos conocer los niveles que alcanzan estos fármacos en Ia sangre y en los demás tejidos animales, segOn Ia dosis y Ia via de administraciOn empleadas. Mediante revisiOn de Ia literatura generada a nivel mundial se ha constatado Ia escasez de trabajos experimentales relacionados con parámetros biofarmacéuticos de antibiOticos en ayes, 10 cual se verifica en Colombia, en donde las experiencias de esta naturaleza son minimas y no han tenido ninguna repercusiOn en el Ambito de Ia farmacologia experimental y clinica. 88. En el pals es un hecho establecido que las dosis, las rnaneras de uso y las vias e intervalos de administraciOn de los antibiOticos en ayes están dados por ensayos de tipo clInico, pero no se han determinado por comprobaciOn experimental los niveles sanguineos obtenidos a las diferentes dosis empleadas y, por consiguiente, Si éstos corresponden a los que la literatura existente sobre el particular cita como efectivos. Poco se conoce sobre Ia concentraciOn alcanzable en Ia especie aviar de los antimicrobianos comUnmente utilizados (9). En el estudio realizado por Yesov (18) se reportan resultados sobre las concentraciones en sangre y en tejidos en ayes jOvenes después de uria inyecciOn intramuscular de ampicilina sOdica y administraciOn oral con ampicilina trihidrato, encontrando que Ia ampicilina sOdica inyectada a 50 mg/kg de peso,.
(3) MARIN L., S. y GARCIA M., L.F. Nivetes sanguineos de ampicilina en pollos. produjo un pico sérico promedio de 3.3 mcg/ml una hora más tarde y niveles promedios tres horas post-tratamiento de 1.0 mcg/ml, mientras que Ia ampicilina trihidrato administracla oralmente a 50 mg/kg y 100 mg/kg produjo picas séricos del antibiOtico de 1.0 mcg/ml y 2.4 mcg/ml, respectivamente. Zurich et a! (19) realizaron un estudio farmacolOgico con ampicilina en gallinas, administrándola por via venosa, en dosis de 50 y 100 mg/kg de peso vivo a 30 ayes de 12 meses de edad. La distribuciOn y aclaramiento renal indicO baja afinidad por las proteinas del plasma y alta afinidad por los lipidos. La ampicilina desapareciO de Ia sangre después de 2 horas a Ia dosis más baja, mientras que bajas concentraciones persistieron durante seis horas a Ia dosis ms alta ensayada. La absorciOn de Ia ampicilina en las ayes parece estar limitada a una determinada extensiOn del tracto intestinal. Diferentes investigadores han mostrado que Ia ampicilina es lenta y pobremerite absorbida del tracto gastrointestinal de diversos mamiferos (12).. En un trabajo efectuado por Archimboult et al (2) en ayes ponedoras, de acuerdo con sus resultados y los encontrados en otros ensayos adelantados por Cottereau (5) y Ferrari (6), se indican las posibilidades y modalidades de empleo de Ia ampicilina en todos los animales domésticos y en particular en las ayes de corral, para el tratamiento de los sindromes respiratorios crOnicos como Ia micoplasmosis, Ia salmonelosis y Ia haerriofilosis.. Los estudios biofarmaceuticos y farmacocinéticos de Ia ampicilina en humanos son numerosos y amplios. Los primeros estudios de absorciOn y excreciOn de este antibiOtico fueron realizados por Knudsen (10), quien demuestra que este es bien absorbido despuOs de su administraciOn oral. Los picos de concentraciOn sOrica se encontraron alrededor de las dos horas despuOs de (a administraciOn, siendo en promedio de 2.19 mcg/ml con dosis de 750 mg y 250 mg; 3.8 mcg/ml, con dosis de 500 mg; 5.1 mcg/ml con dosis de 750 mg y 6.79 mcg con dosis de 1.0 g. Mediante estas determinaciones el autor citado llegO a las siguientes conclusiones:. El tiempo de vida media (t 1/2) de Ia ampicilina en especies mamIferas oscila airededor de 60 minutos, mientras que Ia droga es eliminada dos yeces más rOpido de Ia sangre en los pollos (20).. Concentraciones séricas significativas de ampicilina estOn aUn presentes hasta seis horas despues de su administraciOn oral (0.2 mcg/ml comparado con 0.02 mcg/ml de las otras penicitinas Ocido estables).. As! mismo, Ia rOpida depuraciOn renal de Ia ampicilina en pollos es el principal determinante para a relativa corta duraciOn de Ia droga en el suero a niveles potencialmente efectivos (12). La baja fijaciOn a las proteinas favorece Ia liegada a los tejidos. Un antibiOtico con elevada fijaciOn a las proteinas puede tender a producir niveles bajos en los tejidos (7). La fracciOn del medicamento unida a las proteinas estO en equilibria con Ia fracciOn libre disuelta en el plasma, pero sOlo esta Ultima se distribuye at resto del organismo; Ia primera queda en forma de depOsito y va cediendo a Ia parte acuosa del plasma a medida que Ia forma libre se va eliminando por metabolismo y excreciOn (13). De to anterior se desprende Ia importancia de determinar el grado o porcentaje de uniOn a las proteinas plOsmaticas de una sustancia, at hacer Ia determinaciOn anal itica de ella en las muestras de suero (4). En ayes, estudios de esta indole son muy escasos (9).. Doblando Ia dosis, virtualmente se dobla Ia concnetraciOn maxima en el suero. C). Alrededor del 30% de Ia dosis administrada es excretada por Ia orina en las primeras seis horas.. Acred et at (1) establecieron que sOlo el 17% se unia a las proteinas sOricas, siendo en consecuencia mOs baja esta uniOn que las encontradas para otras penicilinas. El objetivo del presente trabajo fue determinar los niveles sanguineos de ampicilina en pollos de 49 dias de edad, administrada por via oral, en dosis de 10, 25 y 40 mg/kg de peso viyo, e identificar con base en los niveles alcanzados, Ia dosis mOs indicada en pollos, teniendo en cuenta las concentraciones mInimas inhibitorias del antibiOtico (MIC) para las gOrmenes que afectan con mayor frecuencia Ia especie aviar. 89.
(4) REVISTA ICA, Vol. 25, Abril - Junio 1990 MATERIALES Y METODOS. El ensayo tuvo dos fases, una de campo y otra de laboratorlo. La primera se desarrollO en las instalaciones del Programa Nacional de Avicultura del Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (CNIA), Tibaitat& situado en el municipio de Mosquera (Cundinamarca), con altitud de 2.550 m.s.n.m., temperatura media de 130C y humedad relativa del 83%. La fase de laboratorio se desarrollO en las instalaciones del Laboratorio Nacional de insumos Pecuarios del ICA (LANIP), situado en el municipio de Mosquera, Cundinamarca. Se emplearon 90 pollos de Ia linea Hubbard, de un dIa de edad, los cuales fueron criados y levantados en equipos adecuados para tal f in hasta Ia séptima semana de edad (49 dIas), tiempo durante el cual recibieron un alimento completo especialmente preparado para el ensayo por una empresa productora de alimentos para ayes, que no contenla aditivos de tipo medicamentoso, tales como antimicrobianos o anticoccidiales, con el objeto de evitar Ia interferencia de esta clase de sustancias con los resultados. Se asignaron 75 pollos completamente al azar con arreglo factorial de 4 x 5, con cinco repeticiones y un polIo por cada repeticiOn. Como control experimental se asignaron 15 pollos, los cuales no recibieron el antibiOtico, sirviendo cada uno de ellos como testigo para cada tratamiento estadIstico. La distribuciOn fue Ia siguiente: 1 polio x 5 repeticiones x 3 dosis x 5 tiempos de muestreo = 75 pollos. 1 polIo x 3 dosis x 5 tiempos de muestreo = 15 pollos de control. Las dosis experimentates de ampicilina fueron de 0, 10, 25 y 40 mg/kg de peso vivo, empleando Ia via oral, solubilizando el antibiOtico en agua destilada y suministrando Ia dosis correspondiente en forma individual. El antibiOtico empleado fue Ia ampicilina sOdica comercial. Cada late de trabajo estuvo conformado por 6 pollos de 49 dias de edad, 5 de los cuales recibieron Ia dosis correspondiente del antibiOtico, sir90. viendo los restantes como control. Cada uno de estos lotes fue sacrificado y muestreado (sangre), asI: el primero a los 30 minutos, el segundo a Ia hora, el tercero a las 2 horas, el cuarto a las 4 horas y el quinto a las 8 horas postadmiriistradOn de Ia dosis Unica del antibiOtico. Las muestras de sangre tomadas fueron centrifugadas a 2.000 r.p.m. durante 10 minutos. El suero obtenido se mantuvo en congelaciOn a una temperatura de -700C, hasta el momento del análisis. La determinaciOn de Ia concentraciOn de ampicilina en el suero a las diferentes dosis y a los diferentes tiempos de muestreo se realizO por el método microbiolOgico de difusiOn en agar, empleando como gérmen control Ia Sarcina lutea proveniente de una cepa pura de Ia ATCC (American Tipe Culture Collection), Ia cual se mantuvo viable por refrescamiento semanal en un medlo sOlido. La sustancia patrOn empleada fue Ia ampicilina sOdica como materia prima valorada. El tampOn utilizado fue el de fosfatos de acuerdo con las recomeridaciones de Ia U.S.P. (U.S. Pharmacopela) (17), Como modificaciOn al procedimiento de valoraciOn microbiolOgicc conocido, se resalta el empleo de bandejas pyrex de 40 cm de largo por 25 cm de ancho, como elemento básico para las determinaciones, las cuales remplazaron las cajas de petri, tradicionalmente empleadas para estos análisis. El volumen ideal del medlo de valoraciOn (agar antibiOtico No. 11) para agregar a las bandejas fue de 400 ml, Ic cual permitiO depositar en forma Optima 0.1 ml de Ia diluciOn patrOn o de Ia sustancia problema en cada una de las 35 perforaciones de 8 mm de diámetro, que mediante el uso de un cilindro de acero y una plantilla como guia, se realizaban en el agar. La tapa de las bandejas estaba constituida por papel comino, previamente esterilizado al cual le era superpuesto papel aluminio. El papel comino cumple Ia funciOri de absorbente de los vapores de condensaciOn provenientes de Ia incubaciOn en estufa de Ia bandeja, y el papel aluminio permite un SeIlado adecuado que evita Ia contaminaciOn del media depositado en cada bandeja. En cada sesiOn de trabajo las muestras problema y sus diluciones fueron enfrentadas a las.
(5) MARIN L., S. y GARCIA M., L.F. Niveles sangulneos de ampicilina en pollos. niveles séricos de ampicilina están en relaciOn con Ia dosis administrada.. concentraciones patrOn en Ia misma bandeja, con el objeto de mantener el patrOn y el problema bajo las mismas condiciones experimentales como temperatura, tiempo de incubaciOn, concentradOn del inOculo y minimizar variables que pudieran incidir en un momento dado sobre los resultados. Lo anterior quiere decir que no se trabajO bajo una curva patrOn estandarizada y por tanto, en el momento en que se realizaba el annlisis de una determinada muestra, se procedia a preparar de nuevo las concentraciones conocidas del patrOn para enfrentarlas o correlacionarlas con ellas bajo igualdad de condiciones en cada oportunidad.. En diversos trabajos realizados en humanos con este antibiOtico, usando como via de administraciOn Ia oral, se ha establecido igualmente una relaciOn entre los niveles séricos observados y Ia dosis administrada, con picos máximos aldedor de las dos horas. AsI, Knudsen (10), a este tiempo encontrO niveles máximos de 3.8; 5.1 y 6.8 mcg/mI de suero, con dosis Unicas totales de 500, 750 y 1000 mg de ampicilina, respectivamente. Si bien es cierto que Ia magnitud del flujo sanguineo constituye el principal factor que determina Ia concentraciOn de Ia droga en un Organo, existen otros factores relacionados con Ia propiedad de Ia misma droga, tales como Ia liposoli.bilidad, el tamaño molecular, el grado de ionizaciOn, ph ambiental y Ia uniOn a proteinas, entre otros (13, 14).. Lo anterior constituye una modificaciOn en Ia valoraciOn microbiolOgica de antimicrobianos introducida por Arteaga y NUnez (3), Ia cual Ileva a Ia obtenciOn de datos menos influenciados por determinadas variables y por consiguiente, ms confiables. Para el procesamiento de los datos, cada dosis y tiempo de muestreo ensayados estuvieron sujetos a 5 repeticiones (5 pollos) y, a su vez, cada repeticiOn a 5 replicaciones en el agar; estas arrojaron 5 datos dados por Ia zona de inhibiciOn en mm, con los cuales se obtuvo finalmente un dato promedio por repeticiOn. A cada uno de estos datos promedio se les aplicO anélisis de regresiOn, hallándose una determinada concentraciOn de ampicilina con el suero analizado, por repeticiOn. Promediadas las concentraciones halladas por repeticiOn, se obtuvo un resultado final por dosis y tiempo de muestrec; con esLos resultados se construyeron las graficas de concentraciOn de ampicilina en funciOn del tiempo. Las concentraciones estimadas fueron tratadas estadisticamente por análisis de varianza (8).. El tiempo tuvo un efecto significativo sobre Ia concentraciOn de ampicilina activa en sangre (P<0.05). Como se observa en Ia Figura 1, a Ia media hora se hallan niveles superiores de ampicilina en comparaciOn con los obtenidos a Ia hora, y a partir de este tiempo el nivel asciende hasta alcanzar el pico máximo a las dos horas, cuando se administraron dosis Unicas de 10 y 25 mg/kg de peso (0.79 y 1.80 mcg/ml, respectivamente). 10 mg/kg. : ... 2.. - 25 mg/kg -. 2.. E .E. . 40 mg/kg. . .... 1. /. CL. E ,. \. /. . 1.. /. .. /. RESULTADOS V DISCUSION. Se observaron diferencias significativas por efecto de las dosis de ampicilina evaluadas, sobre Ia concentraciOn de Ca misma en Ia sangre (P<0.01). Los resultados obtenidos sugieren una consistencia en los niveles sanguineos de ampicilina por efecto del tiempo a las diterentes dosis, cuando el antibiOtico es administrado por via oral, mostrando tasas de cambia definidas por las dosis suministradas. De esto se infiere que los. 10.. 1/2. 2 1 Tiempo (horas). 4. FIGURA 1. Efecto del tiempo (x) soLre los niveles de ampicilina en sangre de pollos de 49 dIas en dosis de 10, 25 y 40 mg/kg por via oral. 91.
(6) REVISTA ICA, Vol. 25, Abril - Junio 1990 Con Ia dosis de 40 mg/kg de peso a Ia media hora se encontrO el nivel maxima de ampicilina en el suero (2.62 mcg/ml), presentandose en forma similar a las otras dosis evaluadas, un descenso en ese nivel detectado a Ia hora (1.56 mcg/ml), para un posterior incremento del mismo hallado a las dos horas postadministraciOn (1.94 mcg/ml). A las ocho horas postadministraciOn de las dosis de 10 y 25 mg/kg de peso no se detectO el antibiOtico en el suero, a diferencia de Ia hailado con Ia dosis de 40 mg/kg de peso, que muestra a este tiempo un nivel de 0.16 mcg/ml. La interacciOn de ampicilina por tiempo no fue significativa (Tabia 1), TABLA 1.. Cuactrados medlos del análisis de varianza para las concentraciones de ampicilina en sangre de pollos de 49 dias de edad.. Fuentes de varlaciôn. Grados de libertad. Tiempo Ampicilina Tiempo x concentraciOn Error. N.S.:. 4 2 8 45. 9.28 19.60 5.51 48.53. N.S. N.S.. Significativo al 0.01. No significativo.. Los promedios en mcg de ampicilina por ml de suero fueron de 0.340.; 0.680 y 1.460 para Ia dosis de 10, 25 y 40 mg/kg de peso vivo, independiente del tiempo (Tabla 2). TABLA 2. Nlveles sangulneos de ampiclilna en p0lbs de 49 dIas, segUn Ia dosis y el Liempo de muestreo. Tiempo. Niveles sanguineos (mcg/ml). Horas 10 1/2 1 2 4 8 X. 0.487 0.199 0.794 0.191 * N.D. 0.34. * N.D.: No detectables.. 92. Dosls (mg/kg p.v) 25 40. 0.744 0.261 1.802 0.557 ND 0.68. 2.621 1.561 1.942 1.016 0.155 1.46. Se conoce que Ia ampicilina tiene circulaciOn enterohepatica y que su concentraciOn en Ia bills respecto a Ia sangre es hasta nueve veces mayor (11), Ia cual puede dar lugar a reabsorciOn significativa y por cansiguiente, modificaciones en el nivel sérico a un determinado tiempo. Stewart (16) encontrO en una investigaciOn efectuada con ratas, que Ia ampicilina es absorbida rápidamente en el duodeno y excretada entre una y tres horas en alta concentraciOn en Ia bills. Parte de esta cancentración es reabsorbida en Ia fracciOn superior del yeyuno y reexcretada en Ia bilis, iniciándose una disminuciOn en el cido enterohepätico del compuesto. La velocidad de desapariciOn de una droga del plasma es rapida durante Ia fase inicial y depende, tanto de Ia extensiOn de Ia distribuciOn coma del grado de eficiencia de los mecanismos de eliminaciOn. Teniendo en cuenta las concentraciones mlnimas inhibitorias (MIC) de ampicilina reportadas para muchas cepas de Escherichia co/i de 2 a 5 mcg/ml; para Staphylococcus aureus de 0.5 a 1.0 mcg/ml; para Haernophilus influenzae de 0.1 a 1.0 mcg/ml (15), y los niveles del antibiOtico hallados en el suero de los patios con las diferentes dosis, se infiere Ia necesidad de modificar en Ia práctica clinica aviar Ia dosis promedio actualmente en uso (10 a 15 mg/kg de peso vivo), por dosis promedio de 40 mg/kg de peso vivo. Es conveniente, sin embargo, determinar Ia utilidad cljnica de los niveles séricos alcanzados con las dosis analizada, mediante Ia realizaciOn de pruebas sobre el particular. Por otra parte, se requiere investigar Ia reladOn existente entre los niveles séricos encontrados a las diferentes dosis evaluadas y las concentraciones a nivel de tejidos, en donde realmente es indispensable que el antibiOtico ejerza su acciOn.. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 1. Acred, P.; Brown, D.M.; Turner, D.H.; Wilson, M.J. 1962. Pharmacology and chemostherapy of ampicillin: a new broad spectrum penicillin. Grit. J. Pharmacol. Chem. 18:356-369..
(7) MARIN L., S. y GARCIA M., L.F. Niveles sanguIneos de ampicilina en pollos. Archimboult, P.; Boutier, C.; Muscat, B. 1978. Lampicillirie chez Ia volaille. Estudie des residus apres administration per os chez la poule pondeuse. Revue de Medicin Veterinaire. 129:1541-1551. Arteaga, M.; Nuñez, E. 1972. Equivalencia biológica de las cápsulas de oxitetraciclina hcl del mercado colombiano. Rev. Colombiana de Ciencias QuimicoFarmacéuticas. 2:7-25. Baggot, J.D. 1984. Factors involved in the choice of routes of administration of antimicrobial drugs. J. Amer. Vet. Med. Ass. 185:1076-1082. Cottereau, P.H. 1973. Une penicillirie semisyntherique a large spectre antibacterien: Lampicilline. Son interet en therapeutique veterinaire. Revue de Medicin Veterinaire. 124:1041-1049. Ferrari, A. 1974. Ampicilina en terapia veterinaria. Cli nica Veterinaria. 97:299-302. Finn, A.L.: Taylor, W.J.: Kane, W.J. 1981. Aplicaclones prácticas de las concentraciones séricas de farmacos. Individualizing drug therapy: Practical applications of drug monitoring. 1:2-32. a. Hicks, R.C. 1973. Fundamental concepts in the design of experiments. 2a. ed. Holt, Rinehart and Winston. New York. 349 p.. 9. Hirsh, CD.; Knox, J.S.; Conzelman, G.M.; Winger, N. 1978. Pharmacokinetics of penicillin in the turkey. Ann. J. Vet. Res. 39:1219-1221. 10.Knudsen, E.T. 1961. Absorption and excretion of 'penbritin". Bri. Med. J. 2:198-200.. 11.Litter, M. 1980. Farmacologia experimental y clinica. 6a. ed. El Ateneo. Buenos Aires. 82-92. 12.Newr'an, J.; Fridman, J.; Ziv, E.; Singer, N.; Meshorer, A. 1979. Effects of probenecid on blood levels and tissue distribution of ampicillin in fowls and turkeys. Avian diseases. 24:927-938. 13.Pla, J.M.D.; Ojeda, A. 1974. Manual de iniciaciOn a Ia biofarmacia. Farmacocinética aplicada. Universidad de Barcelona. Barcelona. p. 13-37. 14.Powers, T.E.; Varma, K.JU.; Powers, J.D. 1984. Selecting therapeutic concentrations: minimum inhibitory concentrations versus subminimum or supraminimum inhibitory concenetrations. J. Am. Vet. Med. Ass. 185: 1072-1074. 15.Rollinson, G.N.; Stevens, S. 1961. Microbiological studies on a new broad-spectrum penicillin, "penbritin. Brit. Med. J. 2:191-196. 16.Stewart, G.T. 1961. Penbritin: An oral penicillin with broadspectrum activity. Brit. Med. J. 2:200-206. 17.U.S. Pharmacopeia X. National Formulary V Convention, Inc. 1980. Twinbrook Parkway. Rockville. 45:1304-1306. 18.Yesov, B.E. 1977. Pharmacokinetics of ampicillin in young chickens. Veterinariya. Moscow. 619:94-98. 19.Zurich, L.; Calderón, M.T.; Baraona, M.; Yalkin, H. 1984. Estudlo tarmacéutico de ampicilina en gallinas. Archivos de Medicina Veterinaria (Chile). 16:15-20. 20.Zurich, L. 1983. Clinical pharmacology of tiamulin in ruminants. J. Vet. Pharmacol. Therap. 6:23-31.. 93.
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