UNIVERSIDAD PRIVADA DE HUANCAYO
“FRANKLIN ROOSEVELT”
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y BIOQUÍMICA
TESIS
ACTIVIDAD REPELENTE DE UNA LOCIÓN ELABORADA A BASE DE EXTRACTOS FLUIDOS DE Eucalyptus globulus (EUCALIPTO) y
Schinus molle (MOLLE)
PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE QUÍMICO FARMACÉUTICO
PRESENTADO POR:
Bach. CARRASCO TUME, JOVANA MARISOL Bach. VALLEJOS CASTILLO, JOSELUIS
ASESOR:
Dra. MÓNICA EVENCIA POMA VIVAS
LÍNEA DE INVESTIGACIÓN:
Recursos Naturales
Huancayo – Perú 2021
II DEDICATORIA
A Dios y a mis padres, Santos y Soledad, por brindarme todo su amor y apoyo incondicional, a mi hermana Nataly por acompañarme en este duro camino, por apoyarme desde principio a fin, por ser tan buena y admirable y sobre todo por darme tanto amor.
A mi novio, que sin duda ha sabido estar conmigo en cada paso de mi vida, creíste en mí y sin duda me apoyaste, guiaste y sostuviste cuando más te he necesitado.
Jovana Marisol
A Dios y a mi familia, en especial a mis padres, Fermín por guiarme y cuidarme desde el cielo y Francisca, por brindarme su apoyo incondicional para seguir adelante día a día a pesar de las adversidades de la vida.
A mi novia, por su gran ayuda brindada, ya que ha sido de gran importancia para mí, estuviste a mi lado incluso en los peores momentos, siempre ayudándome.
Joseluis
III AGRADECIMIENTO
A la Universidad Privada de Huancayo Franklin Roosevelt por permitirnos obtener el título profesional.
A nuestra asesora de tesis, la Dra. Mónica Evencia Poma Vivas por ser nuestra guía, brindarnos su tiempo y paciencia en el desarrollo de esta tesis.
A nuestros queridos amigos, que estuvieron presentes durante toda o la mayor parte de la realización y el desarrollo de esta tesis, gracias a aquellos que con respeto y decencia realizaron aportes a esta.
Jovana Marisol Joseluis
IV PÁGINA DEL JURADO
JURADOS
PRESIDENTE:
Dra. Martha Raquel Valderrama Sueldo
MIEMBRO SECRETARIA:
Mg. Antonio Fernando Quezada Reyes
MIEMBRO VOCAL:
Dra. Mónica Evencia Poma Vivas
V DECLARACION JURADA SIMPLE
Yo, Jovana Marisol Carrasco Tume, de Nacionalidad Peruana, identificado con, DNI Nº 70929852, Tesista de la Universidad Privada de Huancayo Franklin Roosevelt, Bachiller en Farmacia y Bioquímica, domiciliado en calle Atusparias N° 477, José Leonardo Ortiz, Chiclayo, Lambayeque. DECLARO BAJO JURAMENTO: QUE TODA LA INFORMACIÓN PRESENTADA ES AUTÉNTICA Y VERAZ. Me afirmo y me ratifico en lo expresado en señal de lo cual firmo el presente documento a los 05 días del mes de septiembre del 2021.
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Jovana Marisol Carrasco Tume Huella digital
VI DECLARACION JURADA SIMPLE
Yo, Joseluis Vallejos Castillo, de Nacionalidad Peruana, identificado con, DNI Nº 44905305, Tesista de la Universidad Privada de Huancayo Franklin Roosevelt, Bachiller en Farmacia y Bioquímica, domiciliado en calle AA. HH. Primero de Junio Mz. O Lt. 5, La Victoria, Chiclayo, Lambayeque. DECLARO BAJO JURAMENTO: QUE TODA LA INFORMACIÓN PRESENTADA ES AUTÉNTICA Y VERAZ. Me afirmo y me ratifico en lo expresado en señal de lo cual firmo el presente documento a los 05 días del mes de septiembre del 2021
…………..……….
Joseluis Vallejos Castillo Huella digital
VII RESUMEN
Las enfermedades transmitidas por vectores, especialmente por el mosquito Aedes spp. o Anopheles spp. Representa uno de los grandes problemas de salud a nivel mundial y se encuentra ligado no sólo a las características climáticas y geográficas sino también a las condiciones económicas y demográficas de un determinado país. Objetivo: Demostrar la actividad repelente de una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle). Metodología: El estudio es de tipo longitudinal, prospectivo y de diseño experimental. El extracto fluido se obtuvo mediante el método de maceración con etanol 70° GL, se prepararon concentraciones al 10% y 20%, se utilizaron 20 zancudos hembras Aedes aegypti. Para la determinación del efecto repelente se utilizaron 10 discos a los que se les aplico la loción y expuso al acercamiento de los zancudos en intervalos de 1, 2, 3 y 4 horas. Resultados: Se determinó que el extracto fluido de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 20% tubo un porcentaje elevado de repelencia de grado IV, la loción al 10 % tuvo un porcentaje de grado III, sin embargo el control positivo tuvo mayor efecto repelente alcanzando el grado V de efecto repelente.
Conclusiones: Se concluye que extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 10% y 20% tienen un elevado efecto repelente.
Palabras claves: Repelente, loción, Aedes aegypti, Eucalyptus globulus (eucalipto), Schinus molle (molle).
VIII ABSTRACT
Vector-borne diseases, especially those transmitted by the Aedes spp. or Anopheles spp.
mosquito, represent one of the major health problems worldwide and are linked not only to climatic and geographical characteristics but also to the economic and demographic conditions of a given country. Objective: To demonstrate the repellent activity of a lotion made from fluid extracts of Eucalyptus globulus (eucalyptus) and Schinus molle (molle).
Methodology: The study is longitudinal, prospective and experimental design. The fluid extract was obtained by the maceration method with 70° GL ethanol, 10% and 20%
concentrations were prepared and 20 female Aedes aegypti mosquitoes were used. To determine the repellent effect, 10 disks were used and the lotion was applied and exposed to the approach of the mosquitoes at intervals of 1, 2, 3 and 4 hours. Results: It was determined that the fluid extract of Eucalyptus globulus (eucalyptus) and Schinus molle (molle) at 20%
had a high repellent percentage of grade IV, the lotion at 10% had a percentage of grade III, however the positive control had a higher repellent effect reaching grade V repellent effect.
Conclusions: It is concluded that fluid extracts of Eucalyptus globulus (eucalyptus) and Schinus molle (molle) at 10% and 20% have a high repellent effect.
Key words: Repellent, lotion, Aedes aegypti, Eucalyptus globulus (eucalyptus), Schinus molle (molle).
IX ÍNDICE
DEDICATORIA ... II AGRADECIMIENTO ... III PÁGINA DEL JURADO ... IV DECLARACION JURADA SIMPLE ... V RESUMEN ... VII ABSTRACT ... VIII ÍNDICE ... IX
I. INTRODUCCIÓN ... 10
II. MÉTODO ... 18
2.1 Tipo y diseño de investigación ... 18
2.2 Operacionalización de las variables ... 19
2.3 Población, muestra y muestreo ... 20
2.4 Técnicas e instrumentos de recolección de datos, validez y confiabilidad ... 20
2.5 Procedimiento ... 21
2.6 Método de Análisis de datos ... 22
2.7 Aspectos éticos ... 22
RESULTADOS ... 23
DISCUSIÓN ... 26
CONCLUSIONES ... 28
RECOMENDACIONES ... 29
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ... 30
ANEXOS ... 34
10 I. INTRODUCCIÓN
Las enfermedades transmitidas por vectores, especialmente por el mosquito Aedes spp. o Anopheles spp. Representa uno de los grandes problemas de salud a nivel mundial y se encuentra ligado no sólo a las características climáticas y geográficas sino también a las condiciones económicas y demográficas de un determinado país. Estos vectores (mosquitos) a través de la picadura transmiten patógenos infecciosos como virus, parásitos o bacterias causantes de enfermedades como el Dengue, Chikunguya, Zika, Fiebre amarilla, Paludismo, etc.1
Según los datos de la Organización Mundial de la Salud (2020), afirma que las enfermedades de transmisión por vectores representan más del 19% de enfermedades infecciosas y causa anualmente muertes que superan cifras de 700 000. A modo de ejemplo el paludismo ocasiona 219 millones de caso por año a nivel mundial con más de 400 000 muertes; afectando generalmente a la población menor de 5 años de edad. El dengue por su parte registra 96 millones de casos y 40 000 muertes por cada año.2
Al mismo tiempo, en la ciudad de México del año 2020 de la semana 38 se informaron 11 228 casos de la enfermedad del dengue con 28 fallecimientos, además se han reportado casos de coinfección por el virus del dengue y SARS-CoV-2 en varias ciudades y causo muertes en la ciudad de Jalisco.3
Por otro lado, en Colombia en el año 2017 se notificó en un pueblito 254 casos de malaria y que la minería ilegal producía altos índices de casos de malaria. En el 2018 las cifras aumentaron notablemente y a nivel nacional se reportaron 57.019 casos de malaria según el sistema nacional de vigilancia en salud pública, ocasionando la muerte de un niño de 4 años.4
En nuestro país, Perú, la Organización Panamericana de Salud (OPS) en el 2017 reportó casos sospechosos de Zika en once departamentos, de los cuales sólo el 11% se confirmaron en el laboratorio y en el mismo año en Iquitos se reportó un brote con picos más altos registrándose 800 casos. Con respecto al dengue se notificaron 71.447 casos en las regiones de Loreto, Madre de Dios, Piura y Tumbes de los cuales el 33% son casos confirmados en el laboratorio y el 67%
de los casos se clasificó como probables, además se notificó 16 fallecidos.5,6
11 Asimismo, en Lambayeque (2017) el Centro de Epidemiologia, Prevención y Control de Enfermedades señalo 850 casos de dengue confirmado y sin presencia de síntomas graves y 4 casos de dengue con síntomas graves que termino en la muerte de los pacientes. Por otro lado en el distrito de la Victoria presenta 250 casos por 271.76 habitantes y Tumán 792 casos por 2581.82 habitantes.7
Según la realidad problemática, controlar este tipo de enfermedades es una tarea difícil, más aún si no existen medicamentos eficaces o vacunas, es por eso que a través del presente estudio se elaborará una loción a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) para evaluar su actividad repelente, con el propósito de evitar o prevenir este tipo de enfermedades brindando una alternativa natural, eficaz y económica.
Como antecedentes nacionales tenemos a Mogollon A. (2020), en su tesis “Actividad larvicida de cuatro extractos vegetales sobre Aedes aegypti Linnaeus, 1762 (Díptera: culicidae)”, estableció como objetivo investigar la actividad larvicida de cuatro extractos vegetales P.
elongatum (matico), A. indica (neem), B. graveolens (palo santo) y Schinus molle (molle) sobre Aedes aegypti. Para su desarrollo se elaboraron los extractos por el método de percolación y se obtuvieron diferentes concentraciones las cuales fueron incorporadas en varios frascos con larvas de Aedes aegypti, también se incorporó un grupo control sin tratamiento. Se concluyó que todos los extractos vegetales estudiados presentan actividad larvicida sobre Aedes aegypti, sin embrago, P. elongatum (matico) y A. indica (neem) presentaron mayor actividad.8
También, Oscco O. (2019), elaboró un estudio “Actividad insecticida y repelente del aceite esencial de los frutos de molle (Schinus molle L.) en gorgojos (Acanthoscelides obtectus) de frijol (P. vulgaris L.) en condición de almacenamiento”. El aceite esencial de molle se elaboró por arrastre de vapor y se realizó un análisis fitoquímico por espectrofotometría infrarroja, la actividad insecticida y repelente se evaluó por contacto directo de impregnación en papel filtro y prueba de repelencia en gorgojos. Se identificaron 10 metabolitos siendo los principales el limoneno y β-mirceno, responsables de la actividad insecticida y repelente, la dosis letal media (DL50) del aceite sobre los gorgojos a las 2, 4, 24, 48, 72 y 96 horas fue de 3.9, 2.9, 2.58, 2.25, 1.96 y 1.65µl/mg respectivamente y el tiempo letal medio (TL50) en las concentraciones de 2.06µl/µg, 2.57µl/µg y 3.09µl/µg fue de 66.55, 32.88 y 4.73 horas respectivamente y para la
12 concentración de 3.61µl/µg el TL50 produjo muerte inmediata. La prueba de repelencia del aceite a una concentración de 55µl/µg es repelente a partir de las 4 horas y en la concentración de 60µl/µg es repelente a las 4, 48 y 96 horas. Se concluyó que el aceite esencial de molle presenta actividad insecticida y repelente contra los gorgojos del frijol P. vulgaris.9
Vilchez A. (2017), realizó una investigación “Efecto repelente de una loción elaborada a base de extractos fluidos de hojas de Azadirachta indica y Eucalyptus globulus” su objetivo fue realizar un estudio farmacognóstico de las hojas de A. indica y E. globulus y evaluar su efecto repelente en una loción formulada a base de las especies mencionadas. Se elaboró un extracto fluido de cada especie por percolación y se sometió a una marcha fitoquímica, estos extractos fueron adicionados en formulación de loción y se comparó el basal con las picaduras en distintos tiempos después de aplicar la loción. En la marcha fitoquímica para Eucalyptus globulus se encontró cumarinas, azúcares reductores, lactonas, saponinas, compuestos fenólicos, quinonas, flavonoides y taninos, asimismo, la loción a base de las dos especies mencionadas presenta efecto repelente y se mantiene hasta 5 horas. Se concluye que el efecto repelente de los extractos fluidos de las dos especies se debe gracias a sus compuestos químicos encontrados.10
Y como antecedentes internacionales citaremos a Descamps L., Bizet J., Brustle C. y Sánchez C. (2019), en su artículo “Actividad repelente del aceite esencial de Eucalyptus globulus L.
(Myrtaceae) y Mentha x piperita L. (Lamiaceae) en Acyrthosiphon pisun H. (Hemiptera:
Aphididae)” su objetivo fue evaluar el efecto repelente de los aceites esenciales de Eucalyptus globulus y Mentha x piperita en insectos A. pisun presentes en las hojas de alfalfa. En su metodología las hojas de alfalfa se colocaron por 10 segundos en una solución de los aceites esenciales y en grupo control sin tratamiento, en el centro se colocaron 10 insectos A. pisun. El número de insectos presentes en las hojas se inspeccionó a las 24 y 48 horas y mediante una fórmula se calculó el índice de repelencia. A las 24 horas los aceites mostraron poder repelente en concentraciones de 7 y 3.5% y a las 48 horas el aceite de M. x piperita mantuvo su repelencia y el aceite de Eucalyptus globulus mantuvo su repelencia solo en la concentración del 7%. Se concluyó que los aceites esenciales de Eucalyptus globulus y Mentha x piperita presentan efecto repelente contra A. pisun presente en las hojas de alfalfa.11
13 Al mismo tiempo, Álvarez G., Lozano P., Muñoz F., Rascón L. y Pérez K. (2019), publicaron
“Elaboración y caracterización parcial de metabolitos de formulación repelente con base de extractos de plantas” con el objetivo de extraer los compuestos apolares de las especies A. indica (neem), O. basilicum (albahaca), Eucalyptus globulus (eucalipto) y de las cáscaras de C. limonia (limón) y C. sinensis (naranja) para identificar parcialmente sus componentes y darle utilidad como repelentes para insectos. Se elaboraron extractos por maceración a partir de las hojas de las primeras tres plantas y con las dos últimas a partir de las cáscaras, usando como solvente acetato de etilo. Se realizó un tamizaje fitoquímico a todos los extractos y particularmente se identificó que Eucalyptus globulus (eucalipto) contiene saponinas, triterpenos, esteroles, terpenos, taninos y fenoles, por lo tanto, se concluyó que los metabolitos especialmente los esteroles, terpenos y flavonoides presentes en A. indica (neem), O. basilicum (albahaca) y Eucalyptus globulus (eucalipto) presentan actividad repelente.12
Por último, Bravo P. (2019) y su estudio “Determinación de la actividad insecticida, repelente, antialimentaria del aceite esencial del Molle (Schinus molle) en trips (F. occidentalis)”.
Objetivo: Evaluar la actividad insecticida, repelente y antialimentaria del aceite esencial de molle sobre F. occidentallis. El aceite se obtuvo por arrastre de vapor a partir de las hojas de molle y se elaboró varias concentraciones; en cajas Petri se colocaron hojas de tomate con 4 gotas del aceite, se adicionaron los insectos y se tapó con Parafilm, pasada las 24 horas se registró el número de insectos vivos y muertos para evaluar la actividad insecticida y el índice de repelencia. El aceite de molle a una concentración del 1 a 2% presentó mayor actividad insecticida que podría estar relacionada al compuesto β-pineno y α-felandreno del molle y al 2 y 4% una repelencia muy alta gracias a los terpenoides. Se concluyó que el aceite de molle presenta actividad insecticida, repelente y antialimentaria sobre F. occidentallis.13
En cuanto a dichas teorías que sustenta nuestra investigación, se definirá a continuación según las variables planteadas:
En primer lugar, Eucalyptus globulus Labill es una especie vegetal perteneciente a la familia Myrtaceae. Es un árbol dioico, perenne de origen australiano y de Tasmania con una altura de hasta 100 metros, su tronco es liso y con un tono claro, sus hojas jóvenes son de color verde pálido a gris azulado y largas, emanan un olor fuerte a “eucalipto”, en el haz y en el envés de
14 las hojas se aprecian manchas de color pardo y glándulas secretoras que contienen al aceite esencial, su copa es globosa y se cultiva en jardines, pero también puede crecer de manera silvestre.14,15
El aceite esencial de eucalipto se obtiene por arrastre de vapor a partir de sus hojas frescas. Es un líquido incoloro o amarillo pálido y tiende a oscurecerse en presencia de luz o cuando es almacenado por un tiempo prolongado; su sabor es medianamente amargo, picante con una sensación de frescura en la boca, además, presenta un olor fuerte debido al compuesto aromático 1,8 cineol.14
Dentro de su composición química las hojas destacan por poseer la mayor cantidad de aceite esencial (1 a 3,5%) con sus metabolitos 1,8-cineol o eucaliptol (70 a 85%), también contiene terpineol, hidrocarburos monoterpenicos (α y β-pineno, p-cimeno, limoneno), mirtenal, carvona, taninos, flavonoides, ácidos fenólicos, triterpenos y algunos sesquiterpenos.16
Las hojas de eucalipto se emplean desde nuestros ancestros, especialmente por vía inhalatoria, sus propiedades son antigripales, expectorante, mucolítico, antiséptico, antiinflamatorio, antiasmático, alivia la faringitis, el dolor de garganta, antipirético, antineurálgico, antidiabético, antioxidante, antimicrobiano; tópicamente se usa como antiulceroso y como repelente.16 En segundo lugar, la especie vegetal Schinus molle L. pertenece a la familia Anacardiaceae, es originario de Sudamérica, exactamente del Perú, pero se ha propagado en Chile, Bolivia, Centroamérica, sur de california, oeste de Texas y en Estados Unidos. Es un árbol monoico de follaje perenne y puede llegar a medir hasta 15 metros de alto y con un diámetro de 25 a 35cm, presenta ramas colgantes y abiertas.17
Presenta una copa redonda que proporciona un poco de sombra, sus hojas son color verde- amarillento, son alternas y miden de 15 a 30cm de largo, su corteza es color marrón y se utiliza como madera, sus flores son muy pequeñas miden 6mm y son amarillas, sus frutos aparecen como racimos que cuelgan del árbol y son de color rojo o rosados, cada fruto presenta una o dos semillas.17
El árbol de molle emana un olor perfumado intenso gracias a la presencia de aceites esenciales y volátiles propias de la planta, por lo que es usado como aromatizante, su resina se utiliza en la
15 fabricación de gomas de mascar, además posee propiedades antiulcerosas, se utiliza como colorante de tejidos, como leña y carbón, sus frutos son comestibles y algunos países lo utilizan en reemplazo de la pimienta, también presenta efecto insecticida (fruto y hojas), repelente, analgésico, antibacterial, antidepresivo, antimicrobiano, antiespasmódico, astringente, balsámico, citotóxico, diurético, expectorante, hipotensivo, purgativo, estomáquico, tónico, uterino, estimulante, etc.18
Los principales componentes del aceite volátil del molle son: monoterpenos (β-pineno, α- pineno, limoneno, β-cariofileno y el sesquiterpeno muurolol), sesquiterpenos. Los compuestos β-pineno, α-pineno serían los responsables del efecto insecticida y antimicrobiano del aceite volátil de molle.19
Los extractos fluidos se obtienen por percolación con alcohol de 70º y posterior concentración a vacío y estandarización hasta 1:1. Generalmente, se realiza en primer lugar una extracción exhaustiva en la que se obtiene el 80% como líquido y luego el resto se concentra a vacío hasta la consistencia de blando y se mezclan estandarizándose hasta 1:1.20
Por otro lado, las lociones son preparados oficinales elaborados por un químico farmacéutico o bajo su supervisión, cuyo procedimiento se encuentra descrito en el Formulario Nacional. Son formas farmacéuticas liquidas o semisólidas dependiendo de su viscosidad a temperatura ambiente, contiene uno o más principios activos y está destinado en forma general para ser administrado sobre la piel.21
Las lociones se clasifican desde varios puntos de vista, por ejemplo, por su efecto repelente. El efecto repelente de una sustancia consiste en que al ser aplicado sobre la piel ahuyenta a los insectos o mosquitos, esto debido a que se une con la parte lipídica de la piel y junto con el CO2
y el vapor de agua generan un ambiente gaseoso, produciendo un efecto desagradable en las terminaciones sensitivas de los insectos y un bloqueo de la comunicación química que utilizan para orientarse.22
Los extractos fluidos de ciertas plantas vegetales con actividad repelente pueden ser incorporadas en una forma farmacéutica tipo loción. Un extracto fluido es aquel que se obtiene por métodos de maceración, percolación o lixiviación y presenta una consistencia liquida,
16 además se usa como solvente etanol u otro con la finalidad de extraer los principios activos de las plantas.20
Tomando en consideración la información presentada se formula el siguiente problema del estudio ¿Presentará actividad repelente una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)?, así mismo, se formula los problemas específicos, ¿Cuál será el porcentaje de repelencia de una loción al 10% elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)?, ¿Cuál será el porcentaje de repelencia de una loción al 20% elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)? y ¿Cuál será el porcentaje de repelencia de una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) comparado con un repelente comercial?
Esta investigación se realiza teniendo en consideración la problemática planteada con respecto a la variedad de enfermedades transmitidas por insectos, generalmente zancudos, lo que conlleva al incremento de los índices de morbilidad y mortalidad de las enfermedades, ante esta situación es necesario encontrar vías alternativas para evitar este tipo de contagios y disminuir estos índices, uno de los mecanismos de prevención son, entre otras cosas el uso de repelentes sobre la piel que ayuden a evitar las picaduras de estos insectos, sin embargo, no todos resultan efectivos o producen alergias por el uso de muchos compuestos químicos en su composición.
La elaboración de un repelente a base de principios activos de origen natural puede ayudar a prevenir la trasmisión de enfermedades por insectos, además de ser un producto natural no tendría los efectos alérgicos que producen los productos que presenta componentes de origen sintético, esto producirá un beneficio a la población sobre todo en las zonas con enfermedades endémicas y elevada proliferación de insectos, como se observa en distintas partes del departamento de Lambayeque, así mismo, servirá para futuras investigaciones con conocimiento nuevo y aportando metodologías y procedimientos que servirán de aporte.
El objetivo general planteado en el presente estudio es Demostrar la actividad repelente de una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle), asimismo, se formula los objetivos específicos, Determinar el porcentaje de repelencia de una loción al 10% elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto)
17 y Schinus molle (molle), Determinar el porcentaje de repelencia de una loción al 20% elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) y Comparar el porcentaje de repelencia de una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) con un repelente comercial.
Asimismo, la hipótesis que dan respuesta a los problemas planteados en el presente estudio son una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) presenta actividad repelente, así mismo, se formula las hipótesis específicas, una loción al 10% elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) presenta alto porcentaje de repelencia, una loción al 20% elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) presenta alto porcentaje de repelencia y el porcentaje de repelencia de una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) es mayor que el repelente comercial.
18 II. MÉTODO
2.1 Tipo y diseño de investigación Tipo de investigación
En cuanto a su finalidad: aplicada, longitudinal y prospectivo.
2.1.1 Diseño de investigación
Es experimental, debido a que se manipulara las variables independientes y luego se analizara el efecto producido sobre la variable dependiente. Se realizará según el siguiente esquema:
G1 X1 O1
G2 + O2
G3 - O3
G: Grupo de Individuos X1: Tratamiento
O1, O2 y O3: Efecto observado.
- Control negativo, sin tratamiento.
+ Control positivo
19 2.2 Operacionalización de las variables
VARIABLE INDEPENDIENTE
DEFINICIÓN
CONCEPTUAL DIMENSIONES INDICADOR UNIDAD DE MEDIDA
Extracto fluido de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)
Concentrado de muestra vegetal que contiene los principios activos de la planta15
Concentración
10%
Porcentaje
20%
VARIABLE DEPENDIENTE
DEFINICIÓN
CONCEPTUAL DIMENSIONES INDICADOR UNIDAD DE MEDIDA
Efecto repelente
Que evita o disminuye la picadura de insectos13
Conteo de Acercamiento de zancudos
0 1 2 3 4
Horas
20 2.3 Población, muestra y muestreo
2.2.1 Población
Eucalyptus globulus y Schinus molle del distrito de Ferreñafe del departamento de Lambayeque.
2.2.2 Muestra
4 Kilos de hojas de Eucalyptus globulus
4 Kilos de hojas de Schinus molle Criterios de inclusión
Muestras identificadas
Muestras frescas y libres de pesticidas
Criterios de exclusión
Muestras con plagas
Muestras secas y en descomposición
Muestras de diferente especie
2.2.3 Muestreo
Se empleará el tipo de muestreo no probabilístico por conveniencia.
2.4 Técnicas e instrumentos de recolección de datos, validez y confiabilidad 2.2.4 Técnicas
Observación: Técnica que permite realizar mediante la visualización de las experimentaciones la recolección de los datos del estudio.23
2.2.5 Instrumentos de recoleccion de datos
Ficha de registros: Elaborado por el investigador, donde se recopilará los datos del acercamiento de los zancudos en intervalos de 1h, 2h, 3h y 4h, para su posterior análisis estadístico.
21 2.5 Procedimiento
2.2.6 Recolección y preparación de la muestra vegetal
Las especies vegetales fueron recolectadas en el distrito de Ferreñafe, departamento de la Lambayeque de manera directa, seleccionándolas de acuerdo a su estado y aspecto, descartando las muestras contaminadas, en mal estado o secas.
La muestra recolectada de cada especie fue de 4 kilos de hojas, las cuales luego de la recolección se colocaron en una tina con lejía al 1% por 15 minutos y luego lavadas con abundante agua.
2.2.7 Obtención del extracto fluido:
Las hojas fueron secadas en estufa a 50°C por 24 horas, removiéndolas cada 8 horas, luego de este proceso fueron trituradas en mortero de 250 ml y posteriormente pulverizadas en un molino de cuchillas y posteriormente tamizadas.
Luego de esto fueron colocadas en un frasco de vidrio ámbar de 4 litros de capacidad y llevadas a maceración por 10 días con alcohol de 70° GL, agitando cada 8 horas para mezclar la muestra.
Trascurrido este periodo de tiempo se llevó a estufa por 24 horas hasta evaporación completa, el extracto obtenido fue pesado y reconstituido con etanol de 70° GL en proporción 1:1 lo que se considerará el extracto fluido
2.2.8 Preparación de la loción repelente:
Composición base para 200 ml
Glicerina 50 mL
Alcohol de 96° GL 50 mL
Extracto fluido de Eucalyptus globulus (eucalipto) 40 mL Extracto fluido de Schinus molle (molle) 40 mL
Metilparabeno sódico 0,2 g
Propilparabeno sódico 0,2 g
Agua destilada c.s.p. 200 mL
22 Se procedió a mezclar la glicerina con el etanol de 96° GL, y se llevó a baño María, luego se incorporó los 2 extractos fluidos, Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) a concentraciones del 10% y 20%, después se incorporó el metilparabeno y el propilparabeno que previamente han sido mezclados con agua destilada suficiente, luego se agregó el agua destilada restante, hasta completar los 200 ml.
2.2.9 Determinación de la actividad repelente:
Se empleó la técnica según Dávila C. (2016),24 modificado para este proceso se utilizó una jaula zancudera, conteniendo una cantidad de 20 mosquitos Aedes aegypti. Para la determinación del efecto repelente del extracto se utilizaron discos de papel filtro de 20cm de diámetro, previamente humedecidos con la loción repelente a base de extracto fluido de eucalipto y molle. Se observó y contó el número de mosquitos que exploran la superficie del disco, el procedimiento se repitió a 1, 2, 3 y 4 horas hasta observar que el repelente ha perdido su efectividad. La capacidad repelente se evaluó en base al grado y porcentaje de repelencia que tiene la loción a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle). Los resultados se anotaron tomando en consideración el número de acercamiento de mosquitos y el tiempo.
2.6 Método de Análisis de datos
Los datos fueron procesados en el programa de Microsoft Office, Excel 2016.
Caracterizados mediante parámetros estadísticos descriptivos: Media Aritmética (X), Desviación Estándar (σ).
2.7 Aspectos éticos
La presente investigación por ser un trabajo in vitro no requiere de protocolos estrictos de ética para el manejo de los individuos o animales en estudio, sin embargo, se seguirán protocolos de buenas prácticas en el manejo de material biocontaminados y residuos sólidos para evitar en todo momento daño al personal manipulador y medio ambiente.25,26
23 RESULTADOS
Tabla N° 01: Comparación en horas del acercamiento de zancudos en estado basal y después de la aplicación de la loción repelente a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 10%.
N° Discos Basal AT 0 AT 1 AT 2 AT 3 AT 4
1 15 1 0 2 3 3
2 16 0 0 1 1 2
3 10 0 2 0 2 2
4 7 2 0 0 1 1
5 12 1 0 1 0 1
6 10 0 0 0 2 2
7 13 0 1 0 1 2
8 9 0 0 1 1 2
9 14 0 0 0 1 1
10 15 2 0 2 3 3
Media x ̄ 12.1 0.6 0.3 0.7 1.5 1.9
Desvest σ 2.8 0.8 0.6 0.8 0.9 0.7
AT 0: aplicación en tiempo 0 AT 3: aplicación 3 horas despues
AT 1: aplicación 1 hora despues AT 4: aplicación 4 horas despues AT 2: plicacióna 2 horas despues
Fuente: elaboración propia
En la tabla N° 01, se observa la cantidad de acercamientos de zancudos, después de la aplicación de la loción repelente a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 10%. Evaluado en base al transcurrir de las horas AT1, AT2, AT3, AT4, comparado con el basal. Se determinó la media y su desviación estándar.
24 Tabla N° 02: Comparación en horas del acercamiento de zancudos en estado basal y después de la aplicación de la loción repelente a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 20%.
N° Discos Basal AT 0 AT 1 AT 2 AT 3 AT 4
1 17 0 0 1 1 1
2 15 0 0 1 1 2
3 9 0 0 0 1 2
4 8 0 0 0 1 2
5 13 0 0 1 1 1
6 8 0 0 0 0 1
7 13 0 0 0 1 1
8 11 1 0 0 0 1
9 14 0 1 1 2 2
10 15 0 0 0 1 1
Media x̄ 12.3 0.1 0.1 0.4 0.9 1.4
Desvest σ 3.0 0.3 0.3 0.5 0.5 0.5
AT 0: aplicación en tiempo 0 AT 3: aplicación 3 horas despues
AT 1: aplicación 1 hora despues AT 4: aplicación 4 horas despues
AT 2: plicacióna 2 horas despues Fuente: elaboración propia
En la tabla N° 02, se observa la cantidad de acercamientos de zancudos, después de la aplicación de la loción repelente a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 20%. Evaluado en base al transcurrir de las horas AT1, AT2, AT3, AT4, comparado con el basal. Se determinó la media y su desviación estándar.
Tabla N° 03: Clasificación según grado de repelencia
Grado de Repelencia %
I 0,1 a 20
II 20,1 a 40
III 40,1 a 60
IV 60,1 a 80
V 80,1 a 100
Fuente: Dávila, C. UNMSM26
25 Tabla N° 04: Comparación del efecto repelente entre los extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 10% y 20% frente a un repelente comercial y control negativo, según número de acercamientos de zancudos.
PROMEDIO EN BASE A 10 DISCOS
MUESTRA x̄AT 0 x̄AT 1 x̄AT 2 x̄AT 3 x̄AT 4 TOTAL PROMEDIO GRADO DE REPELENCIA %
locion a base de Eucalyptus globulus (eucalipto) y
Schinus molle (molle) al 10%. 0.6 0.3 0.7 1.5 1.9 5.0 1.0 III 40,1 - 60
locion a base de Eucalyptus globulus (eucalipto) y
Schinus molle (molle) al 20% 0.1 0.1 0.4 0.9 1.4 2.9 0.6 IV 60,1 - 80
Repelente comercial Premier 0 0 0 0 0 0.0 0.0 V 80,1 - 100
Vaselina liquida 20 20 20 20 20 100.0 20.0 No repele 0
AT 0: aplicación en tiempo 0
AT 3: aplicación 3 horas despues
AT 1: aplicación 1 hora despues
AT 4: aplicación 4 horas despues
AT 2: plicacióna 2 horas despues
Fuente: elaboración propia
En la tabla N° 04, se observa la cantidad de acercamientos de zancudos después de la aplicación de la loción repelente a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 10% y 20%. Evaluado en base al transcurrir de las horas AT1, AT2, AT3, AT4, comparado con una loción repelente comercial y el blanco respectivamente.
26 DISCUSIÓN
El presente trabajo de investigación, se propuso: determinar la actividad repelente de una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle), con el propósito de ayudar a disminuir los casos de picaduras por mosquitos y zancudos que transmiten enfermedades.
En la tabla N°1 y N°2, se muestran los datos obtenidos de la picadura de los zancudos, al realizar la comparación entre el basal y la exposición en diferentes tiempos después de aplicar la loción a base de los extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) a una concentración del 10% y 20% respectivamente, a tiempo 0 (AT0), aplicación 1 hora después (AT1), aplicación 2 horas después (AT2), aplicación 3 horas después (AT3) y aplicación 4 horas después (AT4), se halló que hay una diferencia estadísticamente significativa, pero al momento de comparar los resultados en los diferentes tiempos se encontró que no existe una diferencia estadísticamente significativa, lo cual indica que si existe efecto repelente por parte de la loción al 10% y 20%, además se demostró su estabilidad trascurridas 1, 2, 3 y 4 horas.
Así mismo en la tabla N°4, se comparó el efecto repelente de los extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) a una concentración del 10% y 20%, con el control negativo y con el control positivo respectivamente. Para el control negativo se aplicó vaselina líquida, para el control positivo se empleó un repelente de marca comercial. Los resultados obtenidos de esta comparación demuestran que el repelente de marca comercial logró un porcentaje de repelencia máximo (grado V), seguido por la loción a base de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) a una concentración del 20%, alcanzando un porcentaje de repelencia de grado IV, la loción a base de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) a una concentración del 10%, logró un porcentaje de repelencia de grado III y por último el control negativo tuvo un grado de repelencia nulo.
Haciendo una comparación de nuestros resultados con estudios preliminares, encontramos que:
Según Mogollón A. (2020) el extracto de Schinus molle (molle) a las 24 horas y en una concentración de 0.049%, 0.148% y 0.25% presenta una mortalidad sobre Aedes aegypti de 1.6%, 5% y 8.3% respectivamente y a las 72 horas los mismos extractos mostraron un porcentaje repelencia de 33.3%, 33.3% y 18.3%; estos resultados son parecidos a los nuestros, porque
27 utilizando el mismo tipo de extracción y el mismo solvente se logró comprobar el efecto repelente, a pesar de haber usado concentraciones más bajas del extracto de molle. De igual manera afirma nuestros resultados el estudio de Vílchez A. (2017) quien elaboró al igual que nuestro estudio una loción repelente a base de extracto fluido de Eucalyptus globulus (eucalipto) y A. indica, donde evaluó su efecto según el número de picaduras en distintos tiempos después de aplicar la loción, afirmando su efecto y estabilidad en los tiempos de 1h, 2h, 3h, 4h, y 5h, además menciona en su estudio que los metabolitos secundarios encontrados son los responsables del efecto.
Por otro lado, en el estudio de Bravo P. (2019), evaluó la actividad repelente del aceite del Schinus molle (molle) indicando que en las concentraciones del 1 y 2% se aprecia una elevada actividad repelente contra F. occidentallis, asimismo, su efectividad repelente fue realizada en cajas Petri y con hojas de tomate que se expusieron con 4 gotas del aceite y se adicionaron los insectos y se tapó con Parafilm, pasada las 24 horas se registró el número de insectos vivos y muertos; comparado con nuestro estudio el efecto fue mucho menor, lo cual podría deberse al método de extracción, la técnica usada para comprobar la repelencia, la procedencia de la planta o el tipo de microorganismo utilizado.
Al mismo tiempo Oscco O. (2019), determinó la actividad insecticida y repelente del aceite esencial de los frutos de molle (Schinus molle L.) en gorgojos (Acanthoscelides obtectus) quien demostró que su prueba de repelencia en la concentración de 55µl/µg tiene un tiempo de duración de 4 horas y en la concentración de 60µl/µg es repelente hasta por 96 horas. Este estudio presenta diferencias considerables a nuestro estudio, ellos con muy poca concentración han obtenido índices de repelencia por más tiempo que el de nosotros, podemos inferir la diferencia de su efecto al: tipo de extracción, al microorganismo utilizado, además ellos utilizaron el fruto y el presente estudio sólo utilizó las hojas.
Para concluir, Descamps L., Bizet J., Brustle C. y Sánchez C. (2019), sus resultados son similares a los del presente estudio porque evaluaron el efecto repelente de Eucalyptus globulus y Mentha x piperita en insectos, indicando que Eucalyptus globulus mostró su poder repelente en la concentración de 7% hasta 48 horas, lo que respalda el efecto repelente de nuestra loción al 10%.
28 CONCLUSIONES
1. Se demostró que la loción a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle), tienen efecto repelente frente a la picadura del zancudo Aedes aegypti, además presenta una alta estabilidad al trascurrir del tiempo 1, 2, 3 y 4 horas. Estos resultados nos permite afirmar basados en la teoría que el efecto repelente se debe gracias a los metabolitos secundarios presentes en las especies vegetales estudiadas.
2. Se determinó que la loción a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 10%, tiene un elevado grado de efecto repelente, ya que logro evitar el acercamiento del zancudo Aedes aegypti, este efecto se debe a los constituyentes fitoquímicos que contiene las plantas estudiadas.
3. Se determinó que la loción a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 20%, tiene un elevado grado de efecto repelente, ya que logro evitar el acercamiento del zancudo Aedes aegypti, este efecto se debe a los constituyentes fitoquímicos que contiene las plantas estudiadas.
4. Se comparó el porcentaje de repelencia entre los extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) al 10% y 20% respectivamente con una loción repelente de marca comercial, demostrándose que hay una baja o casi nula diferencia estadística, entre la loción a base de extracto fluido y la loción comercial. Demostrando una alta estabilidad con el trascurrir de las horas.
29 RECOMENDACIONES
1. Realizar futuras investigaciones con el fin de determinar cuantitativamente y químicamente los metabolitos responsables de la actividad repelente de las especies vegetales estudiadas.
2. Evaluar la toxicidad y el nivel de alergenicidad de los extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle).
3. Fomentar el uso de la loción repelente a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) como control natural y de esta manera prevenir el Dengue, Zika y Chicungunya en regiones rurales y urbanas endémicas.
30 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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Laboratorio.pdf
34 ANEXOS
34 Anexo 1: Matriz de consistencia
Autor (es): Bach. CARRASCO TUME, Jovana Marisol / Bach. Vallejos Castillo, Joseluis
Tema: ACTIVIDAD REPELENTE DE UNA LOCIÓN ELABORADA A BASE DE EXTRACTOS FLUIDOS DE Eucalyptus globulus (EUCALIPTO) y Schinus molle (MOLLE)
Problema general Objetivo general Hipótesis General Variables y
dimensiones Metodología
¿Presentará actividad repelente una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)?
Determinar la actividad repelente de una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)
Una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) presenta actividad repelente.
Variable Independiente (x)
X1: Extracto fluido de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)
Dimensión:
Concentración
Variable Dependiente (y)
Efecto repelente Dimensión:
Conteo de acercamientos de zancudos
Alcance de la investigación:
Aplicada
Método de la investigación:
Longitudinal y prospectivo Diseño de la investigación:
Experimental
Población:
Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)
Muestra:
4 Kilos de hojas de Eucalyptus globulus
4 Kilos de hojas de Schinus molle Técnicas de recopilación de información:
Observación
Técnicas de procesamiento de información:
Microsoft Excel, media y desviación estándar Problemas específicos Objetivos específicos Hipótesis específicas
¿Cuál será el porcentaje de repelencia de una loción al 10% elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)?
¿Cuál será el porcentaje de repelencia de una loción al 20% elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)?
¿Cuál será el porcentaje de repelencia de una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) comparado con un repelente comercial ?
Demostrar el porcentaje de repelencia de una loción al 10%
elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)
Determinar el porcentaje de repelencia de una loción al 20%
elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)
Comparar el porcentaje de repelencia de una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) con un repelente comercial.
Una loción al 10% elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) presenta alto porcentaje de repelencia Una loción al 20% elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) presenta alto porcentaje de repelencia El porcentaje de repelencia de una loción elaborada a base de extractos fluidos de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle) es mayor que el repelente comercial.
Fuente: Elaboración propia
35 Anexo 2: Operacionalización de variables
VARIABLE INDEPENDIENTE
DEFINICIÓN
CONCEPTUAL DIMENSIONES INDICADOR UNIDAD DE MEDIDA
Extracto fluido de Eucalyptus globulus (eucalipto) y Schinus molle (molle)
Concentrado de muestra vegetal que contiene los principios activos de la planta15
Concentración
10%
Porcentaje
20%
VARIABLE DEPENDIENTE
DEFINICIÓN
CONCEPTUAL DIMENSIONES INDICADOR UNIDAD DE MEDIDA
Efecto repelente
Que evita o disminuye la picadura de insectos13
Conteo de Acercamiento de zancudos
0 1 2 3 4
Horas
Fuente: Elaboración propia
36 Anexo 3: Ficha de recolección de datos
ACTIVIDAD REPELENTE DE UNA LOCIÓN ELABORADA A BASE DE EXTRACTOS FLUIDOS DE Eucalyptus globulus (EUCALIPTO) y Schinus molle
(MOLLE)
CONTROLES Loción de Eucalyptus globulus
(Eucalipto) y Schinus molle (Molle)
N° Discos Rep. comercial Sin repelente 10% 20%
B T0 T1 T2 T3 T4 B T0 T1 T2 T3 T4 B T0 T1 T2 T3 T4 B T0 T1 T2 T3 T4
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Fuente: Elaboración propia
37 Anexo 4: clasificación taxonómica de Eucalyptus globulus (Eucalipto)
38 Anexo 5: clasificación taxonómica de Schinus molle (Molle)
39 Anexo 6: validación de instrumento (experto N°1)
40 Anexo 7: validación de instrumento (experto N°2)
41 Anexo 8: validación de instrumento (experto N°3)
42 Anexo 9: constancia de laboratorio
43 Anexo 10: testimonio fotográfico
Figura 01: Recolección de Eucalyptus globulus (Eucalipto)
44 Figura 02: Recolección de Schinus molle (Molle)
45 Figura 03 y 04: Clasificación y procesamiento de las especies vegetales
46 Figura 05 y 06: Secado de las muestras vegetales
47 Figura 07y 08: Molienda y tamizado de la muestra vegetal
48 Figura 09, 10 y 11: Preparación de los extractos fluidos
49 Figura 12: Elaboración de la loción repelente
Figura 13: insectario para vectores Aedes aegypti adultos
