Informe N°3 - Lípidos

21 

Texto completo

(1)

Informe N°3: Reconocimiento de

Informe N°3: Reconocimiento de

Lípidos

Lípidos

Muestra: Aceite de Oliva marca

Muestra: Aceite de Oliva marca

Banquete

Banquete

Alumnas:

Alumnas: Silvana Silvana AbarzaAbarza Lucila Vargas Lucila Vargas Daniela Zeballos Daniela Zeballos Curso: 382 Curso: 382

Asignatura: Laboratorio de Bioquímica Asignatura: Laboratorio de Bioquímica

Grupo: N°3

(2)

Índice

Índice

Página Página 1.- 1.- Resumen__________Resumen____________________________________________________________________________________ __________ 33 2.- 2.- IntroduccióIntroducción________________n_________________________________________________________________________________ ___ 44 3.-

3.- Parte Parte experimental_experimental____________________________________________________________________________ _____________ 77 4.-

4.- Resultados_____Resultados_________________________________________________________________________________ ________________ 1010 5.-

5.- Discusión________Discusión__________________________________________________________________________________ ______________ 1010 6.-

6.- Conclusiones Conclusiones y y recomendacionesrecomendaciones_______________________________________________________________ ___ 1111 7.- 7.- Tablas__________Tablas_______________________________________________________________________________________ _____________ 1212 8.- 8.- Figuras________Figuras____________________________________________________________________________________ ________________ 1414 9.- 9.- CromatogramasCromatogramas________________________________________________________________________________ ______________ 1515 10

10 BibliografíBibliografía______________a___________________________________________________________________________________ _____ 1717 11

11 Apéndice________Apéndice_____________________________________________________________________________________ _______________ 1818 12

(3)

Resumen

Resumen

En el presente informe se da cuenta de lo realizado en el laboratorio de bioquímica, En el presente informe se da cuenta de lo realizado en el laboratorio de bioquímica, este

este consiste en aconsiste en analizar una mnalizar una muestra de aceiuestra de aceite de olivate de oliva marca Banquete con el fin demarca Banquete con el fin de determinar las propiedades de los

determinar las propiedades de los lípidoslípidos mediante análisis cualitativos y mediante análisis cualitativos y cuantitativos.cuantitativos. Primero

Primero dedeterterminminamamos os líplípididos os sapsapononifiificabcables les en en la la muemuestrstra, a, lo lo cuacual l nos nos dio dio unun resultado positivo ya que se pudo observar una buena separación y distinción de las resultado positivo ya que se pudo observar una buena separación y distinción de las capas, glicerina más agua en la capa inferior (capa clara), jabón en la capa del medio capas, glicerina más agua en la capa inferior (capa clara), jabón en la capa del medio y en la capa superior el aceite que no reaccionó (con NaOH) al procedimiento.

y en la capa superior el aceite que no reaccionó (con NaOH) al procedimiento.

Luego se tomo otra cantidad de aceite y se sometió a un largo proceso, por el método Luego se tomo otra cantidad de aceite y se sometió a un largo proceso, por el método de esterificación de acidos grasos con metanol-ácido sulfúrico, para extraer así los de esterificación de acidos grasos con metanol-ácido sulfúrico, para extraer así los ácidos grasos libres. De estos se

ácidos grasos libres. De estos se recuperaronrecuperaron 30,13%30,13%

Posteriormente se realizó la obtención de esteres metílicos mediante dos

Posteriormente se realizó la obtención de esteres metílicos mediante dos métodos: por métodos: por  este

esterificrificacióación n utilutilizanizando do metametanolnol-ácid-ácido o sulfsulfúricúrico o y y por por transtransteriterificacficación ión utilutilizanizandodo me

metantanol-ol-hidhidróxróxido ido de de potpotasiasio o 2N2N. . En En el el priprimermero o se se recrecupeuperóró 92,38%92,38% de esteresde esteres metílicos dand

metílicos dando un o un rendimiento drendimiento de la esterificace la esterificación con respeión con respecto al valor teóricto al valor teórico deco de 87,15 %

87,15 %

Los acidos grasos recuperados anteriormen

Los acidos grasos recuperados anteriormente se te se llevaron a un análisis por llevaron a un análisis por  cromatografía de gase

cromatografía de gases s para determinar la compara determinar la composición y los tipos de ácidoposición y los tipos de ácidos grasoss grasos que se encontraban en la muestra de aceite de oliva banquete.

que se encontraban en la muestra de aceite de oliva banquete. Encontrando los siguientes ácidos

Encontrando los siguientes ácidos grasos:grasos: 1.- Ácido Linoleico 1.- Ácido Linoleico 2.- Ácido Oleico 2.- Ácido Oleico 3.- Ácido Palmítico 3.- Ácido Palmítico

(4)

Introducción

Introducción

-Lípidos:

-Lípidos:

Los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por carbono e Los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por carbono e hidrógeno y generalmente también oxígeno; pero en porcentajes mucho más bajos. hidrógeno y generalmente también oxígeno; pero en porcentajes mucho más bajos.  Además pued

 Además pueden contener tambien contener también fósforo, nitrógeén fósforo, nitrógeno y azufre.no y azufre.

Es un grupo de sustancias muy heterogéneas que sólo tienen en común estas dos Es un grupo de sustancias muy heterogéneas que sólo tienen en común estas dos características:

características: 1.

1. SoSon inn insosolulublbles ees en agn aguaua 2.

2. Son soluSon solubles en disobles en disolvenlventes orgántes orgánicosicos, como éter, clo, como éter, cloroforroformo, bencmo, benceno, etc.eno, etc. Un

Una a cacaracracterterístística ica básbásicica a de de lolos s líplípididos, os, y y de de la la que que derderivivan an sus sus priprincincipalpaleses propiedades biológicas es la hidrofobicidad. La baja solubilidad de los lípidos se debe propiedades biológicas es la hidrofobicidad. La baja solubilidad de los lípidos se debe a que

a que su estructura química es su estructura química es fundamentalfundamentalmente hidrocarbonada (alifática, alicíclica omente hidrocarbonada (alifática, alicíclica o aromática), con gran cantidad de enlaces C-H y C-C. La naturaleza de estos enlaces aromática), con gran cantidad de enlaces C-H y C-C. La naturaleza de estos enlaces es 100% covalente y su momento dipolar es

es 100% covalente y su momento dipolar es mínimo. El agua, al ser mínimo. El agua, al ser una molécula muyuna molécula muy po

polalar, r, cocon n grgran an fafacicililidadad d papara ra foformrmar ar pupuenentetes s de de hihidrdrógógeneno, o, no no es es cacapapaz z dede inte

interacciraccionar con onar con estas molécuestas moléculas. las. En En prespresenciencia a de de molémoléculaculas s liplipídicaídicas, s, el el aguaguaa adopta en torno a ellas una estructura muy ordenada que maximiza las interacciones adopta en torno a ellas una estructura muy ordenada que maximiza las interacciones entre las propias moléculas de agua, forzando a la molécula hidrofóbica al interior de entre las propias moléculas de agua, forzando a la molécula hidrofóbica al interior de una estructura en forma de jaula, que

una estructura en forma de jaula, que también reduce la movilidad del lípido. Todo ellotambién reduce la movilidad del lípido. Todo ello supone una configuración de

supone una configuración de baja entropía, que baja entropía, que resulta energéticamente desfavorablresulta energéticamente desfavorable.e. Esta disminución de entropía es mínima si las moléculas lipídicas se agregan entre sí, Esta disminución de entropía es mínima si las moléculas lipídicas se agregan entre sí, e interaccionan mediante fuerzas de corto alcance, como las fuerzas de Van der  e interaccionan mediante fuerzas de corto alcance, como las fuerzas de Van der  Waals. Este fenómeno recibe el nombre de efecto hidrofóbico.

Waals. Este fenómeno recibe el nombre de efecto hidrofóbico.

Los lípidos son constituyentes importantes de la alimentación (aceites, manteca, Los lípidos son constituyentes importantes de la alimentación (aceites, manteca, yema de huevo), representan una importante fuente de energía y de almacenamiento, yema de huevo), representan una importante fuente de energía y de almacenamiento, fun

funciocionan nan comcomo o aiaislaslantentes s tértérmicmicos, os, comcompoponennentes tes estestrucructurturaleales s de de memmembrabranasnas bio

biolólógicgicas, as, son son preprecurcursorsores es de de horhormonmonas as (se(sexuaxualeles, s, corcorticticalales)es), , áciácidos dos bibilialiaresres,, vitaminas etc.

vitaminas etc. -Ácidos grasos: -Ácidos grasos:

Los ácidos grasos son moléculas formadas por una larga cadena hidrocarbonada de Los ácidos grasos son moléculas formadas por una larga cadena hidrocarbonada de tipo lineal, y con un número par de átomos de carbono. Tienen en un extremo de la tipo lineal, y con un número par de átomos de carbono. Tienen en un extremo de la cadena un grupo carboxilo (-COOH). Estos

cadena un grupo carboxilo (-COOH). Estos son los componentes orgánicos (pequeñasson los componentes orgánicos (pequeñas moléculas que se unen para formar largas cadenas) de los lípidos que proporcionan moléculas que se unen para formar largas cadenas) de los lípidos que proporcionan energía al cuerpo y permiten el desarrollo de tejidos.

energía al cuerpo y permiten el desarrollo de tejidos. Se conocen unos 70 ácidos grasos

Se conocen unos 70 ácidos grasos que se pueden clasificar en dos grupos:que se pueden clasificar en dos grupos:

•• Los ácidos grasos saturados sólo tienen enlaces simples entre los átomos deLos ácidos grasos saturados sólo tienen enlaces simples entre los átomos de

carbono. Son ejemplos de este tipo de ácidos el mirístico (14C);el palmítico carbono. Son ejemplos de este tipo de ácidos el mirístico (14C);el palmítico (16C) y el esteárico (18C) .

(16C) y el esteárico (18C) .

•• Los Los ácácidoidos s gragrasos sos ininsatsaturaurados dos tietienen nen ununo o o o varvarioios s enenlaclaces es dobdobleles s en en susu

cadena y sus moléculas presentan codos, con cambios de dirección en los cadena y sus moléculas presentan codos, con cambios de dirección en los lugares dónde aparece un doble enlace. Son

lugares dónde aparece un doble enlace. Son ejemplos el oléico (18C, un ejemplos el oléico (18C, un dobledoble enlace) y el linoleíco (18C y

(5)

-Aceite de oliva: -Aceite de oliva:

El aceite de oliva es un

El aceite de oliva es un aceite vegetalaceite vegetal de uso principalmentede uso principalmente culinarioculinario que se extraeque se extrae del fruto recién recolectado del

del fruto recién recolectado del olivoolivo (Olea europaea) denominada(Olea europaea) denominada oliva o aceitunaoliva o aceituna.. *Composición de los aceites de oliva

*Composición de los aceites de oliva El

El rerendindimiemiento nto de de aceaceite ite de de la la aceaceituituna na es es muy alto, muy alto, depdependendieiendo ndo de de lala variedad, el porcentaje puede oscilar entre un 25 y un 30% de aceite en cada aceituna. variedad, el porcentaje puede oscilar entre un 25 y un 30% de aceite en cada aceituna. Las aceitunas poseen un

Las aceitunas poseen un glucósidoglucósido que le proporciona unque le proporciona un sabor amargosabor amargo y que debey que debe eliminarse mediante un macerado adecuado, en el caso del aceite de oliva este eliminarse mediante un macerado adecuado, en el caso del aceite de oliva este compuesto se elimina de forma natural durante el prensado en la almazara.

compuesto se elimina de forma natural durante el prensado en la almazara. De los componentes químicos que posee el aceite son en su mayoría

De los componentes químicos que posee el aceite son en su mayoría ácidosácidos grasos

grasos, como son el, como son el ácido oleicoácido oleico (casi un 75%), siendo el siguiente el(casi un 75%), siendo el siguiente el ácido palmítico,ácido palmítico, ácido

ácido linoleiclinoleicoo. . El El aceaceite de ite de ololiva posee una iva posee una cancantidtidad ad modmoderaerada da dede VitaVitamina mina EE (principalmente α-Tocoferol) y a pesar de poseer una baja cantidad de γ-Tocoferol el (principalmente α-Tocoferol) y a pesar de poseer una baja cantidad de γ-Tocoferol el aceite de oliva es estable.

aceite de oliva es estable.[[88]] Los componentes menores del aceite no se eliminanLos componentes menores del aceite no se eliminan

debido a que rara vez es refinado:

debido a que rara vez es refinado: escualenosescualenos,, esteroles,esteroles, alcoholes triterpenoides,alcoholes triterpenoides, clorofila

clorofila,, carotenoidescarotenoides ..

No obstante se pueden resumir que existen en el aceite de oliva tres grandes grupos No obstante se pueden resumir que existen en el aceite de oliva tres grandes grupos de sustancias, a saber:

de sustancias, a saber:

•• Fracción saponificableFracción saponificable: comprende el 98-99 % en el total de su peso. Está: comprende el 98-99 % en el total de su peso. Está

formada por los

formada por los triglicéridos,triglicéridos, ácidos grasos libres yácidos grasos libres y fosfolípidosfosfolípidos. Esta fracción. Esta fracción está formada por un 75,5 % de ácido oleico (C18:1), un 11,5 % de ácido está formada por un 75,5 % de ácido oleico (C18:1), un 11,5 % de ácido palmítico (C16:0) y por un 7,5 % de ácido linoléico (C18:2), además de otros palmítico (C16:0) y por un 7,5 % de ácido linoléico (C18:2), además de otros ácidos grasos en concentración de trazas, como

ácidos grasos en concentración de trazas, como caféicocaféico,, margáricomargárico,, esteárico,esteárico, etc.

etc.

•• Fracción Fracción insaponinsaponificablificablee: : ccononststiitutuye ye eel l 11,5 ,5 % % een n eel l tototatal l de de ssu u ppeesoso.. Co

Comprmprendende e los los hidhidrocrocarbarburouros s comcomo o elel hexenalhexenal, , rerespspononsasablble e dedell gustogusto herbáceo de un aceite de

herbáceo de un aceite de aromaaroma frutado,frutado, alcoholesalcoholes, esteroles y, esteroles y tocoferolestocoferoles..

•• OtrosOtros componentes menorescomponentes menores::

--PolifenolesPolifenoles: relacionados con el sabor del aceite: relacionados con el sabor del aceite

--Pigmentos clorofílicosPigmentos clorofílicos yy carotenoidescarotenoides : relacionados con el color que puede: relacionados con el color que puede poseer el aceite.

poseer el aceite.

-Compuestos volátiles: responsables del

-Compuestos volátiles: responsables del aromaaroma del aceite.del aceite. -Saponificación:

-Saponificación:

Saponificación es una

Saponificación es una reacción químicareacción química entre unentre un ácido grasoácido graso (o un(o un lípidolípido saponificab

saponificable, portador de residuos de ácidos grasos) y le, portador de residuos de ácidos grasos) y una base ouna base o álcaliálcali, en la que se, en la que se obtiene como principal producto la sal de dicho ácido y la base. Estos compuestos obtiene como principal producto la sal de dicho ácido y la base. Estos compuestos tienen la particularidad de ser antipáticos, es decir tienen una parte

tienen la particularidad de ser antipáticos, es decir tienen una parte polar polar y otra apolar y otra apolar  (o no polar), con lo cual pueden interactuar con sustancias de propiedades dispares. (o no polar), con lo cual pueden interactuar con sustancias de propiedades dispares. Por ejemplo, los

Por ejemplo, los  jabones jabones son sales de ácidos grasos y metales alcalinos que seson sales de ácidos grasos y metales alcalinos que se obtienen mediante

(6)

-Esterificación: -Esterificación:

Esterificació

Esterificación, es n, es la reacción entre un alcohol y la reacción entre un alcohol y un ácido, en presencia de ácidoun ácido, en presencia de ácido sulfúrico como

sulfúrico como catalizador catalizador , y mediante la cual se obtienen un éster y agua. Es la, y mediante la cual se obtienen un éster y agua. Es la reacción inversa de la

reacción inversa de la saponificaciónsaponificación .. Un

Un ácidácido o carbcarboxílioxílicoco y y unun alcoholalcohol forforman man unun éster éster  en en ununa a rereacaccición ón dede est

estererifiificaccacióión n cuacuando ndo se se cacalielientantan n junjuntos tos en en prepresensencia cia de de un un catcatalializadzador or áciácido,do, gen

generaeralmlmentente e el el áciácido do sulsulfúrfúricoico. . La La estesterierificficaciación ón es es unauna reacreacción ción de de sustsustituciituciónón nucleófila en la que el agente nucleofílico es el alcohol, de manera que la molécula de nucleófila en la que el agente nucleofílico es el alcohol, de manera que la molécula de agua

agua se origina por unión del grupo hidróxido, -OH, del ácido y el hidrógeno, H, delse origina por unión del grupo hidróxido, -OH, del ácido y el hidrógeno, H, del alcohol. La extensión de la esterificación es mayor para un alcohol primario que para alcohol. La extensión de la esterificación es mayor para un alcohol primario que para un alcohol secundario y para éste mayor

un alcohol secundario y para éste mayor que para un alcohol terciario.que para un alcohol terciario.

Como se trata de una reacción reversible, la concentración de éster se puede Como se trata de una reacción reversible, la concentración de éster se puede aumentar incrementando las concentracion

aumentar incrementando las concentraciones del es del ácido o el ácido o el alcohol, o disminuyendo laalcohol, o disminuyendo la concentración del agua formada mediante un agente deshidratante.

concentración del agua formada mediante un agente deshidratante. -Transesterificación:

-Transesterificación: La

La transesterificacióntransesterificación permite transformar un éster en otro sin necesidad depermite transformar un éster en otro sin necesidad de pasar por el

pasar por el ácido carboxílico correspondienácido carboxílico correspondiente.te. Hay dos tipos de reacciones:

Hay dos tipos de reacciones:

•• En medio ácido: se utiliza un alcohol en medio ácido. El En medio ácido: se utiliza un alcohol en medio ácido. El grupo R–Ogrupo R–O-- del alcoholdel alcohol

actúa como nucleófilo y ataca al carbono del éster, desprendiéndose el grupo actúa como nucleófilo y ataca al carbono del éster, desprendiéndose el grupo O–R, formando un nuevo éster y

O–R, formando un nuevo éster y un nuevo alcohol.un nuevo alcohol.

•• En medio básico: se utiliza un alcohol en medio básico. ElEn medio básico: se utiliza un alcohol en medio básico. El --O-H ataca alO-H ataca al

carbono del ácido, formando una especie intermedia muy inestable. El grupo carbono del ácido, formando una especie intermedia muy inestable. El grupo O–R se separa, y se forma un ácido carboxílico que es rápidamente atacado O–R se separa, y se forma un ácido carboxílico que es rápidamente atacado por el grupo Et–O

por el grupo Et–O--formando el nuevo éster.formando el nuevo éster.

Cabe destacar que el proceso análogo a la transesterificación es la hidrólisis. Cabe destacar que el proceso análogo a la transesterificación es la hidrólisis.

(7)

Parte experimental

Parte experimental

Materiales: Materiales: Saponificación: Saponificación:

-- Baño María- MecheroBaño María- Mechero

-- Gradillas con tubos de ensayo (3)Gradillas con tubos de ensayo (3)

-- Vaso de precipitado de 250 mlVaso de precipitado de 250 ml

--  Aceite vegetal (100 ml) Aceite vegetal (100 ml)

-- Solución de Sudan III en Solución de Sudan III en gotariogotario

-- Solución de NaOH 20%Solución de NaOH 20%

-- Éter de petróleo o Éter de petróleo o cloroformocloroformo

Esterificación ácidos grasos: Esterificación ácidos grasos:

-- Metanol técnicoMetanol técnico

--  Ácido clorhídrico 4 N Ácido clorhídrico 4 N

-- Solución saturada de cloruro de sodioSolución saturada de cloruro de sodio

-- Naranja de metilo, indicador Naranja de metilo, indicador 

Esteres metílicos: Esteres metílicos:

•• Metanol anhidro.Metanol anhidro. ••  Ácido sulfúri Ácido sulfúrico.co.

•• Solución saturada de cloruro de sodioSolución saturada de cloruro de sodio •• Rojo de metilo, indicador Rojo de metilo, indicador 

•• Éter de petróleoÉter de petróleo

•• Sulfato de sodio anhidro.Sulfato de sodio anhidro. •• Nitrógeno.Nitrógeno.

(8)

Procedimiento Saponificación Procedimiento Saponificación::

1.

1. ColColocar en uocar en un tubo dn tubo de ensae ensayo 2cc de ayo 2cc de aceitceite vegee vegetal y 2cc dtal y 2cc de una soe una solucilución deón de hidróxido sódico al 20%.

hidróxido sódico al 20%. 2.

2. AgitAgitar enérar enérgicagicamente y comente y colocalocar el tubo al br el tubo al baño Maaño María de 20 a 30 miría de 20 a 30 minutosnutos..

3. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la

3. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior inferior  clara, que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada; clara, que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada; lala superior 

superior amarilla de aceite no utilizado, y laamarilla de aceite no utilizado, y la intermedia,intermedia, de aspecto grumoso, que esde aspecto grumoso, que es el jabón formado.

el jabón formado.

Procedimiento Esterificación ácidos grasos: Procedimiento Esterificación ácidos grasos:

a)

a) Se pesSe pesan aproan aproximadamente ximadamente 2,5 grs2,5 grs. De . De aceite aceite vegetal, evegetal, en matran matraz de z de reflujo.reflujo. b)

b) Se agreSe agregan 20 ml de solgan 20 ml de solucióución agua: metn agua: metanolanol-hid-hidróxiróxido de sodido de sodio al 50% p/v y seo al 50% p/v y se agita.

agita. c)

c) Se reflSe refluja durauja durante 60 minnte 60 minutosutos. Se debe toma. Se debe tomar las precar las precauciouciones necenes necesarisarias paraas para tener la seguridad de que la reacción de saponificación es completa.

tener la seguridad de que la reacción de saponificación es completa. d)

d) Si Si fufuesese e nenececesasaririo o dedetetermrmininar ar la la mamateteriria a ininsasapoponinifificacablble, e, se se trtrasasvavasisija ja aa embudo de decantación, el contenido del matraz de reflujo, para extraer dicha embudo de decantación, el contenido del matraz de reflujo, para extraer dicha materia, de acuerdo al método de extracción de

materia, de acuerdo al método de extracción de la materia insaponificablela materia insaponificable.. e)

e) A los jaboA los jabones, que cones, que contientienen o se han extranen o se han extraído la mateído la materia insaria insaponiponificabficable, sele, se agregan 50 ml de agua destilada y gotas del indicador naranja de metilo.

agregan 50 ml de agua destilada y gotas del indicador naranja de metilo. f)

f) Se aciSe acididififica con ácica con ácido clodo clorhrhídídririco 4 co 4 N, pocN, poco o a a popoco y co y cocon n agagititacacióión, hasn, hastata permanencia del color rosado.

permanencia del color rosado. g)

g) Se dejSe deja decaa decantar, hntar, hasta sasta separeparacióación clarn clara de doa de dos fasess fases.. h)

h) LuLuegego o se se exextrtraeaen n lolos s ácácididos os grgrasasos os cocon n 2x2x10 10 mlml. . de de ététer er de de pepetrtrólóleoeo,, desechando la fase acuosa inferior.

desechando la fase acuosa inferior. i)

i) Se evSe evaporapora el soa el solvenlvente en ate en atmósftmósfera dera de nitre nitrógenógeno y a bao y a baño maño maría. Sría. Se verie verificanfican los ácidos grasos con papel tornasol.

los ácidos grasos con papel tornasol.  j)

(9)

Procedimiento ésteres metílicos: Procedimiento ésteres metílicos:

a)

a) Se pesaSe pesan n apraproxioximamadamdamenente 0,5 te 0,5 grsgrs. . de ácidde ácidos grasos grasos de os de aceaceite vegite vegetaetal, enl, en matraz de reflujo.

matraz de reflujo. b)

b) Se agreSe agregagan n 10 ml de 10 ml de memetantanol anhiol anhidro y dro y 1 ml 1 ml de ácide ácido sulfdo sulfúriúrico concco concenentratradodo,, gota a gota, con

gota a gota, con agitación.agitación. c)

c) Se llevSe lleva a ebullia a ebullición y se reflución y se refluja duranja durante 30 minutte 30 minutos, en placos, en placa eléctra eléctrica a bañoica a baño maría.

maría. d)

d) Se enfrSe enfría a ía a temtempeperatratura ambura ambieiente y nte y se transe transfisfiere a ere a emembubudo de do de decdecantantaciación,ón, agregando luego 30 ml de solución saturada de cloruro de sodio.

agregando luego 30 ml de solución saturada de cloruro de sodio. e)

e) Se extrSe extraen loaen los esters esteres metíles metílicos coicos con 2 x 10 ml. de éten 2 x 10 ml. de éter de petrór de petróleo.leo. f)

f) Se laSe lava el exva el extractracto de étto de éter con per con porciorciones dones de ague agua desta destiladilada hasta a hasta que el que el aguaagua de lavado de la reacción de

de lavado de la reacción de neutra, que se verifica con neutra, que se verifica con indicadoindicador rojo de r rojo de metilo.metilo. g)

g) Se seca el exSe seca el extracto etracto etéretéreo con sulfao con sulfato de sodito de sodio anhio anhidro, se fildro, se filtra y se evaptra y se evapora elora el solvente sobre atmósfera de nitrógeno a baño maría.

solvente sobre atmósfera de nitrógeno a baño maría. h)

h) Se enSe enfría a fría a temptemperatueratura amra ambienbiente y ste y se pese pesa.a.

Cromatografía Cromatografía

La muestra obtenida después del proceso de

La muestra obtenida después del proceso de esterificacioesterificacion de n de acidos grasos y tambiénacidos grasos y también la

la obobtentenida ida popor r tratranstnsterierificficacaciónión, , fuefueron ron llellevadvadas as a a crocromatmatogografrafía ía de de gasgases es paparara identificar los compuestos grasos de esta.

identificar los compuestos grasos de esta. Condicio

Condiciones nes cromatograficacromatograficas:s:

 Se uso la Se uso la columna BPX- 70: 70% columna BPX- 70: 70% de ciano de ciano y 30% y 30% de polidimetilsiloxanode polidimetilsiloxano 

 Propano 150°C x 2 minPropano 150°C x 2 min 

 Paper: 10°C/minPaper: 10°C/min 

 T° final: 210°CT° final: 210°C

El cyano es susceptible a

El cyano es susceptible a dañarse con oxígenos, humedad o HCl en comparación adañarse con oxígenos, humedad o HCl en comparación a otras fases de silicona. Rango de

otras fases de silicona. Rango de temperatura de funcionamietemperatura de funcionamiento: subambient a 25 nto: subambient a 25 °° C. Los esteres metílicos sales de acuerdo a P.M en el caso de

C. Los esteres metílicos sales de acuerdo a P.M en el caso de los ácidos grasoslos ácidos grasos saturados, y en los

saturados, y en los insaturados influye la polaridadinsaturados influye la polaridad. Los . Los insaturados salen despuésinsaturados salen después que los saturados del mismo peso molecular.

(10)

Resultados

Resultados

En el primer procedimiento realizado, se verifico que el aceite que se

En el primer procedimiento realizado, se verifico que el aceite que se tiene de muestratiene de muestra es saponificable. Debido a que una vez que se agrego el alcáli (NaOH) y luego de es saponificable. Debido a que una vez que se agrego el alcáli (NaOH) y luego de esperar 30 minutos nos dio un

esperar 30 minutos nos dio un resultado positivo, jabónresultado positivo, jabón Con respecto a

Con respecto a los resultadolos resultados obtenidos en las demás obtenidos en las demás experiencias experiencias realizadas, comos realizadas, como lo son: la esterificacion de ácidos grasos con metanol-acido sulfúrico, la obtención de lo son: la esterificacion de ácidos grasos con metanol-acido sulfúrico, la obtención de est

estereres es metmetíliílicos cos por por estesterierificficaciacion on usausando ndo metmetanoanol-ál-ácicido do y y la la tratranstnsterierificficaciaciónón utilizando metanol-hidroxido de potasio 2N para la obtención de esteres metílicos se utilizando metanol-hidroxido de potasio 2N para la obtención de esteres metílicos se ven reflejados en la tabla N°1

ven reflejados en la tabla N°1 presente en la sección tablas de presente en la sección tablas de este informe.este informe.

Discusión

Discusión

Con respecto a los rendimientos obtenidos experimentalmente se puede notar que el Con respecto a los rendimientos obtenidos experimentalmente se puede notar que el rendimiento del método basado en esterificación de los ácidos grasos es mejor que el rendimiento del método basado en esterificación de los ácidos grasos es mejor que el rendimiento observado en la recuperación de los ácidos grasos, lo que nos lleva a rendimiento observado en la recuperación de los ácidos grasos, lo que nos lleva a decir que es recomendable usar la esterificación de los ácidos grasos para luego decir que es recomendable usar la esterificación de los ácidos grasos para luego verificar cuantitativamente los esteres en cromatografía gaseosa, que seria un buen verificar cuantitativamente los esteres en cromatografía gaseosa, que seria un buen método y de exactitud mucho mayor

método y de exactitud mucho mayor que la de recuperación de ácidos grasos.que la de recuperación de ácidos grasos.

De los componentes químicos que posee el aceite de oliva son en su mayoría ácidos De los componentes químicos que posee el aceite de oliva son en su mayoría ácidos grasos, como son el ácido oleico (casi un 75%), siendo el siguiente el ácido palmítico, grasos, como son el ácido oleico (casi un 75%), siendo el siguiente el ácido palmítico, ácido linoleico.

ácido linoleico.

Como se puede observar en el primer cromatograma aparecieron 3 peak, los cuales Como se puede observar en el primer cromatograma aparecieron 3 peak, los cuales corresponden a los tres principales ácidos grasos que contiene el aceite de oliva. corresponden a los tres principales ácidos grasos que contiene el aceite de oliva. Luego, en el siguiente cromatograma de transterificacion, aparecieron 5 compuestos, Luego, en el siguiente cromatograma de transterificacion, aparecieron 5 compuestos, pero solo se consideran tres de ellos que gráficamente son muy parecidos al anterior  pero solo se consideran tres de ellos que gráficamente son muy parecidos al anterior  cromatograma.

cromatograma. Co

Como mo no no hubhubo o patpatrón rón parpara a dedefinfinir ir quque e aciacido do gragraso so apaparearecició ó priprimermero, o, segsegún ún lolo averiguado el orden sería:

averiguado el orden sería: 1.- Ácido Linoleico 1.- Ácido Linoleico 2.- Ácido Oleico 2.- Ácido Oleico 3.- Ácido Palmítico 3.- Ácido Palmítico

Este orden viene dado por el grado de saturación y la longitud de la cadena del resto Este orden viene dado por el grado de saturación y la longitud de la cadena del resto acilo lo determinan esencialmente las propiedades de la grasa: cuanto más corta e acilo lo determinan esencialmente las propiedades de la grasa: cuanto más corta e insaturada es la cadena del resto acilo, más fluida y volátil es la grasa.

insaturada es la cadena del resto acilo, más fluida y volátil es la grasa.

Los ácidos grasos insaturados tienen uno o varios enlaces dobles en su cadena y sus Los ácidos grasos insaturados tienen uno o varios enlaces dobles en su cadena y sus moléculas presentan codos, con cambios de dirección en los lugares dónde aparece moléculas presentan codos, con cambios de dirección en los lugares dónde aparece un doble enlace, lo que le da el grado de instauración.

(11)

El ácido linoleico posee una configuración (18:2Δ9,12 [donde el 18 es el número de El ácido linoleico posee una configuración (18:2Δ9,12 [donde el 18 es el número de átomos de carbono, el 2 número de dobles enlaces y las cifras

átomos de carbono, el 2 número de dobles enlaces y las cifras sucesivas al Δ “delta” lasucesivas al Δ “delta” la posición de los dobles enlaces]) es el precursor de numerosos derivados, que se posición de los dobles enlaces]) es el precursor de numerosos derivados, que se forman en reacciones de elongación, de saturación o ambas.

forman en reacciones de elongación, de saturación o ambas.  Así,

 Así, el el ácido ácido oleico oleico se se designa designa 18:1(9); 18:1(9); el el número número 18 18 nos nos indica indica el el número número dede carbonos, el 1 tras los dos puntos, el número de dobles enlaces y el 9

carbonos, el 1 tras los dos puntos, el número de dobles enlaces y el 9 entre paréntesisentre paréntesis que este doble enlace comienza en el 9º carbono (está entre el 9º y el 10º), contando que este doble enlace comienza en el 9º carbono (está entre el 9º y el 10º), contando desde el extremo –COOH,

desde el extremo –COOH,

El ácido palmítico es un ácido graso saturado de cadena larga, formado por dieciséis El ácido palmítico es un ácido graso saturado de cadena larga, formado por dieciséis átomos de carbono (C16:0). Es un sólido blanco que se licúa a unos 63,1 °C. Su átomos de carbono (C16:0). Es un sólido blanco que se licúa a unos 63,1 °C. Su fórmula química es CH3(CH2)14COOH.

fórmula química es CH3(CH2)14COOH.

Conclusión

Conclusión

Columna BPX-70 longitud 25mm, diámetro interno entre 0,25mm, espesor de la fase Columna BPX-70 longitud 25mm, diámetro interno entre 0,25mm, espesor de la fase entre 0,25 um,

entre 0,25 um, fase estacionafase estacionaria-cianoproria-cianopropilsiliconapilsilicona. Según los catálo. Según los catálogos Supelco ygos Supelco y Chormpack

Chormpack las columnas CP. Sil 88, BPX-70las columnas CP. Sil 88, BPX-70, SP-2340 (entre otras) son simil, SP-2340 (entre otras) son similares. Por ares. Por  otra parte entendemos que el

otra parte entendemos que el orden de salida de orden de salida de los componentes en el cromatogramalos componentes en el cromatograma no

no dedebe be infinfluiluir r en en su su detdetermermininaciación ón cuacuantintitattativaiva, , siesiendndo o lo lo funfundamdamentental al quque e lala separación de los componentes sea nítida,

separación de los componentes sea nítida, indepenindependientemente de la dientemente de la marca comercialmarca comercial de la columna utilizada.

de la columna utilizada.

70% de polidimetilsiloxano, 30% ciano, esta es una columna polar equivalente a 70% de polidimetilsiloxano, 30% ciano, esta es una columna polar equivalente a SPB-2330

2330 Los ester

Los esteres es memetíltílicoicos s salsalen en de de acuacuerderdo o al al gragrado do de de satsaturauracióción n y y la la lonlongigitud tud de de lala cadena del resto acilo determinan esencialmente las propiedades de la grasa: cuanto cadena del resto acilo determinan esencialmente las propiedades de la grasa: cuanto más corta e insaturada es la cadena del resto acilo, más fluida y volátil es la grasa. más corta e insaturada es la cadena del resto acilo, más fluida y volátil es la grasa. Los ácidos grasos insaturados son esenciales para el correcto funcionamiento de Los ácidos grasos insaturados son esenciales para el correcto funcionamiento de nuestro cuerpo y deben ser aportados en cantidades suficientes con los alimentos. Su nuestro cuerpo y deben ser aportados en cantidades suficientes con los alimentos. Su falta se asocia con las enfermedades coronarias y un elevado nivel de colesterol.

falta se asocia con las enfermedades coronarias y un elevado nivel de colesterol.

Recomendaciones: Recomendaciones:

- Contar con un equipo prep

- Contar con un equipo preparativo de técnicas arativo de técnicas modernas y de mayor capmodernas y de mayor capacidadacidad - Aumentar la sección y/o la longitud de la columna

- Aumentar la sección y/o la longitud de la columna

- Utilizar trampas de condensación con flujo turbulento de gas portador con gradiente - Utilizar trampas de condensación con flujo turbulento de gas portador con gradiente de temperatura o condensadores electroestáticos, para aumentar la eficiencia de la de temperatura o condensadores electroestáticos, para aumentar la eficiencia de la recuperación.

recuperación.

- Optimizar, además de presión y

(12)

Tablas

Tablas

Tabla N°1: Resultados de la experiencia. Tabla N°1: Resultados de la experiencia. P

Prroocceessoo MMaassa a iinniicciiaall MMaassa a rreeccuuppeerraaddaa % % RReeccuuppeerraacciióónn Obtención de Obtención de ácidos grasos ácidos grasos 22,,55110 0 ggrr.. 00,,77556 6 ggrr.. 3300,,1133%% Obtención de Obtención de esteres metílicos esteres metílicos 00,,77556 6 ggrr.. 00,,6699886 6 ggrr.. 9922,,3388%% E Esstteerriiffiiccaacciióónn 00,,77556 6 ggrr.. 00,,6699886 6 ggrr.. 8877,,1155%% Tabla N°2:

Tabla N°2: Ácidos grasos en  Ácidos grasos en la muestra usanla muestra usando tablas Lildo tablas Lilia masson (% esteria masson (% estereses metílicos)

metílicos)

 Ácidos Grasos

 Ácidos Grasos Ac. OlivaAc. Oliva Ac. MaravillaAc. Maravilla C

C1166::0 0 AAcc. . PPaallmmííttiiccoo 1122,,8 8 66,,88 C

C1166::0 0 AAcc. . EEsstteeáárriiccoo 22,,1 1 44,,22 C

C1166::1 1 AAcc. . PPaallmmiittoolleeiiccoo 11,,7 7 ---C C1188::1 1 AAcc. . OOlleeiiccoo 6688,,77 1199,,77 C C1188::2 2 nn--6 6 AAcc. . LLiinnoolleeiiccoo 1133,,99 6699,,33 C C1188::3 3 nn--3 3 AAcc. . LLiinnoolléénniiccoo 00,,88

---Tabla N°3: Datos de la columna utilizada Tabla N°3: Datos de la columna utilizada

(13)

V

Vaarriiaabbllee

V

Vaalloor

r m

meeddiiddoo

LLaarrggo

o

((LL))

225

5

m

m

F

Faasse

e eessttaacciioonnaarriiaa

B

BP

PX

X--7700

II..D

D..

00..2255m

mm

m

E

Essppeessoor

r ddeel

l ffiillm

m

00..225

5 nnm

m

T

Teem

mppeerraattuurra

a iinniicciiaall

11550

0 °°C

C

Tiempo

Tiempo inicial

inicial

2,00

2,00 min

min

R

Raattee

55,,0

0

ddeegg//m

miinn

T

Teem

mppeerraattuurra

a ffiinnaall

22110

0 °°C

C

T

Tiieem

mppo

o ffiinnaall

55,,0

0 m

miinn

Tabla N°4: Datos de inyección de esteres

Tabla N°4: Datos de inyección de esteres metílicos obtenidos por esterificaciónmetílicos obtenidos por esterificación Esterificación

Esterificación

IInnyyeecccciióónn 1 1 uull T

Teemmppeerraattuurra a iinnyyeeccttoor r BB 222200ººCC T

(14)

Figuras

Figuras

Figura N°1: Reacción de saponificación Figura N°1: Reacción de saponificación

Figura N°2: Reacción de esterificación Figura N°2: Reacción de esterificación

CH CH22--CCOOOO--RR RR--CCOOOO--CCHH33 CH CH22-OH-OH     CH-COO-R CH-COO-R!! + + 3 3 CHCH

33OHOH ←←    →OH OH     −−→ RR!!-COO-CH-COO-CH33 CH-OHCH-OH

   

CH

CH22--CCOOOO--RR” ” RR””-COO-CH-COO-CH33 CHCH22-OH-OH

Grasa

Grasa metanol metanol mezcla mezcla de de ésteres ésteres glicerolglicerol Metílicos

Metílicos Figura N°3: Reacción de transesterificación

Figura N°3: Reacción de transesterificación

Figura N°4: Aceite de oliva Banquete. Muestra. Figura N°4: Aceite de oliva Banquete. Muestra.

(15)

Cromatogramas

Cromatogramas

Cromatogram

(16)

Cromatogram

(17)

Bibliografía

Bibliografía

1.- Retamales, J. (1980) Estudio comparativo de métodos de obtención de ácidos 1.- Retamales, J. (1980) Estudio comparativo de métodos de obtención de ácidos grasos y esteres metilicos de ácidos grasos

grasos y esteres metilicos de ácidos grasos a partir de aceites vegetalesa partir de aceites vegetales 2.- Lilia Masson (1985) materias grasas de consumo habitual y

2.- Lilia Masson (1985) materias grasas de consumo habitual y potencial en chilepotencial en chile 3.- (2007) Reglamento Sanitario de los Alimentos

3.- (2007) Reglamento Sanitario de los Alimentos 4.- Página web,

4.- Página web, www.wikipedia.orgwww.wikipedia.org . LA última vez que esta pagina web se modifico. LA última vez que esta pagina web se modifico fue el

(18)

Apéndice

Apéndice

•• Cálculo de recuperación de ácidos grasos.Cálculo de recuperación de ácidos grasos.

Masa inicial de aceite oliva y maravilla (m

Masa inicial de aceite oliva y maravilla (m11): 2,510 gr.): 2,510 gr.

Masa de ácidos grasos obtenidos (m

Masa de ácidos grasos obtenidos (m22): 0,7562 gr.): 0,7562 gr.

% R % Raa = = mm22 x 100x 100 m m11 % R % Raa = 0,7562= 0,7562 x 100x 100 2,510 2,510 % R % Raa= 30,13%= 30,13%

•• Cálculo de recuperación de esteres metilicos.Cálculo de recuperación de esteres metilicos.

Masa inicial de aceite oliva y maravilla (m

Masa inicial de aceite oliva y maravilla (m11): 0,7562 gr.): 0,7562 gr.

Masa de ácidos grasos obtenidos: 0,6986 gr. Masa de ácidos grasos obtenidos: 0,6986 gr.

% E % Emm = = mm22 x 100x 100 m m11 % E % Emm = 0,6986= 0,6986 x 100x 100 0,7562 0,7562 % E % Emm= 92,38%= 92,38%

(19)

•• Cálculo de rendimiento de la esterificación con respecto al valor teórico.Cálculo de rendimiento de la esterificación con respecto al valor teórico. % Rendimiento: % Rendimiento: 1 1 2 2 * * 06 06 ,, 1 1 mm m m x 100 x 100 %

% RendimieRendimiento: nto: 0,6986 0,6986 x x 100100 1,06 x 0,7562

1,06 x 0,7562

%

(20)

 Anexo  Anexo Según el RSA

Según el RSA::

Párrafo I. Disposiciones Generales Párrafo I. Disposiciones Generales Artícu

Artículo lo 247247.- Aceites y grasas son los triglicéridos de ácidos grasos comercialmente.- Aceites y grasas son los triglicéridos de ácidos grasos comercialmente puros, obtenidos de materias primas sanas y limpias, libres de productos nocivos puros, obtenidos de materias primas sanas y limpias, libres de productos nocivos derivados de su cultivo o manejo, o de los procesos de elaboración.

derivados de su cultivo o manejo, o de los procesos de elaboración. Artícu

Artículo lo 248248.- El contenido de humedad y materias volátiles, no deberá ser mayor a.- El contenido de humedad y materias volátiles, no deberá ser mayor a 0,2% en los aceites comestibles y no más de 0,5% en las mantecas o grasas. No 0,2% en los aceites comestibles y no más de 0,5% en las mantecas o grasas. No deberán contener más de 0,25% de acidez libre, expresada como ácido oléico y no deberán contener más de 0,25% de acidez libre, expresada como ácido oléico y no más de 100 ppm de jabón. A la fecha de elaboración, el límite máximo de peróxidos más de 100 ppm de jabón. A la fecha de elaboración, el límite máximo de peróxidos será de 2,5 meq de oxígeno peróxido/kg. de grasa y 10 meq de oxígeno peróxido/kg. será de 2,5 meq de oxígeno peróxido/kg. de grasa y 10 meq de oxígeno peróxido/kg. de grasa en su período de vida útil y almacenados de acuerdo a lo indicado en la de grasa en su período de vida útil y almacenados de acuerdo a lo indicado en la rotulación

rotulación. . No deberán presentar No deberán presentar sus características organolépticas alteradas.sus características organolépticas alteradas.

Se exceptúan de esta disposición, respecto a la acidez libre, el aceite de oliva y la Se exceptúan de esta disposición, respecto a la acidez libre, el aceite de oliva y la manteca de cacao, cuya acidez máxima será de 1,5% expresada en ácido oléico y la manteca de cacao, cuya acidez máxima será de 1,5% expresada en ácido oléico y la manteca de cerdo y grasa bovina cuya acidez máxima será 0,8% expresado en ácido manteca de cerdo y grasa bovina cuya acidez máxima será 0,8% expresado en ácido oléico.

oléico.

 Asimismo, se

 Asimismo, se exceptúa de exceptúa de esta disposición, respecto esta disposición, respecto del índice del índice de peróxido, de peróxido, el aceiteel aceite de oliva extra virgen, cuyo límite máximo será de 20 meq. de oxígeno/k de aceite.

de oliva extra virgen, cuyo límite máximo será de 20 meq. de oxígeno/k de aceite. Artículo 249

Artículo 249.- No se consideran aptos para el consumo los alimentos grasos que.- No se consideran aptos para el consumo los alimentos grasos que estén rancios, alterados química y/o microbiológicamente, que contengan materias estén rancios, alterados química y/o microbiológicamente, que contengan materias extrañas, restos de tejidos vegetales o animales, restos de solventes, aceites de extrañas, restos de tejidos vegetales o animales, restos de solventes, aceites de origen mineral y aditivos no autorizados por el presente reglamento.

origen mineral y aditivos no autorizados por el presente reglamento. Artículo 250

Artículo 250.- La distribución y comercialización de los aceites, mantecas y grasas.- La distribución y comercialización de los aceites, mantecas y grasas co

comemeststibibleles, s, dedebeberá rá rerealalizizararse se en en susus s enenvavaseses s ororigigininalaleses, , prprohohibibiéiéndndosose e susu fraccionamiento en el punto de venta. Esta exigencia se hará efectiva 12 meses fraccionamiento en el punto de venta. Esta exigencia se hará efectiva 12 meses después de la entrada en vigencia del

después de la entrada en vigencia del presente reglamentopresente reglamento..

Párrafo II. De los Aceites y Mantecas o Grasas de Origen Vegetal Párrafo II. De los Aceites y Mantecas o Grasas de Origen Vegetal Art

Artícuículo lo 251251.- .- AceAceiteites s comcomesestibtibles les de de oriorigen gen vegvegetaetal l son son lolos s obobtentenidoidos s de de loslos siguientes frutos o sus partes o de semillas oleaginosas: algodón, cártamo, girasol o siguientes frutos o sus partes o de semillas oleaginosas: algodón, cártamo, girasol o maravilla, gérmen de maíz, maní o cacahuate, oliva, pepa de uva, raps o colza, maravilla, gérmen de maíz, maní o cacahuate, oliva, pepa de uva, raps o colza, sésamo o ajonjolí, soja o soya, avellana chilena, arroz, pepa de tomate, germen de sésamo o ajonjolí, soja o soya, avellana chilena, arroz, pepa de tomate, germen de trigo, linaza, mosqueta y otros autorizados por el Ministerio de Salud, los que deberán trigo, linaza, mosqueta y otros autorizados por el Ministerio de Salud, los que deberán ser de consistencia fluida a la

ser de consistencia fluida a la temperatura de 15°-C.temperatura de 15°-C. Artículo 252

Artículo 252.- Los aceites no deberán contener un porcentaje de ácido erúcico mayor .- Los aceites no deberán contener un porcentaje de ácido erúcico mayor  de 5%.

de 5%.

Artículo 253

Artículo 253.- Mantecas o grasas comestibles de origen vegetal, son los alimentos.- Mantecas o grasas comestibles de origen vegetal, son los alimentos grasos vegetales de consistencia sólida o semisólida a la temperatura de 15°-C, grasos vegetales de consistencia sólida o semisólida a la temperatura de 15°-C, obt

obtenienidas das de de lolos s sigsiguieuiententes s frufrutostos, , sus sus parpartes tes o o semsemillillas: as: caccacaoao, , coccoco, o, coccoco o dedell Paraguay, babassú, palma, palmiste y otros autorizados por el Ministerio de

(21)

Artícu

Artículo lo 254254.- Las constantes físicas y químicas de los aceites y mantecas de origen.- Las constantes físicas y químicas de los aceites y mantecas de origen vegetal deberán corresponder a las indicadas en la tabla I. La composición de ácidos vegetal deberán corresponder a las indicadas en la tabla I. La composición de ácidos grasos determinados por cromatografía gas - líquido, señaladas en la tabla III, se grasos determinados por cromatografía gas - líquido, señaladas en la tabla III, se considerará

Figure

Actualización...

Referencias

Actualización...

Related subjects :