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Prevalencia, incremento y patogenicidad de Clostridium perfringens) y Clostridium paraperfringens en el tracto intestinal de los infantes ovinos

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Academic year: 2020

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(1)PREVALENCIA, INCREMENTO Y PATOGENICIDAD DE. Clostridium perfringens Y Clostridium paraperfringens EN EL TRACTO INTESTINAL DE LOS INFANTES OVINOS* Germán Rodríguez M.* Manuel J. Torres A.. 1.. INTRODUCCIÓN En. Colombia. no. se. han. realizado. trabajos tendientes a identificar las dife rentes cepas de Clostridium perfringens (wilchii) presentes en la flora bacteriana' normal del intestino de los ovinos. Este. grupo de gérmenes puede originar en dichos animales así como en otras espe cies, enfermedades de tipo disentería y enterotoxemia, cuando se presentan alte. raciones en el manejo y la alimentación, causando mortalidad. para la prevalencia e incidencia de infec ción del C. perfringens en el intestino de. ovinos infantes y destetos; y también caracterizar las cepas del C.perfringens presentes en el tracto intestinal ovino buscando algunos patrones fisiológicos y bioquímicos de aplicación práctica, loca lizando cualitativa y cuantitativamente el C. perfringens en las diferentes porciones del sistema digestivo ovino.. alta tanto en ani. males jóvenes como en adultos (Jubby Kennedy, 1974, Marsh, 1969; Smith y Holdeman, 1968).. Los objetivos de este trabajo fueron: evaluar condiciones demográficas, sanita. rias y de manejo en el aprisco y su posi ble causalidad asociativa o predisponente. 2. REVISIÓN DE LITERATURA. La disentería y enterotoxemia de los animales domésticos, en especial de los ovinos, son enfermedades causadas por diferentes grupos toxigénicos de C. perfringens,habitantes del suelo y de las. Contribución del Programa para Graduados en Ciencias Agrarias UIM-ICA, y del Programa de Microbiología (División de Ciencias Veterinarias). Adaptación y resumen de la Tesis de Grado presentada por el autor principal al Programa para Graduados, como requisito parcial para optar al título de Magister Scientiae.. Respectivamente: Médico Veterinario, M.S., Programa de Microbiología, LIMV, Apartado Aéreo 29743, Bogotá; y Médico Veterinario Ph.D., Profesor Titular, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Nacional , Bogotá.. Revista ICA - Bogotá (Colombia) Vol. XII - No. 2 - pp. 151-163 Junio 1977 - CK. ISSN 0018-894. 151.

(2) vías digestivas de los animales (Buchanam y Gibbons, 1974; Davis et al, 1973 y Smith y Holdeman, 1968). El C. perfringens se encuentra clasifi cado. en la última edición del Manual. Bergey (Buchanam y Gibbons, 1974). El mencionado manual reporta un tipo de Clostridium, similar en varias de sus características al C. perfringens llamado. C. paraperfringens. El C. perfringens se ha dividido en cinco tipos toxigénicos A, B, C, D y E en base a una mayor produc ción de toxinas letales, necrosantes y hemolíticas, que pueden ser demostradas cuando. las. células. se. encuentran. en. estado de crecimiento, en cultivos de. pocas horas o varias horas de incubación (Katich, 1973).. (Blood y Handerson, 1965; Jubb y Kennedy, 1974; y Marsh, 1969). La técnica de las asas intestinales liga das en corderos (Hauschild et al., 1968 y 1970) ha sido utilizada para estudiar la enteropatogenicidad del C.perfringens.. 3. MATERIALES Y MÉTODOS Para establecer los recuentos bacte. riales de C. perfringens en el intestino de los ovinos se tomaron al azar 100 semo. vientes al tiempo del nacimiento de las razas Criollo, Corriendalle, Rambouillet, Romney Marsh Mestizo, Romney Marsh Puro, en la granja de San Jorge, Cundinamarca, a los cuales se les tomaron muestras directamente del recto en seis. Hacia 1967 se descubrió un factor enterotóxico asociado únicamente a los. procesos de esporulación y se encontró que induce a la acumulación de líquido en asas intestinales de conejo, eritema en piel de cobayo, produce vasodilatación e hiperemia de los capilares e incrementa la permeabilidad capilar. Dicho factor mostró una toxicidad específica de 2.000 dosis letal ratón 50% (DLR50); es una proteína homogénea libre de ácido nucleico, lípidos y con un peso molecu lar de 36.000 (Duncan y Strong, 1969; Genigeorgis et al., 1973; Hauschild, 1971; Hauschild y Hilsheimer, 1971; Nulo, 1971 y Skjelkvale y Duncan, 1975).. oportunidades, con intervalos de treinta días. Se tomaron datos de la finca y del animal, en formularios especiales. Para el recuento de C. perfringens y C. paraperfringens se utilizó el Medio Bási. co Perfringens (MBP) (Alvarez et al., 1975 y Hauschild et al, 1974) con yema de huevo y se sembraron diluciones de las muestras 1:5 y 1:10, empleando el sistema de "emparedado" (Torres et al, 1969) y calentando las muestras previa. mente a 80°C por 10 minutos. La con firmación bioquímica se efectuó en el medio Lactosa Motilidad Nitrato (LMN) (Alvarez et al, 1975) según el esquema de Torres (1974). Se estudió la capaci. dad de producir hemolisis a y |3 en el El C. perfringens ocasiona en los ovi nos una variedad de enfermedades que. medio Agar Sangre Ovina (ASO), y la toxigenicidad de las cepas aisladas por. afectan tanto a los animales recién naci. serotoxi-neutralización en ratones suizos. dos como los adultos. El C.perfringens. de 30 gramos, vía intraperitoneal (Torres et al, 1975).. tipo A origina casos naturales de diarrea en corderos y se ha citado como agente causal de enfermedades hemolíticas en. Los datos obtenidos en la evaluación. las ovejas de Australia, en corderos de California y de ciertas enteritis hemorrágicas de corderos en el Reino Unido. de las condiciones de manejo, sanitarias y demográficas y los datos de los re cuentos se tabularon y procesaron por. 152.

(3) medio de programas BMD (Dixon, 1973) en un computador IBM 360/44. Se sacri ficaron seis ovinos jóvenes para localizar cualitativa y cuantitativamente el C. per fringens en las 21 porciones del tracto gastro-intestinal. Las muestras se proce. un diseño longitudinal-cohorte. El sexo como variable clasificatoria, con respecto al resto de variables demográficas dio. saron sin calentamiento previo a 80°C.. Cuando se utilizó el recuento de esporos de C. perfringens y C. paraperfringens (Ta bla 1), hubo una significancia estadística entre los sexos y entre las razas. Por lo. Se intervinieron quirúrgicamente cua tro ovinos jóvenes y en cada asa de intestino delgado ligado, se inoculó una. cepa de C. perfringens suspendida en un medio de esporulación (Torres, 1974). Se sacrificaron los animales a las 6, 12, 18 y 24 horas.. 4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN. La edad. promedio. en la primera. muestra fue de 2,52 días, de los cuales. ausencia de significancia (P ) 0,4), aun que individualmente el peso indicó un. ligero grado discriminatorio (P ( 0,25).. tanto, los infantes ovinos muestreados,. tenían más altos recuentos de C. perfrin gens y C paraperfringens entre los machos y menores en la raza criolla. De aquí. que podría hipotetizarse que la diferen cia en recuentos de D. perfringens y C. paraperfringensentre machos y hembras se relacionó con el mejor equipamiento de los machos para empezar su vida post-uterina, incluyendo quizás un más rápido paso a la alimentación extraláctea.. 23 eran animales menores de un día. El. peso promedio de los animales en el primer muestreo fue de 3,6 kg y al sex to muestreo fue de 19,7 kg. Por análisis estadístico discriminatorio. (Armitage, 1971 y Dixon, 1973) en la población muestreada, se encontró ho mogeneidad demográfica dando lugar a. Tal hipótesis queda bien sustentada al observar que a mayor edad y cuando la diferencia en peso es menos marcada, los •recuentos de C.perfringens y C. paraperfringensen heces se nivelan tanto para machos como para hembras. Los criollos por rusticidad serían menos susceptibles a la infección.. TABLA 1. Capacidad de clasificación de las variables bacteriológicas (C. perfringens en heces) con res pecto a sexo y a raza, en 100 infantes ovinos muestreados. Habilidad clasificatoria. Raza. Media. Desv ¡ación estándar. Criollo. 85,71. 1,63. 0,33. Corriedale. 33,33. 1,84. 0,50. Rambouillet. 71,42. 1,67. 0,50. Romney Marsh Mestizo. 35,13. 1,78. 0,49. Romney Marsh Puro. 50,50. 1,73. 0,43. Machos. 87,09. 1.80. 0,46. Hembras. 63,15. 1,72. 0,50. Sexo. 153.

(4) vas de parásitos en el animal traen serias consecuencias en el estado de salud y crean posiblemente áreas propicias den tro del sistema digestivo para la virulentación de microorganismos potencialmente patógenos, en las porciones donde se presentan laceraciones de tejidos. Al quinto mes la población estudiada estaba llegando al climax cuantitativo de C. perfringens (Figura 2).. Se encontró un aumento sensible de. parásitos del tipo Moniezia, Trichuris, Trichostrongylidos y ooquistes de Eimeria, a partir del segundo mes de edad. Hacia e! quinto mes, se tetectó presencia de Fasciola hepática y el incremento del parasitismo fue marcado a tal punto que se hizo indispensable un tratamiento con antiparasiticidas para evitar pérdidas en el grupo cohorte. Las infestaciones masi. 80. 60. s. <3. 40-. o. Z. 20-. 0,0. 1,0. Muestra. 2,0 1. 0,0. 1,0. 2,0. Muestra 2. 1,0. 2,0. Muestra. Log. 10. FIGURA 1. Histogramas obtenidos por computador perfringens.. 154. 3. 1,0. 2,0. Muestra 4. 1,0. 2,0. 3,0. Muestra 5. 1,5. 2,5. Muestra 6. de los recuentos. (BMD-05D). de los diferentes. recuentos de C..

(5) Ü. O. I. 1,00 Log. 10. 1,47. 1,77. I. I. 1,95 2,07 2,17. del número de días. FIGURA 2. Gráfico de la curva de regresión entre los datos medios para cada muestra, contra el Log del número de días correspondientes al muestreo.. 10. 155.

(6) En el estudio de las características. Los resultados de los casos (animal-. cultivo) se presentan en la Tabla 2, para los diferentes muéstreos. Analizando el. individuales de las colonias, se presenta. ron. diferentes tamaños de halos que. primer muestreo, se presentó un porcen. correspondieron a diferentes grados de. taje bajo (20%) de casos positivos. Se. hemolisis (Figura 3), por lo tanto com. muestrearon en este grupo, 23 animales. patibles con C. perfringens y C. paraper. menores de un día que no presentaron. fringens. ningún tipo de crecimiento bacteriano (Figura 1) indicando así, que los anima. aparecen eminentemente tres. categorías de producción de toxina alfa, relacionada con el mayor halo de leciti-. les nacen libres de C. perfringens y C. paraperfringens y que adquieren en su flora intestinal dicho microorganismo al. nasa y su mayor precipitación y las mayores zonas de hemolisis alfa. encontrar éste su habitat en el sistema. El 20% de las cepas estudiadas por la prueba de sero-toxi-neutralización reve laron que existe un 64% de cepas co rrespondientes a C. perfringens tipo A, un 4% a cepas de C. perfringens diferen tes al tipo A, y un 32% a cepas pertene. digestivo de los ovinos tan pronto na cen. El incremento de C. perfringens y. C. paraperfringens en la flora intestinal de los ovinos, se realiza a partir del primer día de nacidos y continúa au mentando, dependiendo de la alimenta. ción, manejo y estado de salud animal (Figura 2). En el medio LMN las reac ciones de lactosa (ácido +, gas +) motilidad (-) son suficientes y de altísima confiabilidad para la prueba confirmati va de C. perfringens y C paraperfrin gens.. cientes al C.paraperfringens,presentes en el sistema digestivo ovino. Al efectuar el seguimiento prospec. tivo de una población cohorte de ovinos infantes en relación al C. perfringens y. C. paraperfringens, se encontró en el primer muestreo, como se aprecia en los. TABLA 2. Resultado de las pruebas presuntiva en Medio Básico Perfringens + Yema de Huevo y confir mativa en Lactosa Motilidad Nitrato. M. Muestreo. B. P. H2S. Lecitinasa. No. +. sembrada en NC*. B. -. 20/100. 20/100. 2. 96/100. 4/100. 100/100. 3. 97/100. 3/100. 100/100. 4. 100/100. 100/100. 5. 100/100. 100/100. 6. 100/100. 100/100. 80/100. -. -. -. -. -. P. Nitrato (+)**. 1:5. 15/20. 1:5. 77/100. 1:10. 80/100. 1:10. 76/100. 1:10. 75/100. 1:10. 81/100. No crecimiento. ** Realizado solamente en casos de (AC +, Gas +) y M (-) en LMN.. 156. Lactosa (AC +, G +) Motilidad (-),. M. +. 1. *. LMN. Dilución.

(7) MBP C/15. ASO. ©. 0. C/16. Bordes ondulados. mucoide, mediana.. Redonda, mucoide. pequeña, lisa.. C/19. 6/3. ®. ®-. ®. 0. 6/9. 76,. 0. 3A. 6A. _5>. f (í) j V J. Bordes ondulados. mucoide, mediano.. Redonda, mucoide mediana, lisa.. Redonda, mucoide mediana, lisa. Redonda, mucoide. 0. mediana, lisa.. Redonda, mucoide mediana, lisa.. 7A. 8A. Bordes ondulados. mucoide, mediana.. Redonda, mucoide, pequeña, lisa.. O. 4A. Bordes ondulados. mucoide, mediana.. (*>. ®. Bordes ondulados. mucoide, mediana.. FIGURA 3. Relación directa de las características individuales de las colonias en los medios MBPyASO.. 157.

(8) histogramas de las distribuciones (Figura 2) una evidente distribución de log10 Poisson, en que el "evento raro", es la presencia de C. perfringens y C. paraper fringens. A continuación la prevalencia en los muéstreos siguientes fue de 100%, con mediana de 1,5, 2,0, 2,0, 2,5, evidentemente crecientes.. En los parámetros de tendencia cen tral para el universo de datos por mues treo, se pudo observar una tendencia al incremento linear log-log que pudo co rroborarse al granear los datos medios para cada muestreo contra el log)0 del número de días correspondientes (Figu ra 2). La pendiente de la línea de regre. alteraron los tejidos intestinales. Las lesiones microscópicas se reflejaron en la mucosa. intestinal. donde. ocasionaron. descamaciones epiteliales (Figura 4), necrosis de las vellosidades, congestión y hemorragia con incremento de la celularidad. En la submucosa se presentó ede ma y congestión. En la muscular y capa adventicia se presentaron ligeros incre mentos celulares.. sión es estadísticamente distinta de 0 a. una significancia de p < 0,005 El au mento en recuentos intestinales en ovi. nos infantes y destetos está seguido por más de un factor y quizás por muchos más.. En el sistema digestivo se presentan diferentes concentraciones de C. perfrin gens y C. paraperfringens encontrándose en las porciones posteriores, especial. mente a partir del ciego, las concentra ciones más altas (log10 ^ 3). Dichos mi croorganismos son no solo habitantes normales de las últimas porciones intes tinales, sino que se encuentran en todo el tracto digestivo inlcuyendo boca, esó fago, hígado y vesícula biliar y que a partir de la primera porción del intesti no delgado (duodeno) se presenta un incremento de la población bacteriana llegando a presentarse su climax en las últimas porciones (colon). Mediante el empleo de la técnica quirúrgico-histológica se analizaron 80 ce pas diferentes con el objeto de evaluar las lesiones producidas en las asas intes tinales ovinas, encontrándose que un 75% de las cepas produjeron lesiones macro y microscópicas y un 25% no 158. FIGURA 4.. Caso experimental. Intestino ligado de oveja 24 horas post-inoculación; Necrosis de coagulación del epitelio de revestimiento (N): nótese la picnosis nuclear (P) y pérdida del con torno celular (C). Descamación epi telial de una vellosidad intestinal(D). Hematoxilina-Eosina 2.000 x..

(9) La técnica quirúrgica-histológica del asa intestinal ligada en los ovinos, es una. técnica complementaria para evaluar el poder toxigénico de cepas de C perfrin gens aisladas en el campo, y descartar aquellas cepas que bioquímicamente tienen un comportamiento similar, pero que toxigénicamente no son compatibles tanto con C perfringens cuanto con C paraperfringens.. 5.. CONCLUSIONES. Y. RECOMENDACIONES. asas intestinales de las especies estudia das, son de esencial valor diagnóstico. para la tipificación de cepas de C per fringens, su diferenciación con C. para perfringens, siendo las de C. paraper fringens atóxicas y apatógenas por defi nición (Dixon, 1973), y para la confir mación definitiva de patogenicidad en las especies en cuestión. Se recomienda la tipificación de los aislamientos de C. perfringens de tipos distintos de A; el seguimiento de pobla ciones. ovinas. adultas. en. condiciones. similares a las de este trabajo en busca La infección de C. perfringens y C. paraperfringens y su presencia en la flora intestinal ovina, se inicia a partir del momento de nacer (X Log10 esporos =. O/gramos) y continúa aumentando en asociación con el sexo (log10 esporos: machos 1,80; hembras 1,72) la raza (logio esporos criollos — 1,63) el peso (incremento machos —16,3 kg; hembras = 15,9 kg) y quizá con la alimentación, el estado de salud, el manejo de los animales y otras variables no bien defini das. Los X log] o esporos subieron a 2,41 al cabo de los seis meses del estu dio. Es la primera vez que se informa sobre C paraperfringens en ovinos. El C. perfringens y el C. paraperfringens colo nizan la boca (posiblemente como conse cuencia de la rumiación) hasta el recto. La estratificación anatómica descendente mostró un marcado incremento cuanti. tativo en la misma dirección, alcanzando. recuentos de C perfringens y C paraper. fringens (vegetativos) hasta log10^3, en las porciones inferiores. En el tracto intestinal de los ovinos, existe un 64%. de cepas de C. perfringens tipo A, 4% de. de la confirmación de variables asociadas. a C perfringens y su patogenicidad; la evaluación. de. la situación. de. entero. toxemia ovina en Colombia y el desarro llo, de ser necesaria, de una vacunación sistemática prospectiva.. 6. RESUMEN. Se evaluaron las condiciones demográ ficas con respecto a la prevalencia de Clostridium perfringens (welchii) (CP) y Clostridium paraperfringens (CPP) en el intestino de los ovinos infantes y jóve nes, estableciendo recuentos de esporos de CP y CPP. Se localizó cualitativa y cuantitativamente CP y CPP en las dife rentes porciones del sistema digestivo. Se reprodujeron quirúrgica e histológica mente las lesiones producidas por CP y CPP. Se muestrearon (heces) seis veces (cada 30 días) 100 ovinos de cinco razas en la granja San Jorge, municipio de Soacha (clima frío), departamento de Cundinamarca, Colombia, y se trabajó en el Laboratorio de Investigaciones. cepas de C. perfringens diferentes al tipo. Médicas Veterinarias, ambos del Institu. A y un 32% de cepas de C paraperfrin. to Colombiano Agropecuario (ICA).. gens.. Los datos de esporo-recuentos (log]0) La técnica de sero-toxi-neutralización. se analizaron estadísticamente mediante. en ratones y quirúrgico-histológica en. programas de la serie BMD, implemen159.

(10) tados en el computador IBM 360/44 de la Universidad Nacional de Colombia. El. Se estudiaron en condiciones de estabu. lación y luego se sacrificaron seis ovinos. sexo fue la única variable que dio indica. jóvenes aparentemente normales, para. ción de discriminación al ser más altos. localizar cualitativa y cuantitativamente. en los machos (1,80 vs. 1,72) que a su vez registraron los pesos más altos. De los 600 casos procesados en el Medio Básico Perfringens (MBP) con yema de huevo (exitosamente aplicado por prime. a CP y CPP. Se encontró que CP y CPP. ra vez a especímenes animales (ovinos) en este trabajo, 520 (87%) crecieron en dicho medio y 404 fueron sometidos a pruebas confirmativas (51%) con reac ciones positivas en el medio Lactosa Motilidad Nitrato (LMN). La prueba de los nitratos fue más sensible en el medio. Agar Nitrato tradicional que en LMN. De todas maneras su utilización se encon. colonizan la boca (posiblemente asocia dos a la rumiación) hasta el recto. La estratificación descendente mostró un marcado incremento en la misma direc. ción alcanzando recuentos de CP y CPP. vegetativos hasta de log10^3 en porcio nes inferiores (colon). Se evaluaron las lesiones producidas. por 80 cepas diferentes de CP en cuatro ovinos, con una enteropatogenicidad del 75%. Las principales lesiones histológicas. (no se presentó invasión bacterial) fue. tró que es necesaria por la excelencia con. ron en mucosa: descamación epitelial,. firmativa de los criterios lactosa (ácido +,. necrosis de las vellosidades, congestión,. gas +), motilidad (-) y hemolisis (a y |3) en agar sangre ovina. Hubo una interesan te correspondencia entre los halos de lecitinasa y a hemolisis y se comprobó que hay por lo menos tres niveles de reactivi dad entre las cepas.. Mediante. la. técnica. de. hemorragia e incremento. celular; en. submucosa se presentó edema y conges tión; en las capas musculares y adventi cias se presentaron ligeros incrementos celulares. Por lo tanto el ovino infante y. joven es un buen reservorio de CP entero-toxi-patogénico y de CPP (atóxico).. sero-toxi-. neutralización en ratón, 80 cepas indivi duales de CP dieron 64% de tipo A, un. 7. SUMMARY. 4% de tipos diferentes al A y un 32% de CPP. Se comprobó que la infección (logio esporos) por CP y CPP en el. Prevalence, increment and pathogenicity of Clostridium perfringens and Clostri. intestino infante ovino, sigue una ten. dencia incremental a partir del primer. muestreo 0,3 (1 a 7 días) y continúa aumentando hasta 2,4 en el sexto mues. treo. Hubo regresión log-log linear signi. ficativa (p< 0,005) dependiendo proba blemente de más de un factor ambiental.. Se comprobó que los ovinos, al momento de nacer se encuentran esen. cialmente libres de CP y CPP; tal hipóte. sis se comprobó por la presencia de un cero (0) estadístico en el primer mues treo (distribución de Poisson, p >0,10). 160. dium paraperfringens in the intestinal tract of wheanling ovines.. Demographic variables on suckling and whealing lambs were studied with respe ct to Clostridium perfringens (welchii) (CP) and Clostridium paraper fringens (CPP) spore prevalence in the. gastro-intestinal tract. Physiobiochemical patterns of the strains were found of practical importance. The lambs were followed prospectively with regard to. qualitative and quantitative prevalence in the different portions of the gastro-intes tinal tract..

(11) Lesions were surgically provoqued and histopathologically studied both for CP and CPP. Feces samples from one hundred lambs were taken six times at. 30 days intervals. The lambs belonged to five different breeds from San Jorge Experimental Station in Soacha (cold climate), Cundinamarca, Colombia, and work took place at the Veterinary Medi cal Research Laboratory (LIMV), both belongingto the Colombian Agricultural Institute (ICA). Logi0 sporecounts data were processed statistically by the BMD series at the IBM 360/44, National University of Colombia. Sex was the only variable with indicated discriminatory power with CP counts being higher for males. (1.80 ) than. for. females. (1,72),. corresponding to higher weights for the former. Breed showed a shight difference (lows) for the autoctonous breeds. Out of 600 cases studied in the. Perfringens Basic Médium (MBP) (succesfully applied for the first time to one specimens), 520 (87%) grew in it. serum-toxi-neutralization. in. mouse. slowed 64% CP type A, 4% or other. types and 32% CPP's. The CP/CPP infections patterns in the suckling/ wheanling ovine followed a linear log-log regression tendency (p < 0,005) begining with log = 0.3 in the first sample at time 0(1-7 days) and increasing up to 2.4 in the sixth sample. Environmental factors not well determined seem to be. present. Ovines and CPP as statistical zero wich followed 0,10).. at birth are free of CP was suggested by an (0) in the first sample a Poisson patterns (p >. Confinement conditions were applied to six lambs that were them euthanized. and studied for location prevalence of CP and CPP. The gastrointestinal tract is colonized along all its extensión from. mouth (probably throungh rumination) to rectum. Stratifications is evident with. the higher counts log)0 ^ 3, corres ponding to the lower portion (colon). The lesions produced by 80 the strains were studied in four lambs, with 75%. and 404 were confirmed (51% positives) in the Lactose Motility Nitrate médium LMN. Nitrates reduction testing were more sensitively done in the regular Nitrate Agar. Its use was somehow. entero-toxi-pathogenicity. The main lesions (never invasive bacterial) were upon the mucosa where descamation of epithelium, necrosit at the villi, hyperemia, hemorrhage and cellularity. irrelevant. were found. In the submucosa edema and. because. of. the. excelent. confirmatory ability of the lactose (acid. +, gas +) motility (-) and a , (3 hemolysis on sheep blood agar. There was an agreement between lecithinase and a hemolysis halos, indicating at least three categories of reactivity among the. hyperemia were observed. In the muscle and adventice slight cellularity was seem. Thus suckling (wheanling) ovines are good reservoirs of entero-toxi-pathogenic CP and atoxic CPP.. 8. BIBLIOGRAFÍA. 1.. ALVAREZ, N.; M.J. TORRES y B.O. OSPINA. 1975. Prevalencia de contaminación microbiológica en alimentos para aves y materias primas. para su elaboración. Bogotá, U. Nacional de Col. 15 p. (sin publicar). 161.

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FIGURA 1. Histogramas obtenidos por computador (BMD-05D) perfringens.
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