1. SOLICITUD
1. 1. DATOS DE LA ACTIVIDAD
Título: LAS BABOSAS DE LA FAMILIA ARIONIDAE EN LOS PARQUES NACIONALES PENINSULARES: TAXONOMÍA, FILOGENIA Y PATRONES DE DISTRIBUCIÓN.
Línea/s prioritaria/s:
c.1. Caracterización de componentes bióticos. Taxonomía y filogénesis.
d.1. Biología de la conservación de especies singulares. Investigación básica. Caracterización genética, biología de la reproducción, patrones de utilización del territorio.
d.2. Biología de la conservación de especies singulares. Investigación específica. Fragmentación y aislamiento de poblaciones, hibridación e introgresión, competencia con especies invasoras y oportunistas.
Clasificación UNESCO (seis dígitos): 240104 Taxonomía animal, 240191 Invertebrados no insectos, 310601 Conservación, 240903 Genética de poblaciones
Duración: de abril-2004 a marzo-2007 Total de años: 3 1.2. DATOS DE LA ENTIDAD SOLICITANTE
X Centro Público de I+D Centro privado de I+D sin ánimo de lucro
Centro Tecnológico (número de Registro oficial como CIT):
Nombre: UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPOSTELA Acrónimo: USC
C.I.F.: Q-1518001-A
Nombre del representante legal: Senen Barro Ameneiro Cargo: Rector
Teléfono: 981 547 050 Telefax: 981 547 777 Correo electrónico: vcinvest@usc.es
Dirección postal completa: Pazo de San Xerome, Plaza do Obradoiro s/n, 15782 Santiago de Compostela Tipo de entidad
X pública X Universidad
privada
CSIC
Organismo Público de Investigación distinto del CSIC
Centro Tecnológico
privado
Otros
público
1.3. DATOS DEL INVESTIGADOR RESPONSABLE Apellidos y nombre: Castillejo Murillo, José
Entidad: Universidad de Santiago de Compostela Centro: Facultad de Biología
Departamento: Biología Animal
Teléfono: 981 563 100 (ext. 13277) Telefax: 981 596 904 Correo electrónico: bacasti@usc.es
Dirección postal completa: Depto. Biología Animal, Fac. Biología, Univ. Santiago, Campus Sur, 15782 Santiago de Compostela, A Coruña.
1.4. AYUDA SOLICITADA (euros)
Personal: 63106.00 €
Material inventariable: 3600.00 €
Material fungible: 9219.09 €
Viajes y dietas: 24625.28 €
Otros gastos:
Gastos indirectos (en su caso): 15082.56 €
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Total 115632.93 EURO
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Firma del Investigador responsable Firma del Representante legal y sello de la Entidad
Fdo.: José Castillejo Murillo Fdo.:
Cargo:
Instrumento legal de nombramiento:
_____de ___________________de 200__
1.5. DECLARACIÓN ACREDITATIVA DEL FUNDAMENTO DE LA REPRESENTACIÓN LEGAL (este apartado deben cumplimentarlo exclusivamente los Centros Tecnológicos, Centros privados de I+D sin ánimo de lucro y Otros tipos de Unidades de Interfaz)
Don/Doña
En representación de la Entidad
Declara que ostenta la representación de la misma en virtud de(1)
Firma
(1) Debe precisarse el instrumento legal de otorgamiento del poder, ya sea ante Notario (especificando los datos de identificación correspondientes) o en virtud de representación estatutaria (adjuntando copia de los Estatutos).
ILMO. SR. PRESIDENTE DE PARQUES NACIONALES
Gran Vía de San Francisco, nº 4 28071 MADRID
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.PERSONAL QUE PARTICIPA EN LA ACTIVIDAD
Investigador Responsable:
Apellidos: CASTILLEJO MURILLO Nombre: JOSÉ
DNI: 71492436-H Sexo: X V M Año de nacimiento: 1949
Titulación académica: BIÓLOGO Grado: Doctor X Licenciado/Ingeniero/Arquitecto Categoría profesional: PROFESOR TITULAR DE
UNIVERSIDAD
Correo electrónico: bacasti@usc.es
Situación laboral: Plantilla X Contratado Interino En formación postdoctoral Otra Firma de conformidad:
Resto de Investigadores:
Apellidos: REY MENDEZ Nombre: MANUEL
DNI: 35275399T Sexo: X V M Año de nacimiento: 1953
Titulación: BIÓLOGO Grado: Doctor X Licenciado/Ingeniero/Arquitecto Categoría profesional: PROFESOR TITULAR DE
UNIVERSIDAD
Correo electrónico: bnreymen@usc.es
Situación laboral: Plantilla X Interino Contratado En formación Otra Firma de conformidad: Pertenece a la entidad solicitante SI X No
En caso negativo se adjuntará la autorización indicada en el apartado b) del punto 4 de la disposición décima.
Apellidos: IGLESIAS PIÑEIRO Nombre: JAVIER
DNI: 33269438F Sexo: X V M Año de nacimiento: 1966
Titulación: BIÓLOGO Grado: Doctor X Licenciado/Ingeniero/Arquitecto Categoría profesional: PROFESOR TITULAR INTERINO
DE UNIVERSIDAD
Correo electrónico: bahelix@usc.es
Situación laboral: Plantilla Interino X Contratado En formación Otra Firma de conformidad: Pertenece a la entidad solicitante SI X No
En caso negativo se adjuntará la autorización indicada en el apartado b) del punto 4 de la disposición décima.
Apellidos: LOMBARDÍA CORTIÑA Nombre: MARÍA JOSÉ
DNI: 33322690-Z Sexo: V X M Año de nacimiento: 1971
Titulación: LICENCIADA EN MATEMÁTICAS Grado: Doctor X Licenciado/Ingeniero/Arquitecto Categoría profesional: PROFESORA ASOCIADA DE
UNIVERSIDAD, TIEMPO COMPLETO Correo electrónico: mjoselc@usc.es
Situación laboral: Plantilla Interino Contratado X En formación Otra Firma de conformidad: Pertenece a la entidad solicitante SI X No
En caso negativo se adjuntará la autorización indicada en el apartado b) del punto 4 de la disposición décima.
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En formación postdoctoral Otra Firma de conformidad: Pertenece a la entidad solicitante SI X No
En caso negativo se adjuntará la autorización indicada en el apartado b) del punto 4 de la disposición décima.
Háganse tantas copias como sea necesario.
3. DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD
Describa el contenido de la Actividad y los objetivos que se buscan. Especifique el plan de trabajo previsto y detalle las razones por las cuales esta Actividad no puede encuadrarse dentro de otros instrumentos del Plan Nacional de I+D+I.
El presente proyecto de investigación está encaminado al estudio de las babosas (Mollusca, Gastropoda, Pulmonata, Stylommatophora) de los Parques Naturales (PPNN) peninsulares, con los objetivos específicos de dilucidar la taxonomía y relaciones filogenéticas de las especies endémicas de las babosas de la familia Arionidae (géneros Arion y Geomalacus), que incluyen endemismos ibéricos y endemismos pirenaicos. Estudios previos realizados por miembros del grupo de investigación han demostrado la presencia de estas especies en los PPNN de Picos de Europa, Ordesa y Monte Perdido, Aigëstortes i Estany de Sant Maurici, Doñana, Cabañeros y Sierra Nevada. En dichos estudios, la determinación específica de los ejemplares se basó exclusivamente en caracteres morfológicos, y la muestra obtenida en cada PPNN es muy pequeña. Estudios más recientes, realizados también por este grupo de investigación y basados en caracteres moleculares (secuencias nucleares ITS y mitocondriales ND1) han revelado la existencia de incongruencias entre la taxonomía morfológica y la taxonomía molecular de especies del género Arion, así como la existencia de especies relictas de este género en los Pirineos y áreas adyacentes, y la monofilia de las especies endémicas de Arion en la Península Ibérica. El género Geomalacus presenta 4 especies en la Península, de las que 3 son endemismos ibéricos, y que presentan áreas de distribución contiguas siguiendo un patrón noroeste-sureste, pero hasta la actualidad no existe ningún estudio taxonómico sobre las mismas basada en caracteres moleculares.
Con este Proyecto se pretende realizar un estudio completo de las babosas de la familia Arionidae de los PPNN peninsulares desde el punto de vista taxonómico y filogeográfico, incluyendo la caracterización genética de las diferentes especies, el análisis de su variabilidad genética y morfológica, la determinación de la congruencia existente entre la taxonomía basada en caracteres morfológicos y moleculares, la historia evolutiva y la datación de eventos de especiación, la reconstrucción de su historia filogenética, y la evaluación del papel de reservorio genético de las poblaciones de las distintas especies de Arion y Geomalacus que se encuentran protegidas en el territorio de los PPNN.
Asimismo, con el fin de obtener información útil de cara a la conservación de dichas poblaciones, se realizará un estudio ecológico de las especies y comunidades prospectadas en los parques, determinando cuales son los factores ambientales (edáficos, de vegetación, climáticos, etc.) que caracterizan los espacios por ellas ocupados, así como una evaluación de la presencia y abundancia de especies de babosas de carácter invasor y oportunista que pueden competir y llegar a desplazar a las especies endémicas. De este modo, los muestreos realizados permitirán obtener un inventario completo de la fauna de babosas de los PPNN prospectados, lo cual presenta también interés desde el punto de vista veterinario para la conservación de aves y vertebrados, debido al papel de hospedadores intermediarios de parásitos (trematodos, cestodos y nematodos) que desempeñan las babosas.
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estadísticos), y se solicita la contratación de 1 licenciado en Biología, con dedicación a tiempo completo, cuya misión será la de apoyo en las tareas de aislamiento, ampliación y secuenciación de DNA y análisis de los datos moleculares obtenidos.
Para la obtención de muestras (captura de ejemplares en los PPNN) se realizarán 4 viajes de muestreo, dos durante el primer año del Proyecto y dos durante el segundo. Los PPNN de la zona norte (Picos de Europa, Ordesa y Aigstortes) serán visitados durante la primavera, y los de la zona centro y sur peninsular (Doñana, Cabañeros y Sierra Nevada) durante el otoño. En cada PN se muestrará el mayor número posible de zonas y biotopos, en las cuales se recogerán además muestras de suelo y hojarasca para su posterior análisis de cara al estudio ecológico.
En el laboratorio se procederá a la caracterización taxonómica de los ejemplares capturados desde el punto de vista morfológico y molecular, poniendo especial énfasis en el estudio de la variabilidad tanto de los caracteres morfológicos como de las secuencias genéticas. Se comprobará la existencia de congruencia entre la taxonomía de babosas de la familia Arionidae basada en caracteres morfológicos y en caracteres moleculares y se realizarán análisis filogenéticos basados en las datos moleculares obtenidos para determinar las relaciones filogenéticas entre las especies estudiadas, datar eventos de especiación y dilucidar su historia evolutiva, evaluando el papel desempeñado por la orografía peninsular, la historia climática y los mecanismos reproductivos en los eventos de especiación.
4. JUSTIFICACIÓN
Establezca, principalmente en términos de oportunidad, las razones que justifican la Actividad propuesta. Identifique el sector o ámbito de actividad beneficiario de la Actividad a corto o largo plazo, así como el impacto negativo que, a su juicio, tendría la denegación de la Actividad solicitada.
Los estudios de diversidad genética y filogenia molecular de gasterópodos terrestres de la Península Ibérica son prácticamente inexistentes. Aunque la fauna de babosas de la Península ha sido estudiada por investigadores de este Grupo y existen citas de numerosas especies en el territorio de lo PPNN, éstos representan zonas poco prospectadas, por lo que resulta de gran interés la realización de muestreos específicos en ellos para realizar un inventario completo de las especies presentes, existiendo un gran potencial, tanto desde el punto de vista morfológico como molecular, para el descubrimiento de nuevas especies.
El presente proyecto se ajusta a las líneas prioritarias marcadas en la Convocatoria, y los investigadores implicados presentan una sobrada y reconocida experiencia en el estudio faunístico y ecológico de estos animales, disponiendo de toda la infraestructura necesario para llevarlo a buen término.
Convocatoria de ayudas a la Investigación en materias relacionadas con la Red de PARQUES NACIONALES (2003)
6. MEMORIA CIENTÍFICO-TÉCNICA DEL PROYECTO
6.1. RESUMEN DE LA PROPUESTA (Debe rellenarse también en inglés) INVESTIGADOR PRINCIPAL: JOSÉ CASTILLEJO MURILLO
TITULO DEL PROYECTO:
LAS BABOSAS DE LA FAMILIA ARIONIDAE EN LOS PARQUES NACIONALES PENINSULARES: TAXONOMÍA, FILOGENIA Y PATRONES DE DISTRIBUCIÓN.
RESUMEN (debe ser breve y preciso, exponiendo sólo los aspectos más relevantes y los objetivos propuestos):
La familia Arionidae está representada en la Península Ibérica por unas 25 especies de babosas de los géneros Arion y Geomalacus, de las que el 75% son exclusivas de la Península, algunas de ellas con carácter de endemismos ibéricos y otras con carácter de endemismos pirenaicos. Existen citas de la mayoría de ellas en los PPNN peninsulares, pero éstos representan territorios poco prospectados con respecto a la fauna de babosas.
Con el presente proyecto se pretende realizar un inventario completo de la fauna de babosas de los PPNN peninsulares y los sigientes objetivos específicos: realizar un estudio taxonómico y de filogenia molecular de las especies de la familia Arionidae, evaluar la congruencia existente entre la taxonomía morfológica y la molecular, analizar la variabilidad morfológica y genética intraespecífica, evaluar el papel de reservorio genético de las poblaciones de Arion y Geomalacus protegidas en los PPNN, reconstruir la historia evolutiva de las especies estudiadas, datar eventos de especiación y estudiar las relaciones filogenéticas entre las especies, establecer las preferencias de cada especie con respecto a distintos factores físicos (edáficos, de vegetación, etc.), determinar los factores que tienen mayor influencia en la composición y distribución de las comunidades de babosas, y determinar la presencia y abundancia en los PPNN de especies de babosas invasoras y oportunistas.
Las babosas son hospedadores intermediarios de trematodos, cestodos y nematodos que parasitan a mamíferos y aves, por lo que el conocimiento preciso de la fauna de babosas de los PPNN también reviste interés desde el punto de vista veterinario para la gestión y conservación de vertebrados.
TÍTULO DEL PROYECTO EN INGLÉS:
THE SLUGS OF THE FAMILY ARIONIDAE FROM THE PENINSULAR SPANISH NATIONAL PARKS: TAXONOMY, PHYLOGENY AND DISTRIBUTION PATTERNS.
RESUMEN EN INGLÉS:
In the Iberian Peninsula, the family Arionidae consist of about 25 species of slugs belonging to the genera Arion and Geomalacus, and 75% of the species live exclusively in the Iberian Peninsula. Some of them are Iberian endemisms, and some are Pyrenean endemism. Most of the species have been cited within the NNPP of the peninsula, but these represent territories undersampled with respect to slugs.
This research project intends to obtain a complete inventory of the slug fauna of the peninsular NNPP and to fulfil the following specific objectives: a taxonomic and phylogenetic study of the family Arionidae based on morphological and molecular characters, to judge the congruence between morphological and molecular taxonomy of these slugs, to analyze the morphological and genetic intraspecific variability, to assess the role of genetic reserve played by the populations of Arion and Geomalacus protected in the NNPP, to reconstruct the evolutionary history of the species dating speciation events and studying the phylogenetic relationships among the species, to study the ecological preferences of the species for different physical factors (edaphic factors, vegetation, etc.), to determine the factors which affect the composition and distribution of the slug communities, and to evaluate the presence and abundance of opportunistic and invasive slug species in the NNPP.
Since slugs are intermediate hosts of trematodes, cestodes and nematode worms that parasite mammals and birds, a detailed knowledge of the specific composition and ecology of the slug fauna of the NNPP is interesting also form the point of view of the conservation and management of vertebrates.
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incluyendo la bibliografía más relevante; los grupos nacionales o internacionales que trabajan en la misma materia específica del proyecto, o en materias afines; los logros anteriores del grupo en esta materia y en otras afines; etc.
Si el proyecto es continuación de otro previamente financiado, deben indicarse con claridad los objetivos ya logrados y los resultados alcanzados.
Si el proyecto aborda una nueva temática, deben indicarse los antecedentes y contribuciones previas del grupo, con el fin de justificar su capacidad para llevar a cabo el nuevo proyecto.
La finalidad de este proyecto es dilucidar aspectos relativos a la taxonomía, las relaciones filogénéticas y los factores, históricos y actuales, que determinan la distribución de las especies de babosas pertenecientes a la familia Arionidae Gray, 1840 (Mollusca: Gastropoda: Pulmonata: Stylommatophora) en los PPNN peninsulares. Esta familia de babosas comprende gran cantidad de especies endémicas que, en función de los datos de distribución de los que se dispone actualmente (CASTILLEJO, 1998; CASTILLEJO et al., EN PRENSA), están presentes en los PPNN peninsulares de Picos de Europa, Ordesa y Monte Perdido, Aigëstortes i Estany de Sant Maurici, Doñana, Cabañeros y Sierra Nevada. Son babosas de tamaño medio o grande (de 3 a más de 15 cm de longitud), con la parte posterior del cuerpo redondeada y carentes de quilla en el dorso de la cola, con el cuerpo recubierto de tubérculos y con el orificio respiratorio situado en la mitad anterior del manto. Asimismo, se persigue obtener un inventario completo y preciso de la fauna de babosas de los PPNN citados, incluyendo datos relativos a la presencia y abundancia en los mismos de especies de babosas de amplia distribución, invasoras y oportunistas, que pueden competir con las especies endémicas y representar una amenaza para la supervivencia de las mismas.
La clasificación taxonómica actual de los gasterópodos terrestres está basada en caracteres morfológicos y anatómicos, siendo los más importantes los del aparato reproductor. En la taxonomía morfológica de las babosas, se consideran caracteres importantes la longitud del animal durante la marcha, el color del cuerpo y costados, la existencia de bandas o manchas, el color de la suela pedia, del mucus del cuerpo y de la suela, el comportamiento durante la cópula y la morfología del espermatóforo. Con respecto a la anatomía del aparato reproductor, tienen especial importancia la forma y tamaño del oviducto libre, del canal deferente, del epifalo, del pene, de la bolsa copulatriz, de la vagina y del atrio genital, la existencia o no de glándulas accesorias u otras peculiaridades anatómicas, de órganos estimuladores, de pliegues en el interior de los distintos conductos, etc. No obstante, es bien conocida la existencia de una gran variación intraespecífica, debida a factores internos y ambientales, en estos y otros caracteres considerados tradicionalmente como taxonómicamente importantes (BACKELJAU et al., 2001). Esto ha dado lugar a una taxonomía inestable e imprecisa en la que abundan los complejos de especies y los subgéneros. Por otro lado, los sistemas de reproducción no son conocidos en todas las especies, si bien se sabe que, dentro del mismo género, se dan casos de autofecundación,
o de fecundación cruzada, o de coexistencia de ambos sistemas, y tampoco son infrecuentes los casos de hibridación entre especies (BACKELJAU et al., 2001;
HELLER, 2001).
En los trabajos más completos y recientes sobre la fauna de babosas de la Península Ibérica se pone de manifiesto que el conocimiento de ésta no es aún satisfactorio, ni siquiera en lo referente al inventario específico. Recientemente, en el contexto de los Proyecto FAUNA IBERICA I y FAUNA IBERICA II, CASTILLEJO, GARRIDO e IGLESIAS han descrito 4 nuevas especies del género Arion, el endemísmo ibérico Arion baeticus (GARRIDO et al., 1994) y los endemismos pirenaicos A. lizarrustii, A. iratii y A. molinae (GARRIDO et al., 1995).
Según los datos actuales, en la región Paleártica la familia Arionidae está representada por la subfamilia Arioninae, que comprende los géneros Arion, Geomalacus y Letourneuxia, y cerca de 40 especies. De ellas, alrededor de 25, de los géneros Arion y Geomalacus, viven en la Península Ibérica, y la mayoría son endémicas, algunas con carácter de endemismos ibéricos y otras con carácter de endemismos pirenaicos. La siguiente relación muestra las especies de Arionidos presentes en la Peninsula Ibérica según CASTILLEJO et al. (EN PRENSA), indicándose para cada una su clasificación corológica:
Familia ARIONIDAE Gray, 1840 Subfamilia ARIONINAE Gray, 1840 Género GEOMALACUS Allman, 1843 Subgénero GEOMALACUS s. str.
Geomalacus (G.) maculosus Allman, 1846... ESPECIE LUSITANICA Subgénero ARRUDIA Pollonera, 1890.
Geomalacus (A.) anguiformis (Morelet, 1845)... ENDEMISMO IBÉRICO Geomalacus (A.) oliveirae Simroth, 1888……… ENDEMISMO IBÉRICO Geomalacus (A.) malagensis Wiktor et Norris, 1991... ENDEMISMO IBÉRICO Género ARION Férussac, 1819
Subgénero ARION s. str.
Arion (A.) ater (Linnaeus, 1758)... DISTRIBUCIÓN EUROPEA Arion (A.) rufus (Linnaeus, 1758)……… DISTRIBUCIÓN EUROPEA Subgénero MESARION Hesse, 1926
Arion (M.) lusitanicus Mabille, 1868... DISTRIBUCIÓN EUROPEA Arion (M.) nobrei Pollonera, 1889 ... ENDEMISMO IBÉRICO Arion (M.) fuligineus Morelet, 1845……….. ENDEMISMO IBERICO Arion (M.) flagellus Collinge, 1893... ESPECIE LUSITÁNICA Arion (M.) subfuscus (Draparnaud, 1805)... DISTRIBUCIÓN EUROPEA Arion (M.) iratii Garrido, Castillejo et Iglesias, 1995... ENDEMISMO PIRENAICO Arion (M.) lizarrustii Garrido, Castillejo et Iglesias, 1995... ENDEMISMO PIRENAICO Arion (M.) molinae Garrido, Castillejo et Iglesias, 1995... ENDEMISMO PIRENAICO Arion (M.) urbiae De Winter, 1986... ENDEMISMO IBÉRICO Arion (M.) paularensis Wiktor et Parejo, 1989……….. ENDEMISMO IBÉRICO Arion (M.) hispanicus Simroth, 1886……….. ENDEMISMO IBÉRICO Arion (M.) baeticus Garrido, Castillejo et Iglesias, 1994... ENDEMISMO IBÉRICO Subgénero KOBELTIA Seibert, 1873
Arion (K.) hortensis Férussac, 1819... DISTRIBUCIÓN EUROPEA Arion (K.) fagophilus De Winter, 1986……… ENDEMISMO IBÉRICO Arion (K.) intermedius Normand, 1852 ………. DISTRIBUCIÓN EUROPEA Arion (K.) anthracius Bourguignat, 1866... ENDEMISMO PIRENAICO Arion (K.) wiktori Parejo et Martín, 1990... ENDEMISMO IBÉRICO
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El género Geomalacus está formado por 4 especies conocidas, de las que tres, son exclusivas de la Península Ibérica. La cuarta, G. maculosus Allman, 1843, está presente además en el extremo suroccidental de Irlanda. Las cuatro especies de Geomalacus presentan una distribución característica a lo largo de cadenas montañosas que, de norte a sur, son: Macizo Galaico y Cordillera Cantábrica (G.
maculosus), Sistemas Central y Oretano (G. oliveirae Simroth, 1891), Sistema Mariánico (G. anguiformis (Morelet, 1845)), y Sistema Bético (G. malagensis Wiktor et Norris, 1991).
MAPAS DE DISTRIBUCIÓN DE LAS ESPECIES DEL GÉNERO Geomalacus Y DE LOS ENDEMÍSMOS DEL GÉNERO Arion (CASTILLEJO et al., EN PRENSA)
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Los estudios anteriores de filogenia molecular de los gasterópodos, basados en el análisis del cluster de ARN ribosomal (WADE et al., 2001), sugieren una posición divergente monofilética de la familia Arionidae con respecto al clade hermano de la familia Limacoidea. Los estudios a niveles sistemáticos basales son muy reducidos, ya que se suelen centrar principalmente en genética poblacional (BACKELJAU et al., 2001), pues esta resulta más interesante para posibles aplicaciones al nivel del control de plagas en las cosechas.
Los estudios enzimáticos mostraban que las nueve especies de Arion presentes en Gran Bretaña e Irlanda son poblaciones heterocigóticas, poblaciones monogenéticas o poblaciones de los dos tipos con probables hibridaciones entre ellas (FOLTZ et al., 1982). También basándose en al análisis de los aloenzimas, se investigó el estatus de las especies de las Azores (BACKELJAU et al., 1992) y los aspectos ecogenéticos del complejo de especies centroeuropeas Arion fasciatus, perteneciente al subgénero Carinarion (BACKELJAU et al., 1997;
JORDAENS et al., 1998). Aunque no existían estudios basados en el DNA dedicados a la filogenia del Arion o a su genética poblacional, algunas poblaciones de grandes ariónidos fueron diferenciadas usando RAPDs (NOBLE and JONES, 1996). En otros gasterópodos, al análisis de la secuencia del ADN, de los ITS, en la especie Albinaria y la cercanamente relacionada con ella Isabellaria (Clausilidae), permitió la identificación de grupos polifiléticos y
demostró que el carácter morfológico tradicionalmente usado, las estructuras clausiliales, no conseguían determinar sus relaciones (SCHILTHUIZEN et al., 1995).
El descubrimiento, llevado a por este grupo, de la existencia de especies relictas endémicas en los Pirineos y áreas adyacentes demanda de una profundización en la investigación de las especies de esta área (A. irati, A. lizarrustii, A. anthracius, A. molinae) (QUINTEIRO, RODRÍGUEZ-CASTRO, CASTILLEJO, IGLESIAS y REY-MÉNDEZ, enviado). Este estudio incluirá un análisis de un elevado número de individuos, superior al investigado hasta la fecha lo que permitirá la evaluación de las estructura genética poblacional y una mayor fiabilidad en las reconstrucciones filogenéticas entre estas especies.
El carácter endémico del género Geomalacus con 4 especies descritas (Geomalacus maculosus, G. oliveirae, G. anguiformis y G. Malaguensis) plantea diversas cuestiones filogeográficas abordables desde el punto de vista molecular.
Estos estudios filogenéticos y de estructura poblacional serán llevados a cabo mediante el análisis de secuencias mitocondriales (ND1) y nucleares (ITS), las cuales proveen de la suficiente resolución para el estudio tanto a nivel micro como macroevolutivo (AVISE, 1994). La estimación de la diversidad genética, los estudios taxonómicos, y la elucidación de las relaciones filogenéticas entre los taxa, son de directa aplicación en los planes de gestión y uso de los Parques Nacionales implicados.
La distribución actual de las especies es el resultado de circunstancias históricas y actuales. Con respecto a los condicionantes actuales, son muchos los factores que contribuyen a explicar la elección de hábitat y la distribución local de las especies (revisión en COOK, 2001). En el ámbito de los gasterópodos terrestres se han señalado relaciones entre la distribución de las especies y factores del suelo como los iones inorgánicos, el pH, la capacidad de drenaje o la textura, y también con otras variables como la temperatura, precipitaciones, altitud, topografía, tipo de vegetación, o la disponibilidad de especies vegetales particulares. El conocimiento de dichos factores resulta imprescindible de cara a la conservación de las especies silvestres.
El conocimiento preciso de la fauna de babosas de los Parques Nacionales también presenta interés desde el punto de vista veterinario para la gestión y conservación de vertebrados, ya que diversas especies de babosas terrestres actúan como hospedadores intermediarios de trematodos, cestodos y nematodos parásitos de mamíferos y de aves. Finalmente, los datos obtenidos en este Proyecto permitirán evaluar la presencia y abundancia en los PPNN prospectados de otras especies de babosas como Deroceras reticulatum, Lehmania valentiana, Limax flavus, Limax maximus, Milax gagates o Tandonia sowerbyi, que son especies invasoras y oportunistas que pueden colonizar los hábitats ocupados por especies endémicas amenazando la supervivencia de sus poblaciones.
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Bruyn, L. 1992. Colour polymorphism and genetic strains in A. intermedius from Flores, Azores (Mollusca, Pulmonata). Biological Journal of the Linnean
Society, 46: 131-143.
Backeljau, T, De Bruyn, L., De Wolf, H., Jordaens, K., Van Dongen, S. and
Winnepenninckx, B. 1997. Allozyme diversity in slugs of the Carinarion complex (Mollusca, Pulmonata). Heredity 78, 445-451.
Backeljau, T., Baur, A., and Baur, B. 2001. Population and conservation genetics.
En “The biology of terrestrial molluscs” (G. M. Baker, Ed.), pp. 383- 412. CABI Publishing, Nueva York.
Castillejo, J., Garrido, C. e Iglesias, J. 1994. The slugs of the genus Geomalacus Allman, 1843, from the Iberian Peninsula (Gastropoda: Pulmonata: Arionidae).
Basteria 58, 15-26.
Castillejo, J. 1998. Guía de las babosas ibéricas. Real Acadmia Gallega de Ciencias. Santiago de Compostela.
Castillejo, J., Iglesias, J. y Garrido, C. (EN PRENSA) Las babosas de la Península Ibérica y Baleares (Mollusca: Gastropoda: Pulmonata: Stylommatophora). Serie Fauna Ibérica, Museo Nacional de Ciencias Naturales, CSIC. Madrid.
Cook, A. 2001. Behavioural ecology. En “The biology of terrestrial molluscs” (G. M.
Baker, Ed.), pp. 447- 487. CABI Publishing, Nueva York.
Foltz, D. W., Ochman, H., Jones, J. S., Evangelisti, S. M., and Selander, R. K.
(1982). Genetic population structure and breeding systems in arionid slugs (Mollusca: Pulmonata). Biol. J. Linn. Soc. 17: 225-241.
Foltz, David W.; Ochman, Howard, and Selander, Robert K. 1984. Genetic diversity and breeding systems in terrestrial slugs of the families Limacidae and Arionidae.
Malacologia; 25, (2): 593.
Garrido, C., Castillejo, J. e Iglesias, J. 1994. Description of Arion baeticus spec. nov.
from the Iberian Peninsula (Gastropoda: Pulmonata: Arionidae). Malakologische Abhandlungen Staatliches Museum für Tierkunde Dresden 17, 37-46
Garrido, C, Castillejo, J. e Iglesias, J. 1995. The spermatophore of Arion intermedius (Pulmonata: Arionidae). Journal of Molluscan Studies 61, 127-133.
Garrido, C., Castillejo, J., and Iglesias, J. 1995. The Arion subfuscus complex in the eastern part of the Iberian Peninsula, with redescription of Arion subfuscus (Draparnaud, 1805) (Gastropoda: Pulmonata: Arionidae). Archiv für Molluskenkunde, 124 (1/2):103-118
Heller, J. 2001. Life history strategies. En “The biology of terrestrial molluscs” (G. M.
Baker, Ed.), pp. 383- 412. CABI Publishing, Nueva York.
Jordaens, K., Backeljau, T., Scheirs, J. and Verhagen, R. 1998. Ecogenetic comparison of the selfing terrestrial slugs A. silvaticus and A. circumscriptus in Belgium (Mollusca: Pulmonata: Arionidae). Hereditas, 129: 27-36.
Noble, L.R. and Jones, C.S. 1996. A molecular and ecological investigation of the large aronid slugs of North-West Europe: the potential for new pest species. In:
Symondson, W.O.C. and Liddell, J.E. (eds.) The ecology of agricultural pests:
Biochemical approaches. Chapman & Hall, London.
Quinteiro, J. Rodríguez-Castro, J. Castillejo, J. Iglesias-Piñeiro, J. & M. Rey- Méndez. Phylogeography of slug species of the genus arion": evidence of monophily of iberian endemics and of the existence of relict species in pyrenean refuges. Mol. Phylogen. Evol. (ENVIADO).
Schilthuizen, Menno; Gittenberger, Edmund, and Gultyaev, Alexander P. 1995.
Phylogenetic relationships inferred form the sequence and secondary structure of ITS1 rRNA in Albinaria and putative Isabellaria species (Gastropoda, Pulmonata, Clausiliidae). Molecular Phylogenetics and Evolution 4, (4): 457-462.
Wade, Christopher M, Mordan, Peter B, and Clarke, Bryan. A phylogeny of the land snails (Gastropoda: Pulmonata). 2001; 268, 413-422.
6.3. OBJETIVOS DEL PROYECTO
(máximo dos páginas)
Deben enumerarse brevemente y describirse con claridad, precisión y de manera realista (es decir, acorde con la duración prevista del proyecto) los objetivos concretos que se persiguen, los cuales deben adecuarse a las líneas prioritarias del Programa de Investigación de Parques Nacionales al que se adscribe el proyecto (ver Anexo I de la convocatoria).
I. Estudio filogeográfico de las especies de babosas endémicas de la península Ibérica de los géneros Geomalacus y Arion
Mediante el análisis de secuencias nucleares (ITS) y mitocondriales(ND1) se estimarán las relaciones filogenéticas entre las 4 especies de Geomalacus morfológicamente descritas en la Península Ibérica, a partir de muestras de las poblaciones residentes en los distintos PPNN (G. maculosus en Picos de Europa, G. oliverae en Cabañeros, G. anguiformis en Doñana y G. malaguensis en Sierra Nevada), así como de las especies del género Arion endémicas de la Península y citadas en los PPNN (Picos de Europa, Sierra Nevada, Cabañeros, Doñana).
a. Caracterización genética del género Geomalacus y endemismos ibéricos de Arion
Para estas especies es necesario conocer las secuencias mitocondriales y nucleares, con el fin de permitir el diseño de cebadores específicos.
b. Análisis de la variabilidad genética intra-específica.
El muestreo de un número de individuos elevado y representativo del rango de distribución de las especies, además de los individuos muestreados dentro del área de los PPNN, va a permitir establecer conclusiones acerca de:
i. Los niveles de diversidad genética
ii. La estimación de parámetros demográficos
iii. Los niveles de flujo génico entre diversas poblaciones
iv. La evaluación del papel de reservorio genético de las poblaciones protegidas y aisladas de los PPNN
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en el análisis de los caracteres morfológicos, y la monofilía requerida por el concepto filogenético de especie.
ii. Relaciones filogenéticas entre las especies iii. Datación de los eventos de especiación.
La calibración disponible de la tasa de mutación en las secuencias analizadas permite, de una forma aproximada, la datación de los eventos de especiación.
iv. Historia evolutiva de las especies.
La reconstrucción de las relaciones filogenéticas de estas especies permitirá la evaluación de hipótesis acerca del papel desempeñado por la orografía peninsular, la historia climática y los mecanismos reproductivos en los eventos de especiación.
II. Historia evolutiva de los endemismos del género Arion con distribución en los Pirineos y áreas adyacentes.
a. Relaciones filogenéticas entre los elementos pirenaicos (A. irati, A.
lizarrustii, A. anthracius, A. molinae).
La posición filogenética de estas especies, clásicamente incluidas en el complejo de A. subfuscus, deben ser evaluadas con precisión disponiendo para ello de un elevado número de individuos y diversos marcadores moleculares.
b. Historia evolutiva de los endemismos pirenaicos.
El conocimiento de las relaciones filogenéticas entre los elementos pirenaicos y la datación molecular de los eventos de especiación permitirá la discriminación entre diversas hipótesis acerca de la generación de estos endemismos, entre las que se incluyen causas climáticas, orográficas y/o reproductivas.
c. Análisis de la variabilidad genética intra-específica.
El muestreo de un número de individuos elevado y representativo del rango de la distribución de la especie, además de los individuos muestreados dentro del área de los PPNN, va a permitir establecer conclusiones acerca de:
i. Los niveles de diversidad genética
ii. La estimación de parámetros demográficos
iii. Los niveles de flujo génico entre diversas poblaciones
iv. La evaluación del papel de reservorio genético de las poblaciones protegidas y aisladas de los PPNN
III. Inventariado y estudio autoecológico y sinecológico de las especies y comunidades de babosas en los PPNN ibéricos
a. Caracterización de las comunidades de babosas presentes en cada uno de los PPNN estudiados.
Se obtendrá un inventario completo de las especies de babosas presentes en cada uno de los PPNN prospectados, así como de la composición de las comunidades que constituyen en distintos biotopos (zonas boscosas, bordes de río, roquedos, etc.).
b. Estudio autoecológico de cada especie.
Se establecerán las preferencias de cada especie por los distintos valores de los factores físicos estudiados.
c. Estudio sinecológico.
Se caracterizará el comportamiento de las comunidades en su conjunto para determinar que factores tienen mayor influencia en su composición y en su distribución.
6.4. METODOLOGÍA Y PLAN DE TRABAJO
Se debe detallar y justificar con precisión la metodología que se propone y debe exponerse la planificación temporal de las actividades, incluyendo cronograma (se adjunta un posible modelo a título meramente orientativo).
El plan de trabajo debe desglosarse en actividades o tareas, fijando los hitos que se prevé alcanzar en cada una de ellas. En los proyectos que empleen el Hespérides o se desarrollen en la zona antártica, deberán también incluir el plan de campaña en su correspondiente impreso normalizado.
En cada una de las tareas debe indicarse el centro ejecutor y las personas involucradas en la misma (Ver la relación de personal investigador incluido en el formulario de solicitud).
Si solicita ayuda para personal contratado o en formación justifique claramente su necesidad y las tareas que vaya a desarrollar.
En el caso de proyecto coordinado, se deberán indicar los mecanismos de coordinación previstos para la ejecución del mismo.
La adecuación de la metodología, diseño de la investigación y plan de trabajo en relación con los objetivos del proyecto se mencionan explícitamente en los criterios de evaluación de las solicitudes.
I. Obtención de muestras
a. Captura de ejemplares en los PPNN
b. Preservación de las muestras para análisis morfológico y para la extracción de tejidos.
c. Muestras de suelo
Los muestreos serán realizados por los investigadores Castillejo e Iglesias, que gozan de una amplia experiencia en el muestreo de gasterópodos terrestres por toda la geografía peninsular.
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los Parques de la zona Centro y Sur (Doñana, Cabañeros y Sierra Nevada) los muestreos se realizarán en el otoño, en principio durante el mes de octubre. Las épocas de muestro pueden verse modificadas en función de la climatología. A lo largo del Proyecto se realizarán dos muestreos en cada Parque, uno durante el primer año del Proyecto y otro durante el segundo año
En cada parque se tomarán muestras en distintos puntos, con el fin de capturar ejemplares de cada especie pertenecientes a distintas poblaciones. Para cada punto de muestreo se determinarán sus coordenadas geográficas (GPS). En el segundo muestreo (segundo año) realizado en cada Parque se visitarán las zonas muestreadas el año anterior, para comprobar la persistencia de las poblaciones de babosas de especies endémicas, así como la presencia y abundancia de especies invasoras, pero se dedicará mayor esfuerzo al muestro de zonas no visitadas durante el primer año. De este modo obtendremos muestras de un mayor número de poblaciones dentro de cada Parque, lo que permitirá una mejor valoración de la variabilidad “intraparque”, genética y morfológica, de cada especie.
La metodología de muestreo es la siguiente: una vez en la zona de estudio, se dedica el día a buscar los puntos más adecuados para la toma de muestras; dicha búsqueda se realiza principalmente en función de su orientación (preferentemente zonas umbrías) y vegetación (se buscan zonas con distintos tipos de cobertura vegetal). Se realiza una primera prospección, durante el día, de los puntos seleccionados, buscando activamente las babosas bajo piedras, troncos o entre la hojarasca. En este momento se realizan anotaciones sobre las características de cada punto de muestreo y se toman las muestras de suelo.
Finalmente, los puntos de muestreo seleccionados son visitados durante la noche;
con la ayuda de linternas se buscan las babosas y se capturan los ejemplares.
Durante la noche las babosas se encuentran activas y es posible obtener una buena imagen de su abundancia, realizar observaciones y tomar fotografías de su comportamiento, y frecuentemente resulta posible observar cópulas o puestas de huevos.
Captura y tratamiento de los ejemplares: Los ejemplares capturados se sacrifican por asfixia en agua durante 24 horas. De este modo los ejemplares mueren extendidos, sin retracciones, lo que facilita su posterior análisis anatómico.
Posteriormente se conservan en botes con etanol al 70%, convenientemente etiquetados, que es sustituido por uno nuevo al cabo de 5 días.
Muestras de suelo: en cada punto de muestreo se toman dos muestras de suelo para su posterior análisis. Para el análisis de humedad, porosidad y aireación se toma una muestra con un cilindro de acero de 6 cm de diámetro y 5 cm de altura, la cual se conserva herméticamente envuelta en papel parafinado. Se toma otra muestra de 1 kg de suelo para analizar la granulometría, pH (en agua, en cloruro
potásico 0.1N, y pH de la hojarasca), carbono, nitrógeno, y complejo de cambio (Na, K, Ca, Mg, Al).
HITOS: obtención de una muestra representativa de la fauna de babosas de los Parques Nacionales prospectados, incluyendo las especies endémicas y aquellas de amplia distribución que puedan tener el carácter de especies oportunistas e invasoras, competidoras de las primeras.
II. Caracterización morfológica de los individuos
Esta actividad correrá a cargo de los investigadores Castillejo e Iglesias, que gozan de una amplia experiencia en la taxonomía morfológica de los gasterópodos terrestres de la Península Ibérica.
Para la identificación específica de los ejemplares capturados se realiza una descripción de sus caracteres externos. En dicha descripción se incluyen los datos del individuo in vivo obtenidos en el momento de su captura, otros datos de los que se pueda disponer relativos al comportamiento (por ejemplo, si se observaron y fotografiaron cópulas), y los datos obtenidos del especien conservado en etanol.
Posteriormente se realiza una disección de cada ejemplar para la observación y descripción de su anatomía interna, con la ayuda de una lupa binocular. Los caracteres taxonómicos más importantes de la anatomía interna son fotografiados y dibujados. El grupo de investigación dispone de todo la infarastructura necesaria para esta labor.
HITOS: identificación a nivel específico de los ejemplares capturados, en función de su morfología externa, anatomía interna, y otros datos de los que se pueda disponer como el comportamiento durante la cópula, o la morfología de espermatóforos.
III. Aislamiento de DNA
a. Las muestras de tejido muscular y/o, visceral de cada individuo morfológicamente identificado será utilizadas para la extracción de DNA total, mediante la utilización del kit comercial DNAeasy Tissue Kit (Qiagen), el cual ha demostrado su capacidad para una correcta extracción a partir de este tipo de muestras, su elevada repetitibilidad, rapidez y comodidad.
b. Tras la extracción de DNA, su concentración e integridad serán evaluadas mediante espectrofotometía y electroforesis.
IV. Amplificación de DNA (PCR)
a. La amplificación de las secuencias ND1 y ITS serán llevadas a cabo mediante el uso de cebadores y condiciones de PCR previamente descritos para las especies pirenaicas del género Arion (QUINTEIRO et al., en prensa).
b. En las restantes especies, la caracterización de sus secuencias permitirá el diseño de cebadores específicos.
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La labor de secuenciación de DNA se llevará a cabo mediante secuenciación cíclica por PCR y la resolución de los fragmentos de extensión se realizará en un secuenciador automático ABI PRISM (Applied Biosystems). El grupo de investigación dispone de dos secuenciadores automáticos: ABI PRISM 377-18 y ABI PRISM 377 XL, los cuales confieren una elevada capacidad de secuenciación, por encima de las necesidades generadas por el presente proyecto.
Las tareas detalladas que incluye son:
a. Purificación y cuantificación de los productos de PCR a secuenciar.
b. Preparación de las reacciones de secuenciación.
c. Secuenciación cíclica por PCR.
d. Purificación de los productos de secuenciación.
e. Preparación de geles de secuenciación y electroforesis.
f. Recopilación y verificado de electroferogramas.
VI. Análisis de datos moleculares
Los diferentes estudios y las variadas metodologías aplicadas requieren de distintos tipos de análisis. Sin embargo, los análisis de los datos obtenidos son idénticos con independencia de la especie/s analizadas.
a. Análisis filogenéticos.
La inferencia de las relaciones filogenéticas y el estudio de la posición taxonómica de las diversas especies analizadas serán llevados a cabo mediante metodologías de filogenia molecular. Estas incluyen la elaboración de árboles filogenéticos por métodos de distancia y neigbour- joining, parsimonia y máxima verosimilitud, implementados en programas como por ej. PAUP, Phylip o MEGA. Análisis de estructura genética poblacional.
b. La estructuración de la diversidad genética intra-específica detectada en las secuencias de DNA será analizada mediante la estimación de estadísticos derivados de Fst y análisis de la varianza molecular (AMOVA).
Además, en aquellos análisis basados en el genotipado mediante secuencias 6. Análisis de datos.micriosatélites, se estimarán los valores de parentesco. Diferentes programas permiten tales estimaciones, por ejemplo Arlequín, Winamova y Kinship.
Las actividades III, IV, V y VI correrán a cargo de los investigadores Rey y Rodríguez, que gozan de amplia experiencia en la aplicación de las metodologías de DNA a la evaluación de la diversidad genética y a la reconstrucción de la historia evolutiva de las especies. La labor del contratado será la de apoyo al desarrollo de estas mismas actividades.
HITOS: caracterización genética de las especies de babosas de las familia Arionidae de los PPNN prospectados, evaluación de la variabilidad genética intra-específica, análisis filogenético de las especies.
VII. Análisis ecológico
Los análisis de suelos recogidos durante los muestreos serán efectuados por servicios externos a la Universidad de Santiago de Compostela, concretamente serán encargados al Centro de Invenstigaciones Agrarias de Mabegondo (CIAM), perteneciente a la Xunta de Galicia.
Además de los análisis de suelos, se realizará una recopilación de información territorial con el objetivo de obtener la mayor cantidad de información posible sobre la vegetación, geología, climatología, usos del suelo, etc. de los Parques Nacionales prospectados, a la menor escala geográfica que sea posible ( desde el nivel de Parque hasta el nivel de punto de muestreo). Con los datos de los análisis de suelo, la información sobre los puntos de muestro obtenida in situ durante los muestreos y la información territorial recopilada se construirá una matriz de datos que servirá de base para los posteriores análisis estadísticos orientados a estudiar la relación de las diferentes especies con las características del medio.
Con los datos obtenidos se calcularán los porcentajes de dominancia (presencias, abundancia-dominancia, dominancia combinada) para cada muestra (punto de muestreo) y para cada PN, se aplicarán, entre otros, el método de perfiles ecológicos para estudiar el comportamiento de cada especie frente a cada uno de los factores ambientales valorados, y el de análisis de correspondencias y de correspondencias canónicas para estudiar la estructura de las comunidades y la influencia sobre ellas de las variables ambientales.
El análisis ecológicos será responsabilidad de los investigadores Lombardía e Iglesias.
HITOS: caracterización de las características físicas de las zonas ocupadas por las poblaciones de babosas estudiadas en el territorio de los PPNN prospectados.
Debe subrayarse el nombre de la persona responsable, en cada tarea.
Actividades/Tareas Centro
Ejecutor Persona responsable y otras
involucradas Primer año (*) Segundo año (*) Tercer año (*)
A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M
Muestreos (recogida de ejemplares USC Castillejo, Iglesias y muestras de suelo) en PPNN
A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M
Análisis moleculares USC Rey, Rodríguez, Contratado
A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M
Análisis morfológicos USC Castillejo, Iglesias Análisis de suelos y recopilación de Servicios A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M
información territorial (vegetación, externos y Servicios externos geología, climatología....) USC Castillejo, Iglesias
A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M
Análisis ecológicos (relación USC Lombardía, Iglesias especies/medio)
A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M A M J J A S O N D E F M
Elaboración de resultados USC Todos (*) Sombrear el número de casillas (meses) que corresponda
6.5. BENEFICIOS DEL PROYECTO
Deben destacarse, entre otros, los siguientes extremos:
Contribuciones científico-técnicas esperables del proyecto, beneficios esperables para el avance del conocimiento y la tecnología y, en su caso, resultados esperables con posibilidad de transferencia ya sea a corto, medio o largo plazo.
Este aspecto se menciona explícitamente en los criterios de evaluación de las solicitudes
Adecuación del proyecto a las líneas prioritarias de la convocatoria.
En el caso de proyecto coordinado, detalle las razones por las que este proyecto coordinado es más ventajoso que la suma de los subproyectos tratados de forma independiente. Indique el valor añadido que justifica la necesidad de un proyecto coordinado
Los objetivos planteados en este Proyecto se adecuan perfectamente a las líneas prioritarias c.1, d.1 y d.2 de la convocatoria. Con el mismo se contribuirá al conocimiento de la fauna de gasterópodos terrestres de los PPNN ibéricos, se evaluará su papel como reservorio de variabilidad genética de especies endémicas y especies relictas, se valorarán diferentes hipótesis sobre los fenómenos de especiación en relación con la orografía peninsular, la historia climática y los mecanismos reproductivos de las especies, se valorará la presencia de especies invasoras, etc., generando con todo ello conocimientos valiosos y de aplicación en el uso y gestión de los PPNN.
6.6. DIFUSIÓN Y EXPLOTACIÓN EN SU CASO DE LOS RESULTADOS
Todas las propuestas deben incluir un plan de difusión y, en su caso, de explotación, de los resultados del proyecto, el cual se valorará en el proceso de evaluación de la propuesta y en el de seguimiento del proyecto. A título orientativo se indica que cabe aquí referirse a:
resultados y propuestas prácticos esperados para mejorar las actividades de gestión y conservación en la Red de Parques Nacionales.
artículos en revistas, capítulos de libros, comunicaciones o ponencias a congresos, etc.
tesis doctorales que puedan derivarse del proyecto, estancias en otros centros de I+D, etc.
propuestas que se espera presentar a convocatorias europeas, participación en redes, etc.
contratos o convenios que puedan derivarse del proyecto, patentes, etc.
Indique los títulos de las cinco revistas que considera más importantes de su área, así como si prevé publicar en ellas. Si es aplicable en su área, indique igualmente los títulos de los cinco congresos con evaluación estricta más importantes de su área y si prevé publicar en ellos.
Los resultados del presente proyectos se prevén diversos, incluyéndose resultados de taxonomía molecular, filogenia molecular, y estructura genética poblacional. En consecuencia, los ámbitos de difusión (revistas internacionales, congresos y difusión electrónica) de estos resultados serían también diversos. Entre las revistas en las cuales se prevé puedan ser publicados los resultados del presente proyecto, teniendo en cuenta las metodología utilizadas y los taxa seleccionados, destacan, por ejemplo: Molecular Phylogenetics and Evolution, Molecular Ecology, Conservation Biology, Biological Journal of the Linnean Society y Journal of Molluscan Studies. Sin embargo hay que destacar que es difícil prever la trascendencia de los resultados, la cual puede implicar la publicación en otras revistas.
Los congresos con asistencia posible son también diversos, en temáticas dispares como filogenia molecular, genética de poblaciones , malacología , zoología, conservación, etc.
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El equipo solicitante está formado por investigadores pertenecientes a distintos grupos de investigación de la USC (Grupo de Malacología Terrestre, Grupo de Sistemática Molecular, Grupo de Inferencia Estadística), que vienen trabajando conjuntamente desde el año 2000.
El Grupo de Malacología Terrestre de la USC viene trabajando en taxonomía morfológica y ecología de gasterópodos terrestres desde el año 1975, y en las líneas de helicicultura y control de plagas de gasterópodos terrestres en la agricultura desde el año 1990. Se han estudiado los caracoles de Galicia, de Castilla y León y las babosasa de la Península Ibérica. Se han dilucidado, desde el punto de vista morfológico, los problemas con el género Arion en Portugal, se ha comprobado la identidad taxonómica de las especies descritas por Torres Mínguez en Cataluña, se ha descrito una nueva familia de babosas: Papillodermidae, se han descrito 6 nuevas especies, se ha estudiado el ciclo biológico de varios Deroceras, se han hecho estudios auto ecológicos, se ha realizado el Catalogo crítico de las babosas
de la Península Ibérica y Baleares.
Como colofón de todo esto se ha realizado la Monografía de las Babosas de la Península Ibérica y Baleares, es un estudio taxonómico, morfológico y biogeográfico.
Con los datos faunísticos y con análisis edáficos de los muestreos estacionales se han estudiado las taxocenosis de gasterópodos de las zona boscosas más representativas de Galicia. Este tipo de trabajos que relacionan la malacofauna con su entorno (fitoecología), son casi inéditos en España; con ellos estamos estudiando cuáles son los factores ecológicos que intervienen en la distribución de las especies, así como las especies características que definen cada comunidad.
En la línea de helicicultura, tras varios años de estudio sobre poblaciones naturales del caracol Helix aspersa y Cepaea nemoralis en distintas zonas de Galicia, conocemos sus ciclos biológicos, dinámica de poblaciones, su régimen alimenticio a lo largo del año, y el efecto de los distintos factores ambientales y edáficos sobre la actividad y las características de los caracoles de las distintas zonas.
Se han publicado manuales prácticos de helicicultura, y se han impartido Cursos Monográficos para la formación de helicicultores, organizados por la Xunta de Galicia y por la Universidad de Santiago. De forma habitual colaboramos con la Cooperativa Gallega de Productores de Caracoles (COGAPROCA) en diversos aspectos que van desde la investigación orientada a solucionar problemas que se plantean en las explotaciones de caracoles, mejora del sistema productivo, producción de crías, organización de jornadas científico-técnicas, etc.
En la línea de control de plagas de gasterópodos terrestres en la agricultura, y en colaboración con investigadores del Grupo de Inferencia Estadística de la USC, hemos desarrollado un modelo de predicción de actividad de la babosa gris Deroceras reticulatum que permite pronosticar su nivel de actividad en cualquier época del año y de ese modo evaluar la necesidad de aplicar medidas de control
(pesticidas), realizamos de forma rutinaria experimentos de campo y de laboratorio para evaluar la eficacia de distintos tipos de pesticidas, químicos y biológicos, para el control de los daños causados por estos animales, e investigamos nuevas estrategias de control, como la lucha contra los huevos de las babosas mediante la aplicación de sustancias como los purines o extractos de plantas.
El grupo de Sistemática Molecular del Dpto. de Bioquímica e Bioloxía Molecular de la Facultad de Biología de la Universidad de Santiago de Compostela, participa desde el año 1995, fundamentalmente, en Proyectos Europeos centrados en el desarrollo de metodologías, basadas en el análisis y utilización de secuencias de DNA, para la identificación de especies marinas. Desde el año 1995 hasta el año 2001, este equipo ha contribuido en la definición de metodologías para la identificación de especies de escómbridos, gádidos, moluscos, anchoas, sardinas, salmónidos, esturiones y anguilas, en especial, en condiciones altamente desfavorables para la preservación de moléculas intactas de DNA, como los alimentos procesados, y en presencia de mezclas de distintas especies. Las metodologías se han basado en PCR (Polymerase Chain Reaction), implicando la secuenciación de diversos genes, principalmente mitocondriales, de una amplia variedad de especies y el análisis de esas secuencias para la identificación de muestras desconocidas, basándose en la utilización de metodologías de reconstrucción filogenética. Las secuencias obtenidas han permitido diseñar sistemas alternativos, rápidos, sencillos y de bajo coste, de discriminación de especies basados en PCR-RFLP y PCR-SSCP. La aparición de nuevas metodologías, basadas en PCR en tiempo real y DNA-chips (o DNA microarrays), ha dirigido los esfuerzos de este equipo, a su aplicación con fines de identificación a aquellas especies, previamente discriminadas por las metodologías arriba citadas. Las ventajas de la PCR en tiempo real, están siendo comprobadas en la actualidad, con la eficacia de los sistemas diseñados y validados de detección de en varias especies basadas en el uso de sondas TaqMan ®. Paralelamente a esta investigación aplicada, se llevan a cabo estudios de sistemática, filogenia y filogeografía de diversas especies, los cuales permiten obtener importantes datos para abordar los problemas de identificación de especies, problemáticas taxonómicas y para la reconstrucción de la historia evolutiva de los organismos.
Destacan así los estudios de la filogenia y genética poblacional de las especies de la Familia Escombridae (atunes, bonitos y caballas), de especies de peces planos, de las diferentes especies del género Merluccius, de moluscos y del percebe.
Junto a estos estudios filogenéticos y de estructura genética poblacional sobre organismos marinos, se han llevado a cabo estudios filogeográficos acerca de diferentes especies de babosas del género Arion. Estos estudios han demostrado la existencia de errores taxonómicos, la existencia de especies relictas en los Pirineos y áreas adyacentes, y la monofilia de las especies endémicas de la península ibérica. Los recientes estudios iniciados en este laboratorio sobre mamíferos, se centran en el análisis poblacional del zorro, Vulpes vulpes, en el noroeste peninsular, lo que ha permitido la caracterización genética de una población con un elevado grado de aislamiento en las áreas de montaña de la provincia lucense, y del corzo Capreolus capreolus, dentro de un Convenio con la Consellería de Medio Ambiente para el genotipado y evaluación de la estructura genética poblacional en el noroeste peninsular.
La disponibilidad de un número elevado de muestras de tejidos de aves muertas por
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En definitiva, el presente proyecto constituye una continuación de líneas de investigación en las que todos los investigadores participantes cuentan con sobrada experiencia, así como con la infraestructura necesaria para su desarrollo.
