2° LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA I

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 Que el alumno aprenda a manejar el material utilizado en un laboratorio deQue el alumno aprenda a manejar el material utilizado en un laboratorio de microbiolog

microbiología ía y y parasitologíaparasitología..

II.- MARCO TEORICO II.- MARCO TEORICO

Algunos de los instrumentos más utilizados en los laboratorios, son elaborados de Algunos de los instrumentos más utilizados en los laboratorios, son elaborados de vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dióxido de silicio, bajo vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dióxido de silicio, bajo álcali, óxido bórico y vestigios de otros óxidos, lo que condiciona su escaso coeficiente álcali, óxido bórico y vestigios de otros óxidos, lo que condiciona su escaso coeficiente de

de dildilataatacióción, n, tentenieniendo do una una gragran n aplaplicaicacióción n en en la la fabfabricricaciación ón de de matmaterierialeales s dede laboratorio, uno de los mas conocidos es .el vidrio PYREX. Así como los elaborados laboratorio, uno de los mas conocidos es .el vidrio PYREX. Así como los elaborados de distintos metales pesados como platino,' mercurio, aluminio, cobre que les otorgan de distintos metales pesados como platino,' mercurio, aluminio, cobre que les otorgan características como buenos conductores del calor o por que al medio ambiente son características como buenos conductores del calor o por que al medio ambiente son muy manejables sin alterar

muy manejables sin alterar su composición.su composición.

Instrumentos de vidrio como la probeta, la pipeta o el tubo de ensayo, y otros como el Instrumentos de vidrio como la probeta, la pipeta o el tubo de ensayo, y otros como el me

mechcherero o BuBunsnsenen, , soson n de de lolos s mámás s cocomumunenes s en en la la mamayoyoríría a de de lolos s lalaboboraratotoririosos científicos.

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Constituye una de las principales herramientas para los fines que se persigue en el Constituye una de las principales herramientas para los fines que se persigue en el laboratorio. Los requisitos necesarios para que un material sea un "buen material", laboratorio. Los requisitos necesarios para que un material sea un "buen material", son:

son: 1.

1. Ser deSer de buena calidad; es decir que no sean buena calidad; es decir que no sean fácil de quebrarse.fácil de quebrarse. 2.

2. Ser Ser de color neutro.de color neutro. 3.

3. PosePoseer er resiresistencstenciaia a a lalas s acaccicionones es memecácáninicacass y a y a lalas s vavaririacacioioneness dede temperatura

temperaturaasí como también a losasí como también a los álcali-libre (no se raje).álcali-libre (no se raje). 4.

4. Poseer bajo coeficiente dePoseer bajo coeficiente de dilatación (que no pierda su forma).dilatación (que no pierda su forma).

Tubos de Ensayo: Tubos de Ensayo:

Se emplean como recipientes de medios de cultivo. Se emplean como recipientes de medios de cultivo. -- TTuubboos s dde e pprruueebbaa

Deben ser de vidrio neutro, paredes gruesas y equilibradas, de preferencia sin Deben ser de vidrio neutro, paredes gruesas y equilibradas, de preferencia sin rebordes para facilitar el

rebordes para facilitar el taponamiento.taponamiento. De 16 x 150 mm

De 16 x 150 mm De 15 x 125 mm De 15 x 125 mm De 13 x 100 mm

De 13 x 100 mm para estudio de para estudio de fermentación –trabajos mecánicosfermentación –trabajos mecánicos De 10 x 75 mm

De 10 x 75 mm pruebas, estudios pruebas, estudios serologicos.serologicos. -- TTuubboos s dde e RRoouuxx

Con escotadura de 4 cm. de fondo, de 25 x

Con escotadura de 4 cm. de fondo, de 25 x 200 mm para200 mm para -- TTuubboos s dde e cceennttrrííffuuggaa

De vidrio, pueden ser cónicos o

De vidrio, pueden ser cónicos o cilíndricos, siempre de paredes gruesas,cilíndricos, siempre de paredes gruesas, De

De paredes gruesas, por estar inmersos rotando a alta paredes gruesas, por estar inmersos rotando a alta velocidad.velocidad.

De polietileno, se utiliza para centrifugaciones a altas velocidades, de medidas De polietileno, se utiliza para centrifugaciones a altas velocidades, de medidas semejantes a los

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Cápsulas o Placas Petri: Cápsulas o Placas Petri:

Cajas cilíndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el Cajas cilíndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el cultivo y aislamiento de microorganismos. Las más usadas son las de 10, 15 ó cultivo y aislamiento de microorganismos. Las más usadas son las de 10, 15 ó 20 mm x 100 mm.

20 mm x 100 mm.

Cultivos bacterianos Cultivos bacterianos

Colonias de bacterias Escherichia coli (más grande, rosa) y Proteus vulgaris (más Colonias de bacterias Escherichia coli (más grande, rosa) y Proteus vulgaris (más pequeña, de color castaño) que crecen juntas en una placa Petri. En circunstancias pequeña, de color castaño) que crecen juntas en una placa Petri. En circunstancias

no

normrmalales es esestatas s babactctereriaias s soson n ininofofenensisivavas s y y hahabibitatan n en en el el ininteteststinino o huhumamanono fav

favoreorecieciendo ndo la la digdigestestiónión, , si si biebien n puepueden den conconververtirtirse se en en patpatógógenaenas s y y proproducducir ir inf

infecceccioniones es del del tratracto cto uriurinarnario. io. Los Los ciecientíntíficficos os y y médmédicoicos s llellevan van a a cabcabo o culcultivtivosos bac

bacterterianianos os y y esestudtudian ian sus sus carcaracacterterístiísticas cas con con el el fin fin de de adqadquiruirir ir conconociocimiemientontoss respecto a las

respecto a las enfermedades bacterianenfermedades bacterianas y as y su prevención.su prevención. Placas Brewer:

Placas Brewer:

Para el cultivo y aislamiento de microorganismos anaeróbicos. Son idénticas a Para el cultivo y aislamiento de microorganismos anaeróbicos. Son idénticas a las anteriores, con excepción de las tapas que además de ser

las anteriores, con excepción de las tapas que además de ser mas pesadasmas pesadas están adaptadas para crear anaerobiosis.

están adaptadas para crear anaerobiosis.

Pipetas: Pipetas:

Tubos cilíndricos delgados terminados en punta, graduados al décimo o al Tubos cilíndricos delgados terminados en punta, graduados al décimo o al centésimo de mI. Se emplean en la medición de pequeñas cantidades de centésimo de mI. Se emplean en la medición de pequeñas cantidades de líquidos. Pueden ser:

líquidos. Pueden ser:

Serológicas

Serológicas: son terminales y con capacidad de 0.1 a 25 : son terminales y con capacidad de 0.1 a 25 ml.ml. Volumétricas

Volumétricas_,, se reconocen por presentar una dilatación bulbosa central conse reconocen por presentar una dilatación bulbosa central con unas marcas de aforamiento conocida, en el extremo proximal angosto de la unas marcas de aforamiento conocida, en el extremo proximal angosto de la pipeta, se les llama también pipetas de

pipeta, se les llama también pipetas de bolabola, las medidas más conocidas son, las medidas más conocidas son de 10, 25, 50 y

de 10, 25, 50 y 100 ml.100 ml.

Pipetas Pasteur: Pipetas Pasteur:

Confeccionad

Confeccionados de varillas de vidrio de diámetro de 4 x 20mm de 30 os de varillas de vidrio de diámetro de 4 x 20mm de 30 ó 40cm deó 40cm de longitud. La calidad de vidrio debe facilitar reblandamientos a la acción directa longitud. La calidad de vidrio debe facilitar reblandamientos a la acción directa de

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Matraces y Erlenmeyers: Matraces y Erlenmeyers:

Re

Recicipipienentetes s de de foformrma a cócóninica ca y y cucuelello lo cocortrto, o, vovolulumémétrtricicos os útútililes es papara ra lala preparación y almacenamiento de soluciones, colorantes, reactivos, medios de preparación y almacenamiento de soluciones, colorantes, reactivos, medios de cultivos, etc.

cultivos, etc.

Matraces Aforados o Fiolas Matraces Aforados o Fiolas::

Recipientes de forma esférica y base plana. Están calibr4ados a medidas Recipientes de forma esférica y base plana. Están calibr4ados a medidas exactas mediante un foro en la parte media del cuello del recipiente en el que exactas mediante un foro en la parte media del cuello del recipiente en el que se

se inindidica ca la la memedididada. . Se Se ememplpleaean n papara ra la la prprepepararacacióión n de de rereacactitivovos s dede preferencia solución buffer.

preferencia solución buffer.

Los matraces Erlenmeyer son recipientes de vidrio de forma

Los matraces Erlenmeyer son recipientes de vidrio de forma troncocónica quetroncocónica que se utilizan en el

se utilizan en el laboratorio para medir o contener líquidos.laboratorio para medir o contener líquidos. Kitasato:

Kitasato:

Son frascos muy parecidos a los

Son frascos muy parecidos a los Erlenmeyers, se caracterizan por sus paredesErlenmeyers, se caracterizan por sus paredes gruesas y por una tubuladura lateral en el cuello, la misma que sirve de gruesas y por una tubuladura lateral en el cuello, la misma que sirve de tabulación lateral para hacer el vacío. Se

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Probetas: Probetas:

Recipientes graduados de forma cilíndrica y capacidad variable, con base para Recipientes graduados de forma cilíndrica y capacidad variable, con base para la esterilidad. Pueden estar graduada.

la esterilidad. Pueden estar graduada.

Va

Vasos de sos de Precipitación o Beacker:Precipitación o Beacker:

Re

Recicipipienentetes s cicilílíndndriricocos s y y cocortrtosos, , cocon n ununa a dedeprpresesióión n en en el el mamargrgen en de de lala bocadura. Su utilidad es amplia. El vidrio debe ser resistente al calor.

bocadura. Su utilidad es amplia. El vidrio debe ser resistente al calor.

Frascos viales para Hemocultivos, vacunas, Cultivos

Frascos viales para Hemocultivos, vacunas, Cultivos de Tejido:de Tejido:

Son de vidrio neutro, resistentes al calor, transparentes y con tapas de rosca, Son de vidrio neutro, resistentes al calor, transparentes y con tapas de rosca, Con capacidad para

Con capacidad para 50ml y 100ml50ml y 100ml blancos o de color ámbar pueden utilizarseblancos o de color ámbar pueden utilizarse par

para a la la resreserverva a de de solsoluciucioneones s y y medmedios ios de de culcultivtivo o en en stostock, ck, prepreviaviamenmentete taponados con algodón esterilizados,

taponados con algodón esterilizados,

Perlas de Vidrio Neutro: Perlas de Vidrio Neutro:

Se emplean para desfibrilar sangre y para recoger cosechas microbianas en la Se emplean para desfibrilar sangre y para recoger cosechas microbianas en la preparación de antígeno

preparación de antígenos, De 4 a s, De 4 a 6 mm.6 mm. Varilla: de Vidrio Macizo

Varilla: de Vidrio Macizo

•

• MATERIMATERIAL AL DE OTRA DE OTRA NATURALENATURALEZAZA

Vástago de metal con una cubierta de ebonita aislante del calor y en

Vástago de metal con una cubierta de ebonita aislante del calor y en el extremoel extremo proximal una tuerca para insertar el alambre de plástico

proximal una tuerca para insertar el alambre de plástico o necron,o necron,

Asa de Kolle Asa de Kolle

Varillas metálicas o de vidrio que llevan en un extremo alambre de platino; Varillas metálicas o de vidrio que llevan en un extremo alambre de platino; cuando el alambre es recto se llama

cuando el alambre es recto se llama NecrónNecrón y cuando el alambre forma uny cuando el alambre forma un anillo de diámetro variable en su extremidad toma el nombre de asa.

anillo de diámetro variable en su extremidad toma el nombre de asa. Espátulas de Metal con mango de madera

Espátulas de Metal con mango de madera Estuches cilíndricos o Cubículares

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•

• EQUIPOS DE LABORATORIOEQUIPOS DE LABORATORIO

Potenciómetro: Potenciómetro:

Miden el pH de los medios de cultivo y de las solucione buffer. Constituido de Miden el pH de los medios de cultivo y de las solucione buffer. Constituido de un par de

un par de electrodos sensible a concentraciones de hidrogenioneselectrodos sensible a concentraciones de hidrogeniones, conectados, conectados a un potenciómetro que indique las mediciones, Los potenciómetros emplean a un potenciómetro que indique las mediciones, Los potenciómetros emplean un electrodo de vidrio, unido a un electrodo de calomel como estándar.

un electrodo de vidrio, unido a un electrodo de calomel como estándar.

Centrífugas: Centrífugas:

Se utiliza en

Se utiliza en la separación de sólidos suspendidos en líquidos. Hay la separación de sólidos suspendidos en líquidos. Hay centrífugascentrífugas de tamaño y velocidades variables, la velocidad, se mide en revoluciones por de tamaño y velocidades variables, la velocidad, se mide en revoluciones por min

minutouto, , La La velvelociocidad dad a a la la cuacual l sedsedimeimentantaran ran lalas s parpartíctícululas as en en un un líqlíquiduidoo dependen de varios factores:

dependen de varios factores: Tamaño de la partícula.

Tamaño de la partícula. El peso de la partícula. El peso de la partícula. La viscosidad del líquido. La viscosidad del líquido. La fuerza

La fuerza gravitacionagravitacional.l.

Ultra centrifugación; para obtener alteraciones elevadas (mayor o igual a 100 Ultra centrifugación; para obtener alteraciones elevadas (mayor o igual a 100

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Laboratorio de Micr

Laboratorio de Microbiología obiología I- Materiales de Laboratorio: RecI- Materiales de Laboratorio: Reconocimiento, Utilidad y Limpiezaonocimiento, Utilidad y Limpieza

(mitocondrias, etc.), la separación se debe efectuar en

(mitocondrias, etc.), la separación se debe efectuar en gradiente de densidad.gradiente de densidad.

Incubadoras y Hornos Incubadoras y Hornos

Los hornos son capaces de mantener t° mas de 100°c y las incubadoras Los hornos son capaces de mantener t° mas de 100°c y las incubadoras menos de 100° c

menos de 100° c .Los hornos no tienen salida de .Los hornos no tienen salida de aire, las incubadoras si.aire, las incubadoras si.

Baños de agua Baños de agua

T

También llamados BAÑO MARIA tienen salida ambién llamados BAÑO MARIA tienen salida de aire de aire presentan un termostatopresentan un termostato qu

que e reregugula la la la tetempmpererataturura a dedel l agagua ua prpresesenenta ta un un pipiso so papara ra cocololocacar r loloss materiales que se desea.

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Refrigeradoras y congeladoras Refrigeradoras y congeladoras

Son incubadoras de temperatura fría menor de cero grados y los frigideres de Son incubadoras de temperatura fría menor de cero grados y los frigideres de dos a siete grados.

dos a siete grados.

Filtración Filtración

Sirve para separar materiales líquidos de sólidos un ejemplo los FITROS DE Sirve para separar materiales líquidos de sólidos un ejemplo los FITROS DE MEMBRANA.

MEMBRANA.

Espectrofotómetro Espectrofotómetro

Se puede observar los colores de los alimentos con una intensidad que el Se puede observar los colores de los alimentos con una intensidad que el

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Autoclave Autoclave

Funciona por las pres

Funciona por las presiones que se dará a una mayor tempeiones que se dará a una mayor temperatura ratura logrando sulogrando su esterilización como por ejemplo las

esterilización como por ejemplo las conservas.conservas.

Horno Pasteur Horno Pasteur

Es como una mufla que tie

Es como una mufla que tiene tres paredne tres paredes es y la cubierta es de asbey la cubierta es de asbesto sirvesto sirve para la esterilización por el calor seco.

para la esterilización por el calor seco.

Estufas de aire caliente Estufas de aire caliente

Al igual que el anterior es utilizado en la esterilización por el calor seco. Tienen Al igual que el anterior es utilizado en la esterilización por el calor seco. Tienen solo dos paredes y son de forma cúbica.

solo dos paredes y son de forma cúbica.

Aparato de arnolo koch Aparato de arnolo koch

Es un tipo de este

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III.-MATEIAL PARA LA PRÁCTICA III.-MATEIAL PARA LA PRÁCTICA



 Pipetas de Pipetas de diferentes graduaciones.diferentes graduaciones.



 Asas Bacteriológicas de aro y punta.Asas Bacteriológicas de aro y punta.



 Caja de Petri.Caja de Petri. 

 Tubos de ensayo con tapón de rosca y tapón de algodón.Tubos de ensayo con tapón de rosca y tapón de algodón. 

 Probeta.Probeta.



 Matraz Erlenmeyer.Matraz Erlenmeyer.



 Vaso de precipitado.Vaso de precipitado.



 Mechero Bunsen.Mechero Bunsen.



 Torundas de algodón.Torundas de algodón.

IV. EXPERIMENTO IV. EXPERIMENTO

Siga cada uno de los pasos como lo indica su Profesor, Técnico o instructor. Siga cada uno de los pasos como lo indica su Profesor, Técnico o instructor. 1

1.. EEnncciieenndda a eel l MMeecchheerroo.. 2.

2. Esterilice su Esterilice su asa asa en en el el mechero mechero hasta hasta que que este este al al rojo rojo vivo vivo y y enfríe enfríe en en el el áreaárea de seguridad.

de seguridad. 3.

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V.- RESULTADO V.- RESULTADO

Obv

Obviamiamentente, e, hay unohay unos s cieciertortos s tiptipos de os de expexperierimementantaciocionenes s que reaque realizlizamoamos s oo determinamos con ma

determinamos con mas frecuencia que otras. Sin embas frecuencia que otras. Sin embargo, el personal rgo, el personal del Laboratoriodel Laboratorio esta siempre dispuesto a considerar nuevos retos. No pretendemos ser capaces de esta siempre dispuesto a considerar nuevos retos. No pretendemos ser capaces de realizar cualquier tipo de determinación, pero prometemos considerar, desde nuestra realizar cualquier tipo de determinación, pero prometemos considerar, desde nuestra experiencia

experiencia, todas las posibles altern, todas las posibles alternativas ativas es por eso lo imprescindes por eso lo imprescindible de reconoceible de reconocer r todo

todos s los los matematerialeriales, s, su su utilutilidad idad y y su su debidebida da limplimpiezaiezapara para cumpcumplir lir con con nuesnuestrostros propósitos.

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VI.- CONCLUSIONES VI.- CONCLUSIONES

•

• Es muy importante haber reconocido todos los materiales a utilizar en elEs muy importante haber reconocido todos los materiales a utilizar en el

laboratorio y saber su utilidad para la

laboratorio y saber su utilidad para la práctica.práctica.

•

• También era necesario para prevenir cualquier accidente no provocado y noTambién era necesario para prevenir cualquier accidente no provocado y no

lamentar consecuencias. lamentar consecuencias.

•

• Una de las conclusiones es haber reconocido algunos reactivos que se debeUna de las conclusiones es haber reconocido algunos reactivos que se debe

te

tenener r cucuididadado o y y cocogegerlrlo o cocon n lolos s guguanantetes s papara ra prprevevenenir ir alalgúgún n titipo po dede contaminación.

contaminación.

•

• Haber reconocido los equipos a utilizar como la centrifuga, el potenciómetro yHaber reconocido los equipos a utilizar como la centrifuga, el potenciómetro y

la estufa de aire

la estufa de aire caliente.caliente.

•

• Conocer la Conocer la calidad de calidad de las principlas principales herramales herramientas a utilientas a utilizar izar como los como los tubos detubos de

ensayo, las pipetas, las placas petri, los

ensayo, las pipetas, las placas petri, los matraces, etc.matraces, etc.

•

• Saber desinfectar las placas cuando se encuentren con algunas bacterias uSaber desinfectar las placas cuando se encuentren con algunas bacterias u

hongos o ácidos, también saber desinfectar las manos y los materiales a hongos o ácidos, también saber desinfectar las manos y los materiales a utilizar.

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VIII.- CUESTIONARIO VIII.- CUESTIONARIO

1. ¿Para que sirve una caja de

1. ¿Para que sirve una caja de Petri?Petri?

Son utilizadas en bioquímica para llevar a cabo

Son utilizadas en bioquímica para llevar a cabo cultivos de microorganismocultivos de microorganismos.s.

2. ¿Cuál es la

2. ¿Cuál es la finalidad de utilizar materiales estériles en el laboratorio?finalidad de utilizar materiales estériles en el laboratorio?

El propósito del proceso de esterilización es destruir la contaminación microbiana de El propósito del proceso de esterilización es destruir la contaminación microbiana de los productos no estériles. La destrucción microbiana mediante agentes físicos o los productos no estériles. La destrucción microbiana mediante agentes físicos o químicos sigue una ley exponencial, que nos permite calcular la probabilidad de químicos sigue una ley exponencial, que nos permite calcular la probabilidad de su

supepervrvivivenencicia a de de un un mimicrcroooorgrgananisismo mo a a papartrtir ir de de la la dodosisis s susumimininiststrarada da en en elel tratamiento. La probabilidad de supervivencia está en función del número y tipos de tratamiento. La probabilidad de supervivencia está en función del número y tipos de microorganismos (carga biológica), de la letalidad del proceso de esterilización y en microorganismos (carga biológica), de la letalidad del proceso de esterilización y en algunos casos, del medio ambiente en el que se encuentren los microorganismos algunos casos, del medio ambiente en el que se encuentren los microorganismos durante la

durante la esterilizaciónesterilización..

3. ¿De que esta formada el

3. ¿De que esta formada el asa bacteriológica?asa bacteriológica?

Son varillas metálicas o de vidrio que

Son varillas metálicas o de vidrio que llevan de un extremo alambre de platino; cuandollevan de un extremo alambre de platino; cuando El alambre es recto se llama aguja y cuando el alambre forma un anillo de diámetro El alambre es recto se llama aguja y cuando el alambre forma un anillo de diámetro variable en su extremidad tómale nombre de asa.

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