Estudio cariotípico en Dyssochroma viridiflorum (Solanaceae) - Sociedad Argentina de Botánica

Bol. Soc. Argent.Bot. 35(3-4): 227

-

236.2000

ESTUDIO

CARIOTíPICO

EN

DYSSOCHROMA

VIRIDIFLORUM (SOLANACEAE)*

M.CRISTINA ACOSTA1 y EDUARDOA.MOSCONE12

.

Summary:Karyotype study in Dyssochroma viridiflorum(Solanaceae).The somatic chromosomesof Dyssochromaviridiflorum(Sims) Miers(2n=2x=24)are examined byclassical and silverstaining for

the first time. Thekaryotype of this species is symmetricalandcomposed by10mpairs+ 1msmpair + 1smpair;twopairs(no.4and9) have activerDNAloci (AgNORs) and attached terminalsatellites inthe

shortarms. AgNORsof metaphasechromosomes and nucleoli ofinterphasenuclei varyinnumber and size, the satellites being polymorphic.Mitotic abnormalitiesinroot tipsrelatedtotheseedsagewere found.Theresultsarecompared with previousreportsforthe other species ofthegenus,D,longipes

(Sendt.) Miers. Data show some karyotype differences between both species. KeyWords:Solanaceae, Dyssochroma viridiflorum, karyosystematics,AgNORs.

Resumen:Seestudiancon tinciónclásicaybandeo AgNORmetafasessomáticasynúcleos¡ntetfásicos

de Dyssochroma viridiflorum (Sims)Miers (2n= 2x=24),especie nativa de Brasilqueseexamina cariológicamentepor primeravez.Elcariotipo dé esta entidadse componede 10 pares m + 1parmsm + 1parsm; dospares (n° 4 y 9)llevansitios activosdeADNr(AgNORs) enlos brazos cortoscon satélites

terminales. LosAgNORs decromosomasmetafásicosynucléolosde núcleos interfásicosvaríanen númeroytamaño,los- satélitessonpolimórficos.Fueron encontradasdiversasirregularidadesmitóticas enápicesradicales relacionadasa laedad de lassemillas. Se discuten los resultadoscon otros previos enel restante miembro del género, D. longipes(Sendt.) Miers. Los datosaportados señalanalgunas

diferencias cariotípicas entre ambasespecies.

Palabras Clave: Solanaceae,Dyssochroma viridiflorum, cariosistemática, bandeo AgNOR.

INTRODUCCIóN

cromosómicodesusintegrantesexceptoD. longipes,

cuyo cariotipo fue examinado continción clásica

(Piovano,1989).

En el presente trabajo se analizan los

cromosomassomáticosde D. viridiflorum,especie hemiepífitaarborescente,mirmecófila,de grandesflo¬

res verdespolinizadas por quirópterosque,al ali¬ mentarse de sus frutos, dispersan las semillas (cf. Cocucci,1999; CastroVerçoza&Freire de Carvalho, 2000).Fuéempleadounmétodode tinción clásicay unprocedimiento de bandeo AgNOR,esteúltimo

paradescubrir los loci de ADNribosomal activosen

la formación delnucléolo.Deestemodo,seespera

aportardatosparala caracterización cromosómica de D.viridiflorum,conel fin de arrojar luz sobresus

relacionesconelrestanteintegrante del género, D. longipes, y conotros miembros de la familia cariológicamente explorados. Enúltimainstancia,se

intenta contribuir alconocimiento de las relaciones fílogenéticasytendencias de evolución cromosómica

enSolanaceae. DyssochromaMierses unode los siete represen¬

tantesde la tribu JuanulloeaeHunz.(Solanaceae), junto a Juanulloa R. et P.,Ectozoma Miers, MerinthopodiumDonnell Smith, Markea L. C. Richard, Schultesianthus Flunz.yHawkesiophyton Hunz.,todos habitantes del neotrópico.Setratadeun pequeño género desólodosespecies, D. longipes (Sendt.) MiersyD.

_viridiflorum

(Sims)Miers,con

distribución restringidaaunospocos estados brasi¬ leños de lamataatlántica (Hunziker,1979).

Cabe destacarqueJuanulloeae prácticamenteno ha sido consideradaenestudios cariológicos, alpun¬

to que aún no se conoce siquiera el número

* Dedicado al Prof.Dr. Juan H. Hunzikerenocasióndesu

75°aniversario.

'Instituto Multidisciplinario9eBiología Vegetal(IMBIV),

CONICET-UniversidadNacionalde Córdoba, Casilla de

Correo495,5000 Córdoba,Argentina.

2_{Miembro de la Carrera delInvestigadorCientífico,CONICET.}

morfológicos, conforme alíndicebraquial creciente, y losm enparticularsehan ordenado acordea su

longituddecreciente.

Enelcasodelos satélitesseutilizólaterminología deBattaglia(1955)conalgunasmodificaciones,se¬

gúnse

señala

acontinuación:microsatélite,dediáme¬

tro menorqueel diámetrodelcromosomay de longi-Lasobservaciones fueronefectuadasencélulas

**

inconspicua;macrosatélite,dediámetro igualque el diámetro delcromosomay de longitud inferiorala mitad del brazocromosómicoque loporta; satélite

MATERIAL

YMÉTODOS

Elmaterialexaminado procedede:

BRASIL.EstadoRío deJaneiro:JardínBotánico de Río deJaneiro, 14-III-1999, leg:L. d’ A. Freire de Carvalho (CORD 779).

meristemáticasdeápicesradicales (5-10mm)de semi¬ llas.Losápicesfueronpretratadosconsoluciónacuo¬

sasaturada deparadiclorobenceno por 3 % hsatem-

linear>

de >gual diámetroylongitudsuperioralamitad

peraturaambiente (22-24 °C) y,luego,fijadosen una delbrazocorrespondiente.La asimetría canotípica fue

mezcla 3:1 dealcoholetílico 95% y ácido acético gla¬

cialporunmínimode 12 hs.Como,coloracióncon- intracromosómica

(A,)

eintercromosómica

(A3)

pro¬

puestos por Romero Zarco (1986), y la clasificación de Stebbins (1971);estaúltimaconsidera la propor-de carmín acético 2% yfueronhechospermanentes ciónde pares cromosómicosconr>2y larelación (R)

remoción del cubreobjetos mediante entrelalongituddelpar mayoryelmenor delcomple¬ mento.

cuantificada mediante los índices de asimetría

vencionalseempleóla tinción de Feulgen. Los pre¬ paradosseefectuaron poraplastamientoen una gota

por

congelamientocon

C02,

utilizándoseEuparalcomo

mediode montaje. Fueron consultados,los atlas de números

Paralarealización de bandeo AgNORsellevaron cromosómicosenplantas, incluido el

correspondien-acabo preparaciones mediantedigestiónenzimática te

Período

1994/95y The Kewrecordoftaxonomic delmaterial de acuerdoaSchwarzacheretal.(1980). literature” hasta el fascículo 2 (2000).

Fueaplicadoelmétodo de bandeo AgNOR, que tiñe positivamenteconplatalas regiones organizadoras nucleolares (NORs) activas de loscromosomas

metafásicos y los nucléolos de los núcleos

interfásicos.Laimpregnaciónargénticasellevóa Tinciónconvencional

.

cabomedianteelprocedimiento Ág-Ide Bloom & Goodpasture(1976)conlos cambios sugeridos por Kodamaeía/. (1980).

Setomaronfotomicrografíascon unmicroscopio individuoÿ.Elidiograma (Fig. 2) está basadoenlas Leica DMLB,utilizándose film Agfa PanISO 25, ya longitudes cromosómicaspromedio, según los datos partir deellasseconfeccionaronloscartogramas.Para quese presentan enla Tabla 1

.

Elcariotipoestácompuestopor10 paresm(n°

RESULTADOS

EnDyssochroma

_viridiflorum

sehalló 2n=24(Fig. 1 A)en55placasmetafásicas, quecorrespondena30

el análisis morfométrico delcariotiposeefectuaron

medicionesaloscromosomasreferidasalalongitud 1-10),unpar msm(n° 11),y unparsm(n° 12).Hay del brazocorto,largoytotalen8placasmetafásicas gradualesdiferenciasde tamañoentrelos distin-teñidas conFeulgenpertenecientesa5 individuos, tospares del

complementó,

siendoel par n° 1 el calculándoseencadacasola media y la desviación más largo (4,44 pm) y eln° 10 elmáscorto(3,09 pm). estándar,datosconlosque seelaboróel idiograma. El índicebraquialmayor corresponde alpar n° 12 (r= Ningunade las metafases seleccionadas para las 1,93) y elmenoralpar n°3 (r= 1,08).Enelidiograma, mediciones presentósatéliteslineares (cf. infra).Para losparesn°1 al 3 y n° 5 al 8 hansido agrupadosya ladescripciónyordenamiento de loscromosomas se quelaescasa diferencia de tamaño y formaentre empleó la nomenclatura de Levanetal. (1964),con ellos haceimposiblesucorrectaindividualización. las modificaciones introducidasparaelíndicebraquial No obstante, enla Tabla 1 todos loscromosomas

(r=_{razónentre los brazos)por Schlarbaum &} hansido ordenados deapares conel fin deponderar Tsuchiya (1984), del siguiente modo: m o la variación de las longitudes cromosómicas indivi-metacéntricos (r = _{1,00-1,29), msm o} meta- duales.

La longitudtotal del complementohaploide submetacéntricos (r = 1,30-1,69), sm o

submetaeéntricos(r= 1,70-3,00). Enelidiograma los (LTCH)es de 45,35 pm, lalongitudcromosómica

A

B

if

c

% 4

w

:

*

f

%

_g

_if

%

I

•i»

ISS

_v

c

0

/

L

'V

/J

t

*

Fig. 1. Metafasesmitóticasde Dyssochroma_viridiflorum(2n=24).A: Célulaconelcomplementonormal. B: Célulaconla mayoríade sus cromosomas fragmentados. C:Célulaconsatéliteslineares -yuncromosomapequeñoreestructurado.D: Célula con un cromosomadicéntrico.LasflechasenA y C señalan organizadores nucleolares, en D,centromeres;las cabezas de flechaindican satélites lineares y elasterisco,uncromosomareestructurado.Laescala vale 5 pm para todas las figuras.

msm sm

m

9 11 12

5

-

8 10

4 1

-

3

Fig. 2.Idiograma deDyssochroma_viridiflorum(2n.= 24). La escala vale 5 pm.

Tabla 1.Medidas decromosomassomáticosde Dyssochromaviridiflorum.Abreviaturas: ds=desviación estándar, p=longitud

del brazocorto,q=longituddel brazo largo, c=longitudtotal del cromosoma, LTCH=longitud total delcomplemento haploide,r =índice braquial, m=metacéntrico,msm=meta-submetacéntrico,sm=submetacéntrico,ÑOR=regiónorgani¬ zadoranucleolar.

Longitud

cromosómicarelativa

(%deLTCH) Longitudescromosómicas absolutas:

Rangoy media+ds

r Tipo (q/p) Par c P q

5,21-3,76

4,44₊0,53.

2,47-1,77 2,08₊0,24

2,85-1,99

2,36 +0,30 9,79 1,14

1 m

4,87-3,43 4,22 +0,49 2,41- 1,63

1,97₊0,25

2,63-1,80

2,25₊0,26

1,14 9,31

.2 m

4,75- 3,28

4,06₊0,52 2,31-1,60

1,95 + 0,27

2,44-1,68 2,11₊0(25

1,08 8,95

3 m

2,56- 1,39 1,92₊0,42

2,79- 1,73 2,09 + 0,31

5,35-3,12

4,01 + 0,69

m(ÑOR)

1,09 8,84

4

2,07-1,47 1,80₊0,20

2,50- 1,83

2,13₊0,24

4,54- 3,30 3,93₊0,43

1,18

8,67

5 m

4,46- 3,01

3,81₊0,49 2,02-1,40

1,69₊0,24

2,47-1,61

2,12₊0,31

8,40 1,25

6 m

2,04- 1,40

1,74₊0,22

2,27-1,44 1,92 + 0,29

4,24-2,84

3,66 +0,51

8,07 1,10

7 m

1,94-1,37

1,64₊0,21

2,18- 1,47

1,91₊0,24

4,12-2,84

3,55₊0,44

1,17

7,83

8 m

3,87-2,71

3,34₊0,40 2,03-1,20

1,55₊0,29

2,09-1,51

1,79₊0,19

m(ÑOR)

7,36 1,16 9

2,09-1,34

1,66 +0,24

3,77- 2,45

.

3,09₊0,43 1,68-1,11

1,43 + 0,20

6,81 1,16

10 m

1,56-1,09 1,37 + 0,15

2,39 - 1,80 2,12 + 0,22

3,95-2,89

3,49₊0,37 7,70 1,55

11 msm

•1,71- 0,99

1,28₊0,21

2,85-1,92 2,47₊0,35

4,56-2,91

3,75₊0,53

1,93 8,27

12 sm

0,25. Los índices de asimetría calculadosalcanzaron poseenuníndicebraquialmenor a2. lossiguientes valores: A=_0,173yA= _{0,101. Ade¬}

más, el cariotipo estudiadoperteneceala categoría de nucleolares(NORs) y satélites terminales asociados asimetría 1Adel sistema de Stebbins (1971) yaque, enlos brazoscortos, cuyavisualización fue posible

por unlado, R=_{1,44 y,por otro,}todoslospares enel 70% de lasplantas.analizadas,dondeel 23% de

las metafases revisadas posee al menos tres interfásicos se observó unnúmero variable de

cromosomas conNORsysatélitesy, de éstas, el 30% micronucleolos(Fig. 4 C), quepuede llegara12,

sien-muestra cuatro.Se observó variaciónenel tamaño do 5 elguarismomásfrecuente. Enla mayoría de

las

de los satélites entrehomólogos,célulase indivi- plantas revisadas el número máximo de nucléolosen

duos (Fig. 1 A, C), presentándose los siguientes ti- interfase es mayor que el de AgNORs enlos

pos:microsatélites (enel 81% delos homólogoscon cromosomasmetafásicos. satélitesvisibles examinados),macrosatélites(12%)

ysatéliteslineares(7%).

LasAgNORs seubicanenposición

terminal

o

subterminal de los brazoscortos.En el últimocaso,

Fueronencontradas diversas irregularidades hay satélites de tamaño variable (a menudo mitóticasen15individuos,entreellassedestaca la microsatélites) que,aveces,setiñen diferencialmente fragmentaciónseverade loscromosomas enmetafase connitratodeplatadel mismo modo que las NORs, (Fig. 1 B) (80%de lasplantasconanomalías). Tam- perosóloen suparteproximal.El75% de las metafases biénseobservóenelmismo estadio lapresencia de examinadas exhibe AgNORs de similar tamaño y,enel

cromosomas reestructurados, tales como resto,hayuna odos AgNORs mayores.Eltamaño

cromosomasdemenortamaño que los normales (Fig. relativo de los nucléolosenelnúcleointerfásicovaría 1C) (13%)y cromosomasdicéntricos (Fig. 1D) (27%). más que las AgNORsenmetafase, pero las variacio-Enanafasesehallóhastaunmáximode 6puentes, nesde ambasestructurassecorrelacionan sólo

cuan-queamenudoestánacompañados porcromosomas dosunúmeroesde dosotres. retrasados y fragmentos simples y dobles (Fig. 3 A,

B) (47%)¿Todos los individuosconanormalidades durante ladivisióncelularmostraron,además, hasta 8micronúcleosde diverso tamañoeninterfase (Fig. 3C,D).

DISCUSIóN

Y

CONCLUSIONES

Dyssochroma viridiflorum, que se examina cariológicamentepor primera vez, es unaespecie diploidecon x=12. Los resultadosobtenidos confir¬

mas

irregularidadesse

mánifestaron

enindividuos provenientesdesemillas cuyagerminaciónsellevóa

caboamásde 60 días de recolectadas. Pudo obser¬

varseque,conlaedaddelassemillas,seincrementó mandicho guarismo para el géneroyconstituyen el la gravedadde las aberraciones (por ej.,aumento en segundorecuentocromosómico enla tribu

Juanu-el número depuentes anafásicos y micronúcleos lloeae(cf.Piovano,1989).Sobreel origen dex=12, interfásicospor célula),fenómeno que resultóate- queesel número básico más comúnenSolanaceae nuadoporla conservación de las semillasa4°Chasta (Moseone, 1992), hayhipótesis encontradas. Así,

sugerminación. Raven(1975)sugiere que elorden Solanalestendría

comonúmerobásicooriginalax=7,en tantoque

x=12seríaelancestralde las Solanáceas.Sin embar-BandeoAgNOR

go,másrecientemente Olmstead& Palmer (1992)pos-En D. viridiflorum elnúmero deregionesorgani- tulanel carácter sinapomórficodex=12enla familia

zadoras

nucleolares activas (AgNORs)enmetafase basándoseenlasrelacionesfilogenéticasinferidas varíaentrelas células(20)eindividuos

(8)

analiza- del análisis delÀDNdecloroplastos.

Enla Tabla 2semuestraqueD. viridiflorum y el dos. Tres plantas exhibieronunmáximode dos pares

decromosomas conAgNORs,n° 4y9(m), aunque, restantemiembro del género, D.longipes,tienen

engeneral, dicho número fuemenor(Fig. 4 A). La cariotipos semejantes, ya quecompartenel mismo cifrade AgNORs observadaporcélula fuede 4 (en el número cromosómicoy poseen similarlongitud 20% de las metafases revisadas),3 (20%), 2 (40%) y 1 cromosómicamedia y total. Sin embargo, lapresencia (20%). La distinción entre ambos pares de deunparsmadicionalenD. longipesdeterminauna cromosomas conAgNORsnofueposible mediante mayor asimetríaintracromosómica

(A()

y suinclu¬ siónen unacategoríadeasimetríadiferenteenel sis-E1númeromáximode nucléolosimpregnadoscon temade Stebbins (1971).Porotrolado,D. viridiflorum plata alcanzaa cuatro entodoslos individuosestu- exhibe mayor variación de tamañoentrelos distintos diados(Fig. 4 B), aunque la cifra más frecuenteesde pares delcomplementó,hecho que determinaun

in-unnucléolo (enel 58% de lós núcleos interfásicos cremento enla asimetríaintercromosómica

(A2).

Por examinados) o dos (28%). En muchos núcleos último,las dos entidades difierenenel número de laimpregnaciónargéntica.

A

B

i

;;

/

f#

_Iw

*

M WW

kk¿¡Mfr

jf

' v

-

»

*

*

I

c

D

»

V

*

m

-4

tift _si«

:

J: ,

t

-‘

X

¡||¡g

i.

•.

.

_.

v.

0

f

m

1

:

Fig.3.Irregularidades mitóticasenDyssochmma virídifíorum. A: Anafaseconseispuentes y unfragmento doble. B: Anafasecondos puentes,tresfragmentosdobles y dossimples.C: Célula interfásicacondosmicronúcleos. D: Célula interfásicaconochomicronúcleos.Lasflechas enA-Bindican fragmentos,y enC-D,micronúcleos. Laescala vale 10gm

A

B

*

•

_%

*

•

*

0

*

n

#

»

n

_*

<1

* _/

* '

»• •i

t 4 .

C

/

i

%

—

•

0~-

.

H

M

_*

*

**

_*

—

-*

Mf

ii

¥

&ÿi

Fig.4.Metafasemitótica y núcleos interfásicos de Dyssochroma viridiflorumteñidosconnitrato deplata.A:Mçtafase somática (2n=24) contres AgNORs. B: Núcleos interfásicosconuno, dosy cuatronucléolosAg-positivos.C:Núcleo interfásico condos nucléolos mayores y seismicronucleolos,todosAg-positivos.Las flechas enAindican AgNORs yenC,

micronucleolos. La escala enAvale5 pm,enB,30pmy enC,10 pm.

paresconNORs, que sereduce auno solo enD. longipes. Encuantoa suexomorfología, ambas espe¬ cies sedistinguenporcaracterísticas florales,entre

ellas,la longitud de lacorola,que escomparativa¬ mentemayor enD.longipes,yla posición de las

anteras,queenD. viridiflorumson muysobresalien¬ tesy enlaentidad anteriorsoninclusaso superan

apenas lapartesoldada de la corola (Hunziker,1977).

Enlafamilia, cariotipossimétricosconunamayo¬

ría de cromosomas m como los hallados en

Dyssochromasontípicos de muchos géneroscon -x

= 12; entreellos Solandra Swartz, integrante de SolandreaeMiers que es una tribu vecina a Juanulloeae. Además,esteúltimo género comparte conDyssochromacromosomasde tamaño similar

(Moscone, 1989a).Loscariotipossimétricos,enmu¬

chasAngiospermas,secorrelacionanconlacondi¬ ción primitivaoplesiomórfica de lostaxa, entanto

quelos asimétricos indicanunaposición derivadao

apomórfica (Stebbins, 1971). Sin embargo,nosería

esteelcasode Dyssochroma, sisetieneencuenta que dicho género, junto alosrestantes integrantes de la tribu,presenta caracteres posiblemente apomórfícos talescomosuhábito de vida epifíticoy

semillaConendosperma exiguo (Hunziker, 1979,com.

pers.),ademásdex=12 (cfr. supra).

Satélitesubicadosenbrazoscortos,talcomo se

encontróenD. viridiñorum,tambiénocurren enD. longipes y la mayoría de las Solanáceas cariológicamente exploradas (Moscone, 1989a; Piovano,1989).Esimportante señalarquesóloel 6% de las metafasesrevisadascontinción clásicaexhi¬ be el máximo de cuatro satélites (dospares de

cromosomas), demodo que lapresencia de estos últimos no es un carácter constante en D. viridiñorum,como tampocoloes enotros

integran-Tabla2. Comparaciónentreloscariotipos de Dyssochroma_viridiflorum yD.longipes [datos tomados de Piovano (1989) mediante tinción con carmín alcohólico-clorhídrico]. Abreviaturas:ÑOR=región organizadoranucleolar,LTCH=longitud

total del complemento haploide, c=longitudcromosómicamedia,ds=desviaciónestándar, r=índice braquial medio,R=

razónentrelalongitud delparmayor y elmenordelcomplemento,Aj =índicede asimetría intracromosómica,A=indice de

asimetría intercromosómica.

Dyssochroma

_viridiflorum

Dyssochroma longipes

2n 24 24

Fórmulacariotípica

10m+lmsm+lsm 9m+1msm+2sm (n)

ParesconÑOR 4 y 9(m) 12(sm)

LTCH

_(ÿm)

45,35 45,90

c₊ds 3,78₊0,38 3,83₊0,33

r₊ds 1,25₊0,25 1,32₊0,32

R 1,44 1,35

Ai

0,173 0,216

A2

0,101 0,085

Tipodeasimetría

según Stebbins 1A 2A

tesde la familia (Moscone, 1989b).Lafaltade obser- pararevelar los sitios deADNractivos. La

compara-vaciónde los satélitespuede deberse,porunlado,a cióndeplacas metafásicas teñidasconnitrato de efectosdel pretratamientoconinhibidores del huso platay concoloración clásicademostró correspon-(Sudá,1975)y, porelotro, ala inactivación diferen- denciaentre las AgNORsylas constricciones se¬

dal deregionesorganizadorasnucleolares específí- cundariasde losCromosomasconsatélites. No obs¬

tante, se observó

diferencia

enel tamaño de los

cassegún las célulasoindividuos (cf. infra).

Variacionesenel

tamaño

de los satélites simila- cromosomasmetafásicossegún fueransometidosa res ala halladaenD.

viridiflorum,

tambiénsehan unou otroprocedimiento. En efecto, aquellos resul-registradoen otrasSolanáceas, alcanzando magni- taron mucho mayores aposterioridel bandeo tudmáximaen Capsicumparvifolium Sendt.(cf. AgNOR,posiblemente debido alamaceracióp

Moscone, 1989a, 1993). Cabe mencionarquePiovano enzimáticáprevia queseempleaenestemétodo (véa-(1989)sólodescribe microsatélitesenD. longipes, seFigs.1A y 4A,ambasaigual escala).

aunqueestaautoraexaminóunúnicoindividuo.Debe Lavariación halladaenel número de AgNORs destacarsequeelpolimorfismo observadoenelpre- metafásicasenD.

_viridiflorum

esconsecuencia desu sentetrabajoesinherentealos satélitesensímis- actividaddiferencial,pueslos loci ribosomales cuando

mos,puesno vaacompañado de cambiosenlos bra- estáninactivosnopueden identificarseconplata. Los

zos cromosómicoscorrespondientes nienlos de- casos enque el número de nucléoloseninterfasees

máscromosomasdelcomplemento. Entre los posi- inferioral de AgNORs metafásicasseexplicanporla bles mecanismosresponsables de tal variaciónse fusiónde losprimeros.Por otrolado,la aparición de sugiere a las duplicaciones, deleciones y micronucleolósha sido atribuidaen otrasplantasala transposiciones desegmentosde ADN ribosomaly presenciade pequeños sitios de ADNr,conbaja activi-la heterocromatina asociada (Schubert &Wobus, dadtranscripcional,quenopueden detectarseenlos

cromosomasmetafásicos (Satoetal.,1980).Sin

embar-Laaparición de múltiplesirregularidades mitóticas go,el alto número demicronucleolosde D.

_viridiflorum

espontáneasenD.

_viridiflorum

esatribuida al pre- es unhecho que debeseraclaradomediante hibridación

cozenvejecimientodesussemillas. Este fenómeno de ADNrinsitu,yaquepodríatratarsede cuerposasó¬ semanifiestaen muchasplantas tropicales, cuyas ciadosalosnucléolos (NABs).Estosúltimosse impreg-semillasamenudo recalcitrantes, pierden viabilidad nan conplata de igual modoquelos nucléolos

genui-conrapidez (cf. Roberts &Ellis,1982); talseríael nos, pues están constituidos porribonucleoproteínas

casode laespecie aquí estudiada.

EnD.

viridiflorum,

elbandeo AgNOR resultó útil 1985; Mosconeetal.,1999).

argirofilicas (cf.Risueño &Medina,1986)."

HUNZIKER, A. T. 1979. South American Solamceae:asynoptic

survey.In: HAWKES, J.G.,R.N.LESTER & A.D. SKELDING (eds.). Thebiologyandtaxonomy_ofthe Solanaceae. Linn. Soc.Symp.,ser.7: 49-85. Academic Press, London. KODAMA,Y,M.C. YOSHIDA & M. SASAKI. 1980. An improved

silver staining technique for nucleolusorganizerregions by using nylon cloth. Jap. J. Human Genet. 25: 229-233.

LEVAN, A., K. FREDGA & A. A. SANDBERG. 1964. Nomenclature for centromericpositiononchromosomes. Hereditas 52: 201-220.

MOSCONE, E. A. 1989a. Estudios citotaxonómicosenlastri¬ busSolaneae y Nicotianeae (Solanaceae) de América del Sur.Tesis doctoral. Univ. Nac. Córdoba,Argentina(Inédita).

MOSCONE, E. A.. 1989b. Karyotypeanalysesinthree Patagonian and S. Andean endemicgenera of Nicotianeae {Solanaceae).PI.Syst. Evol. 166: 31-39.

MOSCONE, E. A.. 1992. Estudios decromosomasmeióticos enSolanaceaede Argentina. Darwiniana 31: 261-297. MOSCONE, E. A.. 1993.Estudios,cromosómicosenCapsicum (Solanaceae) II. Análisis cariotípico de C.parvifoliumy C. annuum var. annuum.Kurtziana 22:9-ljL

MOSCONE, E. A.,J.LOIDL,F. EHRENDORFER & A.T. HUNZIKER. 1995.Analysisofactive nucleolus organizing regionsinCapsicum (Solanaceae) by silver staining.Amer. J. Bot. 82: 276-287.

MOSCONE,E.A., F.KLEIN, M.LAMBROU,J.FUCHS & D. SCHWEIZER. 1999.Quantitativekaryotypingand dual-color FISH mapping of 5S and 18S-25S rDNA probes in the cultivated Phaseolusspecies (Leguminosae). Genome 42: 1224-1233.

OLMSTEAD, R. G. & J.D.PALMER. 1992. Achloroplast

DNA phylogeny of the Solanaceae: subfamilial

relationshipsandcharacter evolution. Ann. Missouri Bot. Gard.79: 346-360.

PIOVANO, M. A. 1989. El cariotipo de Dyssochroma longipes {Solanaceae).Kurtziana 20: 207-212. RAVEN, P. H. 1975. The bases of Angiosperm phylogeny:

Cytology. Ann. Missouri Bot. Gard. 62: 724-764.

RISUEÑO,M. C. &F.J. MEDINA. 1986. The nucleolar structureinplant cells. Revisiones Sobre BiologíaCelu¬

lar 1.ServicioEditorial deláUniversidaddel País Vasco,•

Bilbao.

ROBERTS, E. H. & R.H.ELLIS. 1982.Physiological,

ultraestructural and metabolicaspects ofseed viability. In:A.A.KHAN (ed.). Thephysiologyand biochemistry

ofseeddevelopment, dormancyand germination, pp. 465-485.ElsevierBiomedicalPress.

ROMERO ZARCO, C. 1986. Anewmethod for estimating karyotypeasymmetry. Taxon 35: 526-530.

SATO, S. M. HIZUME & S. KAWAMURA. 1980.

Relationship between secondary constrictions and nucleolus organizing regions in Allium sativum chromosomes. Protoplasma 105: 77-85.

célulasyaúncromosomashomólogosdeunamisma célula,como seencontróenlaespecie examinada, puedesercausadoporvariosfactores, talescomoel número de genesribosomales,el nivel de transcrip¬ ción, y el estado de condensación de la cromatinaen

lasNORs (Mosconeetal., 1995).Porfin, lapresencia de satélites polimórficos fue analizadacondetalleen

metafasesteñidasconFeulgen (cf. supra).

Ante la escasez de datos cromosómicos en

Juanulloeaees de interés taxonómico extender el estudio cariotípico a otros integrantes cario-lógicamentedesconocidos.Porotraparte, la gran

homogeneidad cariotípica de ambas especies de Dyssochroma, impone la aplicación del bandeo cromosómico Cconelobjeto deobtener marcadores adicionales para la identificacióncromosómicay, con

ello, establecer posibles homeologíasentresus res¬

pectivos complementos.

AGRADECIMIENTOS

Losautoresagradecen al Prof. Ing. Armando T. Hunzikerporsugerireltema, alaDra.LucíaFreire de Carvalhoporelsuministro del material estudiado, al Sr.Ricardo Münchporel auxilioconel “software”

paraeldiseño del idiogramayal CONICETporel apoyo financiero.

BIBLIOGRAFíA

BATTAGLIA, E. 1955. Chromosome morphology and

terminology.Caryologia 8: 179-187.

BLOOM, S.E.& C. GOODPASTURE. 1976. Animproved

technique for selective silver staining of nucleolar organizer regions in human chromosomes. Human Genet. 34: 199-206.

CASTRO VERÇOZA, F. & L. D’A. FREIRE DE CARVALHO. 2000. Phenology of Dyssochroma_viridiflora(Sims)Miers {Solanaceae). In: Fifth International Solanaceae

Conference,pág. 62. Botanical Garden of the Üniversity ofNijmegen, Nijmegen.

COCUCCI, A. 1999. Evolutionary radiation ipneotropical

Solanaceae. In: NEE,M„ D. E. SYMON, R. N. LESTER &J.P. JESSOP(eds.). Solanaceae IV, pp. 9-22.Royal

BotanicGardens,Kew.

HUNZIKER, A. T. 1977. Estudios sobre Solanaceae. VIII. Novedades varias sobretribus,"géneros, secciones yespe¬ cies de Sud América. Kurtziana 10: 7-50.

STEBBINS, G. L. 1971. Chromosomal evolution inhigher plants.E. ArnoldPubl.,London.

SUDA, Y. 1975. Somatic chromosome number and chromosomalmorphologyof AnemonehepáticaL.var. japónica (Nakai) Ohwi. Cytologia 40: 693-711.

SCHLARBAUM, S. E. & T. TSUCHIYA. 1984. The chromosomesofCunninghamiakonishii,C. lanceolata, and Taiwaniacryptomerioides(Taxodiaceae).PI. Syst.

Evol. 145: 169-181.

SCHUBERT, I. & U. WOBUS. 1985. In situhybridization

confirmsjumpingnucleolusorganizing regions inAllium. Chromosoma92: 143-148.

SCHWARZACHER, T., R AMBROS & D. SCHWEIZER. 1980.Applicationof Giemsabandingtoorchidkaryotype