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Evaluación de la actividad antioxidante y antimicótica del extracto hidroalcohólico de las hojas de Bunchosia armeniaca (ciruelo cansa boca)

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Academic year: 2020

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. UI. M. IC. A. ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. O Q. TESIS II. Y. BI. Evaluación de la actividad antioxidante y antimicótica del extracto hidroalcohólico de. M. AC. IA. las hojas de Bunchosia armeniaca (ciruelo cansa boca). FA R. PARA OPTAR EL GRADO ACADÉMICO DE. :. POMA AVILA, Oliver Pierre MEDINA JUAREZ, Ruth Guadalupe. BI. BL. IO TE. AUTORES. CA. DE. BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA. ASESOR. :. Dr. RUIZ REYES, Segundo Guillermo. TRUJILLO – PERU 2018. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA. A Dios.. Por darme vida, salud, por fortalecer mi corazón e iluminar mi mente y por haber. A. puesto en mi camino a aquellas personas que han sido mi soporte y compañía.. O Q. UI. M. IC. A mis padres. BI. Por ser una fuente de motivación e inspiración inagotable y de alegría, en mi día a día,. Y. por estar a mi lado, por su apoyo moral y entusiasmo brindado para seguir adelante en. AC. IA. mis propósitos, por el tiempo que compartieron sus experiencias, conocimientos y. DE. FA R. M. consejos, por todo su amor.. IO TE. CA. A mis Amigos(a)s. BL. Porque siempre he contado con ellos para todo, gracias por la amistad y por. BI. permitirme aprender más de la vida a su lado.. Ruth Guadalupe. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A Dios. Por darme la vida, por poner en mí camino a personas maravillosas y por las bendiciones y los regalos que recibo día tras día. Y a su siempre apoyo incondicional para proponerme y alcanzar mis objetivos.. A. A mis padres. M. IC. Eugenio y Maximina, quienes permanentemente me apoyaron con su espíritu. O Q. UI. alentador, me acompañaron a lo largo de mi camino, brindándome consejos,. BI. orientación y fuerza en los momentos cruciales de mi vida, levantándome cuando me. AC. IA. Y. caí y sosteniendo mi vuelo en los grandes momentos de mí existir.. FA R. M. A mi familia Rocio y Dayiro, por siempre permanecer a mi lado dándome esa fuerza para seguir. A mis docentes. BL. IO TE. CA. DE. adelante y ser mi compañía en todos los momentos de mi vida. BI. Quienes laboran con la materia más valiosa de nuestra patria, la mente, formando hombres y mujeres del mañana, sobre la base de valores morales, éticos y humanísticos.. Oliver Pierre. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTO. Agradecemos a Dios Todopoderoso por estar con nosotros en cada paso que dimos, por fortalecer nuestros corazones e iluminar nuestras mentes, y por haber puesto en nuestro camino a personas que han sido de soporte y compañía, así como. O Q. UI. M. IC. A. habernos ayudado a culminar nuestros estudios.. BI. Un agradecimiento especial a la cátedra de Farmacognosia y Farmacobotanica. Y. a mis profesores y a nuestro asesor Dr. Segundo Guillermo Ruiz Reyes por su apoyo. AC. IA. constante y desinteresado, por su amistad, por sus enseñanzas y disposición en la. DE. FA R. M. conducción del desarrollo de este trabajo de investigación.. CA. Agradecemos también, a los respetables señores miembros del jurado por el. BI. BL. IO TE. interés y sugerencias para la realización de este trabajo.. Ruth Guadalupe y Oliver Pierre. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO: En cumplimiento de las normas dispuestas en el reglamento interno de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, sometemos a su. M. IC. A. consideración la Tesis II intitulado:. O Q. UI. “Evaluación de la actividad antioxidante y antimicótica del extracto hidroalcohólico de. AC. IA. Y. BI. las hojas de Bunchosia armeniaca (ciruelo cansa boca)”. FA R. M. Con el Propósito de optar el Grado Académico de Bachiller en Farmacia y Bioquímica. Dejamos a vuestra consideración señores miembros del jurado la calificación del. Trujillo, Setiembre del 2018. BI. BL. IO TE. CA. DE. siguiente trabajo.. ……………………………….. ………..………………………. Medina Juárez Ruth Guadalupe. Poma Ávila Oliver Pierre. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. M. IC. A. JURADO CALIFICADOR. O Q. UI. …………………………………….. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. PRESIDENTE. BI. Dr. QF. Francisco M. Abanto Zamora. …………………………………….... BL. …..……….…………………………. Dra. QF. Marilú R. Soto Vásquez. BI. Dr. QF. Segundo G. Ruiz Reyes MIEMBRO. MIEMBRO. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. En el presente trabajo se determinó la evaluación de la actividad antioxidante y antimicótica del extracto hidroalcohólico de la hoja de Bunchosia armeniaca “ciruelo. A. de cansa boca”. Las hojas fueron recolectadas del Jardín Botánico de Plantas. M IC. medicinales “Rosa Elena de los Ríos Martínez” de la Facultad de Farmacia y. Q. UI. Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, Departamento de La Libertad.. BI. O. Los extractos hidroalcohólicos fueron preparados mediante reflujo. Se determinó la. Y. capacidad antioxidante mediante el método desarrollado por Brand-Williams, cuyas. AC I. A. lecturas espectrofotométricas se realizaron a 520 nm. Los resultados fueron. RM. expresados en porcentaje de captura del radical 2,2-Difenil-1-Picrilhidrazilo (DPPHº). FA. a las concentraciones (0,02 Mm, 0,04 mM, 0,06 Mm, 0,08 Mm y 0,1 Mm.). DE. encontrando un IC50 de 0,4810 mg/mL teniendo capacidad antioxidante prometedora. TE CA. comparado con los artículos hallados. El efecto antimicótico se realizó en cepas de Cándida albicans ATCC 10231 empleando el método de Kirby-Bauer (difusión en. BI BL IO. agar). Para el efecto antifúngico, el grupo experimental I (extracto hidroalcohólico al 25%) mostro un promedio de 7,176 mm de diámetro, para el grupo experimental II (extracto hidroalcohólico al 50%) mostro un promedio de 7,836 mm de diámetro y para el grupo experimental III (extracto hidroalcohólico al 75%) de mayor concentración presento un promedio de 8,236 mm de diámetro.. Palabras claves: Bunchosia armeniaca, Cándida albicans, extracto hidroalcohólico vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. In the present work, the evaluation of the antioxidant and antifungal activity of the hydroalcoholic extract of the Bunchosia armeniaca leaf "plum de cansa boca" was. M IC. A. determined. The leaves were collected from the Botanical Garden of Medicinal Plants. UI. "Rosa Elena de los Rios Martinez" of the Faculty of Pharmacy and Biochemistry of the. O. Q. National University of Trujillo, Department of La Libertad. The hydroalcoholic extracts. BI. were prepared by reflux. Antioxidant capacity was determined by the method developed by. A. Y. Brand-Williams, whose spectrophotometric readings were performed at 520 nm. The. AC I. results were expressed in percentage of capture of the radical 2,2-Diphenyl-1-. RM. Picrilhidrazilo (DPPHº) at the concentrations of 0.02 mm, 0.04 mm, 0.06 mm, 0.08 mm and. FA. 0, 1 Mm. finding an IC50 of 0.4810 mg / mL having an improved antioxidant capacity with. DE. the articles found. The antifungal effect was performed on strains of Cándida albicans. TE CA. ATCC 10231 using the Kirby-Bauer method (agar diffusion). For the antifungal effect,. BI BL IO. experimental group I (25% hydroalcoholic extract) showed an average of 7.176 mm in diameter, for experimental group II (hydroalcoholic extract at 50%) it showed an average of 7.836 mm in diameter and for experimental group III (hydroalcoholic extract at 75%) of higher concentration with an average of 8.236 mm in diameter.. Keywords: Armenian bunchosia, Cándida albicans, hydroalcoholic extract. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE. Pág.. i. A. DEDICATORIA. iii. M IC. AGRADECIMIENTO. Q. UI. PRESENTACION. BI. O. JURADO CALIFICADOR. v vi. Y. RESUMEN. iv. AC I. A. ABSTRACT. vii. I.. INTRODUCCION……………………………………………. II.. MATERIAL Y METODO…………………………………… 7. FA. RM. 1. DE. 2.1. MATERIAL……………………………………………... TE CA. 2.2. EQUIPOS……….……………………………………….. 7 8 9. III.. RESULTADOS………………………………………………. 17. IV.. DISCUSION…………………………………………………. 20. V.. CONCLUSIONES………………………………………….... 24. VI.. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS……………………….. 25. VII. ANEXOS …………………………………………………......….... 31. BI BL IO. 2.3. METODO……..………..………………………………... viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCIÓN. Desde la antigüedad las plantas han sido un recurso al alcance del ser humano para su alimentación y prevención de enfermedades; estas últimas llamadas plantas medicinales, utilizada para diversas patologías, principalmente a partir. IC. A. de los extractos de las hojas que tienen propiedades antibacterianas como. UI. M. antiinflamatorias. La organización Mundial de la salud definió en China, en. O Q. 1980, “planta medicinal” como todo vegetal que contiene en uno o más de sus. BI. órganos, sustancias que pueden ser utilizadas con fines terapéuticos,. IA. Y. preventivos o que son precursores de hemisintesis farmacéutica, dentro de las. AC. enfermedades más frecuentes tenemos a las crónico-degenerativas que son. FA R. M. las principales causas de muerte en el mundo 2,3.. DE. En los últimos años, han surgidos diferentes teorías que pretenden explicar el. CA. proceso de envejecimiento, entre estas hay una que tiene mayor aprobación. IO TE. cuya referencia es que esta ocurre a consecuencia de los radicales libres. Esta. BL. teoría propone que, debido a la variación de los mecanismos antioxidantes,. BI. genera y se acumulan los radicales libres cuya consecuencia directa es la presencia de un estrés oxidativo que destruye estructuras celulares, lo que conlleva luego a la muerte celular 4, 5, 6. Los radicales libres es una especie química ya sea atómica o molecular, inestables de alta energía capaz de existir independientemente y que contiene uno o más electrones desapareados en el orbital más externo. Estos electrones generan un campo eléctrico que no es anulado, lo que ocasiona que la especie 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. química sea paramagnética y por ende altamente reactivo, capaz de actuar en los sistemas biológicos del organismo causando daños irreversibles 7, 8. Nuestro organismo está luchando contra los radicales libres cada momento del día. El problema para nuestra salud se produce cuando nuestro organismo tiene que soportar un exceso de radicales libres durante años, estos se forman de dos maneras: “De forma exógena (contaminación atmosférica, el humo del. IC. A. cigarrillo, los alimentos y los medicamentos) y de forma endógena (se da en la. UI. M. cadena respiratoria y en el sistema inmune como también en enzimas. O Q. oxidativas)”; estos contribuyen en un aumento de los radicales libres en. BI. nuestro organismo, que significa la aparición de las enfermedades como la. IA. Y. arterioesclerosis, la artritis reumatoide, daños pulmonares, cerebrales y .. 9,10. M. AC. cardiovasculares e incluso el envejecimiento. FA R. La protección que debemos tener para evitar el aumento de los radicales libres. DE. en nuestro organismo que aceleran la rapidez de envejecimiento y. CA. degeneración de las células de nuestro cuerpo es el consumo de antioxidantes. IO TE. naturales, para equilibrar o neutralizar a los radicales libres se hallan algunos. BL. compuestos que son producidos de forma endógena por las células obtenidos. BI. exógenamente, de manera exógena lo encontramos en los compuestos con propiedades antioxidantes que son compuestos fenólicos como los flavonoides (verduras, hortalizas semillas y legumbres) y precisamente se necesitan para la protección del cuerpo humano en contra de enfermedades degenerativas, que se requiere para prevenir la actividad de los radicales libres y que aquel desequilibrio causa el estrés oxidativo. 11, 12, 13. .. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Los hongos son agentes causantes de innumerables enfermedades en el hombre. Cualquier tejido puede ser afectado por lo que se presentan diversos cuadros clínicos, cada uno de ellos asociado directamente al estado inmunológico del paciente. El número exacto de hongos Fitopatógenos se desconoce, pero se estiman en un número superior a las diez mil especies, pertenecientes a diversas categorías taxonómicas. .. 14, 15. IC. A. Para el manejo de enfermedades, se implementan controles químicos. UI. M. principalmente. Los residuos tóxicos productos del uso continuo de pesticidas,. O Q. afectan la salud de los trabajadores y deterioran el ambiente. También se debe. BI. tener en cuenta que el problema de la resistencia a fungicidas. Esto se traduce. IA. Y. en la inefectividad de algunos de estos, creando la necesidad de nuevos .. 16. M. AC. productos con modos de acción diferentes. FA R. La búsqueda de alternativas de manejo como el desarrollo de variedades. DE. resistentes, el control biológico y el uso de elicitores bióticos, se constituyen. IO TE. cultivo 17.66. CA. en campos de particular interés investigativo para el adecuado desarrollo del. BL. En la búsqueda de nuevos controladores de enfermedades, los productos. BI. naturales pueden llegar a ser fuente de compuestos fungicidas o fungistáticos amigables con el ambiente. Los extractos vegetales, aceites esenciales y metabolitos secundarios son una fuente botánica de compuestos alternativos a los fungicidas usados actualmente 18. Los extractos de muchas plantas contienen compuestos de bajo peso molecular, que inhiben el crecimiento de hongos. Estos compuestos se pueden encontrar en plantas sanas o se pueden encontrar en extractos de. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. plantas que han estado expuestas a patógenos. Dichos compuestos están involucrados en una multitud de funciones ecológicas entre ellas las interacciones planta microorganismos 19, 20. Teniendo en cuenta los problemas de resistencia a fungicidas que podrían resultar por la biología del patógeno, por el mal manejo de estos productos y que la acción de los extractos vegetales para el control de fitopatogenos ha. IC. A. sido demostrada ampliamente, surge la opción de utilizarlos como una. UI. M. alternativa para el manejo de enfermedades fungosas, diferente a los productos. O Q. tradicionales 21.. Y. BI. Bunchosia armeniaca es un género botánico de plantas con flores de 131. AC. IA. especies pertenecientes a la familia Malpighiaceae. Esta planta es originaria de. M. América conocida como “Cansa boca”, “cafezinho” o “falso – Guaraná”, es un. FA R. árbol de tamaño mediano que empieza sus ramificaciones a muy baja estatura. DE. teniendo así una copa ancha. Sus frutos son de forma elipsoidal que cuando. CA. están maduros toman el color rojizo además generalmente contiene dos. IO TE. semillas. Su clima es tropical, con una temperatura relativa de 25 a 27°C y. BL. humedad entre 70 y 80 % 22, 23.. BI. Cabe mencionar que actualmente el Perú tiene una gran diversidad de plantas y se usan de forma empírica algunas de ellas, ya que esto viene de nuestros antepasados por sus propiedades de sanar o prevenir enfermedades dada la capacidad que tienen para sintetizar diversos metabolitos secundarios (como flavonoides, taninos, terpenos, cumarinas, lignanos, etc.) por la cual constituye una buena alternativa el estudio de sus diversas propiedades. 24 - 27. .. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La Organización Mundial de la Salud (OMS) y la Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación. (FAO) publicaron recientemente un informe donde se recomienda la ingesta de un mínimo de 400 g diarios de frutas y verduras (excluidas las patatas y otros tubérculos feculentos) para prevenir enfermedades crónicas como las cardiopatías, el cáncer, la diabetes o la obesidad, así como para prevenir y mitigar varias carencias de. IC. A. micronutrientes 28.. UI. M. El presente trabajo de investigación pretende evaluar la actividad antioxidante y. O Q. antimicótica del extracto hidroalcohólico de las hojas de Bunchosia armeniaca. BI. “Ciruelo cansa boca” del Jardín Botánico de Plantas Medicinales “Rosa Elena. IA. Y. de los Ríos Martínez” de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la. AC. Universidad Nacional de Trujillo, Departamento de La Libertad, lo cual sirve. FA R. M. como aporte para avalar el uso de la planta en medicina tradicional. De esta. DE. manera brindar a la población una alternativa cercana y cómoda para su. CA. atención primaria con esta especie vegetal.. IO TE. Bajo estas premisas y con el objetivo de contribuir al conocimiento científico de. BL. las plantas medicinales de nuestro país es que el presente trabajo está. BI. orientado a estudiar la especie Bunchosia armeniaca “ciruelo cansa boca”. Con los antecedentes citados los autores del presente trabajo nos planteamos el siguiente problema: ¿Presentará actividad antioxidante y antimicótica el extracto hidroalcohólico de las hojas de Bunchosia armeniaca “Ciruelo cansa boca”?. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1. OBJETIVOS:. 1.1.. Objetivo General:. -. Evaluar la actividad antioxidante y antimicótica del extracto. A. hidroalcohòlico de las hojas de Bunchosia armeniaca “Ciruelo. Objetivos Específicos:. IA. Determinar la actividad antioxidante del extracto hidroalcohólico. AC. -. Y. BI. 1.2.. O Q. UI. M. IC. cansa boca”.. M. de las hojas de Bunchosia armeniaca “Ciruelo cansa boca”. Determinar la actividad antimicótica del extracto hidroalcohòlico. CA. -. DE. FA R. frente al radical libre DPPHº. IO TE. de las hojas de Bunchosia armeniaca “Ciruelo cansa boca”. BI. BL. frente a Cándida albicans ATCC 10231.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.. 2.1.. MATERIAL Y METODO. Material De Estudio. 2.1.1.. Material Biológico:. A. Se utilizó un cultivo puro estandarizado de Cándida albicans. M. IC. ATCC 10231, proporcionadas por el Hospital Referencial del. Material Botánico. AC. IA. 2.1.2.. Y. BI. O Q. UI. Niño – Belén.. M. Se utilizó 1 kilogramo de hojas de Bunchosia armeniaca. FA R. "Ciruelo cansa boca” procedente del Jardín Botánico de. DE. Plantas Medicinales “Rosa Elena de los Ríos Martínez” de la. CA. Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional. IO TE. de Trujillo, Departamento de La Libertad. Equipos:. BL. 2.1.3.. Balanza Analítica “Ohaus-Ga200”, (precisión 0.0001g). -. Refrigerador (Coldex Cool Style ). -. Espectrofotómetro Heweltt Packard modelo 8452 A. -. Autoclave Autester. -. Balanza analítica Sartorius. -. Estufa (memmert). BI. -. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.1.4. Reactivos Agua destilada. ─. Alcohol 96° GL (Dropacksa ). ─. 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo (DPPHº). ─. Dimetilsulfoxido. A. ─. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. Agar Dextrosa Sabouraud al 4%. ─. M. IC. 2.1.5. Medios de cultivo. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.. MÉTODO 2.2.1. Preparación de la especie vegetal 2.2.1.1. Recolección, identificación y preparación del material botánico. Se recolectaron las hojas de Bunchosia armeniaca "Ciruelo. IC. A. cansa boca” procedente del Jardín Botánico de Plantas. M. Medicinales “Rosa Elena de los Ríos Martínez” de la Facultad. O Q. UI. de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de. BI. Trujillo, Departamento de La Libertad y fueron llevadas para. IA. Y. su identificación taxonómica al Herbarium Truxillense (HUT). FA R. M. AC. de la Universidad Nacional de Trujillo.. Procesamiento de las hojas de Bunchosia. DE. 2.2.1.2.. CA. armeniaca. IO TE. Se procedió a seleccionar las hojas de B. armeniaca con el. BL. objetivo de realizar la separación de las partes deterioradas y la. mezcla. con. otra. especie.. La. droga. fue. BI. evitar. convenientemente lavada y desecada. Las hojas se colocaron extendidas sobre papel kraft en un lugar fresco y seco durante 24 horas. Luego fueron pasadas a bolsas hechas de papel kraft y se llevó a estufa a temperatura de 40 ºC hasta peso constante.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.2. Obtención del extracto hidroalcohólico de las hojas de B. armeniaca. Se colocó 150 g de la droga a un balón de 500 mL con 250 mL de etanol 50% v/v. luego se llevó a reflujo durante 2 horas, se dejó en reposo 30 min y se filtró. Se concentró en baño maría. A. hasta obtener 150 ml del extracto hidroalcohólico.. UI. M. IC. 2.2.3. Actividad Antimicótica 29, 30.. O Q. Se realizó empleando el método de difusión en discos según el. Y. IA. Preparación de las diluciones del extracto hidroalcohólico:. AC. 2.2.3.1.. BI. Método de Kirby-Bauer.. FA R. M. En crioviales de 2ml se colocó el extracto hidroalcohólico y se realizó. DE. las siguientes diluciones:. 25 ul de extracto hidroalcohólico + 75 ul de Dimetilsulfoxido.. 50%. 50 ul de extracto hidroalcohólico + 50 ul de Dimetilsulfoxido.. IO TE. 75 ul de extracto hidroalcohólico + 25 ul de Dimetilsulfoxido.. BI. BL. 75%. CA. 25%. Se utilizó Dimetilsulfoxido para luego sellar los crioviales y guardarlos en refrigeración hasta realizar la prueba.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.3.2.. Ensayo de la actividad antimicótica por el. Método de. Difusión en disco: a. Preparación del Inóculo fúngico Se tomó colonias del cultivo original del microorganismo (cepas) a ensayar con el asa bacteriológica y se preparó una suspensión en 8. A. ml de solución salina fisiológica estéril. Se comparó con el patrón de. M. IC. turbidez, ajustando la densidad de la suspensión problema a la del. O Q. UI. patrón: 1 de la escala de McFarland.. Y. BI. b. Preparación del Medio de Cultivo. AC. IA. Se utilizó como medio de cultivo para cepas de Cándida albicans,. FA R. M. Agar Sabouraud.. Para la preparación del medio se procedió a calentar el agar en la. DE. cocina hasta su homogenización (mezcla con calor), posteriormente. CA. se enfrió y ajustó el pH, se esterilizó en autoclave a 121 ºC x 1atm (45. IO TE. min de pre esterilización y 15 min de esterilización).. BI. BL. Se agregó en placas Petri de 90x14 mm (15 mL c/u); hasta un grosor homogéneo de aproximadamente 4 mm. Luego se dejó enfriar las placas a temperatura ambiente por 40 minutos hasta que gelifique antes de proceder a la siembra.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.3.3.. Siembra en las placas:. Después de haber ajustado la densidad del inóculo en la escala de McFarland, se tomó 100 µl de éste con pipeta estéril y se vertió en cada placa con agar Sabouraud, luego se procedió a realizar el hisopado, finalmente se llevó a incubar a temperatura 37 °C. Preparación de los discos:. IC. A. 2.2.3.4.. UI. M. Se prepararón discos de 6 mm de diámetro empleando papel filtro. O Q. Whatman Nº 2, se esterilizó en estufa a 180 ºC durante 2 horas, se. BI. conservó en frascos cerrados, luego se le colocó 10 µl por disco de. IA. Y. cada una de las concentraciones del extracto hidroalcohólico. M. Aplicación de los discos:. FA R. 2.2.3.5.. AC. (25%,50%,75%).. DE. Sobre las placas sembradas se colocó los discos con las distintas. del. IO TE. sensibilidad. CA. concentraciones del extracto hidroalcohólico y también el disco de antifúngico. correspondiente. presionando. con. BI. BL. suavidad sobre la superficie del agar con una pinza estéril. En una placa de 90 mm de diámetro se colocaron 3 discos que serán distribuidos de manera que no se produzca superposición de los halos de inhibición. Transcurrido 5 minutos, las placas se invirtieron y son llevadas a incubar a 37 °C durante 24 horas.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.3.6.. Medición de los diámetros de inhibición del crecimiento micótico:. Pasado el tiempo de 24 horas de incubación, se midió el diámetro de cada halo o zona de inhibición (incluido el diámetro del disco) se expresó en milímetros. Las mediciones se realizarón colocando una. de. la. capacidad. antioxidante. del. extracto. O Q. 2.2.4. Determinación. UI. M. IC. A. regla sobre el reverso de la placa.. BI. hidroalcohólico de las hojas de Bunchosia armeniaca (ciruelo. M. Fundamento del método:. FA R. 2.2.4.1.. AC. IA. Y. cansa boca). El fundamento del método descrito por Brand Williams et al, en. que. DE. consiste. el. radical. libre. estable. 2,2-difenil-1-. IO TE. CA. picrilhidrazilo (DPPH°) tiene un electrón desapareado y es de color azul-violeta, decolorándose hacia amarillo pálido por. BL. reacción con una sustancia capturadora de radicales libres; la. BI. absorbancia es medida espectrofotométricamente a 517 nm. La diferencia de absorbancias, permite obtener el porcentaje de captación de radicales libres 31 - 34.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.4.2.. Preparación de. la. solución 2,2-difenil-1-picrilhidracilo. (DPPH°) Se preparó una solución de DPPH° con etanol de 96° GL a una concentración de DPPH° 0.1 mM 31 - 34. 2.2.4.3.. Preparación de la recta de calibración para la solución de .. 31 - 34. IC. A. radical DPPH°. UI. M. Procedimiento:. O Q. - De la solución de DPPH° 0.1 mM se midió volúmenes de 2; 4; 6;. Y. BI. 8 y 10 mL; y se trasvasó a fiolas de 10 mL aforándolas con. AC. IA. etanol de 96º GL., para obtener concentraciones de 0,02; 0,04;. FA R. M. 0,06; 0,08 y 0.1 mM respectivamente. (Cuadro N° 1) Volumen de solución de. solución de PPH°. DPPH° 0,1 mM. CA. 2 mL. 10 mL. 4 mL. 10 mL. 0,06 mM. 6 mL. 10 mL. 0,08 mM. 8 mL. 10 mL. 0,1 mM. 10 mL. 10 mL. BI. BL. 0,04 mM. IO TE. 0,02 mM. Volumen de etanol 96° GL c.s.p.. DE. Concentración de. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Cuadro N° 1: Concentración de solución de DPPHº para obtener la recta de calibración. - Se realizó un barrido espectrofotométrico con la solución. DPPHº. 0.1 mM para encontrar la longitud de onda de máxima absorbancia -. Se realizó tres lecturas de absorbancias en el espectrofotómetro a 520 nm, de las cuales se sacó un promedio, utilizándose un blanco. IC. A. que consiste en etanol de 96 ºGL.. UI. M. - Se graficó las concentraciones versus las absorbancias para. BI. Determinación de los porcentajes de captura del radical .. 31 - 34. Y. DPPH°. IA. 2.2.4.4.. O Q. obtener la recta de calibración.. M. AC. Procedimiento. FA R. - En un set de 10 fiolas (problema), se adicionó en cada uno de ellos. DE. 10 mL de la solución de DPPH° 0,1 mM.. CA. - Se tomó alícuotas de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 mL del extracto. IO TE. hidroalcohólico y se enfrentó a la solución de DPPH° 0,1 Mm.. BL. - Se realizó tres lecturas de cada sistema a una absorbancia de 520. BI. nm, al minuto 30.. - Se preparó un control (que consiste en 10 mL de solución de DPPH° 0,1 mM) y se pasó a leer la absorbancia a 520 nm en el espectrofotómetro. - Como blanco se utilizó etanol de 96° GL.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. - Posteriormente, se utilizó los valores de absorbancia de los tubos problema y la absorbancia del tubo control, calculando el porcentaje de radicales DPPHº capturado.. - Se calculó el porcentaje de radicales DPPHº capturados, con la. A. siguiente fórmula:. IC. 𝐴𝑏𝑠. 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 𝑚.−𝐴𝑏𝑠. 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎. x 100. M. 𝐴𝑏𝑠. 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 𝑚.. Y. Análisis estadístico. IA. 2.2.5.. BI. O Q. UI. % de captura de radicales DPPHº =. Caracterizados. FA R. 2010.. M. AC. Los datos fueron procesados en el programa Microsoft Excel mediante. parámetros. estadísticos. BI. BL. IO TE. CA. DE. descriptivos: Media Aritmética (𝑥̃) y Desviación Estándar (∂).. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III.. RESULTADOS. Tabla 01. Resultado de la capacidad antioxidante del extracto hidroalcohólico. IC. A. de las hojas de Bunchosia armeniaca. Actividad antioxidante. UI. M. Bunchosia armeniaca. 0,4810 mg/mL. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI. O Q. IC 50. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla Nº 02: Promedio de los halos de inhibición producidos por exposición del extracto hidroalcohólico de las hojas de Bunchosia armeniaca “ciruelo cansa boca” frente a Cándida albicans ATCC 10231.. PROMEDIO. Grupo experimental I. Extracto hidroalcohólico al. O Q. 7,836 ± 0,2. BI. Extracto hidroalcohólico al. Extracto hidroalcohólico al. III. IA. Grupo experimental. AC. Y. 50%. 8,236 ± 0,2. M. 75%. FA R. Leyenda:. DE. Incluye diámetro del disco.. BI. BL. IO TE. CA. . 7,176 ± 0,2. UI. 25% Grupo experimental II. A. 0. IC. DMSO. M. Control negativo (0%). 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. MILIMETROS. GRAFICO N 1: Promedio de los halos de inhibicion del extracto hidroalcoholico de las hojas de Bunchosia armeniaca frente a Cándida albicans ATCC 10231 9000 8000 7000 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0. 8,236. 7,836. 7,176. 0. IC. UI. M. PROMEDIO DE LOS HALOS DE INHIBICION. A. Control negativo Grupo experimental Grupo experimental Grupo experimental (0%) I II III. O Q. En el grafico Nº01, se aprecia que conforme aumenta la concentración del. Y. BI. extracto hidroalcohólico de las hojas de Bunchosia armeniaca “ciruelo cansa. IA. boca” aumenta el diámetro del halo de inhibición, es decir aumenta el efecto. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. inhibitorio.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSION. Es ampliamente conocido que el consumo de frutas está asociado a una menor incidencia de enfermedades crónicas no transmisibles y envejecimiento. Es así que, en busca de nuevas fuentes naturales con propiedades antioxidantes, se ha realizado el presente trabajo de investigación cuyo objetivo es evaluar la. A. actividad antioxidante y antimicótica del extracto hidroalcohólico de las hojas de. M. IC. Bunchosia armeniaca “ciruelo cansa boca”, un fruto nativo del centro de. O Q. UI. América35.. BI. En el presente trabajo de investigación para medir la capacidad antioxidante de. IA. Y. una especie o sustancia se ha utilizado el método espectrofotométrico del. AC. DPPHº basado en la estabilidad del radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo (DPPHº),. FA R. M. la cual se atribuye a la deslocalización del electrón desapareado, esta. DE. deslocalización también le otorga la coloración violeta caracterizada por una 36. .. CA. banda de absorción en solución etanólica de 520 nm. IO TE. Se determinó la capacidad antioxidante del extracto hidroalcohólico de las. BL. hojas de Bunchosia armeniaca la cual fue expresada como la concentración. BI. necesaria para reducir al 50% la concentración inicial del DPPHº (IC50), la tabla 1 muestra los valores obtenidos mediante la correlación lineal, encontrando un IC50 para extracto etanolico de 0,4810 mg/mL. Un estudio realizado por Udaweediye R. (2016) en el cual utiliza el extracto metanólico del fruto de Bunchosia armeniaca, con su artículo Compuestos bioactivos y actividad antioxidante de la Bunchosia armeniaca mostro un. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IC50 =0,981 mg/mL en la prueba de DPPHº, es decir mostro una actividad atrapadora de radicales libres prometedora. .. 37. Realizando una comparación entre los extractos se observa un menor porcentaje de captura de radicales libres de DPPHº y menor IC50 en nuestro proyecto que se utilizó las hojas en vez del fruto, esto es posible a que en este extracto existen otras variedades de Fitoconstituyentes presentes que le. A. podrían estar dando esta capacidad antioxidante, como la presencia de. UI. M. IC. compuestos polifenólicos, taninos y alcaloides 38.. O Q. El trabajo realizo por Jan Tauchen et al. (2015) en su artículo Composición. BI. fenólica, actividades antioxidantes y antiproliferativas de plantas comestibles y. IA. Y. medicinales de la Amazonía peruana, en el cual utilizo 23 extractos de plantas. AC. medicinales entre ellas la Bunchosia armeniaca determinando su actividad. FA R. M. antioxidante del pericarpio de esta planta mediante el método DPPH en medio .. 39. DE. metanolico encontrando un IC50 de 1,5 ± 0,1 mg/mL. CA. En esta investigación se realizó el estudio en extracto metanólico del pericarpio. IO TE. se sabe por cantidad de compuestos antioxidantes difieren de acuerdo a la parte de la planta y el medio en el cual se utiliza, en nuestro estudio se utilizó. BI. BL. etanol y las hojas de la planta, por ende, comparándolo con este articulo nuestro proyecto tendría menor IC 50. En la investigación de Sara de Fraga (2015) en su título Compuestos bioactivos y actividad antioxidante de la Bunchosia glandulifera, utilizo la pulpa de esta planta mediante el método DPPHº para determinar la capacidad antioxidante en cual fue IC50 0,27 mg/mL DPPHº el cual presento actividad antioxidante tanto por los compuestos bioactivos que encontró y mediante su IC 50 que comparado con las investigaciones anteriores presenta una actividad 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. prometedora falta realizar más estudios para poder tener más información, de acuerdo a estos artículos nuestros valores encontrados estarían dentro del rango de actividad antioxidante. .. 40. Un trabajo realizado por Vanesa P. en el 2017 con el título “Estructura química de algunos componentes del extracto etanólico del fruto Bunchosia Armeniaca (Cansa boca) con actividad antioxidante y antimicrobiana” evaluó la actividad. IC. A. antioxidante del extracto etanólico de la cansa boca aplicando el método. UI. M. DPPHº obteniendo IC 50 de 2,963mg/ml, como resultado, que es levemente. BI. O Q. inferior comparado con el estándar Vitamina C (IC 50 = 3,275 mg/ml) 41.. Y. Con respecto a la determinación de la actividad antimicótica, en la tabla 2 se. AC. IA. muestran los resultados de los diámetros de los halos de inhibición de las. M. diferentes concentraciones del extracto hidroalcohólico de las hojas de. FA R. Bunchosia armeniaca “ciruelo cansa boca”; así tenemos, para el grupo. DE. experimental I (extracto hidroalcohólico al 25%) un promedio de 7,176 mm de. CA. diámetro y para el grupo experimental II (extracto hidroalcohólico al 50%) 7,836. IO TE. mm de diámetro y para el grupo experimental III (extracto hidroalcohólico al. BL. 75%) registro un promedio de 8,236 mm de diámetro.. BI. Se encontró que para el grupo control negativo no se obtuvo halos de inhibición. Es así que el promedio del halo de inhibición del grupo experimental III (extracto hidroalcohólico al 75%) fue mayor que el de los otros grupos (a mayor concentración del extracto los halos de inhibición fueron mayores). Si bien es cierto no hay trabajos previos, en la especie B. armeniaca, con los cuales se pueda contrastar el trabajo realizado; existen investigaciones sobre la familia Malpigiácea, como el trabajo realizado por Mijail y Ali, se encontró que 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. la actividad antimicótica del extracto etanólico de Byrsonima crassifolia (Indano) sobre cepas de Cándida albicans y Trichophiton rubrum donde se obtuvo CMI de 8 mg/mL frente a Cándida albicans mas no se obtuvo actividad frente a Trichophiton rubrum, concluyendo que el extracto etanolico de B. crassiflolia. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. IC. A. tiene actividad antifúngica. 42.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.. CONCLUSIONES.. 1. Se demostró la capacidad antioxidante del aceite esencial de las hojas de B. armeniaca según el método con DPPHº, encontrando un IC50 de 0,4810 mg/mL. IC. A. 2. El porcentaje de captación de DPPHº por las hojas de B. armeniaca es. UI. M. mayor a medida que se aumenta la concentración del extracto.. O Q. 3. El extracto hidroalcohólico obtenido de las hojas de Bunchosia armeniaca. Y. BI. “ciruelo cansa boca” posee una actividad antimicótica mínima frente a. AC. IA. Cándida albicans a medida que aumentan las concentraciones del extracto. M. hidroalcohólico (25%, 50%, 75%) se obtiene un mayor diámetro del halo de. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. inhibición de Cándida albicans ATCC 10231.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.. 1. Sistema de Gestión Presupuestal, [Base de datos en línea]. Clasificador de Gastos – Año fiscal. Anexo 2; 2018, [Fecha de acceso 20 mayo 2018].Disponible. en:. https://www.mef.gob.pe/contenidos/presu_publ/anexos/Anexo_2_Gastos. M. IC. A. _RD026_2017EF5001.pdf. O Q. UI. 2. Villar del Fresno A. Farmacognosia General. España: Madrid; 1999.. BI. 3. Yacio M., Valdez M., Paredes O. Análisis del potencial antioxidante de. IA. Y. huitlacoche cosechado en diferentes etapas de desarrollo. [en línea].. AC. Universidad Autónoma de Zacatecas.[Fecha de acceso 7 mayo en. :. FA R. M. 2018].Disponible. http://coecytcoah.gob.mx/206%5C1%5C350%5C2009%5C2%5C24%5C. CA. DE. UAZ%20Vacio%20Adame.pdf. IO TE. 4. Guzmán M, Kouri G, Peregrino J. Enfermedades virales emergentes.. BL. Rev Cubana Med. Trop 2001;53(1): 5-15. BI. 5. Lebeque Y, Morris H, Calas N. Infecciones Nosocomiales: incidentes de la Pseudomona aeruginosa. Rev Cubana Med. 2006:45(1) 6. Garcia P. Bacterial resistence to microbial agents. Rev Chil Infect 2003; 20(1): S11-S23 7. Jorgelina G., Antioxidantes naturales consumo de antioxidantes naturales y esteroles vegetales en adultos mayores entre 65 y 75 años. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

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(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 29. Bruneton J. Elementos de Fotoquímica y Farmacognosia. Barcelona: Acribia S.A.; 1991. p. 242, 243, 491. 30. Villar M, Vargas O. Manual de fitoterapia. Lima: EsSalud, Organización panamericana de la salud; 2001[consultado 02 Mayo del 2018].p.41. Disponible en:. IC. A., Miranda M. Farmacognosia de los Productos Naturales.. UI. 2ed.Ed Félix Valera. La Habana 2012. 147-172.. M. 31. Cuéllar. A. http://www.bvsde.paho.org/texcom/manualesMEC/fitoterapia/cap4.pdf. BI. O Q. 32. Espinosa G, Vargas G, Engleman M. Contribución al Estudio de la. Y. Anatomía Foliar del Icaco (Chrysobalanus icaco L.). Bioagro. 14(1): 29 –. AC. IA. 36. [En línea ] [Fecha de acceso: 5 de Julio del 2018] Disponible en. M. URL:. DE. 0al%20estudio.pdf. FA R. http://cdcht.ucla.edu.ve/bioagro/Rev14(1)/5.%20Contribuci%C3%B3n%2. CA. 33. Silva V. Estudio Farmacotécnico en Drogas Vegetales. Ponencia. IO TE. organizada por la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad. BL. Nacional de Trujillo; 2009 Nov 10; Trujillo, Perú.. BI. 34. Sant’Anna B, Thadeo M, Alves R, Ascensão L. Anatomia e Histoquímica das estruturas secretoras do Caule de Spondias dulcis Forst. F. (Anacardiaceae). R. Árvore, Viçosa-MG; 30(3): 481 – 489. [En Internet] [Fecha. de. acceso:. 30. de. Agosto. 2018]. Disponible. en:. http://redalyc.uaemex.mx/pdf/488/48830319.pdf 35. Valverde G.J. Capacidad antioxidante del extracto acuoso de tres variedades tipo amarillo, naranja y morado de Ipomoea batatas (camote). 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. [Tesis para optar grado en nutrición]. Lima: Universiodad Nacional de. San Marcos; 2014. 36. Blois MS. Antioxidant determination by use of a stable free radical. Nature. 1985; 181:1199-1200. 37. Udaweediye R., Ginigandarage M., Shanika W. Compuestos Bioactivos y Actividad Antioxidante [Revista Mundial de Farmacia y Ciencias. A. Farmacéuticas].2016; Volume 5, Issue 10, 1237-1247. M. IC. 38. Mercado G., de la Rosa .L., Compuestos polifenolicos y capacidad. O Q. UI. antioxidante de las especies típicas consumidas en Mexico. Chihuahua-. BI. Mexico: Rev. Esp. Nutr Hosp.2013; 28(1):36-46.. IA. Y. 39. Tauchena J., Bortl L. Phenolic composition, antioxidant and anti-. AC. proliferative activities of edible and medicinal plants from the Peruvian. FA R. M. Amazon. Revista Brasileira de Farmacognosia. 2016; (26): 728-737.. DE. 40. Fraga S.S., Blank D.E., Peixoto C.R. Compuestos bioactivos y actividad. CA. antioxidante de Bunchosia glandulifera , International Journal of Food. IO TE. Properties. 2016; 19 (2): 467-473. 41. Peres V., “Estructura química de algunos componentes del extracto. BI. BL. etanólico del fruto Bunchosia armeniaca (Cansa Boca) con actividad antioxidante. y. antimicrobiana”.. [tesis. para. optar. Titulo. en. Farmacia].Lima: Universidad Inca Garcilazo de la Vega; 2017. 42. Shapiama M.A., Bazan A.P. Actividad antifúngica de fracciones del extracto etanólico de la corteza de Byrsonima crassifolia (Indano) FRENTE A Candida albicans y Trichophyton rubrum,” [tesis para optar Titulo en Farmacia]. Iquitos: Universidad Nacional de la Amazonia Peruana; 2006. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) FA R. M. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. IC. A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. BL. IO TE. CA. DE. ANEXOS. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IDENTIFICACION TAXONOMICA. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. IC. A. I.. BI. Fig. 1: Identificación y clasificación taxonómica.. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.. PREPARACION DE LA ESPECIE VEGETAL. M. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. M. IC. A. Recoleccion y preparacion de las hojas de Bunchosia armeniaca. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. OBTENCION DEL EXTRACTO HIDROALCOHOLICO. Fig. 2: Recolección, preparación y obtención del extracto hidroalcohólico de las hojas de Bunchosia armeniaca.. .. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III.. O Q. UI. M. IC. A. CAPACIDAD ANTIOXIDANTE. IV.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI. ACTIVIDAD ANTIMICOTICA. Fig. 3: Determinación de la actividad antimicótica frente a Cándida albicans. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. CAPACIDAD ANTIOXIDANTE Tabla 03.. Muestras problema del extracto hidroalcohólico de las hojas de. Bunchosia armeniaca. Cc extracto (ppm) 0. ̅ Abs 𝒙. % captura. 0.50046. 0.5003. 0.0000. IC. A. P. Abs. M. 0.5005. O Q. 0.41816. 16.4048. 0.3322. 33.6018. 0.2588. 48.2777. 0.1404. 71.9437. 0.0896. 82.0981. IA. 0.41849. 0.4182. BI. 20000. Y. M-1. UI. 0.49994. 0.33216. M. 40000. FA R. M-2. AC. 0.41803. 0.25879. IO TE. 0.25899. BI. M-4. 0.3315. 60000. BL. M-3. CA. DE. 0.33291. 80000. 0.25852 0.13422 0.13353 0.153347. M-5. 100000. 8.97E-02 8.94E-02 8.96E-02. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Grafico 02. Capacidad antioxidante expresado como “Concentración necesaria del antioxidante para reducir en un 50% la concentración inicial del DPPHº (IC50)” dele extracto hidroalcoholico de las hojas de Bunchosia armeniaca (cansa boca).. UI. M. IC. A. 90.0000 80.0000 70.0000 60.0000 50.0000 40.0000 30.0000 20.0000 10.0000 0.0000 0. 20000. 40000. 60000. Y. BI. O Q. y = 0.0008x - 0.4533 R² = 0.9895. 80000. IA. % captura DPPH. Determinacion deIC50. 100000. 120000. M. AC. [] extracto (ppm). DE. FA R. IC50= (50 - b)/0.0103. 0,4810 mg/mL. IO TE. CA. IC50. BI. BL. Imagen 01. Espectrofotometría del extracto realizando el IC 50. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 04. Curva de calibración del extracto hidroalcoholico de las hojas de Bunchosia armeniaca Cc (ppm). X Cc. Abs (nm). X Abs. (ppm). 4. 5.87E-02. UI. 0.10179. 8. 0.10138. BI Y IA. 24. 24. 0.29559. FA R. 0.20024. DE. 0.29417 32. 0.39723. 32. 0.39703. 32. 0.39719. 40. 0.2949. 0.29507. 24 32. 0.1999. 0.1996. 16. CA IO TE BL BI st5. 0.19981. M. AC. 16. 24. st4. 0.1003. O Q. 8. 16. st3. 9.77E-02. M. 8. 5.90E-02. A. 5.87E-02. 16. st2. 5.95E-02. 4. 8. st1. 4. IC. 4. st0. (nm). 40. 0.50046. 40. 0.5005. 40. 0.49994. 0.3972. 0.5003. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Grafico 03. Curva de calibración del extracto hidroalcoholico de las hojas de Bunchosia armeniaca.. DPPH curva de calibracion 6.00E-01. 4.00E-01 y = 0.0123x + 0.0044 R² = 0.9995. IC. A. 3.00E-01 2.00E-01. M. Absorbancia. 5.00E-01. O Q. UI. 1.00E-01. 0. 10. 20. 30. 40. BI. 0.00E+00. 50. AC. IA. Y. Concentración (ppm). BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. Imagen 02.. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ACTIVIDAD ANTIMICÓTICA Anexo 2.- Halos de inhibición (mm) del extracto hidroalcohólico de las hojas Bunchosia armeniaca “ciruelo cansa boca” frente a Cándida albicans ATCC 10231 TABLA Nº1: Halos de inhibición por primera exposición del extracto. A. hidroalcohólico de Bunchosia armeniaca “ciruelo cansa boca” frente a. M. IC. Cándida albicans ATCC 10231. Grupo. Grupo. Control negativo. experimental. experimental. (0%). (25%). experimental. (50%). (75%). 0. 0. -. -. -. 1. 2. 1. -. 3. -. 0. 0. 0. 1. -. -. -. 2. -. 1. 3. 1. 0. 0. 0. -. 1. -. 2. -. -. 2. 3. FA R. M. 0. AC. IA. Y. BI. O Q. UI. Grupo. CA. DE. -. IO TE. TABLA Nº2: Halos de inhibición por segunda exposición del extracto. BL. hidroalcohólico de Bunchosia armeniaca “ciruelo cansa boca” frente a. BI. Cándida albicans ATCC 10231 Grupo. Grupo. Grupo. Control negativo. experimental. experimental. experimental. (0%). (25%). (50%). (75%). 0. 0. 0. -. 1. -. -. -. 1. 2. 1. 1. 0. 0. 0. -. 2. 1. -. 2. 2. 2. 3. 3. 0. 0. 0. -. -. 1. -. -. 2. 3. 2. 3. 39 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA Nº3: Halos de inhibición por tercera exposición del extracto hidroalcohólico de Bunchosia armeniaca “ciruelo cansa boca” frente a Cándida albicans ATCC 10231 Grupo. Grupo. Grupo. Control negativo. experimental. experimental. experimental. (0%). (25%). (50%). (75%). -. 1. 2. 2. 0. 0. 0. 2. -. 1. -. 2. 0. 0. 0. 1. 2. 1. 3. -. 2. 3. 2. -. 3. 2. 2. 2. 2. 2. 3. A. 1. IC. 0. M. 0. UI. 0. BI. O Q. 2. IA. Y. TABLA Nº4.- Promedio por repetición de los halos de inhibición producidos por. AC. exposición del extracto hidroalcohólico de las hojas de Bunchosia armeniaca. FA R. M. “ciruelo de cansa boca” frente a Cándida albicans ATCC. DE. 10231. CA. REPETICION. 3. BL. 2. BI. 1. Gi. Gii. Giii. 0. 1. 1,6. 2,16. 0. 1,25. 1,75. 2,22. 0. 1,28. 2,16. 2,33. IO TE. Control (-). DIAMETROS (mm). Leyenda: Control (-): DMSO q.p. Gi: Extracto hidroalcohólico al 25%, Gii: Extracto hidroalcohólico al 50%, Giii: Extracto hidroalcohólico al 75%. º Incluye diámetro del disco. 40 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

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