Sebastián Hernández
shernandez@veritas.cr
Construyendo capacidades para la implementación de CITES para la comercialización de aletas de
tiburones en Latino América
Taller de identificación de especies de tiburones
Chimbote 2018
Tipos de aletas Quebrada seca - Chile
Secado de aletas de tiburones
Clasificación de las aletas
Tamaño
Secado de aletas de tiburones
Clasificación de las aletas Quebrada seca - Chile
Secado de aletas de tiburones
Especies Clasificación de las aletas Quebrada seca - Chile
Secado de aletas de tiburones
Coquimbo - Chile
Secado de aletas de tiburones
Mancora - Perú
Secado de aletas de tiburones
Puerto San José -Guatemala
Comercialización y Exportación
Comercialización y Exportación
Trazabilidad del producto
Exportación a mercados asiaticos
Para que se usan las aletas
secas en Hong Kong?
$100 - 200 US dollar
$20 - 80 US dollar
CITES (Convención Internacional del Comercio de Especies en Peligro de Fauna and Flora) = 183 países
CoP XVI de CITES en Bangkok, Tailandia (2013), apyo de 2/3 del plenario para la
inclusión de:
Sphyrna lewini, S. mokarran, y S. zygaena, Carcharhinus longimanus, Lamna nasus,
Manta spp.
https://www.cites.org/eng/disc/what.php
CITES (Convención Internacional del Comercio de Especies en Peligro de Fauna and Flora) = 183 países
CoP XVII de CITES en Johannesburgo, South Africa (2016), apoyo la inclusión
de:
Carcharhinus falciformis, Alopias spp. Mobula spp.
CITES (Convención Internacional del Comercio de Especies en Peligro de Fauna and Flora) = 183 países
Carcharhinus falciformis
Alopias spp.
https://cites.org/eng/cop/17/prop/index.php
Lista de especies de tiburones incluidas en el Apendice II from CITES
Mundy-Taylor et al. 2014
1 ONG
2 academias
10 instituciones gubernamentales (~ 25 personas)
Taller Institucional (Junio 2014)
Identificación morfológica & genética de aletas de tiburones
1 2
3 4
Taller de identificación morfológica de aletas de tiburones Octuber 2014 - Costa Rica (Guardacostas)
Confiscación de aletas de tiburones (UPS)
Aeropuerto Juan Santamaría / November 2014 - Costa Rica
40 sacos, solo 3 sacos fueron inspeccionados -230 aletas pectorales del tiburon sedoso o gris (Carcharhinus falciformis)
-6 aleta pectorales del tiburon martillo (Sphyrna zygaena) - 4 aletas pectorales del tiburón punta blanca oceánico (Carcharhinus longimanus)
Confiscación de aletas de tiburones (UPS)
Aeropuerto Juan Santamaría / November 2014 - Costa Rica
Confiscación de aletas de tiburones (UPS)
Aeropuerto Juan Santamaría / November 2014 - Costa Rica
Willian Jiménez José Joaquín Calvo
Javier Guevara
Carcharhinus longimanus
Donación de aletas de tiburones por el exportador
“Inversiones Cruz” - Costa Rica
Sphyrna zygaena
Vista dorsal (aleta pectoral)
Vista ventral (aleta pectoral)
Vista dorsal
Vista ventral
Carcharhinus longimanus
Donación de aletas de tiburones por el exportador
“Inversiones Cruz” - Costa Rica
Taller de Identificación morfológica y genética de aletas de tiburones - Agosto 2014 (Panamá)
Taller de Identificación morfológica y genética de aletas de tiburones - Mayo 2016 (Panamá)
Taller de Identificación morfológica y genética de aletas de tiburones - Mayo 2016 (Panamá)
Visita al “Mercado del Marisco”
Ciudad de Panamá
Visita al “Mercado del Marisco”
Ciudad de Panamá
Caracterización biológica - pesquera de las áreas de crianza en la Bahía de Chame : implicancias para el manejo (Panamá)
Taller de Identificación morfológica y genética de aletas de tiburones - Mayo 2017 (El Salvador)
Visita al puerto La Libertad - Mayo 2017 (El Salvador)
Visita al puerto La Libertad - Mayo 2017 (El Salvador)
Colección de fotos y muestras de tejidos de aletas de tiburones - Puerto Acajutla (El Salvador)
Identificación genética utilizando marcadores moleculares especie específicos - Universidad El Salvador
Worshop of Shark Biology – Universidad Científica
Taller de Identificación morfológica de aletas de tiburones Julio 2014 - Perú
Taller de Identificación morfológica de aletas de tiburones Julio 2014 - Perú
Taller de Identificación morfológica de aletas de tiburones Abril 2016 - Perú
Desembarque de tiburones en Pucusana - Perú
Tiburón diamante Isurus oxyrhinchus
Identificación morfológica de aletas húmedas
Tiburón Zorro = Alopias pelagicus
Identificación morfológica de aletas húmedas
Sedoso o Gris = Carcharhinus falciformis
Identificación morfológica de aletas húmedas
Tiburón Azul = Prionace glauca
Identificación morfológica de aletas húmedas
Tiburón Martillo Sphyrna lewini?
o
S. zygaena ?
Identificación morfológica de aletas húmedas
Desembarque de tiburones puerto San José - Perú
Taller de Identificación morfológica de aletas de tiburones Mancora 2017 (Perú)
Identificación morfológica de rayas Mancora 2017 (Perú)
Mobula japanica
Mobula? Manta?
Mobula japanica
Pez guitarra (Pseudobatos planiceps)
Dorsal fin M. japanica
Aleta dorsal
Cruzeta = Sphyrna zygaena
Taller de Identificación morfológica de aletas de tiburones Mancora 2017 (Perú)
Aleta pectoral (vista dorsal) Aleta pectoral (vista ventral)
Taller de Identificación morfológica de aletas de tiburones Mancora 2017 (Perú)
Aleta caudal
Lóbulo superior
Lóbulo inferior
Taller de Identificación morfológica de aletas de tiburones Mancora 2017 (Perú)
Secadero de aletas de tiburones Mancora 2017 (Perú)
Carcharhinus falciformis
Pseudobatos planiceps Alopias pelagicus
Sphyrna zygaena
Tiburón Zorro = Alopias pelagicus
Secadero de aletas de tiburones Mancora 2017 (Perú)
Tiburón gris = Carcharhinus falciformis
Secadero de aletas de tiburones Mancora 2017 (Perú)
Cruzeta = Sphyrna zygaena
Secadero de aletas de tiburones Mancora 2017 (Perú)
Tiburón Azul = Prionace glauca
Secadero de aletas de tiburones Mancora 2017 (Perú)
Pez guitarra
(Pseudobatos planiceps)
Secadero de aletas de tiburones Mancora 2017 (Perú)
Identificación de aletas de tiburones Ilo 2017 (Perú)
Identificación de aletas de tiburones Ilo 2017 (Perú)
Tiburón Azul = Prionace glauca
Identificación de aletas húmedas de tiburones Ilo 2017 (Perú)
Tiburón Diamante = Isurus oxyrhinchus
Identificación de aletas húmedas de tiburones Ilo 2017 (Perú)
Tiburón sardinero = Lamna nasus
Identificación de aletas húmedas de tiburones Ilo 2017 (Perú)
Necesitamos un mejor programa!!! Evaluando la identificación morfológica de aletas de tiburones
ISharkFin
Wet fins Dry fins
80
60
40
20
0
COSTA RICA PERÚ CHILE
Percentage of Correspondence
47/86
35/146
80/111
2/18
120/238
13/147
Algunos resultados interesantes: Que tanto debemos confiar en el programa ISharkFin para la identificación de aletas?
100
Wet fins Dry fins
100 100
80 60
40
20
0
Dorsal fin
Dorsal view Pectoral fin
Ventral view Pectoral fin
Algunos resultados interesantes: Que tanto debemos confiar en el programa ISharkFin para la identificación de aletas?
Correlación digital invariante
Análisis de imágenes de aletas de tiburones
Position Size Rotation
Especie desconocida Filtro especie-específico
Patrón de difracción
Correlación digital invariante
Análisis de imágenes de aletas de tiburones
Especie desconocida Filtro especie-específico
Correlación digital invariante
Análisis de imágenes de aletas de tiburones
AD: Aleta Dorsal Alopias pelagicus
Especie desconocida Filtro especie-específico
+
Correlación digital invariante
Análisis de imágenes de aletas de tiburones
Correlación positiva
VDAP: Vista Dorsal Aleta pectoral Alopias pelagicus
Especie desconocida Filtro especie-específico
+
Correlación digital invariante
Análisis de imágenes de aletas de tiburones
Correlación positiva
VVAP: Vista ventral aleta pectoral Alopias pelagicus
Especie desconocida Filtro especie-específico
+
Correlación digital invariante
Análisis de imágenes de aletas de tiburones
Correlación positiva
Sinergia del uso de herramientas para la identificación de aletas
Conclusiones
P. glauca I. oxyrinchus L. nasus
Análisis de imagenes Análisis genéticos
Identificación de especies
Establecer la fiscalización visual de la ID de las aletas
(comercializadas/exportadas)
Paso 1: Encontrar la primera aleta dorsal
¿Es la aleta del mismo color en ambos lados?
SI…….Posible aleta dorsal No…….Aleta pectoral
¿Existe una fila de cartílago en la base, con cada pieza de cartílago cercanos al adjacente?
Si……. = aleta dorsal (es muy probable que se observe el borde libre de la dorsal)
No…….
Solo material esponjoso, En algunos casos se
observa partes de cartílago
= lóbulo inferior aleta caudal
Paso 1: Encontrar la primera aleta dorsal
Sardinero, tintorera, porbeagle - Lamna nasus
Perro, punta blanca oceánico - Carcharhinus longimanus
Primera aleta dorsal del tiburón martillo son altas!!!!!!
Cornuda cruz (Sphyrna zygaena)
Cachuda, Cornuda, Martillo – Sphyrna zygaena
Los aletas dorsales de los tiburones martillos son largas en altura (en proporción más largas que anchas < 2.5). Coloración gris y/o café con base delgada con filas de pequeñas piezas de cartílago.
Hammerhead sharks (3 large species, all CITES App II)
Key Feature: High aspect ratio (i.e., fin is tall and narrow)
Fin is light grey or brown, without other markings
Fin base is narrow and has row of small, oval cartilage
Diamante, maco, marrajo – Isurus oxyrhinchus
El tiburón cola de zorro (Alopias) tiene una base delgada de la aleta dorsal, donde las piezas de cartílago son de forma irregular.
Otras aletas “alta” (en proporción más largas que anchas < 2.5) son gris oscuras con una base delgada
Tiburón zorro
(Alopias superciliosus)
Las aletas de tiburones zorros (Alopias spp.) tienen una base gruesa, con cartilagos basales de forma tamaño irregular a lo largo de la base
Comparasión morfológica de aletas secas y húmeda de la aleta dorsal de Alopias pelagicus
Aleta húmeda Aleta Seca
Comparando el cartilago basal entre aletas humedas y secas a partir del corte basal del lobulo inferior de la aleta caudal o timón en Alopias pelagicus Aleta húmeda
Aleta húmeda
Aleta seca
Aleta Seca
Aletas secas de tiburón zorro Alopias pelagicus??
A. pelagicus
Vista dorsal
Vista ventral
Vista ventral Vista dorsal
Alopias spp.
Alopias spp.
Vista dorsal
Vista ventral
Aletas pectorales secas de Alopias superciliosus
Vista dorsal
Vista ventral
Aletas pectorales húmedas de Alopias vulpinus
Vista dorsal
Vista dorsal
Vista ventral
Vista ventral
Laboratorio de Biología Molecular (BIOMOL)
Centro de Programas Internacionales (CPI)
Identificación genéticas y morfológicas de aletas
de tiburones de países en Latinoamérica
Kit Qiagen Inc. T
4-5 hrs.
Extracción de ADN
Promega
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Reactivos
Water: mantains the final concentration of the reagents in the desired volumen Buffer: keeps the master mix at the proper pH so the PCR
Magnesium chloride (MgCl2): act as a cofactor and is a catalyzer in the PCR Nucleotides (A,C,G,T): provide the nucleotide bases for the synthesis of DNA Primers: cut the DNA in specific region to replicate the DNA
Taq polimerase (enzyme): add the nucleotides to the new strand replicated
ADN
Amplificar una región específica
Thermocycler
Polimerase Chain Reaction (PCR)
(35 cycles ºT)
Thermocycler
95 ºC 60s
strands separated Desnaturation
New DNA strands
72 ºC 120s
Taq polimerase Extension
DNA doble helix
40-60 ºC 60s Annealing
Primers anneal to flanking regions
(35 cycles ºT)
wells
Polysaccharide matrix used to visualize the fragment
-
+
-
+
MMR: molecular mass ruler
Shivji et al. 2002
The primers species-specific and multiple format accurately and sensitively identified several shark species
Múltiples partidores (especie-específico)
Fragment of DNA amplified (size of fragment = species)
Primers species-specific
5´-AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3´ 5´-AGGTGCCTGTAGTGCTGGTAGACACA-3´
5´-GTCGTCGGCGCCAGCCTTCTAAC-3´ 5´-AGTGCTTGACCATTCGGTGTGCGT-3´
DNA
?
ITS2
nuclear DNA sequence
Molecular markers species-specific based on the
“Internal Trancribed Spacer 2” (ITS2)
ITS2
TTCGCC AAGCGG
Fish5.8SF
ATACGCC TATGCGG
TGCGATC ACGCTAG
Fish28SR
5´-AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3´
Primers species-specific
5.8SADNr
28SADNr
Molecular markers for shark identification
Amplicón diagnóstico 929 pb
Amplicón diagnóstico 1350 pb ATACGCC TTCGCC
TGCGATC
ITS2
TTCGCC AAGCGG
Fish5.8SF
ATACGCC TATGCGG
TGCGATC ACGCTAG
Fish28SR
5´-AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3´
Amplicón diagnóstico 929pb
Amplicón diagnóstico 1350 pb
5.8SADNr
28SADNr
ATACGCC TTCGCC
TGCGATC
Primers species-specific
Molecular markers for shark identification
GACACA CTGTGT
ITS2 Fish5.8SF
ATACGCC TATGCGG
TGCGATC ACGCTAG
Fish28SR
5.8SADNr
28SADNr
5´-AGGTGCCTGTAGTGCTGGTAGACACA-3´
Amplicón diagnóstico 771pb
Amplicón diagnóstico 1350 pb
ATACGCC CTGTGT
TGCGATC
Primers species-specific
Molecular markers for shark identification
TCTAAC AGATTG
ITS2 Fish5.8SF
ATACGCC TATGCGG
TGCGATC ACGCTAG
Fish28SR
5.8SADNr
28SADNr
5´-GTCGTCGGCGCCAGCCTTCTAAC-3´
Amplicón diagnóstico 556pb
Amplicón diagnóstico 1350 pb
ATACGCC AGATTG
TGCGATC
Primers species-specific
Molecular markers for shark identification
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 N M
929 pb
771 pb
1000 pb
554 pb
Results
Shark species involved in the Chilean shark
fin trade to Asian markers
Proportion of pelagic shark species from drying warehouse
89.3%
13.6%
1.7%
I. oxyrhinchus
L. nasus
P. glauca
A. superciliosus
0.2%
Unidentified shark species
N = 652
Genetic results
ITS2 Fish5.8SF
Fish28SR
Amplicón diagnóstico 782pb
Amplicón diagnóstico 1350 pb
5.8SADNr
28SADNr
S. mokarram
Amplicón diagnóstico 445 pb
S. lewini S. zygaena
Amplicón diagnóstico 249pb DNA
?
Muchas gracias por su participación!!!!!!
+506 84017932
Guía de identificacíon de los apéndices prebranquiales (placas de las branquias) de especies de Móbulas para la aplicación de
medidas para el comercio
International measures
“Regulate and monitoring the trade of some of the most threatened sharks”
Sphyrna lewini Sphyrna mokarran Sphyrna zygaena
Carcharhinus longimanus
CoP 16. 2013: Inclusion in Appendix II
Lamna nasus Manta spp.
CITES (Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora)
International measures
“Regulate and monitoring the trade of some of the most threatened sharks”
Sphyrna lewini
CoP 17. 2016: Four proposal for inclusion in Appendix II, only three were accepted. CoP Prop. 45 for Potamotrygon motoro.
CITES (Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora)
Alopias pelagicus Alopias vulpinus Alopias superciliosus
Carcharhinus falciformis Mobula spp.
Potamotrygon motoro
IUCN Classification: Vulnerable globally
Manta oceánica (Mobula birostris)
Manta de arrecife (Mobula alfredi)
• Todas las especies de Móbulas son filtradores
• Cada individuo tiene 5 pares de hendiduras branquiales
• Las branquias estan internamente sostenidas por un placa branquial
Hendiduras branquiales
filamentos branquiales para succionar y retener el plancton y peces pequeños
Apéndices Prebranquiales
“Características generales”
Cuando las placas branquiales son removidas de los individuos capturados, Los pescadores cortan por la mitad las placas y éstas son secadas para posteriormente ser comercializadas.
Pesquerías de Mobulas y Mantas
“Características generales”
Las placas branquiales son usadas en el mercado Asiático con fines medicinales.
Debido a esta razón la demanda de estos productos ha incrementado las pesquerias de estas especies.
En general, las Mobulas son mas pequeñas que las Mantas y pueden ser identificadas por sus diferencias morfológicas de su boca
Identificación entre Mobulas y Mantas
“Características generales”
MANTA:
Boca posición
terminal MOBULA:
Boca ventral
SI NO
La boca, esta distribuida en posición terminal?
Mobulas tiene la mandíbula en posición ventral
Mantas tiene la mandíbula en posición terminal
30cm regla
1. Tamaño: medición de la longitud total de la placa branquial comercializada
3. Bordes de los filamentos:
• suaves (arriba)
• separados (abajo)
Identificación entre Mobulas y Mantas
“Características generales”
Caracteres diagnosticos que son utilizados para identificar cada tipo de placa branquial:
- Tamaño placa branquial - Color placa branquial
- Bordes de los filamentos branquial
2. Color: bi-color (abajo) o uniforme (arriba)
30cm regla
Móbula
Manta
Clave para la identificación de las placas entre Mobulas y Mantas
Pregunta 1:
La placa branquial, es mas larga que 30cm y su coloración es uniforme (café oscuro/negruzca)?
SI = Manta
NO = Ir a pregunta 2
Móbula Pregunta 2:
Tienen las placas branquiales un borde central de coloración blanca y/o con separados
filamentos branquiales?
SI = Mobula NO = Manta
Placas branquiales de Mobula birostris &
M alfredi
30cm regla
1. Tamaño placas branquiales = Largas
2. Coloración placas branquiales = uniforme café oscuro/negro 3. Filamentos branquiales = Suaves
Borde filamentos
Placas branquiales café/negro y borde de los filamentos suaves