UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE MEDICINA
UNIDAD DE SEGUNDA ESPECIALIZACIÓN EN
ESTOMATOLOGÍA
“NIVEL DE CRECIMIENTO DE LA Candida albicans ATCC 10231
SOBRE LA RESINA ACRÍLICA DE TERMOCURADO PARA
BASES DENTADURAS”.
TESIS
PARA OPTAR EL TÍTULO DE:
ESPECIALISTA EN REHABILITACIÓN ORAL
AUTORA : C.D. Ms. Claudet Sánchez, Fiorella Grace
ASESOR : Esp. Dr. Alarco La Rosa, Luis Felipe
TRUJILLO – PERÚ
2013
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DEDICATORIA
A mis padres
A mi abuela Clotilde
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AGRADECIMIENTO
A cada uno de los docentes de la Unidad de Segunda
Especialización en Estomatología que contribuyeron a
mi formación como especialista.
A la Doctora Elva Mejía Delgado, por su
asesoramiento en la ejecución de esta tesis.
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ÍNDICE GENERAL
DEDICATORIA ... ii AGRADECIMIENTO ... iii PRESENTACIÓN ... iv INDICE GENERAL ... iv RESUMEN ...v ABSTRACT ... vi I. INTRODUCCIÓN ... 1II. MATERIAL Y MÉTODOS ... 11
III. RESULTADOS ... 20 IV. DISCUSIÓN ... 25 V. CONCLUSIONES ... 29 VI. RECOMENDACIONES ... 30 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ... 31 ANEXOS
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RESUMEN
El presente estudio de tipo experimental, tuvo como objetivo determinar el nivel de crecimiento de la Cándida albicans ATCC 10231 sobre la resina acrílica de termocurado para bases de dentaduras. Para lo cual se evaluaron un total de 36 muestras de 3 diferentes marcas comerciales de resinas acrílicas.
Para determinar si existe diferencia de los niveles de crecimiento de Cándida albicans entre los tres tipos de resinas se empleó la prueba de comparación de medias utilizando la desviación t de student con un nivel de significancia del 5% (p<0.05). Los resultados mostraron que el nivel de crecimiento de la Cándida albicans ATCC 10231 en promedio, sobre la resina acrílica para bases de dentaduras no se diferencia estadísticamente de un tipo de resina a otro (p=0.951>0.05).
La resina acrílica marca Vitalloy ® presentó un máximo de 87600 UFC no siendo estadísticamente significativo, La resina acrílica marca Triplex ® presentó un máximo 90150 UFC, que lo coloca en el segundo nivel de crecimiento en esta investigación. no siendo estadísticamente significativo. La resina acrílica marca Vitacron ® presentó un máximo de 72300 UFC ocupando el tercer lugar y no es estadísticamente significativo.
Palabras claves: Cándida Albicans, Resina Acrílica de termocurado
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ABSTRACT
The present study of experimental nature had as an objective to determine the level of growth of Cándida albicans ATCC 10231 over the acrylic resin of thermocuring for dental supports. To achieve this, a total of 36 samples of 3 different commercial brands of acrylic resin were evaluated.
To determine if there was a difference in growth levels of Cándida albicans ATCC 10231 between the three types of resins a test of median comparison was employed, utilizing the t-student deviation with a significance level of 5% (p<0.05). The results showed that the level of growth of Cándida albicans ATCC 10231 on average, over acrylic resin for dental supports is not statistically different from one brand of resin to the other (p=0.951>0.05).
The acrylic resin by the brand of Vitalloy ® showcased a maximum of 87600 UFC without being statistically significant. The acrylic resin by the brand of Triplex ® showed a maximum 90150 UFC, which places it at a second level of growth in this investigation, without being statistically significant. The acrylic resin by brand Vitacron ® showed a maximum of 72300 UFC occupying the third place and without being statistically significant.
Key words: Candida albicans . termocure acrylic resin
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I. INTRODUCCIÓN
La prótesis dental completa es un tratamiento para el desdentado total mediante aparatos bucales que reponen artificialmente los dientes naturales y compensan la atrofia de los huesos maxilares que se produce tras la pérdida de los dientes. Por lo tanto, no sólo sirven para mejorar la masticación, sino también el habla y la estética, que están muy deteriorados en el paciente completamente desdentado.1-3.
El aspecto psicológico que ocasiona la perdida de dientes puede alcanzar un gran significado, en ocasiones mas lesivo para el paciente que la propia perdida de la función. Con la pérdida de los dientes y la disminución del reborde residual pueden aparecer cambios secundarios en las características faciales, al quedar alterado el soporte labial y al reducirse la altura facial da como resultado de la perdida de la dimensión vertical. 2,3.
La demanda de tratamiento de este tipo hasta en la actualidad sigue siendo elevada a pesar del éxito inicial de los cuidados dentales destinados a la prevención. Las prótesis dentales completas seguirán siendo parte del ámbito de actividad de los odontólogos generales y especialistas durante las próximas décadas.3,4.
Lo antes expuesto se ve respaldado por las encuestas nacionales del National Institute of Dental Research en los Estados Unidos, el que señala que el edentulismo total se produce en el 10,5% de la población
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adulta, adultos de 40 - 44 años presentan edentulismo total en un 26% y a los 65 a más años presenta edentulismo total en un 44%. Por tanto el edentulismo total continúa siendo un asunto significativo en los Estados Unidos que es uno de los países con mayor desarrollo por lo tanto nosotros podemos decir que el porcentaje de edentulismo total será mayor en muestro país debido a que no tenemos políticas de preventivas de salud oral para adultos, y somos un país en vías de desarrollo.3,4.
A lo largo de la historia, en la fabricación de las bases para dentaduras se han empleado varios materiales, desde madera, hueso, marfil, cerámica, metales, aleaciones metálicas y numerosos polímeros (polimetilmetacrilato, poliestireno, poliamida, resina epóxica, policarbonato, etc.). De todos los materiales empleados, el que mostró mejores propiedades globalmente fue el polimetilmetacrilato (PMMC), y como resultado, este último ha dominado el terreno de las bases de las dentaduras en los últimos tiempos.3,5,6.
Desde mediados de la década de 1940, la mayor parte de las bases protésicas se han confeccionado con resinas de polimetilmetacrilato. Dichas resinas son plásticos resilentes formados por la unión de múltiples moléculas de metilmetacrilato. El polimetilmetacrilato puro es sólido transparente e incoloro. Sus propiedades de color permanecen estables bajo condiciones intraorales normales, y se ha demostrado la idoneidad de sus propiedades físicas para su uso dental.3,5-7.
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Los polímeros obtenidos a partir del ácido acrílico o metacrílico (poliácidos) son duros y transparentes, pero su polaridad permite la sorción de agua que tiende a separar las cadenas ocasionando un ablandamiento general y una pérdida de resistencia por lo que no se utilizan en la boca. Sí se usan, por el contrario los ésteres de los poliácidos, así mediante la sustitución del ácido metacrílico, obtenemos el metacrilato de metilo. A partir del metacrilato de metilo por una reacción de polimerización se obtiene el polimetilmetacrilato de metilo que es material básico que constituye la base de la prótesis.5,6.
Se entiende por polimerización la formación de cadenas largas o macromoléculas, de elevado peso molecular, a partir de la unión de moléculas pequeñas (metacrilato de metilo) que constituyen los monómeros.5-7.
En la actualidad, los materiales para base de dentaduras de polimetilmetacrilato se suministran en forma de dos componentes, el monómero líquido (metacrilato de metilo) se mezcla con el polímero que se presenta en forma de polvo (formado de pequeños fragmentos de cadenas de polimetacrilato de metilo). El monómero disuelve parcialmente al polímero dando una masa plástica. Esta masa plástica se ataca dentro de un molde, donde el monómero polimeriza, debido a esta presentación, se puede observar una estructura de tipo esférico, donde hay una matriz uniforme en la que resaltan las partículas esféricas del polímero.5,6
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Las características y propiedades de las resinas acrílicas o comúnmente llamados acrílicos son: biocompatibilidad, duración dentro de la boca, ausencia de irritación, forma adaptada exacta y permanente, resistencia del color y aspecto natural, gran resistencia mecánica y poca tendencia a la abrasión, buenas propiedades higiénicas, estabilidad ante cambios del entorno (intra y extraoral, cambios de temperatura).5-7.
El polimetilmetacrilato presenta ligeras variaciones según el proceso empleado en su polimerización: termocurado, autocurado, polimerización al microondas y moldeado por inyección, siendo los utilizados para la confección de prótesis completas los acrílicos que tienen la polimerización de termocurado.5-7.
El Polimetilmetacrilato termocurado generalmente se presenta en forma de dos componentes, polvo y líquido; el polvo, compuesto de microesferas de polímero polimetilmetacrilato transparentes o pigmentadas y con el 0,5% de peso de iniciador, generalmente peróxido dibenzoico. Las propiedades mecánicas se pueden mejorar empleando copolímeros y metilmetacrilato con cloruro de vinilo y acetato de vinilo.5.
El líquido, compuesto de monómero metilmetacrilato es volátil, transparente. Su punto de ebullición es de 100,3 °C, contiene el 0,01% de hidroquinona como estabilizador. Algunos materiales contienen hasta el 6% de agente entrecruzador, como el etilenglicoldimetacrilato (EGDMA). 5.
En nuestro mercado de materiales odontológicos para uso en laboratorio contamos con polimetilmetacrilicato de termocurado la
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reacción de termocurado es el proceso de calentamiento utilizado para controlar la polimerización, luego se debe dejar enfriar la mufla de forma paulatina a la temperatura del ambiente unos 30 minutos, después la prótesis puede ser desenmuflada y preparada, luego se esperara 24 horas para su estabilización para poder ser instalada en paciente.5,6
La superficie de la prótesis presenta a las pocas horas de su inserción en boca una película orgánica adquirida constituida por proteínas presentes en la saliva. Estas proteínas actuarían como mediadores en la fijación de la placa bacteriana a la superficie de la prótesis.5,6
En los portadores de prótesis completas los microorganismos que predominan son lactobacilos, estreptococos y las especies de cándida, que puede sobre infectar lesiones mucosas existentes. Para una capacidad de defensa de la mucosa oral frente a los ataques microbiológicos tiene especial importancia que esté humedecida por una saliva mucosa. El uso intensivo de prótesis influye de forma negativa sobre la capacidad de regeneración de la mucosa oral.3,7.
En pacientes con edad avanzada, la incubación de la mucosa oral bajo la base de la prótesis, y con frecuencia la insuficiente higiene dental explica en parte las modificaciones indeseables en el equilibrio microbiológico de la cavidad oral. Cuando existe una prótesis total las condiciones ecológicas para los microorganismos que colonizan un boca desdentada total son radicalmente distintas a las presentes en la boca normal.7,8.
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La Cándida albicans, es encontrada en la cavidad oral en 25% a 50% de individuos sanos, incluyendo adultos y niños. Pero cuando tenemos pacientes portadores de dentaduras totales, estos valores aumentan de 60% a 100%. Cándida albicans es la especie más común, y representa al menos el 70% de los microorganismos aislados en los portadores de dentaduras.7.9,10.
El género Cándida está encuadrado dentro de los hongos imperfectos (deuteromycota) de la clase Blastomycetes y dentro de la familia Criptococcaceae. La Cándida puede observarse como células redondeadas u ovaladas de 3 a 5 μm, grampositivas y con un metabolismo principalmente aerobio. Es capaz de producir gemaciones y puede formar pseudomicelio o verdadero micelio o ambos y tiene una reproducción asexual por blastoconidios.7-10.
La Cándida albicans al ser un hongo asexual que presenta una pared celular compuesta fundamentalmente por polisacáridos (30-50%) y diversas proteínas (20-40%). En la superficie de la pared celular de Cándida albicans se han descrito estructuras fibrilares, similares a las fimbrias de algunas bacterias, que participan en la adhesión del hongo a las células del hospedador.9-11.
Su temperatura óptima de crecimiento es de 37ºC y coloniza superficies húmedas desde la boca hasta el tubo digestivo encontrándose también en piel y mucosa de vagina y uretra.10,11.
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La Cándida albicans posee algunos factores de patogenicidad que le permiten desarrollar patología con más frecuencia de lo que ocurre con otras especies de Cándida. Necesita encontrarse en fase levaduriforme para iniciar la lesión, aunque las variaciones nutricionales y ambientales modulan, con el tiempo, su conversión en fase micelial, en la que, además de conservar intacta su virulencia previa, ésta constituye un buen mecanismo de escape a la actividad fagocitaria de los macrófagos.12,13.
La producción de adhesina (estructura de la superficie celular que promueve la adhesión) está directamente relacionada con las condiciones de cultivo de la levadura. Está comprobado que usando diferentes medios y temperaturas de cultivo se modifica la capacidad de adhesión de Cándida albicans a las células del epitelio bucal. La adhesina de la cándida se puede estructurar formando una capa flocular o una capa fibrilar. La capa flocular interviene en la adhesión de Cándida las células de la mucosa oral.14-16
La adhesión de Cándida esta mediada por una sustancia álcali-soluble contenida en la pared de la levadura que es la manosa. La quitina es otra sustancia similar a la adhesina, presente en la pared celular y con posible participación en la adhesión.13,16.
Velazco G, Ortiz R, en La Habana 2009; Realizó un estudio sobre evidencia microscópica de la presencia de Cándida albicans en bases protésicas retiradas de la cavidad bucal , en la que concluyó que existen claras evidencias en relación con la adherencia de Cándida albicans a la
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superficie acrílica de la base de la dentadura. La unión de Cándida albicans hacia la mucosa bucal intervienen una serie de sistemas de reconocimiento (receptores-ligandos) específicos.17
Velazco G, en La Habana 2011, realizó un estudio sobre Análisis microscópico de la superficie de tres tipos de resina acrílica utilizada para base de dentaduras removibles, en la que concluyó que las resinas acrílicas en cualquiera de sus formas siguen siendo los materiales de elección para la elaboración de las bases de las dentaduras removibles. Los procesos de curado deficientes ocasionan gran cantidad de defectos estructurales del material que permiten la adherencia de microorganismos como la Cándida albicans que favorecen la aparición de lesiones como la Estomatitis subprotésica.18.
Romero E, en México 2006, realizó un estudio sobre Análisis microscópico de la adherencia de Cándida albicans in vitro sobre resina acrílica utilizada para bases de dentaduras procesada con tres diferentes técnicas, , en la que concluyó que la estomatitis subprotésica está asociada a la adherencia y colonización de Cándida albicans a la base de las dentaduras y a otros cofactores, como un pH ácido, ingesta aumentada de carbohidratos, diversas enfermedades sistémicas y tratamientos farmacológicos.19.
Serrano C, en Madrid 2004, realizó una investigación sobre Estudio in vitro de la adherencia de Cándida albicans a las resinas acrílicas, en el que concluyó que la adhesión de Cándida albicans a los diferentes tipos
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de polimetilmetacrilato muestra diferencias estadísticamente significativas. La determinación de la adhesión que se realiza por diferentes métodos coincide en la apreciación cualitativa pero los resultados difieren en la apreciación cuantitativa para los valores más bajos y más altos de adhesión.20.
Analizadas las investigaciones anteriormente presentadas, y considerando que la resina acrílica de termocurado es el material de elección en sus diversas marcas, y que la Cándida albicans es frecuentemente encontrada en las lesiones de estomatitis sub protésica nos surge la inquietud para investigar el nivel de crecimiento de los microorganismos oportunistas como la Cándida albicans sobre la base de dentaduras con un propósito preventivo, informador y educador para nuestros pacientes y colegas
El propósito de este estudio es comprobar el nivel de crecimiento de Cándida albicans sobre la superficie del polimetilmetacrilato de termocurado utilizado para la fabricación de prótesis.
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PROBLEMA
¿Existe diferencia en el nivel de crecimiento de la Cándida albicans ATCC 10231 sobre los diferentes tipos de resina acrílica de termocurado utilizada para bases de dentaduras?
HIPOTESIS
Si, la Candida albicans ATCC 10231 presenta mayor nivel de crecimiento in vitro sobre resina acrílica termocurado Marca Vitalloy .
OBJETIVO GENERAL
Determinar el nivel de crecimiento de la Cándida albicans ATCC 10231 sobre la resina acrílica de termocurado para bases de dentaduras.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Determinar la cantidad de unidades formadoras de colonias de Cándida albicans sobre la resina acrílica de termocurado Marca Tiplex (IvoclarVivadent).
Determinar la cantidad de unidades formadoras de colonias de Cándida albicans sobre la resina acrílica de termocurado Marca Vitalloy (Vaicryl S.A).
Determinar la cantidad de unidades formadoras de colonias de Cándida albicans sobre la resina acrílica de termocurado Marca Vitacron (New Stetic S.A).
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II. MATERIAL Y MÉTODOS
2.1. Diseño de investigación 2.1.1. Material de Estudio
Tipo de Estudio
El presente trabajo de investigación corresponde al tipo experimental.
2.1.2. Tipo de Muestreo
La selección de la muestra se realizó a través del método aleatorio hasta completar el número requerido.
2.2. Población Objetivo:
2.2.1. Criterios de Inclusión:
Resina Acrílica de termocurado de 1 cm2 que cumplieron
con los protocolos de manufactura indicados por el fabricante y que presentó sueprficie uniforme.
2.2.2. Criterios de Exclusión:
Placa petri con agar sabouraud conteniendo la macrodilución de la cepa de Cándida albicans ATCC 10231 cuyo resultado en el proceso de incubación previa fue sido dudoso.
Resina Acrílica de termocurado que haya sufrido alguna modificación mediante su procesado, emuflado.
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2.2.3. Criterios de Eliminación:
Placa petri con agar sabouraud conteniendo la macrodilución de la cepa de Cándida albicans ATCC 10231 que haya sufrido contaminación o deterioro durante la realización de procedimientos y que no permita su medición posterior.
2.3. Unidad de Análisis
Tubos de ensayo conteniendo la macrodilución de caldo glucosado de la cepa de Cándida albicans ATCC 10231 y la resina acrílica de termocurado. Placas petri con agar sabouraud conteniendo la macrodilución de caldo glucosado de la cepa de Cándida albicans ATCC 10231 y la resina acrílica.
2.4. Unidad de Muestreo
Placas petri con agar sabouraud conteniendo la macrodilución de caldo glucosado de la cepa de Cándida albicans ATCC 10231.
2.5. Tamaño de la Muestra
Para el presente trabajo de investigación La población muestral estuvo dada por el caldo glucosado más la siembra de Cándida albicans ATCC 10231 más las resinas acrílicas para bases de dentaduras
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Para determinar el tamaño muestral usamos la fórmula: ( ) ( ̅ ̅ ) Y ( ) Donde: n = muestra preliminar. = muestra final. Z α/2 = 1.96 para un = 0,05. = 0.84 para un β = 0.20.
S = 1.2( ̅ ̅ )valor asumido por no haber estudios previos.
Con estos datos se determinó una muestra final de 12 tubos de ensayo para cada tipo de resina acrílica.
Luego:
n = 12 muestras para cada tipo de resinas acrílicas.
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2.6. VARIABLES Y ESCALA DE MEDICIÓN VARIABLES TIPO ESCALA DE MEDICIÓN SEGÚN SU
NATURALEZA SEGUN SU FUNCIÓN
Resina Acrílica de termocurado
Cualitativa Independiente Nominal
Nivel de crecimiento de Candida
Albicans.
Cuantitativa Dependiente De Razón
2.6.1. Diseños operacionales
RESINA ACRILICA DE TERMOCURADO
Definición Conceptual:
Son polímeros a base de polimetracrilato de metilo, peróxido de benzoilo (iniciador), Plastificantes, como el ftalato de dibutilo, pigmentos: óxidos metálicos, Opacadores, algunas traen fibras orgánicas para imitar capilares de se presentan en polvo (polímero) y líquido (monómero); es usada en odontología para base de prótesis. Para su polimerización se requiere de temperatura5.
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Definición Operacional:
Para el presente trabajo de investigación se consideró como resina acrílica de termocurado de las marcas: Triplex, Vitacryl y Vitaloy.
Cándida Albicans
Definición Conceptual:
La Cándida está encuadrada dentro de los hongos dimórficos, la cual se puede observar como células redondeadas u ovaladas de 3 a 5 μm, grampositivas.10,11.
Definición Operacional:
Para el presente trabajo se consideró el número de Unidades Formadoras de Colonias a) 0 a 1000(normal) no se consideró crecimiento de la Cándida Albicans y b) 1001 a más+(enfermedad) se consideró como crecimiento de la Cándida Albicans.10
2.7. Proceso de Captación de la Información
La cepa de Cándida Albicans se diluyó en caldo glucosado estéril hasta que se obtuvo una turbidez semejante al tubo 0,5 del Nefelómetro de Mc Farland. Para incubar la cepa se prepararon los tubos de ensayo con 8ml de caldo glucosado para luego inocular 2ml del cultivo preparado de Cándida albicans, seguido a esto se le introdujo la resina acrílica y se incubaron a 37 °C por 24horas.
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Luego de las 24 horas, las muestras de resina acrílica, se sometieron a un raspado de la superficie rugosa y se cambiaron a tubos de ensayo los cuales contenían 10 ml de solución salina para luego ser colocados a la centrífuga a 3000 rpm por 3min, seguido a esto nuevamente la resina acrílica se cambió a otros tubos de ensayo los cuales van a tener 10ml de caldo glucosado estéril y nuevamente se incubado a 37 °C por 24 horas. Luego de cada tubo de ensayo se tomó 0,1ml de caldo glucosado y se sembró en la placa petri la cual contenía agar sabouraud luego se incubarán a 37º C y finalmente se hizo la lectura de UFC.
A. De la aprobación del proyecto.
Para la realización del presente estudio de investigación se obtuvo el permiso para la ejecución, mediante la aprobación del proyecto por el Comité Permanente de Investigación Científica de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo con la correspondiente Resolución Decanal.
B. De la autorización para su ejecución.
Aprobado el presente proyecto por el Comité de Investigación Científica de la Facultad de Medicina , el investigador se presentó y solicitó la autorización del: Laboratorio de Microbiología de la Universidad Nacional de Trujillo.
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C. De la preparación de las muestras de resina acrílica.
Se realizaron mediante el procedimiento de relleno-presión conocido como “técnica de la mufla”, se utilizó una mufla dividida en dos partes en la cual se introdujo preformas de cera tipo cavex de las dimensiones deseadas (10 x 10 mm) dentro de la escayola del molde de trabajo. Tras aplicar calor hasta la disolución de la cera y realizar el necesario aislamiento de las superficies de la escayola respecto a la resina, se procedió a colocar la mufla frente a la contramufla y presionar una contra otra con una prensa por acción mecánica. Durante el proceso de prensado la resina en exceso sobresale entre las dos mitades de la mufla por los lados, se utilizó la ranura para el flujo de la resina para conseguir reducir al máximo posible el grosor de los pliegues.
Dentro de la mufla se utilizó yeso piedra tipo III, luego de ser enterrada dichas preformas de cera se llevó a la estufa y se hizo hervir por un tiempo de 15 minutos. Después, se procedió al lavado y posteriormente se dejó enfriar para proceder a preparar el acrílico lento líquido y polvo de acuerdo a las indicaciones del fabricante.
Luego que el acrílico se encontró en la etapa adecuada se procedió a colocarlo en los espacios de la cera y se prensó tres veces; Terminado este proceso se llevó a ebullición por 45
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minutos, para luego desenmuflar y proceder al pulido con piedras acrílicas redondas y felpa de trapo con piedra pómez, el brillo se efectuó con una felpa de trapo y blanco de España por un lado mientras que el otro permaneció rugoso, con el objetivo de simular ambos lados de la prótesis.
Luego se procedió a sumergir las unidades de resina acrílica de termocurado en agua estéril durante 24 horas, para eliminar monómeros contenidos.
Se eligieron 12 muestras por cada tipo de resinas acrílica. Éstas fueron examinadas y las que presentan defectos o poros superficiales fueron descartadas1,2.
D. De la obtención de la cepa.
Este estudio utilizó un cultivo liofilizado de la cepa Cándida albicans ATCC 10231 el cual se obtuvo del Laboratorio de Microbiología de la Universidad Metropolitana de Sao Paulo – Brasil.
E. De la preparación del inóculo.
Cada cepa se diluyó en caldo glucosado estéril hasta que se obtuvo una turbidez semejante al tubo 0,5 del Nefelómetro de Mc Farland.
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F. Del cultivo de la cepa.
Las cepas estándar de Cándida albicans fueron cultivadas en medio sabouraud e incubados a 37 °C por 24 – 72 horas. Todo el procesamiento se realizó en el laboratorio de Microbiología de la Universidad Nacional de Trujillo ,bajo la supervisión de la co-asesora microbióloga.
G. Del Nivel de crecimiento de la Cándida albicans.
Las resinas acrílicas fueron esterilizadas, para luego ser inoculadas con la cepa de Cándida albicans, la cual fue previamente diluída, luego las placas fueron introducidas dentro de tubos de ensayo, los cuales contienen caldo glucosado estéril y serán incubadas a a 37º C por 24 horas.
El de crecimiento se determinó a través del conteo de unidades formadoras de colonias ( UFC), sembrando 0,1 ml de cada uno de los tubos que contienen las resinas procesadas en medio sabouraud luego se incubaron a 37º C.
La observación del crecimiento fúngico se realizó mediante el conteo de las Unidades Formadoras de Colonias (UFC).
Usando microscopio óptico y conteo por campos con aumento de 40x.
2.8. Instrumento de recolección de datos.
Para efectos de la investigación se elaboró una ficha (ver anexo 01), donde se evaluó el recuento bacteriano. El instrumento contiene:
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El conteo de las Unidades Formadoras de Colonias (UFC) de cada una de las placas Petri sembradas.
2.9. Consideraciones éticas.
Para la ejecución de la presente investigación, se siguieron los principios de la Declaración de Helsinki, adoptada por la 18o
Asamblea Médica Mundial (Helsinki, 1964), y modificada por la AMM en Seúl, Octubre 2008.22
2.10. Análisis estadístico e interpretación de la información
Los métodos, instrumentos y procedimientos que se aplicaron fueron:
Los datos fueron procesados empleando el programa SPSSV.17 previa elaboración de la base de datos correspondiente en el programa Excel para Windows.
Para analizar la información se construyó tablas de frecuencia de una entrada con sus valores absolutos, se calculó su media, su desviación estándar y su gráfico correspondiente.
Para determinar si existe diferencia de los niveles de crecimiento de Cándida albicans entre los tres tipos de resinas se empleó la prueba de comparación de medias utilizando la desviación t de student con un nivel de significancia del 5% (p<0.05).
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III. RESULTADOS
1. Existe crecimiento de Cándida albicans ATCC 10231 sobre las tres marcas de resina acrílica de termocurado para bases de dentaduras sin embargo este crecimiento no es estadísticamente significativo (p=0.951>0.05). (Tabla 1).
2. La cantidad de Unidades formadoras de colonias de Cándida albicans sobre la resina acrílica de termocurado Marca Vitalloy
está entre 1450 +/- 15793 UFC (Tabla 2).
3. La cantidad de Unidades formadoras de colonias de Cándida albicans sobre la resina acrílica de termocurado Marca Tiplex (IvoclarVivadent) oscila entre 52500+/-13225 UFC (Tabla 3).
4. La cantidad de Unidades formadoras de colonias de Cándida albicans sobre la resina acrílica de termocurado Marca Vitacron (New Stetic S.A.) oscila entre 53250+/-12799 UFC (Tabla 4).
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Tabla 1
Nivel de crecimiento de la Cándida albicans ATCC 10231 sobre la resina acrílica para bases de dentaduras
Resina acrílica Media Desviación estándar Test de Duncan Vitalloy ® 51450 15792.734 a Tiplex ® 52500 13224.770 a Vitacron ® 53250 12799.077 a ANOVA: Test F 0.050 p 0.951
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Tabla 2
Nivel de crecimiento de la Cándida albicans ATCC 10231 sobre la resina acrílica Vitalloy ®
Estadística Crecimiento Mínimo 21750 Máximo 87600 Media 51450 D. Estándar 15793
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Tabla 3
Nivel de crecimiento de la Cándida albicans ATCC 10231 sobre la resina acrílica Triplex ®
Estadística Crecimiento Mínimo 41550 Máximo 90150 Media 52500 D. Estándar 13225
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Tabla 4
Nivel de crecimiento de la Cándida albicans ATCC 10231 sobre la resina acrílica Vitacron ®
Estadística Crecimiento Mínimo 36000 Máximo 72300 Media 53250 D. Estándar 12799
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IV. DISCUSIÓN
La resina acrílica, polimetilmetacrilato (PMMA) por sus características y propiedades físicas es el plástico que se emplea actualmente de forma principal para la confección de bases de prótesis. Aunque la composición de los diferentes tipos y marcas es básicamente igual, difieren algo según los colorantes, activadores, iniciadores y agentes que se añaden al PMMA para mejorar sus propiedades.5.
La estomatitis protética es un proceso inflamatorio asociado a la utilización de prótesis dentales removibles o completas. Se caracteriza por un enrojecimiento persistente del área de soporte de una prótesis removible, preferentemente palatina. Puede presentar un aspecto de enrojecimiento puntiforme. Se trata de un proceso con etiología multifactorial en el que puede estar involucrada la infección por Cándida.8.
Prótesis completas removibles antiguas desajustadas, mala higiene bucal, mala higiene protésica, utilización nocturna de las prótesis, pueden ocasionar infección por Cándida; eso se repotencia si el huésped presenta xerostomía déficit de Fierro, vitamina B12 Enfermedades sistémicas descontroladas, Inmunosupresión. 8-10.
A pesar que la mucosa oral presenta propiedades antifúngicas que protegen contra la invasión candidiásica gracias a la presencia de ciertas proteínas y otros factores no determinados. Todas aquellas
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circunstancias que alteren la integridad de la mucosa mediante traumatismos, maceración u oclusión como ocurre en los portadores de prótesis dentales favorecen la adhesión del hongo y la invasión mucosa. 9-11.
La Cándida albicans, es encontrada en la cavidad oral en 25% a 50% de individuos sanos, incluyendo adultos y niños. Pero cuando tenemos pacientes portadores de dentaduras totales, estos valores aumentan de 60% a 100%. Cándida albicans es la especie más común, y representa al menos el 70% de los microorganismos aislados en los portadores de dentaduras.3,8.
Los resultados obtenidos en esta investigación indican que el nivel de crecimiento de Cándida albicans, en promedio, no se diferencia estadísticamente de un tipo de resina a otro, un estudio realizado por Velazco G18., La Habana 2011, sobre el análisis microscópico de la
superficie de tres tipos de resina acrílica utilizada para base de dentaduras removibles, en la que concluyó que los procesos de curado deficientes ocasionan gran cantidad de defectos estructurales del material que permiten la adherencia de microorganismos como la Cándida albicans que favorecen la aparición de lesiones como la Estomatitis subprotésica. Estos resultados contrastantes con los encontrados se pueden deber al estricto control en el procesado de las resinas acrílicas que tuvimos en la presente investigación.
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En otra investigación realizada por Romero E19., México 2006, sobre
Análisis microscópico de la adherencia de Cándida albicans in vitro sobre resina acrílica utilizada para bases de dentaduras procesada con tres diferentes técnicas de polimerización, se concluye que la estomatitis subprotésica está asociada a la adherencia y colonización de Cándida albicans a la base de las dentaduras y a otros cofactores, como un pH ácido, ingesta aumentada de carbohidratos, diversas enfermedades sistémicas y tratamientos farmacológicos.20
El nivel de crecimiento de la Cándida albicans sobre la resina acrílica Vitalloy ® fue mayor que los otros dos tipos de resina con un máximo de 87600 UFC no siendo estadísticamente significativo podría deberse a la presencia de porosidades de la misma resina acrílica. Esto podría estar en concordancia con la investigación de Serrano C20. Madrid 2004, quien
realizó una investigación in vitro sobre adherencia de Cándida albicans a las resinas acrílicas, en el que concluyó que la adhesión de Cándida albicans a los diferentes tipos de polimetilmetacrilato muestra diferencias estadísticamente significativas.
La determinación de la adhesión que se realiza por diferentes métodos coincide en la apreciación cualitativa pero los resultados difieren en la apreciación cuantitativa para los valores más bajos y más altos de adhesión.21
El nivel de crecimiento de la Cándida albicans sobre la resina acrílica marca Triplex ® oscila entre 41550 con un máximo 90150 UFC, que lo
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coloca en el segundo nivel de crecimiento en esta investigación pero aun no es estadísticamente significativo, esto podría estar en relación con el estudio realizado por Romo, Morenoy col. utilizó la técnica de auto y termopolimerizado, y señala que las prótesis presentan una superficie irregular con amplias grietas y defectos observando que la Cándida albicans aloja en estos defectos, sin embargo el número de blastoconidios adheridos no es estadísticamente significativo de 24 a 48 horas. Esto sustenta que en la presente investigación utilizamos solo la técnica de termocurado, y nuestro tiempo de incubación fue de 48 horas.
En tanto que el nivel de crecimiento de la Cándida albicans sobre la resina acrílica marca Vitacron ® oscila entre 36000 hasta 72300 ocupando el tercer y no siendo estadísticamente significativo.
A pesar de no haber muchas investigaciones en este tema los resultados encontrados para las tres marcas de resina acrílica no son estadísticamente significativos, lo cual se puede relacionar con un estricto manejo de las resinas acrílicas en laboratorio dental, así como que el estudio se hizo in vitro, y como lo señala Serrano C20. Madrid 2004 el
crecimiento mayor de la cándida pasado las 72 horas manifestó un crecimiento significativo.
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V. CONCLUSIONES
1. Existe crecimiento de la Cándida albicans en los tres tipos de resina acrílica de termocurado para base de dentaduras, no existiendo diferencias estadísticamente significativas entre ellas (p=0.951>0.05).
2. La resina acrílica marca Vitalloy ® presentó un máximo de 87600 UFC no siendo estadísticamente significativo.
3. La resina acrílica marca Triplex ® presentó un máximo 90150 UFC, no siendo estadísticamente significativo.
4. La resina acrílica marca Vitacron ® presentó un máximo de 72300 UFC no siendo estadísticamente significativo.
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VI. RECOMENDACIONES
1. Replicar el estudio alargando los tiempos de incubación.
2. Replicar el estudio utilizando diversas técnicas de polimerización de la resinas acrílicas.
3. Realizar una investigación obteniendo muestras in vivo, aplicando un análisis con microscopia electrónica de barrido.
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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Kratochvil FJ. Prótesis parcial removible. México: Mc Graw-Hill Interamericana; 1989.
2. Mallat DE, Mallat CE. Prótesis Parcial Removible y sobre dentaduras.Madrid, España: Elsevier; 2003.
3. Besford J, Besimo C. Prótesis Completas. 4ªed. Madrid: Elsevier; 2007.
4. Mish C, Prótesis sobre Implantes.Madrid : Elsevier; 2006.
5. Anusavice P. La ciencia de los materiales dentales, 11ªed.España: Elsevier; 2004.
6. Guzmán HJ. Biomateriales Odontológicos de uso Clínico. 3ªed.Bogota: Mc Graw-Hill Interamericana;2003.
7. Regezi JA, Sciubba JJ. Patología bucal: correlaciones clínico-patológicas. 3ª ed. México: Interamericana-McGraw Hill Interamericana; 2000.
8. Sapp P, Eversole L, Wysocki G. Patología oral y Maxilo Facial contemporánea. 2da ed. Madrid: Elsevier; 2006.
9. Tortora B, Funke R, Case A. Introducción a la microbiología. 9na ed. Buenos Aires: Médica Panamericana; 2007.
10. Negroni M.Microbiología Estomatológica, Fundamentos y guía práctica. 2da ed.Buenos Aires:Médica Panamericana; 2009.
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11. Carrillo A, Brío S, Cárdenas C. Infecciones fúngicas por levaduras y sertaconazol. Lima: Difco; 2006.
12. Liebana UJ. Microbiología Oral. 2da ed. Madrid: Interamericana; 2002.
13. McPhee S, Ganong W. FisiologíaMédica: Una Introducción a la Medicina Clínica.5ªed.México: El Manual Moderno; 2007.
14. Kasper F, Hauser J. Harrison principios de Medicina Interna.16ªed. Madrid: Mc Graw_Hill Interamericana; 2005.
15. Muzyka B. Oral fungal infections. 2da ed. New York: Dent Clin; 2005.
16. Velazco G, Reynaldo Ortiz, Evidencia microscópica de la presencia de Candida albicans en bases protésicas retiradas de la cavidad bucal. Rev. Cubana Estomatológica. 2009;43(1): 2-8.
17. Velazco G, Ortiz R, Análisis microscópico de la superficie de tres tipos de resina acrílica utilizada para base de dentaduras removibles, Rev. Europea Odontoestomatológica[revista en internet]. 2011 Ene [citado el 25 de enero del 2011] Disponible en: http://bvs.sld.cu/revistas/est/vol46_2_09/est07209.htm.
18. Romero E, Análisis microscópico de la adherencia de Candida albicans in vitro sobre resina acrílica utilizada para bases de dentaduras procesada con tres diferentes técnicas, Rev. Odontológica Mexicana. 2006;10 (4): 167-172.
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19. Serrano C.Estudio in vitro de la adherencia deCandidaAlbicansa las resinas acrílicas. [Tesis]. Madrid: Universidad Complutense de Madrid; 2005.
20. Declaración de Helsinki. Principios éticos para las investigaciones médicas en seres humanos. Disponible en:
http://www.wma.net/es/30publications/10policies/b3/17c_es.pdf
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ANEXOS
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ANEXO 01
FICHA DE RECOLECCIÓN DE DATOS
Resina Acrílica de Termocurado Marca: ______________
UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS Placa Petri Nº1 Placa Petri Nº 2 Placa Petri Nº 3 Placa Petri Nº 4 Placa Petri Nº 5 Placa Petri Nº 6 Placa Petri Nº 7 Placa Petri Nº 8 Placa Petri Nº 9 Placa Petri Nº 10 Placa Petri Nº 11 Placa Petri Nº 12
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ANEXO Nº 2
EVALUACIÓN DE LA TESIS
El Jurado deberá:
a. Consignar las observaciones y objeciones pertinentes relacionados a los siguientes ítems.
b. Anotar el calificativo final.
c. Firmar los tres miembros del Jurado.
TESIS: ... ... ... 1. DE LAS GENERALIDADES: El Título ... ... Tipo de Investigación: ... ... 2. DELPLAN DE INVESTIGACIÓN: Antecedentes: ... Justificación: ... Problema: ... Objetivos: ... Hipótesis: ... Diseño de Contrastación: ... Tamaño Muestral: ... Análisis Estadístico: ... 3. RESULTADOS: ... 4. DISCUSIÓN: ... 5. CONCLUSIONES: ... 6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: ...
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7. RESUMEN: ... 8. RELEVANCIA DE LA INVESTIGACIÓN: ... 9. ORIGINALIDAD: ... 10. SUSTENTACIÓN 10.1Formalidad ... 10.2 Exposición ... 10.3 Conocimiento del Tema: ...
CALIFICACIÓN:
(Promedio de las 03 notas del Jurado)
JURADO: Nombre Código Firma Docente Presidente: Esp. ………... ………. …………... Grado Académico:……… .……… ………... Secretario: Esp. ………. ……… ………... Grado Académico:……… ………. ………... Miembro: Esp. ………... ……….. ………... Grado Académico:……… ……….. ………...
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ANEXO Nº 3
RESPUESTAS DE TESISTAS A OBSERVACIONES DEL JURADO
El Tesista deberá responder en forma concreta de las observaciones del jurado a manuscrito en el espacio correspondiente:
a) Fundamentando su discrepancia.
b) Si está de acuerdo con la observación también registrarla. c) Firmar. TESIS:……… ……… ……… ……… 1. DE LAS GENERALIDADES: El Título ... ... Tipo de Investigación: ... ... 2. DELPLAN DE INVESTIGACIÓN: Antecedentes: ... Justificación: ... Problema: ... Objetivos: ... Hipótesis: ... Diseño de Contrastación: ... Tamaño Muestral: ... Análisis Estadístico: ... 3. RESULTADOS: ... 4. DISCUSIÓN: ... 5. CONCLUSIONES: ... 6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: ... 7. RESUMEN: ...
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8. RELEVANCIA DE LA INVESTIGACIÓN: ... 9. ORIGINALIDAD: ... 10. SUSTENTACIÓN
10.1Formalidad ... 10.2 Exposición ... 10.3 Conocimiento del Tema: ...
………... Nombre Firma
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CONSTANCIA DE ASESORAMIENTO DE TESIS
Yo, Luis Felipe Alarco La Rosa, Doctor en Estomatología, Especialista en Rehabilitación Oral y Docente de la Unidad de Segunda Especialización en Estomatología de la Universidad Nacional de Trujillo, doy constancia de haber asesorado la tesis titulada: “NIVEL DE CRECIMIENTO DE LA CANDIDA
ALBICANS ATCC 10231 SOBRE LA RESINA ACRÍLICA DE
TERMOCURADO PARA BASES DE DENTADURAS”. Cuyo autor es CD.
Fiorella Grace Claudet Sánchez, alumna de la segunda Especialización en Estomatología con mención en Rehabilitación Oral. de la Universidad Nacional de Trujillo.
___________________________________ Esp. Dr. Luis Felipe Alarco La Rosa
COD. UNT 5192
