DEPARTAMENTO DE CIENCIAS AGRONÓMICAS Y VETERINARIAS
“EFECTO SOBRE EL COMPORTAMIENTO REPRODUCTIVO DEL GANADO BOVINO LECHERO LACTANTE UTILIZANDO DIFERENTES PROGRAMAS PARA
LA SINCRONIZACIÓN DEL ESTRO Y OVULACIÓN
T E S I S
QUE PARA OBTENER EL TITULO DE
MÉDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA
Presenta:
JOSE CLEMENTE LEYVA CORONA
LA SINCRONIZACIÓN DEL ESTRO Y OVULACIÓN
TEMA DE TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO DE
MÉDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA
PRESENTA:
JOSE CLEMENTE LEYVA CORONA
M.C. M.V.Z. PABLO LUNA NEVÁREZ ASESOR
A mi familia:
De quienes he sentido apoyo en todo momento, pues siempre han creido en
mis desiciones, lo que los convierte en un valioso tesoro para mi. Se los agradezco
sinceramente. ¡GRACIAS FAMILIA!
A mis Padres:
Sr. José pascual Leyva Rubio y Sra. María Enedina Corona Sierra.
Quienes me dieron la vida, una educación y ser mi mejor ejemplo a seguir, y
que además me han apoyado incondicionalmente toda mi vida en la realización de
los proyectos que me he fijado, haciendome sentir dichoso de tenerlos, y orgulloso
de que sean mis padres. Les dedico esto que tal vez sea muy poco comparado con
el apoyo, la confianza y el amor que he recibido de ellos. Que dios me de la dicha de
tenerlos mucho mas tiempo juntos conmigo. ¡ LOS QUIERO, MUCHAS GRACIAS!.
A mi hermano:
Mario Raúl Leyva Corona.
De quien siento la responsabilidad de ser uno de sus mejores ejemplos
después de mis padres, y esperando que algún día viva la bonita experiencia de
haber realizado una importante etapa mas en la vida, como lo es vivir la
experienciade terminar una carrera profesional. ¡Hechale ganas y no te dejes caer!.
Reyna Susette Zazueta Félix.
A quien le agradezco haber compartido sus mejores y peores momentos
conmigo, apoyandome incondicionalmente. Por darme su cariño y comprensión. Por
creer en mi, por ser mi mejor amiga y por haberla conocido. ¡TE QUIERO, Y
MUCHAS GRACIAS!.
A mi abuela:
Sra. Albina Sierra Ascencio, por su amor y apoyo a lo largo de toda mi vida.
¡GRACIAS ABUELA!.
A mis amigos:
Mario A. Zazueta Valenzuela, Edgar Lugo Sauceda, Pedro Pablo Valenzuela,
José y Cristina Serrano Ponce, Gildardo Gil León, María Jesus Leal, Anarely
Loureiru, Carlos Octávio Ávila, Fabian Barreras, Edgar Espinoza, Mario Rivera
Rochin, Víctor Hugo Flores, Zuleyca A. Gutierres, María Antonia Molina, María
Dolores Carrazco, Elizabeth Cazares, y a todos ustedes que ya saben quienes son.
Gracias por compartir conmigo tantos momentos bonitos que serán inolvidables para
todos nosotros. ¡GRACIAS!
Primeramente darle gracias a dios por darme la dicha de haber realizado otra
etapa mas en mi vida, además de rodearme de la gente que mas quiero y por
tenerlos a todos juntos y con salud.
Especialmente le doy mi mas sinceros agradecimientos a mi asesor M.C.
Pablo Luna nevárez, que para mi es una persona que admiro y respeto como
persona y como profesionista. Le doy las gracias por ser nuestro amigo y por recibir
inumerables consejos que ayudaron en mi formación personal y profesional.
A los maestros M.V.Z. José María Aceves Gutiérrez, M.V.Z. Alberto Torres G.,
M.V.Z Rolando Reyna Granados, M.V.Z. Lorena Chávez Güitron, M.C. Candelario
Castillo Salas, M.V.Z. Sergio Fernandez, M.V.Z.. Carlos Aguilar Trejo. ¡GRACIAS!
A mis revisores M.V.Z Guadalupe Méndez Castillo, M.V.Z Ricardo Jiménez
Nevárez y M.V.Z Javier Munguía Xochihua, por su valiosa cooperación.
CONTENIDO
RESUMEN...viii
LISTA DE CUADROS...ix
INTRODUCCIÓN...1
1.1 Justificación ...3
1.2 Planteamiento del problema...3
1.3 Objetivo...4
1.4 Limitaciones de estudio...5
II. FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA...5
2.1 Factores que afectan la fisiología reproductiva...5
2.1.1 Nutrición...5
2.1.2 Estrés...8
2.2 Ciclo estral...11
2.2.1 Endocrinología del ciclo estral...12
2.2.2 Etapas del ciclo estral...13
2.3 Dinámica folicular del ovario...15
2.3.1 Ondas foliculares...15
2.3.2 Actividad luteal...17
2.3.3 Actividad folicular...18
2.4 La ultrasonografía como herramienta en el manejo reproductivo animal ...19
2.4.1 Funcionamiento básico del ultrasonido...20
2.4.2 Aplicación en reproducción animal...22
2.4.4 Ultrasonografía de los ovarios...24
2.4.5 Ecografía de los folículos ováricos...25
2.4.6 Ecografía del Cuerpo Lúteo...27
2.5 Desarrollo de los métodos para la sincronización del estro...28
2.5.1 Sincronización del estro y ovulación con PGF2α...29
2.5.2 Aplicación clínica de la PGF2α...30
2.5.3 Protocolo de PGF2α con dos aplicacines de PGF2α...32
2.5.4 Sincronización del estro y ovulación con métodos a base de PGF2α + GnRH...32
2.5.5 Aplicación clínica del GnRH...33
2.5.6 Protocolo Pre-synch (GnRH+ PGF2α)...34
III. METODOS Y MATERIALES...35
3.1 Método...35
Descripción del tratamiento 1...36
Descripción del tratamiento 2...36
3.2 Técnica transrectal con ultrasonografía...36
3.3 Variables a analizadas...37
3.4 Materiales...38
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN...39
V. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES...44
VI. LITERATURA CITADA...45
José Clemente Leyva Corona; “Efecto sobre el comportamiento reproductivo
del ganado bovino lechero lactante utilizando diferentes programas para la
sincronización del estro y ovulación” . Asesor M.C. M.V.Z. Pablo Luna Nevárez. El
objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto de la aplicación de dos diferentes
programas hormonales para la sincronización del estro y la ovulación, sobre el
porcentaje de preñez en ganado bovino productor de leche. Se utilizaron 37 vacas
de la raza Holstein-Friesian, de 4 a 7 años de edad, de 3 a 5 partos y buena
condición corporal, las cuales fueron divididas en dos grupos experimentales: grupo
1 (T1) formado por 18 vacas que recibieron la aplicación intramuscular (IM) de 25 mg
de Prostaglandina F2α (PGF2α) el día 0 y una segunda aplicación el día 14; mientras que el grupo 2 (T2), estuvo formado por 19 vacas que recibieron la
aplicación IM de 25 mg de PGF2α el día –12, más una inyección IM de 100 microgramos (µg) de GnRH el día 0 y el día 9, así como una segunda aplicación IM
de 25 mg de PGF2α el día 7. Las vacas de ambos grupos fueron inseminadas artificialmente a tiempo fijo. En todas, se realizó el diagnóstico de gestación por
ultrasonografía a los 35 días posteriores a la inseminación. El porcentaje de preñez
para el T1 fue de 61.1% y para el T2 de 89.4%, encontrando diferencia estadistica
(P<.05).
ix
CUADRO PÁGINA
1 PORCENTAJE DE HEMBRAS CON ACTIVIDAD
OVÁRICA A LOS 30 DÍAS POSTPARTO---40
INTRODUCCIÓN
México es un país donde las actividades pecuarias sustentan parte
importante de la economía. Dentro de estas actividades tenemos la explotación de
ganado bovino productor de carne y/o de leche. Dichas explotaciones, para obtener
una eficiente productividad, dependen de un adecuado balance en el control de los
factores de manejo, tales como la nutrición, reproducción, sanidad medio ambiente,
etc, así como factores ambientales que se encuentran en esas explotaciones.
Actualmente la mayoría de los establos lecheros de la región, han ido
adquiriendo e implementando diversas herramientas para mejorar su sistema de
producción, principalmente la calidad y cantidad de leche, y como ejemplos de estas
herramientas podemos mencionar la utilización de la medicina preventiva, nuevas
fórmulas en dietas para mejorar la producción de leche, así como la condición
corporal. Otro aspecto es la importación de ganado y semen de gran valor genético
para tratar de mejorar la genética de sus hatos. También se han implementado
técnicas en la reproducción, como la inseminación artificial, transplante embrionario y
la sincronización de estros.
Es importante la aplicación de técnicas reproductivas que mejoren los índices
de concepción. Actualmente, la inseminación artificial es una de las técnicas más
importantes para elevar la productividad en las explotaciones lecheras, al usar
semen de calidad, esto permite tener mejores crías, por consiguiente se obtendrá
una mejor calidad del hato, evitándose las desventajas en el uso de la monta natural
Es recomendable aplicar otras técnicas reproductivas como en el caso del
también la ovulación, para que de ésta manera se pueda aprovechar eficientemente
la inseminación artificial, además de lo que la sincronización del estro puede ayudar
reproductivamente en el hato.
La sincronización del estro involucra el control o manipulación del ciclo estral
con el propósito de que las hembras elegidas en un rebaño expresen estro (celo)
aproximadamente al mismo tiempo. Es un manejo bastante utilizado en los
programas de inseminación artificial, transplante de embriones, concentraciones de
partos y uso intensivo del toro con monta natural, esto por pocos días .
En un principio, los métodos iniciales para la regulación del ciclo estral, se
basaron en el uso de la progesterona, sola o en combinación con estrógenos.
Posteriormente se utilizaron las prostaglandinas como potentes agentes luteolíticos.
Hoy en día, después de varias investigaciones se ha llegado a la conclusión que los
métodos actuales para la sincronización del ciclo estral, requieren de la manipulación
tanto de las ondas foliculares, como de la vida del cuerpo lúteo, para lograr un
preciso control del ciclo estral.
La sincronización de estros a base de prostaglandinas, las cuales tienen un
efecto luteolítico, además de la utilización del GnRH (hormona liberadora de
gonadotropinas), que permiten controlar no sólo el estro, sino también la
ovulación, asegurando la liberación de un óvulo viable en el momento preciso para
que coincida con la inseminación artificial.
Por lo tanto, la sincronización de la ovulación utilizando prostaglandinas en
combinación con GnRH, asegura un mayor éxito en la fertilidad del ganado
1.1 Justificación.
La producción láctea en Sonora, no se ha visto muy favorecida en los últimos
años, pues los parámetros productivos no han sido los esperados, esto en parte por
los manejos reproductivos que se han implementado a la fecha. Por tal motivo, es
necesario optar por nuevas técnicas e investigaciones para tratar de favorecer a
esta industria. El empleo de métodos mas eficientes para la sincronización de la
ovulación es una de las herramientas que podrían ayudar a los productores para que
tengan un mejor porcentaje de fertilidad en sus hatos, y con ello mayor número
animales gestantes que serán candidatos a elevar el número de vacas en producción
en nuestros establos lecheros. De esta manera los productores se verán más
favorecidos en cuanto a fertilidad de sus hatos, y por consecuencia mayor número de
vacas en producción.
Además es importante utilizar métodos para el control del ciclo estral que
aseguren una eficiente respuesta reproductiva por parte de la vaca, lo cual solo es
posible si se logra controlar tanto el desarrollo folicular, como el periodo de vida del
cuerpo lúteo. De aquí se destaca la importancia de evaluar la eficiencia de dichos
métodos, a fin de generar conocimientos que puedan apoyar la rentabilidad de las
explotaciones lecheras.
1.2 Planteamiento del problema
Las deficiencias productivas obligan al productor a buscar mejores alternativas
para eficientar su producción, sin embargo un factor critico, dada su importancia, es
mantener la gestación, buen trabajo de parto, mantener la lactancia, y que la
actividad ovárica de la vaca no se prolonge mas de 60 días, ya que es el tiempo
recomendado que se le designa a la vaca lechera como un manejo reproductivo para
la involución y reposo del aparato reproductor.
Es por ello, que la sincronización de la actividad ovárica ha sido una de las
herramientas implementadas por los productores para eficientar la fertilidad y así
obtener animales que al final de la gestación sean animales lactantes, que es lo que
se pretende con todo esto.
Con el paso del tiempo, los métodos para la regulación del ciclo estral han ido
evolucionando con el fin de mejorar el comportamiento reproductivo de la
explotación, optimizando los recursos disponibles. El más utilizado ampliamente para
la sincronización de estros en ganado lechero, es la aplicación de la PGF2α, la cual es capaz de inducir un potente efecto luteolítico, asegurando que después de ello, la
vaca entre en calor en un tiempo promedio de 72 a 80 hrs posteriores a su
aplicación, en caso de cuerpo lúteo reciente.
Sin embargo, en la actualidad, el estudio detallado de la dinámica del ovario a
través de la ultrasonografía, ha permitido entender que para un adecuado control del
ciclo estral, es necesario controlar tanto el cuerpo lúteo como desarrollo folicular.
1.3 Objetivo.
Utilizar dos tratamientos hormonales diferentes, para evaluar la actividad
fertilidad entre ambos mediante el uso de la ultrasonografía 35 días posteriores a la
inseminación artificial.
1.4 Limitaciones del estudio.
Un factor que se consideró, fue el número de animales que se utilizaron para el
estudio, ya que solo era posible disponer de dos grupos de 16 vacas cada uno, por
lo que la estadistica no se favoreció del todo, ya que se requiere grupos numerosos
para que los resultados sean mas reales.
II. FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA
2.1 FACTORES QUE AFECTAN LA FISIOLOGÍA REPRODUCTIVA. 2.1.1 Nutrición.
En los bovinos, al igual que en otras especies de mamíferos, se ha
demostrado que el desarrollo del folículo ovárico se controla principalmente por un
sistema integral de retroalimentación que incluye la hormona liberadora de
gonadotropinas (GnRH) proveniente del hipotálamo, a la hormona folículo
estimulante (FSH) y a la hormona luteinizante (LH) secretadas por la hipófisis, y a las
hormonas esteroides (estrógenos, andrógenos y progesterona) y a algunas proteínas
(inhibina, activina y folistatina) secretadas por el ovario.
El desarrollo folicular se controla principalmente por la acción coordinada de
las gonadotropinas (Campbell et al., 1995). Los requerimientos de gonadotropinas
para el crecimiento folicular en ganado fueron determinados recientemente por
(Gong y Webb, 1996) quienes suprimieron la liberación de LH o de LH y FSH por la
demostraron que sin la liberación pulsátil de LH el desarrollo folicular podía llevarse a
cabo pero se detenía cuando el folículo dominante alcanzaba los 7 – 9 mm de
diámetro. Más tarde al suprimirse los niveles de FSH, el crecimiento de los folículos
se detuvo a los 4 mm de diámetro. Por lo tanto, si el desarrollo folicular depende del
estímulo constante de las gonadotropinas; entonces, los cambios en la secreción de
las mismas, provocados por la nutrición podrían afectar al desarrollo folicular.
Después de la ovulación, ocurre la fertilización, cuando la vaca es inseminada
en el momento apropiado. Los niveles óptimos de progesterona provenientes del
cuerpo lúteo recién formado son esenciales para proveer de un ambiente adecuado
para el desarrollo y crecimiento del embrión en el oviducto y útero. Así, los posibles
sitios donde una nutrición inadecuada puede ejercer sus efectos determinantes en la
función reproductiva incluyen:
1. En el hipotálamo y glándula pituitaria, alterando la liberación de
gonadotropinas con el subsecuente efecto de retardar la ovulación y causar
un desarrollo folicular anormal.
2. Directamente en el ovario donde tanto los patrones de crecimiento folicular
como la función lútea pueden verse afectados.
3. Alterando el desarrollo folicular, donde indirectamente la calidad del ovocito
puede verse reducida con el subsecuente efecto negativo en la supervivencia
embrionaria.
4. Provocando un ambiente uterino inadecuado que afecte negativamente el
Las concentraciones circulantes de FSH en animales enteros no parecen
verse afectadas por cambios nutricionales. Rhodes et al., (1995) encontraron que no
había diferencias en las concentraciones de FSH en novillonas desnutridas, ni aún
después de que éstas habían perdido el 17% de su peso corporal; tampoco
encontraron diferencias en las concentraciones de FSH entre ovejas con condición
corporal alta o baja. Sin embargo, la falta de diferencias en las concentraciones de
FSH pudo deberse a la regulación ovárica de la secreción de FSH. De hecho, los
animales ovariectomizados con buena condición corporal tienen concentraciones
circulantes de FSH más altas que aquellos con una condición corporal pobre
(Gutiérrez, 1999).
Pese a que en algunos estudios no se establecieron diferencias en el patrón
de secreción de LH en novillonas malnutridas, se ha demostrado que los cambios
significativos en el peso corporal o en la disponibilidad de alimento alteran el patrón
de secreción de LH. Esto se demostró por primera vez por González Padilla et al.
(1975), citados por Yelich et al., (1996) en novillonas con restricción alimenticia.
En la mayoría de las ocasiones la glándula pituitaria es capaz de liberar
cantidades sustanciales de LH y FSH en respuesta a la estimulación de GnRH. Más
aún, la cantidad de LH liberada no cambió cuando novillonas con una condición
corporal inicialmente alta estaban perdiendo peso. No obstante, en novillonas con
una condición corporal inicialmente baja y que estaban perdiendo peso, la respuesta
de la LH a la GnRH se redujo (Roberson et al., 1992). En conjunto estos resultados
indican que la respuesta a la GnRH disminuye una vez que el animal ha alcanzado
que el inicio de la primera oleada folicular en vacas amamantando no difiere entre
aquellas que se mantienen en un nivel de alimentación bajo y las que se encuentran
en un nivel alto. Aunque, la primera ovulación se retrasó 25 días en los animales con
nivel nutricional bajo (Stagg et al., 1995). Además, cuando la condición corporal es
baja, la síntesis y almacenamiento de gonadotropinas, o la sensibilidad / respuesta
de la glándula pituitaria al GnRH se encuentran reducidas.
En conclusión, las concentraciones de FSH en los animales enteros no se ven
influenciadas por el estado nutricional. No obstante, la concentración y frecuencia de
los pulsos de LH parecen disminuir cuando los animales son sometidos a dietas
subóptimas. En ganado lechero, el grado del déficit energético durante las primeras 2
a 3 semanas posparto está altamente correlacionado con el intervalo al primer estro.
Así por ejemplo, una serie de experimentos recientes llevados a cabo en el instituto
Roslin, donde el dicho ganado ha sido seleccionado en dos líneas divergentes, los
animales altos productores mostraron un retraso significativo en el reinicio de su
actividad cíclica (Gutiérrez, 1999).
2.1.2. Estrés.
Las vacas lecheras son extremadamente sensibles al estrés calórico del
medio ambiente. El problema consiste en que éstas son incapaces de mantener una
temperatura corporal normal en un medio ambiente calórico debido a una alta
producción de calor asociada con la lactación. Las vacas se ajustan a las altas
temperaturas reduciendo el consumo de alimento, buscando la sombra, estar parada
incluyendo la conducta estral. La combinación de estos ajustes junto con las altas
temperaturas ocasionan una depresión en la producción de leche y en el
comportamiento reproductivo durante el clima caluroso.
Durante el verano, se presenta una marcada disminución en la producción de
leche por las vacas como un resultado del estrés calórico. El ganadero lechero, en
general tiene una buena apreciación para esta pérdida en la producción debido a
que ellos pueden monitorear el volumen del tanque tomando la lectura sobre una
base diaria.
Sin embargo, las pérdidas reproductivas debido a estrés calórico no son tan
obvias durante estos meses y no llegan a ser aparentes hasta más tarde en el otoño.
Una caída significante en las tasas de preñez durante los meses de verano sin
recuperación hasta noviembre, sugieren un efecto acarreador durante el principio del
otoño. En contraste, las dichas tasas de gestación en vaquillas no son afectadas
durante los meses de verano. Parece ser que la vaquilla no lactante es más eficiente
en adaptarse al medio ambiente calórico que las vacas lactantes. Anteriormente,
investigadores de Arizona informaron una reducción del 50% en el comportamiento
reproductivo durante los meses de verano (Armstrong, 1992).
El estrés calórico afecta varios componentes del proceso reproductivo.
Durante la exposición de las vacas al clima caluroso, se presenta una reducción en
la duración del estro menor de 10 horas, también se ha visto una intensidad más
baja del estro. Esta reducción en la actividad sexual (actividad física) disminuye el
calor metabólico producido y así reduce la carga calórica total producida por la vaca.
temprano en la mañana, el personal del establo puede no darse cuenta de ello. Si el
estro ocurre durante el periodo caluroso del día, la vaca difícilmente llega a ser activa
debido a la necesidad de buscar un área sombreada (Risco, 1998).
Si los crayones o las marcas son utilizadas como una ayuda en la detección
del estro, esta reducción en la actividad sexual da como resultado vacas que no
están siendo “borradas” o teniendo una marca en funcionamiento. Estas alteraciones
en la conducta estral, compromete la eficiencia en la detección del estro para los
programas de inseminación artificial. En suma, las vacas expuestas al calor comerán
menos o estarán lejos del alimento. Esto causa que pierdan peso y alcancen un
balance energético negativo, lo cual retarda el ciclo estral en el posparto o prolonga
el ciclo en aquellas que han comenzado ha ciclar (Risco, 1998).
El estrés calórico también altera el balance hormonal, lo cual interfiere con el
proceso reproductivo que da como resultado la gestación. En particular el estrógeno,
hormona que normalmente es alta alrededor del momento del estro, es
significativamente más baja en vacas con estrés calórico. Esta menor diferencia
afecta la intensidad del estro así como el medio ambiente del útero y el oviducto que
controla la capacitación del esperma, la fertilización y viabilidad del embrión. La
sangre que fluye al útero es reducida en las vacas con estrés calórico. Tal reducción
en el flujo de sangre afecta la disipación de calor del útero y la disponibilidad de
nutrientes a este, así como el desarrollo embrionario. Estos cambios alteran el
balance y sincronización que existe entre el embrión y el útero culminando en una
2.2. CICLO ESTRAL
El ciclo estral, es la actividad ovárica caracterizada por las modificaciones
estructurales en el aparato reproductor de la hembra. Para los bovinos se establecen
cada 21 días (Randel, 1980). Se escuentra regulado por el eje
hipotálamo-hipófisis-ovárico, además de otras hormonas involucradas (Bandinga et al., 1992).
La duración del ciclo estral es en promedio de 20 ó 21 días, con un rango que
varía de 18 hasta 24 días; la fase luteal ocupa aproximadamente 17 días, y le sigue
una fase folicular de 3 a 4 días . La duración del estro en la vaca es de 12 a 16
horas, con un promedio de 15 a 18 horas. La ovulación tiene lugar de 10 a 12 horas
después de terminar el estro, o bien, de 25 a 30 horas después de la secreción
preovulatoria de gonadotropinas.
En condiciones de domesticación la vaca es poliéstrica continua durante todo
el año. La edad de la pubertad, primer estro, está influida por la nutrición y la
estación del año en que se ha producido el nacimiento, estando comprendida entre
los siete y los dieciocho meses, con una media de diez meses. Una pequeña
proporción de novillas no ovulan en el primer estro y en la gran mayoría la primera
ovulación se produce en un celo “silente”. Las alteraciones en la nutrición y las
enfermedades retrasan la pubertad. Una vez alcanzada la pubertad la ciclicidad
estral, sólo se interrumpe con la gestación durante las tres a seis semanas
posteriores al parto, durante una alta producción láctea, cuando existen evidentes
deficiencias nutricionales y en ciertas condiciones patológicas. Algunas vacas y
novillas no manifiestan signos externos durante el estro a pesar de tener una
puede deberse, sin embargo, a un fallo en la observación de los síntomas del celo
por parte del ganadero más que a una ausencia real de dichos síntomas. (Williamson
et al., 1972; Esslemont and Bryant, 1976; citados por Arthur et al., 1991).
2.2.1. Endocrinología del Ciclo Estral.
El ciclo estral es controlado por una cascada de hormonas que son
secretadas inicialmente por el hipotálamo, es cual es una pequeña porción, pero muy
importante del cerebro, y que regula algunas de las funciones corporales (Randel,
1980; citado por Gómez, 1995).
El hipotálamo secreta un factor liberador de las gonadotropinas (GnRH), el
cual es transportado por el sistema portal hipofisiario a la glándula pituitaria. El GnRH
hace que la hipófisis secrete las hormonas gonadotrópicas, de las cuales las más
importantes son la hormona folículo estimulante (FSH) y la hormona luteinizante
(LH), y éstas son transportadas por la sangre al ovario, donde ambas modulan su
actividad.
El folículo crece por la acción de la FSH y la LH, que son las que regulan el
ciclo ovárico y son liberadas periódicamente. Los estrógenos afectan al cerebro,
causando que la vaca presente calor y se encuentre receptiva al macho. En altas
concentraciones deprimen la secreción pulsátil de la FSH. Una elevación de la LH es
producida al momento de acercarse el estro, esta oleada trabaja sobre los folículos,
lo cual permite que el óvulo sea liberado unas 30 horas después de terminar el estro.
En el sitio del folículo reventado se desarrolla una estructura llamada cuerpo lúteo
la secreción de progesterona del CL., la cual sensibiliza el útero, produciendo un
medio ambiente favorable para el desarrollo y establecimiento del embrión (Bearden
y Fuquay, 1992).
La vida del CL es determinada por las prostaglandinas (PGF2∝), ya que cuando no se presenta la preñez el útero las libera, produciendo regresión del CL,
causando con esto un alto a la producción de progesterona; el descenso brusco en
los niveles de progesterona permite la activación del eje hipotálamo-hipófisis-gonadal
(Randel 1980; citado por Gómez, 1995).
2.2.2. Etapas del Ciclo Estral.
El ciclo estral se divide en cuatro fases que son las siguientes:
1
. Proestro.
Este período se caracteriza por crecimiento folicular y producción de estradiol,
el cual aumenta el aporte sanguíneo al aparato genital tubular y produce edema del
mismo, desde la vulva al oviducto. Los procesos de crecimiento son estimulados a lo
largo de todo el aparato, pero especialmente en el útero. La vulva se hincha hasta
cierto grado, el vestíbulo se torna hiperémico y las glándulas vestibulares secretan
un líquido seroso que asemeja un flujo vaginal claro. El crecimiento del folículo
ovárico es suficiente para elevarlo o hacer protrusión por encima de la base de dicho
órgano.
2. Estro.
Después de los tres días de proestro, aparece el estro o período de deseo
origen a las manifestaciones psíquicas del celo. Durante las 14 a 18 horas que la
vaca permanece en este estado, manifiesta inquietud, ansiedad, brama con
frecuencia y pierde el apetito. La producción de leche disminuye de manera vertical;
el aparto genital se halla bajo el dominio creciente de los estrógenos; aumenta la
congestión de los genitales y se aprecia incremento manifiesto de la secreción
glandular dando origen a un moco fluido que emana por la vulva y cuyo olor
(feromona sexual) atrae y excita al toro. Persiste la inflamación de la vulva y vagina
en las que se advierte hiperémia, y por último, al cabo de 14 a 18 horas, el sistema
nervioso de la vaca se torna refractario al estradiol y cesan en el animal todas las
manifestaciones psíquicas del celo. Durante el estro se inicia un aumento de los
valores de la LH procedente de la hipófisis, la cual produce la liberación de estradiol.
3. Metaestro.
Es el período inmediatamente sucesivo al término del estro, durante el cual
tiene lugar la ovulación, aparece hemorragia en la cavidad folicular que se llena de
sangre y comienza el crecimiento rápido de las células luteínicas.
Este es el período de la organización celular y del desarrollo del cuerpo
amarillo. Después de la ovulación se inicia el aumento en la producción de
progesterona, aún cuando el tejido luteínico no se halle plenamente formado. Cesa
gradualmente la congestión del aparato genital tubular y las secreciones glandulares
de dicho aparato se tornan viscosas y disminuyen en cantidad.
El metaestro dura de 2 a 3 días , y es precisamente durante este período que
4. Diestro.
Este período es el más largo del ciclo estrual, llamado también período de la
función del cuerpo amarillo. Aún cuando la vaca no queda preñada, el cuerpo
amarillo se transforma en un órgano funcional que elabora grandes cantidades de
progesterona, que ingresa a la circulación general y afecta el desarrollo de la
glándula mamaria y el crecimiento del útero. El miometrio se hipertrofia por
influencia de la progesterona, y las glándula uterinas secretan un material viscoso y
espeso que servirá de nutrición al cigoto. El desarrollo glandular continúa a todo lo
largo del aparato genital tubular. En caso de llegar un cigoto al útero, el cuerpo
amarillo persistirá durante toda la gestación. Si el huevo no es fecundado, el
cuerpo amarillo permanece funcional hasta el día 17 aproximadamente, después
del cual empieza a regresar en preparación para un nuevo ciclo estral (Arthur.,
1991).
2.3. DINAMICA FOLICULAR DEL OVARIO. 2.3.1. Ondas foliculares
El ciclo estral bovino es caracterizado por una serie de 2 a 3 ondas foliculares.
Cada una de ellas es precedida por un incremento sérico de la hormona folículo
estimulante (FSH), la cual inicia el crecimiento de un grupo de folículos de 3 mm o
mas. Basado en las observaciones con ultrasonido, la primer onda folicular se
considera que inicia el día 1 del ciclo, donde el día 0 es definido como el día del
mientras que los demás se detienen en 4 mm, considerándose éstos últimos como
subordinados, mientras que el primero es el dominante (Hendriksen et al., 2000).
Una onda de crecimiento folicular involucra el desarrollo sincrónico de un
grupo de folículos. Una onda folicular esta caracterizada por el desarrollo de un gran
folículo dominante, y varios folículos subordinados que invariablemente se atresian.
Algunos investigadores han observado una preponderancia de ciclos estruales
de 2 ondas, mientras que otros indican una predominancia de ciclos de 3 ondas. Una
onda folicular tiene normalmente una duración de 8 a 10 días y el número de ondas
foliculares que ocurren durante el ciclo estral depende del período postparto en
vacas lecheras y en vacas de carne. Generalmente se presentan de 2 a 4 ondas
foliculares durante el ciclo estral, y aproximadamente el 75% de vacas presentan 3
ondas foliculares (D’Occhio et al., 1999).
En estudios recientes de vaquillonas prepuberales, la composición de las
ondas no ovulatorias fueron muy similares a la de animales maduros y se concluyó
que los mecanismos que controlan el “bien ordenado” fenómeno de emergencia de
ondas, selección y regresión folicular se establecen muy tempranamente en el
período prepuberal, tan temprano como 2 semanas de edad (Adams, 1993). La
atresia folicular se utiliza para designar el proceso normal de regresión folicular
ocurrida en el ovario y se aplica a todos los folículos, sean cavitarios o no (Wilde,
2000).
En la mayoría de las vacas y novillas se ha comprobado que tienen dos o
tres ondas de crecimiento folículares. En hembras con 2 ondas, estas se inician los
folículo dominante es ovulatorio en la segunda onda en vacas con 2 ondas y en la
tercera en animales de 3 ondas (Arthur, 1991).
2.3.2. Actividad Luteal.
El cuerpo luteo comienza su regresión más temprano en los ciclos de 2-ondas
(Día 16) que en los de 3-ondas (Día 19) afectando correspondientemente el intervalo
interovulatorio (20 días y 23 días respectivamente). En ambos casos, el folículo
dominante en el momento en que ocurre la luteolísis se torna en folículo ovulatorio y
la emergencia de la onda siguiente se demora hasta el día 0 muy cerca del día de la
ovulación siguiente. La comparación de las ondas foliculares entre vaquillonas
vírgenes y vaquillonas preñadas, y entre vírgenes tratadas con progesterona y
preñadas, reveló que la emergencia de folículos no ovulatorios continuó hasta el
último día estudiado (Día 100; vaquillonas preñadas y vaquillonas vírgenes tratadas
con progesterona) o hasta la luteolísis (vaquillonas vírgenes). Las ondas emergieron
con intervalos de 8 a 10 días (Hendrisken et al., 2000).
El crecimiento del folículo dominante de la primera onda fue mayor que el de
las siguientes ondas anovulatorias en vaquillonas no preñadas y preñadas; ello fue
atribuido a menores niveles circulantes de progesterona durante su fase de
crecimiento (cuerpo lúteo inmaduro) comparado a las concentraciones durante la
fase de crecimiento de los folículos dominantes de las ondas subsiguientes (cuerpo
lúteo maduro). Del mismo modo, el folículo dominante de la segunda onda en los
ciclos de las 3-ondas fue más pequeño que el de la primera onda. Estudios
dominante fueron mediados por la supresión de LH. Aunque aún no ha sido
observado directamente, el ciclo de 3-ondas podría estar asociado con niveles más
altos de progesterona durante el comienzo de la fase luteal que determinarían un
tamaño menor del folículo dominante comparado al del ciclo de 2-ondas. Un menor
tamaño se traduciría en menor duración del período de dominancia y por ende una
más temprana emergencia de la onda siguiente. El comparativamente pequeño
folículo dominante de la segunda onda en los ciclos de 3-ondas (expuesto a altas
concentraciones de progesterona durante la fase de crecimiento)resulta en un
período de dominancia relativamente breve y permite la emergencia de la tercera
onda antes de que se inicie la luteolísis (Hendrisken et al., 2000).
2.3.3. Actividad Folicular.
Durante el ciclo estrual, no se encontraron interrelaciones entre el ovario que
contiene cuerpo lúteo y el ovario con folículo dominante o entre la localización del
cuerpo lúteo y las características del folículo dominante. Tampoco hubo efectos
intraováricos del folículo dominante sobre ninguna de las características de la
dinámica de ondas. Se concluyó que los efectos supresivos entre folículos,
previamente postulados, se ejercían a través de canales sistémicos más que
autocrinos o paracrinos (Adams, 1993).
Las comparaciones de asociaciones temporales entre intervalos
interovulatorios de 2-ondas versus 3-ondas y entre ondas foliculares que ocurren
durante el ciclo versus las que ocurren al comienzo de la gestación nos permiten
la dinámica de las ondas foliculares: 1) un folículo dominante provoca regresión de
sus subordinados, 2) un folículo dominante durante su fase de crecimiento suprime la
emergencia de la onda siguiente y 3) Los folículos emergentes de una onda
determinan la regresión del folículo dominante estático de la onda precedente. Los
resultados apoyan claramente las dos primeras hipótesis, pero no la tercera puesto
que la terminación de la fase estática o los folículos en regresión no fueron
acelerados por el tratamiento con líquido folicular (Adams, 1993).
2.4. LA ULTRASONOGRAFÍA COMO HERRAMIENTA EN EL MANEJO REPRODUCTIVO ANIMAL.
Desde hace ya muchos años, la Ecografía o Ultrasonografía está siendo
utilizada por muchos Veterinarios en el medio rural, como una herramienta
importante en el manejo, diagnóstico y tratamiento de los procesos reproductivos en
los animales domésticos. Sus comienzos en nuestra área se remontan a los años 80,
donde se comenzó a utilizar en yeguas, y más tarde en vacas, utilizando en ambas la
vía transrectal. Posteriormente, y gracias al desarrollo de Empresas de alta
tecnología, se fue popularizado su uso en aquellas especies, así como en cerdas,
ovejas y cabras, y sabemos que hoy es un elemento de gran ayuda en muchos
animales domésticos, e incluso en los exóticos (Tamayo, 2002).
2.4.1 Funcionamiento básico del ultrasonido.
El mecanismo utiliza ondas de ultrasonido ( sonido de alta frecuencia ) que
son emitidos a través de cristales piezoeléctricos, y esas ondas que penetran en los
tejidos, y son devueltas como ecos, los cuales son captados por el mismo cristal, y
Esos puntos serán tanto más brillantes cuanto mayor sea la reflexión por
parte del tejido, y así, cada tejido tiene su estructura más o menos ecogénica,
denominándose hiper, hipo o anecogénica, según la cantidad ecos que reflejan. Se
presentan en una escala de grises, desde el negro ( anecogénico ) como los líquidos
límpidos, hasta el blanco ( hiperecogénico ) como la compacta de los huesos, que
reflejan todos los ecos y pueden dar imágenes "en espejo" y otros "artefactos" (
imágenes que no son reales ). La máquina de ultasonidos o ecógrafo utilizan ondas
de sonido de alta frecuencia, cuya magnitud de medida es el megaherts ( MHz ), 1
MHz = 1’000 000 de ondas de sonido por segundo, para producir imágenes de
órganos internos y de tejidos blandos (Tamayo, 2002).
El ecógrafo está integrado por la consola y el transductor. La consola está
compuesta por el monitor, los mandos y el teclado, y en su interior posee los
mecanismos que transforman las señales eléctricas provenientes del transductor en
imágenes visualizables en la pantalla del monitor.
El transductor posee una gran cantidad de pequenos cristales piezoeléctricos,
cuya vibración por el paso de la corriente eléctrica produce la emisión de ondas que
se transmiten a través de los tejidos en diferentes ángulos e intensidad.
La ecografía se fundamenta en el principio impulso - eco donde los impulsos
viajan a través de los tejidos a una velocidad constante hasta encontrarse una
superficie reflectante, que envìa de regreso parte de ellos a la fuente emisora. Las
ondas de sonido tienen las características siguientes:
Amplitud: es la altura de la onda, equivalente a la intensidad o volumen del sonido, y
se mide en decibelios ( dB ).
Velocidad: depende del medio que el sonido atraviese, en tejido blando es de 1 540
m/s.
Frecuencia: es el número de ciclos o períodos por segundo ( entre 2 y 10 MHz ).
Longitud: es la distancia que la onda recorre en un segundo, o sea, 0,3 - 1,5 mm en
el caso de los ultrasonidos (Tamayo, 2002)
En correspondencia con el tejido “escaneado”, el color de las imágenes se
traduce en distintas tonalidades de grises dede el blanco hasta el negro, donde se
puede precisar imágenes con zonas hiperecogénicas - más blancas en el monitor -
anecogénicas - negras o hipoecogénicas - oscuras. Los lìquidos ofrecen una imágen
en negro, pero los gases, músculos, huesos y estructuras sólidas se muestran en
blanco. Los límites entre dos tejidos adyacentes de distintas densidades se
denominan interfase, las cuales nos posibilitan delimitar los òrganos y tejidos objeto
de investigación; mientras las densidades nos propician evaluar los cambios
normales o anormales de los órganos correspondientes (Tamayo, 2002)
2.4.2. Aplicaciones en reproducción animal
El campo de aplicaciones de la Ultrasonografía es muy vasto, y en estos
últimos años se han aumentado las mismas a través de la Biotecnología de la
Reproducción. Sólo para comentar algunos de los tantos usos del Ecógrafo en estas
áreas, tenemos:
-Estudio de ovarios y útero durante el ciclo estral y gestación
-Diagnóstico precoz de gestación.
-Determinación precoz del sexo fetal.
-Estudio de la dinámica folicular: ondas foliculares, como guía para punción y
aspiración folicular y colecta de ovocitos.
-Estudio de la viabilidad embrionaria.
-Determinación de la edad de gestación.
- Evaluación ginecológica de donantes y receptoras de embriones
-Determinación de momento de inicio de superovulación de donantes.
-Estimación de la respuesta superovulatoria.
-Estudio del momento la aplicación de agentes luteolíticos para sincronizar celos.
-Evaluación de respuesta del ovario a otros sistemas de sincronización de celo.
-Determinación del momento y/o tasa de ovulación para servicio en yeguas y
cerdas
- Determinación de preñeces múltiples.
- Determinación precoz de mellizos para dejar uno ( yeguas )
- Aplicación en los machos, para estudio de glándulas accesorias, testículos y
epidídimo (Tamayo, 2002).
2.4.3. Examen ecográfico transrectal
En la vaca se utiliza sólo esta vía para el estudio del aparato reproductor, y no
es muy conveniente la evacuación del recto, ya que la mayor flacidez de sus
paredes, permiten que muchas veces se introduzca aire, y eso nos complica una
manipulación simultánea del transductor y tracto genital, posicionándolos de acuerdo
a la estructura que buscamos estudiar. Es muy importante tener la premisa de que
antes de iniciarse en trabajos con el Ecógrafo, el Veterinario debe tener mucha
práctica en la exploración rectal por palpación o tacto, ya que ambas técnicas
funcionan como una simbiosis, y se sinergizan para llegar a lograr un buen resultado
final.
Algunos especialistas comentan que en la rutina de la manipulación con el
ecógrafo se requiere de "manos extra" y organización. Si bien el diagnóstico
ecográfico es sólo 2 o 3 semanas más precoz que el tacto rectal, se trata de una
técnica más rápida y objetiva, brindando más seguridad para la viabilidad del
embrión. Incluso hay otras patologías que pueden determinarse más certeramente
con esta técnica ( muerte embrionaria temprana, metritis, piómetra, fetos macerados
o momificados, etc. ) (Tamayo, 2002).
2.4.4. Ultrasonografía de ovarios
Los ovarios son fáciles de explorar en la vaca, y debemos reconocer en ellos
las estructuras funcionales: folículos y cuerpo lúteo. Los folículos son visibles como
cavidades negras o anecogénicas, con un borde muy fino, y a veces de contorno
irregular por la compresión de otras estructuras del ovario. Su tamaño va
creciendo durante el ciclo estral de la vaca a razón de 1.5 a 2.5 mm por día,
llegando el folículo dominante a 15-20 mm en el momento previo a la ovulación
La tecnología del ultrasonido ha permitido el estudio de las ondas foliculares en
el vacuno, sea de gran ayuda en Biotecnología, como en los procesos de
superovulación. El cuerpo luteo aparece de 2 a 3 días despues de la ovulación,
creciendo de 1a 2mm por día, hasta su máximo tamaño a los 7 a 12 días
post-ovulación. Aparece mas bien grisáceo , y muchas veces con una pequeña cavidad
central con líquido y alguna trabécula visible ( 60-70%), y son a veces mal llamados
cuerpos lúteos quísticos ( ya que no poseen efecto significativo sobre la fertilidad, ni
sobre la duración del ciclo, ni en la concentración plasmática de progesterona,
respecto de los no cavitarios ). Sin embargo, la regresión funcional del cuerpo lúteo,
ocurre más rápido que la morfológica, por lo que podemos identificar esta estructura
hasta casi 2 o3 días después de la siguiente ovulación.
Los quistes de ovario son definidos como folículos anormales, anovulatorios
con un diámetro mayor a 25 mm en la vaca ( folículos persistentes ). En una
palpación rectal pueden reconocerse fácilmente los quistes, pero no puede
determinarse claramente si su origen es folicular o luteínico, siendo esta nueva
tecnología de gran ayuda en la terapia a seguir (Pieterse, 1990).
Los quistes foliculares poseen una fina pared y su cavidad es límpida y
anecogénica, mientras que en los quistes luteínicos tienen la pared más gruesa por
la luteinización de la capa granulosa, y algunas veces pueden verse trabéculas en el
interior de la cavidad. Estos últimos los encontraremos asociados a niveles altos de
progesterona en sangre, utilizando el valor umbral de 0.5 ng/ml para diferenciarlos de
realizar este diagnóstico por ultrasonido, e instaurar el tratamiento correspondiente
en el mismo momento.
Finalmente, podemos observar tumores de ovario en algunas ocasiones,
pudiendo sólo determinar por ecografía su tamaño pero no su origen (Pieterse,
1990).
2.4.5. Ecografía de los Folículos Ováricos.
En el examen ecográfico de los ovarios, los folículos se muestran a través de
imágenes no ecogénicas de color negro en forma redondeada o en estructuras
irregulares debido a la compresión de los folículos adyacentes, al cuerpo lúteo y a la
compresión de los folículos por el estróma ovárico. Las medidas que obtenemos de
los folículos corresponden a las dimensiones del antro folicular y no incluye el
dìámetro de la pared (Tamayo, 2002)
Los folículos ováricos, como cualquier estructura esta llena de líquido,
aparece en la pantalla como áreas de color negro. Los folículos en general aparecen
en forma redondeada, pero también pueden presentarse formas más irregulares,
generalmente debido a la comprensión de los folículos y el estroma ovárico. Las
paredes que separan los folículos son a veces muy delgadas y en consecuencia
dificiles de distinguir. A veces la presencia de dos folículos adyacentes y del mismo
tamaño da la impresión de la presencia de un folículo irregular. Las medidas de los
folículos son en realidad las medidas del antro folicular (Pierson y Adams, 1999).
Los folículos preovulatorios se muestran como estructuras redondeadas
ovulación en la vaca, según los resultados de diferentes autores, los cuales han
corroborado sus datos con la posterior formaciòn del cuerpo lúteo.
La determinación de la dinámica de las ondas foliculares mediante ecografía
es uno de los resultados de mayor impacto en la biotecnología de la reproducción
bovina. El inicio de una onda folicular se caracteriza por la formación de un gran
número de folículos simultáneamente, selección del folìculo dominante y atresia de
los folículos más pequeños, recesivos o subordinados. En ausencia de luteólisis el
folículo dominante detiene su crecimiento, comienza su regresión y da paso a una
nueva onda folicular. El día cero del ciclo es el primer día que desaparece el folículo
preovulatorio y coincide con el surgimiento de la primera onda folicular.
En la mayoría de las vacas y novillas se ha comprobado que tienen dos o tres
ondas de crecimiento folículares. En hembras con 2 ondas, estas se inician los días
0 y 10 del ciclo, mientras que en los de 3 ondas, comienza los días 0, 9 y 16. El
folículo dominante es ovulatorio en la segunda onda en vacas con 2 ondas y en la
tercera en animales de 3 ondas ( Tamayo, 2002)
2.4.6. Ultrasonografía del Cuerpo Lúteo.
El cuerpo lúteo tiene una ecotextura diferente del estroma ovárico. El contorno
bien definido del cuerpo lúteo es visible aproximadamente a los 3 días posteriores a
la ovulación, y es un tejido ecogénico que se observa de un color ligeramente blanco
en la pantalla. Normalmente, el cuerpo lúteo es observado en toda la fase luteínica, e
inclusive, en algunos casos el cuerpo albicans es distinguido. En un estudio, el 79%
de los cuerpos lúteos tenían una cavidad central de un tamaño entre 2 y 20mm de
algunos casos puede aparecer mas de una cavidad, en todos los casos, las
cavidades están redondeadas por el tejido luteal ecogénico (Hildebrandt et al.,
2000). En la vaca es algo obscura y redondeada con 1.5 a 3.5 cm de tamaño
(Kastelic et al., 1990).
El cuerpo lúteo (CL) se muestra evidente en imágenes ecográficas alrededor
de los 2 - 3 días posteriores a la ovulación. Esta estructura es hipoecogénica en la
vaca, algo oscura y redondeada con 1,5 a 3,5 cm de tamaño en correspondencia con
los estadíos del CL hemorrágico, CL maduro o CL en regresión.
En investigaciones realizadas, entre el 30 y 80 % de los CL presentan cavidad
central de 2 a 20 mm de diámetro con zona anecogénica oscura, probablemente
conformada por el líquido folícular del folículo que originó al CL, y rodeada por tejido
luteal; en estos casos, los CL son fisiológicos. La concentración de progesterona y el
porcentaje de gestación no muestran diferencias significativas en vacas con CL con
cavidad en comparación con los que tienen CL compacto.
En hembras superovuladas también podemos evaluar la presencia de cuerpos
lúteos (CL), pero cuando la respuesta es superior a 10 ovulaciones por ovario es
difícil precisar el número de ellos. Sin embargo, la ecografía nos permite hacer una
valoración más precisa de la respuesta superovulatoria, determinar la presencia de
folículos anovulatorios y descubrir estados patológicos, cuya información es
fundamental para decidir si se efectúa, o no, la recolección de ovocitos / embriones
2.5. DESARROLLO DE LOS MÉTODOS PARA LA SINCRONIZACIÓN DEL ESTRO
La regulación del ciclo estral se cree esta asociada con el contról del cuerpo
lúteo, del cual su promedio de vida y actividad secretora esta regulado por
mecanismos tróficos y líticos. El desarrollo de los métodos para el control del ciclo
estral en vacas esta dado es 5 fases distintas:
La fase I incluye efectos para prolongar la fase luteal por la administración
exógena de progesterona. Después agentes progestágenos son combinados con
estrógenos o gonadotropinas en la fase II; mientras que la fase III involucra la
prostaglandina F2 alfa, que es una agente luteolítico. Los tratamientos que combinan
agentes progestágenos con PG caracterizan la fase IV.
El monitoreo preciso de los folículos ováricos y el cuerpo lúteo a tiempo real
por ultrasonografía transrectal, nos permite conocer el ciclo estral de los bovinos y
particularmente los cambios que ocurren durante una onda folicular. El crecimiento
folicular en el ganado lechero ocurre en distintos patrones de ondas, con nuevas
ondas foliculares, apareciendo aproximadamente cada 10 días (con un rango de 6 a
15 días). Ahora sabemos (Fase V), que para el control preciso del ciclo estral, se
requiere de la manipulación de las ondas foliculares y del cuerpo lúteo (Patterson et
al., 2000).
2.51. Sincronización del estro y la ovulación con prostaglandinas (Pgf2 alfa).
La sincronización consiste en la amplificación de un producto hormonal
aplicaciones. Las hormonas más usadas son: PROSTAGLANDINA PGF2 alfa.
Hormona que, en forma natural, es producida por el endometrio y actúa en el último
período del ciclo. En el comercio esta hormona existe con diferentes nombres
comerciales como: Lutalyse e Iliren. La base de su éxito consiste en la aplicación del
producto en el momento en que la hembra presenta cuerpo lúteo (Mazzucchellil,
2001)
Las prostaglandinas trabajan eliminando el cuerpo lúteo en los ovarios de las
hembras ciclando entre los días 6 al 16 su ciclo estral. Esto les permite volver a estro
en dos a cinco días con sus ciclos cincronizados. Las hembras en los días, 17 a 20
estarán en estro normalmente dentro de uno a cuatro días, entonces ellas estarán
sincronizadas. Y aquellas hembras entre los días 1 al 5 del ciclo y las que no estén
ciclando no responderán a la inyección.
La Prostaglandina F2alfa (PG F2alfa) se produce en el endometrio desde
donde pasa, via hemática, al ovario, lugar donde ejerce su acción: la luteolisis. El uso
de PG F2alfa natural por via parenteral presenta dos inconvenientes: se requieren
dosis muy grandes y, por otro lado, existe el riesgo de aparición de efectos
secundarios. Por este motivo se han desarrollado análogos sintéticos mucho más
activos (con lo que se requiren dosis menores) y exentos de efectos secundarios
(Mazzucchelli, 2001)
2.5.2. Aplicación clínicade la PGF2α
Hay que tener claro que, al margen de la finalidad que se persiga, la única
hay que tener en cuenta que para que actúe es indispensable la existencia de un CL
(cuerpo lúteo) funcional. El tiempo que pase hasta la salida en celo del animal
dependerá del estado del CL en el momento de la administración; este tiempo suele
oscilar entre 3 y 5 dias.
1) Sincronización de celos:
En realidad consiste en una sincronización de luteolisis; para su correcta
realización hay que tener en cuenta cuatro cosas:
a) Los animales han de presentar una ciclicidad ovárica normal; esto planterá
problemas en el caso de las novillas.
b) Para sincronizar a un grupo de animales es necesario realizar dos
aplicaciones separadas 10 ó 12 dias entre sí (el motivo es que, al recibir la
primera dosis, cada animal estará en una fase distinta del ciclo estral).
c) Es necesario realizar una doble tras la última inyección, a causa de las
inseminación, a las 72 y a las 96 horas variaciones que existen entre animales
en cuanto al tiempo que pasa entre la última dosis y la salida en celo (este
tiempo puede oscilar entre 3 y 5 dias).
d) A pesar de seguir correctamente este protocolo siempre hay que esperar que
entre un 20 y un 30% de los animales no se sincronizarán.
En realidad la inducción al aborto está casi exclusivamente restringida a los
casos de cubrición accidental de novillas demasiado jóvenes En estos casos puede
utilizarse la PGF2α para terminar con la funcionalidad del CL de gestación.
La administración deberá hacerse entre la semana y los 5 meses de
gestación; el aborto se producirá entre los 2 y los 7 dias siguientes a la
administración. Hay que tener en cuenta que a partir de los 150 días de gestación la
placenta es capaz de producir suficiente progesterona como para mantener la
gestación sin la ayuda del cuerpo lúteo.
3) Endometritis
Al tratar el tema de la aplicación de PGF2α en síndromes metríticos hay que aclarar dos conceptos: efecto luteolítico y efecto uterotónico. Al producir la luteolisis
lo que conseguimos es que el útero cambie de un ambiente progesterónico (con
bajas defensas locales) a un ambiente estrogénico (con defensas locales altas).
Por otro lado se habla bastante de la conveniencia de un efecto uterotónico,
que ayudaría en el proceso al ayudar a evacuar el contenido. En cuanto a esto hay
que tener en cuenta dos cosas: por un lado que el útero tiene una gran capacidad de
reabsorción (en el fondo, después del parto no se elimina tanto contenido) y, por
otro, que una elevada actividad contráctil a nivel de musculatura lisa puede acabar,
afectando al intestino bajo la forma de síndrome cólico (Mazzucchelli, 2001)
4) Quistes ováricos
La PG F2alfa puede utilizarse en casos de quistes ováricos de
utilizar, asociada a GnRH para el tratamiento de cualquier tipo de quistes
(Mazzucchelli, 2001).
2.5.3. Protocolo de PGF2 alfa con dos inyecciones de prostaglandina
Este método funciona mejor al saber que un porcentaje alto de hembras esta
ciclando y está dispuesto a gastar más en la droga a cambio de gastar menos tiempo
en la detección de calores. Se dan dos inyecciones de prostaglandina a todas las
hembras con 11 a 14 días de intervalo, luego se hace la detección de calores y se
insemina por los próximos 5 días, o inseminación masiva entre 72 y 80 horas
después de la segunda inyección (Heuwieser, 2000).
2.5.4. Sincronización del estro y ovulación con métodos a base de pgf2 alfa + GnRH (pre-synch).
El GnRH es un liberador de gonadotropinas sintético que actúa sobre la
glándula pituitaria, estimulando la liberación de la hormona folículo estimulante
(FSH), que induce el desarrollo de los folículos y la producción de la hormona
luteinizante (LH), que estimula la ovulación.
El GnRH u hormona liberadora de gonadotropinas, se sintetiza en el
hipotálamo desde donde se transporta via hemática a la hipófisis, lugar donde
estimula la producción y secreción de LH (hormona luteinizante) y FSH folículo
estimulante). La producción de GnRH se halla doblemente regulada: en primer lugar
progesterona; en segundo lugar por las informaciones que recibe el hipotálamo tanto
desde el organismo (edad, enfermedades, etc.) como desde el exterior (estación del
año, nutrición, etc.).( Mazzucchelli, 2001)
2.5.5. Aplicación clínica:
1) Tratamiento de los quistes ováricos.
La aplicación de GnRH en estos casos está plenamente justificada, sobre todo
en los casos de quistes foliculares: la GnRH producirá la descarga de LH que
conducirá a la luteinización del quiste y al consiguiente restablecimiento de la
ciclicidad ovárica. Este resultado se obtiene en un 80% de los casos tras la primera
aplicación; la tasa total de curaciones suele situarse entre el 90 y el 95%.
No obstante, debido a dificultades que pueden existir a la hora de establecer
el carácter folicular o luteínico de un quiste ovárico, se recomienda la asociación de
un tratamiento con prostaglandina F2 alfa (PG F2alfa) a los 12 ó 14 dias de la
aplicación de la GnRH. Por otro lado, este tratamiento acortará el tiempo de
respuesta clínica (la salida en celo) en unos 10 dias.
2) Prevención del retraso en la ovulación
En este apartado se incluyen tanto casos patológicos (vacas "repetidoras")
como no patológicos (esto es, casos en los que interesa asegurar el resultado de la
situaciones la acción beneficiosa de la GnRH de debe a que induce el pico
preovulatorio de LH; de este modo se producirá la ovulación a un tiempo fijo tras la
administración siempre, claro está, que exista un folículo maduro.
3) Mejora de la fertilidad postparto
La optimización de la eficiencia reproductiva por conseguir cuanto antes el
restablecimiento de la ciclicidad ovárica tras el parto de forma que el animal haya
ciclado ya alguna vez cuando llegue el momento de la inseminación. A este respecto
se ha demostrado que la aplicación de 250 microgramos de GnRH a los 10 ó 15 dias
tras el parto mejora los resultados reproductivos de la explotación (Mazzucchelli,
2001).
2.5.6. Protocolo Pre-synch (GnRH+PGF2alfa).
El GnRH, es utilizado en el método pre-synch, el cual consiste en controlar las
estructuras ováricas, tanto del folículo como cuerpo lúteo, en combinación con PGF2
alfa. Este programa desarrolla la sincronización de las ondas foliculares, tiempo
de ovulación y el desarrollo luteal. El método implica la aplicación de PGF2 alfa al
día –12, GnRH al día 0, PGF2 alfa al día 7, y GnRH al día 9 con inseminación
artificial a tiempo fijo al día 10 con un rango de 16 a 20 hrs después de la última
aplicación de GnRH, el cual induce la liberación de LH 48 hrs posteriores a la
segunda aplicación de PGF2 alfa, lo cual nos controla la ovulación, mientras que la
cuerpo lúteo de tamaño suficiente, el cual al ser eliminado podra desencadenar o
activar la liberación de las gonadotropinas (Cartmill et al., 2001).
III. MÉTODOS Y MATERIALES
3.1 Método.
La presente investigación se llevó a cabo en la Posta del ITSON, ubicada en
el block 204 del Valle del Yaqui, en el municipio de Cajeme, situada en las siguientes
cordenadas geográficas: “27 20 40 “ de latitud norte; con altitud de 35 metros sobre
el nivel del mar. La temperatura promedio anual máxima es de 33.68ºC, y la minima
de 17.41ºC y su precipitación pluvial es de 520.1mm (SAGAR,1996).
Se utilizaron 37 vacas Holstein Friesian, de 4 a 7 años de edad, de 3 a 5
partos, con una condición corporal de 2.5-3.5, con un mínimo de 45 días postparto, y
actividad ovárica demostrada mediante la ultrasonografía.
Se formaron dos grupos experimentales: T1 y T2, cada uno con 18 y 19
hembras respectivamente seleccionadas al azar. Al T1 le correspondió el método de
sincronización con doble aplicación de PGF2 alfa, y al T2 el método de Pre-Synch,
tal y como se muestra a continuación:
Descripcción del T1.
En el día 0 25mg de PGF2 alfa IM (5ml). Al día 14: 25 mg de PGF2 alfa IM
(5ml).
Descripción del T2.
Para el T2 se aplicaron:
Al día –12: 25mg de PGF2 alfa I.M (5ml). Para el día 0: 100 microgramos de
GnRH I.M (1 ml). al día 7: 25mg de PGF2 alfa I.M y al día 9: 100 microgramos de
GnRH I.M
La inseminación artificial se realizó a tiempo fijo en ambos tratamientos, en el
caso del T1, la IA se llevó a cabo a las 72 hrs. posteriores a la segunda aplicación de
PGF2 alfa, mientras que en el T2, ésta se realizó en un rango de 16 a 20 hrs.
posteriores a la última aplicación de GnRH.
El diagnóstico de gestación se realizó por ultrasonografía a los 35 días
posteriores a la IA, utilizando un equipo de ultrasonido Sonovet 600 con transductor
transrectal de 7.5 MHz. Para la realización de éste procedimiento, se utilizó la técnica
por Pierson y Ginther, la cual se detalla a continuación.
3.2 Técnica transrectal con ultrasonografía (U.S).
El procedimiento para un examen de U.S. en el bovino es similar a la
palpación rectal. Después de restringir a los animales de cualquier movimiento, hay
que evacuar el recto, ya que la materia fecal puede distorcionar la imagen. El área
para el equipo. Debe eliminarse las luces o reflejos, ya que esto causa una
disminución de la visualización. Dicho éxamen debe ser sistemático y verdadero.
Debe hacerse una completa examinación de la morfología del tracto
reproductivo, y los cambios del útero durante el ciclo estral, así como de los cuernos
uterinos. Una vez que se ha removido la materia fecal, el transductor es cubierto con
un gel conductor ( para establecer un buen contacto con la mucosa y evitar burbujas
de aire) e insertarlo en el recto. El cervix es localizado y el cuerno uterino axaminado
en plano longuitudinal (Pierson,1990).
El transductor es movido sobre la superficie dorsal del cuerno uterino y se
cambia ligeramente de lado a lado examinándolo completamente. Cuando la unión
de los cuernos uterinos es alcanzada, el transductor se mueve a lo largo de cada uno
de los cuernos uterinos y se examinan en planos oblicuos. El transductor es rotado
para examinar el ovario. Así de la misma manera se examinan el cuerno y el ovario
del lado contrario (Ginther, 1988).
3.3 VARIABLES ANALIZADAS.
1. Actividad ovárica: al momento de la segunda aplicación de la PGF2 alfa
(tamaño folicular y del C.L) en ambos grupos.
Análisis estadistico: La actividad ovárica (tamaño del folículo y del C.L) fue
analizada por el diseño simple completamente al azar, para determinar si existía
2. Porcentaje de hembras gestantes. A los 35 días posteriores de la la
inseminación artificial en ambos grupos mediante el uso de la ultrsonografía.
Análisis estadístico: El porcentaje de gestación entre ambos tratamientos, fue
analizado mediante la prueba de ji-cuadrada, para determinar si existía diferencia
estadística (P<.05); utilizando el procedimiento PROC FREQ, en el paquete estadístico SAS (versión 6.12 para windows).
3.8 Materiales:
• Jeringas de 5 y 3 ml. • Trampa de manejo. • Guantes de palpación.
• Equipo de ultrasonido Sonovet 600, con transductor transrectal de 7.5 MHz. • Frascos de hormona PGF2 alfa.
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN.
En el presente trabajo de investigación, para la variable “porcenaje de
hembras gestantes” se obtuvo un 89.47% de gestación para el T2, el cual
corresponde al método Pre-synch. Por otro lado, un 61.11% de gestación para
hembras del T1, el cual corresponde a la doble aplicación de PGF2 alfa, tal y como
lo muestra el cuadro 1, encontrando una diferencia estadistica (P< .05) entre ambos tratamientos en lo que respecta a la variable “porcentaje de preñez”. Estos
resultados muestran un incremento del 28.36% para el grupo T2 sobre el porcentaje
de gestación obtenido en las hembras del grupo del T1.
Los resultados para las variables “tamaño del folículo y cuerpo lúteo” para
ambos tratamientos se muestran en el cuadro 2, donde se observa que las vacas
del T2 tuvieron un tamaño folicular de 14.52 mm en promedio y 12.27 mm para las
hembras del T1, encontrando diferencia estadística (P< .05) entre ambos tratamientos, con un incremento de 2.25 mm para el T2, con respecto al T1. Para la
variable ”tamaño del cuerpo lúteo”, se encontró un promedio de 2.11 cm para el
T2 y 2.01 cm para el T1, no encontrando diferencia estadística (P>.05) entre ambos tratamientos para dicha variable.
Estos resultados demuestran que manipulando hormonalmente tanto el
folículo como el cuerpo lúteo, tal y como sucedió en el T2, sincronizaremos
efectivamente el funcionamiento de ambas estructuras, ya que como se observó en
Cuado N.1 Porcentaje de preñez en base a dos tratamientos hormonales.
Cuadro N. 2 Tamaño del folículo y del cuerpo lúteo en base a dos tratamientos
hormonales.
Tratamiento N Tamaño del Tamaño del C.L (cm) folículo (mm). 1 18 2.0l 12.27
