MÉTODOS DE ESTUDIO DE
ANTIMICROBIANOS
Antimicrobianos. Conceptos
!!Desinfectante
!!Antiséptico
!!Antimicrobiano
!!Superficies inertes
!!Superficies vivas
!!Organismos vivos vía sistémica
Antimicrobianos. Conceptos
!!Acción antimicrobiana. Fundamento:
!!TOXICIDAD SELECTIVA .
!!Deriva de su acción específica sobre determinadas estructuras
!!Pared bacteriana (penicilinas, cefalosporinas)
!!Ribosoma 70S (macrólidos, tetraciclinas,…)
!!Se requiere una elevada potencia biológica
!!Diferentes niveles de toxicidad.
!!Implican mayor o menor necesidad de control de dosis y niveles
Antimicrobianos. Conceptos
!!Antibiótico/quimioterápico/antimicrobiano
!!Bacteriostático. Inhibe la multiplicación
!!Bactericida. Destruye al microorganismo
•! Sinergismo. La combinación es más activa que cada antimicrobiano individualmente
•! Indiferente. La combinación tiene la actividad del más activo individualmente.
•! Antagonismo. La combinación es menos activa que el más activo individualmente.
•!Espectro: Géneros y especies frente a los que un antimicrobiano es típicamente activo.
•!Modificado por mecanismos de resistencia adquiridos
•!Resistencia/sensibilidad/Sensibilidad intermedia
Antimicrobianos. Conceptos
Niveles séricos a dosis clínicamente tolerables
Bacteria resistente
Bacteria sensible
Concentración inhibitoria
Antimicrobianos. Modos de acción
!! Sobre la pared bacteriana
!!Acción bactericida
!!Baja toxicidad
!!Requieren crecimiento activo
!! Sobre la membrana citoplasmática
!!Desestructuran la membrana
!!Alteran permeabilidad
!!Toxicidad relativamente alta
!!Bactericidas
Antimicrobianos. Modos de acción
!! Inhibición síntesis de proteinas
!!Muy numerosos
!!Frecuentemente bacteriostáticos
!! Inhibición síntesis ácidos nucleicos
!!Inhiben transcripción o la replicación, o lesionan directamente el ADN.
!!Habitualmente bactericidas
!! Interferencia de vías metabólicas.
Antimicrobianos. Métodos de estudio
!! Disco placa
Antimicrobianos. Disco-placa (difusión en agar, Kirby-Bauer)
!! Inconvenientes
!!Manual
!!No permite estudio de grandes volúmenes de microorganismos
!!Resultados cualitativos
Antimicrobianos. Disco-placa (difusión en agar, Kirby-Bauer)
!! Ventajas
!!Sencillo
!!Barato
!!Disponible para todos los antimicrobianos
!!Permite estudiar sinergismos, antagonismos, mecanismos de resistencia peculiares
Sinergismo
Subpoblaciones resistentes en S. aureus resistente a meticilina
Sinergismo entre cefalosporinas de 3ª generación e inhibidores de beta lactamasas en cepas productoras de beta-lactamasas de espectro
extendido (BLEEs)
Antimicrobianos. Dilución en agar
!! Inóculo común
!! Placas con concentraciones progresivas de antimicrobiano
!! Inoculador especial (replicador de Steers)
!! Inoculación de numerosas cepas
(hasta 40) en la misma placa
DILUCIÓN EN AGAR
•! CIM50: concentración que inhibe al 50% de las cepas
•! CIM90: concentración que inhibe al 90% de las cepas
•! Intervalo: la mayor y la menor CIM
Antimicrobianos. Dilución en agar
!! Ventajas
!!Estudio de grupos grandes de cepas
!!Resultados cuantitativos
Antimicrobianos. Dilución en agar
!! Inconvenientes
!!Moderadamente automatizable
!!Muy laborioso
!!Estudios epidemiológicos
Antimicrobianos. E-test
!! Técnicamente similar a disco-placa
!! Ofrece resultados cuantitativos
!! La CIM corresponde al punto de corte entre el halo de inhibición y la tira de E-test.
!! Permite estudiar sinergismos,
antagonismos y subpoblaciones.
Antimicrobianos. Dilución en medio líquido (caldo)
!!Permite el mayor grado de automatización
!!Ofrece resultados cuantitativos
!!Uso habitual en clínica, en paneles que incluyen identificación y sensibilidad
!!No utilizable en grandes estudios y estudios epidemiológicos
!!No permite estudiar sinergismos, antagonismos y subpoblaciones
